长效土霉素注射液在猪体内的药代动力学研究
治疗猪气喘病的综合措施
治疗猪气喘病的综合措施作者：王传朴蔺汇涛李进来源：《中国动物保健》2022年第08期摘要：猪气喘病是生猪较为高发的一种疾病，虽然致死率不高，但是治愈难度较大，流行范围较广，会对生猪生长造成严重抑制。
基于此，下文笔者首先分析了猪气喘病的流行特点、临床症状、病理变化、诊断方法，然后着重探讨了猪气喘的预防、治療措施，以期为广大生猪养殖人员提供参考。
关键词：猪;气喘病;预防;治疗猪气喘病也被称为猪支原体肺炎，是一种由猪支原体引发的呼吸道疾病，主要以气喘、咳嗽为临床表现。
生猪一旦感染该病，生长速度会严重放缓，饲料转化率会严重下降，如果治疗不及时还会引发慢性肺炎或继发感染其他疾病，而这势必会对生猪养殖效益造成不良影响。
因此，在生猪养殖过程中，养殖人员必须对猪气喘病加强辨别，切实做好猪气喘病预防、治疗工作。
1 流行病学1.1 传染源隐性带毒猪和患病猪是该病主要传染源。
新疫区发病多是因为从外引进隐性带毒猪，未经隔离观察或疫病检查，就直接与原有猪群混合饲养所致;旧疫区发病多是因为母猪隐性带毒，不断向外界散布猪肺炎支原体，进而对仔猪造成感染，导致仔猪患病。
1.2 易感群体野猪、家猪是该病的易感群体，不同品种、性别、年龄的生猪、野猪对该病都具有易感性。
但是尤其以断奶仔猪、哺乳仔猪易感性最强，其次是哺乳母猪、妊娠母猪，成年育肥猪一般不会发病，通常呈慢性、隐性经过。
除此之外，纯种土猪相较于纯种引进猪、杂交猪发病率相对较高，长白、大约克、杜洛克等双肌臀杂交猪易感性较差，即使发病也仅仅会表现出轻微咳嗽症状[1]。
1.3 传播途径呼吸道传播是该病的主要传播途径，隐性带毒猪、患病猪在打喷嚏、咳嗽时，病原会随分泌物、飞沫排出体外，对环境及其他健康猪造成感染。
1.4 流行特点该病没有明显的季节特性，一年四季均可发生，但是在潮湿、雨雪、寒冷的冬春季节最为高发。
除此之外，卫生条件、饲养管理也会对该病的流行及发生产生重要影响。
如果圈舍湿度过大、温度过高，饲料营养不足、品质较低，会使该病的发病率增多、病死率提高、病程时间延长、病情加重;反之，如果圈舍条件良好，饲料营养充足，会使该病的发病率、致死率显著下降，病症明显缓和，病程时间明显缩短，而这对于患病猪病情的恢复也是极为有利的。
多西环素研究进展
多西环素(Doxycycline)又名脱氧土霉素、强力霉素,为四环素类常见抗菌药物之一。
其化学名称为6-甲基-4-(二甲氨基)-3,5,10,12,12α-五羟基-1,11-二氧代-1,4,4α,5,5α,6,11,12α-八氢-2-并四苯甲酰胺盐酸盐半乙醇半水合物,分子式为C 22H 24N 2O 8(图1),分子量为512.93[1]。
多西环素作为半合成类抗菌药,其抗菌活性和组织穿透力强,并具有体内分布广,临床上使用无明显肾毒性副作用,半衰期较长、较高的生物利用度等诸多优点。
盐酸多西环素对革兰氏阳性菌、阴性菌、支原体、衣原体和立克次氏体等有明显的抗菌效果。
盐酸多西环素粉针剂、注射液等多种制剂在我国兽医临床上已得到较为广泛的应用。
目前,主要用于防治畜禽支原体(M.Pneumonia )感染引起的肺炎,大肠杆菌(E.coli )、沙门氏菌(Salmonella )引起的腹泻,布氏杆菌病(Bru⁃cellosis )、鹦鹉热(Psittacosis )以及水产养殖、养蜂中多种感染性疾病的预防和治疗[2,3]。
1理化性质四环素类为具有α并四苯衍生物,引起该类药物表现不同的生物学特性的关键在于其四环素母核5、6、7位置上取代基的不同[4]。
与同类药物比较,盐酸多西环素因其四环素母核5、6取代基不同,所以其脂溶性表现较好,使透过生物膜的穿透能力大大提高,体内吸收快速且分布广泛[5],其抗菌活性也增强,表现为其可以对细菌产生杀菌作用。
