食品微生物检验基本程序OK
食品微生物检验的基本程序.共45页文档
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36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
食品微生物检验的基本程序.
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
叙述微生物检验的基本流程
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在开展微生物检验工作之前，需要进行充分的准备。
微生物检测操作流程
微生物检测操作流程《微生物检测操作流程》微生物检测是一项重要的实验室技术，用于检测和鉴定各种微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
本文将介绍一般的微生物检测操作流程。
一、样品采集与处理1. 样品选择：根据实验目的选择适当的样品类型，如水样、食品样、土壤样等。
2. 采集样品：采集样品时要注意避免污染和交叉污染。
3. 处理样品：根据具体情况，对样品进行处理，如稀释、研磨、过滤等。
二、培养基的制备1. 选择合适的培养基：根据待检微生物的特性选择适当的培养基类型。
2. 制备培养基：按照标准的配方和操作规程制备培养基。
三、菌落计数1. 加样和摇匀：将样品加入培养基中，并充分摇匀。
2. 培养：将培养基装入培养皿或培养瓶中，进行恒温培养。
3. 菌落计数：根据菌落的外观、形态等特征，进行菌落计数。
四、纯化和鉴定1. 提取纯种菌：从培养基上选取单个菌落，进行传代培养，获得纯种菌。
2. 形态鉴定：通过观察微生物的形态特征，如形状、大小、颜色等，进行初步鉴定。
3. 生理生化特性鉴定：通过对微生物的生理生化特性进行检测，如氧需求性、产气性、酶活性等，进一步鉴定。
五、分子生物学检测（可选）1. 提取DNA/RNA：采用适当的方法提取待检微生物的DNA或RNA。
2. PCR扩增：利用聚合酶链式反应（PCR）扩增目标序列。
3. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，确定目标序列的存在与否。
六、结果分析与报告1. 结果解读：根据实验结果判断待检微生物是否合格。
2. 报告编写：撰写实验报告，包括实验方法、结果、分析和结论。
3. 结果验证：可以进行复核实验或委托第三方实验室进行验证。
以上即是一般的微生物检测操作流程，不同类型的微生物检测可能会有一些差异。
在实验中，操作人员应严格遵循操作规程，做好实验安全和样品处理，保证检测结果的准确性和可靠性。
简述微生物检验的工作的基本流程。
简述微生物检验的工作的基本流程。
微生物检验是一种常见的实验室技术，用于检测和鉴定各种微生物的存在和数量。
微生物检验的基本流程包括样品采集、处理、培养、鉴定和结果分析等环节。
首先是样品采集。
根据不同的检测要求，可以从不同的样品来源（如水、土壤、食品、医疗器械等）中采集所需的样品。
采集过程中需要注意避免污染，采集工具要经过严格的消毒处理，确保样品的纯净度和可靠性。
接下来是样品处理。
这一步骤主要是将样品进行预处理，以去除一些干扰物质，提高后续操作的准确性和灵敏度。
样品处理的方法包括过滤、稀释、浓缩、提取等。
通过这些处理，可以使样品更适合进行后续的培养和检测。
然后是样品培养。
培养是微生物检验的关键步骤，它可以使微生物在适宜的培养基上生长繁殖。
根据检测对象的特点和需求，可以选择不同的培养基、培养条件和培养时间。
在培养过程中，需要控制培养条件，如温度、湿度、气体组成等，以促进微生物的生长。
接着是样品鉴定。
鉴定是判断微生物种类和数量的关键步骤。
鉴定方法有多种，包括形态学观察、生理生化特性检测、分子生物学方法等。
通过观察微生物的形态、结构、色素、菌落形态等特征，以及检测其代谢产物、酶活性、生长速率等生理生化特性，可以初步确定微生物的种类。
而分子生物学方法，如PCR、DNA测序等，可以更准确地鉴定微生物的种类和亲缘关系。
最后是结果分析。
根据鉴定结果，可以对微生物的种类和数量进行分析和评估。
通过对检测结果的分析，可以判断样品是否符合相关标准和要求，评估其卫生安全性和质量合格性。
同时，还可以根据分析结果，制定相应的控制措施和改进方案，以保证生产和生活环境的卫生安全。
总体来说，微生物检验的基本流程是样品采集、处理、培养、鉴定和结果分析。
每个环节都非常重要，都需要严格控制操作步骤和条件，以确保检测结果的准确性和可靠性。
微生物检验在食品安全、医疗卫生、环境保护等领域具有重要的应用价值，能够有效预防和控制微生物相关疾病和问题的发生。
【优文档】食品卫生微生物学检验的一般程序PPT
三糖铁试验） 三糖铁试验）
三糖铁试验）
三糖铁试验） 三糖铁试验）
恒温培养
分离鉴别培养 样品处理和稀释------计数 前（预）增菌 前（预）增菌 样品处理和稀释------计数 前（预）增菌 纯培养 毒力测定 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 前（预）增菌 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 样品处理和稀释------计数 血清学测定（初步分群、进一步分型） 分离鉴别培养 分离鉴别培养 分离鉴别培养 采样
食品卫生微生物学检验的一般程序
食品卫生微生物学检验的一般程序
采样 样品处理和稀释------计数 前（预）增菌
选择性增菌 分离鉴别培养
纯培养 形态学观察 运动性检查 初步生化实验
（革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 三糖铁试验）
进一步生化实验（糖发酵、M.R., V-P.吲哚，特殊酶等） 血清学测定（初步分群、进一步分型） 毒力测定 结果分析报告
三糖铁试验）
三糖铁试验） 三糖铁试验）
结果观察
无菌取样
样品均质
样液稀释
ห้องสมุดไป่ตู้
前增菌等
样品接种
