离子阱质谱
=
安捷伦 G6300 系列LC/MSD Trap
现场培训教材
质谱数据系统
毛细管电泳
液相色谱
气相色谱
注意
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安捷伦科技有限公司不对与该材料有关的任何活动做担保。这些活动包括但不仅限于为了某特殊目的而进行的销售和适应性。
安捷伦科技有限公司将不会对包含在材料里的与装备，表现和材料使用有关的错误或导致的损失负责。
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2007年6月
G6300A 系列离子阱软件概述以及开机关机操作
仪器硬件概述
1.1典型配置
1.2仪器原理简介
1.2.1离子阱的主体包含一个环电极和两个端电极，环电极和端电极都是绕Z轴旋转的双
曲面，并满足r20=2Z20（ r0为环形电极的最小半径，Z0为两个端电极间的最短距
离）。射频电压V rf加在环电极上，两个端电极都处于零电位。
1.2.2与四极杆分析器类似，离子在离子阱内的运动遵循马修方程，也有类似四极杆分析
器的稳定图。在稳定区内的离子，轨道振幅保持一定大小，可以长时间留在阱内，
不稳定区的离子振幅很快增长，撞击到电极而消失。离子阱的操作只有射频RF电
压，没有直流DC电压，因此离子阱的操作只对应于稳定图上的X轴。对于一定质
量的离子，在一定V rf下，不同质量数的离子按照m/z由小到大在稳定图的X轴上
自右向左排列。当射频电压从小到大扫描时，排在稳定图上的离子自左向右移动，
振幅逐渐加大，依次到达稳定图右边界，从离子阱中抛出，经过高能打拿极然后由
电子倍增器检测。
1.3仪器硬件概述
1.3.1离子源
1.3.2离子源原理
1.3.3仪器构造-示意图
1.3.4 仪器构造-实物
离子阱整体
离子阱分解图
1.3.5 LC-MSD Trap 的典型操作模式（以MS2为例）：
首先样品组分通过LC 进行分离，然后通过大气压电离源电离产生离子，离子阱在电场作用下，通过离子电荷控制（ICC ）在阱中进行离子累积存储一定数量的离子，然后通过扫描隔离掉低于目标离子质量数的离子，通过在端电极上施加附加电场排除掉阱中高于目标质量数的离子，这个过程为Isolation ，接下来通过在端电极上施加特定离子的共振波形，使其与He 碰撞导致离子内能增加而使离子碎裂，此过程称之为Fragmenation 或CID ，最后在离子阱上扫描Rf 电压得到二级质谱。
1.3.6常见问题
1. 为什么要控制离子累积过程？
首先样品组分通过LC进行分离，然后通过API产生了大量的带电离子到离子阱，由于离子数目的增加会产生空间电荷效应，因此在质谱分析中离子阱里仅能容纳一定数目的离子，超过这个离子数目（超过空间电荷上限）会降低质谱的分辨率、质量精度和线性动态范围。在正离子模式下，对于VL和SL ，ICC为30000，对于XCT为200000，XCT Ultra 为500000。详细内容请参见Quick reference guide
（G2440-90092）。
G6300A系列离子阱开、关机软件概述及基本操作
开机、关机及软件概述
2.1 开机
2.1.1打开液氮罐自增压阀门，确认液氮罐或N2发生器的输出压力为0.55-0.69MPa（80-
100psi）(一般0.6Mpa)，调节高纯He钢瓶减压表输出压力至少0.35 MPa (一般建
议0.55Mpa 或80Psi)，确认前级泵的气镇阀处于关闭状态。
2.1.2首先开启计算机并登陆进入Windows界面，然后依次打开LC1200 各电源开关，打
开G6300A系列Trap左侧的主电源开关和仪器前面左下角的电源开关，此时听到
一声电磁阀的声音，前级泵启动，然后涡轮泵开始工作，等待大概1min左右。
2.1.3启动Instrument 1 Online图标启动LC-MS Trap，如果只想启动离子阱，可以只
点击桌面图标6300 Series Trap Control图标启动离子阱控制软件。
（LC-MS Trap）（Trap Only）
2.1.4软件启动完成后LC部分与普通LC工作站相同，离子阱控制画面如下：与此同时
Trap的Data Analysis 画面也同时打开。仪器自动处于待机状态（如果由于真空未到
8*10-5，仪器会自动切换到Shutdown状态，这时可以先选中左侧的Neb Gas和Dry
Gas，等待仪器到达真空后自动切换到待机状态）。
2.1.5观察仪器状态和真空情况，待仪器高真空到达2*10-5mBar以下，此时可以正常使
用操作仪器了（短时间关机一般4h 能达到真空，如果长时间关机，最好过夜）。
如果更换He钢瓶，在离子阱控制画面，选择菜单：Options > Vacuum System…，
选择Flush Helium Line两次。
2.2 换源（ESI > APCI）
2.2.1 在离子阱控制画面，点击Shutdown，等待电离源冷却，然后打开ESI源，移掉
Nebulizer管线，移掉ESI源，安装APCI源，连接APCI Heater和APCI High
Voltage电缆，关上APCI源，在离子阱控制画面左下角选择APCI，然后点击
Standby回到待机状态。调入合适方法准备分析。
2.2.2 APCI > ESI步骤与类似，只是APCI温度较高，换源前需要一点时间让APCI源冷
却。
2.3 关机
2.3.1 确认前级泵上灰色的气镇阀（Gas Blast Valve）处于关闭状态。此气镇阀在操作状
态应定期打开（全开），如果连续开机，建议每周打开一次，每次半小时，然后关
闭，以便泵油能够回流并去除泵油中易挥发的组分。
2.3.2 首先关掉LC流量，将泵流量设置到0，然后再次点击选择Off，依次点击柱温箱和
检测器选择Off。然后在MSD Control画面点击左侧Shutdown ，让电离源冷却，再次确认前级泵气镇阀已经关闭。
2.3.3 打开IE画面，在地址栏输入192.168.254.10,同开机画面，选择Service > Vacuum
System > Continue Update > Vent VacSys.
