大豆糖蜜综合利用_贺凌云

合集下载

多级逆流固液提取技术提取大豆分离蛋白

多级逆流固液提取技术提取大豆分离蛋白

2011年4月 The Chinese Journal of Process Engineering Apr. 2011收稿日期:2010−12−13,修回日期:2011−03−09基金项目:国家水体污染控制与治理科技重大专项基金资助项目(编号2008ZX07207-003-3)作者简介:高建萍(1987−),女,山东省潍坊市人,硕士研究生,主要研究方向为蛋白质分离纯化;通讯联系人,张贵锋,E-mail: gfzhang@,王明林,E-mail: mlwang@.多级逆流固液提取技术提取大豆分离蛋白高建萍1,2, 刘 琳1, 张贵锋2, 王明林1, 黄永东2, 刘永东2, 苏志国2(1. 山东农业大学食品科学与工程学院,山东 泰安 271018;2. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京 100190)摘 要:采用液相色谱和生物质谱技术对豆粕中不同蛋白质在提取过程中的释放行为进行了研究,并将多级逆流固液提取技术用于大豆分离蛋白提取. 结果表明,豆粕中的2S 组分由于分子量低和高水溶性在提取过程中释放速率较快,提取2次总释放量超过80%, 3次提取7S 和11S 组分总释放量约为69%,提高固相和液相间7S 和11S 的浓度梯度或延长提取时间有助于7S 和11S 组分释放. 采用该提取技术可提高提取液中的总蛋白浓度,在相同蛋白质收率下可节水11%,同时较高的蛋白质浓度可增加酸沉过程中蛋白质收率.关键词:大豆分离蛋白;高效液相色谱−质谱联用技术;蛋白质识别;释放;多级逆流固液提取 中图分类号:X522 文献标识码:A 文章编号:1009−606X(2011)02−0312−061 前 言大豆分离蛋白(Soybean Protein Isolate, SPI)是从脱脂豆粕中提取的一种植物蛋白,总蛋白质含量超过90%,良好的保水性、乳化性、吸油性和凝胶性等使其广泛用作食品添加剂和食品原料[1]. 大豆中的蛋白质根据离心过程中的沉降系数可分为2S, 7S (Conglycinin), 11S (Glycinin)和15S 四种组分,所占比例约为9.4%, 34%, 42%, 4.6%[2,3]. 7S 组分中主要是7S 球蛋白(β-Conglycinin),是由α(70.6 kDa), α′(80.2 kDa), β(48.4 kDa)三种亚基组成的三聚体结构糖蛋白,分子量约为180 kDa ,等电点5.2∼6.2[1,4,5]. 11S 组分中主要是11S 球蛋白,是一种由6个亚基对组成的多聚亚基蛋白,分子量320∼380 kDa ,每个亚基对由1个酸性亚基和1个碱性亚基通过二硫键连接而成,等电点为4.6[6,7]. 7S 和11S 组分的含量是影响SPI 功能特性的关键因素.目前,我国普遍采用的SPI 提取工艺属碱溶酸沉工艺,即豆粕经pH 7.8 (NaOH 调节)的水溶液浸提后离心去除不溶物,提取液经酸沉处理后再进行离心以分离出凝乳,凝乳经水洗、中和后直接进行喷雾干燥,获得SPI 粉[8,9],提取液去除凝乳后获得的乳清水属高浓度有机废水. 豆粕中蛋白质的提取多采用传统的罐式提取,存在用水量大、7S 和11S 组分提取率低等缺陷. 提取1 t SPI 需用豆粕约2.4 t ,用水量超过29 t ,产生24 t 高浓度乳清废水(COD>20%);此外,低提取率导致豆渣中7S 和11S 残留量高,亚基解离导致SPI 性能降低. 因此,研究新型SPI 提取工艺以降低用水量并提高7S 和11S 组分收率具有重要的现实意义. 多级逆流固液提取 (Multi-stage countercurrent solid −liquid extraction)技术是固相物料和溶剂运动方向相反、连续定量加入固相物料和溶剂、导出残留物和提取液的连续分离技术[10,11]. 根据提取设备差异,多级逆流固液提取工艺可分为罐组式、连通器式、螺旋式及离心式等多种形式. 在多级逆流固液提取过程中不同部位的溶剂存在浓度梯度,增加了溶剂和固相物料间的浓度差异,从而加快了目标物释放速率并获得较高的提取液浓度[12]. 多级逆流固液提取技术由于溶剂用量少、提取时间短和生产效率高等优点[13],近年来在食品、中药、天然产物等领域中的应用日益增多.针对SPI 提取过程中存在的用水量大、7S 和11S 提取率低并导致高浓度有机废水产生量大等共性问题,本研究以蛋白质释放行为研究为基础,比较了不同条件下蛋白质的释放速率差异,研究了多级逆流固液提取技术用于提取大豆分离蛋白以降低用水量的可行性.2 材料与方法2.1 材料与试剂脱脂豆粕由大庆日月星公司提供,胰蛋白酶(序列纯)购自美国Promega 公司,三氟乙酸(TFA)和乙腈购自美国Fisher 公司,其他试剂均为市售分析纯. 2.2 仪器高效液相色谱−质谱联用系统(HPLC −MS)由美国Agilent 公司1100液相色谱和美国Thermo Fisher 公司LCQ Deca XP 电喷雾质谱组成,数据采集与处理软件为Xcalibur 1.3,数据分析软件为Biowork 3.1(含Turbosequest), Ultrospec 2000紫外分光光度计(瑞典Pharmacia 公司).2.3 实验方法2.3.1 蛋白质释放过程分析称取100 g 豆粕,加入800 mL pH 7.8的NaOH 溶液,50℃摇床中连续振荡10 min ,快速抽滤,收集滤液;向残余豆粕中加入400 mL pH 7.8的NaOH 溶液,重复上述过程4次. 将收集到的滤液离心(10000 r/min, 5 min),上清液用HPLC 分离,收集分离出的各色谱峰,酶解后进行液质联用分析以进行蛋白质识别;通过HPLC 各色谱峰面积研究不同蛋白质释放过程.将上述实验获得的蛋白质提取液合并,调节pH 值至4.5,冷却至4~6℃,以10000 r/min 离心5 min ,收集上清液,酶解处理后用液质联用技术进行蛋白质种类分析.2.3.2 多级逆流固液提取实验多级逆流固液提取工艺实验装置系统图见图1. 在提取过程中清水从右向左移动,豆粕相对于提取液从左向右移动,整体上豆粕与提取液运动方向相反,其中S 0为新鲜豆粕,S 1, S 2和S 3分别为提取一、二和三次后的豆粕,W 为清水,提取液E 1为豆粕S 2与清水混合后的提取液,提取液E 2为豆粕S 1与E 1混合后的提取液,提取液E 3为新鲜豆粕S 0与E 2混合后的提取液. 多级逆流固液萃取实验启动时3个提取罐装满水溶液,向第1个罐中加入新鲜豆粕,连续搅拌并离心分离,洗涤后的豆粕依次导入第2和第3个提取罐直至稳态操作;在稳态多级逆流固液萃取过程中,清水W 与提取过2次的豆粕S 2均匀混合,通过旋流分离器分离后产生的豆粕残渣S 3不再使用,产生的提取液为一次蛋白提取溶液E 1;该提取液与提取过1次的豆粕S 1混合均匀,连续离心后的豆粕残渣为2次提取的残渣S 2,产生的提取液为二次蛋白提取溶液E 2;该提取液与新鲜的豆粕S 0均匀混合,连续离心后产生豆粕残渣S 1,产生的提取液为3次蛋白提取溶液E 3.图1 多级逆流固液提取实验装置系统图Fig.1 Schematic diagram of experimental apparatus for multi-stage countercurrent solid −liquid extraction2.4 分析方法 2.4.1 蛋白质含量测定蛋白质含量测定采用福林酚法. 2.4.2 凝胶过滤色谱分析大豆蛋白提取溶液用凝胶过滤色谱法(HPSEC)分析,色谱柱为TSK3000SW[300 mm×7.5 mm (I.D.), 10 µm],流动相为0.02 mol/L 磷酸缓冲液(pH 7.0),流速0.4 mL/min ,检测波长280 nm ,进样量10 µL. 2.4.3 HPLC 分析大豆蛋白提取溶液用去离子水稀释后用HPLC 分析,色谱条件:色谱柱Zorbax 300 SB C 18[250 mm×4.6 mm (I.D.), 5 µm],流动相A 为水(含0.1% TFA),流动相B 为乙腈(含0.1% TFA),梯度:0~45 min 5%~60% B ,45~50 min 60%~90% B ,流速0.75 mL/min ,波长280 nm. 2.4.4 酶解方法将上节分离出的色谱峰在100℃下热变性处理10 min ,真空干燥,然后溶于200 µL 0.05 mol/L NH 4HCO 3溶液(pH 8.0)中,加入50 µg 胰蛋白酶[溶于50 µL 0.05mol/L NH 4HCO 3 (pH 8.0)中],混合均匀后于37℃恒温8 h ,酶解产物直接进行HPLC −MS 分析. 蛋白质提取液经酸沉淀处理后的上清液于100℃下热变性处理10 min ,将pH 值调至8.0后加入胰蛋白酶,酶解条件同上. 2.4.5 HPLC −MS 分析色谱柱为Zorbax SB C 18[150 mm×2.1 mm (I.D.), 5 µm];流动相A 为水(含0.1% TFA), B 为乙腈(含0.1% TFA);梯度0~80 min 10%~90% B ,进样量30 µL. 