样品处理和稀释------计数 前（预）增菌 食品卫生微生物学检验的一般程序 食品卫生微生物学检验的一般程序 食品卫生微生物学检验的一般程序 食品卫生微生物学检验的一般程序 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 选择性增菌 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 食品卫生微生物学检验的一般程序 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 （革蓝氏染色 半固体培养或液体显微观察 前（预）增菌 样品处理和稀释------计数
微生物检测流程
微生物检测流程
微生物检测的流程包括以下步骤：
1. 采集样本：在无菌环境中采集少部分食品样本，对样本实施均质处理，稀释样液，接种，然后恒温培养处理后的样本，取出观察食品样本。
2. 染色和观察：必要时，还需对标本行染色后再观察，这可对致病菌性质、来源进行鉴别，更能排除污染因素，使标本致病菌检出率得到大幅度提升。
3. 分离培养：若在镜检环节发现标本上吸附的细菌，就需对标本实施分离纯化并将其接种于适宜的培养基上，再将空气与温度调整至适合细菌生长的数值，获得便于进一步鉴定细菌。
4. 细菌鉴定：通过细菌形态、菌落特点、酶类检测、血清学试验、生化反应等方式鉴定分析分离获得的标本，明确致病原因。
5. 药敏试验：对分离致病菌行体外抗菌药物敏感性试验，预测其治疗作用，明确相关细菌耐药性，协助医生在临床诊断治疗中针对部分感染性疾病时采取合适药物，提升临床疗效。
6. 报告：要求在24小时内出具镜检报告，在24小时或次日出具初步鉴定与直接药敏结果；通常最后鉴定与细菌药敏结果不超过3天，除血培养外，任何一项送检标本需均在24小时内预报。
如需更多信息，可以查阅食品安全类书籍或者咨询微生物专家。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物检验是一种重要的实验室技术，用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具，并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质，比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息，包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后，需要尽快进行处理，避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行，使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释，以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行，以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存，确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前，需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上，避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行，避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养，促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况，记录生长的数量和形态，用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时，需要进行鉴定和分析，确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准，进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读，判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
微生物检验的基本程序
微生物检验的基本程序1 检验前的准备2样品的采集3样品的送检4样品的处理方法5 致病菌检验参考菌群的选择6样品的检验7检验结果的报告检验前的准备1.准备好所需的各种仪器：如冰箱、恒温培养箱、显微镜等2.按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌，冷却后送无菌室备用。
3.准备好实验所需的各种试剂、药品，制备好普通营养琼脂或其他选择性培养基。
根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中备用。
4.做好无菌室或超净工作台的灭菌工作，提前1h灭菌30~60min。
5.检验人员的工作衣、鞋、帽、口罩等灭菌后备用。
6.工作人员进入无菌室后，实验没有完成之前不得随便出入无菌室。
微生物实验室检验<>流程无菌取样—样品均质—样液稀释—样品接种—恒温培养—结果观察食品微生物检测常规微生物项目：细菌总数、大肠菌群、酵母总数、霉菌总数，此类细菌不致病，但会严重影响食品的外观及风味。
目前常用微生物培养法来计数菌落，允许有该类菌落，但菌落总数不能超标。
致病微生物项目：沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157：H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等。
致病微生物在食品中是绝对不允许存在的，所以快速检测食品中是否存在有致病微生物，是食品安全检验的重中之重。
食品微生物检验<>指标我国卫生部颁布的食品微生物<>指标有菌落总数,大肠菌群和致病菌三项。
1.菌落总数：菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数。
2.大肠菌群：大肠菌群是寄居于人及温血动物肠道内的肠居菌，它随着的大便排出体外。
食品中如果大肠菌群数越多，说明食品受粪便污染的程度越大。