因此,使用盐酸多西环素也可降低其耐药菌株的产生,同时表现出与天然四环素类无明显交叉耐药性,而且在体内代谢的消除半衰期t 1/2β长达15~22h,其持续的治疗作用表现较好。
临床上常用的多西环素的药物形式为其盐酸盐(Doxycycline Hyclate),物理形状为结晶性粉末状,颜色为淡黄色或黄色,无臭而味苦。
在水或甲醇中易溶解,乙醇或丙酮中呈现微溶状态,在氯仿中则几乎不溶解[6]。
兽医药理学
兽医药理学第一章总论▪掌握内容一、药动学二、药效学三、影响药物作用的因素四、合理用药一、药物代谢动力学研究内容：药物的跨膜转运药物体内过程：机体对药物的处置（disposition）吸收(absorption)分布(distribution)代谢(metabolism)排泄(excretion)简称ADME体内药物浓度（血药浓度）动力学规律1.简单扩散大部分药物均通过这种方式转运。
药物的解离度与体液的pH对扩散产生明显的影响。
酸性药物（如乙酰水杨酸、青霉素、磺胺等）在碱性较高的体液中有较高浓度，碱性药物（如利血平、红霉素、土霉素等）则在酸性体液中浓度较高。
2.主动转运3.易化扩散4.胞吞和胞饮5.离子对转运一、药物的吸收（absorption）概念是指药物从用药部位进入血液循环的过程。
除静脉注射药物直接进入血液循环外，其它给药方法均有吸收过程。
影响因素：给药途径剂型药物的理化性质动物的种属给药途径：内服、注射、呼吸道、皮肤影响胃肠道吸收的因素：1）药物剂型：药物制剂的释放速率和胃肠中的溶解速率影响药物吸收速率和程度。
溶解的药物和液体剂型较易吸收。
2）胃肠排空作用：排空速率会影响药物进入小肠的速率。
适当的肠蠕动可促进固体药物制剂的崩解和溶解有利于药物的吸收。
3）pH值：胃肠液的pH能明显影响药物的解离度，酸性药物在胃中易吸收，碱性药物在小肠中吸收。
4）药物的相互作用5）首过效应：首过消除或第一关卡效应，指内服药物从胃肠道吸收经门静脉系统进入肝脏，在肝药酶和胃肠道上皮酶的联合作用下进行首次代谢，使进入全身循环的药量减少的现象分布是指药物从全身循环转运到各器官、组织的过程。
总体分布不均匀，但血液中分布均匀。
影响分布的四个因素：药物的理化性质：脂溶性高，非解离型、小分子物质分布广。
血浆蛋白结合率组织的血流量药物对组织的亲和力体液pH和药物的解离度体内屏障三、药物的排泄药物或其代谢物从体内通过排泄排出体外，主要排泄途径为肾脏排泄和胆汁排泄，其它组织器官也参与某写物质的排泄。
猪传染性鼻炎与高热性疾病的防治技术
展， 鼻腔分泌物增 多， 甚至鼻腔流出血液 。 此病以吻部扭 曲变 形． 上颌短于下颌 ， 面部皮肤 皱缩 为主要外部特征 ， 而高热病
是 由多种 病原引起 的 以高热症 状为 主的一种难治 的猪病， 引起 高热 的病 原很 多。 有病 毒性 、 细 菌性 、 霉形体 、 寄生 虫
等。
、
猪传染性鼻炎防治技术
二、 猪高热性疾病 防治技术
１ 、 症 状 识 别
１ 、 症状识别 发病猪表 现打喷嚏 、 呼吸困难和鼾声 ， 病猪摇头用 鼻拱 地、 擦墙， 鼻孔有分泌物流 出。 如无并发症 ， 体温正常， 但不同 年龄猪发病其症状各异 。 乳猪最早 可在 ３ ￣ ４日龄感染 发病 ，
内眦部形成半 月状条纹 的泪斑 。
２ 、 防 治措 施 ２ ． １ 免 疫 接 种
４ １ ￣ Ｃ￣ ｄ ２ ； 厌食 、 呕吐； 皮肤 发红 、 眼睑水肿青紫． 眼结膜炎 ： 鼻 腔有分泌物，咳嗽 、气喘等呼吸道症状 。仔猪发病率可达
１ ０ ０ ％、 死亡 率可达 ５ ０ ％以上， 母猪流产 率可达 ３ ０ ％以上． 成 年猪也可发病死亡 。
养， 最好全进全 出； 饲喂优质营养全面的配合饲料； 母猪产后
即肌 肉注射 ２ ０ ％的长效土霉素 １ ０ ～ ２ ０ ｍｕ头。 预防母 猪乳房
炎、 子宫炎和无乳综合病 ： 仔猪分别在 ３日龄 、 ７日龄 、 ２ １日