2.3.4 观察涡轮泵T2 和T1转速，等待大概15min，待涡轮泵转速降下来，关闭IE画面，
关掉Trap仪器左下角电源开关，关闭左侧主电源开关，关闭PC以及N2和He钢
瓶。
G6300 系列离子阱校正与调谐
校正与调谐
为了获得高品质、准确的质量图，LC/MSD 必须进行灵敏度最优化，准确确认质量。校正调谐是调整 LC/MSD 参数以达到这一目的的过程。安捷伦的离子阱质谱仪通过使用注射泵把一个标准调谐液导入 LC/MSD Trap 并产生离子来完成校正和调谐。
在 Default 方法设置下，将质谱置于 Operate ，在线观察调谐液中的标准离子。对应质量列表中的质量数，检查各标准离子。如果质量数偏差超过 0.2 amu 则应该做自动校准。同时检查累积时间，如果系统污染严重，累积时间就越短。
如果看不到累积时间，对着 profile 图点击右键，设置质谱图题头显示内容，将 Show Accu Time 和 Show ICC Actual 选上即可，将显示小数点位数设置到2。
3.1
校正离子阱
3.1.1
打开MSD Trap Control 画面，检查真空状态。具体操作为Option>Vacuum System 会看到以下画面（以6320 XCT 为例）。从Acquisition 切换到Tune 画面，如下图所示：确认He 分压为6 x 10-6 。
3.1.2
在离子阱控制画面，选择扫描校正为当前校正。具体操作为Options > Scan
calibration 选择Current 。从菜单Method 下调入Default.ms 方法，确认离子阱参数为：
3.1.3在Tune画面激活Smart参数，点击左侧Operate，使用注射泵泵入ESI调液
G2431A到ESI源，流速为5uL/min（或0.3mL/h）。注射泵实物图如下：注射泵的操作请参见现场工程师讲解或参考注射泵随机手册。
注射泵0.3 ml/h ( 5 ul/min )
中Show Accu Time和Show ICC Actual。
3.1.5观察Profile质谱图，如果显示质量数与标准质量数相差超过0.2amu则需要进行
Scan Calibration。选择Calibration标签，点击左侧Auto 和Scan Calibration，
对于不同的电离源，在此画面可选择不同的Mass List，如果与标准质量数相差较
远，需同时选择Presearch，然后选择下面的Start 开始进行自动校正。
3.1.6校正完成后，出现上图右侧Auto Calibration Results，如果右侧Message List
没有任何提示则显示校正完成，点击Save保存校正文件，如果出现信号不稳提
示，请检查调谐液和喷雾针。
3.1.7检查检测器增益，在C alibration 标签，点击Detector，在注射泵5uL/min调谐液
流速下，选择Check，如果需要校正则出现提示，按照提示选择Calibrate校准检
测器增益。如果Check后系统认为不需要校正则没有提示显示。
Calibration，在Tune画面输入Traget Mass 622,然后点击MS(n)标3.1.8 Isolation
签，选中Manual MS(n)，按照下图输入如下参数，观察右上角Profile质谱图，当
width减小到0.7，如果622 信号不消失，则不需要校正。否则进行Auto Isolation Calibration。
3.1.9在Calibration画面，选中I solation Calibration，去掉Scan Calibration选项，
点击Start开始Isolation校正过程，校正结束后，选择Save保存Isolation校正文
件。
3.1.10 Fragmentation Calibration，点击MS(n)标签，选中Manual MSn，按照下图输
入如下参数，只选中Isolation，Width=4，观察右上角Profile质谱图，记下622的信号强度，然后选中Fragmenation，将电压Ampl在0.7-1.5之间改变，观察622碎片离子540的强度，若果540/622>15%则不需要进行Fragmenation校正。否则进行下一步。
3.1.11在Calibration画面，只选中Fragmenation Calibration，点击Start开始
Fragmenation Calibration校正过程，校正结束后，选择Save保存Fragmenation
校正文件。
G6300A系列离子阱编辑色谱、质谱方法
编辑液质联用Full Scan方法
本部分将以Demo Sample磺胺样品和随机测试柱为例编辑全扫描和二级质谱分析方法。样品信息如下，请在分析前准备好流动相及2.1mm*3cm 5u SB-C18色谱柱（P/N 873700-902）和磺胺样品（P/N 59987-20033），流动相为A相（水/5mM甲酸铵），B相（甲醇5mM甲酸铵）。然后Purge流动相，按分析条件对色谱柱进行平衡。
? sulfamethizole (M+H)+ = 271,
? sulfamethazine (M+H)+ = 279,
? sulfachloropyridazine (M+H)+ = 285
? sulfadimethoxine (M+H)+ = 311.
4.1 建立一个全扫描方法：
4.1.1双击桌面上Instrument 1 online图标:
4.1.2选择菜单Method>Load Method，调入缺省方法DEF_LCMS.M
4.1.3在GUI画面点击Injector图标，选择Set up injector，选择Standard Injection。输入
进样量1uL
4.1.4点击Pump图标，选择Set up pump，依次输入控制pump的参数和梯度组成（可以
适当调节梯度以便得到好的分离）。
4.1.5点击柱温箱图标，选择Set up Column Thermostat...，输入柱温箱参数
4.1.6在检测器参数设置画面，选择Set up DAD Signals...，，输入DAD参数。一般要求狭
缝<样品带宽<参比带宽，详细操作请参见工程师讲解。
4.1.7点击GLP图标，选择Time Checklist...，选择Data Acquision，不选Standard Data
Analysis。然后选择OK。
4.1.8 在工作站Chemstation Sulfms1.M 做为方法
名。
4.1.9 在工作站Chemstation
MS图标选择Settings
4.1.10 在MSD Trap Control画面，单击Mode图标，依照下图输入参数，然后点击Apply。此例
中所用仪器为XCT，如为其它型号，请选择Standard-normal扫描模式或参见Quick Reference Guide进行设置。
4.1.11 点击Tune子菜单，选择Smart，输入Target Mass 300m/z，根据Quick Reference
Guide中对应的LC流量输入Nebulizer 40psi，Drying Gas 8.0L/min，Dry Temp 350C，在右侧输入 ICC Target 使用缺省值，Average 7。
4.1.12 点击Chromatogram子菜单，选择TIC作为实时绘图，选择喜欢的颜色作为线条颜
