细胞培养技术

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细胞培养技术

细胞培养技术

• 形态:与成纤维细胞相似。 • 胞体呈梭形或不规则三角形,中央有圆形 核,胞质向外伸出2-3个长短不同的突起。 细胞群常借原生质突起连接成网。生长时 呈放射状。 • 凡由中胚层间充质来源的其他组织细胞, 如血管内皮、心肌、平滑肌、成骨细胞等, 也多呈成纤维细胞形态。但无分泌纤维的 能力,只是一种习惯上概括的称法而已。
细胞形态过渡的过程
• • • • • • 一般附于支持物上数分钟后,既由球形移 行成圆饼形,有人把这种状态的细胞称为 发射延展细胞,过一段时间后,延展细胞 过渡为极性细胞。成纤维细胞不经放射延 展。而上皮细胞经过延展细胞后进入极性 细胞时,细胞相互连接成一片。
五、细胞周期
• 细胞分裂间期:G1期、S期、G2期。 • 细胞分裂期:前期、中期、后期、末期。 • • 按5×104~2×105个/ml细胞接种,到 在支持物上生长满,从一瓶细胞分成两瓶 细胞,叫传代。一般习惯上称做一代,但 实际上细胞能增殖6-7代。
六、细胞的生物特性
• 1、正常的细胞离体培养后,可维持2倍体 性质,但在一般情况下,2倍体细胞只能传 30-50代,生长一年左右,以后停止生长、 衰老死亡。 • 2、肿瘤细胞则可生长时间长,获得无限的 生长能力。 • 3、胰酶可使细胞衣性质改变,使细胞易从 支持物上脱离下来。
七、细胞生存条件和代谢
4、多形性细胞型

• •
如神经组织的细胞。难以确定它们的稳 定形态。 以上划分,主要是根据细胞的一般形态 特征和描述上的方便,但实际上,环境改 变,形态也会改变。如HELA细胞(人宫颈 癌细胞),本属上皮细胞型,但在过酸或 过碱的培养液中,可变成长梭形,在适宜 的PH值时细胞又可复原。
(二)、悬浮型细胞
• 处代培养和细胞数少时对PH变动耐受力差。 CO2高或CO2低对细胞都不利,保持CO2 恒定的浓度(5%)即可维持培养基中氢离 子浓度。 • 密闭瓶口的培养方法,随CO2浓度的升高, PH不断变化。 • 开放的瓶皿中培养,能保持氢离子的浓度, 有利于细胞生长。