龄注射 ２ ０ ％的长效土霉 素 ０ ． ５ ｍ Ｌ ／ 头：新购仔猪立 即用 ２ ０ ％ 的长效 土霉素 ２ － ３ ｍＬ ／ 头肌注， 到场后在饲料 中添加抗 菌药 物， 待猪 群稳定后 即可进行伪 狂犬病 、 猪瘟 、 口蹄疫补 防工 作， 猪群长期实行“ 脉冲式 ” 给药， 按程 序定期进 行免 疫接 种：
多西环素注射液在猪体内的药动学及生物利用度研究
多西环素注射液在猪体内的药动学及生物利用度研究李伟;段新华;杨阳;朱许强;钟家林;沈祥广;丁焕中【期刊名称】《华南农业大学学报》【年(卷),期】2010(031)004【摘要】健康猪7头,按拉丁方设计进行单剂量静注多西环素普通注射液、肌注10%和20%多西环素注射液的药动学试验,给药剂量根椐体质量以多西环素计均为20 mg/kg.以高效液相色谱法测定血药浓度,血药浓度-时间数据用WinNonlin计算机程序分析处理.猪静注多西环素注射液的主要药物动力学参数:药时曲线下面积(AUC)为(141.76±20.38) mg·h·L-1,体清除率(Cl)为(0.14±0.02) L·kg-1·h-1,表观分布容积(Vss)为(1.36±0.17) L·kg-1,消除半衰期(t1/2β)为(9.44±2.60) h;肌注10%和20%多西环素注射液的主要药物动力学参数分别为:AUC为(75.74±21.22)和(90.86±12.11) mg·h·L-1,达峰时间(tmax)为(1.05±0.24)和(1.30±0.30) h,峰浓度(Cmax)为(2.55±0.65) 和(2.28±0.26) μg·mL-1,t1/2β为(32.74±8.66)和(58.36±7.33) h,生物利用度(F)为(52.42±8.97)%和(64.49±6.22)%.结果表明10%和20%多西环素注射液肌注后吸收较快,消除缓慢,消除半衰期延长,给药后72 h仍能达到对常见病原菌的有效血药浓度.【总页数】4页(P121-124)【作者】李伟;段新华;杨阳;朱许强;钟家林;沈祥广;丁焕中【作者单位】华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642;华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642;广州市科虎生物技术研究开发中心,广东,广州,510540;华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642;华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642;华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642;华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642【正文语种】中文【中图分类】S859.7【相关文献】1.多西环素注射液在猪体内的药动学及生物利用度研究 [J], 马海英2.盐酸头孢噻呋混悬注射液在猪体内的药动学及目对生物利用度研究 [J], 张卫元;陈翠兰;黄文辉;张翠平;徐永磊;张世硕;李在建3.长效土霉素注射液在猪体内的药动学及相对生物利用度研究 [J], 廖雪玲;张炳旭;丁焕中4.泰地罗新注射液在猪体内的药动学及生物利用度研究 [J], 闫超群;黎健业;张申;谢顺;胡浪;顾欣;曹莹;黄士新;黄显会5.复方双氯芬酸钠注射液在猪体内药动学和生物利用度研究 [J], 李宇琛;陈鸿雨;吴天兴;陆小松;韩孝欣;刘芳;王东亮;李龙飞;卜仕金因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
替米考星的药理及临床应用
替米考星具有很强的抗菌作用，药代动力学特征优良，同时还能提高动物体的免疫力，另外，最新研究显示，替米考星个别猪病防治上，还具有抗病毒作用。
