最新-2009第二学期基因工程原理课程考试试卷(a)参考答案
高二生物下学期第三章《基因工程》综合测试卷-人教版(含答案)
高二生物下学期第三章《基因工程》综合测试卷-人教版（含答案）一、选择题(本题共16小题，每小题3分，共48分。
每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的)1.下列有关基因工程的叙述，正确的是( )A.基因工程是细胞水平上的生物工程B.基因工程的产物对人类都是有益的C.基因工程育种的优点之一是目的性强D.基因工程产生的变异属于人工诱变2.下列有关E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶作用的叙述，正确的是( )A.T4 DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来B.E.coli DNA连接酶只能将双链DNA片段平末端之间进行连接C.T4 DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端，又可以“缝合”平末端D.E.coli DNA连接酶连接平末端的效率比较低3.下列过程中没有涉及碱基互补配对原则的是( )A.提取目的基因B.目的基因与载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的表达和检测4.下列关于PCR扩增DNA片段和电泳检测扩增产物实验的叙述，错误的是( )A.PCR过程需要耐高温的DNA聚合酶B.PCR过程需要DNA连接酶C.PCR扩增区域由2个引物来决定D.不同大小的DNA在电场中迁移速率不同5.下列实例不涉及基因工程的是( )A.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，以降低乳汁中乳糖的含量B.将正常的基因导入病人体内并使其表达，以达到治疗疾病的目的C.用航空飞船将种子载到太空中环游，以获得高产的植株D.将胰岛素基因导入动物的受精卵中，并在动物乳汁中获得胰岛素6.下列关于基因工程的成果及应用的说法，正确的是( )A.用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒B.利用基因工程菌只能生产药物C.基因工程使人们更容易培育出优良性状的动植物品种，获得很多过去难以得到的生物制品D.利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中7.合成自然界中不存在的蛋白质应首先设计( )A.基因的结构B.蛋白质的结构C.氨基酸序列D.mRNA的结构8.下列有关蛋白质工程的说法，正确的是( )A.必须从预期蛋白质的功能出发B.在分子水平上直接改造蛋白质C.可以不涉及转录和翻译过程D.不需要借助基因工程的相关技术9.下列叙述符合基因工程概念的是( )A.在细胞内直接将目的基因与宿主细胞的遗传物质进行重组，赋予生物新的遗传特性B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的大肠杆菌菌株C.用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上10.下列有关基因工程诞生的说法，不正确的是( )A.基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的B.工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能C.遗传密码的破译为基因的分离和合成提供了理论依据D.基因工程必须在同物种间进行11.下列属于PCR技术的条件的是( )①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦限制性内切核酸酶A.①②③⑤B.①②③⑥C.①②③⑤⑦D.①②④⑤⑦12.下列选项中不是表达载体必要的组成成分的是( )A.目的基因B.启动子C.终止子D.抗青霉素基因13.下列关于基因工程在农牧业上的应用，说法正确的是( )A.用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒B.基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培养体形巨大、品质优良的动物C.基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物D.噬菌体作为载体可以将重组 DNA 导入动物细胞获得转基因动物14.目前市场上最主要的胰岛素产品是第二代胰岛素，相比第一代的动物源胰岛素，第二代胰岛素采用基因工程技术生产，其结构与人体内自身的胰岛素结构一致，最为安全有效。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是( )。
A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别( )。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
A 3’5’DNA聚合酶B 5’3’DNA聚合酶C 5’3’DNA内切酶D 5’3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。
基因工程试题及答案
