西医综合-生物化学基因信息的传递(三)

西医综合-生物化学基因信息的传递(三)(总分：37.00，做题时间：90分钟)一、不定项选择题(总题数：5，分数：37.00)∙ A.Klenow片段∙ B.连接酶∙ C.碱性磷酸酶∙ D.末端转移酶(1).常用于合成cDNA第二链的酶是A. √B.C.D.(2).常用于标记双链DNA3＇端的酶是A. √B.C.D.[解释] 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段(E.coli DNA-pol Ⅰ Klenow fragment)，又叫做Klenow聚合酶或Klenow大片段酶。

它是由大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ全酶，经枯草杆菌蛋白酶(一种蛋白质分解酶)处理之后，产生出来的分子量为76×10dal的大片段分子。

Kle-now聚合酶仍具有5＇→3＇的聚合活性和3＇→5＇核酸外切酶活性，但失去了全酶的5＇→3＇的核酸外切酶活性。

在DNA分子克隆中，Kle-noW聚合酶的主要用途有：①修补经限制酶消化的DNA所形成的3＇隐蔽末端；②标记DNA片段的末端；③cDNA克隆中的第二链cDNA的合成；④DNA序列测定。

∙ A.TATA盒∙ B.GC盒∙ C.CAAT盒∙ AAT盒（分数：25.00）(1).TFⅡD的结合位点是A. √B.C.D.(2).转录因子Sp1的结合位点是A.B. √C.D.RNA聚合酶Ⅱ启动转录时，需要一些称为转录因子的蛋白质，才能形成具有活性的转录复合体。

能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，统称为反式作用因子。

反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(TF)，有时称为通用转录因子或基本转录因子。

真核生物的TFⅡ又分为TFⅡA、TFⅡB等。

所有的RNA聚合酶Ⅱ都需要通用转录因子，这些通用转录因子有TFⅡA、TFⅡB、TFⅡD、TFⅡE、TFⅡF、TFⅡH，在真核生物进化中高度保守。

通用转录因子TFⅡD不是一种单一蛋向质，它实际上是由TBP 和8～10个TAFs组成的复合物。

TBP结合一个10bp长度DNA片段，刚好覆盖基因的TATA盒，而TFⅡD则覆盖一个35bP或者更长的区域。

此外，还有与启动子上游元件如GC盒、CAAT盒等顺式作用元件结合的蛋白质，称为上游因子，如Sp1结合到GC盒上，C/EBP结合到CAAT盒上。

这些反式作用因子调节通用转录因子与TATA盒的结合、RNA聚合酶与启动子的结合及起始复合物的形成，从而协助凋节基因的转录效率。

(3).变构调节和化学修饰调节的共同特点是∙ A.引起酶蛋白构象变化∙ B.酶蛋白发生共价修饰∙ C.属于快速调节方式∙ D.有放大效应A.B.C. √D.[解释] 酶活性的调节：①酶原与酶原的激活：消化管内蛋白酶以酶原形式分泌，不仅保护消化器官本身不受酶的水解破坏，而且保证酶在其特定的部位与环境发挥其催化作用。

此外，酶原还可以视为酶的贮存形式。

②变构酶：如果某效应剂引起的协同效应使酶对底物的亲和力增加，从而加快反应速度，此效应称为变构激活效应；效应剂称为变构激活剂(allosteric activator)，反之，降低反应速度者称为变构抑制剂(allosteric inhibitor)。

例如，ATP和枸橼酸是糖酵解途径的关键酶之一磷酸果糖激酶-1的变构抑制剂。

这两种物质增多时，此代谢途径受到抑制，防止产物过剩；而ADP和AMP是该酶的变构激活剂，这两种物质的增多激发葡萄糖的氧化供能，增加ATP的生成。

是体内快速调节的重要方式。

③酶的共价修饰调节：酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，这一过程称为酶的共价修饰(covalent modification)或化学修饰(chemicalmodification)。

