菊花组织培养(公开课)
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课件3：3.1菊花的组织培养
6、下列关于植物组织培养中灭菌操作，错误的是 (B) A．外植体可以用酒精灭菌 B．镊子等器械需酒精灭菌 C．操作前手需酒精消毒 D．培养基需高压蒸汽灭菌
谢谢观看！
成熟组织细胞。
(3)差异：一般细胞分化程度越高，全能性越小； 细胞分化程度越低，细胞全能性越高，如受精卵> 卵细胞>体细胞。 (4)表现全能性的条件： ①离体条件； ②无菌操作(防止杂菌污染)；
③适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细 胞分裂素等)； ④种类齐全、比例适合的营养物质； ⑤温度、酸碱度、光照等条件的控制。
(2)有机营养 ①氨基酸：如甘氨酸、丝氨酸及酪蛋白水解的氨基 酸，作为主要有机氮源。 ②维生素类：常用维生素C、维生素B1、维生素B6、 维生素H等，作为早期的生长因子。 ③琼脂除固化培养物外，还有吸附能力。
(3)植物生长调节物质 植物生长调节物质起关键作用的是生长素、细胞 分裂素；二者的比例与使用先后顺序均影响细胞 的分裂和分化。 (4)pH、温度、光照 不同的植物对各种条件的要求往往不同。菊花的 细胞培养适宜条件：pH在5.8左右，温度控制在 18～22℃，每日用日光灯照射12h。
2．实验操作中的注意事项 (1)防止外植体带菌。 ①选择好外植体采集时期和采集部位。外植体采集 以春秋为宜，优先选择地上部分作为移植体，阴雨 天勿采，晴天下午采，采前喷杀虫剂、杀菌剂或套 塑料袋。 ②在室内或无菌条件下进行预培养。 ③外植体严格消毒。做消毒效果实验，多次消毒和 交替消毒。
(2)保证培养基及接种器具彻底灭菌。 ①分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口。 ②检查封口膜是否有破损。 ③扎瓶口要位置适当、松紧适宜。 ④保证灭菌时间和高压锅内温度。 ⑤接种工具用前彻底灭菌。 ⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。
菊花的组织培养教案(优质课)
《菊花的组织培养》教案
武汉市第二中学李玲
课题目标
1、掌握植物组织培养的基本过程
2、了解影响植物组织培养的各种因素
3、掌握培养基制备、外植体消毒、接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术
二、教学重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术
三、教学难点：无菌技术
四、教学方法：自学法，引导，讨论，幻灯直观教学
五、教具准备：课件、相关实验器材等。
六、教学时间：1课时
七、教学过程：
八、板书设计
课题1 菊花的组织培养
一、基本过程
二、影响因素
1.选材：种类、部位、年龄、保存时间
2.营养
3.植物激素
4.PH、温度、光
5.无菌技术
三、实验操作：
制备培养基选取外植体并消毒接种培养移栽和栽培四、结果分析与评价。
菊花的组织培养(市公开课)
③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分
思考：你打算做几组重复？打算设置对照实验 吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养
课题1 菊花的组织培养
学习目标
掌握植物组织培养相关理论知识。 熟悉植物组织培养的基本过程。 理解细胞分化概念及脱分化，再分化。
课题重点与难点
课题重点细胞分化，脱分化，再分化。
活动一：
1.什么是细胞分化？原因和结果？ 2.什么是脱分化、再分化？ 3.愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 4.组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
分化频率高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响
基础知识----相关概念
1.细胞分化：
概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过程
原因：基因在特定的时间和空间条件下的 选择性表达的结果
结果： 形成各种组织器官
2.脱分化：
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织 的过程，又叫去分化。
3.再分化：
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可 以重新分化成根或芽等器官。
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成， 每次使用器械后，都需要用 火焰灼烧灭菌，接种后立即 盖好瓶盖。
思考：你打算做几组重复？打算设置对照实验 吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养
课题1 菊花的组织培养
学习目标
掌握植物组织培养相关理论知识。 熟悉植物组织培养的基本过程。 理解细胞分化概念及脱分化，再分化。
课题重点与难点
课题重点细胞分化，脱分化，再分化。
活动一：
1.什么是细胞分化？原因和结果？ 2.什么是脱分化、再分化？ 3.愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 4.组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
分化频率高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响
基础知识----相关概念
1.细胞分化：
概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过程
