药物分析第十二章喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析
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（2）旋光性 硫酸奎宁（左旋体）硫酸奎尼丁（右 旋体）二盐酸奎宁（左旋体）
（3）紫外吸收光谱 喹啉环
（4）荧光特性 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝
色荧光
二、鉴别试验
（一）绿奎宁反应
奎宁为6位含氧喹啉衍生物，可以发生 绿奎宁反应。
6－含氧喹啉＋氯水＋氨水
二醌基亚
（溴水）
胺的铵盐
ChP采用此法鉴别硫酸奎宁和二盐酸奎宁
青蒿琥酯 取本品约50mg，加三氯甲烷l ml使溶解，取3~4 滴置白 瓷板上， 待三氯甲烷挥发后， 加2%香草醛硫酸溶液1滴，显红 色。
（二）光谱法 IR
（三）色谱法 TLC HPLC：210nm
三、杂质检查
青蒿素有关物质检查（TLC，ChP2010）
取出，晾干，喷以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶 液，在85℃加热10～20 分钟至斑点清晰， 要求： •对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰 斑点。 •供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（1）主斑 点比较，不得更深；与对照溶液（2）的主斑点比 较，深于对照溶液（2）主斑点的斑点不得多于1个。
N
含量 测定
酸碱滴定 1:3 1:4
第二节 青蒿素类药物的分析
2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗 疟药-青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为 诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生 物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。
一、结构与理化性质
1.结构 含过氧基团的新型倍半萜内酯
青蒿素
牢记：lmol的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸
ChP和USP都采用此法测定硫酸奎宁的含量。
b.硫酸奎宁片
硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离 碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。
2分子游离奎宁
H + ClO4H ClO4-
+
H
ClO4-
+
H ClO4-
1mol硫酸奎宁生成2mol奎宁 1mol奎宁消耗2mol高氯酸
复习：吩噻嗪类药物的分析
基本 结构
基本 性质
鉴别
含量 测定
硫氮杂蒽母核 碱性;
生物来自百度文库沉淀剂 酸碱滴定法
10-碱性侧链 易氧化; 氧化
UV
2-卤素
与金属离子与鈀离子络合 鈀离子比色
络合；
卤素取代基 法
紫外吸收 氯化物
HPLC
5
6
S
4
7
3
8 9
10N R
2 R'
1
第十二章 喹啉与 青蒿素类抗疟药物 的分析
（二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查
1.酸度 2.水中不溶物 3.氯化物：生产工艺带入 4.甲醛 5.四氢吡咯
四、含量测定
（一）硫酸奎宁 • 非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（ChP、USP） • HPLC测定硫酸奎宁片的含量（USP）
a.硫酸奎宁 奎宁为二元碱，其中喹核氮的碱性较强，
可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能 与硫酸成盐，而保持游离状态。
第一节 喹啉类药物的分析
一、基本结构与主要化学性质 1.结构：本类药物均有吡啶与苯稠合而成的喹啉
杂环
H3CO
N HO
H
H
H HC CH2
·H2SO4 ·2H2O
N
硫酸奎宁 2 难溶于水
H3CO
N HO
H
H H HC CH2
·2HCl
N
二盐酸奎宁—易溶于水
H3CO
HO N H H H CH=CH2,H2SO4,2H2OH3CO
（三）无机酸盐
SO42-+Ba2Cl-+Ag-
BaSO4 ↓ AgCl ↓
硫酸奎宁
三、有关物质检查 （一）硫酸奎宁中有关物质检查 1.酸度 控制药物中的酸性杂质 用pH计测定,pH为5.7～6.6。 2.氯仿－乙醇中的不溶物 控制药物在制备过程中引入的醇中不溶 性杂质或无机盐类 3.其他金鸡钠碱 控制其他的生物碱 TLC（ChP）：主成分自身对照法 HPLC（BP）：峰面积归一化法
硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示 一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫 酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐， 因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。
反应的摩尔比？
H+
SO42- +3HClO4
H+
HH+ HSO4-
+
H+ ClO4-
HH++ ClO4H+ ClO4-