3.致病菌：致病菌既能够引起人们发病的细菌。
对不同的食品和不同的场合，应该选择一定的参考菌群进行检验。
4.霉菌及其毒素：我国还没有制定出霉菌的具体指标，鉴于有很多霉菌能够产生毒素，引起疾病，故应该对产毒霉菌进行检验。
一食品微生物检验的一般步骤
3、样品的保留 （1）阴性样品：在发出报告可及时处理； （2）阳性样品：在发出报告以后3天才能处理
1.捣碎均质法
• 将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从 中取25g放入带225mL稀释液的无 菌均质杯中，8000~10000r/min均 质1~2min即可。
2.剪碎振摇法
• 将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从 中取25g检样进一步剪碎，放入带 225mL稀释液和直径5mm左右玻璃 珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速 振摇50次，振幅要大于40cm。
2、半固体样品采样方法
• 无菌操作打开包装，用无菌勺子从几 个部位挖取样品，放入无菌容器。
3、固体样品采样方法
• 大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同的 部位割取，并注意其代表性；
• 小块大包装食品应从不同部位的小块上切 取样品，放入无菌容器。
• 若为检验食品的污染情况，可取表层样品； 若为检验食品品质的情况，应从深部取样。
×××××采样单
样品编号：━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 产品名称（商品名）______规格型号__________注册商标_____________ 生产厂家_______________通讯地址__________邮政编码□ □ □ □ □ □ 受检地点_______________通讯地址__________邮政编码 □ □ □ □ □ □ 采样地点_______________采样日期__________采样基数______________ 生产日期_______________批 号__________产品依据标准__________ 有效成分及含量 ____________________________________________________________ 检验目地________________检测项目_____________________________
微生物检测基本流程
微生物检测基本流程微生物检测是一项常见的实验室技术，用于检测样品中是否存在微生物，以及评估其数量和种类。
微生物检测的基本流程可以分为样品采集、预处理、培养和鉴定四个步骤。
首先是样品采集。
样品可能来自不同的环境，如食品、水、空气或生物体，采集方式因样品类型和检测目的而有所不同。
常见的采集方式包括刷取、切割、研磨或抽取液体。
采集样品时需要严格遵守无菌技术，以防止外部微生物污染。
其次是预处理。
预处理步骤旨在从样品中去除非目标微生物，并减少干扰物质的影响。
预处理方法包括过滤、离心、稀释和加入抑制剂等。
其中过滤可以去除悬浮的微生物，离心可以使微生物沉淀，稀释可以减少微生物数量，加入抑制剂可以防止微生物的生长。
接下来是培养。
培养是将样品中的微生物接种到合适的培养基上，使其生长和繁殖。
培养基的选择应考虑到不同微生物的需求。
常见的培养基包括琼脂、半固体培养基和液体培养基。
培养需要控制好培养温度、湿度、氧气含量和光照条件，以促进微生物的生长。
最后是鉴定。
鉴定是确定培养物中微生物的种类和数量。
鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性测定和分子生物学技术。
形态学观察可以通过显微镜观察微生物的形态和结构特征，如形状、大小、颜色和运动方式。
生理生化特性测定可以通过对培养物的生长情况、代谢产物和酶活性等进行测定。
分子生物学技术则可以通过PCR、DNA测序等方法识别微生物的遗传信息。
在整个微生物检测过程中，实验室必须严格遵守一系列质量控制标准，以确保结果的准确性和可靠性。
常见的质控措施包括使用阳性和阴性对照样本进行对比，建立外部质量控制计划，进行日常验证和仪器校准等。
总结起来，微生物检测的基本流程包括样品采集、预处理、培养和鉴定四个步骤。
这些步骤的正确执行可以确保微生物检测结果的准确性和可信度，为实验室提供可靠的参考数据，以支持食品安全、环境卫生和疾病诊断等领域的工作。
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主要内容：
第一节 检验前准备 第二节 样品的采集 第三节 样品的送检 第四节 样品的处理 第五节 致病菌检验参考菌群的选择 第六节 样品的检验 第七节 检验结果的报告 第八节 检验后样品的处理
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基本程序
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第一节 检验前的准备
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（三）世界粮农组织(FAO)的取样方案
第一节 检验前的准备
(1)准备好所需的各种仪器，如冰箱、恒温水浴 箱、显微镜等
(2)各种玻璃仪器，如吸管、平皿、广口瓶、试 管等均需刷洗干净,湿法(121℃，20min)或干 法(160℃~170℃，2h)灭菌，冷却后送无菌室 备用。
(3)准备好实验所需的各种试剂、药品，做好普 通琼脂培养基或其他选择性培养基，根据需要 分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水 浴中或保存在4℃的冰箱中备用。
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（二）美国FDA的取样方案
（1）对于随机取样通用原则：如无特殊 规定，可根据总件数开方决定联样件数， 一件两份，但不小于12件，不多于36件， 当总件数少于12件时，第件都要取样；
