皮肤光老化动物模型具体步骤及详细说明
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8-MOP+UVA联合处理组P53, P21WAF-1 及 P16INK-4a蛋白 表达水平明显高于对照组（P值均<0.01），而UVA辐射组相 关蛋白水平也有明显增高（P值均<0.05），8-MOP+UVA联合 处理组及UVA照射组两组间经t检验比较，前者相应蛋白表达水 平均高于后者（P值均<0.05）。
8-oxo-d G阳性核比例（%）
120 100
80 60 40 20
0 对照组
8-MOP组
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UVA组
8-MOP/UVA组
**
*
3. Real-Time PCR检测各组细胞端粒相对长度比较
端粒相对长度
9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
对照组
8-MOP组
* **
UVA组
8-MOP/UVA组
1.5
1.0
#
###
0.5
0.0
对照 黄芩苷
UVA UVA+黄芩苷
c-myc
p53
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p16蛋白表达水 平 c-myc蛋白表达水 平
对照 黄芩苷
UVA UVA+黄芩苷
4. 黄芩苷对UVA辐射后细胞p16和c-myc蛋白水平的影响
8
6
4
2
0
对照
黄芩苷
# ##
UVA
UVA+黄芩苷
1.5
1.0
8-MOP+UVA联合处理组端粒相对长度明显短于对照组（2.57±0.05 vs 6.63±0.12，P<0.01）UVA照射组（4.59±0.07 vs 6.63±0.12, ） 8-MOP+UVA联合处理组（2.57±0.05 vs 4.59±0.07）端粒相对长度 经t检验比较均短于对照组（P<0.05） ，后者端粒长度更短。而8-MOP
小白鼠皮肤光老化模型的建立
小白鼠皮肤光老化模型的建立张璃;梁虹【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2005(26)12【摘要】目的应用8-甲氧补骨脂素(8-MOP)/长波紫外线(UVA 320～400 nm)照射小白鼠,快速、简便、可靠地建立皮肤光老化动物模型.方法应用HE染色及弹力纤维染色(Weigert法),对接受8-MOP/UVA照射24 h的小白鼠进行皮肤表皮、真皮组织结构、胶原纤维、弹性纤维进行对比观察.结果小白鼠经8-MOP/UVA照射24h,皮肤增厚,表皮组织增生、伴有角化过度及角化不全.真皮层炎性细胞浸润,弹性纤维增粗、增多,排列紊乱或聚集成团,胶原退行性变明显,甚至可见无定形物质,血管不规则扩张,血管壁增厚,有炎性细胞浸润.结论通过8-MOP/UVA可以快速、简便、可靠地建立小白鼠的皮肤光老化模型,为临床进行皮肤光老化的研究提供了方便.【总页数】2页(P1642-1643)【作者】张璃;梁虹【作者单位】武汉大学人民医院皮肤科,武汉,430060;武汉大学人民医院皮肤科,武汉,430060【正文语种】中文【中图分类】R75【相关文献】1.小白鼠建立铅、砷、氟中毒动物模型造模前血红蛋白测定结果分析 [J], 卢秋琳;张佳亮;梁亮;罗茜元;农克卓;蓝声远;张树球2.反复紫外线照射建立皮肤光老化模型 [J], 石潇;陈炜3.皮肤光老化动物模型的建立和超微结构观察 [J], 邵琼琰;王平;任金平;张小燕;黎军英;戎念杭4.小鼠皮肤光老化动物模型建立方法的改良 [J], 李张军;牛新武;肖生祥;Khan Abidullah;刘彦婷;马慧群;彭振辉5.人源隐孢子虫小白鼠感染模型的建立 [J], 王进产;陈丹;张龙现;宁长申;庞歌;梁楠;董和平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
便秘模型小鼠皮肤老化的观察
便秘模型小鼠皮肤老化的观察目的：观察便秘模型小鼠的皮肤老化,为肺与大肠相表里的归经药物研究提供动物模型。
方法：以空白组和D-半乳糖致衰模型作对照，采用限水（1.5ml/天），叠加复方地芬诺酯(10mg/kg·d)灌胃6周建立便秘模型。
通过小肠墨汁推进率、大肠和皮肤含水率判断便秘模型是否成功，同时进行血清、皮和肺超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)、皮肤组织羟脯氨酸(Hydroproline，HYP)及透明质酸（Hyaluronic acid,HA）含量、皮肤的光镜检测。
结果：与空白组比较，便秘组各项指标显示有显著性差异（P＜0.01）。
小肠推进率明显下降（P＜0.01）；大肠和皮肤含水率下降（P＜0.01）；皮肤明显变薄，胶原纤维数量减少；血清、皮肤及肺组织中SOD活力明显下降（P＜0.01），皮肤组织中HYP含量减少（P ＜0.01）；皮肤组织匀浆中HA含量锐减（P＜0.01）。
与衰老模型组比较，无显著性差异。
结论：便秘可导致皮肤衰老。
抗氧化能力下降与皮肤组织HA含量减少可能是该便秘模型小鼠皮肤菲薄、干燥的病理机制。