而且与临床常用的其它抗生素之间无交叉抗药，在多种动物疾病的临床治疗上都取得了显著的效果。
与泰乐菌素相比，其用药量少、作用持久、副作用小、体内残留低、安全无毒，是一种经济、安全、有效的畜禽常用抗菌和促生长新型兽药，在当前动物疾病复杂化、非典型化的状态下，为临床用药带来了新的思路和方法。
因此，替米考星在未来畜禽疾病的控制中将发挥更重要的作用，具有广阔的应用前景。
一、作用机理（一）抑制细菌蛋白合成替米考星是半合成的畜禽专用大环内酯类抗生素，具有16元环的内酯结构，环上的羟基与糖或取代糖以甙键的方式连接，大环张力较少，因而性质稳定。
替米考星主要通过抑制细菌的蛋白合成起到抗菌作用，其与50S核糖体亚单位可逆性的结合，抑制移位酶的活性，影响核糖体的位移过程，阻碍肽链的延长和蛋白质的合成，为生长期抑菌剂。
替米考星是目前最为安全的抗生素之一，其毒性较小的部分原因是其不与哺乳动物的80S核糖体结合。
（二）促进机体的防御功能替米考星具有协同巨噬细胞产生杀菌作用。
在正常状态时，存在于肺泡内的巨噬细胞能将集聚在感染部位的细菌、支原体等吞入后，利用自身的消化酶将吞入的病原体杀灭，然后从被杀死的菌体内释放所谓的抗原免疫成分，在淋巴细胞内传递信息，促进抗体的产生。
但实际上，被吞入巨噬细胞内的病菌有部分未能被杀灭，而投给替米考星后，则能协同巨噬细胞消化酶杀灭病原菌。
研究还证实，猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)两种病毒同时感染时引起猪体内巨噬细胞数量的减少，同时降低其免疫功能，而此时投给替米考星，则能协助巨噬细胞使其免疫功能接近正常。
替米考星还能抑制中性粒细胞的坏死，具有诱导细胞凋亡的效应，防止炎症加剧。
此外，替米考星还可能作为免疫介质，调节机体免疫功能，从而促进机体防御功能。
恩诺沙星治疗猪副嗜血杆菌病的效果
中国动物保健2024.01摘要：猪嗜血杆菌病又称为格拉泽病，临床表现为多发性纤维性浆膜炎和关节炎，是由猪嗜血杆菌引起的一种接触性传染病。
感染该病后出现体温升高、关节肿大、咳嗽等症状，给养猪场带来很大的经济损失。
恩诺沙星是第四代喹诺酮类抗生素，具有高效、广谱、副作用小。
在治疗细菌类疾病具有很好的作用，该药对革兰阳性菌和阴性菌均有效，对支原体、衣原体等也有效；对治疗猪嗜血杆菌具有很好的效果，联合用药能够很快地减轻疾病症状。
关键词：恩诺沙星；猪副嗜血杆菌；治疗效果恩诺沙星治疗猪副嗜血杆菌病的效果王相花（诸城市贾悦畜牧兽医站山东潍坊262200）收稿日期：2023-03-14作者简介：王相花（1971.10—），女，本科，副高级兽医师，主要从事畜牧兽医工作。
随着我国集约化经济不断发展，规模化养猪的扩大伴随着养猪密度不断地增加。
研究调查发现，在我国养猪大省中，断奶5d 后的哺乳仔猪一直到70日龄保育猪阶段容易发生猪副嗜血杆菌病。
临床上表现为关节肿大跛行、皮毛无光泽、采食量下降生长速度慢，呼吸道表现为咳嗽、呼吸困难，淋巴结肿大等。
该病具有较强的感染性，其传播途径广，因此可以感染整个圈舍，死亡率在30%左右，给养殖户带来较大的经济损失，因此必须给予高度重视。
本文对如何治疗猪副嗜血杆菌病以及该病出现的临床症状进行总结，给后续科研人员提供借鉴。
1国内外猪副嗜血杆菌疾病研究进展猪副嗜血杆菌病是由猪副嗜血杆菌（HPS ）引起，Angen 等[1]研究报道，HPS 有15种血清型，其中欧洲、我国等地4、5和13型最常见。
血清分型中的抗原是脂多糖（LPS ），不同血清型之间的交叉保护性差，每一种血清型有特殊的临床表现。
HPS 定植于猪上呼吸道中，病猪主要表现于脑膜炎、关节炎等特征。
毒性最强的血清型有1、5、10、12、13和14型。
2007年余群英[2]在研究中提到，保育猪发生HPS 与对应型的毒力相关，毒力不同。
对应的临床症状也不用，一些菌株毒力强会使感染猪出现全身临床症状，一些菌株毒力弱只表现呼吸道症状。
