中药化学 实验 穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定
穿山龙根茎叶不同生长期薯蓣皂苷元的含量测定
穿山龙根茎叶不同生长期薯蓣皂苷元的含量测定赵春颖;佟继铭;刘玉翠【期刊名称】《承德医学院学报》【年(卷),期】2008(25)2【摘要】目的:检测不同生长期穿山龙地上部分和地下部分薯蓣皂苷元的含量,以确定其地上部分的开发利用价值.方法:采用RP-HPLC法检测不同生长期穿山龙中薯蓣皂苷元的含量.色谱柱:Discovery C18(250mm×4.6mm×5 μm),流动相:甲醇:水(84:16),流量:0.8ml/min,柱温:室温,检测波长:203nm.结果:薯蓣皂苷元在0.10-1.0mg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为97.23%,RSD 为0.879%(n=5).地上部分(茎叶果实种子)中薯蓣皂苷元含量在8、9月份较高,分别为2.294%和2.117%;根茎(地下部分)中薯蓣皂苷元含量在9、10月份较高,分别为2.261%和2.576%;结论:穿山龙地上部分采收期应为8、9月份,地下部分采收期应为9、10月份,且地上部分也有较高的开发利用价值.【总页数】3页(P127-129)【作者】赵春颖;佟继铭;刘玉翠【作者单位】承德医学院中药研究所,河北,承德,067000;承德医学院中药研究所,河北,承德,067000;承德医学院中药研究所,河北,承德,067000【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.不同产地穿山龙薯蓣皂苷元含量的比较研究 [J], 高晓旭;勾勇山;高志光;李宝德2.广西不同产地玉郎伞根茎叶中水黄皮素的含量测定 [J], 符传武;刘永逸;黄筱珏;韦于熳;覃华亮;洪薇;蒋秋香;覃子龙;李隽永;李玲3.不同产地穿山龙薯蓣皂苷元含量的比较研究 [J], 李宝德;高晓旭4.不同产地穿山龙中薯蓣皂苷元比较 [J], 孙传菊; 葛重宇; 于长杰; 杨燕飞; 沈玉萍; 杨欢5.盾叶薯蓣根状茎不同部位和不同生长期薯蓣皂苷元含量的差异性研究 [J], 曹玉芳;王太霞;胡正海因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中药化学实验
中性药渣
自然晾干
干燥药渣
干燥药渣
置乳钵中研成细粉，置索氏提取器 中，以石油醚（60~90℃沸程）为 溶剂，连续回流提取4~5小时.
石油醚提取液
回收石油醚至剩10~15ml时， 迅速倾入小三角烧瓶中，放置 使充分冷却，过滤。
滤液
沉淀
用少量冷石油 醚洗二次抽干.
薯蓣皂苷元粗品
四、薯蓣皂苷元的鉴定
（1）化学检识： ①醋酐-浓硫酸反应（Libermann-Burchard反应） 取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使 溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1 滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变成乌绿色。 ②氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应） 取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸 后，在硫酸层出现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出 现。
实验原理
