杂种猪染色体的核型与显带研究 Studies on the Karyotype and Bands of Hybrid Pig
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caryotype染色体组型
实验用品
毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 人染色体放大照片
染色体编号(人X染色体)
记述一特定带时，需 要写明4个内容：染 色体号，长短臂，区 的号序和带的号序。 这些内容按顺序写， 不用间隔或加标点。 如果某一带被再细分， 在原带号数后加一小 数点，编号原则仍按 从着丝粒往臂端序贯 编号。如1p31.2代表 一号染色体短臂3区1 带第2亚带
FISH技术和RFLP结合，可以精确地描 述原属于染色本长短臂等结构改变和染 色体核形或复杂片段的性质。 FISH和细胞免疫化学技术结合，可以同 时用多种颜色反应不同的核苷酸链和蛋 白质，这样可以在单个细胞内同时找到 基ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的位点。转录和翻译和产物，有助 了解核苷酸结构功能以及表达产物之间 关系的研究。
实验步骤
1. 2. 3. 4.
计数，沿边缘剪下染色体，编号 初步目测配对，分组 测量长度，计算相对长度、着丝粒指数、 臂比，相同的染色体间配对 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上，每一 组下面画一横线，在两端注明起止号，并在 横线下的中部写明A-G组号，染色体从大到 小编为1-22号，性染色体单独列为一组
多色荧光染色体显带（Rx-FISH）
能否让每条区带也杂交上不同的颜色呢? 这一想法导 致了彩色核型分析(Rx-FISH) 的诞生. Rx-FISH技术是采用多种荧光素标记与 人类DNA有高度同原性猿的DNA作为探 针，杂交后使人类的24条染色体上呈现 特异的带型。这样便可根据彩色的荧光 条带进行核型分析。
FISH的临床运用
白血病检测中常用的FISH探针有单一序 列探针, 着丝粒探针, 整条染色体探针, 常 用方法有单标记FISH, 双 标记FISH, 比 较基因组杂交(CGH), M-FISH 和RxFISH等.各种FISH探针及方法均在白血 病的诊断, 治疗监测, 预后估计和微小残 留病检测中起重要作用
家猪(Sus scrofa dorrzestica)体细胞染色体的研究1)
１ ．３ ．２ １０土０１４ ６８土００９ ．４ ．７ ５３ 上００３ ．４ ．８
６ ２ 士０ ０１ ．０ ． ７
５５ 土００５ ．８ ．３ ５５ 土００５ ．１ ．５ ５３ 土００５ ．１ ．５ ５１ 土００ ８ ．０ ．５ ５０土００５ ．９ ．５ ４３ 土００７ ．２ ．４ ４０ 士００１ ．４ ．５ ） ３２ 土００ １ ．５ ．６ ２８土００９ ．７ ．６ ８３土０１ １ ．２ ．０
４ ．９ ． １ ９１ 士０ ２ ９Biblioteka ４．６ ．２ ８ ５ 士０ ４ ２
４ ．８ ０ ３ ５ ９ ２ 土 ．１
用放大约 ２０ 倍的显微摄影照片进 行染 ５０ 色体测量， 每种猪各测 １ 个细胞， ６ 分别算出相 对长度和着丝点指数的平均值 （ １ 表 、表 ２ 作 ） 为染色体编号和配对的依据。 从测量数据看来， 这些家猪染色体的相对长度和着丝点指数都很
３ ． １ ．６ ６ ９ 土０ ４ １
， ｘ ｇ Ｊ０ １ｔ ｌＺ
３ ．３ ．３ ５７土０ｆ９ ） ４ ．０ ．７ ３６ 土０４２ ４ ．５ ．６ ２７ 士０５５ ４ ．７ ．３ ８４土０４６