质谱条件:离子源喷雾电压4.5 kV ,毛细管温度300℃,扫描范围m /z 300~2000. 精确质量数扫描和二级质谱扫描(MS/MS)均为数据依赖型扫描,MS/MS 碰撞能量为35%. 质谱数据用Turbosequest 软件进行检索,数据库为从Swiss-Prot 下载的包括大豆中已发现的全部蛋白质的氨基酸序列.3 结果与讨论3.1 豆粕提取液中蛋白质种类识别采用HPLC对豆粕提取液及其后续处理样品进行S 0. Fresh soybean mealS 1, S 2, S 3. Soybean meal after extraction byone, two and three timesW. Fresh waterE 1. Supernatant from the mixture of W with S 2E 2. Supernatant from the mixture of E 1 with S 1E 3. Supernatant from the mixture of E 2 with S 01. Extraction container 2. Pump3. Cyclone separator分析. 图2是豆粕提取液、经酸沉处理乳清废水和沉淀物重新溶解后的HPLC 图谱,可见豆粕提取液中不同种类成分的保留时间分布范围较宽,乳清废水中主要成分集中在23 min 以前,而沉淀物的保留时间主要集中在24 min 以后. 大豆中蛋白质主要是2S, 7S, 11S 和15S 组分,其中2S 中主要是蛋白酶抑制剂类及细胞色素C, 7S 中主要是球蛋白和少量的血球凝集素、脂肪氧化酶及β-淀粉酶,11S 中主要是球蛋白. 大豆中蛋白质分子量范围较宽,许多蛋白质以多聚亚基形式存在. 这些多亚基蛋白在提取过程中可能发生解离或聚集,且不同蛋白质组分及其亚基的等电点、分子量和亲疏水性不同.图2 豆粕提取液、乳清废水和沉淀物的HPLC 分析图谱 Fig.2 HPLC chromatograms of extraction solutions of soybeanmeal, supernatant and precipitation precipitate收集图2中不同保留时间的色谱峰,酶解产物用HPLC −MS 进行分析,质谱数据用Turbosequest 软件进行数据库检索以识别每个色谱峰中的蛋白质种类. 图3(a)是提取的上清液中保留时间为35.4 min 的色谱峰经胰蛋白酶处理后的总离子流图,表明酶解产物存在离子m /z 575.6;精确质量数扫描图谱表明离子m /z 575.6带双电荷[图3(c)],该离子对应的多肽在图3(a)中的保留时间为15.1 min ,数据库检索表明该离子对应的多肽序列为VFDGELQEGR ,存在于11S 球蛋白G1 (A1aBx)亚基序列中,表明图2(a)保留时间为35.4 min 的色谱峰中存在11S 球蛋白. 确定了大豆中主要蛋白质在色谱图中的保留时间,其中2S 组分蛋白质主要分布于20 min 以前的色谱峰;保留时间为23 min 的色谱峰中检测出11S 球蛋白的碱性亚基和2S 中的Kunitz-trypsin Inhibitor (KTI)蛋白;保留时间为24.3 min 的色谱峰中主要是7S 的α亚基和11S 的A5A4B3亚基等;保留时间为24~36 min 的是完整的7S 和11S 球蛋白及发生部分解离的7S 和11S 球蛋白.图3 图2中保留时间为35.4 min 的色谱峰酶解产物的色谱−质谱分析Fig.3 HPLC −MS analysis of the digested chromatographic peakin 35.4 min of retaining time [(a) total ion, (b) peak in 15.1 min of retaining time, (c) zoom scan, m /z 575.3 and (d) MS/MS spectrum, m /z 575.3]反相色谱主要根据样品极性进行分离,但样品分子量超过一定范围时其保留时间随分子量增加而延长. 从整体上分析,大豆内丰度较高的4类蛋白质组分中2S 组分的分子量较小,较易分散于水溶液中,在色谱图中的整体保留时间较短. 7S 和11S 中的球蛋白均属多亚基蛋白质,图2中有些色谱峰中只检测出了7S 和11S 球蛋白的部分亚基,表明在提取过程中存在多亚基球蛋白的亚基解离. 24 min 之后的色谱峰中可检测出7S 和11S 的全部亚基,表明这些色谱峰中主要是完整的7S 和11S 球蛋白. 文献[14]报道15S 组分较难溶于溶液而残留于粕渣中.3.2 大豆中蛋白质的释放行为为比较豆粕中不同组分的释放行为,重点以2S 组分及7S 和11S 球蛋白为指标,考察了不同提取条件下提取液中各组分相对含量的变化. 图4是不同提取次数所得豆粕提取液的HPLC 图谱. 从图可以看出,随提取次数增加,上清液中2S 组分(保留时间为14.98~20 min)含量逐渐降低,保留时间为23 min 的色谱峰中存在11S 球蛋白的碱性亚基和2S 中的KTI ,该色谱峰面积随提取次数增加逐渐降低,HPLC −MS/MS 分析结果表明,提取2次后该色谱峰中主要是11S 球蛋白的碱性亚基,而2S 中的KTI 含量较低,表明2S 组分具有较快的释放速率. 含7S 和11S 球蛋白的各色谱峰(保留时间为24.67, 29.7和36.2 min)面积变化趋势表明,随提取次数逐渐增加,上清液中7S 和11S 球蛋白所占比例逐渐增加. 用HPSEC 对不同提取次数的上清液进行了分析,图5表明,随提取次数增加,提取液中高分子量组分增加,与HPLC −MS 和反相色谱分析结果一致.05010005010001020304005010035.3929.6223.0720.7014.623.90(a) Soybean meal (b) SupernatantR e l a t i v e a b s o r b a n c e 36.1424.3122.9720.0613.7010.535.2635.3929.6424.8020.0713.6110.534.22(c) PrecipitationprecipitateTime (min)01020304050050100150600800100012001400050100572574576578580501002004006008001000050100(a)45.5043.0139.0937.6527.8823.0520.1911.196.01R e l a t i v e a b u n d a n c eTime (min)(b)1149.6955.5697.0667.5575.6(c)578.7576.7575.7575.3573.0571.3(d)904.3903.3788.4602.2525.9489.2361.1246.8m /z图4 提取一次、三次和五次的豆粕提取液HPLC 图谱 图5 提取一次、二次和三次的豆粕提取液HPSEC 图谱Fig.4 HPLC chromatograms of protein solutions extracted Fig.5 HPSEC chromatograms of protein solutions extractedonce, thrice and five times from soybean meal once, twice and thrice from soybean meal以二级质谱中检测出的目标多肽对应的一级质谱峰面积计算不同种类蛋白质在提取过程中的动态变化. 图6是以提取液中KTI 、亚基A5A4B3和α亚基的多肽峰面积代表的2S, 7S 和11S 组分在提取过程中的相对释放量随提取次数的变化. 2S 组分在第1次提取时的相对释放量高达55%左右,提取2次时相对释放量超过80%,分子量较高的7S 和11S 组分的相对释放量较2S 组分低,4次提取总释放量不足90%. 可见,7S 和11S 组分由于释放速率低于2S 组分,其提取过程需更长的时间;此外,在提取过程中增加豆粕与提取液之间7S 和11S 的浓度梯度有利于提高其释放速率,释放出的高分子量组分及时移出有助于增加豆粕与提取液之间的浓度梯度并提高豆粕中7S 和11S 组分的释放量.图6 大豆蛋白质提取过程中2S 组分中KTI, 11S 组分中的A5A4B3亚基和7S 球蛋白中的α亚基释放量动态变化 Fig.6 Relative release rate of KTI of 2S fraction, A5A4B3 subunitof 11S fraction and α subunit of β-conglycinin of 7S fraction in extraction of proteins from soybean meal3.3 多级逆流固液提取利用多级逆流固液提取法提取了大豆分离蛋白,研究了不同固液比下豆粕中蛋白质释放过程、总蛋白释放量、提取液中不同蛋白质相对含量及所制大豆分离蛋白的分子量范围.