岛津LC-20A工作原理
hplc(液相色谱)常识及疑难详解(附实际操作图解lc-20a)

1 液相色谱基础知识1.1 液相色谱名词术语Mobile phase:流动相,在色谱柱中存在着相对运动的两相,一相为固定相,一相为流动相。
流动相是指在色谱过程中载带样品(组分)向前移动的那一相。
Stationary phase:固定相,柱色谱或平板色谱中既起分离作用又不移动的那一相。
Gradient elution: 梯度洗脱,一个分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比, 使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
Detection wavelength:检测波长,retention time:保留时间,被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间Peak:峰Peak Base:峰基线,经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。
一般应平行于时间轴Peak Height:峰高,色谱峰顶点至峰底的距离。
Peak Width:峰宽,色谱峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点间的距离Peak Width at Half Height:半峰高宽Peak Area:峰面积Tailing Peak: 后沿较前沿平缓的不对称峰Leading Peak:前沿较后沿平缓的不对称峰Ghost Peak: 假峰,并非由试样所产生的峰Baseline Drift:基线漂移Baseline Noise:基线噪音Band Broadening:组分在色谱柱内移动过程中谱带宽度增加的现象. 1.2 流动相1.2.1 流动相类型正相液相色谱流动相:一般正相色谱固定相极性大于流动相极性,采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。
常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等),极性小的组分先出柱。
反相液相色谱流动相:一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。
L20-A岛津液相色谱技术参数

L20-A岛津液相色谱技术参数功能:用以检测蔬菜水果中氨基甲酸酯类农药残留技术参数:输液单元Prominence LC-20AD/20AT/20ABLC-20AD:输液方式:并联双柱塞柱塞容量:10ul最大排液压力:40MPa流量设定范围:0.0001mL/min-10.0000mL/min流量准确度:1%或0.5ul /min其中较大值以内(0.01mL/min-2mL/min)流量精密度:0.3以下(RSD:0.1%以下)LC-20AT输液方式:串联双柱塞柱塞容量:主泵头 47ul、副泵头23ul最大排液压力:40MPa流量设定范围:0.001mL/min-10.000mL/min流量准确度:2%或2uL/min其中较大值以内(0.01mL/min-5mL/min)流量精密度:0.3以下(RSD:0.1%以下)LC-20AB输液方式:并联双柱塞(2式)柱塞容量:10uL 最大排液压力:40MPa流量设定范围:0.0001mL/min-10.0000mL/min流量准确度:1%或0.5uL/min其中较大值以内(0.01mL/min-2mL/min) 流量精密度:0.3以下(RSD:0.1%以下)梯度系统 LC-20AB梯度方式:高压混合混合溶剂数:2液混合浓度准确度:0.5%以下LC-20AD/20AT高压GE规格梯度方式:高压混合混合溶剂数:2液或3液混合浓度准确度:0.5%以下(LC-20AD),1%以下(LC-20AT)LC-20AD/20AT低压GE规格梯度方式:低压混合混合溶剂数:最多4液混合浓度准确度:0.5%以下(LC-20AD),1%以下(LC-20AT)紫外可见检测器Prominence SPD-20A/20AV UV-VIS检测器Prominence SPD-M20A PDA检测器SPD-20A / SPD-20AV光源:SPD-20A D2灯、SPD-20AV D2灯、W灯二极管元件数:无波长范围:SPD-20A 190nm-700nm 、SPD-20AV 190nm-900nm谱带宽•缝隙宽:8nm波长准确度:1nm以下波长精密度:0.1nm以下噪声:±0.25×10-5AU(指定条件下)漂移:1×10-4AU/h(指定条件下)线性:2.5AU(ASTM规格)功能:190nm-370nm或371nm以上双波长检测,比例色谱图输出,波长扫描池:光路长:10mm,容量:12mL、耐压:12MPa