色。
4.1.13点击Mode子菜单，选择Save Spectra对话框，对于Include Profile Spectra 选择
On，然后点击Apply。需要注意的是对于需要做Deconvolute的质谱图必须选择Profile才可以，但是Profile文件较大。
4.1.14确认所有模块已经处于On的状态，选择Method>Save Method画面保存方法，覆盖
原先文件，这样就编好了一个完整的LC-MS方法。
4.1.15返回工作站画面，单击样品信息Sample info图标，选择Prefix/Counter，在
Prefix栏输入ACQ，Counter为00000，文件会按照前缀ACQ自动添加，不会覆
盖，也可以选择Manual，受动取名，但是在进样前要确认文件名已改，否则可能文
件会被覆盖。输入数据要存放的子目录名。
4.1.16点击Chemstation 画面上的Start图标，开始数据采集。在MSD Trap
Control 画面检测质谱信号。
4.2建立一个Manual MS(n)方法：
4.2.1点击MSD Trap Control 画面上选择File>Open Analysis File调出先前采集的全扫描
文件。
4.2.2在色谱图上右键单击选择Insert New Segment Limit，依次加入五个时间段，选中第一个
时间段，拖拉鼠标调节时间段范围能套住第一个色谱峰。在此时间段内，输入271 为母离子，
打碎电压为1，接下来在其它时间段依次输入各个母离子285;279和311，每段Average改为
5，最后一个时间段将Divert Valve选择到to Waste。
4.2.3选择Method > Save Method As 保存Manual MS2方法，依照前述步骤采集一个Manual
MS2 的数据文件。
4.3建立一个AutoMS(n)方法：
离子阱质谱
= 安捷伦 G6300 系列LC/MSD Trap 现场培训教材 质谱数据系统 毛细管电泳 液相色谱 气相色谱
注意 包含在该文件中的信息将可能在未通知的情况下改变。 安捷伦科技有限公司不对与该材料有关的任何活动做担保。这些活动包括但不仅限于为了某特殊目的而进行的销售和适应性。 安捷伦科技有限公司将不会对包含在材料里的与装备，表现和材料使用有关的错误或导致的损失负责。 这份文件中的任何部分都不得拷贝或复制或未经安捷伦科技公司的预先允许进行翻译。 安捷伦科技有限公司 售后服务电话：800-8203278 手机用户：400-8203278 中文网站：https://www.360docs.net/doc/0210656578.html,/chem/cn 2007年6月
G6300A 系列离子阱软件概述以及开机关机操作 仪器硬件概述 1.1典型配置 1.2仪器原理简介 1.2.1离子阱的主体包含一个环电极和两个端电极，环电极和端电极都是绕Z轴旋转的双 曲面，并满足r20=2Z20（ r0为环形电极的最小半径，Z0为两个端电极间的最短距 离）。射频电压V rf加在环电极上，两个端电极都处于零电位。 1.2.2与四极杆分析器类似，离子在离子阱内的运动遵循马修方程，也有类似四极杆分析 器的稳定图。在稳定区内的离子，轨道振幅保持一定大小，可以长时间留在阱内， 不稳定区的离子振幅很快增长，撞击到电极而消失。离子阱的操作只有射频RF电 压，没有直流DC电压，因此离子阱的操作只对应于稳定图上的X轴。对于一定质 量的离子，在一定V rf下，不同质量数的离子按照m/z由小到大在稳定图的X轴上
自右向左排列。当射频电压从小到大扫描时，排在稳定图上的离子自左向右移动， 振幅逐渐加大，依次到达稳定图右边界，从离子阱中抛出，经过高能打拿极然后由 电子倍增器检测。 1.3仪器硬件概述 1.3.1离子源 1.3.2离子源原理 1.3.3仪器构造-示意图
离子阱质谱和四极杆质谱的原理
离子阱质谱和四极杆质谱的原理 分析质荷比的原理 四极杆（Quadrupole）：由四根带有直流电压（DC）和叠加的射频电压（RF）的准确平行杆构成，相对的一对电极是等电位的，两对电极之间电位相反。当一组质荷比不同的离子进入由DC和RF组成的电场时，只有满足特定条件的离子作稳定振荡通过四极杆，到达监测器而被检测。通过扫描RF场可以获得质谱图。四极杆成本低，价格便宜，虽然目前日常分析的质荷比的范围只能达到3000，但由于分析器内部可容许较高压力，很适合在大气压条件下产生离子的ESI离子化方式，并且，ESI电离最突出特点是产生多电荷，蛋白质和其他生物分子电喷雾电离所产生的电荷分布一般在3000以下，所以四极杆广泛地与ESI联用。另外，三重四极杆由于可以做多级质谱，定量也方便，使用极为广泛。 离子阱（Ion trap）：由一对环形电极（ring electrod）和两个呈双曲面形的端盖电极（end cap electrode）组成。在环形电极上加射频电压或再加直流电压，上下两个端盖电极接地。逐渐增大射频电压的最高值，离子进入不稳定区，由端盖极上的小孔排出。因此，当射频电压的最高值逐渐增高时，质荷比从小到大的离子逐次排除并被记录而获得质谱图。离子阱质谱可以很方便地进行多级质谱分析，对于物质结构的鉴定非常有用。 我们单位就用的ESI-四极杆分析多肽，请问三重四极杆原理又是什么？ 说来比较复杂，我有相关的文献，需要的话我可以发信给你。 有本英文的书"Practical aspects of ion trap mass spectrometry" Thomas Cairns主编的，很详细，可以到国家图书馆借到。 简单得说，离子阱能囚禁的离子质量与所用射频的频率的平方成反比，与其幅度成反比。通常是固定频率，从小到大扫描幅度，其囚禁的离子以质量从小到大的次序就出来了。 简单得说，离子阱能囚禁的离子质量与所用射频的频率的平方成反比，与其幅度成反比。通常是固定频率，从小到大扫描幅度，其囚禁的离子以质量从小到大的次序就出来了。 ---------------------------------------------------------------- 还有点我不明白：就是SI M scan或MS/MS模式isolating ions时m/z大于要监测的离子的是怎么被eject的？还有Endcap上的tailored RF wav ef orm和resonance eject RF都是什么样的电压，怎么作用的？ “还有点我不明白：就是SIM scan或MS/MS模式isolating ions时m/z大于要监测的离子的是怎么被eject的？” 我来试试看解释一下这个问题 其实加载到四级杆上的DC和RF电压使得四级杆内产生一个变化的电场，而变化的电场又产生变化的磁场（电磁感应现象）。带点离子通过的时候，其实就是切割磁力线的匀速运动。 在选定的m/z下，这个能量场只允许某一个或某一范围内的m/z离子通过。更大的m/z离子因为场给予的能量不足将逐渐减速而从四级杆空隙跑出。更小的m/z离子因场能大于其自身能量，而加速飞离四级杆。 故而最后达到检测器的仅是你选定的m/z离子
质谱离子阱