图7是固液比为1:10 g/mL 和单级停留时间为6 min 条件下不同提取级数蛋白提取液的HPLC 和HPSEC 图谱. 由于2S 等低分子量蛋白经2次提取后释放较完全,豆粕S 2中残留的蛋白质主要是7S 和11S 蛋白,E 1曲线表明保留时间为29 min 的组分所占比例较高,因此提取液E 1中7S 和11S 组分所占比例较高;HPSEC 图谱中保留时间为13.43 min 的色谱峰强度较高也表明提取液E 1中主要是分子量较高的蛋白质[图7(b)],该结果与7S 和11S 组分释放行为研究结果(图4)一致. S 1与E 1充分混合后S 1中的7S 和11S 组分继续释放,提取液E 2中7S 和11S 组分绝对含量增加. 同时,图7中提取液E 2中低分子量的组分含量也有所升高,原因在于第1次提取过程中未完全释放的2S 组分由于溶出速率高于7S 和11S 组分,相对比例逐渐增加. 在多级逆流固液提取过程中,不同提取级数中2S, 11S 和7S 组分的相对释放量的动态变化见图8,与图7结果一致.在多级逆流固液提取过程中,随提取次数增加豆粕中蛋白组分由左向右逐渐被释放,由于大豆蛋白中不同蛋白组分释放行为的差异,7S 和11S 组分从E 3到E 1的相对比例逐渐增加,从E 1到E 3逐级提取后7S 和11S 绝对含量逐渐升高. 实验比较了基于多级逆流法提取和传统提取过程获得的蛋白质溶液中7S 和11S 所占比例,结果表明多级逆流固液提取法获得的蛋白质溶液中7S 和11S 所占比例提高了8%. 可见在多级逆流固液提取过程中豆粕S 0经1次提取后仍有大量未完全释放的7S 和11S 组分,在第2次和第3次提取时释放量较大,从而提高了蛋白提取液中7S 和11S 组分的比例,这对增加SPI 中高分子量组分相对含量并改善SPI 功能特性十分关键.5010005010001020304005010036.0729.5419.9622.9919.365.34(a) OnceR e l a t i v e a b s o r b a n c e35.3429.5723.0220.0214.573.85(b) Thrice 41.0634.2629.5823.0020.0313.694.24(c) Five times Time (min)0501000501000102030405005010035.3124.9113.49(a) OnceR e l a t i v e a b s o r b a n c e 29.9435.3528.7616.6413.45(b) Twice46.4128.7519.1513.40(c) ThriceTime (min)1234530405060708090100R e l a t i v e r e l e a s e r a t e (%)Extraction times图7 多级逆流固液提取过程中不同提取级数豆粕提取液的HPLC 图谱和HPSEC 图谱Fig.7 HPLC and HPSEC chromatograms of protein solutions during multi-stage countercurrent solid −liquid extraction图8 多级逆流固液提取过程中不同提取级数的提取液中2S组分中KTI 和11S 组分中A5A4B3亚基、7S 球蛋白中 的α亚基释放量的动态变化Fig.8 Relative release rate of KTI of 2S fraction, A5A4B3subunit of 11S fraction and α subunit of β-conglycinin of 7S fraction in three extraction stages during multi-stage countercurrent solid −liquid extraction实验采用福林酚法测定了多级逆流固液提取大豆分离蛋白提取液中的蛋白质浓度,进行3次多级逆流平行实验. 豆粕中蛋白质含量为55%,多级逆流固液提取工艺中大豆分离蛋白的提取率为77.6%,而目前工业上每生产1 t 大豆蛋白粉需2.4 t 豆粕,大豆蛋白粉中的蛋白质含量按90%计算,则原料豆粕中蛋白质的收率不足70%. 大豆中2S, 7S, 11S 和15S 四种组分的含量分别为9.4%, 34%, 42%和4.6%,经过提取后15S 中主要蛋白质存在于豆渣中,但仍有少量溶出;2S 组分尽管平均分子量较低且易溶解,但部分蛋白质的等电点接近 4.5,因此,酸沉阶段会有部分2S 组分与7S 和11S 共同沉淀. 蛋白质等电点沉淀过程主要与溶液pH 有关,但蛋白质浓度会影响沉淀过程的收率,本实验中蛋白质收率提高的主要原因是提取液的浓度较高. 多级逆流固液提取技术是一种有效提高大豆分离蛋白提取率的方法.目前工业上使用的大豆分离蛋白提取过程属错流提取工艺,第1次提取时豆粕与水的比例为1:8 g/mL ,离心后向残余豆粕中加入清水,加入量与第1次提取时豆粕用量的比例为4:1 mL/g ,整体上豆粕与水的比例为1:12 g/mL. 由于错流提取工艺用水量较高,提取液中蛋白质浓度与用水量近似呈反比,7S 和11S 组分的浓度降低后导致其在酸沉阶段沉淀不完全,乳清废水中存在一定量的7S 和11S 球蛋白及其亚基,增加了后续水处理过程负荷,同时也降低了大豆分离蛋白的收率. 本研究采用多级逆流固液提取过程中的固液比为1:8 g/mL ,降低了用水量. 结果表明提取液中7S 和11S 组分的总释放率可达75%左右,在酸沉淀阶段7S 和11S 组分的收率提高了3%,降低了乳清废水中7S 和11S 组分的总量,同时降低用水量后乳清废水中2S 组分浓度比错流提取工艺有所增加.比较了固液比分别为1:7, 1:8和1:9 g/mL 条件下多级逆流固液提取工艺中大豆中蛋白质的释放量及7S 和11S 组分的相对含量变化,结果(表1)表明,固液比为1:8和1:9 g/mL 条件下大豆分离蛋白的相对释放量比固液比为1:7 g/mL 条件下分别提高了12.9%和20.7%,其中7S 和11S 组分在提取物中的总含量分别提高了14.6%和20.8%. 在提取过程中固液比越高,多级逆流固液提表1 不同固液比条件下大豆分离蛋白的相对释放量及7S 和11S 组分的相对含量Table 1 Relative release rate of SPI and content of 7Sand 11S fractions in extraction process with different ratios of solid to liquidRatio of solid to liquid(g/mL) Relative release rateof SPI (%) Relative content of 7S and 11S fractions (%)1:7 1:8 1:971.3 84.2 92.069.2 83.8 90.005010005010001020304005010036.1728.9622.9320.055.42E 1(a) HPLCR e l a t i v e a b s o r b a n c e 36.6128.9822.9620.0513.565.44E 236.1428.8322.8719.985.39E 3Time (min)501000501000102030405005010035.3228.7516.6313.43(b) HPSECE 1R e l a t i v e a b s o r b a n c e 35.5428.8021.6516.7313.50E 238.8835.5029.5521.6313.52E 3Time (min)20406080100123R e l a t i v e r e l e a s e r a t e (%)Extraction solution取工艺对离心分离过程要求越高,在工业上会增加动力消耗. 同时,固液比过高将导致7S和11S组分浓度过高,也会影响其释放行为. 与传统的蛋白提取工艺相比,固液比为1:10 g/mL条件下用水量节省了11%,同时由于提取液中较高的7S和11S浓度,在酸沉阶段7S和11S的收率较传统工艺中的酸沉阶段提高了3%.4 结 论(1)以脱脂豆粕为原料,利用碱溶酸沉法提取大豆分离蛋白,利用高效液相色谱−质谱联用系统对大豆分离蛋白提取液中的蛋白质种类进行了分析,识别出提取液中2S, 7S和11S等主要成分,而分子量较大的15S组分则残留于豆粕残渣中.(2)在蛋白质组分识别的基础上,对不同蛋白质组分在提取过程中的释放行为进行了研究. 结果表明,2S组分具有相对较快的释放速率,而7S和11S组分的释放速率相对较低.(3)利用多级逆流固液提取技术提取大豆分离蛋白可有效提高7S和11S组分的相对释放量,且可使大豆分离蛋白的提取率比传统提取方法提高8%.