４ ． ９十 ０． ２ ８４ ３６
３ ，８ ．０ ７７土０４６ ４ ．４ ．６ ４３ 土０５０ ４ ．４ ．２ ６４士０５６ ３ ．６ ．７ ７４土０３７ ４ ．４ ．１ ３３土０６８ ４ ．３ ．６ ３８ 士０５８ ４ ．１ ．７ ８４士０３６
序 ５ ４。 ２＋ ０． ， 多２
邻 ．４ ．９ ，土０３０ ４． ．５ ９ｂ 土０１６ ７ ４ ．８ ．４ ９ ５土０２ ４
４ ．２ ．３ ９ ４ 土０ １ ３
４ ．２ ．１ ６９ 土０３５ ３ ．６ ．９ ４５ 土０３ １ ４ ．２ ．２ ４５ 土０５０ ４ ．８ ．０ ６３ 士０３５ ４ ．２ ．１ ８６ 士０ ３４ ４ ．９ ．４ ９１ 土０２２
环江香猪染色体核型的研究
了阻止猪群在抗 体空 白或低效价期 遭受猪 瘟病 肉注射猪用新 必妥（ 细胞转移因子 ） 注射液 １ｍ 。 ０ Ｌ
据 比较 观 察 效果 良好 。
疫程序
猪 群抗紧急 免疫接种 时 ， 同时肌 志 ， 是制定 免疫 程序 的前 提 ， 因此必须 定期或不
１ 制片 ． ５
广西环 江香猪 原种保 种场 的香猪 ６ ０头 ， 其 养终 止前 ２ ４ ，加入 ５滴秋 水仙 碱 （１ ／ Ｌ ， —ｈ ４ ｇｍ ） ｘ
施 的安装都要从系统疾病控制理论 出发 ， 贯彻 有
污染猪场的净化 （ 淘汰带毒 猪 ） 提供依据。
利生物安全 和动物 防疫 的原则 ， 全面落实各种生
此外 ， 积极 推广应用新 型 Ｃ Ｆ疫 苗 ， Ｓ 更有利
口
日 期 ：ｏ ５ ｌ 一 Ｏ ２ ｏ 一 ２ ｌ ７一
产、 防疫措施 ， 特别注意活猪 （ 括种猪 、 包 苗猪 、 中 于猪瘟 的防制。 猪、 肥猪） 和猪 肉制 品的各项 检疫 ， 杜绝 Ｃ Ｆ Ｓ Ｖ随
也是我 国重点保 护的小型猪种资源之一 。 产于广 西和贵州省交界地 区的环江县。 产区共有存栏香
草、 树叶 、 野菜生存 和繁衍 ， 形成 了抗 逆强 、 代谢 率低 、 肉质 鲜美 ， 饲料 广泛 、 易于 管理 等优 良特
猪８ 万多头 ， 分布在交通不便 的中低 山地带 。香 性 ， 为我 国生命 科学研究 、 工程和食 品工业 生物 杜绝各种免 疫抑制性疫病病原如 次注射单独用经 煮沸消毒的针 头。 二是要严格掌 之远距 离传播 ， 握免疫剂量。 三是彻底消毒参 与免疫注射人员 的 Ｐ Ｒ Ｖ等传入。消毒 、 离 、 ＲＳ 隔 免疫 、 驱虫 、 杀蚊 、 灭
一
据 比较 观 察 效果 良好 。
疫程序
猪 群抗紧急 免疫接种 时 ， 同时肌 志 ， 是制定 免疫 程序 的前 提 ， 因此必须 定期或不
１ 制片 ． ５
广西环 江香猪 原种保 种场 的香猪 ６ ０头 ， 其 养终 止前 ２ ４ ，加入 ５滴秋 水仙 碱 （１ ／ Ｌ ， —ｈ ４ ｇｍ ） ｘ
施 的安装都要从系统疾病控制理论 出发 ， 贯彻 有
污染猪场的净化 （ 淘汰带毒 猪 ） 提供依据。
利生物安全 和动物 防疫 的原则 ， 全面落实各种生
此外 ， 积极 推广应用新 型 Ｃ Ｆ疫 苗 ， Ｓ 更有利
口
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产、 防疫措施 ， 特别注意活猪 （ 括种猪 、 包 苗猪 、 中 于猪瘟 的防制。 猪、 肥猪） 和猪 肉制 品的各项 检疫 ， 杜绝 Ｃ Ｆ Ｓ Ｖ随
也是我 国重点保 护的小型猪种资源之一 。 产于广 西和贵州省交界地 区的环江县。 产区共有存栏香
草、 树叶 、 野菜生存 和繁衍 ， 形成 了抗 逆强 、 代谢 率低 、 肉质 鲜美 ， 饲料 广泛 、 易于 管理 等优 良特