离子阱的基本原理： 离子阱的发展历史：最早是三维离子阱，它模拟了理想的四极场，但其内表面是双曲面的，加工非常困难。慢慢有人做了简化，比如柱形离子阱(有商用的仪器)，这还是三维离子阱。后来发展的线性离子阱是在四极杆轴向上加一个直流，比如商用的LTQ 。但LTQ 这样的线性阱里面的结构也是双曲面的，加工也非常困难，要求精度很高。线性离子阱经过简化后，可以变成矩形离子阱，加工比较简单，加工成本也不高，我国国内也可以加工。 当然，所有离子阱的核心都是从双曲面的离子阱来的，所以先介绍一下传统的双曲面三维离子阱。它由一个环形电极和上下两个端盖电极组成，加上前端的离子源入射和检测器。它的内表面是双曲面的，加工很困难。 离子阱能够储存(捕获)离子，根据马修方程，当离子在r 径向和 z 轴向两个方向都稳定时，离子就能够被离子阱稳定地捕获。根据 离子稳定图，当离子在两个方向都稳定时就被捕获了，通常利用的是第一稳定区(如图)。当离子处于稳定位置时，根据马修方程中a 和q 的关系式，a 和q 同离子的质荷比m/z 、所加射频场的频率、场半径、射频电压、直流电压有关。商用仪器通常不加直流(即a=0)， 离子在一条线上运行，如图所示，质量数越小，越靠近右侧。当扫描射频电压时，每个离子的q 逐渐由小变大，直到离子脱离稳定区， 跑出离子阱，即可被检测。 、管路敷设技术通过管线不仅可以解决吊顶层配置不规范高中资料试卷问题，而且可保障各类管路习题到位。在管路敷设过程中，要加强看护关于管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷弯扁度固定盒位置保护层防腐跨接地线弯曲半径标等，要求技术交底。管线敷设技术中包含线槽、管架等多项方式，为解决高中语文电气课件中管壁薄、接口不严等问题，合理利用管线敷设技术。线缆敷设原则：在分线盒处，当不同电压回路交叉时，应采用金属隔板进行隔开处理；同一线槽内强电回路须同时切断习题电源，线缆敷设完毕，要进行检查和检测处理。、电气课件中调试对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行 高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料试卷相互作用与相互关系，根据生产工艺高中资料试卷要求，对电气设备进行空载与带负荷下高中资料试卷调控试验；对设备进行调整使其在正常工况下与过度工作下都可以正常工作；对于继电保护进行整核对定值，审核与校对图纸，编写复杂设备与装置高中资料试卷调试方案，编写重要设备高中资料试卷试验方案以及系统启动方案；对整套启动过程中高中资料试卷电气设备进行调试工作并且进行过关运行高中资料试卷技术指导。对于调试过程中高中资料试卷技术问题，作为调试人员，需要在事前掌握图纸资料、设备制造厂家出具高中资料试卷试验报告与相关技术资料，并且了解现场设备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况 ，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。 、电气设备调试高中资料试卷技术电力保护装置调试技术，电力保护高中资料试卷配置技术是指机组在进行继电保护高中资料试卷总体配置时，需要在最大限度内来确保机组高中资料试卷安全，并且尽可能地缩小故障高中资料试卷破坏范围，或者对某些异常高中资料试卷工况进行自动处理，尤其要避免错误高中资料试卷保护装置动作，并且拒绝动作，来避免不必要高中资料试卷突然停机。因此，电力高中资料试卷保护装置调试技术，要求电力保护装置做到准确灵活。对于差动保护装置高中资料试卷调试技术是指发电机一变压器组在发生内部故障时，需要进行外部电源高中资料试卷切除从而采用高中资料试卷主要保护装置。
离子阱质谱仪使用流程
液质联用离子阱质谱仪使用流程 1. 使用质谱须知 在使用质谱仪前请确认并检查以下条件： ● 仪器已经正确安装并且经过厂商工程师的检测； ● 质谱仪属于精密贵重仪器，未经专门培训人员不得擅自开启使用，更不 得随意“调校”氮气和氦气压力或更改仪器参数等； ● 检查液氮罐和氦气钢瓶是否有一定压力，以便为测试样品提供符合流速 和压力要求的氮气（喷雾气体和干燥气体）和氦气（碰撞气体）； ● 常规ESI源已安装完毕 ● 样品溶液必须澄清透明，不含有固体微粒，不得将粗提物直接用于测定， 以免堵塞喷雾针或者污染毛细管。测试用的液相溶剂体系不得含有不挥 发性的酸、碱、盐。 2. 测样前仪器准备 2.1 启动trapcontrol软件 2.1.1. 单击桌面图标或者通过程序目录启动trapcontrol软件； Start – Programs – Bruker Daltonics – esquireControl 软件可能要求输入操作人员的姓名。
2.1.2. 选择软件中质谱仪处于操作状态
释 3.2 将配好的样品或标准品吸入进样器（针），将进样器（针）放置于进样 泵中。注意：进样器（针）内不能有气泡 3.3 将进样器（针）直接与离子源连接（如图） 注意毛细管与注射器之间需紧密连接。进样器内不能有气泡 3.4 设置进样泵的流速为120～180微升/小时 3.5 参数调节，初学者建议采用Tune -> Smart 模式，调节下图蓝色标识部 分。 A 雾化气、干燥气流量和温度，建议以下列值为基准调节： Nebulizer 5 psi – 15 psi Dry Gas 5 l/min Dry Temp 300 °C B 设置正负离子模式，或者正负离子交替模式。
离子阱
离子阱 离子阱并不是一个很新颖的装置，早在50年代末它就被应用于改进光谱测量的精确度。设法提高光谱精确度是每个从事原子光谱研究的科学家所追求的「圣杯」，有人曾这么比喻：如果哪一天上帝允诺帮每个人实现一个愿望，十个原子光谱学家中，大概有九个都会希望上帝做同一件事──以他伟大的神力把一个原子或分子一动也不动地固定在空间中某一点，好让这些科学家把光谱线量到无比精确。这当然只是一个梦想，一个在真实世界中永远无法实现的愿望。由于测不准原理的作祟，DE不可能无限小，所以谱线不可能量到无限准。但是如果我们能使Dt够大，DE还是可以很小，换言之，想要量到更精准的谱线，测量时间必须拉长，因此必须设法局限住待测物体。于是离子阱因应而生，它的原理十分简单：利用电荷与电磁场间的交互作用力来牵制带电粒子的运动，以达到将其局限在某个小范围内的目的。 离子阱，又称离子陷阱，是一种利用电场或磁场将离子（即带电原子或分子）俘获和囚禁在一定范围内的装置，离子的囚禁在真空中实现，离子与装置表面不接触，应用最多的离子阱有“保罗阱”（四
极离子阱，沃尔夫冈·保罗）和“Penning阱”。离子阱可以应用于实现量子计算机，量子计算机以粒子的量子力学状态，如原子的自旋方向等表示0和1，称为“量子比特”，离子阱利用电极产生电场，将经过超冷处理的离子囚禁在电场里，实现量子比特。 离子阱(Ion trap)，由一对环形电极(ring electrod)和两个呈双曲面形的端盖电极(end cap electrode)组成。在环形电极上加射频电压或再加直流电压，上下两个端盖电极接地。逐渐增大射频电压的最高值，离子进入不稳定区，由端盖极上的小孔排出。因此，当射频电压的最高值逐渐增高时，质荷比从小到大的离子逐次排除并被记录而获得质谱图。离子阱质谱可以很方便地进行多级质谱分析，对于物质结构的鉴定非常有用。这种由一对环电极和两个双曲面端电极形成的离子阱称为三维离子阱，离子聚焦的位置是在中心的一个点上，具有比较大的空间电荷效应，常规的三维离子阱的离子存储数目为几千个。 为了避免空间电荷效应和简化电极结构，后来人们使用四级杆的
