饲料中尿素含量的测定——比色法
饲料中尿素含量的测定（非国标）
——比色法
一、适用范围
本方法适用于动物饲料及其原料中尿素含量的测定
二、原理
由于对-二甲胺基苯甲醛（DMAB，Ehrilich’S试剂）与尿素可形成有颜色的复合物，并可用分光光度计在420nm处进行比色，以求出尿素的含量
三、仪器与试剂
1、分光光度计420nm，1cm吸收池
本方法除特殊注明外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
2、DMAB溶液
溶解16g DMAB于1000mL甲醇中，再加入100mol/L盐酸，该溶液在1个月内是稳定的。
3、乙酸锌（Zn（Ac）2.2H2O）溶液
称取22.0克乙酸锌溶于蒸馏水中，再加入3mL乙酸，然后稀释至100mL 。4、亚铁氰化钾（K4Fe（CN）6.3H2O）溶液
溶解10.6g 亚铁氰化钾于蒸馏水中，再稀释至100mL。
5、磷酸缓冲液（PH6—7.0）
先分别溶解3.403g磷酸二氢钾和4.355g磷酸氢二钾100mL蒸馏水中，然后将两溶液合并在一起，再用水稀释至1000mL。
6、木炭Daroa G60
7、尿素标准溶液：
称取5g（准确至1mg）尿素（试剂级）溶解于水，再稀释至1000mL作为储备液（5mg/mL）
工作液：0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8和2.0尿素/5mL。吸收储备液各2 4 6 8 10 12 14 16 18和20mL 分别置于250mL容量瓶中，并用磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度。
8、参比溶液
用含1.0mg尿素/5mL的标准溶液作为参比溶液。如置于24℃以下环境，该参
比溶液可稳定一周。
四、标准曲线的制备
吸取不同浓度的尿素工作标准溶液5mL ，分别置于20mmX150mm（25mL）的比色管中，各加入5mL DMAB溶液。另外，制备一空白对照液，即吸取5mL DMAB溶液和5mL磷酸缓冲液于25mL比色管中。然后，将所有比色管轻轻充分摇动，并置于25℃水浴中放置10min。然后，用空白对照调节吸光度0点。用1Cm 吸收池于420nm处读取各溶液的吸光度值。然后用吸光度对尿素浓度做图，得一条直线。否则，应将该批号的DMAB溶液重做一次。
五、测定步骤
称取1.00g粉碎的样品置于500mL容量瓶中，加入1g木炭，约250mL水，5mL乙酸锌溶液和5mL铁氰化钾溶液，机械振摇30min，并用水稀释至刻度，静置至沉淀下沉。用滤纸过滤，收集上清溶液。吸取5mL溶液于比色管中，加入5mLDMAB溶液，并充分振摇。每组样品均应带一参比标准（5mL参比溶液和5mL DMAB溶液）及一个空白对照液。于25℃水浴中放置100min。以空白对照液为对照，读取420nm的吸光度。
六、测定结果的计算：
由标准曲线查得的浓度（mg/5mL）X100
尿素（%）=--------------------------------------------------------
样品重X1000/500
（1.0 X A样品）X1000
或尿素（%）=-------------------------------------------
A标准X所测定的样品重（mg）
附注盐酸标准溶液的配置与标定方法
1、盐酸标准溶液的配置
（1）0.05mol/L 取分析纯盐酸4.2mL 加蒸馏水定容至1000mL，摇匀即得。（2）0.1mol/L 取分析纯盐酸8.5mL加蒸馏水定容至1000mL 摇匀即得。
2、标定方法
精密称取在300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.1g（准确至0.1mg），加蒸馏水50mL 使溶解，加甲基红溴甲酚绿指示剂10滴，用盐酸标准溶液滴定至呈紫红色，煮沸2min，冷却至室温，继续滴定至呈紫红色，即得。
3、计算公式
m X 1000
C= ——————
v X 53.00
式中C——盐酸标液的浓度（mol/L）
v——滴定时消耗盐酸标液的量（mL）
m——基准无水碳酸钠的称取量（g）
4、重复性
每次标定至少取3份平均样进行操作，计算结果的相对平均偏差不得超过0.2%，否则需重新标定。
5、注意事项
本方法规定的基准无水碳酸钠称取量，系指盐酸标液浓度0.05mol/L时所称取的量，如果标定时用0.1mol/L标准盐酸液，则基准无水碳酸钠称取量应为0.15g。
尿素的定性检验
方法一：取尿素样品1g 加入试管中, 加水约1ml 溶解，再加浓硝酸20 滴，混合均匀后放置冷却 5 ～10 分钟，若有白色结晶产生就证明存在尿素。方法二：取尿素样品1g 放入试管中，在酒精灯上加热溶化，稍冷却，加入蒸馏水2ml 及1g /ml 氢氧化钠溶液 5 滴，溶解后，再加入0.05g /ml 硫酸铜溶液 3 滴，若出现紫色，也证明是尿素。
尿素测定方法
实验十七 实验名称：尿素的测定 实验目的与要求：掌握测定血清尿素的基本原理 实验仪器、试剂：半自动生化分析仪、尿素测定试剂盒 实验原理： 尿素经脲酶水解生成NH3与CO2,在谷氨酸脱氢酶（GLDH）的作用下，氨与α-酮戊二酸及还原型辅酶Ⅰ（NADH）反应生成谷氨酸和NAD+，NADH在340nm 处的吸光度下降速率与待测样品中尿素的含量成正比。 操作方法： 1、将试剂R1：R2=4：1混合，即为工作液 2、按下列顺序加入各试剂 单位ml 空白标准样本 蒸馏水0.01 —— 样本－－0.01 标准液－0.01 － 工作液 1.0 1.0 1.0 3、混匀各管，340nm,空白管调零，延时30秒，读取初始吸光度A1，60秒后读取A2，计算ΔA 实验现象与数据：记录ΔA 结果分析与结论：尿素＝ΔA样/ΔA标×C标（8.32 mmol/l） 参考范围：1.7-8.3mmol/l 临床意义： 实验十八 实验名称：血清尿酸的测定 实验目的与要求：掌握尿酸酶-过氧化物酶耦联法测定尿酸的基本原理 实验仪器、试剂：尿酸测定试剂盒，722E/723分光光度计 实验原理：尿酸酶氧化尿酸，生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使ESBmT和4－氨基安替比林缩合成有色化合物，其在546nm吸光度与尿酸浓度成正比。 操作方法： 按以下步骤操作 单位ml 标准测定空白 样本－0.025 － 标准液0.025 －－ 蒸馏水－－0.025 酶试剂 1.0 1.0 1.0 混匀37℃温浴5min，以空白管调零。546nm，0.5cm比色杯，测定各管的A 实验现象与数据：记录各管的A 结果分析与结论：血清尿酸浓度＝A样/A标×C标（357μmol/l）参考值：男202－416μmol/L，女142-339μmol/L