参考文献:[1] Castro R F, Marina M L, Garfa M C. Perfusion Reversed-phaseHigh-performance Liquid Chromatography/Mass Spectrometry Analysis of Intact Soybean Proteins for the Characterization of Soybean Cultivars [J]. J. Chromatogr. A, 2007, 1170: 34−43.[2] Panthee D R, Kwanyuen P, Sams C E, et al. Quantitative Trait Locifor β-Conglycinin (7S) and Glycinin (11S) Fractions of Soybean Storage Protein [J]. J. Am. Oil Chem. Soc., 2004, 81(11): 1005−1012.[3] Renkema J M S, Lakemond C M M, De Jongh H H J, et al. The Effectof pH on Heat Denaturation and Gel Forming Properties of Soy Proteins [J]. J. Biotechnol., 2000, 79(3): 223−230.[4] Delwiche S R, Pordesimo L O, Panthee D R, et al. Assessing Glycinin(11S) and β-Conglycinin (7S) Fractions of Soybean Storage Protein by Near-infrared Spectroscopy [J]. J. Am. Oil Chem. Soc., 2007, 84(12): 1107−1115.[5] Liu C, Wang H L, Gui Z M, et al. Optimization of Extraction andIsolation for 11S and 7S Globulins of Soybean Seed Storage Protein [J]. Food Chem., 2007, 102(4): 1310−1316.[6] Zarkadas C G, Gagnon C, Poysa V, et al. Protein Quality andIdentification of the Storage Protein Subunits of Tofu and Null Soybean Genotypes, Using Amino Acid Analysis, One- and Two-dimensional Gel Electrophoresis and Tandem Mass Spectrometry [J]. Food Res. Int., 2007, 40(1): 111−128.[7] Yuan Y J, Velev O D, Chen K, et al. Effect of pH and Ca2+-inducedAssociations of Soybean Proteins [J]. J. Agric. Food Chem., 2002, 50(17): 4953−4958.[8] Duranti M, Barbiroli A, Scarafoni A, et al. One-step Purification ofKunitz Soybean Trypsin Inhibitor [J]. Protein Express. Purif., 2003, 30(2): 167−170.[9] 赵西周,陈春佳,张效伟,等. 连续性碱溶酸沉生产大豆分离蛋白特点分析 [J]. 中国油脂, 2002, 5(5): 61−63.[10] Wang Q E, Ma S M, Fu B Q, et al. Development of Multi-stageCountercurrent Extraction Technology for the Extraction of Glycyrrhizic Acid (GA) from Licorice (Glycyrrhiza uralensis Fish) [J]. Biochem. Eng. J., 2004, 21(3): 285−292.[11] 胡小中,温光源,李里特. 多级逆流醇浸法制取大豆浓缩蛋白工艺的研究 [J]. 食品工业科技, 2009, 30(3): 272−275.[12] 王英,崔政伟. 连续动态逆流提取的动态和现状 [J]. 包装与食品机械, 2009, 27(1): 49−53.[13] Li W, Zheng C, Wang J S, et al. Microwave Multi-stageCountercurrent Extraction of Dihydromyricetin from Ampelopsis Grossedentata [J]. Food Technol. Biotechnol., 2007, 45(4): 374−380. [14] 周兵,周瑞宝. 大豆球蛋白的性质 [J]. 西部粮油科技, 1998,23(4): 39−43.Extraction of Soybean Protein Isolate UsingMulti-stage Countercurrent Solid−Liquid Extraction MethodGAO Jian-ping1,2, LIU Lin1, ZHANG Gui-feng2, WANG Ming-lin1, HUANG Yong-dong2, LIU Yong-dong2, SU Zhi-guo2(1. College of Food Science and Engineering, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China;2. State Key Laboratory of Biochemical Engineering, Institute of Process Engineering, CAS, Beijing 100190, China) Abstract: Release behavior of proteins in soybean meal during their extraction process using high performance liquid chromatography−mass spectrometry was investigated. The possibility for extraction of soybean protein isolate using multi-stage countercurrent solid−liquid extraction (MSCSLE) was also studied. The result indicated that 2S protein showed a higher release rate and more than 80% of total 2S proteins were released after extraction in two times. The total release rate of 7S and 11S proteins reached 69% after three times of extraction, indicating that 7S and 11S fractions had a lower release rate during extraction process. Increasing the concentration gradient between the solid and liquid or extending the extraction time enhanced the release of 7S and 11S fractions. The concentration of total proteins obtained using MSCSLE was higher than that obtained by multi-time extraction, resulting in higher 7S and 11S recovery rate. Under the same recovery rate of soybean protein isolate, 11% of water could be saved. During precipitation, 8% of total 7S and 11S protein could be recovered.Key words: soybean protein isolate; high performance liquid chromatography−mass spectrum; protein identification; release; multi-stage countercurrent solid−liquid extraction。