酶的共价修饰包括磷酸化与脱磷酸化、乙酰化与脱乙酰化、甲基化与脱甲基化、腺苷化与脱腺苷化，以及-SH与-S-S-的互变等。

其中以磷酸化修饰最为常见。

酶的共价修饰是体内快速调节的另一种重要方式。

(4).DNA上的外显子(exon)是∙ A.不被转录的序列∙ B.被转录，但不被翻译的序列∙ C.被转录也被翻译的序列∙ D.调节基因序列∙ E.以上都不对A.B.C. √D.DNA上的外显子是被转录也被翻译的序列。

(5).下列关于核糖体的叙述，正确的是∙ A.是遗传密码的携带者∙ B.南rRNA与蛋白质构成∙ C.由snRNA与hnRNA构成∙ D.由DNA与蛋白质构成∙ E.由引物DNA和蛋白质构成A.B. √C.D.核糖体是糖质合成的场所，mRNA才是遗传密码的携带者。

核糖体是由rRNA和核糖体蛋白共同构成的，又称核糖体。

snRNA是核内小RNA，它在hnRNA和rRNA的转录后加工、转运及基因表达过程的调控方面具有重要功能。

在原核生物由DNA与蛋白质构成的为类核结构，在真核生物DNA和组蛋白共同构成核小体，它是染色质的基本组成单位。

引物DNA和蛋白质三者只在DNA复制起始时，引物形成、复制延长之初很短暂的时期在一起，并不形成特定结构。

(6).重组DNA技术中，常用到的酶是∙ A.限制性核酸内切酶∙ B.DNA连接酶∙ C.DNA解链酶∙ D.反转录酶A. √B. √C.D. √[解释] 重组DNA技术中常用的工具酶有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、反转录酶、DNA聚合酶Ⅰ、多聚核苷酸激酶、末端转移酶、碱性磷酸酶等。

不需DNA解链酶类。

(7).参与复制起始过程的酶中，下列哪一组是正确的∙ A.DNA-pol Ⅰ、DNA内切酶∙ B.DNA外切酶、连接酶∙ C.RNA酶、解螺旋酶∙ D.Dna蛋白、SSB E．DNA拓扑异构酶、DNA-pollA.B.C.D. √[解释] 参与复制有Dna A蛋白、解螺旋酶Dna B蛋白，rep蛋白、Dna C蛋白、引物酶(Dna G蛋白)、SSB(单链DNA结合蛋白)、拓扑异构酶等等。

DNA-pol Ⅰ、RNA酶、连接酶等均参与复制的终止过程。

DNA-pol Ⅰ本身具有5＇→3＇核酸外切酶活性及3＇→5＇核酸外切酶活性。

复制过程无须DNA内切酶参与。

(8).共同参与构成乳糖操纵子的组分有∙ A.三个结构基因∙ B.一个操纵序列∙ C.一个启动序列∙ D.一个调节基因A. √B. √C. √D. √[解释] 原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇地串联、密集于染色体，而共同组成一个转录单位--操纵子，如乳糖操纵子等。

乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，它们分别编码β-半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶，此外还含一个操纵序列O，一个启动序列P，一个调节基因I。

(9).DNA重组技术中，用来筛选重组体的方法有∙ A.标志补救∙ B.分子杂交∙ C.特异性抗体与产物结合∙ D.紫外分光光度计分析A. √B. √C. √D.重组体的筛选。

①直接选择法：a．抗药性标志选择：如果克隆载体携带有某种抗药性标志基因，转化后只有含这种抗药基因的转化子细菌才能在含该抗生素的培养板上生存并形成菌落，这样就可将转化菌与非转化菌区别开来。

如果重组DNA时将外源基因插入标志基因内，标志基因失活，通过有、无抗生素培养基对比培养，还可区分单纯载体或重组载体(含外源基因)的转化菌落。

噬菌体载体转化菌形成的噬菌斑也是一种筛选特征。

此法只适用于阳性重组体的初步筛选。

b．标志补救：若克隆的基因能够在宿主菌表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补，那么就可以利用营养突变菌株进行筛选，这就是标志补救。