组织和细胞培养技术

组织和细胞培养技术

组织和细胞培养技术引言:组织和细胞培养技术是生物科学领域中的一项重要技术,它可以在体外条件下培养和繁殖各种组织和细胞。

这项技术的出现,不仅为生物学研究提供了便利,也在医学、农业等领域起到了重要作用。

本文将从组织培养和细胞培养两个方面介绍这项技术的原理、应用以及未来发展方向。

一、组织培养技术组织培养技术是指将植物或动物的组织切割并在适当的培养基上进行培养,使其继续生长和繁殖的过程。

其基本原理是通过提供适宜的培养基和条件,提供细胞分裂所需的养分和环境,使组织细胞在体外不断生长和分化。

在组织培养技术中,培养基的配方是关键。

培养基通常由无机盐、有机物、植物激素和维生素等组成。

无机盐提供细胞所需的微量元素和离子,有机物为细胞提供能量和碳源,植物激素调节细胞的生长和分化,维生素则是细胞代谢所必需的。

通过调整这些成分的比例和浓度,可以促进组织细胞的生长和分化。

组织培养技术在植物学研究中有着广泛的应用。

例如,通过组织培养技术,可以实现无性繁殖,即通过分离植物体的一部分组织并在培养基上进行培养,最终得到与母体完全相同的新植株。

此外,还可以通过组织培养技术研究植物的生长发育过程、细胞分化和基因表达等。

二、细胞培养技术细胞培养技术是指将动植物的细胞分离并在培养基中进行培养,使其在体外条件下继续生长和分裂的过程。

与组织培养技术相比,细胞培养技术更为广泛,可以培养各种类型的细胞,包括动物细胞、植物细胞和微生物细胞等。

细胞培养技术的基本原理是提供适宜的培养基和条件,使细胞在体外环境下获得生长和分裂所需的养分和环境。

培养基的配方与组织培养技术类似,但通常会根据不同类型的细胞进行调整。

细胞培养技术还需要控制培养条件,如温度、湿度和气体含量等,以提供最适宜的生长环境。

细胞培养技术在医学研究和生物工程领域有着广泛的应用。

在医学中,细胞培养技术可以用于研究疾病的发生机制、筛选药物和治疗方法等。

例如,可以通过培养人体癌细胞株来研究肿瘤的生长和转移机制,从而寻找治疗癌症的新方法。

细胞培养技术在生物医学中的应用

细胞培养技术在生物医学中的应用

细胞培养技术在生物医学中的应用随着生物医学研究的不断深入,细胞培养技术逐渐成为一个应用广泛且必不可少的技术。

细胞培养技术是指将活体细胞通过合适的营养基、温度、气体和pH等环境条件,进行体外培养和增殖的一种技术。

在生物医学领域,细胞培养技术被广泛应用于药物研究、基因工程、疾病预防和治疗等方面。

一、细胞培养技术在药物研究中的应用药物的研发过程需要大量的药物筛选和临床试验。

细胞培养技术可以通过体外培养肿瘤细胞、细菌或病毒等,进行药物的筛选和毒性评价。

通过细胞培养技术可以模拟人体的生理环境,将待测的药物加入培养基,观察细胞对药物的反应,进而评估药物的安全性和疗效。

此外,利用细胞培养技术还可以研究药物在细胞内的作用机制,从而更好地发现新药物和优化已有药物。

二、细胞培养技术在基因工程中的应用基因工程技术可用于研究生物的基本遗传机制、改良和增加生物的特性。

而细胞培养技术则是基因工程技术最常用的手段。

利用细胞培养技术可以将异种基因导入细胞中,通过改变细胞的生理过程,实现基因转录、翻译、调节等一系列的生物学活动。

例如,利用细胞培养技术可以合成人类蛋白质,用于药物研发或提高生物产量,同时也可以用于研究肿瘤等人类疾病的基因重组和基因治疗。

三、细胞培养技术在疾病预防和治疗中的应用细胞培养技术可以为医学实践提供有用的工具,例如利用细胞培养技术可以制备细胞疫苗。

将一些生长健康的细胞培养起来,使其特异性地转移给免疫系统或直接用于疫苗生产。

该疫苗可诱导机体免疫系统对特定病原体产生免疫保护,从而达到疾病防治的目的。

此外,利用细胞培养技术和基因工程技术可制备重组疫苗、基因疫苗和肿瘤疫苗等,有助于人类预防和治疗各种疾病。

细胞培养技术有着广泛的应用前景,但是在实际操作中存在某些技术难点。

例如,细胞培养环境的优化、细胞品种的选择、培养基和添加剂的优化等都可能影响到细胞培养实验结果的准确性。

因此,在细胞培养技术的应用中,技术人员要严格遵守试验标准,保证实验结果的准确性。

细胞培养技术培训ppt课件版

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严格执行突发事件上报制度、校外活 动报批 制度等 相关规 章制度 。做到 及时发 现、制 止、汇 报并处 理各类 违纪行 为或突 发事件 。
严格执行突发事件上报制度、校外活 动报批 制度等 相关规 章制度 。做到 及时发 现、制 止、汇 报并处 理各类 违纪行 为或突 发事件 。
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见的是贴附于平面支持物细胞。在一般光镜下 生存中的细胞是均质而透明的,结构不明显。
细胞在生长期常有1-2个核仁,在细胞机能 状态不良时,细胞轮廓会增强,反差增大。
若胞质中时而出现颗粒、脱滴和腔泡等, 表明细胞代谢不良。
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倒 置 显 微 镜
back
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液 氮 罐
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细胞生物学实验技术