猪８ 万多头 ， 分布在交通不便 的中低 山地带 。香 性 ， 为我 国生命 科学研究 、 工程和食 品工业 生物 杜绝各种免 疫抑制性疫病病原如 次注射单独用经 煮沸消毒的针 头。 二是要严格掌 之远距 离传播 ， 握免疫剂量。 三是彻底消毒参 与免疫注射人员 的 Ｐ Ｒ Ｖ等传入。消毒 、 离 、 ＲＳ 隔 免疫 、 驱虫 、 杀蚊 、 灭
一
猪CAPN1基因部分外显子及3′UTR区的SNPs检测
第6期
杨秀芹等: 猪 CAPN1 基因部分外显子及 3′UTR 区的 SNPs 检测
743
表 1 引物序列 Table 1 Primer sequences
引物 Primer
扩增位置 Location
P1
Intron2, Exon3,
Intron3
P2
Intron3,
Exon4
P3
Exon6
P4
Intron6, Exon7,
742
HEREDITAS (Beijing) 2008
第 30 卷
the mutations detected by P4, P6 primers and that resulting in the change of HinfⅠrecognition site may be related to lean meat percentage. Keywords: pig; CAPN1 gene; lean meat percentage; tenderness; PCR-SSCP; PCR-RFLP
瘦肉率一直是育种学家追求的目标, 随着人们
生活水平的提高, 肉质的重要性也逐渐得到消费者 和生产者的重视, 嫩度是影响肉质的的一个重要方 面, 因此, 对 CAPN1 基因进行多态性检测, 并结合 生产性状进行相关性分析, 寻找能运用到生产实践 中去的分子标记, 具有一定的理论和实践意义。
1 材料和方法
将PCR产物与适量的上样缓冲液混匀, 100℃水 浴加热 10 min, 冰浴 10 min, 上样于非变性聚丙烯 酰胺凝胶, 凝胶的浓度根据扩增片断的长度不同而 有所差别。室温下恒压 120 V电泳 14~16 h, 电泳结 束后用AgNO3显色, 待电泳条带清晰后换上去离子 水停显, 做基因型分析。对具单链构象多态性的PCR 产物随机选取纯合基因型片段进行克隆、测序, 进 一步验证电泳分型结果。
猪MSCs染色体制备技术及核型分析
，实验六人淋巴细胞染色体标本制作本文来自：C:/细胞生物学实验技术一、实验目的：学习动物细胞染色体标本的制作方法，认识染色体形态。
二、实验原理：染色体是细胞遗传的研究对象，分析认识染色体对于认识遗传物质的传递、复制、畸变等都有重要的意义。
获得染色体的方法很多，目前对于哺乳动物比较常用的方法是外周血细胞培养法，就是将外周血接种在适当的培养基中进行培育，人类外周血细胞是终未分化细胞，一般没有分裂能力，但经PHA（植物血球凝集素）或ConA等药物刺激后，转变为可分裂的转化细胞，向培养基中加入适量的秋水仙素，可使细胞停留在中期，可以获得大量的分裂细胞。
用低渗盐溶液（一般为0.4%KCl或0.075MKCl）处理，使其中的红细胞及分裂相细胞的膜破裂并使转化细胞膨胀，结合离心技术，可将红细胞碎片及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去，最后以气干法制片，可获得较好的染色体标本。
三、试剂和器材：（一）试剂：１.培养基RPMI1640（或Eagles液）、胎牛血清、肝素、PHA、青链霉素、5%NaHCO3、2%碘酒、75%酒精、2μg/ml秋水仙素（或10μg/ml秋水仙胺）。
１.低渗液：０.４％KCl，预温在37o C。
２.固定液：甲醇、冰醋酸，每次在使用前按3：1临用时配制。