基因工程试题及答案【篇一：基因工程题库以及答案】因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是： (1)____________，(2)___________。
3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。
4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。
5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8．限制性内切核酸酶bsuri和haeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。
9．dna聚合酶i的klenow大片段是用_____________切割dna聚合酶i得到的分子量为76kda的大片段，具有两种酶活性：(1)____________； (2)________________的活性。
10．为了防止dna的自身环化，可用_____________去双链dna__________________。
11．egta是____________离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的t7 dna聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记dna的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
09基因工程-答案.docx
高考专题09基因工程（选修三）•不会的作上标记过后查书和资料。
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基因工程的原理、操作、应用1. 什么是基因工程？基因工程导致的生物变异属于哪种变异类型？昱因工程是指按照人们的愿望，进行严格的段计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生场以斯的直传特性，创童出更符■合人们需要的新的生杨类型和生扬产醃。
基因工程是衣DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组.技术。
基因工程导致的生杨变异属于基因重组。
2. 与其它基因重组相比，基因工程的最大优点是什么？能定向改造.生扬性状。
3. 基因工程诞生的理论基础有哪些？⑦美国科学家艾弗里等证朗DNA是生扬的遗传扬质。
②沃森和克里克提出DNA的玖螺淡结构。
③中心法则提出和遗传密码子的破译4. 基因操作的工具有哪些，分别在基因操作屮起什么作用？限制酶切封我体和目的基因；DNA连接酶------- 连接DNA片段；我体------ 运戟目的基因进入受体细胞O5. 限制酶一•般来自什么生物，主要特点是什么，其作用的键是什么键，作用结果是什么？来源：主要来自原核生扬。
特点：能够识别玖链DNA分子的芷种特定的核苜酸序列，并能将每一条链上特定部住的两个核苜酸之问的确酸二酯钦切开，体现了酶的专一性。
作用键：璘酸二酯键作用结果：DNA分子断裂形成黏性耒端或平末端。
6. 链状DNA和环状DNA上酶切位点种类和数量与酶切后DNA片段数之间有什么关系？Q）单酶切环状DNA分子：酶切片段数=卩艮制酶识别序列教线形DNA分子：酶切片段数=限制酶识别序列教+1②玖酶切环状DNA分子：酶切片段数=两种限制酶积别序列数之和线形DNA分子：酶切片段数=两种限制酶识别序列数之和+17. 什么是目的基因？目的基因一般是什么类型的基因？目的基因就是基因工程中彼操作的外源基因。
q的基因一般都是為码蛋自质的基因。
某大学《基因工程》课程考试试卷(含答案)
某大学《基因工程》课程考试试卷一、名词解释（共10小题，每小题1分，共10分）1、粘性末端2、基因工程3、质粒的不相容性4、基因组文库5、克隆(clone)6、电击转化法7、重组PCR8、限制性酶切图谱法9、质粒10、重组率的定义二、填空题（共10小题，每小题1分，共10分）1、在基因克隆中碱性磷酸单酯酶的主要用途有：A、在用P标记DNA 5′端之前；B、在DNA重组技术中，去除DNA片段的，可防止酶切后的载体的与。
2、载体的功能是运送高效转入；为外源基因提供能力或能力；为外源基因的或提供必要的条件。
三、简答题（共10小题，每小题4分，共40分）1、载体应具备的条件是什么？2、受体细胞应具备的条件？3、蓝白斑筛选原理是什么？4、PCR克隆目的基因的基本程序是什么？5、酵母菌表达外源基因的优势是什么？6、营养缺陷型的哺乳动物受体细胞的遗传标记是什么？7、λ-DNA作为载体的优点是什么？8、巴斯德毕赤酵母表达系统特征及优势是什么？9、融合蛋白表达质粒的构建原则是什么？10、分泌型目的蛋白表达系统的构建策略是什么？四、论述题（1-2每小题8分，3-4题每小题12分，共40分）1、论述PCR原理及引物设计的基本原则。
2、强化转录终止的必要性是什么？3、请论述λ-DNA载体的构建策略是什么。
4、请论述植物基因工程的共整合转化程序和二元整合转化程序及二元整合转化程序的特征。
某大学《基因工程》课程考试试卷答案一、名词解释（共10小题，每小题1分，共10分）1、粘性末端因酶切位点在两条DNA单链上不同（对称）酶切后形成的具有互补碱基的单链末端结构，酶切产生的两个粘性末端很容易通过互补碱基的配对而重新连接起来。
2、基因工程指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。
