凝集反应PPT课件

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人民卫生出版社
第三节 抗球蛋白试验
• 抗球蛋白试验由Coombs于1945年建立,故又称为 Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的经典 方法。
• Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接结 合在红细胞表面抗原的不完全抗体,使红细胞凝 集。常用试验方法有直接抗球蛋白试验和间接抗 球蛋白试验。
一、载体
载体的种类
RBC 聚苯乙烯胶乳 离子交换树脂 活性炭 明胶颗粒
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载体的条件: 1.不溶于水,理化性质稳定且无化学和免疫学活性。 2.大小均匀,密度与介质相近。 3.能直接吸附和通过偶联剂牢固结合抗原抗体。
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二、方法类型
根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应的方 式不同,间接凝集反应可分为4类:
1.正向间接凝集试验 2.反向间接凝集试验 3.间接凝集抑制试验
4.协同凝集试验
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三、间接血凝试验
红细胞+抗原
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一、直接抗球蛋白试验
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• 直接抗球蛋白试验既可用玻片法定性测定,也 可用试管法作半定量分析。
• 常用于新生儿溶血症、自身免疫性溶血性贫血 和医源性溶血性疾病等的检测。
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二、间接抗球蛋白试验
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• 冷凝集试验可协助诊断肺炎支原体感染引起的肺炎, 可用于辅助诊断冷凝集素综合征、传染性单核细胞 增多症、疟疾、肝硬化、淋巴瘤及多发性骨髓瘤等。
• 冷凝集试验是传统的实验方法,但是其敏感度和特 异性不强。
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小结
方法类型
原理
临床用途
方法评价
抗原与抗体在玻片上直接反应 血型的鉴定、菌种诊 简便、快速,敏感度低,
抗原致敏 抗体 抗原致敏红
红细胞
细胞凝集
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四、胶乳凝集试验
胶乳凝集试验也是间接凝集反应,因所用的 载体颗粒为聚苯乙烯胶乳而得名。
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胶乳凝集抑制试验检测HCG: 标本中加入相应量的HCG抗体,抗体与尿中HCG结
合,再加入HCG胶乳抗原,本应凝集反应受到抑制,说 明尿中含HCG,妊娠反应阳性。
免疫学检验
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第十三章 凝集反应
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本章要点
1. 凝集反应概念、特点及类型。 2. 直接凝集反应原理、方法类型及临床应用。 3. 间接凝集反应原理、方法类型及临床应用。 4. 抗球蛋白试验原理、方法类型及临床应用。 5. 冷凝集试验的原理和临床应用。
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• 为半定量试验方法,在微生物学检验中常用已知菌 液与一系列稀释的受检血清混合,保温后观察每管 内抗原凝集程度,通常以产生明显凝集现象的最高 稀释倍数作为血清中抗体的效价,亦称为滴度。
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• 临床应用: 1.肥达试验Widal test 2.外斐氏试验Weil-
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一、概念
• 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后,在适 当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象。 • 颗粒性抗原还包括可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒 (O型人红细胞、绵羊红细胞、聚苯乙烯胶乳、炭粒等) 结合成的致敏颗粒。
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二、特点
1.抗原分子大,介质中成均匀的颗粒悬液。 2.抗原抗体复合物以抗原为主。 3.试验时稀释抗体。 4.效价报告抗体的稀释度。
玻片凝集试验
断或分型
多用于定性试验
抗原与系列倍比稀释的血清在 交叉配血、辅助诊断 操作简单,敏感度不高,
试管凝集试验 试管内反应
目录
1 概述
2 第一节 直接凝集反应
3 第二节 间接凝集反应
4 第三节 抗球蛋白试验
5 第四节 冷凝集试验
6 小结
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概述
• 早在1896年,Widal就利用伤寒病人的血清与伤寒杆 菌发生特异性凝集的现象,有效地诊断伤寒病。 • 至1903年,Landsteiner在特异性血凝现象的基础上 发现了人类ABO血型,并于1930年获得了诺贝尔医学 奖。
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三、主要技术类型
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第一节 直接凝集反应
• 细菌、红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参与下可 直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应 (direct agglutination)。 • 凝集反应中的抗原称为凝集原(agglutinogen), 抗体称为凝集素(agglutinin)。 • 常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。
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一、玻片凝集试验
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• 临床应用:
1.菌种鉴定 单、快速 2.敏感度低 3.定性检测
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二、试管凝集试验
• 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质 的作用下,出现肉眼可见的凝集现象。
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felix test 3.交叉配血试验
• 方法评价: 1.半定量试验 2.操作简便、快速 3.敏感度不高 4.可有假阳性
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第二节 间接凝集反应
将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面,然 后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下, 出现肉眼可见的凝集现象。
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• 此试验可用于检测母体Rh(D)抗体,以便及早发现和避免 新生儿溶血症的出现。
• 可用于对红细胞不相容输血所产生的血型抗体进行检测。 • 还可对某些细菌、立克次体感染后产生的不完全抗体进行
检测。
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第四节 冷凝集试验
• 冷凝集试验是用于检测血清中冷凝集素的方法。 • 冷凝集素(cold agglutinin)是冷反应型抗红 细胞抗体,具有较强的凝集红细胞的作用,属于 IgM型抗体,可存在于正常人血清中,但是正常人 血清抗红细胞抗原的lgM冷凝集素效价比较低。
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