３.染液：2%Giemsa（二）器材：１.超净工作台２.恒温箱３.5ml移液管 4.链霉素瓶５100 ml血浆瓶 6.50 ml量筒７1 ml，2 ml注射器８.清洁载片（使用前存冰箱中）9.恒温水浴（37o C）10.水平离心机11.尖底离心管（10 ml）12.天平13.试管架，定时钟14.吸管，橡皮头15.相差显微镜16.酒精灯（三）实验材料：人血或猪血四、实验步骤：1.培养基的制备：在超净工作台上，用吸管吸取RPMI1640液10 ml，用1 ml注射器取肝素0.3 ml，PHA0.4 ml，青链霉素0.3 ml（各10000单位/ ml），混合均匀后用0.5%的NaHCO3，调整pH为7.0-7.2，然后用5 ml吸管分装，每小瓶5 ml，用胶布封口。
15种榛子种质的染色体核型分析
15个种质中 , B 221的染色体相对长度最短 , 为 5170% , B 223最长 , 为 15118% , CV 为 23102%。 相对长度的变化以 B 223为最大 ; 除种质欧榛与 7#的染色体最长 /最短小于 2之外 , 其余种质的染色体 最长 /最短均在 2～3之间 。但各种质 11对染色体中除 B 223 的第 8 对和第 10 对染色体臂比大于 210 外 , 其余各种质各对染色体臂比均小于 210。
点四区系统法 , 核型分类依据 Stebbins (1971) 的对称性标准 , 同时参照李懋学和陈瑞阳 ( 1985) 的
核型分析标准 。
p
通过主成分分析 ,
并采用
D
2 ij
= Epk
=∑
(Gik - Gjk ) 2公式计算种质间遗传距离 。式中 Gik和 Gjk分
k =1
别表示种质
i和
j第
k个性状的标准化基因型值 。对
D
2 ij
采用
SAS程序进行 Q 型聚类 。
2 结果与分析
211 染色体数及倍性观察 经观察发现 , 平榛 、欧榛及 13个种间杂种榛的染色体没有非整倍及加倍现象 (图 1) , 染色体数
为 2n = 2x = 22, 核型公式如表 2所示 。 212 核型分析
15种榛子的核型比较如表 2 所示 。 15 个种质染色体平均长度为 1150 μm , 变异系数 ( CV ) 为 28161%。81223为最短染色体 , 长度为 0179μm; B 223最长 , 为 3176μm。同一种质间染色体长度差 异亦不大 , 除 B 223为 2126μm 外 , 其余集中在 0196～1127μm 之间 。根据 L ima2Dei2Farra的 “染色体 场 ” (Chromosome field) 理论 (岳爱琴 等 , 2001) , 榛子染色体属小染色体 。
点四区系统法 , 核型分类依据 Stebbins (1971) 的对称性标准 , 同时参照李懋学和陈瑞阳 ( 1985) 的
核型分析标准 。
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别表示种质
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j第
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D
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采用
SAS程序进行 Q 型聚类 。
2 结果与分析
211 染色体数及倍性观察 经观察发现 , 平榛 、欧榛及 13个种间杂种榛的染色体没有非整倍及加倍现象 (图 1) , 染色体数
为 2n = 2x = 22, 核型公式如表 2所示 。 212 核型分析