第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义：基因工程。
克隆：无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。
同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。
平末端：DNA片段的末端是平齐的。
《基因工程》习题及参考答案
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
【精品】第二章基因工程习题答案
基因工程课程习题选择题001基因工程操作的三大基本元件是【Ａ】I供体II受体III载体IV抗体V配体ＡI+II+IIIＢI+III+IVＣII+III+IVＤII+IV+VＥIII+IV+V002根据当今生命科学理论，基因工程的用途是【E】I分离纯化基因II大量生产生物分子III构建新型物种IV提高基因重组效率ＡI+II+IIIＢI+II+IVＣI+III+IVＤII+III+IVＥI+II+III+IV003根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是【A】Ａ基因诱变Ｂ分子克隆ＣDNA重组Ｄ遗传工程Ｅ基因无性繁殖004基因工程的单元操作顺序是【B】Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转Ｅ切，接，增，转，检005下列有关基因的叙述，错误的是【A】Ａ蛋白质是基因表达的唯一产物Ｂ基因是DNA链上具有编码功能的片段Ｃ基因也可以是RNAＤ基因突变不一定导致其表达产物改变结构Ｅ基因具有方向性006限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是【D】Ａ修复自身的遗传缺陷Ｂ促进自身的基因重组Ｃ强化自身的核酸代谢Ｄ提高自身的防御能力Ｅ补充自身的核苷酸消耗007天然PstI限制性内切酶的来源是【D】ＡBacillusamyloliquefaciensＢEscherichiacoliＣHaemophilusinfluenzaeＤProvidenciastuartiiＥStreptomyceslividans008T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是【D】Ａ2'-OH和5'-PＢ2'-OH和3'-PＣ3'-OH和2'-PＤ3'-OH和5'-PＥ5'-OH和3'-P009若载体DNA用M酶切开，则下列五种带有N酶粘性末端的外源DNA片段中，能直接与载体拼接的是【D】M NＡA/AGCTTT/TCGAAＢC/CATGGACATG/TＣCCC/GGGG/GGCCCＤG/GATCCA/GATCTＥGAGCT/CG/AGCTC010下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是【B】Ａ质粒是共价环状的双链DNA分子Ｂ天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列Ｃ质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA自主复制Ｄ松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增Ｅ质粒并非其宿主细胞生长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】Ａ穿梭质粒Ｂ表达质粒Ｃ探针质粒Ｄ整合质粒Ｅ多拷贝质粒012下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是【A】ＡCosmid>λ-DNA>PlasmidＢλ-DNA>Cosmid>PlasmidＣPlasmid>λ-DNA>CosmidＤCosmid>Plasmid>λ-DNAＥλ-DNA>Plasmid>Cosmid013目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是【C】Ａ质粒DNAＢ噬菌体DNAＣ病毒DNAＤ线粒体DNAＥ叶绿体DNA014若某质粒带有lacZ标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【D】Ａ半乳糖Ｂ葡萄糖Ｃ蔗糖Ｄ5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）Ｅ异丙基巯基-b-半乳糖苷（IPTG）015质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是【C】①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A①③⑤⑦B②④⑥C①③⑥⑦D②③⑥⑦016双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于【A】ＡDNA的聚合反应ＢDNA的连接反应ＣDNA的降解反应Ｄ特殊的DNA连接酶Ｅ聚合单体2'和5'位的脱氧017下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是【E】I限制性酶切IIPCR扩增III抗药性筛选ＡIＢI+IIＣI+IIIＤII+IIIＥI+II+III018鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【A】Ａ原核细菌Ｂ酵母菌Ｃ丝状真菌