大肠杆菌工程菌利用甘蔗糖蜜发酵产L-乳酸研究

大肠杆菌工程菌利用甘蔗糖蜜发酵产L-乳酸研究

大肠杆菌工程菌利用甘蔗糖蜜发酵产L-乳酸研究赵锦芳;薛葳蕤;张晓敏;王永泽;王金华【摘要】大肠杆菌HBUT-L来源于HBUT-D,因此具有快速利用蔗糖的特性。

对HBUT-L利用蔗糖及甘蔗糖蜜发酵产L-乳酸的特性进行了研究。

结果表明,该菌株在96 h的发酵过程中,可将100 g/L的蔗糖转化生成60.0 g/L乳酸,转化率达到74.0%,杂酸产量少,具有工业化开发潜力。

在玉米浆培养基中可以直接添加未经处理的甘蔗糖蜜,发酵周期持续224 h,发酵液所得乳酸产量为87.0 g/L,发酵液残糖为28.6 g/L,但乳酸产率极低,仅为0.389 g/(L•h),后续将对甘蔗糖蜜预处理工艺进行研究,进一步提高乳酸发酵速度和产量。

%Escherichia coli HBUT-L comes from the strain HBUT-D, so it is characterized by the rapid uti1ization of sucrose. In the experiment, the characteristics of L-1actic acid fermentation from Escherichia coli HBUT-L by sugar and sugarcanemo1asses were studied. The resu1ts showed that in 96 h of fermentation process, HBUT-L cou1d convert 100 g/L of sucrose into 60.0 g/L of L(+)-1actic acid, the conversion ratio was 74%, with 1ess production of impurities and deve1opment potentia1 for industria1ization. Untreated sugarcane mo1asses cou1d be direct added into corn steep 1iquor medium, the fermentation 1ast-ed 224 h, and fermentation broth produced 87.0 g/L of L(+)-1actic acid and 28.6 g/L of residua1 sugar, however the yie1d of L-1actic acid was extreme1y 1ow and just 0.389 g/L. Subsequent1y, it needed to research the pretreatment techno1ogy of sugar mo1asses and further increase the speed and yie1d of L(+)-1actic acid fermentation.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2016(055)024【总页数】5页(P6541-6544,6545)【关键词】大肠杆菌工程菌;甘蔗糖蜜;发酵;L-乳酸【作者】赵锦芳;薛葳蕤;张晓敏;王永泽;王金华【作者单位】湖北工业大学生物工程学院/发酵工程教育部重点实验室,武汉430068;湖北工业大学生物工程学院/发酵工程教育部重点实验室,武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院/发酵工程教育部重点实验室,武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院/发酵工程教育部重点实验室,武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院/发酵工程教育部重点实验室,武汉 430068【正文语种】中文【中图分类】TQ92L-乳酸是一种重要的有机酸,广泛应用于食品、医药和化工领域,L-乳酸最具前景的应用在于聚乳酸(PLA),PLA是一种可降解的、具有良好使用性能的生物相容性高分子材料,用于制造可生物降解塑料,近些年一直成为关注和研究的热点[1]。