土壤中氮含量的测定分析(精)
土壤中氮含量的测定分析 核心提示：摘要：概述了土壤中氮元素的存在形式、土壤全氮、无机氮(包括铵态氮、硝态氮)水解氮、酰胺态氮的测定方法。关键词：土壤；全氮；测定方法土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态... 摘要：概述了土壤中氮元素的存在形式、土壤全氮、无机氮(包括铵态氮、硝态氮)水解氮、酰胺态氮的测定方法。 关键词：土壤；全氮；测定方法 土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态氮两大类，其中95%以上为有机态氮，主要包括腐殖质、蛋白质、氨基酸等。小分子的氨基酸可直接被植物吸收，有机态氮必须经过矿化作用转化为铵，才能被作物吸收，属于缓效氮。 土壤全氮中无机态氮含量不到 5%，主要是铵和硝酸盐，亚硝酸盐、氨、氮气和氮氧化物等很少。大部分铵态氮和硝态氮容易被作物直接吸收利用，属于速效氮。无机态氮包括存在于土壤溶液中的硝酸根和吸附在土壤颗粒上的铵离子，作物都能直接吸收。土壤对硝酸根的吸附很弱，所以硝酸根非常容易随水流失。在还原条件下，硝酸根在微生物的作用下可以还原为气态氮而逸出土壤，即反硝化脱氮。部分铵离子可以被粘土矿物固定而难以被作物吸收，而在碱性土壤中非常容易以氨的形式挥发掉。土壤腐殖质的合成过程中，也会利用大量无机氮素，由于腐殖质分解很慢，这些氮素的有效性很低。 土壤中的氮素主要来自施肥、生物固氮、雨水和灌溉水，后二者对土壤氮贡献很小，施肥是耕作土壤氮素的主要来源，而自然土壤的氮素主要来自生物固氮。 土壤含氮量受植被、温度、耕作、施肥等影响，一般耕地表层含氮量为0.05%～0.30%，少数肥沃的耕地、草原、林地的表层土壤含氮量在 0.50%～0.60%以上。我国土壤的含氮量，从东向西、从北向南逐渐减少。进入土壤中的各种形态的氮素，无论是化学肥料，还是有机肥料，都可以在物理、化学和生物因素的作用下进行相互转化。 1 土壤全氮的测定 1.1 开氏法 近百年来，许多科学工作者对全氮的测定方法不断改进，提出了许多新方法，主要有重铬酸钾-硫酸消化法、高氯酸-硫酸消化法、硒粉-硫酸铜-硫酸消化法。但开氏法目前仍作为一个统一的标准方法，此法容易掌握，测定结果稳定，准确率较高。 开氏法测氮的原理为：在盐类和催化剂的参与下，用浓硫酸消煮，使有机氮分解为铵态氮。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括硝态氮）。含有硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消
饲料中尿素含量的测定——比色法
饲料中尿素含量的测定（非国标） ——比色法 一、适用范围 本方法适用于动物饲料及其原料中尿素含量的测定 二、原理 由于对-二甲胺基苯甲醛（DMAB，Ehrilich’S试剂）与尿素可形成有颜色的复合物，并可用分光光度计在420nm处进行比色，以求出尿素的含量 三、仪器与试剂 1、分光光度计420nm，1cm吸收池 本方法除特殊注明外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 2、DMAB溶液 溶解16g DMAB于1000mL甲醇中，再加入100mol/L盐酸，该溶液在1个月内是稳定的。 3、乙酸锌（Zn（Ac）2.2H2O）溶液 称取22.0克乙酸锌溶于蒸馏水中，再加入3mL乙酸，然后稀释至100mL 。4、亚铁氰化钾（K4Fe（CN）6.3H2O）溶液 溶解10.6g 亚铁氰化钾于蒸馏水中，再稀释至100mL。 5、磷酸缓冲液（PH6—7.0） 先分别溶解3.403g磷酸二氢钾和4.355g磷酸氢二钾100mL蒸馏水中，然后将两溶液合并在一起，再用水稀释至1000mL。 6、木炭Daroa G60 7、尿素标准溶液： 称取5g（准确至1mg）尿素（试剂级）溶解于水，再稀释至1000mL作为储备液（5mg/mL） 工作液：0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8和2.0尿素/5mL。吸收储备液各2 4 6 8 10 12 14 16 18和20mL 分别置于250mL容量瓶中，并用磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度。 8、参比溶液 用含1.0mg尿素/5mL的标准溶液作为参比溶液。如置于24℃以下环境，该参
比溶液可稳定一周。 四、标准曲线的制备 吸取不同浓度的尿素工作标准溶液5mL ，分别置于20mmX150mm（25mL）的比色管中，各加入5mL DMAB溶液。另外，制备一空白对照液，即吸取5mL DMAB溶液和5mL磷酸缓冲液于25mL比色管中。然后，将所有比色管轻轻充分摇动，并置于25℃水浴中放置10min。然后，用空白对照调节吸光度0点。用1Cm 吸收池于420nm处读取各溶液的吸光度值。然后用吸光度对尿素浓度做图，得一条直线。否则，应将该批号的DMAB溶液重做一次。 五、测定步骤 称取1.00g粉碎的样品置于500mL容量瓶中，加入1g木炭，约250mL水，5mL乙酸锌溶液和5mL铁氰化钾溶液，机械振摇30min，并用水稀释至刻度，静置至沉淀下沉。用滤纸过滤，收集上清溶液。吸取5mL溶液于比色管中，加入5mLDMAB溶液，并充分振摇。每组样品均应带一参比标准（5mL参比溶液和5mL DMAB溶液）及一个空白对照液。于25℃水浴中放置100min。以空白对照液为对照，读取420nm的吸光度。 六、测定结果的计算： 由标准曲线查得的浓度（mg/5mL）X100 尿素（%）=-------------------------------------------------------- 样品重X1000/500 （1.0 X A样品）X1000 或尿素（%）=------------------------------------------- A标准X所测定的样品重（mg）