Ｄ植物Ｅ人类019cDNA第一链合成所需的引物是【D】ＡPolyAＢPolyCＣPolyGＤPolyTＥ发夹结构020TaqDNA聚合酶的发现使得PCR技术的广泛运用成为可能，这是因为【D】ＡTaqDNA聚合酶能有效地变性基因扩增产物ＢTaqDNA聚合酶催化的聚和反应不需要引物ＣTaqDNA聚合酶具有极强的聚和活性ＤTaqDNA聚合酶能使多轮扩增反应连续化ＥTaqDNA聚合酶能使扩增反应在DNA变性条件下进行021为了利用PCR技术扩增下列染色体DNA片段上的虚线部分，应选用的引物顺序是【D】ＡI+IIＢI+IIIＣI+IVＤII+IIIＥII+IV022构建基因文库一般使用的载体是【E】I质粒IIλ-DNAIIICosmidＡIＢIIＣIIIＤII+IIIＥI+II+III023强化基因转录的元件是【C】Ａ密码子Ｂ复制子Ｃ启动子Ｄ内含子Ｅ外显子024启动子的特征之一是【B】ＡGC富积区ＢTATABoxＣ转录起始位点Ｄ长度平均1kbＥ含有某些稀有碱基025下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】Ａ阻遏蛋白Ｂ启动子Ｃ操作子Ｄ终止子Ｅ增强子026包涵体是一种【E】Ａ受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒Ｂ大肠杆菌的亚细胞结构Ｃ噬菌体或病毒DNA的体外包装颗粒Ｄ用于转化动物细胞的脂质体Ｅ外源基因表达产物的混合物027外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【Ｅ】I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离ＡIIIＢI+IIＣI+IIIＤII+IIIＥI+II+III028第二代基因工程是指【C】Ａ途径工程Ｂ代谢工程Ｃ蛋白质工程ＤRNA基因工程Ｅ细胞器基因工程029基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【Ｃ】Ａ重组质粒渗透至细胞外Ｂ重组质粒被细胞内核酸酶降解Ｃ重组质粒在细胞分裂时不均匀分配Ｄ重组质粒杀死受体细胞Ｅ重组质粒刺激受体细胞提高其通透性030利用毛细管作用原理，将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术是【Ｄ】ＡWestern印迹转移技术ＢNorthern印迹转移技术Ｃ基因的表现型分析法ＤSouthern印迹转移技术031在翻译过程中．mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。
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2008─2009学年 第 2学期
《基因工程原理》课程考试试卷(A 卷)参考答案
专业: 生物技术
年级:2006 考试方式:闭卷 学分:4 考试时间:120分钟
一、名词解释(每小题2.5分，共15分)
1、 基因工程：是指在分子水平上进行的遗传操作，指将一种或多种生物提（供体）的基因
或基因组提取出来，或者人工合成基因，按照人们的愿望，进行严密的设计，经过体外加工重组，转移到另一种生物体（受体）的细胞内，使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。
2、 星活性：高浓度的酶、高浓度的甘油、低离子强度、极端pH 值等，会使一些核酸内切酶
的识别和切割序列发生低特异性，即Star activity 现象。
3、 插入型载体：只具有一个可供外源DNA 插入的克隆位点。
4、 反转录PCR ：在逆转录酶的作用下、以mRNA 为模板合成互补的cDNA ，再以cDNA 为
模板进行PCR 反应。
5、 感受态：受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl 等化学试剂法）的处理后，细
胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源DNA 的载体分子通过的感受态细胞。
6、 考斯质粒：考斯质粒是一类人工构建的含有l-DNA cos 序列和质粒复制子的特殊类型的载
体 二、填空题(每小题1分，共10分)
1、用酚—氯仿抽提DNA 时，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇，这是因为异戊醇可以 防止气泡 ；分离DNA 时要使用金属离子螯合剂，如EDTA 和柠檬酸钠等，其目的是 抑制了DNase 。
2、按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为 严谨型质粒 。
和 松弛型质粒 。
3、λ 噬菌体在感染大肠杆菌以后，可以进入 Lytic growth 也可以进入 Lysogenic state 。
如果其基因组 DNA 通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入 融源状态。
；它也可以选择进入 融菌状态 ，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。
4、ddNTP 与普通的 dNTP 的不同之处在于 ddNTP 2’和3’双脱氧 ，它们可以在 DNA 聚合酶的作用下，通过其 5’ 掺入到正在增长的 DNA 链中，导致链延伸反应终止。