2、高效液相色谱_电喷雾_离子阱质谱法快速推定硫酸奈替米星中有关物质的结构
高效液相色谱 电喷雾 离子阱质谱法快速推定硫酸奈替米星中有关物质的结构 袁耀佐1,张玫1,钱文1,谭力1,赵恂1,周晓华1,张正行2(1 江苏省食品药品检验所,南京210008;2 中国药科大学药物分析教研室,南京210009) 摘要:目的 应用高效液相色谱 电喷雾 离子阱质谱(H PLC ESI I T M S n)法及TFA fi x技术,快速鉴定硫酸奈替米星样品中有关物质的结构。方法 A g il ent SB C 18 (4 6mm 150mm,3 5 m)色谱柱,水 三氟乙酸 甲醇(84115)为流动相,流速0 5mL!m i n-1;离子肼质谱仪正离子检测,柱后分流(32)进样,电喷雾离子源,离子源温度350?,雾化室压力275 8kP a,干燥气流速9L!m i n-1,采用T FA fix技术,即在柱后添加丙酸 异丙醇(2080)溶液,改善流动相中三氟乙酸对电喷雾离子化的抑制作用;对有标准品的有关物质,其结构通过与对照品的色谱质谱行为来确定;对无对照品的有关物质,主要以奈替米星和西索米星质谱行为为模板,根据它们多级质谱信息来推定。结果 硫酸奈替米星原料中检出9个有关物质,推定出其中7个物质的结构,分别为西索米星、去甲基西索米星、1 N 乙基 加洛糖胺、5 O 乙基 奈替米星、2# N 乙基 奈替米星、3? N 乙基 奈替米星、3 N 丙基 依替米星,解析了另两物质的部分结构。结论 建立的方法可以用于硫酸奈替米星原料中有关物质结构的快速推定,为奈替米星质量控制和工艺优化研究提供了可靠快速的分析手段。 关键词:硫酸奈替米星;有关物质;结构推定;高效液相色谱 电喷雾 离子阱质谱法 中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1001-2494(2010)18-1428-06 R api d Character izati o n of t he Re l a ted Substances i n N etil m ic i n Sulf ate Sa m ple by HPLC ESI I T M S n YUAN Yao zuo1,Z HANG M e i1,Q I A N W en1,TAN L i1,Z HHAO Xun1,Z HOU X iao hua1,Z HANG Zheng x i n g2 (1 J iangsu Instit u te for D rug Control,N anjing210008,Ch i na;2 D epart m ent of Pharmaceutical A nal y sis,Chi na Phar m aceutical Uni versit y,N anjing210009,China) ABSTRACT:O BJECT I VE T o character ize rap i d l y t he re l a ted substances i n ne til m i c i nsu lfate samp l e by a H PLC ESI I T M S n m eth od w it h a TFA fi x techno logy M ETHODS T he m ethod was carried out usi ng an ag ilent SB C 18 (4 6mm 150mm,3 5 m)co l u mn and a m obil e phase containi ng a m i x ture o fw ater,tr ifluo roacetic ac i d and m ethano l(84115)at a fl ow rate of0 5mL!m i n-1 Two fifth o f the colu mn e l uentw as sent i nto t he M S fo r peak charac teriza tion by sp litti ng mode T he i den tificati on o f related substances i n the ne til m i c i nsulfa te bulk sa m ple was perfo r m ed w ith a i on trap m ass spec trom eter,w it h an electrospray ionization(ES I)source i n the positive i on m ode,t he te m pera t ure o f ES I i on source is350?,nebulizi ng pressure i s275 8kPa,and dry gas flow is9L!m i n-1, a so l u tion co taini ng prop i onic ac i d and i sopropano l(8020)w as i nfused i nto t he eluent through a T p i ece to decrease t he M S si gnal suppressi on of tr ifluo roacetic acid R elated substanes wh i ch the i r reference substances can be obta i ned were identifi ed by co m pa ri ng the i r chrom atog raph ic andM S behav iors w ith those o f correspond i ng re f e rence substances,the o t her unknow n related substances were deduced usi ng the collision i nduced disso ciati on(C I D)spectra o f as temp l a tes RESULTS A t o ta l o f n i ne compounds were were character ized i n comm ercial sa m ples,a m ong wh i ch seven i m pur ities w ere identifi ed,t hey are si so m i c i n,de N me t hy l siso m ici n,1 N ethy lgara m i ne,5 O e t hy l netil m ic i n,2# N ethy l netil m icin,3? N ethy l netil m ici n and3 N propy l eti m icin,respecti ve l y,and t he oth er t wo com pounds w ere deduced parti a lly,too CONCLUSI ON The estab lished me t hod is su itab le for the rap i d i dentifica ti on o f re l a ted substances i n netil m ic i nsulfate sa m ples and qua lity control KEY W ORDS:ne til m i c i n su lfate;related substances;character i zati on;H PLC ESI I T M S n 奈替米星(netil m icin)是在西索米星(siso m icin)的1位氨基上引入一个乙基的半合成氨基糖苷类抗生素,二者抗菌谱相似,但奈替米星对氨基糖苷乙酰转移酶稳定,且耳肾毒性低于其他同类产品[1],临床应用均为其硫酸盐。美国药典32版(USP32)、英国药典2009(BP2009)、日本药局方15版(JP% &)、?中国药典(2005年版(Ch P2005)等药典中均对有关物质进行了控制[2 5]。王建等[6]曾建立 作者简介:袁耀佐,男,博士,副主任药师 研究方向:抗生素质量研究 T e:l(025)86631609 E m ai:l yu anyaozuo@yahoo co m c n