SPD-M20A光源:D2灯、W灯二极管元件数:512波长范围:190nm-800nm谱带宽•缝隙宽:1.2nm(高分辨方式) 8nm(高灵敏度方式)波长准确度:1nm以下波长精密度:0.1nm以下噪声:±0.3×10-5AU(指定条件下)漂移:0.5×10-3AU/h(指定条件下)线性:2.0AU(ASTM规格)功能:等高线输出,光谱检索,最大输出池:光路长:10mm,容量:10mL,耐压:12MPa自动进样器Prominence SIL-20A/20AC进样方式:全量进样,进样量可变式进样量设定范围:0.1ul-100ul(标准),1ul -2.000mL(选购件)试样处理数:175(1mL试样瓶)105(1.5mL试样瓶)(SIL-20AC0)70(1.5mL试样瓶))50(4mL试样瓶)192(96-MTP 块(384-孔MTP 2块)在上述各规格外另可使用1.5mL试样瓶10个进样量准确度:1%以下进样量精密度:RSD:0.3%以下(10mL进样时指定条件下)交叉污染:0.005%以下(萘、洗必泰)反复进样次数:最大30/1试样针清洗:在进样前后任意设定试样冷却器: SIL-20A 无 SIL-20AC模块冷却加热方式,兼除潮功能4℃-4主要特点 LC-20AT液相色谱仪拥有●网络化─―为分析工作者提供完美解决方案●高性能─―轻松满足客户对仪器严格的要求●自动化─―高效率高可靠性赢得客户的信赖。
岛津LC-20A使用及维护

系统开始运行,检查各单元参数应与方法设定一致。等待系统平衡。一般情况下,由于流动相不同,交换平衡时间不定。可以观察Detecter检测器吸收变化,如果吸收值稳定不变,即认为接近平衡,可以调零等待,确认不变后,准备进样分析。
可以通过改变衰减⊕或⊕予览基线观察基线变化,待基线平稳,准备进样操作。
⊙Detecter检测器参数:Cell设定池温。Wavelength设定波长。
⊙Controller系统控制器参数:
⊙Data acquisition选中Acquisition Time□后,设置分析时间,等等
⊙LCTime Prog时间程序参数:编辑泵梯度洗脱程序,也可以控制柱箱,检测器,等等。
●点击Method∈Data Analysis Parameter编辑积分参数:
2、清洗结束后,停止系统运行,在LC SOLUTION工作站中,按Instrument on/off键即停止所有单元工作。
清洗流路系统要求:
⊙如果使用缓冲液,先用水更换缓冲液,清洗1小时,然后更换甲醇清洗40分钟,
⊙如果使用有机溶剂(水),直接更换甲醇清洗40分钟即可。
3、退出LC SOLUTION(可听到峰鸣一声),再完全退出。
2、根据待检样品的需要选用合适的色谱柱(柱进出口方向应与流动相流向一致)和定量环。
3、配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
5、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
注意:真空抽滤装置和超声波装置为液相色谱实验室必须的辅助设备。
三、开机和平衡系统
4.进样分析:
⊙单针进样分析:如图点击Single Start图标:
Shimadzu LC-20A液相色谱的使用

7. 迪马Platisil C18 ODS色谱柱 色谱柱
• pH范围1-11, 通用性强 • 适用于100%纯水溶液流动相 反相色谱:流动相极性大于固定相的极性称之为反相 色谱。 色谱柱最好保存在甲醇溶液中;乙腈保存时间长了, 就会出现类似堵的现象,最好用甲醇保存。 糖柱除外,糖柱保存于纯水中,温度为4℃。
• 2. 泵 LC-20AT(A) 或 (B)
Pump泵开关 Purge 排气开关 输液方式:串联双柱塞 最大排液压力:40MPa
• 3. 紫外检测器 SPD-20A 光源:SPD-20A D2灯 波长范围:SPD-20A 190nm700nm 波长准确度:1nm以下 波长精密度:0.1nm以下 噪声:±0.25×10-5AU 漂移:±0.5×10-4AU/h • 4. 示差折光检测器 RID-10A • 5. 柱温箱 AT-330 (可对色谱柱进行加热及保温) • 6. 进样器(20µL)
石油醚 色素
碳酸钙颗粒
玻璃柱
按两相状态:气相色谱法, 气固色谱法 ,气 按两相状态: 液色谱法 ,液相色谱法 ,液固色谱法 ,液液 色谱法。
按固定相的几何形式: 按固定相的几何形式:柱色谱法,纸色谱法, 薄层色谱法。
按分离原理: 按分离原理: 吸附色谱法,分配色谱法,离 子交换色谱法,尺寸排阻色谱法,亲和色谱法。
mV 检检检 A:214nm 100
400
mV 检检检 A:214nm
75
300
50
200
25
100
0 0.0 2.0 mV 1.0 检检检 A:214nm 175
150 125 100
0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