原因：基因在特定的时间和空间条件下的 选择性表达的结果
结果： 形成各种组织器官
2.脱分化：
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织 的过程，又叫去分化。
3.再分化：
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可 以重新分化成根或芽等器官。
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成， 每次使用器械后，都需要用 火焰灼烧灭菌，接种后立即 盖好瓶盖。
菊花组织培养(公开课)
随着生物技术的不断进步，菊花组织培养技术有望在未来实现更加高效、环保的应用。例 如，通过基因编辑技术改良菊花品种，提高其抗逆性和观赏价值。
应用拓展
除了传统的快速繁殖和种质保存，菊花组织培养技术还可应用于花卉的工厂化生产、盆栽 市场等领域。通过组织培养技术，可以生产出高品质、高附加值的盆栽菊花，满足消费者 对花卉品质和多样性的需求。
组织培养技术的应用领域
植物繁殖
品种改良
通过组织培养技术快速繁殖珍稀、濒危植 物和花卉，提高植物的繁殖系数和品质。
利用组织培养技术进行基因编辑和转基因 技术，培育抗逆、抗病、优质、高产的农 作物新品种。
细胞培养
生物反应器
通过组织培养技术将植物细胞在培养基上 培养成细胞团或细胞悬浮液，生产次生代 谢产物和细胞生长调节剂等。
将形成的愈伤组织转移到新鲜 的培养基上，使其不断增殖。
植株再生
将增殖的愈伤组织分化成完整 的植株，经过移栽和养护，最 终获得大量健康的菊花苗。
03
菊花组织培养的实验操作
实验材料的选择与准备
选择健康、无病虫害 的菊花植株作为实验 材料。
对实验材料进行消毒 处理，以减少污染风 险。
准备实验所需的培养 基、容器、试剂、工 具等。
利用组织培养技术构建生物反应器，模拟 植物生长环境，进行大规模的植物细胞培 养和生产。
02
菊花组织培养技术
菊花的生物学特性
菊花的形态特征
菊花属于多年生草本植物，具有 根、茎、叶、花等器官，花色丰 富，有黄、白、粉、红等多种颜
色。
菊花的生长习性
菊花适应性强，喜温暖、湿润的环 境，耐寒、耐旱，对土壤要求不严 格，但以肥沃、排水良好的土壤为 佳。
菊花的繁殖方式
应用拓展
除了传统的快速繁殖和种质保存，菊花组织培养技术还可应用于花卉的工厂化生产、盆栽 市场等领域。通过组织培养技术，可以生产出高品质、高附加值的盆栽菊花，满足消费者 对花卉品质和多样性的需求。
组织培养技术的应用领域
植物繁殖
品种改良
通过组织培养技术快速繁殖珍稀、濒危植 物和花卉，提高植物的繁殖系数和品质。
利用组织培养技术进行基因编辑和转基因 技术，培育抗逆、抗病、优质、高产的农 作物新品种。
细胞培养
生物反应器
通过组织培养技术将植物细胞在培养基上 培养成细胞团或细胞悬浮液，生产次生代 谢产物和细胞生长调节剂等。
将形成的愈伤组织转移到新鲜 的培养基上，使其不断增殖。
植株再生
将增殖的愈伤组织分化成完整 的植株，经过移栽和养护，最 终获得大量健康的菊花苗。
03
菊花组织培养的实验操作
实验材料的选择与准备
选择健康、无病虫害 的菊花植株作为实验 材料。
对实验材料进行消毒 处理，以减少污染风 险。
准备实验所需的培养 基、容器、试剂、工 具等。
利用组织培养技术构建生物反应器，模拟 植物生长环境，进行大规模的植物细胞培 养和生产。
02
菊花组织培养技术
菊花的生物学特性
菊花的形态特征
菊花属于多年生草本植物，具有 根、茎、叶、花等器官，花色丰 富，有黄、白、粉、红等多种颜
色。
菊花的生长习性
菊花适应性强，喜温暖、湿润的环 境，耐寒、耐旱，对土壤要求不严 格，但以肥沃、排水良好的土壤为 佳。
菊花的繁殖方式
讲课—菊花组织培养(公开课)课件
通过提供适宜的生长条件，植物细胞 可以脱分化形成愈伤组织，再经过再 分化形成根、茎、叶等器官，最终形 成完整的植株。
组织培养应用领域
植物繁殖
通过组织培养技术可以快速繁 殖优质品种，提高繁殖系数，
缩短育种周期。
细胞培养
对植物细胞进行培养，可用于 研究细胞生长、代谢、次生代 谢产物合成等方面的机制。
基因工程
讲课—菊花组织培养(公开课)课件
目录 CONTENTS
• 课程介绍 • 菊花组织培养基础知识 • 菊花组织培养技术流程 • 实验操作与演示 • 问题与解答
01
课程介绍
课程目标
掌握菊花组织培养的 基本原理和技术。
培养学生的实验操作 能力和科学探究精神 。
了解组织培养在菊花 繁殖和品种改良中的 应用。
培养基中的成分对菊花组织培养至关重要。适宜的营养 成分和激素水平能够促进细胞分裂和生长，诱导愈伤组织 和器官形成。同时，还需注意调节pH值，确保培养基的 适宜酸碱度。
学生提问
如何处理和解决培养过程中出现的污染问题？
回答
若发现培养物出现污染，需立即取出并丢弃，避免污染 扩大。同时，需对污染原因进行分析，并采取相应措施， 如加强消毒、检查操作过程等，以预防类似问题再次发生 。
通过组织培养技术可以将外源 基因导入植物细胞，实现基因 的转移和表达，为植物改良提 供新的手段。
药用植物生产
利用组织培养技术可以生产珍 稀、濒危药用植物资源，满足
市场需求，保护生态环境。
03
菊花组织培养技术流程
材料准备
选取健康、无病虫害的菊花植株 。
准备无菌操作台、酒精、棉球、 镊子等实验器材。
课程内容
组织培养的基本概念和原 理。
组织培养应用领域
植物繁殖
通过组织培养技术可以快速繁 殖优质品种，提高繁殖系数，
缩短育种周期。
细胞培养
对植物细胞进行培养，可用于 研究细胞生长、代谢、次生代 谢产物合成等方面的机制。
基因工程
讲课—菊花组织培养(公开课)课件
目录 CONTENTS
• 课程介绍 • 菊花组织培养基础知识 • 菊花组织培养技术流程 • 实验操作与演示 • 问题与解答
01
课程介绍
课程目标
掌握菊花组织培养的 基本原理和技术。
培养学生的实验操作 能力和科学探究精神 。
了解组织培养在菊花 繁殖和品种改良中的 应用。