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书 1.实验原理 脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。尿素被脲酶水解产氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是连续监测法。 脲酶 尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－ 谷氨酸脱氢酶 NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD＋+H2O 2 标本： 2.1 病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。 2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用
无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。 3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：申能尿素测定试剂盒（142 3107170 1 试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml） 6.1.1 试剂组成 试剂1： Tris缓冲液pH7.8 120mmol/L α-酮戊二酸7mmol/L ADP 0.6mmol/L 谷氨酸脱氢酶≥1000U/L
脲酶≥6000U/L 试剂2： NADH 0.25mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品
尿素性质
水分/%≤0.50 1.00 粒度(φ0.8～2.5mm)/%≥ 90 90 工业制法 生产方法：工业上用液氨和二氧化碳为原料，在高温高压条件下直接合成尿素，化学反应如下： 2NH3+CO2→NH2COONH4→CO(NH2)2+H2O 农业应用： 尿素是一种高浓度氮肥，属中性速效肥料，也可用于生产多种复合肥料。在土壤中不残留任何有害物质，长期施用没有不良影响。畜牧业可用作反刍动物的饲料。但在造粒中温度过高会产生少量缩二脲，又称双缩脲，对作物有抑制作用。我国规定肥料用尿素缩二脲含量应小于0.5%。缩二脲含量超过1%时，不能做种肥，苗肥和叶面肥，其他施用期的尿素含量也不宜过多或过于集中。 尿素是有机态氮肥，经过土壤中的脲酶作用，水解成碳酸铵或碳酸氢铵后，才能被作物吸收利用。因此，尿素要在作物的需肥期前4～8天施用。 分析 方法名称：尿素—尿素的测定—中和滴定法 应用范围：本方法采用滴定法测定尿素中尿素的含量。 本方法适用于尿素。 方法原理：供试品照氮测定法测定，用盐酸滴定液滴定，根据滴定液使用量，计算尿素的含量。 试剂： 1. 盐酸滴定液(0.2mol/L) 仪器设备： 试样制备： 1. 盐酸滴定液(0.2mol/L) 配制：取盐酸18.0mL，加水适量使成1000mL，摇匀，得0.2mol/L盐酸滴定液。标定：取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.3g，精密称定，加水50mL使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL盐酸滴定液（0.2mol/L）相当于10.60mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度。 取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4mL使溶解，再加水稀释至200mL。取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30mL，摇匀。 操作步骤：精密称取供试品约0.15g，置凯氏烧瓶中，加水25mL、3%硫酸铜溶液2mL与硫酸8mL，缓缓加热至溶液呈澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷，加水100mL，摇匀，沿瓶壁缓缓加20%氢氧化钠溶液75mL，自成一液层，加锌粒0.2g，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，并将冷凝管的末端伸入盛有4%硼酸溶液50mL的500mL锥形瓶的液面下，轻轻摆动凯氏烧瓶，使溶液混合均匀，加热蒸馏，俟氨馏尽，停止蒸馏，馏出液中加甲基红指示液数滴，用盐酸滴定液(0.2mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL盐酸滴定液(0.2mol/L) 相当于6.006mg的CH 4N 2 O。
尿素合成中缩二脲含量的测量及控制
