血氨

血氨的检测及临床意义
血氨：体内各组织各种氨基酸分解代谢产生的氨以及由肠管吸收进来的氨进入血液，形成血氨。

血氨在酸性与碱性环境中其存在形式发生NH3与NH4+的转变。

血氨的来源：
①胃肠道产氨（尿素分解，食物蛋白分解）：肠道细菌有尿激酶，可将尿素分解产生氨；
②肾脏产氨（谷氨酰胺分解产氨）：血液中的谷氨酰胺流经肾脏时，可被肾小管上皮细胞中的谷氨酰胺酶分解成谷氨酸和氨，如果尿的pH值较高，氨易被重新吸收入血；
③骨骼肌，心肌代谢产氨：组织中的氨基酸经过联合脱氨作用脱氨或其他方式脱氨。

血氨的清除：
①肾脏排泄（最主要）；
②肝脏，大脑，肾脏，部分肌肉合成谷氨酰胺；
③鸟氨酸循环产生尿素；
④血氨过高时由肺部呼出。

血氨升高的因素：
1 摄入过多——高蛋白饮食；
2 产氨过多——上消化道出血；
3 便秘——肠道与氨接触过久；
4 感染——细菌的分解代谢旺盛，产氨过多；
5 PH升高——低钾碱中毒（放腹水，呕吐，腹泻，低血糖，利尿剂，继发醛固酮增多）；
6 抑制大脑呼吸，中枢缺氧。

血氨的临床意义：
1 最常见——关于肝性脑病的检测（肝硬化终末阶段肝昏迷，肝衰竭，肝脏的急性亚急性坏死）；
2 TPIS（门脉体分流术）并发证；
3 遗传代谢性疾病（鸟氨酸循环障碍：鸟氨酸氨基甲酰转换酶缺乏，氨基甲酰合成酶缺乏）；
4 TNP完全肠外营养疗法，REYE综合症等。

血氨的临床医学检验：
1、试验前质量前控制
抗凝——EDTA-Na2、EDTA-K2抗凝为主，也有用肝素钠抗凝，因为肝素是一种酸性黏多糖，属于一种阴离子多聚电解质，和阳离子有不同的亲和力，与氨有聚合作用，使血氨结果偏低。

采用肝素抗凝血样本测定血氨浓度，肝素浓度需控制在10～40 U/ml以内为宜；用去氨的抗凝管血氨浓度明显低于未去氨的抗凝管。

采血——采血至真空采血管负压为零。

红细胞氨浓度是血浆的2.8倍，故标本应禁止溶血，溶血可使红细胞内的氨进入血浆。

红细胞和血小板中的γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）、谷丙转氨酶（ALT），可引起血氨的浓度的自然增加。

据文献报导：在肝病时γ-GT和的ALT活性比正常人的增加很多，γ-GT是血氨测定引起标本氨浓度增加的一个主要因素。

为了降低血标本在放置中氨的增加，测定出标本中真实的氨含量，可在血标本中加入γ-GT抑制剂，如6-二氨基-5氧-L-己氨酸（6-diazo-5-oxo-L-norleucin）或硼砂加丝氨酸等。

送检——采集标本后应迅速送检立即检测,放置时间不得超出1h(30分钟内送检，冰水放置，不可冻存)。

随着标本放置时间的延长,血氨值会不断的升高。

温度升高变化更明显,差异有显著性，据文献报导：在0、20、37℃时，氨平均增加的比率分别是3.9±0.23、5.2±0.23、25.2±0.59umol/L/h，无论是放置冰箱还是室温,超过1h结果升高均具统计学意义；去氨的EDTA-K2抗凝管与普通EDTA-K2管相比,结果差异有显著性,前者血氨浓度明显低于后者。