大豆科技2020年总目次

大豆科技2020年总目次

■总目次2020年总目次■人物横蹄勇骁千里马俯首甘为孺子牛——记国家大豆产业技术体系顾问专家张孟臣研究员…………………………………………杨秋萍2(1)■专家视点2020年大豆产业发展趋势与政策建议……………………王新刚,喻佳节,司伟1(1)中国和美国大豆生产成本比较分析………………………………喻佳节,司伟2(4)疫情之年四川大豆生产及技术指导意见………………吴海英,冯军,梁建秋,等2(11)2019年全国豆制品抽检统计年度分析报告………………………………徐玉环,吴月芳3(1)四川大豆生产现状、主要问题及发展对策………………梁建秋,吴海英,冯军,等3(7)■会议报道——国家大豆体系专栏国家大豆产业技术体系2019年度工作会议在武汉市召开……………………………宋雯雯1(4)全国专用大豆产业联盟年会暨产销对接会在五大连池市成功召开…………………杨秋萍5(1)■研究与探讨响应曲面法优化鲜果豆丁制备工艺及其品质评价…………武杰,王子玥,张琳,等1(6)菌线克种衣剂对赤峰地区重茬大豆生育与产量的影响…………王晓磊,李峰,周学超,等1(14)大豆分离蛋白在面包中的应用研究………………李翠芳,张钊,王才立,等1(21)播种期对浙鲜85秋季延后栽培生育和产量的影响…………吴美娟,黄洪明,汪暖,等1(28)贵州石漠化区大豆生产品种优化方案研究………………杨艳,冷远康,陈佳琴,等2(13)大豆行间覆膜对土壤养分及微生物的影响…………………………………………王英霞2(22)微量元素防治大豆黄叶效果简报………………李琼,常世豪,杨青春,等2(27)大豆应用“霍尚澳优”水溶肥料试验总结…………………………………………郭起华2(30)黄淮海南部地区大豆成熟至收获期气象条件对种子发芽率的影响………………李国臣,武婷婷,孙石,等3(11)不同时期播种对大豆症青率及产量的影响………………刘健,祁丽敏,沈庆花,等3(16)鲜食春大豆浙鲜12移栽密度与氮肥用量试验初报………………包祖达,丁杨东,戴夏萍,等3(26)30%氟磺胺草醚微乳剂防除大豆田一年生阔叶杂草的效果研究………………………刘义3(29)叶面喷施硒肥对黑大豆生长及品质的影响………………卫玲,肖俊红,刘博,等4(1)大豆氮磷钾营养高效基因型筛选与研究………………孟凡钢,于德彬,饶德民,等4(6)半矮秆大豆突变体的筛选及农艺性状分析………………姜银姬,黄初女,朱浩哲,等4(10)非共价作用对球蛋白—花青素复合物结构特性的影响…………胡淼,杨秋萍,郑环宇,等5(3)鲜榨大豆油工艺研究与应用………………罗淑年,高珊,张星震,等5(13)菌线克生物种衣剂对大豆胞囊线虫病防效及产量影响的研究………………袁明,韩冬伟,李馨园,等5(19)■总目次大豆油脂脱色在线检测控制技术研究与应用………………张佳宁,于坤弘,唐月,等5(23)黑龙港地区夏大豆高产品种筛选………………李康利,佟越强,聂江文,等6(1)夏大豆生育期对光周期和主要气象要素的响应——以濉科国审豆为例………………张军舰6(9)有机物料替代化学肥料对大豆产量及品质的影响………………袁明,韩冬伟,王淑荣,等6(15)大豆膳食纤维微生物的影响因素与控制方法………………张兆兴,张钊,王才立,等6(20)■综述酸浆豆腐研究进展………………高若珊,孙亚东,张光,等1(32)表观遗传调控基因CLF在植物器官形态建成的研究进展…………姜晓旭,李晓屿,马瑶,等3(33)转基因技术提高大豆对非生物胁迫耐受性的研究进展…………轩慧冬,黄颜众,郭娜,等4(13)大豆籽粒发育过程中蛋白质含量积累规律与影响因素分析…………………董岭超,汪辉,郁万琴,等5(27)■专题论坛转基因技术提高大豆耐旱性……………………方义生,陈李淼,周新安1(38)浅谈杂交育种和转基因技术的关系………………………………王昌陵,王文斌1(42)浅谈转基因大豆……………张万科,陈受宜1(45)基于全基因组重测序技术鉴定转基因大豆插入位点的方法………………郭兵福,郭勇,洪慧龙,等1(47)大豆GmFTLs基因家族的功能研究………………徐思远,郭广雨,徐坤,等2(33)共表达G2EPSPS和GAT基因增强转基因大豆植株对草甘膦耐受性……………郭兵福,郭勇,洪慧龙,等2(37)大豆转基因技术……………杨雪,赵琳2(39)浅谈大豆育种方法……………………张彤3(40)神奇的食物——大豆…………………韩松洋3(43)认识转基因大豆………………………蔡洪生3(46)解决大豆疫霉根腐病的有效途径——转基因育种…………………………………………陈佳欣3(48)除草剂对大豆的危害…………………崔文雪3(50)■病虫防治大豆病毒病介体昆虫研究概况………………………………高宇,史树森1(49)浅析我国农业病虫害防治现状及建议…………………………………………杨福丽1(55)大豆田蛴螬的发生规律及防治方法………………陈立娟,高凤菊,陈文凭,等6(25)■研究简报马关县大豆新品种(系)多点鉴定试验简报………………………李明杰,熊光道,高荣琼5(31)一种大豆植株的扩繁方法及在育种中应用简报…………………李志辉,傅豪,韩昕君,等5(35)■观察与思考进境大豆风险分析及监管防控初探………………李林杰,周丽丽,王洛高,等3(52)新时代背景下发展中国大豆科技和振兴大豆产业策略分析………………………………孙磊4(20)石家庄市藁城区大豆产业和种植成本收益调查分析…………康振宇,宋建新,郭佳,等4(24)甘肃省大豆生产现状及发展途径分析………………杨如萍,韦瑛,张国宏,等4(28)四川大豆良种繁育体系存在的主要问题与发展对策…………梁建秋,冯军,曾召琼,等4(32)富顺县高粱+大豆产业发展模式分析………………………………陈小林,李良均4(34)体系推动四川大豆生产发展的主要贡献及对策…………………曾召琼,冯军,梁建秋,等5(39)■总目次黄淮海地区大豆机械化收获存在的问题和解决办法……………………………陶华,刘松涛5(43)基于中国大豆进口市场结构分析对我国大豆产业发展的启示……………………………侯春香6(28)■实用技术黄淮海地区大豆高效生产技术………………杨旭,张秀荣,付贵阳,等4(37)禹城市夏大豆播种关键技术及保障措施………………陈立娟,高凤菊,杨友庆,等4(40)阜阳地区夏大豆症青发生情况调查及防治技术…………………………………………杜霄力5(46)山西省优质专用菜用大豆品种特性及高产栽培技术…………王军,张海生,李方舟,等6(36)■种子世界脂氧酶完全缺失无腥味大豆新品种东富豆1号培育及栽培技术…………………高媛,薛恩玉,姜妍,等1(56)高产高蛋白大豆新品种牡豆15选育与栽培要点………………王燕平,李文,宗春美,等1(60)黑龙江省主推高油大豆品种及高产栽培技术要点………………郭美玲,郭泰,王志新,等2(42)无腥味大豆新品种东富豆3号的培育及栽培技术………………薛恩玉,高媛,姜妍,等2(48)夏大豆新品种山宁24的选育及栽培技术………………周静,赵恩海,付贵阳,等2(52)极早熟大豆新品种登科6号品种选育及栽培技术………………李强,王雪娇,张万海,等2(55)早熟大豆新品种华豆10的选育与栽培要点…………………………………………钱振亚2(57)大豆新品种云黄14的选育及栽培要点………………赵银月,刘珏,詹和明,等2(59)极早熟高产大豆吉育702的选育及栽培技术………………徐研,姚秀亮,王义生,等3(59)高产耐密型夏大豆品种开豆49选育及栽培技术………………李筱雨,孙春梅,张冬菊,等3(62)抗病高油大豆品种齐农5号的选育及生产技术………………袁明,韩冬伟,王淑荣,等4(43)大豆新品种佳豆8号的选育及栽培技术要点………………郭美玲,郭泰,王志新,等4(48)优质高产大豆新品种圣豆十号的选育及推广………………张小燕,李春燕,曹基秋,等4(52)春大豆新品种桂春18号的选育及栽培技术………………宁德娇,梁江,韦清源,等4(56)耐密夏大豆新品种开豆49的选育及栽培要点………………李相涛,张冬菊,李筱雨,等4(60)高产抗病大豆新品种吉育354的选育及栽培要点……………张云峰,王明亮,孙星邈,等5(49)大豆新品种云黄15的选育及栽培要点…………………赵银月,刘钰,黄国贤,等5(52)大豆新品种通农36号选育及栽培技术…………………滕迁莹,崔明元,刘海,等5(54)开鲜豆3号大豆的选育及栽培技术要点…………………………………………李子升5(56)大粒抗病国审大豆新品种洛豆1号的选育…………………郭建秋,常丽丹,李林,等5(60)早熟高产大豆新品种吉育251的选育及栽培要点………………王明亮,张云峰,孙星邈,等6(41)夏播鲜食大豆新品种苏豆17号………………陈华涛,张红梅,刘晓庆,等6(44)高油大豆新品种九研9号的选育与栽培技术要点………………王美玲,张安宏,丁海龙,等6(47)大豆新品种牡豆14的选育………………孙国宏,任海祥,宗春美,等6(50)耐荫型高蛋白夏大豆新品种贡夏豆13的选育及栽培技术………………向仕华,杨世鹏,余鳞,等6(52)大豆新品种南农518的选育与栽培技术………………李凯,智海剑,盖钧镒,等6(55)茶豆新品种潍豆138的选育及栽培技术………………司玉君,曹其聪,陈雪,等6(57)。