5、Klenow DNA 聚合酶是 DNA 聚合酶Ⅰ 经蛋白酶裂解而从全酶中除去 5’—3’外切酶 活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。
三、选择题(每小题1.5分，共15分)
1、限制性内切核酸酶可以特异性地识别（ C ）。
A 、特定的三联密码；
B 、双链 DNA 的特定碱基对；
C 、双链 DNA 的特定碱基序列；
D 、单链 DNA 的特定碱基序列。
2、在切口平移方法标记 DNA 探针时只能使用（ B ）。
A 、Klenow 酶；
B 、DNA 聚合酶 Ⅰ；
C 、DNA 聚合酶 Ⅱ；
D 、DNA 聚合酶 Ⅲ。
3、在下列进行 DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好（ C ）。
A 、反应体积；
B 、酶反应温度；
C 、反应时间；
D 、酶量。
4、PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（ B ）。
A 、退火温度过低；
B 、退火温度过高；
C 、dNTP 浓度过高；
D 、循环次数过多。
5、以下不属于 PCR 的应用的为（ D ）。
A 、随机扩增多态性 DNA （RAPD ）；
B 、扩增片段长度多态性（AFLP ）；
C 、RACE ；
D 、S1 酶作图。
6、pUC18 与 pUC19 的区别在于（ B ）。
A 、二者的选择标记不同；
B 、二者的多克隆位点方向相反；
C 、pUC18 无 lacZ 基因；
D 、pUC19 无 lacZ 基因。
7、有关 DNA 序列自动化测定的不正确叙述是（ D ）。
A 、用荧光代替了同位素标记；
B 、激光扫描分析代替人工读序 基；
C 、本原理与手工测序相同；
D 、不再需要引物。
8、下列哪一项不是质粒载体必备的基本特征( D )。
A、可以独立复制；
B、有选择标记；
C、有多克隆位点；
D、含lacZ。
9、在分离DNA 过程造成DNA 分子断裂的因素很多，下列说法中哪一项是不正确的（C ）。
A、核酸酶的降解；
B、化学降解；
C、保存液中未加一滴氯仿；
D、物理剪切。
10、氨苄青霉素的工作原理为（A ）。
A、可以抑制细胞壁肽聚糖的合成；
B、可以与核糖体30S 亚基结合并抑制蛋白质合成；
C、可以抑制核糖体的转位；
D、可以与核糖50S 亚基结合并抑制蛋白质合成。
四、简答题(每小题5分，共25分)
标记的原理及基本步骤。
答：RAPD应用了PCR反应的原理，以不同的基因组DNA为模板，以单一的随机寡聚核苷酸（长度多为10个核苷酸）为引物而获得的一定扩增产物。
由于不同基因组DNA序列存在着差异，其不同区段上可与引物同源互补的位点不同，扩增产物的数量、大小也不同，因而表现出多态性。
1)基本步骤：
2)DNA的提取
3)模板DNA浓度和质量的检测
4)PCR扩增
5)电泳检测：PCR结束后每个样品加4ul凝胶上样缓冲液，每个泳道点样20ul。
6)将凝胶浸于1ug/ml的EB中30min~60min，用水清洗约10min，观察、拍照。
7)统计分析：记录条带清晰的RAPD条带，计算带纹相似率；计算带频率、群内遗传纯度；
计算DNA片段大小。
2、一个理想的载体应具备那些特点？
答：
a)较小的分子和较高的拷贝数；
b)多个单一的限制性内切酶位点；
c)两种以上的选择标记；
d)易导入宿主细胞并复制和表达。
3、试回答影响限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）切割效率的因素？
答：
1)DNA样品的纯度；
2)DNA甲基化程度；
3)反应条件；
4)酶的纯度；
5)酶切反应的温度和时间。
4、经典RACE 克隆的原理是什么？
答：
反向PCR；
瞄定PCR；
末端转移酶法。
5、
6、采用同聚物加尾的方法进行dscDNA 克隆，一般采用dC/dG 而不采用dA/dT ，简述其
原因？
答：
（1）
（2）dA/dT退火温度低；
（3）反转录用的dT引物。
五、问答题(每小题10分，共20分)
1、一个携带有氨苄青霉素和卡那霉素抗性基因的质粒仅在卡那霉素基因中有EcoRⅠ识别位点。
消化后与目的DNA连接后转化对两种抗生素都敏感的E. coli菌株，试问：
（1）利用什么方法筛选接受了质粒的宿主细胞和没有接受质粒的宿主细胞？
（2）如何区分接受了含有目的DNA的重组质粒和空质粒的克隆？
答：
（1）：用氨苄青霉素筛选，抗氨苄青霉素的为带有质粒的宿主细胞。
（2）：用卡那霉素筛选，不抗卡那霉素但抗苄青霉素的为含有目的DNA的重组质粒的宿主细胞。
2、已知拟南芥、水稻ADH、甘蓝型油菜、矮牵牛等物种的ADH基因序列，如何得到棉花的ADH基因（利用高保真酶），请谈谈它的基本步骤？
答
1)从Genbangk下载拟南芥、水稻ADH、甘蓝型油菜、矮牵牛等物种的ADH基因序列；
2)将各序列多重比对，设计保守区引物；
3)提取棉花RNA；
4)将RNA逆转录为cDNA；
5)PCR扩增；
6)胶回收、连接、转化、检测；
7)测序，得到保守区序列；
8)根据保守区序列设计RACE引物；9)RACE扩增，并测序；
10)得到全长基因序列。
六、综合题(15分)
当前，甲型H1N1流感疫情迅速从墨西哥和美国蔓延至包括中国在内的几十个国家，全球已报道病例达到44287人。
快速有效的诊断是有效的防治该疾病的重要措施之一，请根据基因工程的相关知识，设计一种高效、快速的检测H1N1的方法？
答：
1)从病人体内分离H1N1病毒；
2)测序；
3)设计特异引物；
4)在群体中鉴定引物特异型；
5)取疑似样本；
6)PCR扩增。
7)电泳。