第一章尿素 1.1 尿素简介 尿素是人工合成的第一个有机物，是一种高浓度氮肥，属中性速效肥料，也可用了生产多种复合肥料。在土壤中不残留任何有害物质，长期施用没有不良影响。畜牧业可用作反刍动物的饲料。但在造粒中温度过高会产生少量缩二脲，又称双缩脲，对作物有抑制作用。我国规定肥料用尿素缩二脲含量应小于0.5％。缩二脲含量超过1％时，不能做种肥，苗肥和叶面肥，其他施用期的尿素含量也不宜过多或过于集中。 尿素广泛存在于自然界中，如新鲜人粪中含尿素0.4％。尿素产量约占我国目前氮肥总产量的40％，是仅次于碳铵的主要氮肥品种之一。尿素作为氮肥始于20世纪初。20世纪50年代以后，由于尿素含氮量高(45％～46％)，用途广泛和工业流程的不断改进，世界各国发展很快。我国从20世纪60年代开始建立中型尿素厂。1986～1992年，我国尿素产量均在900万吨以上。目前占氮肥总产量的40％。 尿素分子式是CO(NH2)2，因为在人尿中含有这种物质，所以取名尿素[1]。尿素含氮(N)46％，是固体氮肥中含氮量最高的。工业上用液氨和二氧化碳为原料，在高温高压条件下直接合成尿素，化学反应如下： 2NH3+CO2→NH2COONH4→CO(NH2)2+N2O 尿素易溶于水，在20℃时100毫升水中可溶解105克，水溶液呈中性反应。尿素产品有两种。结晶尿素呈白色针状或棱柱状晶形，吸湿性强。粒状尿素为粒径1～2毫米的半透明粒子，外观光洁，吸湿性有明显改善。20℃时临界吸湿点为相对湿度80％，但30℃时，临界吸湿点降至72.5％，故尿素要避免在盛夏潮湿气候下敞开存放。目前在尿素生产中加入石蜡等疏水物质，其吸湿性大大下降。 尿素是生理中性肥料，在土壤中不残留任何有害物质，长期施用没有不良影响。但在造粒中温度过高会产生少量缩二脲，又称双缩脲，对作物有抑制作用。我国规定肥料用尿素缩二脲含量应小于0.5％。缩二脲含量超过1％时，不能做种肥，苗肥和叶面肥，其他施用期的尿素含量也不宜过多或过于集中。
实验十三血清尿素氮测定(脲酶—Berthelot比色法)
实验十三血清尿素氮测定（脲酶—Berthelot比色法） 一、实验目的与要求 1 了解血液尿素氮（BUN）在人体营养学上的生理学意义及其在代谢上的重要性。 2 掌握血液尿素氮测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。 二、实验原理 尿素在脲酶作用下分解生成氨。在碱性条件下，经次氯酸氧化生成的氯胺与苯酚被亚硝基铁氰化钠催化生成蓝色的靛酶。其反应式为： CH2NH2N尿素O+HOH脲酶NH3彩+CHOH2N氨基甲酸O-2NH3+CO2 氨 NH3+OCl-NH2Cl+OH- 次氯酸氨胺催化剂 NH2Cl+OH+OH-Cl-+H2O+HONH2 苯酚P胺基苯酚 HONH2+OH-+O2==N——O-+H2O 酚靛三、实验仪器与试剂 1 仪器 （1） AT648半自动生化分析仪1台； （2） 4孔恒温水浴锅1个； （3）振动摇床1台。 2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括： （1）试管架1个； （2） 2ml试管10个； （3） 20μl微量加样器1个； （4） 1ml移液管1个； （5） 5ml移液管2个； （6）吸耳球1个； （7）搪瓷盘1个； （8）微量加样滴头； （9）吸水纸。 3 本试剂盒内含5种试剂： （1）脲酶（冻干） 2瓶 （2） pH 8.0缓冲液：由乙二胺四乙酸二钠盐和磷酸氢二钾组成 1×46ml （3）显色剂Ⅰ：由苯酚和亚硝基铁氰化钠组成 1×225ml （4）显色剂Ⅱ：由氢氧化钠和安替福民组成 1×225ml （5）尿素氮标准液（20mg/dl） 2×2ml 四、实验步骤 1 血清 （1）取脲酶一瓶，用23.0ml pH 8.0缓冲液溶解。 （2）于一系列试管中，按下表加入各溶液。表131系列反应管中所加溶液的量 空白管标准管样品管样品（μl）——20标准液（μl）—20—酶液（μl）0.50.50.5 （3）于37℃水浴中保温15min，然后各管分别加入显色剂Ⅰ和显色剂Ⅱ各2.5ml。 （4）再于37℃水浴中保温20min，取出冷却至室温，于721分光光度计/ AT648半自动生
尿素的测定方法 第7部分：粒度 筛分法(标准状态：现行)
I C S65.080 G20 中华人民共和国国家标准 G B/T2441.7 2010 代替G B/T2441.7 2001 尿素的测定方法 第7部分:粒度筛分法 D e t e r m i n a t i o no f u r e a P a r t7:P a r t i c l e s i z e S i e v em e t h o d 2010-06-30发布2011-01-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
前言 G B/T2441‘尿素的测定方法“分为以下九个部分: 第1部分:总氮含量; 第2部分:缩二脲含量分光光度法; 第3部分:水分卡尔四费休法; 第4部分:铁含量邻菲啰啉分光光度法; 第5部分:碱度容量法; 第6部分:水不溶物含量重量法; 第7部分:粒度筛分法; 第8部分:硫酸盐含量目视比浊法; 第9部分:亚甲基二脲含量分光光度法三 本部分为G B/T2441的第7部分三 本部分代替G B/T2441.7 2001‘尿素测定方法粒度的测定筛分法“三本部分与G B/T2441.7 2001相比主要变化是:分析步骤中增加了人工筛分三本部分由中国石油和化学工业协会提出三 本部分由全国肥料和土壤调理剂标准化技术委员会(S A C/T C105)归口三 本部分起草单位:国家化肥质量监督检验中心(上海)三 本部分主要起草人:张求真二孙丹三 本部分所代替标准的历次版本发布情况为: G B/T2448 1981,G B/T2448 1991,G B/T2441.7 2001三
