《微生物的实验室培养》教案
微生物实验室培养教案
微生物实验室培养教案1. 引言微生物实验室是学习微生物学的重要环节。
在实验室中，培养微生物是最基本、常见的实验操作之一。
本教案旨在向实验室教师和学生介绍如何正确进行微生物的培养实验，包括培养基的配制、无菌技术和微生物培养条件的控制。
2. 实验目的本实验主要目的如下： - 掌握培养基的配制方法，了解常用培养基的成分和作用； - 掌握无菌技术，确保实验过程的无菌条件； - 学习微生物培养条件的控制，如温度、湿度和氧气等。
3. 实验材料与设备实验所需的材料和设备如下： - 培养基原料：琼脂、蔗糖、蛋白胨等； - 无菌培养器具：培养皿、试管、移液管等； - 微生物菌种； - 无菌工作台或灭菌箱； -培养箱； - 无菌操作工具：移液枪、不锈钢镊子等。
4. 实验步骤4.1 培养基配制1.根据实验需要选择合适的培养基，并准备所需原料。
2.将琼脂等固体物质称取适量，加入蒸馏水中。
3.放入高压锅中加热，搅拌均匀，直至沸腾。
4.关闭高压锅火源，等待冷却至50摄氏度左右。
5.向培养皿中倒入适量的培养基，待其凝固。
6.在培养皿上标明培养基种类、日期和菌种。
4.2 无菌技术操作1.洗手并穿戴实验室规定的实验衣和手套。
2.准备好无菌操作区域（无菌工作台或灭菌箱），将培养器皿、培养基和无菌操作工具放入其中。
3.开启无菌操作区域的紫外灯，辐照一段时间杀灭环境中的微生物。
4.打开培养器皿盖、移液管盖等容器，将其放入无菌操作区域，避免空气污染进入。
5.使用无菌操作工具取一定量的微生物菌种，均匀涂布在培养基表面。
6.关闭无菌操作区域的紫外灯，将培养器皿盖、移液管盖等容器盖好。
4.3 微生物培养条件控制1.将培养皿放入培养箱中，注意分开放置以避免交叉污染。
2.设置好培养箱的温度、湿度和氧气浓度等参数，根据实验需要进行调整。
3.定期观察培养皿内微生物的生长情况，记录观察结果。
4.进行培养期间的常规检查和维护，如补充培养基、调整培养条件等。
2023高中生物人教版微生物的实验室培养技术教案
2023高中生物人教版微生物的实验室培养技术教案一、实验目的通过本实验，学生将学习和掌握微生物的实验室培养技术，包括无菌操作、培养基的制备、菌落计数等。
二、实验材料和仪器设备1. 培养基：琼脂（agar）、液体培养基、牛肉膏蛋白胨培养基等。
2. 无菌培养器具：培养皿、试管、培养瓶、移液管等。
3. 实验仪器：恒温培养箱、恒温水浴锅等。
三、实验步骤1. 无菌操作（1）实验室准备：实验前要对实验室进行消毒，保证实验环境的洁净无菌。
（2）个人准备：戴好实验帽、口罩和手套，并进行手部消毒。
（3）工具准备：准备好所需的培养器具，并经过高温高压灭菌处理。
（4）操作步骤：a. 打开培养器具盖子时，要迅速将盖子反放在工作台上，避免空气中的微生物进入器具。
b. 使用火焰对培养器具进行消毒，如移液管要先在火焰中加热，再进行取样或移液操作。
c. 注意避免污染，操作过程中要保持器具与周围环境的距离。
d. 实验结束后，要将培养器具进行高温高压灭菌处理。
2. 培养基的制备（1）准备所需培养基的原料和试剂。
（2）按照配方准确称取原料和试剂，并加入适量的蒸馏水中。
（3）调节pH值：使用pH计测量培养基溶液的pH值，根据需要调节至合适的范围内。
（4）高温高压灭菌：将调整好pH值的培养基装入试管或培养瓶中，用高温高压灭菌器进行灭菌处理。
3. 菌落计数（1）准备涂布板：将培养基倒入培养皿中，使其均匀覆盖培养皿底部，待其凝固后进行操作。
（2）标定容量：取一定体积的微生物液体悬液，通过连续稀释法稀释成不同浓度的悬液。
（3）涂布法计数：取适量的微生物悬液用吸管均匀涂布在培养皿上，然后在恒温培养箱中进行培养。
（4）计数方法：根据培养皿上形成的菌落数量进行计数，并通过相应的计算公式得出原始液体中的微生物数量。
四、实验注意事项1. 实验室环境要保持洁净无菌。
2. 实验前个人要做好个人卫生防护工作。
3. 实验过程中要严格遵守无菌操作规范。
4. 培养基的制备要准确，pH值的调节要仔细。
课题1微生物的实验室培养-人教版选修1生物技术实践教案
课题1 微生物的实验室培养-人教版选修1 生物技术实践教案教学目标•了解微生物实验室培养的基本原理和方法•学习操作无菌实验的技能•熟悉使用化学试剂和实验器材的方法和注意事项教学重点学生能够熟练地进行微生物实验室培养和无菌实验操作，掌握实验过程的基本方法和注意事项。
教学难点如何正确进行微生物实验室培养和无菌实验，保证实验的准确性和安全性。
教学过程一、实验目的和原理1.实验目的：了解微生物实验室培养的基本原理和方法，掌握无菌实验操作技巧，学会使用化学试剂和实验器材。
2.实验原理：微生物实验室培养是把微生物放在适宜的环境中，使其得到营养、生长和繁殖的过程，一般有两种方法：液体培养和固体培养。
无菌实验是指在无微生物干扰和污染的条件下进行实验操作，通常需要采用灭菌和消毒等技术。
二、实验器材和试剂•实验器材：培养皿、试管、移液管、显微镜等。
•试剂：琼脂、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、碘酒、70%酒精等。
三、实验步骤1.实验前准备：清洗试管、培养皿等实验器具，准备所需试剂和培养物。
2.培养基制备：称取适量的琼脂和磷酸盐缓冲液，加入蒸馏水，加热至琼脂完全溶解，然后进行灭菌消毒。
3.杂菌检测：将准备好的培养基倒在培养皿上，放置在恒温箱中，观察是否有杂菌的生长。