培养基中的成分对菊花组织培养至关重要。适宜的营养 成分和激素水平能够促进细胞分裂和生长，诱导愈伤组织 和器官形成。同时，还需注意调节pH值，确保培养基的 适宜酸碱度。
学生提问
如何处理和解决培养过程中出现的污染问题？
回答
若发现培养物出现污染，需立即取出并丢弃，避免污染 扩大。同时，需对污染原因进行分析，并采取相应措施， 如加强消毒、检查操作过程等，以预防类似问题再次发生 。
通过组织培养技术可以将外源 基因导入植物细胞，实现基因 的转移和表达，为植物改良提 供新的手段。
药用植物生产
利用组织培养技术可以生产珍 稀、濒危药用植物资源，满足
市场需求，保护生态环境。
03
菊花组织培养技术流程
材料准备
选取健康、无病虫害的菊花植株 。
准备无菌操作台、酒精、棉球、 镊子等实验器材。
课程内容
组织培养的基本概念和原 理。
专题四菊花的组织培养PPT课件
细胞分裂素
不利分化
先使用细胞分裂素后使 细胞即分裂也分化 用生长素
同时使用
分化频率高
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③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响
生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化
生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑 制根的分化
生长素 ＝ 细胞分裂素： 促进愈伤组织生长
（4）除了上述因素外，PH、温度、光照等条件
也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往
不同。进行菊花的组织培养，一般将PH值控制
在5.8左右，温度控制在18-22℃，并且每日用
日光灯照射12h。
第24页/共69页
讨论：1、你能说出各种营养物质的作用吗？同 专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的 配方有哪些明显的不同？
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的 无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗 透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离 体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产 生的特殊营养需求。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的
培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无
机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量
②植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的 比例等，会影响实验结果。
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分 化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下， 细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。按照不同的顺序 使用这两类激素，会得到不同的实验结果。
使用顺序
实验结果
先使用生长素，后使用 有利于细胞分裂，但
第39页/共69页
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第41页/共69页
第42页/共69页
课题菊花的组织培养
是
。
答案：（1） aB Ab （2）纤维素酶 （3）聚乙二醇 （4）愈伤组织 （5）2 甲、乙两烟草品种旳花粉 48 AaBb 7/16
专题知识归纳
菊花旳组织培养
植物组 织培养
月季旳花药培养
概念：
原理：细胞旳全 基础：
能性
条 件 ： 脱分化
再分化
植物组织培养旳基本过 外植体
愈伤组织
胚状体
程：
外植体旳选择
• 2.你能说出MS培养基中多种营养物质旳作用吗？ 同专题2中微生物培养基旳配方相比，MS培养基 旳配方有哪些明显旳不同？
提醒：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所 必需旳无机盐；蔗糖提供碳源，同步能够维持细 胞旳渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生旳特殊营养需求。微生物培养基以有机 营养为主。与微生物旳培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物涉及植物生长 必须旳大量元素和微量元素两大类。
• 取甲乙两品种旳花粉分别培养成植株，将它们旳叶肉细胞制成原 生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放 到不小于800勒克斯光照下培养，成果有旳细胞团不能分化，有 旳能分化发育成植株。请回答下列问题：
• （1）甲、乙两烟草品种旳花粉旳基因型分别为 和 。
• （2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。
• 3．基因型为AaBb旳水稻（24条染色体）旳花药经过无菌操作， 接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。
• （1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成旳不规则旳细胞团，
愈伤组织形成中，必须从培养基中取得
和小分子有机
物等营养物质。
• （2）要增进花粉细胞分裂生长，培养基中应有