替米考星固体分散体在猪体内的药代动力学研究
2021年第5期(总第225期)糾畜希欢浚矗doi:10.3969/j.issn.1006-4907.2021.05.013替米考星固体分散体在猪体内的药代动力学研究唐达,伍涛※(重庆市畜牧科学院，重庆402460)摘要:研究替米考星固体分散体在猪体内的药代动力学特征，并评价其与市售替米考星肠溶颗粒的生物等效性。
釆用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中替来考星浓度，通过PKSolver2.0药动学程序计算药动学参数。
市售替米考星肠溶颗粒和替米考星固体分散体在猪体内的药动学行为均符合一级吸收一室模型,分别为(2.72±0.14)、(2.55±0.21)h,分别为(1.53±0.26)(1.81±0.19)|ig/mL,AUCo-oo分别为(33.31±2.19)^(45.47±2.62)小g-h/mL,替米考星固体分散体相对肠溶颗粒的相对生物利用度提高至136.5%。
结果表明，替米考星固体分散体具有更好的肠溶缓释作用及更高的生物利用度，具有一定的生物安全性，在猪体内保持药效时间更久。
关键词：替米考星；固体分散体;猪;药代动力学;生物利用度中图分类号:S859.796文献标识码:A文章编号:1006-4907(2021)05-0029-04Pharmacokinetics of Tilmicosin Solid Dispersion in SwinesTang Da,Wu Tao*(Chongq ing A cademy of A nimal Sciences,Chongqing402460,PRC.)Abstract:Study the pharmacokmetics of tilmicosin solid dispersion in pigs and evaluate its bioequivalence with commercial tilmicosin enteric coated granules.The plasma concentrations of tilmicosin were analyzed by HPLC.The pharmacokinetic parameters were calculated by PKSolver2.0pharmacokinetic program.The concentration-time curve of tilmicosin solid dispersion and commercial tilmicosin enteric coated granules were fitted a two compartment open model with first order absorption.The main pharmacokinetic parameters of were(2.72±0.14)(2.55±0.2l)h,were (1.53±0.26)(1.81±0.19)ug/ml,AUC“were(33.31±2.19)(45.47±2.62)ug»hAnl.The relative bioavailability of t ilmicosin SD group was increased to136.5%compared with enteric coated granule group.In conclusion,tilmicosin solid dispersion shows better performance of sustained release, which improves biosafety and last longer in pig.Keywords:Tilmicosin;Solid