4.微生物接种：采用无菌技术，将培养物移植至培养基表面和内部，标明不同的培养条件和试验目的。
5.培养条件：培养箱中的温度、湿度和光照条件要根据不同的微生物种类进行调节和控制。
6.观察和记录：观察微生物在培养基上的生长情况和形态特征，进行记录和统计分析。
7.鉴定和鉴别：采用显微镜等检测技术，进行微生物的鉴定和鉴别，以确定其种类和特性。
四、实验注意事项1.操作过程中要注意使用无菌技术，避免微生物污染。
2.实验室要保持干净卫生，经常清洗和消毒实验器材和环境。
3.对于具有毒性的试剂，要注意正确配制和储存，避免误用和事故发生。
4.操作结束后，要清洗和消毒实验器材和实验环境，保证实验室的安全和卫生。
微生物的实验室培养.(教案)
普通高中课程标准实验教科书——生物选修1[人教版]课题1 微生物的实验室培养★课题目标（一）知识与技能了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神★课题重点无菌技术的操作★课题难点无菌技术的操作★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课1．基础知识1．1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
【补充】培养基的类型及其应用：1．2 培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。
【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
1．3 培养基除满足微生物生长的pH 、特殊营养物质和氧气等要求。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH 调节为中性或微碱性。
《微生物的实验室培养》实用教学设计
03 实验室培养技术与方法
培养基类型及选择依据
培养基类型
根据微生物的营养需求和生长特性， 培养基可分为基础培养基、营养培 养基、选择培养基和鉴别培养基等。
选择依据
在选择培养基时，需考虑微生物的 营养需求、生长速度、代谢产物等 因素，以及实验目的和实验条件。
培养学生对微生物学的兴趣和热情， 树立科学严谨的实验态度和环保意识。
能力目标
能够独立完成微生物的分离、纯化和 培养工作，具备分析和解决微生物培 养过程中常见问题的能力。
教学内容与方法
教学内容
微生物实验室培养的基本原理和方法，包括培养基的制备、接种技术、培养条件的 选择和控制等；常见微生物的培养特性和生长规律；微生物的分离、纯化和保存方 法。
操作步骤
用接种环在平板培养基表面通过分区划线的方法接种微生物，划线时接种环与 平板表面成一定角度，轻轻接触平板表面，以不划破培养基为度。划线完成后， 盖上平板盖，倒置放入恒温培养箱中培养。
稀释涂布平板法操作演示
01
准备
取无菌平板、移液管、无菌水等物品，将待测样品进行适当稀释。
02 03
操作步骤
用移液管吸取一定量的稀释后的微生物悬液，滴加到平板培养基表面， 用无菌玻璃刮刀将菌液均匀涂布在平板上。涂布完成后，盖上平板盖， 倒置放入恒温培养箱中培养。
革兰氏染色法操作演示
要点一
革兰氏染色法的步骤
包括涂片、干燥、固定、初染、媒染、脱色、复染等步骤。
要点二
革兰氏染色法的注意事项
如涂片不宜过厚、脱色时间要控制好、复染时要均匀等。
微生物的实验室培养教案
课题1 微生物的实验室培养★课题目标（一）知识与技能了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神★课题重点无菌技术的操作★课题难点无菌技术的操作★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课1．基础知识1．1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
【补充】培养基的类型及其应用：1．2 培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。
【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
1．3 培养基除满足微生物生长的pH 、特殊营养物质和氧气等要求。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
《微生物的实验室培养》教学设计-优秀教案
《微生物的实验室培养》教学设计-优秀教案2.1《微生物的实验室培养》一、基础知识(一）培养基人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。
1.根据外观的物理状态,培养基的种类包括培养基和培养基等。
在液体培养基中加入凝固剂后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养剂表面生长，形成肉眼可见的。
2.根据培养基中化学成分的不同，可分为培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）和培养基。
培养基是通过加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的培养基，如培养细菌用的葡萄糖铵盐培养基。