分散固相萃取-离子阱质谱法(QuEChERS-GCMSMS)
分散固相萃取-离子阱质谱法（QuEChERS-GCMSMS ）分析中药中的农药多残留 Application Notes_C_GCMS-31 吕建霞 余翀天 赛默飞世尔科技（中国）有限公司 引言 中药为我国的传统中医特有药物，为我国的民族文化瑰宝。据统计，我国用于饮片和中成药的药材有1000-1200余种，其中约有20%的中药材来自人工栽培[1]。随着人工栽培过程中农药的使用，使得中药材极可能受到农药的污染，中药材中农药残留的存在直接危害着人类的健康。《中国药典（2015版）》[2]中提供了多种农药残留的同时检测方法，采用分散固相萃取的前处理方法，气相色谱串联质谱法的检测手段进行检测。本文依据此方法建立了分散固相萃取-气相色谱串联质谱法对中药中60种有机氯、有机磷及拟除虫菊酯农药残留同时检测，结果表明该方法灵敏度好，回收率高，线性范围好。仪器 Trace1310-ITQ 气相色谱离子阱质谱仪，配EI 源（Thermo Scientific ）；AS1310 自动进样器（Thermo Scientific ）均质器、离心机、天平、漩涡混合器、氮吹仪（Thermo Scientific ）耗材 色谱柱：TG-5MS （30 m ×0.25 mm ×0.25 μm ）（Thermo Scientific ）QuEChERS 产品：萃取管，50 mL 含6.0 g 无水硫酸镁和1.5g 醋酸钠（PN ：60105-210）；净化管，15 mL 含900 mg 无水硫酸镁、150 mgPSA 、150 mgC18（PN ：60105-227）（Thermo Scientific ） 关键词 分散固相萃取；离子阱质谱；TG-5 sil 色谱柱；中药；农药残留目标 建立高效的气相色谱串联质谱检测方法，灵敏、快速的测定中药中的多种农药残留；样品中的农药经分散固相萃取净化，离子阱质谱采用二级质谱模式检测，灵敏度高 试剂与标准品 农药标准 溶液购自国家标准物质中心，浓度100 mg/L 。乙腈：色谱级。冰醋酸。 0.1%醋酸-乙腈溶液：加10 mL 冰酯酸到990 mL 的乙腈。标准溶液的制备 单一农药标准溶液各取适量，用正己烷稀释定容，得浓度为1 mg/L 的混合标准溶液。样品前处理 取试样可食用部分，粉碎并混合均匀，准确称取3 g （精确至0.01 g ），加入10 mL 水浸泡，转移到QuEChERS 萃取管中，加入15 mL0.1%冰醋酸/乙腈溶液，均质提取2 min 。以10000 r/min 离心10 min 。准确吸取10 mL 提取液于离心管中，N 2吹干，用2.0 mL 乙腈涡混溶解残渣。将上述溶液转移到净化管中，涡混2 min ，5000 r/min 离心3 min 。用一次性注射器取上清液，过0.45 μm 滤膜，供气相色谱-质谱测定 。
micrOTOF-Q II 质谱仪使用流程
micrOTOF-Q II 液质联用高分辨质谱仪使用流程 1. 使用质谱须知 在使用质谱仪前请确认并检查以下条件： ● 仪器已经正确安装并且经过厂商工程师的检测； ● 质谱仪属于精密贵重仪器，未经专门培训人员不得擅自开启使用，更不 得随意“调校”氮气和氦气压力或更改仪器参数等； ● 检查液氮罐和氦气钢瓶是否有一定压力，以便为测试样品提供符合流速 和压力要求的氮气（喷雾气体和干燥气体）和氦气（碰撞气体）； ● 常规ESI源已安装完毕 ● 样品溶液必须澄清透明，不含有固体微粒，不得将粗提物直接用于测定， 以免污染毛细管。 2. 测样前仪器准备 2.1 启动micrOTOFcontrol软件 2.1.1. 单击桌面图标或者通过程序目录启动micrOTOFcontrol软件；软件要求输入操作人员的姓名：
2.1.2. 选择软件中质谱仪处于操作状态
2.1.4. 仪器在操作状态下
质谱离子阱
离子阱的基本原理： 离子阱的发展历史：最早是三维离子阱，它模拟了理想的四极场，但其内表面是双曲面的，加工非常困难。慢慢有人做了简化，比如柱形离子阱(有商用的仪器)，这还是三维离子阱。后来发展的线性离子阱是在四极杆轴向上加一个直流，比如商用的L TQ。但L TQ这样的线性阱里面的结构也是双曲面的，加工也非常困难，要求精度很高。线性离子阱经过简化后，可以变成矩形离子阱，加工比较简单，加工成本也不高，我国国内也可以加工。 当然，所有离子阱的核心都是从双曲面的离子阱来的，所以先介绍一下传统的双曲面三维离子阱。它由一个环形电极和上下两个端盖电极组成，加上前端的离子源入射和检测器。它的内表面是双曲面的，加工很困难。 离子阱能够储存(捕获)离子，根据马修方程，当离子在r径向和z轴向两个方向都稳定时，离子就能够被离子阱稳定地捕获。根据离子稳定图，当离子在两个方向都稳定时就被捕获了，通常利用的是第一稳定区(如图)。当离子处于稳定位置时，根据马修方程中a和q的关系式，a和q同离子的质荷比m/z、所加射频场的频率、场半径、射频电压、直流电压有关。商用仪器通常不加直流(即a=0)，离子在一条线上运行，如图所示，质量数越小，越靠近右侧。当扫描射频电压时，每个离子的q逐渐由小变大，直到离子脱离稳定区，跑出离子阱，即可被检测。
离子阱是怎样被选择的、如何作SIM和MS/MS： 当然稳定区是假想的状态，是通过理论模拟的反映离子运动的一种方式，离子在阱里处于各种各样的状态。当射频电压固定在某一个值时，每个不同m/z的离子在其中有一个振动频率ω，ω=1/2βΩ，其中Ω是射频的频率，而一台离子阱仪器的振动频率是固定的，所以离子的振动频率仅与β(beta)有关。β和q有个关系式，所以只要知道q的值，就可以知道离子的振动频率。在稳定图上可看到q从0到0.908(0.908是其稳定区的边界)，每一个q值对应的点，都有一个对应的离子振动频率;也就是说，离子的振动频率和离子的m/z没有关系，而只和q有关系。第10张幻灯片讲的是β的q的关系式，有3种估值方法：当q<0.4时，用Dehmelt法估值;当q从0.4到0.7/0.8
质谱和液质联用快速入门