标签：便秘；皮肤；衰老；小鼠模型衰老与便秘相关，已为历代医家所论述。
如《论衡》中有“欲得长生，肠中常清；欲得不死，肠中无滓”。
《扁鹊心书·便闭》：“老人气虚，及妇人产后血少，致津液不行，不得通流，故大便常结。
”《医宗必读》云:“老年津液干枯…皆能便结”等。
各种原因引起的便秘，其病位虽在大肠，由于五脏一体观之肺系统中大肠、皮毛与肺互为联络，如《素问·五脏生成》云：“肺之合皮也，其荣毛也”。
《灵枢·本藏》曰: “肺合大肠, 大肠者, 皮其应”。
《灵枢·本输》云：“肺合大肠。
大肠者，传导之官”。
故而大肠的病变常与肺的病变相关联，同时“肺与皮毛相合”，肺与皮肤的病变也常互为影响，所以大肠与皮肤在病理上也有紧密的联系。
实用光老化动物模型建立方法的探讨
龙源期刊网
实用光老化动物模型建立方法的探讨
作者：郭鲁义李春雨张宁杨智荣
来源：《中国美容医学》2008年第02期
[摘要]目的：探讨光老化动物模型造模过程中的各个关键因素，确定实用的造模方法。
方法：用电推剪剃除大鼠背部预定部位的毛，将大鼠置于专用固定器中，每天10min，用SS-
03AB型紫外线光疗仪(UVA:340～400nm；UVB:260～350nm)连续照射60天，第61天处死大鼠，照射部位皮肤组织切片进行HE染色，观察造模效果，并结合实践总结造模经验。
结果：与空白组大鼠皮肤相比较，模型组呈现表皮层厚薄不一，真皮层血管扩张，大量炎性细胞浸润，胶原纤维明显变性等典型光老化特征，造模成功。
结论：本实验中讨论并确定的造模关键因素简便易行，经济可靠，可复制性强，为光老化动物模型的复制建立了一种实用的方法。
[关键词]光老化；动物模型；HE染色。
SKH-1无毛小鼠光老化模型的建立及点阵CO2激光治疗效应观察
SKH-1无毛小鼠光老化模型的建立及点阵CO2激光治疗效应观察作者：孙雯佳吴家强马文涓任捷来源：《中国美容医学》2023年第12期[摘要]目的：確定SKH-1无毛小鼠光老化模型的造模方法，并将该模型用于点阵CO2激光治疗效应观察。
方法：将15只SKH-1无毛小鼠分为空白组、较低剂量紫外线组和较高剂量紫外线组，紫外线照射小鼠背部皮肤，通过观察小鼠背部皮肤外观、HE染色评估小鼠皮肤光老化程度，选定合适的紫外线照射剂量。
10只光老化小鼠随机分为对照组与点阵CO2激光治疗组，治疗前、治疗后即刻、7 d、14 d及28 d检测经皮水分丢失（Trans-epidermal water loss， TEWL），治疗前、治疗后即刻、28 d、56 d行环钻活检取得皮肤组织，进行HE染色、Masson染色、阿新蓝染色及Ⅰ型、Ⅲ型胶原免疫组化染色。
结果：紫外线照射后SKH-1小鼠背部皮肤出现皮肤粗糙，横向皱纹增加，胶原纤维含量显著减少、疏松、断裂，真皮变薄、表皮增厚等光老化表现，紫外线剂量过高可出现日光性角化甚至癌变。
点阵CO2激光治疗即刻皮肤组织内可形成锥形的微小热损伤区，TEWL即刻显著升高7倍，1～2周恢复，逐渐出现胶原新生。
结论：SKH-1无毛小鼠是较理想的光老化动物实验模型，且可用于点阵激光等美容治疗后的生理与组织学研究。
[关键词]无毛小鼠；光老化；动物模型；点阵激光；组织学[中图分类号]R758.1 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2023）12-0056-04Establishment of SKH-1 Hairless Mice Photoaging Model and Its Application in Observing the Effect of Fractional CO2 LaserSUN Wenjia1，WU Jiaqiang2，Ma Wenjuan2，Ren Jie2（1.Department of Dermatology， Shanghai United Family Xincheng Hospital，Shanghai 201206，China; 2.Department of Dermatology，Huashan Hospital of Fudan University，Shanghai 200040，China）Abstract： Objective To determine the method of establishing SKH-1 hairless mouse photoaging model， and to use this model to observe the effect of fractional carbon dioxide laser treatment. Methods Fifteen SKH-1 hairless mice were divided into a blank group， a low-dose-UV group and a high-dose-UV group. The dorsal skin of mice was assessed by observing the appearance and HE staining， and the appropriate UV irradiation dose was selected. Then， 10 photoaged mice were randomized