细胞生物学实验技术

细胞生物学实验技术细胞生物学实验技术是现代生命科学研究中的关键环节,它为研究人员提供了深入了解细胞结构、功能和相互作用的途径。

本文将重点介绍一些常见的细胞生物学实验技术,包括细胞培养、染色技术、分离技术和显微镜观察等。

一、细胞培养技术细胞培养是一项基础性技术,它可以将细胞从体内取出并在适当的培养基中进行增殖和维持。

细胞培养的首要任务是提供适当的培养基,其中含有必需的营养物质、生长因子和适当的温度、湿度和气体条件。

细胞培养技术广泛应用于细胞生物学实验、组织工程、药物研发等领域。

二、染色技术染色技术是细胞生物学实验中常用的方法之一,它使研究者能够对细胞内各种结构和分子进行可视化观察。

常用的染色方法包括荧光染色、酶标染色和核酸染色等。

荧光染色利用荧光标记的抗体或染料,可使特定的细胞结构或分子在显微镜下发出荧光信号,从而观察其位置和表达水平。

酶标染色则通过酶与底物的反应,使细胞或组织显示出颜色等信号。

核酸染色则利用特定染料与细胞核酸结合,以观察DNA或RNA的分布情况。

三、分离技术分离技术在细胞生物学实验中具有重要作用,它可以将不同类型的细胞或细胞组分进行分离和纯化。

常用的分离技术包括细胞离心、流式细胞术和免疫磁珠分离等。

细胞离心是通过离心机将混合细胞悬液分离成上清液和沉淀,从而获得纯化的特定类型细胞。

流式细胞术则通过流式细胞仪测量细胞的大小、形态和表面标记物,从而实现对细胞的高通量分离和分析。

免疫磁珠分离则利用特定抗体结合在磁珠表面,以实现对需要纯化的细胞或细胞组分的选择性捕获。

四、显微镜观察显微镜观察是细胞生物学实验的重要手段,它使研究者能够观察到细胞内不同的结构和过程。

传统光学显微镜可实现对细胞形态和部分细胞器的观察,但其分辨率有限。

近年来,随着超分辨显微镜技术的发展,研究者们能够突破传统光学显微镜的分辨率极限,实现对亚细胞结构和分子过程的观察。

总结细胞生物学实验技术在现代生命科学研究中发挥着至关重要的作用。

细胞培养技术

细胞培养技术

细胞培养重要名词
核型(Karyotype):一个细胞全部染色体的组成和 所有特征。 合核体(Synkaryon):两个细胞融合后形成的单核 杂种细胞。 活力(Viability):以100个细胞中存活细胞数表示。
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细胞培养重要名词
接触抑制(Contact inhibition):指细胞相互接触后 失去运动(移动)的现象。
上世纪初(1907年)美国科学家Harrison和Carrel创建 的、以淋巴液为培养基在试管内成功地培养了蛙胚神经 组织。50年代在培养容器、培养液及技术操作上都进行 了大的改进,使细胞培养进入一个突飞猛进的发展阶段。
70年代,随着遗传缺陷细胞株的培育,杂交瘤技术制备 单克隆抗体,癌基因转染及基因工程出现,使细胞培养 技术不仅用于研究生命科学,也成为生物工程、基因工 程和组织工程等学科的生产手段。
溶酶原激活剂;激素:EPO和促黄体生成素等;杀虫剂:杆状病 毒;肿瘤特异抗原;癌胚抗原;通过杂交瘤生产的各种单克隆 抗体;细胞本身(如干细胞);皮肤重植等。
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三、对细胞培养的评价
(三)细胞培养技术的商业化 对于生物技术所使用的各种细胞株的价值,现 尚难作出评价。1998年,美国市场就达3.5-4亿美 元,而且每年还以6-8%的速度增长。美国细胞株供 应公司和机构及国内供应单位可在网上查询 。
Expession Systems 杆病毒细胞株的主要供应者
Life Tech
供应基础研究用的特异化细胞株
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三、对细胞培养的评价
(四)组织(细胞)培养的局限性 细胞(组织) 培养 ,包括器官培养终归是离体
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三、对细胞培养的评价
invitrogan 有关不同细胞株的用户 论坛ATCC 各种细胞株的主要供应者 提供 有关细胞株的筛选