提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异 纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异 制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进 行酸水解得到槲皮素
[实验流程]
1、提取
槐米（20g）
加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液
药渣
煎煮液
放置4~5h，抽滤
沉淀
自然干燥
粗品芦丁
2、精制
粗品芦丁
加甲醇15~20ml，水浴加热（空 气冷凝）溶解， 至无黄色物，趁 热过滤。
实验原理
提取原理：苦参生物碱有一定碱性，可与 酸结合成盐，因此采用酸水提取法。 纯化原理：总生物碱呈阳离子状态而被阳 离子交换树脂所交换，再用氨水碱化后生物 碱游离以有机溶剂回流提取。 分离原理：利用总生物碱中氧化苦参碱在 乙醚中难溶而与其它生物碱分盐酸盐
渗漉液
通过装湿重60g（60ml）树脂的阳离 子交换树脂柱交换，交换速度1~2d/s。 注意测定不同交换时间pH值的变化。 （每隔15分钟）
穿山龙总皂苷提取方法研究
穿山龙总皂苷提取方法研究【摘要】目的探讨穿山龙中总皂苷的提取方法，为后续的提取工艺研究奠定基础。
方法以总皂苷含量和浸膏得率为指标，考察超声提取法、回流提取法、索氏提取法，确定最佳提取方法。
结果超声提取法总皂苷含量8.67%，浸膏得率为3.66%；回流提取法总皂苷含量13.16%，浸膏得率为7.46%；索氏提取法总皂苷含量11.22%，浸膏得率为6.10%。
结论最佳提取方法为回流提取法。
【关键词】穿山龙；总皂苷；薯蓣皂苷元；提取方法穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣（dioscorea nipponica makino）的干燥根茎，味甘苦温，具有祛风湿，止痛，舒筋活血，止咳平喘祛痰功效[1]。
主治风湿性关节炎，筋骨麻木，大骨节病，跌扑损伤，慢性支气管炎、咳嗽气喘。
现代药理研究证明，其总皂苷类成分具有调节免疫、改善心血管功能、祛痰、抗肿瘤、抗炎镇痛等多种药理作用[2]。
穿山龙主要成分是甾体皂苷类，包括薯蓣皂苷（dioscin）、纤细皂苷（gracillin）和水溶性皂苷等[3]。
本品是近30年来从民间搜集而逐步广泛应用的，民间多用其浸酒或煎服，为治疗风湿病的三大常用药之一[4]。
有报道用穿山龙注射液治疗风湿和类风湿关节炎，有效率达89%[4]。
可见该药的用途是极其广泛的，开发利用穿山龙的前景广阔，因此其提取及含量测定的工艺方法至关重要。
本实验拟以总皂苷含量和浸膏得率为指标，考察超声提取法、回流提取法、索氏提取法，确定最佳提取方法。
为后续的单因素及正交相结合的方法确定穿山龙总皂苷最佳工艺研究奠定基础。
1材料与仪器穿山龙药材购于广州清平药材市场，经广东药学院中药鉴定教研室李书渊教授鉴定均为薯蓣科薯蓣属穿龙薯蓣（dioscoreanipponica makino）的干燥根茎。
uc-1800型紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）；tc-15型恒温电热套（海宁市华星仪器厂）；dfy-400型摇摆式高速万能粉碎机（温岭市林大机械有限公司）；岛津ay120托盘电子分析天平；hh-6恒温水浴锅（江苏省金坛市宏华仪器厂）；上海亚荣生化仪器厂旋转蒸发仪。
植物来源穿山龙皂苷酶的分离提纯及其酶性质
植物来源穿山龙皂苷酶的分离提纯及其酶性质
陶媛媛;张波;鱼红闪;金凤燮
【期刊名称】《大连工业大学学报》
【年(卷),期】2007(026)002
【摘要】对从麦麸中提取的穿山龙薯蓣皂苷酶进行分离提纯并对其酶性质进行鉴定.结果表明,该酶的分子质量约为65 ku;该酶不仅能水解穿山龙薯蓣皂苷的α-鼠李糖基,也能水解人参皂苷Rc的20-O-α-阿拉伯糖基和3-O-β-葡萄糖基,酶反应的最佳温度为40 ℃,最适pH值为5.