LC20AT岛津输液泵说明书

岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪:岛津LC-20AT型高效液相色谱仪二、功能和用途:1、功能:本仪器采用高压梯度通过高压输液泵分别独立精确控制流量、调整溶剂浓度比例,实现高效率、高精度混合;即配备了可提供全波长三维信息的二极管阵列检测器,全新的光路设计与有效的梯形狭缝池设计保证了高分辨率和高灵敏度;也配备了灵敏度更高、选择性更好的荧光检测器;还配备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。
2、用途:本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样;二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应;荧光检测器可以检测产生荧光的物质,对如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应;蒸发光散射检测器对碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
三、操作步骤:1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器,然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a、首先打开UPS,然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元(泵)、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A,CTO-20A柱温箱电源打开。
(HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角)b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度,按purge键进行自动脱气,一般设置为3分钟;然后按自动进样器软键盘的purge键,对自动进样器上的样品进行脱气,一般为25分钟。
c、双击Lc solution图标。
输入用户名Admin,点击OK。
单击系统配置的图标,出现系统配置的对话框。
单击自动配置,仪器自动将能找到的仪器配置,也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。
LC-20A 岛津高效液相色谱仪 说明书

9
LC-20A 硬件基本操作
一、岛津 LC-20A 系列介绍
1. LC-20A 泵分为三种,分别为 LC-20AD,LC-20AB,LC-20AT。
LC-20AD 并联双柱塞泵,柱塞容量 10ul,最大排液压力 40MPa,
流量范围 0.0001-10.0000ml/min。
LC-20AB 并联双柱塞泵(2 组),柱塞容量 10ul,最大排液压力 40MPa,
上海分公司
上海市淮海西路 570 号红坊E座 邮政编码: 200052 传 真: 021-22013600 分析中心: 021-22013645 维修电话: 021-22013601 22013608
成都办事处
成都市西御街 77 号国信大厦 6 层 F 座 邮政编码: 610015 传 真: 028-86198420 维修电话: 028-86198422,86198421
1. LC-20A 泵分为三种,分别为 LC-20AD,LC-20AB,LC-20AT。 ◆ 功能说明
泵的辅助功能及详细操作说明请参阅说明书。
流量值的设定
绿色: 电源打开时 红色: 出现错误时 橙色: 处在休眠时
压力上限
实际压力 泵运行时亮
执行程序时亮 基本功能及 辅助功能键
功能同 FUNC
删除键
压力下限
LC-20A 硬件基本操作
返回键
功能键:查看或修 改辅功功能,滚动
时间编程功能
删除键
在分析序 列表中添 加行
执行数字 上部所显 示的功能
光标键: 在 分析序列 表中移动 光标
减号键
激活时间程 序编辑
初始化屏幕, 清除键
开始进样 停止进样
清洗键(一 次)
岛津液相色谱仪LC-20A参数

1工作条件1.1 电源:220V,50Hz电源1.2 环境温度:5-35˚C1.3 环境湿度:<85%2主要技术指标2.1二元高压梯度泵*2.1.1传动机构:并联双柱塞往复泵,免维护润滑系统2.1.2 流量范围:0.0001ml/min~10.0000ml/min*2.1.3 流量精度:<0.06%RSD2.1.4 工作压力:最大耐压40Mpa(5795.9psi)2.1.5溶剂压缩性补偿:可自动, 连续进行2.1.6柱塞冲洗:在线密封垫清洗装置,可编程2.1.7梯度曲线:共20文件,合计400段,可作复杂的函数梯度,分析复杂样品2.1.8梯度组成范围:0.0-100.0%, 0.1%步进2.1.9梯度混合准确度:±0.5%, 不随反压变化2.1.10梯度组成精度:0.1%RSD2.2三路真空在线脱气机2.2.1工作原理:使用特氟隆AF膜的低容量脱气机,可大幅地缩短流动相置换,稳定化的等待时间。