合成培养基的优点是化学成分及其含量明确、实验的可重复性好，缺点是配制繁琐，成本较高。
3.按照培养基的用途，培养基可分为基础培养基、培养基和培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以不需要的微生物生长，所需要的微生物的生长，培养、分离出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入；选择培养金黄色葡萄球菌，可在培养基加入；若在培养基中加入，即可抑制细菌和放线菌的生长，将真菌分离出来；无氮培养基不含氮元素，可用于选择能的细菌）4.培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分。
异养微生物只能利用（有机物、无机物）作碳源，也是能源。
5.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供________的条件。
（二）无菌技术1.获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在____________________附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_________________相接触。
2.消毒和灭菌（1）消毒是指使用____________________________________仅杀死物体表面或_________的部分微生物（不包括______和_______）。
微生物的实验室培养教案
专题2课题1：微生物的实验室培养【课程标准】了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【基础知识】1．培养基是指-------------------------------------------------------------------------------。
据物理性质将其分为---------------------和----------------------、-----------------------。
据用途分为------------和----------------------。
2．培养基的营养成分包括------------、------------、------------、------------、------------。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加------------、培养霉菌时需将培养基PH调至------------、培养细菌时需将PH调至------------、培养厌氧微生物则需提供------------条件。
4．自养型微生物常用的碳源是------------、------------，氮源是------------、------------。
异养型微生物常用的碳源是------------、------------，氮源是------------、------------。
5．消毒是指---------------------------------------------------------------------------------。
灭菌是指------------------------------------------------------。
6．实验室常用的消毒方法有------------------、------------------、------------------。
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微生物的实验室培养
一、课题目标
了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点与难点
课题重点：无菌技术的操作。
课题难点：无菌技术的操作。
三、课题背景分析
课题背景通过生产中的实例，首先引导学生认识在微生物的培养过程中，保持培养物纯净的重要性。
教师不必拘泥于教材中列举的实例，可以充分发挥学生的主动性，让学生搜集列举更多的生产生活中的实例，从中体会培养物纯净对于微生物培养的重要性。
在此基础上，教材让学生进一步明确培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。
四、基础知识分析与教学建议
（一）培养基
知识要点：1.培养基的用途和种类，指出培养基可分为液体和固体两大类； 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方； 3.尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。
教学建议：教师在介绍液体和固体培养基时，宜结合教材提供的图片进行讲解，以增进学生的感性认识。
教材以表格的形式提供了一个培养基配方的实例。
教师可以采用资料分析的形式，让学生通过主动的分析，认识培养基的基本组成成分，并结合必修模块“分子与细胞”中的知识，让学生从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。
（二）无菌技术
知识要点：1.无菌技术的含义；消毒与灭菌的概念及两者的区别；3.常用的消毒与灭菌的方法，接种环灼烧灭菌的方法。