尿素的测定方法 第7部分:粒度筛分法 1范围 G B/T2441的本部分规定了用筛分法测定尿素的粒度三 本部分适用于由氨和二氧化碳合成制得的尿素粒度的测定三 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过G B/T2441的本部分的引用而成为本部分的条款三凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本三凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分三 G B/T6003.1 1997金属丝编织网试验筛(I S O3310-1:1990,E Q V) 3原理 用筛分法将尿素分成不同粒径的颗粒,称量,计算质量分数三 4仪器 4.1孔径0.85m m二1.18m m二2.00m m二2.80m m二3.35m m二4.00m m二4.75m m和8.00m m试验筛 (G B6003.1中R40/3系列),附筛盖和底盘; 4.2感量0.5g的天平; 4.3振荡器,能垂直和水平振荡三 5分析步骤 5.1根据被测物料,按粒度d(0.85m m~2.8m m二1.18m m~3.35m m二2.00m m~4.75m m二 4.00m m~8.00m m)选取一套(两个)相应的试验筛三 5.2将筛子按孔径大小依次叠好(大在上,小在下),装上底盘,称量约100g实验室样品(精确到0.5g),将试料置于依次叠好的筛子上,盖好筛盖,置于振荡器上,夹紧,振荡3m i n,或人工筛分三称量通过大孔径筛子及未通过小孔径筛子试料,夹在筛孔中的颗粒按不通过计三 6分析结果的表述 粒度w,以质量分数(%)表示,按式(1)计算: (1) w=m1?100 m 式中: m1 通过大孔径筛子和未通过小孔径筛子试料的质量的数值,单位为克(g); m 试料的质量的数值,单位为克(g)三 计算结果表示到小数点后一位三
尿素(UREA)检测的标准操作程序
尿素（UREA）检测的标准操作程序 一、目的 规范在罗氏cobas c311生化分析仪上定量检测人血清、血浆中的尿素，确保检测结果的准确性及重复性。 二、范围 检验科生化室检验人员。 三、该SOP变动程序 本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准:专业组长，科室主任。 四、授权操作人 检验科经过培训并被授权发报告的人员均可操作。 五、实验原理 酶动力学法 尿素 + H 2O 尿酶 2NH+ 4 + CO 2 2NH+ 4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ 谷氨酸脱氢酶 L-谷氨酸 + 2NAD+ + H 2 O NADH浓度降低的速率与样本中的BUN的浓度成正比，在340nm下进行检测。 六、标本 1、标本类型： 血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。 血浆：肝素、EDTA-K3 、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。 2、样本稳定性： 标本在2－8 度可稳定2 天，15－25度可稳定8小时，-20 度可稳定6 个月。只能冻融一次。 七、仪器与试剂 1、仪器：罗氏cobas c311生化分析仪 2、试剂：罗氏原装配套尿素试剂，试剂无需任何处理，可直接使用 3、试剂稳定性：未开封试剂盒按要求保存可稳定至有效期末，已开封试剂 盒在仪器上可稳定8周
八、校准 1、校准物：S1:0.9%NaCl，S2:C.f.a.s(罗氏通用校准品，复溶后使用)。 2、校准方法：两点校准。 3、校准频率：每批试剂必须用新鲜试剂和校准一次。另外，以下情况需要再 次校准：校准过期:批校准稳定28天，盒校准7天。 九、操作程序 1.每日开机准备： 1.1仪器处于关机状态 1.1.1检查供水、排水系统是否正常 1.1.2接通仪器左侧电源开关, 以及电脑控制电脑的开关 1.1.3登陆：输入用户名mjt及密码123，仪器初始化后进入待机状态 1.2仪器处于休眠状态： 1.2.1仪器在进入睡眠时指定的时间自动唤醒，或单击[[唤醒]]唤醒仪器； 1.2.2系统退出睡眠状态至登录界面，输入用户名及密码，仪器初始化后进入待 机状态。 1.3开机后确认 1.3.1进入系统总览，点击日常保养按键，检查保养工作是否完成（仪器自动完 成，但如果Hitergent不够量，自动保养会中断），如保养未完成，确认Hitergent够量后，进入综合功能—维护，用光标选中需做的保养项目，点选择，再执行，手工要求仪器完成保养工作 1.3.2清除标本数据库 进入进入系统概览，点样本数据清除，选择清除后点确定，即可清除以往所有的病人结果数据 1.3.3检查试剂盘内试剂是否足够： 进入试剂界面，点击设置按键,从该画面下检查试剂量,按需要更换试剂
实验2 氮肥中含氮量的测定 可参考《分析化学》P170
实验二氮肥中含氮量的测定(甲醛法) 请同学们参考《分析化学实验》P170-172页的实验内容 一、氢氧化钠标准溶液的配制和标定 （一）目的要求 1.了解碱标准溶液一般的配制和标定方法。 2.掌握用邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠溶液的方法。 （二）原理 碱标准溶液常用氢氧化钠来配制。氢氧化钾一般并不优于氢氧化钠，而且价格高，因此仅在个别特殊情况下使用。 由于氢氧化钠固体易吸收空气的CO2和水分，因此碱标准溶液不能直接配制，而必须用标定法。 氢氧化钠吸收空气中的CO2，以及水中溶解的CO2，使配得的溶液中含有少量Na2CO3。含有碳酸盐的标准碱溶液，将使滴定反应复杂化，甚至使测定发生一定的误差。因此应配制不含碳酸盐的碱溶液： 1. 取1份纯净的NaOH，加入1份水，搅拌使之溶解，配制成50%的NaOH浓溶液（约14.5mol·L-1）。在此溶液中，碳酸钠几乎不溶解。待碳酸钠沉降下来之后，吸取上层清液，用新煮沸并冷却的蒸馏水稀释至所需的浓度。 2. 1L氢氧化钠标准溶液中，加入1~2mL20%BaCl2溶液，摇匀后用橡皮塞塞紧，静置过夜，待碳酸钡完全沉淀后，将上层清液转入另一试剂瓶中，塞好备用。 苛性碱标准溶液侵蚀玻璃，最好用塑料瓶贮存。在一般情况下，可用玻璃瓶贮存碱标准溶液，但须用橡皮塞。浓NaOH溶液和NaOH标准溶液在存放过程中要密封。因此，常安装虹吸管和钠石碳管（如图4-2），以防止其吸收空气中的CO2。 标定碱溶液时，常用邻苯二甲酸氢钾和草酸等作基准物质，亦可用标准酸溶液与之比较以进行间接标定。 用邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）标定氢氧化钠时，反应如下： KHC8H4O4 + NaOH == NaKC8H4O4 + H2O 化学计量点时溶液pH值约9.1，可用酚酞作指示剂。 邻苯二甲酸氢钾易得到纯品，在空气中不吸水，容易保存。 （三）试剂