dispersion;Swine;Pharmacokinetics;Bioequivalence替米考星(Tilmicosin,TMC)是畜禽专用大环内脂类抗生素叫是预防和治疗呼吸道疾病的首选药物叫市场份额巨大％本研究选用性能稳定旳的肠溶性载体丙烯酸树脂Eudragit L100和新型两亲性非离子型共聚物网聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)为联合载体，制备了替米考星固体分散体(JMC SD),使替米考星过胃、肠溶靶向控释,有效减少口服替米考星在胃中溶解基金项目：重庆市技术创新与应用发展专项面上项目《肠溶缓释型替米考星固体分散体的创制与应用》(cstc2019jscx-msxmX0344)o 作者简介：唐达(1988-),男，重庆荣昌人，助理研究员，硕士,研究方向：兽药制剂,***************。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
思诺沙星是我国兽医临床中常用的合成抗菌药物，有研究表明，ＴＭＰ作为抗菌增效荆，可与多种抗菌药物 配伍。本制剂以恩诺沙星为主药，辅以ＴＩｖＩＰ增强其抗菌效力已在临床得到证实。近年来，混悬型注射剂在我国 兽药生产中日益受到重视，主要缘于混悬型注射剂使难溶性药物注射给药成为了可能，而且混悬型注射剂本身 由于药物颗粒较大，吸收较慢而具有长效作用，因其可减少给药次数而深受用户欢迎。但混悬型注射剂要求颗 粒大小要均匀，不能沉降太快，通针性和再分散性好，而实际生产中其物理稳定性往往较差，因而我们在进行 处方设计时根据混悬剂稳定的原理，选用助悬剂以提高分散介质的黏度而避免药物颓粒沉降，选用润湿剂改善 恩诺沙星的疏水性，又根据正交设计筛选其虽佳用量，得到了质量稳定的复方恩诺沙星混悬型注射剂，这样的 处方和工艺适合工业化生产。
减少猪对外界的应激反应，从而尽可能的反映土霉素在猪体内的变化。猪单剂量肌肉注射２５ ｍｇ，ｋｇ土霉素后的 血药浓度时间曲线符合一级吸收二室模型，从矗。、Ｃ一和ｆｌｎＢ可以看出此药品在猪体内分布较快，持效时间 长。ｙｌ，Ｆ为４．６４８Ｌ／ｋｇ，大于１．０Ｌ／ｋｇ，表明药物的组织浓度高于血浆浓度，药物在体内的分布广泛，或组织蛋 白对药物有高度结台‘”。结果显示：单剂量肌肉注射土霉素后，药物在体内能逐渐被吸收，并广泛分布后，消 除缓慢，同时也显示了药物在组织中能长时间的维持较高的血药浓度，有利于药物本身的药效发挥，以达到长 效之目的。
１４
ｍｍ
川
柏
∞
曲
仲
湫飞
０
Ｂ
０
。
１Ｌ．Ａ怂～一一一／Ｌ～ｊ
ｃ
ｌ
、、一一、－一——一一————一————一
ｍＡＵ
４０
∞
㈨㈥
ｊ…ｌ｛
２０
｛…８
Ｌｊ
６
１０
｛㈠ｉ！
ｆ｛
ＬＬ—Ｊ
８ Ｌ——～一——～
。
ＤＡＤｌ
ｍＡＵ
Ｃ，Ｓｌｇ；２２。．４ＲｅＩ－－３６０，１００｛＾ＭＯｘｌｃ－１、＾ＭＯｘｕＥＢ诅ＭＯ∞２７０Ｄ）
冷冻离心５ ｍｉｎ，去除沉淀，取上清液。
２．３
ＨＰＬＣ色谱条件预柱：ＺＯＲＢＡＸ
ＳＢ Ｃ１８（４．６ ｍｍｘｌ２．５ ｔｏｎｉ，５．０
ｖｒｎ）；色谱柱：ＺＯＲＢＡＸ Ｅｘｔｅｎｄ—Ｃ１ｓ（４．６
ｉｎｍｘ２５０
ｎｌｍ，５．０岬）；流动相为溶液Ｂ．乙腈（９５：５），在线洗脱；流速０．８ ｍＬ／ｍｉｎ：柱温３０。Ｃ；检测波长３６０Ⅻ；
程。
２．５血浆样品的测定
各血浆样品补加１００
ｒｔＬ
０，０１ｍｏｌ／Ｌ盐酸，按２．２项处理，取上清液５０皿注入色谱系
统进行分析，用其测得的峰面积在标准曲线上进行多点外标法校准，得其血浆土霉素浓度。
一５ｌ一
２．６回收率和精密度试验
用空白血浆加土霉索对照品溶液，配制成浓度分别为１．００、４．００、１６，ｏｏ“ｇ＾ｎＬ的
测得１．ｏｏ、４．ｏｏ、１６．００ ｐｇ／ｍＬ的平均批内变异系数为１．９％、１．４％和１．１％，ｎ＝４－），批间变异系数为２．６％、２．３％