教学建议：教师可以首先结合学生的生活经验，让学生意识到日常的生活环境中，每时每刻每处都存在着微生物，任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中，然后再强调无菌操作的重要性。
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。
只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。
教材中提供了阅读材料“实验室常用的消毒和灭菌方法”，教师可以让学生通过阅读了解这些常用方法，并回答旁栏中的两道思考题，根据回答的情况，检查学生是否真正理解了上述内容。
在此基础上，教师再介绍无菌操作的具体内容，让学生进一步熟悉培养微生物的规范操作，以及实验中将要用到的材料与器具。
五、实验安排及注意事项
（一）从菌种保藏中心购买菌种后，教师首先需要用平板划线法纯化培养
所得菌种，并根据学生小组的数目，准备好数个平板。
（二）第1 课时完成基础知识的教学，学习各种操作方法，并制备培养基。
高压蒸汽灭菌所需要的时间较长，因此需要利用课下时间完成。
课下完成后，再于第2课时完成大肠杆菌的纯化培养。
此后安排学生连续观察记录3〜4 d。
（三）配制培养基时，教师需要提示学生按照每个培养基消耗15〜20 mL
的量来估算总用量。
全班同学的培养基可以集中起来，分批灭菌。
（四）灭菌后，培养基冷却到55C后应及时进行倒平板操作。
如果不能及时操作，需要将培养基放到55 C左右的电热箱中保温，以防止琼脂凝固。
（五）如果打算做本专题的第2或第3课题，建议此课题不仅要练习平板划线操作，还要练习稀释涂布平板法操作。
为此，教师需要提前 1 天用液体培养基培养大肠杆菌，培养一夜后，于第2 天将培养液分发到各小组。
（六）实验后，所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则将会造成环境污染。
六、课题成果评价
（一）培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~ 2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。
（三）是否进行了及时细致的观察与记录
培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。
这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。
七、答案和提示
（一）旁栏思考题
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿
（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管
（3）实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
（二）倒平板操作的讨论
1•培养基灭菌后，需要冷却到50C左右时，才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度？
提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
3•平板xx后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
（三）平板划线操作的讨论
1 .为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。
划线
结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌
落。
（四）涂布平板操作的讨论
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。
结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2 步应如何进行无菌操作？
提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。
例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。
（五）练习
1.提示：可以从微生物生长需要哪些条件的角度来思考。
例如，微生物的生长需要水、空气、适宜的温度，食品保存可以通过保持干燥、真空的条件，以及冷藏等方法来阻止微生物的生长。
2.提示：可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。
例如，这三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养，但无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件，而其他两种技术都要求严格的无菌条件。
3.提示：这是一道开放性的问题，答案并不惟一，重点在于鼓励学生积极参与，从不同的角度思考问题。
例如，正是由于证明了微生物不是自发产生的，微生物学才可能发展成为一门独立的学科；巴斯德实验中用到的加热灭菌的方法导致了有效的灭菌方法的出现，而这一灭菌原理也适用于食品的保存等。