高中生物人教版菊花的组织培养实践教案
高中生物人教版菊花的组织培养实践教案实践目标：通过菊花的组织培养实践活动，使学生了解植物组织培养的原理和技术，培养学生的动手操作能力和科学实践能力。
实践材料：1. 菊花茎段（长约5cm）：准备新鲜的菊花，选取健康的茎段。
2. 培养基：包括基本培养基和生长调节物质（植物激素）。
实践步骤：1. 杀菌处理：将菊花茎段在酒精灯上迅速烧灼杀菌，避免外部细菌的污染。
2. 剪切茎段：用镊子将菊花茎段切割成约5cm长度，确保每段都包含着新鲜的芽眼。
3. 培养基配置：将基本培养基和生长调节物质按照一定比例配置，并在烧杯中加热溶解均匀。
4. 培养瓶准备：用95%的乙醇将培养瓶彻底清洗消毒，然后加入准备好的培养基，约2/3满。
5. 茎段培养：将准备好的菊花茎段插入培养瓶中，注意不要碰触到瓶壁。
6. 封口处理：在培养瓶口用无菌棉塞或锡纸封口，防止细菌侵入。
7. 光照条件：将培养瓶置于适宜的光照条件下，如灯箱或温室。
8. 观察和记录：每隔一段时间，观察菊花茎段切口处是否有白色的组织生长，并记录观察结果。
实践要点：1. 培养基的配置和消毒要保持无菌操作，避免细菌或其他微生物的干扰。
2. 茎段切割要迅速进行，避免切口过长时间的接触空气导致污染。
3. 培养瓶的封口要严密，避免外部细菌的侵入。
4. 光照条件要与植物生长习惯相匹配，提供适宜的光照强度和周期。
实践检测：通过观察和记录菊花茎段切口处的组织生长情况，学生可以获取实践结果。
1. 成功情况：在一定时间内，菊花茎段切口处出现白色的组织生长，说明组织培养成功。
2. 失败情况：菊花茎段切口处没有组织生长，可能是培养基的配比不合适，或操作过程中出现了污染等问题。
实践拓展：1. 不同植物的组织培养：学生可以选择不同的植物茎段进行组织培养实验，比较它们的组织培养效果。
2. 组织培养的应用：介绍植物组织培养在农业、园艺和医药领域的应用，引导学生思考植物组织培养的实际意义。
实践总结：通过本次菊花的组织培养实践活动，学生了解了植物组织培养的原理和技术，并培养了他们的动手操作能力和科学实践能力。
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2、原因：
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全 套遗传物质（全套基因）
从理论上讲，生物体的任何一个细胞都具 有发育成 完整个体的潜能。但是在个体发 育中,细胞并不能表现出全能性,而是分化 成各种组织和器官。这是因为在特定时间 和空间条件下,细胞中的基因会有选择性的 转录翻译出各种不同的蛋白质,从而构成生 物体不同的组织和器官。
（三）、植物组织培养的应用：
（1）试管苗的快速繁殖 （2）无病毒植物的培育 （3）提取原料 （4）人工种子 （5）转基因植物的培育
(1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官、 组织或细胞产生愈伤组织的过程。
(已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行 离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重 新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构 和功能，成为具有未分化特性的细胞。)
(3).再分化：愈伤组织继续培养，重 新分化成根和芽等器官的过程。
（二） 植物组织培养的过程
离体的植物组 织或细胞（外 植体）
脱分化
愈伤组织
再分化
胚状体
（根，芽） 植物体
外植体:用于离体培养的植物 器官或组织片段
(2).愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞通 过脱分化形成的疏松而无规则的，高度液泡化 的呈无定形状态的,未分化的薄壁细胞
➢2-3周，愈伤组织开始形成。
3、不同植物激素使用顺序和使用量
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动 细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激 素。植物激素的浓度、使用的先后顺序 以及用量的比例等，都会影响实验结果
①按照不同的顺序使用这两类激 素，会得到不同的实验结果。
使用顺序
实验结果
先使用生长素，后 有利于细胞分裂， 使用细胞分裂素 但细胞不分化
生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有的全 套遗传物质（全套基因）
基因的选择性表达
14
10
个
200多种
3、细胞的全能性与细胞分化程度的关系：
(1)全能性高则分化程度低 全能性最高的是受
精卵，还没有分化，个体发育其实就是受精卵不断 分裂分化的过程，越往后细胞分化程度越高，体细 胞是高度分化的细胞也是全能性最低的细胞。
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
3、接种的无菌操作（酒精、酒精 灯——灼烧）
4、无菌箱中的培养；
5、移栽到消过毒的环境中生存一段 时间。
• 5、pH、温度、光照
• 菊花： pH=5.8 温度控制在18— 22℃ 每日光照12h
(2) 全能性的大小
受精卵>生殖细胞(卵细胞、 精子等）>体细胞 植物细胞>动物细胞(动物细胞核具全能性)
例1、下列有关细胞全能性的含义，正确的是：
A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全 部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体 的潜能 D、 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、 生长、衰老、死亡的全过程
➢3-5周之后，诱导出的新叶片和芽。