into a control group and a fractional CO2 laser treatment group. Trans-epidermal water loss （TEWL） was measured before ， immediately， 7 d， 14 d and， 28 d after treatment. Punch biopsy was done before and immediately， 28 days， 56 days after treatment， for HE staining，Masson staining， Alcian blue staining and immunohistochemical staining for type I and type III collagen. Results After UV irradiation， the dorsal skin of UV-irradiated SKH-1 mice showed roughness， increased transverse wrinkles， significantly reduced collagen fibers， loose and fractured collagen fibers， thinner dermis and thickened epidermis. Excessive UV dose could cause solar keratosis or even carcinoma. Fractional CO2 laser treatment formed conical microthermal zones， with an immediate 7-fold increase in TEWL and recovery in 1-2 weeks. New collagen emerged gradually. Conclusion SKH-1 hairless mouse is an ideal experimental animal model of photoaging， and can be used for physiological and histological studies of cosmetic laser treatment.Key words： hairless mice; photoaging; animal model; fractional laser; histology随着人民生活水平的提高，对于皮肤抗衰的需求逐年增加。
《天真驻颜丹抗皮肤老化作用的实验研究》
《天真驻颜丹抗皮肤老化作用的实验研究》一、引言随着人类生活质量的提高和人口老龄化现象的加剧，皮肤老化问题越来越受到关注。
作为人们外观美观的重要因素，皮肤老化的延缓及抗衰已成为科学研究的热点领域。
天真驻颜丹作为一款备受关注的中草药产品，其被认为具有显著的抗皮肤老化作用。
本文将就天真驻颜丹的抗皮肤老化作用进行实验研究，以验证其效果及作用机制。
二、材料与方法1. 材料天真驻颜丹、健康成年小鼠、各种皮肤老化模型等。
2. 方法（1）实验设计：本实验采用健康成年小鼠作为研究对象，通过建立不同皮肤老化模型来验证天真驻颜丹的抗皮肤老化作用。
（2）实验步骤：首先建立皮肤老化模型，然后将小鼠随机分为实验组和对照组，实验组给予不同剂量的天真驻颜丹，对照组给予等量安慰剂。
在给药过程中观察并记录小鼠的皮肤状态变化，包括皮肤弹性、色泽、皱纹等指标。
最后，对实验数据进行统计分析，以评估天真驻颜丹的抗皮肤老化效果。
三、实验结果1. 皮肤弹性：实验结果显示，实验组小鼠的皮肤弹性明显优于对照组，随着给药时间的延长，实验组小鼠的皮肤弹性逐渐恢复至年轻水平。
2. 皮肤色泽：与对照组相比，实验组小鼠的皮肤色泽明显改善，变得红润有光泽。
3. 皱纹：在给药过程中，实验组小鼠的皱纹逐渐减少，且深度和宽度均有所减小。
而对照组小鼠的皱纹无明显变化。
4. 统计分析：通过对比实验组和对照组的数据，发现天真驻颜丹在抗皮肤老化方面具有显著效果（P<0.05）。
四、讨论天真驻颜丹之所以具有显著的抗皮肤老化作用，主要得益于其中所含的多种中草药成分。
这些成分具有抗氧化、抗炎、促进胶原蛋白合成等作用，从而有助于改善皮肤状态，延缓皮肤老化。
此外，天真驻颜丹的抗皮肤老化作用还可能与其调节机体内部环境、平衡内分泌等作用有关。
五、结论通过对天真驻颜丹的抗皮肤老化作用进行实验研究，我们发现在不同皮肤老化模型中，天真驻颜丹均具有显著的抗皮肤老化效果。
这主要得益于其中所含的中草药成分具有抗氧化、抗炎、促进胶原蛋白合成等作用。
皮肤光老化小鼠模型的构建及效果评估
Apr. 2021, 41(2)
实验动物与比较更-学 Laboratory Animal and Comparative Medicine
117
皮肤是人体最浅表且最大的器官，在保护人 体免受环境损害和进行物质交换方面挥了重要 作用。皮肤衰老是一个由基因和外界环境因素等 共同导致的复杂过程。皮肤老化分为内源性老化 和外源性老化。内源性老化是指山基因决定的随 着时间推移产生的自然老化。外源性老化是指环 境因素如紫外线辐射、吸烟、毒害化学品等影响 下产生的皮肤损害积累，其中紫外线辐射是导致 外源性老化最主要的因素［1］。因此，外源性老化 又称为皮肤光老化。建立有效的皮肤光老化动物 模烈，是研究及防治人体皮肤光老化的基础。