细胞培养无菌操作基本技术

细胞培养无菌操作基本技术细胞培养是现代生物学研究中常用的一种实验技术,能够使细胞在体外条件下生长和繁殖。

无菌操作是细胞培养过程中非常重要的一项技术手段,可以保证细胞培养环境的无菌纯净,避免细胞被外部微生物污染。

本文将介绍细胞培养中常用的无菌操作基本技术,并结合实例进行详细说明。

无菌操作基本技术主要包括以下几个方面:1.实验前准备在进行无菌操作前,首先需要准备好实验所需的培养基、培养器具和其他实验工具。

这些器具和工具需要经过高温高压灭菌处理,以确保其无菌。

此外,实验人员还需佩戴无菌手套、穿戴无菌实验服,并对实验台面进行彻底的清洁消毒,保持实验环境的无菌。

2.灭菌操作在进行无菌操作前,需要对培养器具进行灭菌处理。

常用的灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌两种。

干热灭菌是将培养器具置于高温烘箱中,持续加热若干小时,以达到灭菌目的。

湿热灭菌则是将培养器具置于高压高温的蒸汽中,进行高压灭菌。

此外,对于一些无法耐受高温高压的培养器具,还可使用化学灭菌方法,如使用过氧化氢和酒精进行消毒。

3.无菌操作技术在进行无菌操作时,需要遵循一定的操作规范。

首先,实验人员应将实验器具放入无菌工作台中,在UV灯的照射下进行灭菌处理。

然后,实验人员需要将自己的双手放入无菌手套中,并使用无菌皮培养工具进行操作。

接下来,需要准备好含有培养基的培养皿,并用无菌注射器将细胞转移到培养皿中。

在操作过程中,需要注意避免造成培养基的污染,尽量减少对培养基的接触时间,以防止细菌或其他微生物的污染。

4.维持无菌操作环境在进行细胞培养过程中,需要维持无菌操作环境。

实验人员应避免在实验台面上散落细胞培养基、细胞碎片或其他可能造成污染的物质。

细胞培养箱和无菌安全柜的门不可长时间打开,以防止空气中的微生物进入工作区域。

并且需要定期对无菌安全柜和细胞培养箱进行清洁和消毒。

同时,实验室人员需要经常进行手部清洁,并定期更换无菌手套和实验服,保持实验环境的无菌。

细胞培养中的无菌操作是进行细胞培养实验的基础,能够产生可靠的实验数据,并在细胞学研究中发挥重要作用。

细胞培养技术的应用与发展

细胞培养技术的应用与发展细胞培养技术已经成为了现代生命科学研究的重要工具之一,随着技术的不断发展与创新,其在医学、工业、农业等领域中的应用越来越广泛。

本文将从细胞培养技术的基本原理、应用及未来发展趋势等方面进行论述。

一、细胞培养技术的基本原理细胞培养技术是指通过体外培养的方式,使细胞在相对理想的营养、温度、氧气、二氧化碳、水分等条件下生长、繁殖和分化,并保持其生物学的特性。

具体而言,细胞培养技术包括以下几个方面。

1. 细胞的来源细胞培养的第一步是选择合适的细胞来源,包括原代细胞、细胞系和细胞株。

其中原代细胞是从组织或器官中分离出的未经连续培养的细胞;细胞系是一组经连续次传代和分离的细胞,具有特定的生物学特性;细胞株则是从细胞系中特定的细胞分离而来,保留了一定程度的细胞特性。