刈号微量元素水溶肥对大豆和玉米农艺性状及产量的影响

刈号微量元素水溶肥对大豆和玉米农艺性状及产量的影响
在作物生长发 育 中 不 可 缺 少 且 不 可 相 互 代 替 [7].
例如,
Fe 是 光 合 作 用、生 物 固 氮 和 呼 吸 作 用 中 细
胞色素、非血红素铁蛋白和某些叶绿素G蛋白复合
体合成的必 需 元 素.当 植 株 体 内 缺 铁 时,常 常 在
幼叶上表 现 出 叶 脉 间 失 去 绿 色,出 现 白 化 叶 [8].
物,根瘤少而 小,固 氮 能 力 弱,导 致 产 量 降 低. 由
此可见,当作物体 内 缺 乏 任 何 一 种 微 量 元 素 的 时
候,生长发育都会受到抑制,导致产量降低和品质
下降.
30
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
7 期 王自杰等:刈号微量元素水溶肥对大豆和玉米农艺性状及产量的影响
收稿日期:
2022

12

27
基金项目:黑龙江省重点研发计划(
GA22B014);黑 土 地 保 护
与利用科技创新工程专项(
XDA28100000);黑 龙 江 省 自 然 科
学基金(
LH2021C091);黑 龙 江 省 重 点 研 发 计 划 指 导 类 项 目
(
GZ20210132).
第一作者:王自杰(
e
l2019 整 理 数 据,
软件中邓肯




差 法(
DPS13.

DMRT 法)
对试验数据进行差异显著性分析.
2 结果与分析
2.
1 刈号微量元 素 水 溶 肥 对 大 豆 和 玉 米 苗 期 性
状的影响
2.
1.
1 大 豆 苗 期 性 状 由 表 1 可 知,与 CK 相
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

黑龙江粮食Heilongjiang Grain2010年第1期摘要:大豆糖蜜是生产醇法大豆浓缩蛋白过程中产生的副产物,主要成分有糖类、蛋白质、异黄酮和皂苷等。

本文介绍了大豆糖蜜的综合利用,一是从大豆糖蜜中提取异黄酮、皂苷和大豆低聚糖等的研究进展;二是利用大豆糖蜜作发酵底物的应用、研究进展,以及大豆糖蜜的其它应用。

关键词:大豆糖蜜;综合利用;功能因子;发酵贺凌云田娟娟白志明(黑龙江省粮食科学研究所,150008哈尔滨)大豆糖蜜综合利用粮油科技Grain &Oil Technology大豆糖蜜是生产醇法大豆浓缩蛋白(Alcohol Leaching Soybean Protein Concentrate 简称ALSPC )过程中的副产物。

大豆糖蜜的浓度为65%~72%,其中含有5%~8%蛋白质,30%~35%糖类,0.5%~2%大豆异黄酮,3%~6%皂苷,4%~8%类脂和4%左右灰分。

大豆糖蜜外观为棕黄色的粘稠状液体,味甘苦。

1963年,Daniel Chajuss 把乙醇提取大豆蛋白质过程中产生的棕色粘稠的浆状物质命名为“大豆糖蜜”。

大豆糖蜜成分较为复杂,是多种植物性化合物的集合体。

据报道,每生产一吨ALSPC 将得到大约0.34吨大豆糖蜜,是制约生产企业扩大生产规模的主要因素之一,因此,对大豆糖蜜的开发和利用显得尤为重要。

本文详尽叙述了大豆糖蜜可应用的领域,为生产企业提供了开发大豆糖蜜的思路,如能充分地利用这一宝贵资源,将为企业赢得更大的经济效益。

1大豆糖蜜提取活性功能因子1.1大豆异黄酮异黄酮在植物界中分布有限,多存在于豆科植物中。

大豆异黄酮具有类雌激素样作用,可与雌激素受体结合,发挥弱雌激素效应,对女性体内雌激素水平具有双向调节的作用。

大豆异黄酮结构中有多个活性羟基,具有较强的还原性,可清除机体内多余的自由基,发挥抗氧化作用。

目前发现大豆异黄酮有12种,分为游离型苷元和结合性糖苷,共分为三个系列:染料木素系列、大豆苷元系列和黄豆黄素系列。

近年来人们逐渐认识到植物原料中异黄酮的医学价值,尤其是异黄酮苷元。

其中染料木素和黄豆黄素可有效降低心血管疾病的发生。

在醇法大豆浓缩蛋白的生产过程中,大部分异黄酮保留在萃取液中,萃取液经浓缩后得大豆糖蜜,大豆异黄酮得到相应的浓缩,因此,大豆糖蜜是生产大豆异黄酮的最佳原料。

许浮萍等在其专利中采用醇沉法从大豆糖蜜中去除大豆低聚糖,再用离心法精制大豆异黄酮,产品纯度达到90%以上。

Gugger 等研究了利用异黄酮溶解度对温度差异来提取异黄酮和分离纯化染料木素。

在65℃~95℃的条件下进行超滤,超滤液用树脂吸附处理,用水洗脱可溶性糖类,用乙醇溶液解吸异黄酮。

孟雷等报道了利用大孔树脂制备大豆异黄酮,以大豆糖蜜为原料,经Ca (OH )2絮凝去除大豆蛋白质后,利用大孔树脂吸附分离大豆异黄酮。

研究结果表明,用浓度为70%的乙醇洗脱大豆异黄酮,得到产品的纯度最高为63.51%,收率为93.40%。

1.2大豆皂苷大豆皂苷是一种齐墩果酸型五环三萜糖苷化合物,由齐墩果酸三萜的羟基和低聚糖分子的环状半缩醛上的羟基失水缩合而成。

大豆皂苷可分为A 族、B 族、E 族和DDM P 族,达二十种之多,具有多种生理活性作用:可清除人体内自由基,具有抗氧化和降低过氧化脂质的作用;可防治动脉粥样硬化及心血管疾病;皂苷有较强的起泡性,可以添加到软饮料、啤酒和碳酸饮料中作为起泡剂;具有乳化功能,可以做清洁剂应用于洗面奶等护理化妆品中;大豆皂苷还具有抗诱变、抗肿瘤等功效,可制成药物中间体和相关药物的开发。

徐龙权等研究了以脱脂豆粕为原料用乙醇浸提、正丁醇萃取、丙酮沉淀法提取大豆皂苷。

最佳条件为温度80℃,乙醇浓度70%,浸泡时间7h ,大豆皂苷的提取率达94%。

苏宝根等研究了利用大孔吸附树脂制备高含量的大豆皂苷。

用柱层析法对低含量的大豆皂苷提取液进行分离,大豆皂苷的含量达到45%以上,收率大于90%;再用结晶法精制大豆皂苷粗品,大豆皂苷含量大于96%,收率大于50%。

大豆糖蜜中也富集了大豆皂苷,可在分离大豆异黄酮的同时,将大豆皂苷分离出来。

1.3大豆低聚糖大豆低聚糖是指大豆糖蜜中含有的对人体有益的可溶性糖类,主要成分是蔗糖、棉籽糖和水苏糖。

棉籽糖是半乳糖α(1→6)糖苷键与蔗糖的葡萄糖基连接;水苏糖是棉籽糖的半乳糖基以α(1→6)糖苷键与半乳糖连接。

棉籽糖和水苏糖均属于α-半乳糖苷类,能直接被人体肠道内的益生菌利用,促进双歧杆菌等益生菌的增殖,实现人体肠道内的微生态平衡;据资料表明大豆低聚糖还具有降低血液中胆固醇和甘油三酯含量以及预防龋齿的功效;大豆低聚糖的甜度和热量较低,是一种理想的低甜度、低热量天然甜味剂,可作为功能性糖类应用于食品保健领域。