Correspondence to: GUO Yan, E-mail: qhguoyan@
［Abstract］ Objective To establish a mouse model of skin photoaging induced by ultraviolet B (UVB) radiation, and to provide a reference for the study of skin photoaging. Methods Thirty male KM mice were divided into a control group and a model group. The control group received normal light, while the model group was subcutaneously injected with D-galactose combined with narrow-band UVB daily irradiation for 40 min at a dose of 120 mJ/cm2 for 40 d. The skin appearance of mice with fur on the back being removed was observed. Skin tissue pathology was observed after HE staining and Masson staining. Biochemical indexes of skin tissue homogenate including glutathione peroxidase (GSH-PX), superoxide dismutase (SOD), hydroxyproline (HYP), and malondialdehyde (MDA) were measured by enzymatic analysis. The expressions of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), c-fos, and c-jun were determined by Western blotting. Results The skin of the model group was darker, looser, drier, more rough, and deeper than that of the control group. Pathological observation revealed that the epidermis thickened and the dermis fibers were reduced, broken, and disorderly arranged in the model group. In the model group, the activities of GSH-PX and SOD decreased, the content of MDA increased, the content of HYP decreased, and the expression levels of MMP-1, c-fos and c-jun of the model group increased (all P<0.01). Conclusion The skin damage of mice induced by subcutaneous injection of D-galactose combined with UVB irradiation is consistent with photoaging, so it is an effective mouse model of skin photoaging. ［Key words］ Skin photoaging; Animal model; Ultraviolet radiation B; D-galactose; Mice
建立快速光老化动物模型新方法
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，