(C20H24N2O2·H+)2SO4 + 3HClO4 → (C20H24N2O2·2H+)·2ClO4- + (C20H24N2O2·2H+)·HSO4-·ClO4
1mol的硫酸奎宁消耗4mol的高氯酸
片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。
五、体内药物分析-自学
HPLC法测定人体血液中的氯喹 P322
重点内容
基本 结构
基本 性质
鉴别
喹啉环 碱性侧链
N HO
H
H H HCCH2 H3CO
碱性; 荧光特性 旋光性； 共轭
·H2SO4 ·2H2O
绿奎宁反应 紫外 荧光 无机酸盐
H H
N
H
HO
CH=CH2,H2SO4,2H2O
N
2
N
2
硫酸奎宁
硫酸奎尼丁
奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同， 因此旋光性、碱性、溶解度也不同。
N Cl
N
N N
N N
磷酸哌喹
·4H3PO4 ·4H2O
Cl
Cl
N
·2H3PO4
HN N CH3
CH3
CH3
磷酸氯喹
2.主要化学性质 （1）碱性
奎宁碱性：脂环氮(pKa 8.8) >喹啉环系芳香 氮(pKa 4.2 ，不能与硫酸成盐)
CH3OH—O
Cl Cl2 HO
ClCl Cl2 O
N
N
N
NH3
ONH4 N
N
N
二醌亚胺盐 绿/翠绿色产物
（二）光谱特征 1.紫外吸收光谱 磷酸氯喹盐酸溶液（0.01mol/L） λmax：222nm、257nm、329nm、343nm
2.荧光光谱特征 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光
3.红外吸收光谱特征
四、含量测定
❖ 双氢青蒿素片的含量测定 —分解后的UV法
❖ 测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml， 分别置10ml量瓶中，各精密加入乙醇1ml，摇匀， 加2%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置60℃恒温水 浴中反应30分钟，取出冷至室温，以2%氢氧化钠 溶液-乙醇（4:1）为空白，照分光光度法（附录Ⅳ A），在238nm的波长处分别测定吸收度，计算， 即得。
双氢青蒿素
❖ 青蒿琥酯
❖ 蒿甲醚
2.化学性质 （1）氧化性 （2）旋光性 （3）水解性 （4）UV：末端吸收
青蒿素
二、鉴别试验
（一）呈色反应
1.过氧桥的氧化反应（KI-淀粉）
2.羟肟酸铁反应-内酯
3.香草醛-硫酸反应：萜类
青蒿素（ 1 ) 取本品约5 mg , 加无水乙醇0.5 ml 溶解后,加碘化钾试 液0.4ml，稀硫酸2.5 ml 与淀粉指示液4 滴，立即显紫色。 ( 2 ) 取本品约5 mg , 加无水乙醇0.5 ml 溶解后， 加盐酸羟胺试 液0.5 ml 与氢氧化钠试液0.25 ml , 置水浴中微沸，放冷后，加 盐酸2滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。
（3）紫外吸收光谱 喹啉环
（4）荧光特性 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝
色荧光
二、鉴别试验
（一）绿奎宁反应
奎宁为6位含氧喹啉衍生物，可以发生 绿奎宁反应。
6－含氧喹啉＋氯水＋氨水
二醌基亚
（溴水）
胺的铵盐
ChP采用此法鉴别硫酸奎宁和二盐酸奎宁
青蒿琥酯 取本品约50mg，加三氯甲烷l ml使溶解，取3~4 滴置白 瓷板上， 待三氯甲烷挥发后， 加2%香草醛硫酸溶液1滴，显红 色。
（二）光谱法 IR
（三）色谱法 TLC HPLC：210nm
三、杂质检查
青蒿素有关物质检查（TLC，ChP2010）
取出，晾干，喷以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶 液，在85℃加热10～20 分钟至斑点清晰， 要求： •对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰 斑点。 •供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（1）主斑 点比较，不得更深；与对照溶液（2）的主斑点比 较，深于对照溶液（2）主斑点的斑点不得多于1个。
N
含量 测定
酸碱滴定 1:3 1:4
第二节 青蒿素类药物的分析
2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗 疟药-青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为 诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生 物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。
一、结构与理化性质
1.结构 含过氧基团的新型倍半萜内酯
青蒿素
牢记：lmol的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸
ChP和USP都采用此法测定硫酸奎宁的含量。
b.硫酸奎宁片
硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离 碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。
2分子游离奎宁
H + ClO4H ClO4-
+
H
ClO4-
+
H ClO4-
1mol硫酸奎宁生成2mol奎宁 1mol奎宁消耗2mol高氯酸
复习：吩噻嗪类药物的分析
基本 结构