质谱(MS) mass spectrometry 质谱法是将样品离子化，变为气态离子混合物，并按质荷比（m/z）分离的分析技术;质谱仪是实现上述分离分析技术,从而测定物质的质量与含量及其结构的仪器。质谱分析法是一种快速,有效的分析方法,利用质谱仪可进行同位素分析,化合物分析,气体成分分析以及金属和非金属固体样品的超纯痕量分析。在有机混合物的分析研究中证明了质谱分析法比化学分析法和光学分析法具有更加卓越的优越性，其中有机化合物质谱分析在质谱学中占最大的比重,全世界几乎有3/4仪器从事有机分析, 现在的有机质谱法，不仅可以进行小分子的分析，而且可以直接分析糖，核酸，蛋白质等生物大分子，在生物化学和生物医学上的研究成为当前的热点，生物质谱学的时代已经到来，当代研究有机化合物已经离不开质谱仪。 一.仪器概述 1.基本结构 质谱仪由以下几部分组成 供电系统 ┏━━━━━┳━━━━━━╋━━━━━━━┳━━━━━━┓ 进样系统离子源质量分析器检测接收器数据系统┗━━━━━┻━━┳━━━┻━━━━━━━┛ 真空系统 (1)进样系统:把分析样品导入离子源的装置,包括:直接进样,GC,LC及接口,加热进样,参考物进样等。 (2)离子源:使被分析样品的原子或分子离化为带电粒子(离子)的装置,并对离子进行加速使其进入分析器，根据离子化方式的不同,有机常用的有如下几种,其中EI,FAB最常用。 EI(Electron Impact Ionization):电子轰击电离——最经典常规的方式,其他均属软电离，EI 使用面广，峰重现性好，碎片离子多。缺点：不适合极性大、热不稳定性化合物，且可测定分子量有限，一般≤1,000。 CI(Chemical Ionization):化学电离——核心是质子转移，与EI相比，在EI法中不易产生分子离子的化合物，在CI中易形成较高丰度的[M+H]+或[M-H]+等‘准’分子离子。得到碎片少，谱图简单，但结构信息少一些。与EI法同样，样品需要汽化，对难挥发性的化合物不太适合。 原理R + e-→R+·+ 2e-（电子电离）反应气为含H的 R为反应气体分子R+·+ R →RH+ + (R-H)·分子,例如异丁 M为样品分子RH+ + M →R + (M+H)+ (质子转移）烷,甲烷,氨气, R浓度＞＞M浓度R+·+ M →R + M+·（电荷交换）甲醇气等 R+·+ M →(R+M)+·（加合离子） FD(Field Desorption):场解吸——大部分只有一根峰, 适用于难挥发极性化合物，例如糖,应用较困难，目前基本被FAB取代。 FAB(Fast Atom Bombardment):快原子轰击——利用氩,氙,80年代初发明,或者铯离子枪(LSIMS,液体二次离子质谱)，高速中性原子或离子对溶解在基质中的样品溶液进行轰击，在产生“爆发性”汽化的同时，发生离子-分子反应，从而引发质子转移，最终实现样品离子化。适用于热不稳定以及极性化合物等。FAB法的关键之一是，选择适当的（基质）底物，从而可以进行从较低极性到高极性的范围较广的有机化合物测定，是目前应用比较广的电离技术。不但得到分子量还能提供大量碎片信息。产生的谱介于EI与ESI之间,接近硬电离技术。生成的准分子离子，一般常见[M+H]+和[M+底物]+。另外：还有根据底物脱氢以及分解反应产生的[M-H]_
离子阱
离子阱由于可以存贮所有从离子源产生进入阱中的离子，因此灵敏度很高；另外，离子阱的特有功能是容易产生MS n，对分子的结构解析非常有用；离子阱质谱还非常容易用软件实现全自动控制，人机接口非常简单。三维离子阱质谱的分析器由一对环形电极和两个呈双曲面形的端盖电极组成（见图1）。 在环形电极上加基础射频电压（Fundemental rf）和直流电压；在端盖电极上加交流补充电压。由离子源产生的离子，通过脉冲离子门进入离子阱，通过调节射频电压和直流电压，离子可以稳定地存贮在离子阱中。阱中离子的数目可通过自动增益控制（AGC）技术进行有效控制。阱中离子数目太多，会引起空间电荷效应，导致电场的扭曲和整体性能的下降。离子阱中一般充入1 mTorr的氦气，它有两个作用，一是碰撞“冷却”降低初进入离子的动能，有效地捕获注入的离子；二是作为碰撞气体，从而产生多级MS。一个离子是否可稳定地存贮在阱中，取决于离子的荷质比，离子阱的大小（r），fundamental rf的谐振频率（ω），和环电极上的电压幅度（V）。离子行为的依赖性被描述为多维参数q z q z＝4eV/mr2ω2公式
图2显示了阱中离子“稳定区域图”，一个给定质荷比的离子将有一个q z 值，若落在稳定区的边界内，离子就被稳定捕获。若q z值落在边界外，则该离子会撞在电极上湮灭。通过扫描射频电压值（即从低到高加射频电压值），可以使阱中离子的轨道依次变得不稳定，因此可从低m/z到高m/z依次将离子甩出阱外检测。对于高质量数m/z的离子，用扫描射频电压无法使离子轨道不稳定，这时在端盖电极上加高幅的交流电压，如果交流电压频率与离子振荡频率一致，将会产生共振，离子振荡的振幅随时间线性增加，当振幅足够大时，离子将甩出阱外。结合这两种方式还可分离出特定m/z的离子，比如扫描范围为50～1500 m/z，若想分离出m/z＝500的离子，则先扫描射频电压，使50～499 m/z被甩出阱；再依次改变交流电压频率，使501～1500 m/z被甩出阱，这样就分离出m/z＝500的离子。若在端盖电极上加低幅的交流电压信号，将使被分离出的离子产生共振激发，与氦气碰撞，产生结构碎片信息。以肽分析为例，这个过程将引起沿肽骨架的随机断裂，在质谱上获得丰富的氨基酸序列碎片。
四极杆、离子阱、飞行质谱和各种离子源比较
四极杆、离子阱、飞行质谱和各种离子源比较 单四极质量分极器Q由四根严格平行并与中心轴乖间隔的圆柱形或双曲面柱状电极构成正负两组电极，其上施加直流和射频电压，产生一动态电场子有全扫描和选择离子检测方式SIM，后者比前者灵敏度提高几个量级，但在不熟识测量物质的情况下，有可能造成误判三重四极杆QQQ是由三组四极杆串接起来，第一和第三组是质量分析器，第二组是活化室。如果第二个质量分析器不加电压，QQQ就可以作用Q使用。当然也在第一个质量分析器后加一个检测器。作为Q使用有子离子扫描、母离子扫描、中性丢失扫描和多反应选择扫描MRM，MRM扫描主要用于定量分析，比单极的SIM灵敏度更高。 离子阱分析器它是由环行电极和上、下两个端盖电极构成的三维四极场。原理：将离子储存在阱里，然后改变电场按不同质荷比将离子推出阱外进行检测。 离子阱有全扫描和选择离子扫描功能，同时利用离子储存技术，可以选择任一质量离子进行碰撞解离，实现二级或多级MSn分析功能。但离子阱的全扫描和选择离子扫描的灵敏度是相似的。广泛应用于蛋白质组学和药物代谢分析。 飞行时间质谱TOF-MS，它与离子的飞行速度和质量相关，线性同轴的飞行时间质量分析器由一段无场的飞行管构成。离子束被高压加速以肪冲方式推出离子源进入飞行管，自由漂移到达检测器，由于分了质量不同，获得的加速度不同，质量小的离子比大的具有较高速度，离子选到达检测器。 TOF理论上不存在质量上限，因此在高分子量分析应用中重要性是无敌的，目前主要应用在生物质谱领域。 扇形场质量分析器：在离子源中生成的离子被几千伏高压加速，以一定的的曲率半径通过电场、磁场，其运动轨道半径取决于离子的动量、质荷比、加速电压、磁场强度，不同质量离子在变化的电、磁场或加速电压下被分离。
高效液相色谱-线性离子阱质谱联用仪