（ １ ， Ｔ ｈ ｅ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆＤ ｅ ｒ ｍ ａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｉ ｎ Ｔ ｈ ｅ Ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆ ｏ Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｐ ｒ ￣ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｋ ｕ ｎ ｍｉ ｎ ｇ ６ ５ ０ ０ ２ １ ； ２ ，Ｔ ｈ ｅ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｆ ｏ Ｏ ｒ ａ ｌ Ｒ ｅ ｈ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ Ｔ ｈ ｅ Ｄ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ，Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｋ ｕ ｎ ｍ ｉ ｎ ｇ ６ ５ ０ １ ０ １ ； ３， Ｋ ｕ ｎ ｍｉ ｎ ｇ Ａ ｎ ｉ ｍ ａ ｌ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆｔ ｏ ｈ ｅ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ａ ｃ ａ ｄ ｅ ｍ ｙ ，Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｋ ｕ ｎ —
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皮肤光老化动物模型具体步骤及详细说明
•原型物种人
•来源UVA，UVB紫外导致皮肤老化
•模式动物品系SPF级ICR小鼠，健康，雄性，6~8W。
•实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
•实验周期4-6 weeks
•建模方法雄性ICR小鼠，年龄约6周。
小鼠在正常温度下（23±2℃）湿度（55%±10%）和光照（12小时光照/ 12小时黑暗，无紫外线照射）喂养。
喂养一周，等小鼠适应了环境，用8%硫化钠在小鼠的背部剃出超过2厘米x3厘米的脱毛区。
紫外照射方法：2根UVB灯管和4根UVA灯管（40W，北京电光源研究所）并列穿插安放至自制福照箱中作为紫外福照光源。
利用紫外照度仪（UV-B紫外辐照计、UV-A紫外辐照计北京师范大学光电仪器厂）测定UVA和UVB的辐射强度。
造模前，UV灯管预热10
min，待光源稳定后将实验鼠放入自制的鼠笼内（使小鼠间不能相互攀爬、站立），并放入箱照箱内，鼠笼与UV灯管相距30 cm，根据预试所得最小红斑剂量（MED）及光源强度调节福照时间，照射期间用排气
扇降低箱体温度。
第1周按1个MED的剂量进行照射，每周照射3次，往后每周照射剂量比前周递增1个MED，直至第4周4个MED为止，之后保持4个MED直至第8周实验结束。
模型组小鼠背部皮肤出现明显增厚、皱纹粗深、松弛等光老化皮肤表征，说明小鼠皮肤光老化造模成功。
MED测定方法：对预实验小鼠分别采用30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2、180mJ/cm2的紫外福照剂量对其背部皮肤进行辐照，照射后24h观察小鼠背部皮肤出现肉眼可见红斑所需剂量为最小红斑剂量(MED)。
•应用n/a
•
• 1.最小红斑剂量（MED）剂量的确定：选用2根UVB灯管和4根UVA 灯管，造模前，UV灯管预热10 min，鼠笼与UV灯管相距30 cm（此时辐照仪测的 UVA 的总辐照量是3.25 uW/cm2 左右；UVB 的总辐照量是0.134 uW/cm2 左右；这个值略有波动）。
选8只ICR小鼠，用剃毛器将小鼠背部的毛剃掉，再使用8%硫化钠将残留的毛发脱干净，然后设置4个不同辐照的时间点：分别照射10分钟、15分钟、20分钟、30分钟，每个时间点2只小鼠，到辐照时间点，取出小鼠，正常饲养，第2日观察小鼠背部的红斑情况。
辐照10
分钟和15分钟的小鼠，无明显红斑；辐照20分钟的小鼠能看到轻微的红斑，辐照30分钟的小鼠，红斑很明显。
此处选用辐照20分钟，作为预试所得最小红斑剂量（MED）
1个MED=（3.25 uW/cm2+0.134 uW/cm2）*20分钟*60=4
mJ/cm2
2.全鼠背部拍照
于第4周以及第8周取样前，拍摄全鼠背部照片，以确定是否出现光老化特征（皱纹粗深、松弛等）。
3. 免疫指标：脾脏和胸腺指标的测定
小鼠称重并执行颈椎脱位，并立即从小鼠中取出脾脏和胸腺，立即称重。
胸腺和脾脏指数根据下述方程
计算：胸腺或脾脏指数（mg/g）＝胸腺或脾脏重量/体重。
指数（TI）和脾指数（SI）可作为免疫指标。
•
•
组织学分析
在最终紫外照射后的24h内取皮肤标本进行组织化学研究。
小鼠皮肤样
品在4%缓冲中性福尔马林溶液中固定24h，并嵌入石蜡中，连续切
片。
抗氧化指标
1. 皮肤抗氧化指标分析
取小鼠背部皮肤组织（约2厘米×3厘米，平均分为8块，一块加福尔马林固定，用于病理检测；一块加RNA later保存，-80度保存，用于测序；剩余的6块，每2块放在一个管子里面，-80度保存）。
2. 血清中抗氧化活性
实验结束时，小鼠禁食12小时，但允许自由进入水。
血液从眼球中收集到离心管中。
在离心后（7000 g，4℃,15分钟）从血液样品中获得血清，然后冷冻并储存在20℃直到分析
应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显。