和３．Ｏ％，ｎ＝１６。结果见表３。
３．５药代动力学研究结果猪单剂量肌肉注射２５ｍｇ／ｔｇ土霉素后，其猪血中的药物浓度如表３所示，药时曲线
见图２。
血药浓度经ＤＡＳ２．０拟和处理，最佳房室为二室，权重为ｌ／ｃｃ，得到的药代动力学参数见表４。 ４讨论 ４．１方法学 在反相ＨＰＬＣ法测定土霉素含量的方法中，色谱柱填料中残存的硅醇基团与金属离子对土霉素的
归方程为：ｙ＝１９．０７７ｘ＋０４“，相关系数ｒ＝０９９９ ７，定量限为０．２５¨ｇ／ｍＬ，定量限的回收牢和精密度为９１．０％和
４．２％。
３．３回收率试验结果
低、中、高（１．００、４．００、１６．００ｐｇ／ｍＬ）添加血浆标准样品的平均回收率分别为９４．５％、
９７．Ｏ％和９７．３％，ｎ：４，变异系数为２．５％、２．９％和１，ｌ％，ｎ＝４，结果见表２。平均回收率都大于８０．０％，方法准 确度能够满足药代动力学的要求。 ３．４精密度试验结果 ４批血浆样品，每批测定１．００、４．００、１６．００ｐｇ／ｍＬ三种添加浓度，每种浓度测定４次，
ｍ眺ｇ土霉素后的血药浓度一时间曲线符合一级吸收二室模型，参数为ｚｋ＝２
ｈ，ｃｎ。＝７．６２
ｐｇ／ｍＬ，ｔ１部＝６９．３１５ ｈ，ＶＩｌＦ＝．４．６４８ Ｌ／ｋｇ，表明长效土霉素在体内逐渐吸收和广泛分布后能长时间的在组织中维
持较高的血药浓度，能达到长效之目的。本方法能对兽药药代动力学研究和长效土霉素注射液合理给药方案提 供参考。
作者简介：蔡金华（１９７８年一），男，大学本科，助理兽医师．从事兽药、饲料检捌工作。
一５０
虫国直丝璺医主金勤塑苎旦兰佥盒Ｚ堂堂生生金垒童墨
关键词】
高效液相药管理条例》的实施和兽药ＧＭＰ推行，新兽药和兽药新剂型正逐步进入正常的研发、申报、 生产和监测轨道。本文就兽药的药代动力学方面进行了一定的研究．并以长效土霉素注射液为例，建立了其在 猪体内的药动方法学，并对药动参数进行了分析，以供国内研究参考。 Ｉ材料
长效土霉素注射液在猪体内的药代动力学研究
蔡金华，顾欣，刘雅妮
（上海市兽药饲料监察所，上海２０１１０３）
【摘要】建立了土霉素在猪血浆中含量测定的高效液相色谱法，研究了其在猪体内的药代动力学。土霉素的线 性范围０．２５～３２．０ ｔ．，ｇ／ｍＬ，相关系数０．９９９７，最低定量限为０．２５．ｇ／ｍＬ。药代动力学的研究结果主要为猪单剂 量肌肉注射２５
ＳｙｍｐｏｓｉｕｍｏｆＶｃｔｃｎｎａｒｖＤｒｕ２Ｂｒａｎｃｈ．ＣｈｉｎｅｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆＡｎｉｍａｌ
ａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ
浆，能使血浆上清液完全澄清透明，极大的降低了血浆的黏度和色度，并且能够有效的提取土霉素，专属性良 好，色谱图详见图ｌ。在研究药代动力学时，通常认为。标准曲线的浓度范围要覆盖药代动力学参数Ｃｍａｘ的 １／１０～１／２０．国内报道猪肌肉注射剂量４０ ｍｇ／ｋｇ的Ｃｍａｘ为（２２．３０＋±２ ０９）Ｉｔｇ／ｍＬ［２］和（１５．９６Ｊ：２．３６）¨ｇ／ｍＬ［２］， 而本方法标准曲线定量范围大，定量检测限低能达到０．２５ ｐｐｍ，故完全能满足猪体内血药浓度测定的要求，可 适用于药代动力学的研究。 ４．２药动学 在采血时本方法采用了４头猪轮流间隙采血，再进行单纯集聚数据分析法进行分析，能够尽量
峰面积，测定血样中土霉素浓度。 ２．８数据处理
３ ３．１
所得药时数据用动力学软件ＤＡＳ２．０处理。
结果
方法的专属性
土霉素的色谱图见图１。可以看出，血浆中土霉素与内源性杂质分离良好，土霉素的保留
时间约为７．４ｍｉｎ左右。 ３．２标准曲线和定量限 结果见表１。血浆中土霉素在０．２５～３２．００ ｒｔｇＣｒｒｍ范围内具有良好的线性关系，其回