脱气效率高。
*2.2.2 通路:3*2.2.3 内部容量:0.4ml2.3 自动进样器2.3.1进样方式:全量进样, 进样量可变式2.3.2进样量设定范围:0.1μL ~ 100μL2.3.3样品瓶数目:105个(1.5mL样品瓶)等可选2.3.4进样次数:每个样品瓶可重复进样1~99次2.3.5反复进样次数:最大30次/1个试样2.3.6进样精度:<0.2%RSD2.3.7进样量准确度:1%以下*2.3.8交叉污染:< 0.0025% (萘、洗必泰)*2.3.9进样速度:10秒完成10μL进样2.3.10进样针清洗:在进样前后任意设定/内外清洗功能/清洗液有在线自动脱气2.4二极管阵列检测器2.4.1 光源:氘灯和钨灯2.4.2波长范围:190~800nm*2.4.3二极管个数:512个2.4.4波长精度:±1nm*2.4.5基线噪音:±0.3⨯10-5AU*2.4.6基线漂移:0.25⨯10-3AU/h2.5 柱温箱*2.5.1容量:可放置6根4.6x 300mm的色谱和两个手动进样器、梯度混合器、柱切换阀等2.5.2温度控制范围:10︒C~85︒C2.5.3温度设定范围:4°C - 85°C(步距为1°C)*2.5.4控温方式:强制空气循环电子冷却加热方式2.5.5温度设定准确度:±0.5︒C2.5.6温度稳定性:±0.1︒C2.5.7安全措施:a.为防止过热,可设定使用最高温度保护b.内装温度保险丝;c.内装可燃溶剂漏夜传感器2.5.8控制方式:软件控制、面板控制2.6系统控制器2.6.1具有数据转换功能,可以起到将LCsolution工作站或网络客户计算机通过Ethernet与分析装置连接的接口作用;2.6.2具有内存缓冲2.6.3配有Web服务器功能, 可不使用专用软件直接通过互联网浏览器对仪器进行系统访问、进行系统控制、监视、装置的维护管理等2.7数据处理系统2.7.1软件结构:32位,支持鼠标右键功能,长文件名及拖放功能, WIN2000及XP界面2.7.2报告:可任意编制,也可选择模板,可自动生成E-mail 和PDF格式2.7.3向导:众多向导,图形界面,直观2.7.4系统适应性:标准配置系统适应性软件,方便客户计算柱效、理论塔板数、拖尾因子等验证必备指标1.LC-15C2.价格:27万人民币3.产地:苏州4.技术规格5.各个单元的主要技术指标。
岛津LC-20A(四元低压和二元高压)系统参数

岛津LC-20A(四元低压和二元高压)系统参数系统整体描述Shimadzu “Prominence” LC-20A二元系统是由LC-20T高性能送液泵、溶剂选择阀、SPD-20A双通道紫外检测器、5通道自动脱气机、高性能自动进样器、柱温箱、分析柱及Labsolution色谱工作站等组成。
泵单元描述高压二元双泵,可实现高精度梯度混合功能标配柱塞清洗单元传动机构:微体积双柱塞串联往复泵,免维护润滑系统流速范围:0.0001-10.0000ml/min(在不分流的情况下,为质谱检测器等高灵敏检测器提供稳定的流速)流速精确度:≤0.06%RSDor ≤0.02min SD,其中较大值流速准确度:± 1%工作压力:最大耐压40Mpa(约6000psi)溶剂压缩性补偿:可自动, 连续进行柱塞冲洗:在线密封垫清洗装置,可编程梯度曲线:共20文件,合计400段,可作复杂的函数梯度,分析复杂样品梯度组成范围: 0.0-100.0%, 0.1%步进梯度混合准确度:±0.5%, 不随反压变化梯度组成精度: 0.15%RSD压力范围:高压、低压时间程序:流量、压力、事件、LOOP(程序反复)、10文件、合计320段溶剂选择阀可自动切换溶剂传输种类,高精度电磁阀控制配合二元高精度系统实现四元梯度功能脱气机描述流路数目:5通道最大操作流速:每个流路20 mL/min 内部容量:每个流路170μl自动进样器描述进样方式: 全量进样, 进样量可变式温度设定: 4 至40°C进样量设定范围: 0.1 L ~ 100 L(标准值), 可以增加至2000ul样品瓶数目: 标准105位进样次数: 每个样品瓶可重复进样1~99次反复进样次数: 最大30次/1个试样进样精度: <0.2%RSD进样量准确度: 1%以下交叉污染: < 0.0035% (萘、洗必泰)进样速度: 10秒完成10mL进样进样针清洗: 在进样前后任意设定/内外清洗功能/清洗液有在线进样线性: >0.999使用pH范围: pH1 ~ pH14紫外检测器描述波长范围:190-700nm ,有双波长模式波长准确度:<1nm波长精密度:< 0.1nm波长校正:使用氘灯和低压汞灯特征线 (包括紫外区)波长重现性:±0.1nm噪音(AU):±0.25×10-5漂移:0.3×10-4AU/h柱温箱描述容量: 可放置6根4.6x 300mm的色谱和两个手动进样器、梯度混合器、柱切换阀等温度控制范围: (室温+10) C~85 C 温度设定范围: 4°C - 85°C(步距为1°C)控温方式:强制空气循环电子冷却加热方式定时程序: 线性温度程序温度设定准确度: ±0.5 C温度稳定性: ±0.1 C时间程序功能:温度设定变更,温度控制启动、停止。