方伟辉研究了利用微生物发酵的方法制备大豆低聚糖。

其分52黑龙江粮食Heilongjiang Grain2010年第1期离纯化大豆低聚糖的方法是先采用乙醇-正己烷混合溶剂除去大豆糖蜜中脂类物质,然后用磷酸沉淀法去除部分杂质,粗糖浆经过脱色后,选用酿酒酵母发酵得到了棉籽糖、水苏糖纯度较高的大豆低聚糖产品。

蒋丽华等研究了利用超滤法纯化大豆低聚糖。

选用截留分子量为10000D 的超滤膜,在pH7.0,温度20℃的工艺条件下,得到了澄清透亮的透过液,大豆低聚糖的透过率达70%再经浓缩得到大豆低聚糖糖浆。

田娟娟等开展了从大豆糖蜜中分离低聚糖的研究,利用酸沉淀法去除大豆糖蜜中的蛋白质后,经活性炭或树脂脱色,真空浓缩后得到无色大豆低聚糖浆产品,其纯度可达70%.有资料证实,大豆低聚糖的含量占大豆糖蜜固形物的一半以上,从大豆糖蜜中提取大豆低聚糖是对大豆糖蜜最有效的利用,但是大豆糖蜜色泽深必须在去除胶体物质和蛋白质后进行脱色研究,制备出高浓度的大豆低聚糖浆,它是生产ALSPC 延伸的工艺路线,能为企业创造更多的利润。

1.4大豆胰蛋白酶抑制素大豆糖蜜中的蛋白属于清蛋白成分,主要是胰蛋白酶抑制素,是抗营养因子,是一种具有生物活性的蛋白质或多肽化合物。

目前得到了详细研究的只有两种胰蛋白酶抑制素:Kunitz 胰蛋白酶抑制素(KTI )和Bowman-Birk 胰蛋白酶抑制素(BBI )。

KTI 和BBI 均属于丝氨酸蛋白酶抑制剂,KTI 具有抑制胰蛋白酶活性的能力,而BBI 同时具有抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性的能力。

近年来研究发现大豆胰蛋白酶抑制素具有抗癌活性,能对癌细胞的活动产生明显的抑制作用。

研究表明KTI 对卵巢癌细胞的入侵力和转移表达具有明显的抑制作用;低浓度的BBI 在动物体内对直肠癌、肝癌和肺癌等多种癌症都有明显的抗癌活性且毒副作用小。

目前对于BBI 的抗癌活性的研究已进入到临床试验的阶段,已研制出多种有效结合剂型;此外,BBI 还具有抗辐射保护作用,减少辐射引起的蛋白质固化和辐射诱导基因的过度表达。

因此,开发利用具有抗癌和抗辐射生物活性的大豆胰蛋白酶抑制素具有重要的意义。

陈星等利用固定化胰蛋白酶分离纯化大豆胰蛋白酶抑制素可得到高纯度的大豆胰蛋白酶抑制素。

研究结果表明:大豆胰蛋白酶抑制素通过各阶段纯化后其活性从0.95KIU/L 增高至325.5KIU/L ,纯化程度提高324.6倍,得率0.033%;电泳结果表明,利用固定化胰蛋白酶分离纯化的大豆胰蛋白酶抑制素有单谱带,纯化效果明显。

张宾等研究用壳聚糖树脂固定胰蛋白酶法制备大豆胰蛋白酶抑制素检验结果表明:胰蛋白酶已成功地偶联到壳聚糖树脂上,对大豆胰蛋白酶抑制素的吸附率约为33.3%。

2大豆糖蜜在发酵领域的应用大豆糖蜜成分复杂多样,含有微生物生长所需要的营养和水溶性矿质元素,是良好的天然微生物发酵剂,作为发酵底物的应用前景广阔。

因大豆糖蜜价格低廉,作为发酵底物可以明显降低生产成本。

目前有关将大豆糖蜜作为发酵底物的应用研究尚不多见。

2.1发酵丁醇Qureshi 等报道了以大豆糖蜜为发酵底物,用梭状芽孢杆菌属的beijerinckiiBA101菌种发酵生产丁醇,该菌种可利用大豆糖蜜中的蔗糖、果糖和半乳糖,而无法利用棉籽糖和水苏糖这一特点,可以用来分离方法纯化大豆低聚糖。

2.2发酵槐脂Solaiman 等利用念珠菌属bombcola 菌种,以大豆糖蜜和油酸作为共同发酵原料生产槐脂。

目标产物的产率为53g/L 左右,槐脂纯度可达97%,是获得高纯度内酯形式槐脂的一条重要途径,利用大豆糖蜜作底物要比用葡萄糖作底物,具有产率高、降低了成本的特点。

2.3发酵乳酸M ontelongo 等以乳杆菌salivarius 为菌种发酵生产乳酸,研究在大豆糖蜜中添加0.5%酵母提取物消除营养成分不足等问题及对菌种生长和乳酸产量产生的影响。

实验结果表明,该方法不但可缩短发酵时间,同时,大豆糖蜜中葡萄糖、蔗糖、棉籽糖和水苏糖均能利用。

3大豆糖蜜的其它应用大豆糖蜜是多种植物性化学成分集合体,包括异黄酮、胰蛋白酶抑制素、酚酸、皂苷、肌醇六磷酸、磷脂和植物甾醇等。

将大豆糖蜜制成口服制剂服用,不但可补充人体对这些植物性物质的需求,还能改善和预防皮肤性疾病。

将大豆糖蜜制成药膏,可治疗皮肤感染和轻微痤疮;制成洗发香波起到预防脱发和减少皮屑的作用,安全有效。

大豆糖蜜是一种新兴的食品添加剂。

大豆糖蜜替代部分蔗糖添加于烘烤食品中,降低产品含糖量,赋予产品诸多生理功能,改善产品风味,使更多的消费者接受。

大豆糖蜜含有利于益生菌增殖的低聚糖,可以用来制作益生菌饮品,张敏等报道利用大豆糖蜜作为促进剂研制出益生大豆糖蜜双歧酸奶,试验结果表明,在100ml 的纯鲜奶中选择发酵剂添加量为7ml ,蔗糖添加量为5g~7g ,大豆糖蜜添加量为2g 时,获得了感官品质较好的大豆糖蜜双歧酸奶产品。

此外,大豆糖蜜还能像其它植物糖蜜一样,可以应用在建筑领域作为混凝土减水剂使用,可以延长凝固时间,使混凝土缓凝。

4结束语大豆糖蜜作为生产醇法大豆浓缩蛋白过程中产生的副产物,含有多种活性功能因子,可以用作提取大豆异黄酮、皂苷、大豆低聚糖和胰蛋白酶抑制素的原料。

大豆糖蜜可以作为发酵底物生产多种类型发酵产品。

此外,由于其组成化学成分的多样性和特殊性,大豆糖蜜还能应用于医药、食品、建筑等多个领域。

随着国内的醇法大豆浓缩蛋白产业不断发展,大豆糖蜜的综合利用是企业必须面对的难题。

研究开发利用大豆糖蜜,也一定会为企业创造更大经济效益。

(参考文献略)责任编辑:逄瑞王月粮油科技Grain &Oil Technology 53。

相关文档
最新文档