高效液相色谱-线性离子阱质谱联用仪 仪器名称：高液相色谱-线性离子阱质谱联用仪 High Liquid Chromatography & Linear Ion Trap Quadrupole （简称LTQ） Mass Spectrometer 仪器型号：HPLC1260 & LTQ XL 仪器缩写：LTQ 生产厂家：美国Agilent公司、美国Thermo-fisher公司 安装日期：2015-7-15, 2008-4-17 标签：小分子定性、定量分析。药物杂质、天然产物结构鉴定 仪器简介： LTQ XL增强型二维线性离子阱质谱仪，拥有无与伦比的灵敏度和超快的周期时间，可以保证在最短的时间内用最少的样品得到最多的质谱信息。LTQ XL 提供的高质量的谱图和先进数据分析软件包联合可以为复杂结构确证研究提供完整的解决方案。LTQ XL同时扩展了离子阱质谱的功能和操作性能，新功能包括： 可升级的电子转移裂解(ETD)模块可以提供传统裂解方法无法得到的蛋白质翻译后修饰信息 脉冲碰撞能量诱导解离(PQD)功能可以提供低质量端的碎片离子信息 高选择MS/MS分析给谱图在数据库和谱库检索更好的匹配，提高了结构确证的可靠性
快速极性切换、母离子相关MS3数据关联扫描，可以对代谢物组成的鉴定进行智能、快速分析 可以和高端的回旋共振质谱组合成最先进的多级高分辨杂交质谱仪 LTQ XL使用最新的Xcalibur操作平台，和Mass Frontier、MetWorks和BioWorks等专业应用软件配合，是药物杂质鉴定、代谢物结构鉴定、天然产物结构分析、药物筛选过程中的定量、法医和临床检验等尖端领域的最佳选择方案。 二维液相色谱中心切割技术可对复杂组分进行分析。 半制备液相色谱-质谱分析可制备少量化合物，并采用柱后分流技术质谱在线检测制备所得样品。 主要配置： Agilent公司的液相系统和光电二极管阵列检测器 Thermo公司的LTQ XL线性离子阱质谱仪 性能指标： m/z范围：50-2 000 Da ESI全扫描MS/MS灵敏度：250 fg利血平，信噪比>100:1 分辨率：FWHM=0.5 Da MSn：自动1～10级质谱 质量稳定度：+/-0.1Da /8hours 定量动态线性范围：10e5～10e6 DAD扫描波长范围190-600nm 应用范围： 复杂中药、天然产物定性、定量分析 药物杂质分析 代谢物鉴定和定量 翻译后修饰（PTM）研究 药物筛选过程中的定量、法医和临床检验 半制备液相色谱-质谱分析 二维液相色谱-质谱分析 来样须知： 样品为极性或弱极性（含有极性基团），分子量范围100~4000amu，能溶于水、乙腈、甲醇、乙醇 固体或冻干粉样品，含主要成分0.1~1mg（须注明使用的溶剂：水、乙腈、甲醇、乙醇）。溶液样品50~1000uL，浓度100~1000ug/mL，（须注明浓度及溶剂）样品中不得含有磷酸盐、硫酸盐、盐酸盐等不挥发性盐类 样品中不得含有表面活性剂类（或去污剂。解释：我们的仪器要保证灵敏度测试代谢样品）、强酸、强碱 样品中不得含有乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、苯、环己烷、DMSO等有机试剂 样品中不得含有蛋白质、多糖、脂类物质 样品中不得含有增塑剂类物质（解释：我们的仪器要保证灵敏度测试代谢样品） 包天测试的样品（代谢组学、药代等样品）可以为血样、尿样、细胞组织样、微生物培养液等，样品必须经过去除蛋白质、脂类和多糖的操作，然后用流动相
LC-MS操作步骤
液质联用使用流程 一、开机步骤 1.质谱开机步骤 1）检查氮气和氩气，并打开主阀。 2）检查机械泵泵油的水平线是否在窗口的1/2～2/3 之间。 3）打开UPS电源，打开计算机和离子阱质谱仪下方的主机电源。4）启动trapcontrol 软件，待真空度达到2*10-5mbar 以下，按《离子阱质谱仪使用流程》正常操作。（如果长时间关机或更换He 钢瓶，在离子阱控制画面，选择菜单：Options > Vacuum System…，选择Flush Helium Line 两次） 二、液相开机步骤 1）检查流动相并补加好，确保柱子装的是3.5μm 2.1 x 50mm的。 2）打开计算机，依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源，等待仪器自检过后方可操作。 3）打开变色龙的软件，对泵进行洗泵和排气。 4）设定各部参数，让仪器平衡一段时间待基线平稳 三、液质联用使用步骤 1. 质谱方法的建立 1）单击桌面图标或者通过程序目录启动trapcontrol 软件；Start - Programs - Bruker Daltonics - esquireControl 软件可能要求输入操作人员的姓名。 2）选择软件中质谱仪处于操作状态
液相色谱-高容量离子阱质谱(LC-IT-MS,HCT)
液相色谱-高容量离子阱质谱(LC-IT-MS，HCT) 更新时间：2011-01-10 14:05:56来源: 工业360仪器仪表网 核心提示：Bruker Daltonics公司的esquire HCT是目前esquire系列的高档离子阱质谱仪。仪器的核心部分离子阱由上下两个端盖电极和中间的环电极组合而成，三个电极均为双曲线形状，当在电极上加以适当的电压后，便形成一个假想的离子“陷阱”。 一. 基本原理 Bruker Daltonics公司的esquire HCT是目前esquire系列的高档离子阱质谱仪。仪器的核心部分离子阱由上下两个端盖电极和中间的环电极组合而成，三个电极均为双曲线形状，当在电极上加以适当的电压后，便形成一个假想的离子“陷阱”。离子阱的存在可使带电粒子或气态离子的运动限制在阱内长达一定时间。当改变限制离子在阱内运动的条件后，被选择离子可从端盖电极中心的小孔弹射出去而到达检测器，连续质荷比的离子依次从阱中弹出时，便形成连续的质谱图。由于离子可在阱内贮存一段时间，离子阱质谱仪可实现时间序列的串联质谱MSn，通常状态下可以做到n=4-6级，esquire HCT在手动状态下最高可达n=11级。esquire HCT可使用大气压化学电离（Atomospheric Pressure Chemical Ionization, APCI）、纳升电喷雾（NanoElectrospray）及常规电喷雾（Electrospray）电离等几种电离源，有正离子、负离子、正负离子交替三种电离方式，常规扫描范围为50-3000 m/z，扩展模式下可为200-6000 m/z，仪器在最高分辨率下半峰宽为0.3 （FWHM/ m/z），准确率为0.15Da。 esquire HCT前接Agilent公司1100系列液相色谱仪，由ChemStation及esquire Control控制软件分别控制液相色谱部分和质谱部分，两部分之间可实现无缝连接，外置的DataAnalysis、ReportDesigner、LibraryEditor及QuantAnalysis等质谱分析软件可对质谱数据进行充分的挖掘分析。 二. 仪器性能指标 1．UltraScan: 50-2000amu, 0.65 FWHM, 26000u/sec 2．Enhanced: 50-3000amu, 0.35 FWHM, 8100u/sec 3．MaxRes Scan: 50-3000amu, 0.25 FWHM, 1650u/sec 4．Extended: 200-6000amu, 3 FWHM, 27000u/sec 5．MS/MS灵敏度: 1pg Reserpine (S/N=50:1) 6．母离子选择分辨率: 1amu(50-3000amu) 7．准确度: 0.15amu 8．手动MSn，AutoMS5 三. 主要应用