基本 性质
鉴别
含量 测定
硫氮杂蒽母核 碱性;
生物来自百度文库沉淀剂 酸碱滴定法
10-碱性侧链 易氧化; 氧化
UV
2-卤素
与金属离子与鈀离子络合 鈀离子比色
络合；
卤素取代基 法
紫外吸收 氯化物
HPLC
5
6
S
4
7
3
8 9
10N R
2 R'
1
第十二章 喹啉与 青蒿素类抗疟药物 的分析
（二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查
1.酸度 2.水中不溶物 3.氯化物：生产工艺带入 4.甲醛 5.四氢吡咯
四、含量测定
（一）硫酸奎宁 • 非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（ChP、USP） • HPLC测定硫酸奎宁片的含量（USP）
a.硫酸奎宁 奎宁为二元碱，其中喹核氮的碱性较强，
可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能 与硫酸成盐，而保持游离状态。
第一节 喹啉类药物的分析
一、基本结构与主要化学性质 1.结构：本类药物均有吡啶与苯稠合而成的喹啉
杂环
H3CO
N HO
H
H
H HC CH2
·H2SO4 ·2H2O
N
硫酸奎宁 2 难溶于水
H3CO
N HO
H
H H HC CH2
·2HCl
N
二盐酸奎宁—易溶于水
H3CO
HO N H H H CH=CH2,H2SO4,2H2OH3CO
（三）无机酸盐
SO42-+Ba2Cl-+Ag-
BaSO4 ↓ AgCl ↓
硫酸奎宁
三、有关物质检查 （一）硫酸奎宁中有关物质检查 1.酸度 控制药物中的酸性杂质 用pH计测定,pH为5.7～6.6。 2.氯仿－乙醇中的不溶物 控制药物在制备过程中引入的醇中不溶 性杂质或无机盐类 3.其他金鸡钠碱 控制其他的生物碱 TLC（ChP）：主成分自身对照法 HPLC（BP）：峰面积归一化法
硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示 一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫 酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐， 因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。
反应的摩尔比？
H+
SO42- +3HClO4
H+
HH+ HSO4-
+
H+ ClO4-
HH++ ClO4H+ ClO4-
(C20H24N2O2·H+)2SO4 + 3HClO4 → (C20H24N2O2·2H+)·2ClO4- + (C20H24N2O2·2H+)·HSO4-·ClO4
1mol的硫酸奎宁消耗4mol的高氯酸
片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。
五、体内药物分析-自学
HPLC法测定人体血液中的氯喹 P322
重点内容
基本 结构
基本 性质
鉴别
喹啉环 碱性侧链
N HO
H
H H HCCH2 H3CO
碱性; 荧光特性 旋光性； 共轭
·H2SO4 ·2H2O
绿奎宁反应 紫外 荧光 无机酸盐
H H
N
H
HO
CH=CH2,H2SO4,2H2O
N
2
N
2
硫酸奎宁
硫酸奎尼丁
奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同， 因此旋光性、碱性、溶解度也不同。
N Cl
N
N N
N N
磷酸哌喹
·4H3PO4 ·4H2O
Cl
Cl
N
·2H3PO4
HN N CH3
CH3
CH3
磷酸氯喹
2.主要化学性质 （1）碱性
奎宁碱性：脂环氮(pKa 8.8) >喹啉环系芳香 氮(pKa 4.2 ，不能与硫酸成盐)
CH3OH—O
Cl Cl2 HO
ClCl Cl2 O
N
N
N
NH3
ONH4 N
N
N
二醌亚胺盐 绿/翠绿色产物
（二）光谱特征 1.紫外吸收光谱 磷酸氯喹盐酸溶液（0.01mol/L） λmax：222nm、257nm、329nm、343nm
2.荧光光谱特征 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光
3.红外吸收光谱特征
四、含量测定
❖ 双氢青蒿素片的含量测定 —分解后的UV法
❖ 测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml， 分别置10ml量瓶中，各精密加入乙醇1ml，摇匀， 加2%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置60℃恒温水 浴中反应30分钟，取出冷至室温，以2%氢氧化钠 溶液-乙醇（4:1）为空白，照分光光度法（附录Ⅳ A），在238nm的波长处分别测定吸收度，计算， 即得。
双氢青蒿素
❖ 青蒿琥酯
❖ 蒿甲醚
2.化学性质 （1）氧化性 （2）旋光性 （3）水解性 （4）UV：末端吸收
青蒿素
二、鉴别试验
（一）呈色反应
1.过氧桥的氧化反应（KI-淀粉）
2.羟肟酸铁反应-内酯
3.香草醛-硫酸反应：萜类
青蒿素（ 1 ) 取本品约5 mg , 加无水乙醇0.5 ml 溶解后,加碘化钾试 液0.4ml，稀硫酸2.5 ml 与淀粉指示液4 滴，立即显紫色。 ( 2 ) 取本品约5 mg , 加无水乙醇0.5 ml 溶解后， 加盐酸羟胺试 液0.5 ml 与氢氧化钠试液0.25 ml , 置水浴中微沸，放冷后，加 盐酸2滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。