15种榛子的核型比较如表 2 所示 。 15 个种质染色体平均长度为 1150 μm , 变异系数 ( CV ) 为 28161%。81223为最短染色体 , 长度为 0179μm; B 223最长 , 为 3176μm。同一种质间染色体长度差 异亦不大 , 除 B 223为 2126μm 外 , 其余集中在 0196～1127μm 之间 。根据 L ima2Dei2Farra的 “染色体 场 ” (Chromosome field) 理论 (岳爱琴 等 , 2001) , 榛子染色体属小染色体 。
家猪染色体研究进展及其在猪育种中的应用
自１ ９ ９ ０年 以来 ， 家猪 遗 传 基 因图谱 （ 包 括 物 理 图谱 和遗 传 连 锁 图谱 ） 的科 研 工 作 发 展 迅 速 ， 应 用
野 猪进 化 而来 ， 在不 同 时期 、 不 同地 区 、 不 同条 件 下
或在 同一 时期 、 不 同地 区 、 不 同条 件下 选育形 成 的家
随家猪 基 因组 计 划 和 基 因定 位 的需 要 ， 国 内外
１ 家猪 染 色体 研 究现 状
１ ． １ 家猪 染 色体 核型 研 究 国 内家 猪 染 色 体 核 型 的研究始于 １ ９ ７ ６年 ， 到 目前 为 止 ， 我 国对 引 进 猪 种（ 如 长 白猪 、 杜 洛克和汉普 夏等 ） 、 国内猪种 （ 如
进 行 了 对 家 猪 染 色 体 高 分 辨 显 带 的研 究 ，Ｒ ｅ ｎ ｎ ｅ Ｍ＿ ８ 获得 了近 ４ ０ ０条 带 的 高分 辨 Ｒ带 ； 王 喜 忠 等 Ｊ
获得 了内江 猪 、 藏猪 、 姜 曲海 猪 、 梅花猪 、 滇 南 小 耳
猪、 二花脸 猪 、 东 北 民猪 等 高分 辨 Ｇ带 ， 带数达 ４ ４ ４ 条； 于汝 梁等 。 。 发表了４ ２ ０条 带和 ５ ０ ３条 带 的 Ｇ带 模式图； 夏金 星 等 ＿ １ ］ 绘 制 了家猪 高分 辨 Ｇ带 染色 体 ５ ７ ７条 带 纹模 式 图 ； 曹 阳等 ＿ １ ｊ 获 得 了松 辽 黑猪 Ｇ一
奠定 了基 础 。 国 内外 对 有 关 家 猪 染 色 体 Ｃ带 的 主 要研 究 内容有 以下 几个 方 面 。
Ｉ ． ３ ． Ｉ 染 色 体 Ｃ带 分 带技 术 ： 张玄 兵 ＿ ｌ 纠对 生 物染
色 体显带 技 术 的研究 与应 用进 行 了探讨 。 １ ． ２ 家猪 染 色体 高分 辨显 带研 究 家猪 起源 是 由
高坡猪的染色体核型及带型研究的开题报告
高坡猪的染色体核型及带型研究的开题报告
一、选题背景及意义
高坡猪是我国重要畜禽养殖品种之一，具有快速生长、肉质鲜美、免疫力强等优点。
染色体核型及带型研究是对高坡猪遗传特征和分子生物学的深入研究，具有重要意义。
二、研究目的
本研究旨在探究高坡猪的染色体核型及带型特征，为该品种的遗传改良以及保护提供基础数据。
三、研究方法
1. 实验动物的选择：选择4只健康的高坡猪进行实验。
2. 细胞培养和原位杂交：采集高坡猪胎儿肝脏组织，进行细胞培养和原位杂交。
3. 影像扫描和分析：采用显微镜和影像扫描技术，对高坡猪染色体核型和带型进行扫描和分析。
四、研究步骤
1. 采集高坡猪胎儿肝脏组织，进行细胞培养。
2. 制备高坡猪染色体的原位杂交物质。
3. 进行高坡猪染色体核型的观察和记录。
4. 影像扫描和分析高坡猪染色体带型。
五、预期结果
本研究将得到高坡猪染色体核型和带型的详细观察和分析结果，为该品种的遗传分析提供实验数据。
六、研究意义
本研究将为高坡猪的遗传改良和保护提供基础数据，同时也对其他猪种的染色体核型及带型研究提供借鉴和参考。
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