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法 1.实验原理 脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。 尿素被脲酶水解产氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。NADH 的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是连续监测法。 脲酶 尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－ 谷氨酸脱氢酶 NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD ＋+H 2O 2 标本： 2.1 病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。 2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：奥林巴斯尿素测定试剂盒试剂1：＋试剂2：6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存 试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的
氮肥中氮含量的测定—氨态氮的测定方法电子教案(精)
相关知识 依据国家标准GB/T8572-2010复合肥料中总氮含量的测定 知识点：肥料中氮的测定方法 1、氨态氮的测定 （1）酸量法(碳酸氢铵和氨水） ①方法原理:试液与过量的硫酸标准滴定溶液作用，加热煮沸5min ，冷却后加2d 混合指示剂，用氢氧化钠标准溶液返滴定剩余硫酸，由硫酸标准溶液的量和消耗量氢氧化钠标准溶液的量，求出氨态氮的含量。反应如下： 2NH 4HCO 3＋H 2SO 4＝(NH 3)2SO 4＋2CO 2↑＋2H 2O 2NaOH ＋H 2SO 4(剩余)＝Na 2SO 4＋2H 2O ②结果计算: 试样中氮含量以质量分数表示，按下式计算 ③方法讨论 此方法适用于碳酸氢铵、氨水中氮含量的测定。 迅速精确称量试样，立即将试样用水洗入已盛有已知浓度硫酸溶液的锥形瓶中，使试样完全溶解反应。 （2）蒸馏后滴定法 ①方法原理:样品与过量强碱溶液作用，然后从碱性溶液中蒸馏出的氨，用过量的硫酸标准溶液吸收，以甲基红或甲基红-亚甲基蓝乙醇溶液为指示剂，用氢氧化钠标准溶液返滴定至终点。由硫酸标准溶液的量和消耗的氢氧化钠标准溶液的量，求出氨态氮的含量。 NH 4+＋OH -＝NH 3↑＋H 2O 2NH 3＋H 2SO 4＝(NH 4)2SO 4 2NaOH ＋H 2SO 4(剩余)＝Na 2SO 4＋2H 2O ②结果计算: 计算试样中的含氮量同酸量法 ③方法讨论 此方法适用于含铵盐的肥料和不含受热易分解的尿素或石灰氮之类的肥料的测定。 蒸馏后滴定法操作过程相对繁琐，但测定结果准确，使用范围广，常用作仲裁分析。 （3）甲醛法 氨态氮 强酸的铵盐 甲醛法 强碱分解-蒸馏法 氨水或弱酸的铵盐：返滴定法
实验五血清尿素氮的测定
血清尿素氮的测定 一.实验原理 血清中尿素在氨基硫脲存在下，与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时，可生成双乙酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物)，其颜色深浅与尿素含量成正比，与同样处理的尿素标准液比色。即可求得血清中尿素的含量。 由于反应在强酸中进行，所产生的羟胺是干挠物质，所以必须用氧化剂将其氧化除去。 在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定．加入氨基硫脲可增加其稳定性，还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。 二.实验操作 取试管3支，注明空白管、标准管、测定管，按下表操作 540nm比色，以空白管调零，测定各管吸光度值。 三.计算
血清尿素氮（mmol / L ）=——————— X 17.85 测定管吸光度标准管吸光度 正常值参考范围3．57～14．28mmol ／L 四.临床意义 血液中非蛋白含氮化合物包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、 胆红素及氨等。其中尿素含量约占l ／3～1／2。尿素是蛋白质代谢的产物．通过肾脏排出，故测血清尿素氮可作为检测肾脏功能的试验，并且其增高程度与病变的严重程度呈平行关系。 五.试剂 1.尿素氮试剂：蒸馏水lOOml ，浓硫酸44ml ，85％磷酸66ml ，冷却至室温后，加氨基硫脲50mg ，硫酸镉(3CdSO ４·8H 2O)2g ，溶解后稀释至1000ml 。 2.20g ／L 二乙酰一肟试剂：称取二乙酰一肟20g ，加入蒸馏水约900ml ，溶解后稀释至1000ml. ３.尿素氮标准贮存液(357mmol ／L)：称取尿素1.072g 溶解于蒸馏水中定容至1000ml 。 ４.尿素氮标准应用液(17.85mmol ／L)；取贮存液5ml ，加蒸馏水至100ml 。
尿素软膏中尿素含量的测定