2. 细胞的培养条件对于不同的细胞类型,其生长繁殖的最适温度、培养基成分、营养物质、生长因子等条件也不尽相同。

因此,在细胞培养过程中,需要根据具体的需求设计出最适合细胞生长的培养条件,保证其能够正常生长繁殖,并保持特定的生物学特性。

3. 细胞的分离和传代在细胞培养中,细胞的分离和传代也是非常重要的环节。

细胞分离的目的是把细胞从组织或器官中分离出来,单独培养;而细胞的传代则是指将已经培养的细胞分割成两个或多个部分,继续培养,保持其生长繁殖的能力。

二、细胞培养技术的应用1. 医学领域细胞培养技术在医学领域中的应用广泛,例如用于研究人类生理、病理以及药物毒性等方面。

此外,细胞培养技术还可以用于制备干细胞和肿瘤细胞等细胞种,以供疾病治疗或药物研发之用。

在肿瘤治疗方面,细胞培养技术可以用于研究肿瘤细胞的特性以及药物对肿瘤细胞的作用机制,为临床治疗提供参考。

2. 工业领域在工业领域中,细胞培养技术也被广泛应用于生物制品的生产过程中。

例如,在生物药品的制备过程中,细胞培养技术可以用来制造细胞培养物,这是制备生物制品的重要步骤。

3. 农业领域在农业领域中,细胞培养技术可以被用作繁殖和改良农业作物。

细胞培养技术的发展历程

细胞培养技术的发展历程细胞培养技术是指将单个细胞或组织细胞在合适的培养基中进行体外培养,以便研究细胞的生物学特性和进行相关实验。

随着科学技术的进步,细胞培养技术得到了长足的发展,为生物医学研究、药物筛选和组织工程等领域提供了强有力的支持。

本文将从细胞培养技术的起源开始,梳理其发展历程,并介绍一些重要的应用。

一、起源细胞培养技术的起源可以追溯到19世纪末,当时德国生物学家埃尔恩斯特·埃尔门德尔首次成功地将组织细胞培养于离体环境中。

他利用鸟胚的细胞培养实验,为后来细胞培养技术的发展奠定了基础。

二、早期发展20世纪初,细胞培养技术得到了进一步的发展。

1912年,美国生物学家亨利·麦克莱兰(Ross Granville Harrison)成功地将脊椎动物的神经细胞培养了数天,并观察到了神经细胞的生长和分化。

这一突破为后来的组织细胞培养提供了有力的依据。

随着培养基的改良和培养条件的优化,细胞培养技术在20世纪中叶取得了长足的进展。

1948年,美国细胞生物学家乔治·盖雅在培养基中添加鸡胚液,成功地培养出了人类胚胎肾细胞。

这一突破标志着细胞培养技术进入了一个新的阶段。

三、细胞系的建立20世纪50年代,细胞系的建立成为细胞培养技术的重要发展方向。

细胞系是指从原代细胞中分离出来的、能够在体外长期生长和繁殖的细胞群。

1951年,美国生物学家乔治·盖雅与吉斯特·萨尔特成功地建立了人类胚胎肾细胞系,被称为“Hela细胞”。

这一细胞系的建立对于研究细胞生物学和药物筛选具有重要意义。

四、培养技术的改进随着细胞培养技术的发展,人们对培养条件进行了不断的改进。

1960年代,美国细胞生物学家菲利普·拉斯克和约翰·哈米尔顿开发出了一种新的培养基,被称为“DMEM”,为细胞培养提供了更适宜的生长环境。

此后,培养技术的改进主要集中在培养基的配方和培养条件的优化上。

人们通过添加多种生长因子、维生素和抗生素等物质,使细胞在培养基中能够更好地生长和分化。

细胞培养技术


三、培养细胞技术
(二)细胞来源 (2) 消化培养法 与组织块培养法区别: A. 用酶制剂处理组织块,除去细胞间
质,使细胞分离,形成细胞悬液; B. 细胞生长方式多为单层。
优点:更易摄取营养、排除代谢产物生长 较快。
缺点:操作繁杂,易污染;消化可能对细 胞有损伤。
精品课件
三、培养细胞技术
(二)细胞来源 2. 细胞系(cell line) 原代培养物开始第一次传代培养后的细
底物:胶原、玻璃、塑料、其它细胞
血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白
和纤粘素、胶原等糖蛋白(生长基质),这些
带正电荷的糖蛋白的Байду номын сангаас贴壁因子先吸附于底物
上,悬浮细胞再与吸附有促贴壁因子的附着。
进口塑料培养瓶涂有生长基质(化学合成的功 能基团)
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精品课件
精品课件
潜伏期
此时细胞有生长话动,而无细胞分裂。
单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单
克隆抗体。
精品课件
细胞培养目的和作用
基础研究 (1) 药物作用机理; (2) 基因功能; (3) 疾病发生 机理。
2、生物制药 疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗,艾滋病疫苗
等),肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。 基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的
过滤)
精品课件
二、培养细胞相关条件
(二)培养用品
(1)培养瓶(25 、75 cm3)
6孔)
培养板(96、48、24、12、
培养皿(各种直径规格)
精品课件
二、培养细胞相关条件
(二)培养用品 (2)离心管(15、50 ml) (3)移液管、吸管 (4)冻存管、EP管 (5)试剂瓶等。
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二、培养细胞相关条件
生物安全柜分类
一级:可保护工作人员和环境而不保护样 品,目前已很少用。
二级:提供工作人员、环境和产品的保护。
A(A1和A2)
B(B1和B2)
三级:生物安全3、4级实验室用。
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生物安全柜
ESCO A整C理2版-4S1
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生物安全柜
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三级生物安全柜
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诊断用和药用单克隆抗体生产。
细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,
生物活性物质等。
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二、培养细胞相关条件
(一) 实验室准备
1. 无菌操作实验室 无菌操作间、缓冲间、更衣室等。
2. 生物安全柜(超净工作台)
生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以 及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用 来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料, 使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感 染性气溶胶和溅出物而设计的。
除非必须,一般不建议作此热处理。
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二、培养细胞相关条件
(二)细胞培养用试剂 (3)缓冲液 Hanks、PBS 4℃保存,避免Leabharlann 照;用前放在37℃温热。整理版
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二、培养细胞相关条件
(4)抗生素
工作浓度 储存温度
penicillin
100 units/ml
streptomycin 100 ug/ml