样品，充分混匀，以２５ｍｇ瓜ｇ单剂量肌肉注射。给药后按下列时间点前腔静脉采血：０ｍｉｎ（给药前）、５ｍｉｎ， １５血ｎ、３０ｍｍ、４５ＩＩｌｉｎ、６０ｍｉｎ、２ｈ、４ｈ、８ｈ、１２ｈ、２４ｈ、３２ｈ、４８ｈ、５６ｈ、７２ｈ、８０ｈ、９６
１６１ ｈ、１０４ｈ、１２０ｈ、１４９ｈ、
ｈ。采血采用轮流顺序。肝素钠抗凝，离心取血浆，置于．２０＂Ｃ备用。按照２．５项下方法操作，记录色谱图和
ｍ㈠ｉ㈨
，ｏ｜
０ ２
：ｊ㈨ｌ
。Ｌ：！．．：二型＼二＝＝二竺
４ ６ ８ １０ １２
１４
ｉ…
ｆ＼
Ｉ
。。
１６
１８
ｍｉｎ
Ａ．土霉素对照品（５．０岭ＪｍＬ）ｓ Ｂ舔加空白血浆（５．ｏ ＩＩｇ＾ｎＬｈ Ｃ．空白血浆；Ｄ．用药后加ｍｉｎ的阳性血浆 图Ｉ土霉素的ＨＰＬＣ色谱图
５３——
Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈ￡＇２００６
水。
乙腈（色谱级），盐酸，高氯酸，柠檬酸，柠檬酸三钠，７，－－胺四乙酸二钠均为分析纯，超纯
１．４实验仪器
Ａｇｉｌｌｅｎｔ
１１００高敛液相色谱仪：Ｇ１３７９Ａ脱气机，Ｇ１３１１Ａ四元泵．Ｇ１３１３Ａ自动进样器，Ｇ１３１６Ａ
柱温箱，Ｇ１３１５ＡＤＡＤ检测器，Ａ．１０．０２色谱工作站；ＺＨ一２型振荡器，天津药典标准仪器厂；高速冷冻离心机，
低、中、高三种已知浓度的药物血浆样品。而后。每种浓度样品按２．２项方法处理，取上清液５０ⅡＬ注入色谱系 统进行分析测定，用其测得的峰面积在标准曲线上进行多点外标法校准，得其加样回收率和批内精密度。批间 精密度则采用以上三种浓度的空白血浆加对照品的药物血浆样品，每批每种浓度制各４份，总共测４批，计算 其批问变异系数。 ２．７土霉素药物代谢动力学试验 将４头猪试验前饲养７ｄ，饲喂不含抗菌的全价日料。取长效土霉素注射液
Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅ ２００６
Ｓｖｎｍｏｓｉｕｍ ｏｆＶｅｔｅｆｉｎｍｗＤｒｕ２Ｂｒａａｃｈ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＡｎｉｍａｌ ａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ
艺研究中十分普遍。本试验通过对正交设计筛选出来的处方进行反复验证，结果表明该设计是一种比较简便、 快速而具有科学性的实验设计，能正确地反映客观实际情况。
Ｏ．０ｌ、０．０６和０．００１ ｍｏｌ／Ｌ的混合溶液Ａ。再按混合溶液Ａ：Ｎ，Ｎ．二甲基甲酰胺－－４００：１２０的比例混合成溶液Ｂ。
２．１．３
２０％（Ｖ／Ｖ）高氯酸溶液
量取２０ｍＬ的高氯酸，加入８０ｎｉＬ的水，混合。
２．２血浆样品的处理
取４００ ｐＬ的血浆，加入１００¨Ｌ２０％高氯酸溶液，震荡５ ｓ，而后１５０００ ｒ／ｍｉｎ４℃高速
谱图影响很大，往往形成拖尾。试验中，四种流动相【ｌ为超纯水（含０．０５ ｍｏｌ／Ｌ的磷酸氢二钠，Ｏ．０５ ｍｏｌ／Ｌ柠檬 酸，Ｏ．０１ｍｏｌ／Ｌ乙二胺四乙酸二钠）；２为四氢呋喃：０．０２５ｍｏＬ／ｌ草酸＝１５：５００；３为四氢呋喃：乙腈：０．０２５ｍｏｌ／Ｌ草 酸（２．５：２２．５：７５）；４为０．２ｍｏｌ／Ｌ草酸（ｐＨ６．８８）：乙腈（２０：８０）】都使浓度为ＯｌＯｍｇ／ｎｍ的土霉素对照品拖尾， 对应的拖尾因子为２．６、２．６、３．７、２．８。本文采用的流动相参考了徐士新等［１］的文献，分离上霉素后，其谱图拖 尾因子为１．０，能够很好的保持流出峰的峰形，使定量更为准确。血浆的组成成分极其复杂，其蛋白质主要包括 血浆蛋白质、含氮激素及一些酶等。而土霉素在血浆中易与蛋白质强烈结合，因此须用强酸和酸性脱蛋白剂从 生物样品中提取。１０％－－氯乙酸按１０％三氯乙酸：血浆＝ｌ：４的体积比例不能完全变性血浆蛋白，离心后血浆上层 呈乳白色浑浊状，易使血浆中的土霉素拖尾，乙腈按乙腈：血浆＝１：１的体积比例则检测不出１．０