尿素软膏中尿素含量的测定 首都医药1999年第2期第6卷药检技术 作者：姜厚德 单位：安徽省金寨县青山镇卫生院(237331) 关键词：尿素；非水滴定；含量测定 摘要用非水滴定法测定尿素软膏中尿素含量，并用B.P法作比较，二者测定结果较接近，用于测定自制尿素软膏的尿素含量也全部合格。此法关键是用醋酐增强了尿素的碱性而使滴定终点突跃明显；加入苯溶解凡士林，排除了在测定过程中的干扰。 尿素(Urea)为脱水药，作用与山梨醇相似，外用可抗菌、止痒及软化角质。尿素软膏为皮肤科常用制剂。英国药典(BP)和美国药典(USP)对尿素的制剂和原料的含量测定均采用凯氏定氮法，当测定软膏时，常因基质的突然沸腾而导致失败。笔者采用非水滴定法测定尿素软膏中尿素的含量，取得较好效果。 1实验依据 由于尿素是极弱的碱(Kb＝1.5×10-14)，在水和冰醋酸中都不能进行滴定，为增强滴定突跃，故采用增强尿素的碱性以便直接滴定。 2试药和仪器 尿素、高氯酸、盐酸、醋酐均为AR；25型酸度计(上海雷磁仪器厂)，S648型电热恒温水浴箱(上海医疗器械七厂)。 3方法和结果 3.1通过多次筛选和实验，取能实现明显滴定终点突跃的醋酐-苯(1∶1v/v)为溶媒。 3.2准确称取干燥至恒重的尿素5份，用电位滴定法，甘汞电极和玻璃电极分别为参比电极和指示电极，加结晶紫指示液3滴，用0.1mol HClO4液滴定，经酸度计测量加入不同体积时所对应的电位值，画表求得△E/△V的最大值为400mv，5份供试品的终点颜色均为刚转黄色。
3.3精密称取15%尿素软膏0.5g，加入醋酐-苯10ml，置水浴上加热并振摇使溶解，放冷，加入结晶紫指示液3滴，用0.1mol HClO4液滴定至恰显黄色，并将结果用空白校正，即得(每1mol/ml hClO4液和0.006006g的CH4NO相当)。 3.4精密称取干燥至恒重的尿素8份，各用4份分别以B.P法和本法测定，平均含量分别为98.40%和98.47%，比较接近一致。 3.5回收率测定：精密称取干燥至恒重的尿素约75mg，加入凡士林0.5g，按本法进行，以B.P法测得的含量98.4%为标准，计算称取量中含尿素的量。计算结果平均回收率为100.03%。再用本法对本院制剂室自制的15%尿素软膏进行含量测定，结果全部合格。 4讨论 4.1本法为利于溶解凡士林及作为惰性溶媒，故加入苯。 4.2加入醋酐旨在提高尿素的碱性，因为醋酐含乙酰阳离子〔(CH3CO)3＋O〕，比醋酸含质子〔CH3COOH2＋〕的酸性更强。 4.3非水滴定法简便易行、快速准确，适合医院制剂室作为中间品质量控制和含量测定的方法。
血清尿素测定参考方法
ICS 11．020 C 50 VS 中华人民共禾口国卫,--l=行业标准 WS／T 345—20 11 血清尿素测定参考方法 Reference procedure of the measurement of urea in serum 201 1-09-30发布2012—04—01实施 中华人民共和国卫生部发布
目次 前言 1范围· ·Ⅲ， 2规范性引用文件● 3术语和缩略语·● 4测定原理·· ··0 5测定样品 0 6测定试剂.0 6．1警示与安全注意事项.0 6．2试剂原料- 0 6．3试剂眭能要求.0 6．4试剂制备 0 6．5标准液的制备·0 7测定条件·，7．1仪器· 7．2最终反应混合液的浓度 7．3血清尿素测定条件，如7．4校准的扩展不确定度u 8测定······u 8．1无蛋白滤液的制备··· 8．2试剂准备 8．3标准曲线制作··· 8．4测定方法······ 8．5测定范围u他挖地n 8．6误差的来源 8．7测定样品要求 9结果计算·····- 9．1计算实际吸光度值···n¨¨n 9．2标准曲线的制作·一n 9．3样品测定结果的计算·-‘H 9i 4卓岔换算·····- M 附录A(规范性附录)L一谷氨酸脱氢酶催化活性浓度测定 附录B(规范性附录)脲酶催化活性浓度测定···¨n
前言 本标准修改采用由国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)批准的《CDC人血清尿素参考方法(分光光度法)》，并参考ISO 15193：2009《体外诊断器具生物源样品中量的测定参考测定程序的表述》适当增加内容。 本标准按照GB／T 1．1—2009给出的规则起草。本标准由卫 生部临床检验标准专业委员会提出。本标准起草单位：卫生部 临床检验中心。本标准主要起草人：杨振华、陈宝荣、邵燕、陈 琦、孙慧颖、胡滨。 Ⅲ
尿素检测流程
实验室分析 方法名称：尿素—尿素的测定—中和滴定法 应用范围：本方法采用滴定法测定尿素中尿素的含量。 本方法适用于尿素。方法原理：供试品照氮测定法测定，用盐酸滴定液滴定，根据滴定液使用量，计算尿素的含量。 试剂： 1. 盐酸滴定液(0.2mol/L) 2. 3%硫酸铜溶液 3. 硫酸 4. 20%氢氧化钠溶液 5. 锌粒 6. 4%硼酸溶液 7. 甲基红指示液 8. 甲基红-溴甲酚绿混合指示液 9. 基准无水碳酸钠 仪器设备： 试样制备： 1. 盐酸滴定液(0.2mol/L) 配制：取盐酸18.0mL，加水适量使成1000mL，摇匀，得0.2mol/L盐酸滴定液。 标定：取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.3g，精密称定，加水50mL使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL盐酸滴定液（0.2mol/L）相当于10.60mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度。 2.甲基红指示液 取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4mL使溶解，再加水稀释至200mL。 3. 甲基红-溴甲酚绿混合指示液 取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30mL，摇匀。 操作步骤：精密称取供试品约0.15g，置凯氏烧瓶中，加水25mL、3%硫酸铜溶液2mL与硫酸8mL，缓缓加热至溶液呈澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷，加水100mL，摇匀，沿瓶壁缓缓加20%氢氧化钠溶液75mL，自成一液层，加锌粒0.2g，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，并将冷凝管的末端伸入盛有4%硼酸溶液50mL的500mL锥形瓶的液面下，轻轻摆动凯氏烧瓶，使溶液混合均匀，加热蒸馏，俟氨馏尽，停止蒸馏，馏出液中加甲基红指示液数滴，用盐酸滴定液(0.2mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL盐酸滴定液(0.2mol/L)相当于6.006mg的CH4N2O。