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二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂 (2)血清
使用:5 ~ 20%。 保存:–20~-70℃储存;
4℃存放勿超过一个月。 解冻步骤:
-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室 温下全溶后再分装或使用。
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二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂
血清解冻后发现有絮状物出现,该如何处理?
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二、培养细胞相关条件
血清分类
3、普通进口胎牛血清
如Hyclone南美胎牛血清(SV30087)
4、国产的各种系列胎牛血清 国产的胎牛血清,国内没有严格意义的胎牛血
清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而国内都是 剖腹产出胎牛,8小时左右取血,然后,进行过滤 分装。
5、其他血清 新生牛血清,小牛血清,一般国产的。
二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂 (1)培养基 MEM,DMEM,RPMI1640 4℃保存,避免光照;用前放在37℃温热。
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二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂 (1)培养基
水 无机盐 氨基酸 维生素 其他成分——葡萄糖、酚红、HEPES、丙酮酸钠
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(1)Hyclone 北美特级胎牛血清(SH30070.03) (2)Gibco北美特级胎牛血清(16000-044)
2、优等级胎牛血清 (1)Hyclone加拿大优等胎牛血清(SH30396)
(2)Hyclone澳大利亚优等胎牛血清(SH30084) (3)Gibco澳大利亚胎牛血清(10099-141)
原因:脂蛋白的变性;
血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)
在血清解冻后,也会存在于血清中,也是造成 絮状物的主要原因之一。这些絮状物的产生不 会影响血清本身的质量。
去除方法:可以将血清分装至无菌离心管
内,以400g 稍微离心,将上清液加入培养基内
一起过滤。我们不建议您直接过滤血清以去除
这些絮状物,因为它可能会阻塞过滤膜。
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二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂 (1)培养基
培养基选择:按提供细胞来源的要求准备。
什么情况下选择无酚红培养基: 酚红影响到实验结果 流式细胞仪检测细胞样品
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二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂 (2)血清
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二、培养细胞相关条件
血清分类 1、特级胎牛血清(最高级别的)
单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单
克隆抗体。
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细胞培养目的和作用
基础研究
(1) 药物作用机理; (2) 基因功能; (3) 疾病发生机理。
2、生物制药
疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗,艾滋病疫苗 等),肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的 一些细胞生长因子如干扰素,粒细胞生长因子,胸腺肽 等。
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二、培养细胞相关条件
(二)培养用品 (1)培养瓶(25 、75 cm3) 培养板(96、48、24、12、6孔) 培养皿(各种直径规格)
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二、培养细胞相关条件
(二)培养用品 (2)离心管(15、50 ml) (3)移液管、吸管 (4)冻存管、EP管 (5)试剂瓶等。
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细胞培养目的和作用
1、科学研究
药物研究与开发
新药筛选:如化学合成药物药效研究,中药有效成分 筛选与鉴定等。
疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎 病毒疫苗,艾滋病疫苗等),肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细 胞生长因子研究与开发等。
细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开 发,人参皂甙,紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
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二、培养细胞相关条件
(三)细胞培养用试剂
血清热灭活:
56℃, 30 分钟加热已完全解冻之血清。加热 过程中须规则摇晃均匀。目的:使血清中补体 成份失活。
启动的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑 肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细 胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究、培养ES 细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热 灭活血清。
二、培养细胞相关条件
3.相关仪器设备 (1)CO2培养箱 (2)倒置显微镜、普通显微镜及照相系统 (3)冰箱(4度,-20度,-80度) (4)超纯水系统(电阻率≥ 18.2MΩ.cm ) (5)细胞存储器(液氮罐,深低温冰箱、-80
度冰箱)
(6)高温高压灭菌装置、清洗装置 (7)滤菌相关仪器(针式滤器,泵加压过滤) (8)离心机、天平、pH仪、移液枪等
细胞培养技术
冯晓桃 广西中医药科学实验中心
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一、细胞培养概念
从机体内取出组织或细胞,在体外模拟体内的生理环 境,在无菌、适当温度和一定营养条件下进行孵育培 养,使之生存、生长,并维持其结构和功能的方法。
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细胞培养特点
1、条件可控:研究影响因素 2、体外: 可用各种手段研究 3、长期: 遗传性状 4、大量提供条件相同的细胞
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