• (4).胚状体：具有胚根和胚芽的结构
• 胚状体包裹着人工胚乳和人工种皮可以制 成人工种子。
2、影响植物组织培养的因素 内 因 ：植物种类，同一种植物材料的年龄、保
存时间的长短 ，
外因
营养：矿质元素：大量元素，微量元素 有机物 ：蔗糖、氨基酸等
植物激素：细胞分裂素，生长素
环境条件：适宜光照、温度、 PH
1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同
2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素等 凝固剂：琼脂
思考
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些 明显的不同？
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物 包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
2、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物 组织培养过程中还需要提供有机物培养基？
此时的组织或细胞为离体的，细胞所生活的环 境为液体有机物营养环境，而不能体现其整个 植物体的光能自养。
正确答案： C
例2、在生物体内，细胞没有表现出全能性， 而是分化为不同的组织、器官，是因为：
A、细胞丧失了全能性 B、基因的表达有选择性 C、不同的细胞内基因不完全相同 D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生
了变化
正确答案： B
科学研究表明，处于离体状态的植物 活细胞，在一定的营养物质、激素和其他 外界条件的作用下，就可能表现出全能性， 发育成完整的植株。人工条件下实现的这 一过程，就是植物组织培养。
《菊花的组织培养》
植物的组织培养
一.植物组织培养的基本过程
组织培养： 是指在人工培养基上，离
体培养植物的器官、组织、细胞， 并使其生长、增殖、分化以及再 生植株的技术。
思考：
1、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性
（一）细胞的全能性
1、定义：
具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都 具有发育成完整个体的潜能
先 后使使用用生细胞长素分裂素，细胞既分裂又分化
同时使用
分化率提高
②当同时使用这两类激素时，两者用量的比 例影响植物细胞的发育方向。
生长素用量比细胞分 裂素用量
植物细胞的发
比值低时
有利于芽的分化、抑 制根的形成
比值适中时
促进愈伤组织的生长
生长素 / 细胞分裂素
4、消毒
在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境
植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要 的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的 生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微 小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们 比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素， 使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培 养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保 证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到 这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的 消毒、灭菌，并且要求无菌操作。
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全 套遗传物质（全套基因）
从理论上讲，生物体的任何一个细胞都具 有发育成 完整个体的潜能。但是在个体发 育中,细胞并不能表现出全能性,而是分化 成各种组织和器官。这是因为在特定时间 和空间条件下,细胞中的基因会有选择性的 转录翻译出各种不同的蛋白质,从而构成生 物体不同的组织和器官。
（三）、植物组织培养的应用：
（1）试管苗的快速繁殖 （2）无病毒植物的培育 （3）提取原料 （4）人工种子 （5）转基因植物的培育
(1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官、 组织或细胞产生愈伤组织的过程。
(已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行 离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重 新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构 和功能，成为具有未分化特性的细胞。)
(3).再分化：愈伤组织继续培养，重 新分化成根和芽等器官的过程。
（二） 植物组织培养的过程
离体的植物组 织或细胞（外 植体）
脱分化
愈伤组织
再分化
胚状体
（根，芽） 植物体
外植体:用于离体培养的植物 器官或组织片段
(2).愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞通 过脱分化形成的疏松而无规则的，高度液泡化 的呈无定形状态的,未分化的薄壁细胞
➢2-3周，愈伤组织开始形成。
3、不同植物激素使用顺序和使用量