【总页数】4页(P120-123)
【作者】陶媛媛;张波;鱼红闪;金凤燮
【作者单位】大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连,116034
【正文语种】中文
【中图分类】Q946-83;Q946.49
【相关文献】
1.人参皂苷Re酶转化的F1皂苷等产品的分离提纯 [J], 宋建国;肖永坤;王东明;鱼红闪;金凤燮
2.芦丁-α-鼠李糖苷酶分离提纯及其酶性质 [J], 王侃;鱼红闪;金凤燮
3.穿山龙薯蓣皂苷的分离提纯 [J], 胡湘春;鱼红闪;金凤燮
4.人参皂甙-α-鼠李糖苷酶分离提纯及其酶性质 [J], 金赞敏;鱼红闪;金凤燮
5.穿山龙中薯蓣皂苷酶提取工艺的优化 [J], 江慧;孙蓉;汪魏平;徐文科;陆小凤;年四辉
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薯蓣皂苷元的提取分离、检测方法及药理作用研究进展
薯 蓣 皂 苷 元 的提 取分 离 、 检 测方 法 及 药理 作 用 研 究进 展
盛芳 园， 何 忠梅 ， 陈 凯， 李成恩 ， 郜玉刚 ， 杨 鹤 ， 张连学
（ 吉林 农业 大学 中药材学 院 ， 吉林 长春 １ ３ ０ １ １ ８ ）
摘要 ： 薯蓣皂苷元是重要的医药化工原料， 在制药中应用广泛， 由于其较高的医用价值和经济价值而备受关注。文章对
时珍 国医国药 ２ ０ １ ３年第 ２ ４卷第 ４期
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中药化学 实验 穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定
滤液
沉淀
用少量冷石油 醚洗二次抽干.
薯蓣皂苷元粗品
四、薯蓣皂苷元的鉴定
（1）化学检识： ①醋酐-浓硫酸反应（Libermann-Burchard反应） 取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使 溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1 滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变成乌绿色。 ②氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应） 取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸 后，在硫酸层出现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出 现。
薯蓣皂苷在植物体内与糖结合成苷，但经过水 解可得薯蓣皂苷元和单糖，利用薯蓣皂苷元不溶 于水，易溶于有机溶剂的性质，利用石油醚连续 回流将其提取出来。
O
O
OH O O OH HO CH3 OH OH HO CH3 OH OH O O O O
薯蓣皂苷
三、实验内容
穿山龙粗粉（50g）/组
置圆底烧瓶中，加水250ml、浓硫酸 20ml，室温浸泡24小时，文火加热 回流4~6小时，放冷，倾出酸水液。
二实验原理薯蓣皂苷在植物体内与糖结合成苷但经过水解可得薯蓣皂苷元和单糖利用薯蓣皂苷元不溶于水易溶于有机溶剂的性质利用石油醚连续回流将其提取出来
实验
穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定 一、目的要求
1、掌握亲脂性中性成分（薯蓣皂苷元）的提取方法。 2、掌握薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元的性质和检识方法。
二、实验原理
（2）薄层色谱检识 吸附剂：硅胶-CMC薄层板 样 品：5%自制薯蓣皂苷元的乙醇液 对照品：5%薯蓣皂苷元对照品的乙醇液 展开剂：苯：乙酸乙酯（8：2） 显色剂：25%磷钼酸的乙醇溶液（喷洒后 110℃加热5分钟）
酸性药渣
用清水漂洗3次，然后将药渣倒入 乳钵中，加Na2CO3粉末，反复研 磨，调pH至中性，水洗，抽干。
穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元含量的动态分析
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测定含量。结果 ： 穿龙薯蓣根 茎 中花期薯蓣皂苷元含量最 高为 １３ ％ ， 萎期含量 最低 为 １０ ％。 穿龙薯蓣 地上 ．５ 枯 ．３ 部分不同生长 时期均不合薯蓣皂苷元 。结论 ： 穿龙薯蓣根 茎中花期 薯蓣 皂苷元含量 最高 ， 萎期 含量 最低 。 穿龙 枯
薯蓣地上部分不 同生长时期均不合薯蓣皂苷元。
关键词
穿龙薯蓣 ； 薯蓣皂苷元 ； Ｐ Ｃ； Ｈ Ｌ 超临界 Ｃ ：萃取 Ｏ
文 献 标 识 码 ： Ａ 文章 编号 ：０ ６— ６０ ２０ ）２— ０ ２— ３ １０ ９ ９ （０ ７ ０ ０ ６ ０
中 图分 类号 ：９ ７ ２ Ｒ ２ ．