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岛津SIL-20A自动进样器进样系统的介绍 老生常谈了,趁着这次大赛的结束我也来收收尾,现介绍这款岛津 SIL-20A自动进样器。因为经常用它但对它的结构还是有些模糊,趁 着这从学习的机会想同大家共同探讨下,还请大家多指教。自动进 样器的原理大体相同,只是不同品牌的机器间都有各自的特点吧, 谁好谁坏用者自有评断。
样品盘1共105个瓶位,样品盘0为10个瓶位一般很少用到这个样品盘, 在做进样位置校准时用到。
下面就介绍下它的进样功能:这款进样器的组成是由两个六通阀组成的 两个环路,内环和外环,它是通过切换两个六通阀进行流路转变来实现 进样功能的,Agilent的是一个六通阀加一个计量泵,有点差别。这里再 谈下对两款进样器的比较吧,个人比较倾向于岛津进样器虽然它显得笨 重点,它的进样速度、交叉污染性和进样控制能力都是亮点,毕竟工作 效率是重要的嘛。但是A的进样器有它独特之处,样品前处理功能很强, 程序设定能让你轻松搞定繁琐的预处理,熟练操作才能使A的进样器随心 所欲,这就对操作者要有一定的要求了。两者的精密度嘛,半斤八两都 很不错。
洗针只是清洗针外边部分。洗针后进样针座回归高压六通阀处进样,同时高压六通阀再次 向逆时针转动,切换流路至外环状态
进样后要清洗计量泵和管路:
低压阀逆时针旋转30度形成闭合回路,计量泵向前运动使注 射器回到原位。
•
此后低压阀再向顺时针旋转60度,计量泵向后运动来抽取管路中流动相和清 洗液。
当计量泵抽出后,管路中的流动相和清洗液已经再计量泵中, 此时只需将计量泵向前推出,排除废液即可。
•
洗针吸取样品洗针: 低压阀向顺时针旋转30度是为计量泵的下一步工作作铺垫(堵住计量泵的一端)。此时进样针座抬 起,进行抽取样品前的洗针(洗针功能可以自行设定在软件里)
• 洗针结束后,准备抽取样品
计量泵向后运动拉动注射器进行抽取,此时注意低压阀处的封闭状态是低压阀先 前顺时针旋转30度造成的闭合回路。计量泵抽取样品经高压阀流路至定量环处形 成单一抽取流路。 取样后再进行洗针。
1. 压力释放:
低压阀和高压阀分别向逆时针和顺指针方向旋转60度来改变内环和外环流路,这样来自泵 的流动相可以直接进入色谱柱通过六通阀。此时外环的处于停滞状态,注意此时的系统压 力,也就是在软件中能看的到的压力显示有略微的加大后又恢复正常。这时相当于我们熟 悉的手动进样器的Load的状态。
•
在完成了两个阀的转变后,外环流动得以释放出来,此时它与内环流路形成 环路(通俗点说就是在一条直线上了)这样为以后的吸取样品提供条件。
• 从外观上看这款岛津进样器显 得体积大、笨重,好像一点也 不合乎小日本的作风,但是进 样效果却是很不错的,进样速 度快没得说,依赖精密计量试 样的高性能计量泵,保证分析 重现性。交叉污染小0.005%全 封闭样品室设计完全避免光照 对样品的影响,带有除潮功能 的冷却器,对易分解样品也有 较好的稳定性。它的进样针座 安放在滑动机械杆上,可随瓶 位以十字坐标找点的方式进行 定位取样,以皮带传动作为动 力介质,采用精密的XYZ快速 进针驱动技术,这样以来它在 速度上有了优势要比A的那种手 臂式抓取样品快的多。它的缺 点是进样器振动过大,噪音也 大尤其是在刚开机器时很明显, 再有包括泵的purge都是通过自 动进样器来完成,每天开机时 需要进行全面的purge有点像 waters2695的模式,有些费时。
差
至此,完成了一次进样过程,再次 进入待机状态。
总结: 岛津的这种进样系统看似很繁琐,两个六通阀的运用大概是 较多的借助于气相多通阀的连用原理,它的灵活性多变,运 用自如,精密度较高,但多阀的运用也会增加它的设计成本。 还有它的交叉污染性很小清洗液一直处于更替阶段,在选择 清洗液时,一定要根据检测产品的种类而定,洗针液的质量 直接关系到进样精密度的问题,要注意更换和purge系统。 同时它的开机purge尽量要选定全流路排气,会减小系统误
待机状态:
与Agilent的比较:
待机状态,也就是在完成上一次进样后等待下 次进样时的状态,此时流动相走的是外环流路, 自泵来的流动相进高压阀 》定量环 》 针座 和针》 高压阀流向色谱柱。
压力释放是进样前的准备,当待机状态的流路时整个外环系统是有 压力的,此时低压阀和高压阀同时改变旁路,使外环流路停止流动等待进样 针下一次抽取样品