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动 细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激 素。植物激素的浓度、使用的先后顺序 以及用量的比例等，都会影响实验结果
①按照不同的顺序使用这两类激 素，会得到不同的实验结果。
使用顺序
实验结果
先使用生长素，后 有利于细胞分裂， 使用细胞分裂素 但细胞不分化
生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有的全 套遗传物质（全套基因）
基因的选择性表达
14
10
个
200多种
3、细胞的全能性与细胞分化程度的关系：
(1)全能性高则分化程度低 全能性最高的是受
精卵，还没有分化，个体发育其实就是受精卵不断 分裂分化的过程，越往后细胞分化程度越高，体细 胞是高度分化的细胞也是全能性最低的细胞。
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
3、接种的无菌操作（酒精、酒精 灯——灼烧）
4、无菌箱中的培养；
5、移栽到消过毒的环境中生存一段 时间。
• 5、pH、温度、光照
• 菊花： pH=5.8 温度控制在18— 22℃ 每日光照12h
(2) 全能性的大小
受精卵>生殖细胞(卵细胞、 精子等）>体细胞 植物细胞>动物细胞(动物细胞核具全能性)
例1、下列有关细胞全能性的含义，正确的是：
A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全 部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体 的潜能 D、 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、 生长、衰老、死亡的全过程
➢3-5周之后，诱导出的新叶片和芽。
• (4).胚状体：具有胚根和胚芽的结构
• 胚状体包裹着人工胚乳和人工种皮可以制 成人工种子。
2、影响植物组织培养的因素 内 因 ：植物种类，同一种植物材料的年龄、保
存时间的长短 ，
外因
营养：矿质元素：大量元素，微量元素 有机物 ：蔗糖、氨基酸等
植物激素：细胞分裂素，生长素
环境条件：适宜光照、温度、 PH
1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同
2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素等 凝固剂：琼脂
思考
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些 明显的不同？
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物 包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
2、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物 组织培养过程中还需要提供有机物培养基？
此时的组织或细胞为离体的，细胞所生活的环 境为液体有机物营养环境，而不能体现其整个 植物体的光能自养。
正确答案： C
例2、在生物体内，细胞没有表现出全能性， 而是分化为不同的组织、器官，是因为：
A、细胞丧失了全能性 B、基因的表达有选择性 C、不同的细胞内基因不完全相同 D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生
了变化
正确答案： B
科学研究表明，处于离体状态的植物 活细胞，在一定的营养物质、激素和其他 外界条件的作用下，就可能表现出全能性， 发育成完整的植株。人工条件下实现的这 一过程，就是植物组织培养。
《菊花的组织培养》
植物的组织培养
一.植物组织培养的基本过程
组织培养： 是指在人工培养基上，离
体培养植物的器官、组织、细胞， 并使其生长、增殖、分化以及再 生植株的技术。
思考：
1、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性
（一）细胞的全能性
1、定义：
具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都 具有发育成完整个体的潜能
先 后使使用用生细胞长素分裂素，细胞既分裂又分化
同时使用
分化率提高
②当同时使用这两类激素时，两者用量的比 例影响植物细胞的发育方向。
生长素用量比细胞分 裂素用量
植物细胞的发
比值低时
有利于芽的分化、抑 制根的形成
比值适中时
促进愈伤组织的生长
生长素 / 细胞分裂素
4、消毒
在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境
植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要 的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的 生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微 小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们 比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素， 使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培 养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保 证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到 这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的 消毒、灭菌，并且要求无菌操作。