酵母咪唑甘油磷酸脱水酶基因表达产物与细菌组氨酸合成有关。

当酵母DNA与人噬菌体载体结合后，再将重组子转染或感染组氨酸缺陷型大肠杆菌，在无组氨酸的培养基中培养。

因为只有带咪唑甘油磷酸脱水酶重组基因的菌株才能在无组氨酸的培养基中生长，所以，这样获得的生长菌即含有咪唑甘油磷酸脱水酶基因。

利用α互补筛选携带重组质粒的细菌也是一种标志补救选择方法。

c．分子杂交法：这是利用32P标记的探针与转移至硝酸纤维素膜上的转化子DNA或克隆的DNA片段进行分子杂交，直接选择并鉴定目的基因。

在分子生物学技术中，还有一种原位杂交技术是用于检测某一基因在组织内的定位表达，这与分子克隆筛选的原位杂交是两个不同的概念或技术，应注意区分。

②免疫学方法：如果克隆基因的蛋白质产物是已知的，可利用特异抗体与目的基因表达产物相互作用进行筛选，因此属非直接选择法。

免疫学方法特异性强、灵敏度高，尤其适用于选择不为宿主菌提供任何选择标志的基因。

分为免疫化学方法及酶免检测分析等。

(10).tRNA的前体加工包括∙ A.剪切5＇和3＇末端的多余核苷酸∙ B.去除内含子∙ C.3＇末端加CCA∙ D.化学修饰A. √B. √C. √D. √[解释] tRNA的前体加工包括：①剪切5＇和3＇末端的多余核苷酸；②去除内含子；③3＇末端加CCA；④化学修饰(甲基化)。

(11).下列选项中，属于顺式作用元件的有∙ A.启动子∙ B.增强子∙ C.沉默子∙ D.操纵子A. √B. √C. √D.[解释] 顺式作用元件是指可影响自身基因表达活性的DNA序列，可将真核基因的这些功能元件分为启动子、增强子及沉默子等。

启动子指的是RNA聚合酶结合位点周同的一组转录控制组件。

增强子是远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性表达、增强启动子转录活性的DNA序列。

沉默子为负性调节元件，对基因转录起阻遏作用。

操纵子是原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇地串联、密集于染色体上，共同组成的一个转录单位，操纵子包括启动序列、操纵序列、调节基因及结构基因。

(12).下列属于终止密码子的是∙ A.UCA∙ B.UCC∙ C.UAC∙ D.UAA E．UGCA.B.C.D. √[解释] 64个遗传密码其中61个密码子分别代表各种氨基酸，有3个密码子不代表任何氨基酸，而为肽链的终止信号，称为终止密码子，是：UAA、UAG、UGA。

(13).下列哪种酶不参加DNA的切除修复过程∙ A.DNA聚合酶Ⅰ∙ B.DNA聚合酶Ⅲ∙ C.AP内切核酸酶∙ D.DNA连接酶 E．蛋白质UvrA、UvrB等A.B. √C.D.[解释] DNA切除修复有不同方式：从糖基化酶起始作用的切除修复；UVrA、UVrB、UvrC的修复。

两种方式中都需要DNA聚合酶Ⅰ及连接酶，而前者尚需AP内切核酸酶，后者还需蛋白质UvrA、UvrB等，但两种方式均不需要DNA聚合酶Ⅲ，此酶在DNA复制中DNA链的延长上起主要作用。

(14).DNA复制需要：①DNA聚合酶Ⅲ；②解链蛋白；③DNA聚合酶Ⅰ；④DNA指导的RNA聚合酶；⑤DNA连接酶参加。

其作用的顺序是∙ A.4，3，1，2，5∙ B.2，3，4，1，5∙ C.4，2，1，5，3∙ D.4，2，1，3，5∙ E.2，4，1，3，5A.B.C.D.DNA的复制过程大致为由解链蛋白解开DNA双螺旋，由DNA指导的RNA聚合酶先合成—段起始引物，随之由DNA聚合酶Ⅲ催化DNA复制延长，另一随从链则合成冈崎片段，经RNA酶切除RNA引物后，由DNA聚合酶Ⅰ催化DNA聚合以填补空隙，最后由DNA连接酶将相邻的DNA片段连接起来。