低温离心5min，取血浆迅速测定，30min内检测完成。

2、分析方法：
①干化学法：线性及批内重复性良好，简便快速,试剂保存时间长,有利于临床的快速检测；干化学法测定血氨水平高于湿化学法。

②酶动力学法；酶法测定血氨,具有特异、简洁和快速的特点，其原理为NH3+α-酮戊二酸+β-NADPH+(H+) 谷氨酸脱氢酶谷氨酸+(β-NADP+)+H2O。

采用试间终止法，被氧化β-NADPH的在340nm的检测吸光度的变化与氨的量成正比。

酶动力法适用于半自动和全自动生化分析仪测定。

但在实际工作中发现，由于样品中的血氨含量甚微，影响测定因素较多，致使测定结果的重复性较差。

实验结果表明，测定血氨标本，用1mol/L NaOH 清洗仪器反应杯后测定与其他试验一起随机测定结果有较大的差别。

随机所测得的血氨结果血氨测定易受环境及其他返流干扰因素的影响，而使测定结果不准确和不稳定。

因此，血氨检测不可以和其他的试验同时测定，血氨标本在清洗仪器反应杯后测定，目的是将对血氨测定的影响因素降至最低，以保证血氨测定的准确性。

比清洗仪器反应杯后测得的结果普遍偏高，可能是反应杯被其他试验携带污染，导致结果偏高。

③离子交换树脂柱法：将这种离子交换树脂装在一支离子交换柱内。

当血液中的NH4被树脂离子交换吸附后，先用无氨水冲洗树脂柱，再用洗脱剂将柱上的NH3洗脱：NH4又进入到溶液中。

收集洗脱液用酚试剂比色测定氨，具有干扰因素较少，准确度高等优点，但其操作繁琐，在推广上也存在一定困难。

④氨气敏电极法：氨气敏电极为一复合电极，以pH玻璃电极为指示电极，银-氯化银电极为参比电极。

此电极对置于盛有0.1mol/L 氯化铵内充液的塑料套管中，管端部紧贴指示电极敏感膜处装有疏水半渗透薄膜，使内电解液与外部试液隔开半透膜，与pH 玻璃电极间有一层很薄的膜。

当水样中加入强碱溶液将pH 提高到11 以上，使铵盐转化为氨，生成的氨由于扩散作用通过半透膜(水和其他离子则不能通过)，使氯化铵电解质薄膜层内NH3+H2O=NH4++OH- 反应向右移动，引起氢氧根离子浓度改变，由pH 玻璃电极测得其变化，在恒定的离子强度下测得的电动势与水样中氨氮浓度的对数呈一定的线性关系，由此可从测得的电位值，确定样品中氨氮的含量。

氨气敏电极测定污水中的氨氮，操作简单，无须对样品进行预处理，省去了絮凝沉淀或过滤操作，节约了分析时间，适合于实验室大批量废水中氨氮含量的测定，尤其对于高浓度废水更具有优越性。

该法用血少、简便、快速结果较稳定、准确,但难以普及。

⑤扩散法：操作较繁锁，测定时间较长，容易失败，并需一特制的扩散装置。

3、分析仪器：
①强生公司Vitros950全自动干化学仪；
②希森美康干式生化分析系统FDC-100；
③上海雷磁仪器公司氨气敏电极PNH3-1；
④美国Van London-phoenix公司#NH3 1501 Ammonia electrode；
⑤日本京都AMMONIA-CHECKERII型血氨检测仪；
⑥东西仪（北京）科技有限公司血氨测定仪(便携式)；
⑦日本富士FUJI DRI-CHEMSLIDE NH3-WIⅡ型血氨检测仪；
除此以外，在生化仪上还可利用酶动力原理的试剂盒测定血氨。

我院开展血氨检测的意义及局限：
①意义：利于肝硬化终末阶段、肝衰竭、肝脏的急性亚急性坏死导致的肝昏迷、以及TPIS （门脉体分流术）并发症、遗传代谢性疾病（鸟氨酸循环障碍）、TNP完全肠外营养疗法、REYE综合症等疾病的鉴别、检测，更好的服务临床。

②局限：我院此类患者及标本极少，不利于分析质控的开展及结果的稳定性分析；分析前质量控制是血氨分析质量控制的重中之重，从抗凝管的选择到采血以及送检条件、时限均有严格的要求，需要临床的高度配合方能把握好血氨检测的质量关卡。