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反相高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量
反相高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量摘要】目的：建立反相高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量。
方法：采用安捷伦C18色谱柱(Eclipse XDB-C18，250×4.6mm，5μm)，乙腈-水(50:50)为流动相；检测波长为203nm；柱温30℃。
结果：薯蓣皂苷进样量在0.49423～7.90764μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为100.9%，(RSD为0.6%)。
结论：此法用于测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量，方法简便、专属性高，结果准确可靠。
【关键词】高效液相色谱；穿龙骨刺片；薯蓣皂苷【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）28-0377-03穿龙骨刺片具有补肾、健骨、活血、止痛的功效。
主要用于骨质增生，骨刺疼痛的治疗。
该产品收载于《中国药典》2015年版一部，由穿山龙、淫羊藿、狗脊、川牛膝、熟地黄和枸杞子等6味药物组成。
穿山龙为方中主药，具有祛风除湿，活血通络的功效，临床用于治疗类风湿关节炎。
而薯蓣皂苷为穿山龙药材的主要指标成份。
在《中国药典》2015年版一部穿龙骨刺片质量标准中采用高效液相色谱法测定穿山龙的水解产物薯蓣皂苷元的含量来控制产品质量，该方法中需要使用甲醇、三氯甲烷、乙腈，且用量较大，样品前处理时间较长。
为了减少有毒有害试剂的使用，缩短检验时间，保持与穿山龙药材质量控制指标一致，便于制剂的质量控制，尽可能减少对人体及环境的影响，本文对穿龙骨刺片质量标准进行修订。
1.实验方法1.1 仪器安捷伦高效液相色谱仪HP-1260（自动进样器G1329B、紫外检测器G1315D），KQ-500DBB型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）。
1.2 试药穿龙骨刺片样品由桐君阁药厂提供，薯蓣皂苷（批号：111707-201402，含量以96.2%计）由中国药品生物制品检定所提供。
乙腈为色谱纯，水为二次纯化水（一级纯化水），其余为分析纯。
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薯蓣皂苷
三、实验内容
穿山龙粗粉（50g）/组
置圆底烧瓶中，加水250ml、浓硫酸 20ml，室温浸泡24小时，文火加热 回流4~6小时，放冷，倾出酸水液。
酸性药渣
用清水漂洗3次，然后将药渣倒入 乳钵中，加Na2CO3粉末，反复研 磨，调pH至中性，水洗，抽干。
中性药渣
自然晾干
干燥药渣
干燥药渣
置乳钵中研成细粉，置索氏提取器 中，以石油醚（60~90℃沸程）为 溶剂，连续回流提取4~5小时.
石油醚提取液
回收石油醚至剩10~15ml时， 迅速倾入小三角烧瓶中，放置 使充分冷却，过滤。
滤液
沉淀
用少量冷石油 醚洗二次抽干.
薯蓣皂苷元粗品
四、薯蓣皂苷元的鉴定
（1）化学检识： ①醋酐-浓硫酸反应（Libermann-Burchard反应） 取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使 溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1 滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变成乌绿色。 ②氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应） 取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸 后，在硫酸层出现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出 现。
实验
穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定 一、目的要求
1、掌握亲脂性中性成分（薯蓣皂苷元）的提取方法。 2、掌握薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元的性质和检识方法。
二、实验原理
薯蓣皂苷在植物体内与糖结合成苷，但经过水 解可得薯蓣皂苷元和单糖，利用薯蓣皂苷元不溶 于水，易溶于有机溶剂的性质，利用石油醚连续 回流将其提取出来。
（2）薄层色谱检识 吸附剂：硅胶-CMC薄层板 样 品：5%自制薯蓣皂苷元的乙醇液 对照品：5%薯蓣皂苷元对照品的乙醇液 展开剂：苯：乙酸乙酯（8：2） 显色剂：25%磷钼酸的乙醇溶液（喷洒后 110℃加热5分钟）
Hale Waihona Puke