（2）对食品中沙门氏菌的抽检： 根据受沙门氏菌危害以及食品的消费 者分类分为三类：
18.06.2020
按照三级采样方案设定的指标，在n个样品中，允许全部样品 中相应微生物指标检验值小于或等于m值；允许有≤c个样品其 相应微生物指标检验值在m值和M值之间；不允许有样品相应 微生物指标检验值大于M值。
例如：n=5，c=2，m=100 CFU/g，M=1 000 CFU/g。含义是 从一批产品中采集5个样品。
三级法：设定取样数n，指标值m，附加指标值M， 允许介于m与M之间的样品数c。只要有一个样品值超 过M或c规定的数就判整批产品不合格。
n：同一批次产品应采集的样品件数；
c：最大可允许超出m值的样品数；
m：微生物指标可接受水平的限量值；
M： 微生物指标的最高安全限量值。
18.06.2Βιβλιοθήκη 201218.06.2020
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3. ICMSF对食品中微生物的危害度分类与 抽样方案说明
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（二）美国FDA的取样方案
美国食品与药品管理局(FDA)的取样方案与 ICMSF的取样方案基本一致，所不同的是严 重指标菌所取的15、30、60个样可以分别混 合，混合的样品量最大不超过375g。也就是 说所取的样品每个为100g，从中取出25g， 然后将15个25g混合成一个375g样品，混匀 后再取25g作为试样检验，剩余样品妥善保 存备用。
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第一节 检验前的准备
(4)无菌室或超净工作台的灭菌；如用紫外灯法 灭菌，时间不应少于45min，关灯半小时后方 可进入工作；如用超净工作台，需提前半小时 开机。必要时进行无菌室的空气检验，把琼脂 平板暴露在空气中15min，培养后每个平板上 不得超过15个菌落。
(5)检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后 备用。工作人员进入无菌室后，实验没完成前 不得随便出入无菌室。
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（一）ICMSF取样方案
国际食品微生物规范委员会(简称ICMSF)的取样方案是依 据事先给食品进行的危害程度划分来确定的，将所有食品 分成三种危害度
Ⅰ类危害：老人和婴幼儿食品及在食用前可能会增加危 害的食品；
Ⅱ类危害：立即食用的食品，在食用前危害基本不变； Ⅲ类危害：食用前经加热处理，危害减小的食品。 将检验指标对食品卫生的重要程度分
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（二）美国FDA的取样方案
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（二）美国FDA的取样方案
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（三）世界粮农组织(FAO)的取样方案
1979年版FAO食品与营养报告中的食品质量 控制手册的微生物学分析中列举了各 种食品的微生物限量标准，按ICMSF的取样方 案判定的。
表3-3 各种即食食品的微生物水平标准（p39)
基本原则： 根据下列情况设定抽样方案并规定其不同采样数： 各种微生物本身对人的危害程度各有不同。 根据食品经不同条件处理后，其危害程度变化情况： 降低危害度；危害度未变；增加危害度
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ICMSF取样方案
二级法：设定取样数n，指标值m，超过指标值m的 样品数为c，只要有≥c个样品检验值大于m，就判定整 批产品不合格。
成一般、中等和严重三档
根据以上危害度的分类，又将取样方案分成
二级法和三级法
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1. ICMSF的采样基本设想及基本原则
基本设想： 在某些情况下，用于分析的样品可能代表所抽“一批” 样品的情况； 在“多批”食品的情况下必须考虑诸多因素，包括检验 目的、产品及被抽样品的性质、分析方法。
➢ 若5个样品的检验结果均小于或等于m值（≤100 CFU/g）， 则这种情况是允许的；
➢ 若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100 CFU/g <X≤1 000 FU/g），则这种情况也是允许的；
➢ 若有3个及以上样品的检验结果位于m值和M值之间，则这种 情况是不允许的；
➢ 若有任一样品的检验结果大于M值（>1 000 CFU/g），则这 种情况也是不允许的。
举例(二级法)
按照二级采样方案设定的指标，在n个样品中， 允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值大于 m值。
如：n=5,c=2,m=100CFU/g，某批样品检验结 果为：3个样品小于100CFU/g，2个样品大于 100CFU/g。
这批样品是否合格？
18.06.2020
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举例(三级法)
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第二节 样品的采集
第二节 样品的采集 一、采样的目的和意义
1、便于食品卫生质量监督管理; 2、鉴别食品中是否存在有毒有害物质; 3、为新产品、新资源利用、新食品、
新化工产品、新工艺投产前进行卫生鉴 定。
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第二节 样品的采集 二、抽样方案
Ö（一）ICMSF取样方案； Ö（二）美国FDA的取样方案； Ö（三）世界粮农组织（FAO）取样方案； Ö（四）我国的食品取样方案。