尿素的标准
尿素的标准 1 主题内容与适用范围 本标准规定了尿素的技术要求、试验方法、检验规则以及标志、包装、运输和贮存。 本标准适用于由氨和二氧化碳合成制得的尿素。其主要用途为农业肥料、塑料、树脂、涂料、医药等工业部门的原料。 分子式：CO(NH2)2 相对分子质量：60.055(根据1987年国际相对原子质量表) 2 引用标准 GB/T 2441 尿素总氮含量的测定蒸馏后滴定法 GB/T 2443 尿素中缩二脲含量的测定分光光度法 GB/T 2444 尿素中水分的测定卡尔·费休法 GB/T 2445 工业用尿素铁含量的测定邻菲 GB/T 2446 工业用尿素碱度的测定容量法 GB/T 2447 工业用尿素水不溶物含量的测定重量法 GB/T 2448 尿素粒度的测定筛分法 GB 8569 固体化学肥料包装 GB/T 13256 工业用尿素硫酸盐含量的测定目视比浊法 3 技术要求 3.1 外观：颗粒或结晶。 3.2 尿素应符合表1的要求： 表 1 尿素技术指标％ 指标名称: 工业用农业用 优等品一等品合格品优等品一等品合格品总氮(N)含量(以干基计) ≥46.3 46.3 46.3 46.3 46.3 46.0 缩二脲含量≤0.5 0.9 1.0 0.9 1.0 1.5 水分(H2O)含量≤0.3 0.5 0.7 0.5 0.5 1.0 铁含量(以Fe计) ≤0.0005 0.0005 0.0010 碱度(以NH3计) ≤0.01 0.02 0.03 硫酸盐含量(以SO4-2计) ≤0.005 0.010 0.020 水不溶物含量≤0.005 0.010 0.040 粒度(φ0.85～2.80mm) ≥90 90 90 90 90 90 注：结晶状尿素不控制粒度指标。 4 试验方法 4.1 总氮含量的测定按照GB/T 2441的规定进行。 4.2 缩二脲含量的测定按照GB/T 2443的规定进行。 4.3 水分的测定按照GB/T 2444的规定进行。 4.4 铁含量的测定按照GB/T 2445的规定进行。 4.5 碱度的测定按照GB/T 2446的规定进行。 4.6 硫酸盐含量的测定按照GB/T 13256的规定进行。 4.7 水不溶物含量的测定按照GB/T 2447的规定进行。 4.8 粒度的测定按照GB/T 2448的规定进行。 5 检验规则 5.1 尿素应由生产厂的质量检验部门进行检验，生产厂应保证每批出厂的尿素都符合本标准要求，每批出厂的尿素都应附有一定格式的质量证明书，证明书包括下列内容：生产
血清尿素UREA测定
血清尿素UREA测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 在下述反应中，NAD+生成速率与样本中尿素（尿素氮）的浓度成正比。通过在340 nm处测定固定时间间隔内吸光度的下降速率，即可测得样本中尿素（尿素氮）的浓度。 尿素酶 尿素 + 2H2O 2 NH4＋ + 2 HCO3－ 谷氨酸脱氢酶 NH4＋+α-酮戊二酸+NADH+H+ L-谷氨酸+NAD＋+H2O 3 标本： 3.1 病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。 3.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子
的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。 3.3标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。 3.4 标本运输：常温条件下保存运输。 3.5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）：α-酮戊二 酸 7.5mmol/ L 谷氨酸脱氢 酶 ＞800U/L NADH 0.35mmol /L 二磷酸腺苷 1.5mmol/L Tris缓冲液
115mmol/L 试剂2（R2）： Tris缓冲液115mmol/ L 尿素酶＞40000 U/L α-酮戊二酸7mmol/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 4.1.5 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。 4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的UREA校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
尿素中氮的测定
序号 1 2 3 尿素的总质量 氢氧化钠初读数 氢氧化钠末读数 V(氢氧化钠) N的含量 相对误差 S 计算T 查表后的T (置信 界限为95%) N的含量 尿素中氮的测定 一、实验目的 1．学会用甲醛法测定氮含量，掌握简洁地定的原理。 2．学会铵根离子的强化，掌握是系统消化系统。 3．掌握容量瓶、移液管的正确操作。 4．进一步熟悉分析天平的使用。 二、实验原理 尿素是有机碱，不能被强酸直接滴定，需要先消化。 尿素的消化尿素是有机碱。Kb=1.3* ,不满足弱碱被直接滴定的条件，可用浓硫酸将其转化为l硫酸铵。 尿素经浓硫酸消化后转化为硫酸铵，过量的硫酸依甲基红为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至溶液从红色到黄色。 铵根是弱酸，不能被强碱直接滴定，要把弱酸强化 弱酸的强化铵根是一个弱酸可用甲醛将其转化，一反应式见书上，由于生成的是弱碱，化学计量点时溶液的PH为8.7，应选用酚酞为指示剂，溶液中有两种指示剂，在滴定前溶液为红色，滴入氢氧化钠溶液后，随着溶液氢离子的减少，颜色的变化顺序依次为红-橙（第一次）——黄——金黄色（第二次），第一次出现金黄时未到终点，此时是指示剂甲基红的颜色变化，待过纯黄后，再出现第二次金黄色时，已到终点，此时是指示剂酚酞的颜色变化。 铵盐与甲醛的反映在室温中进行的较慢，加甲醛后，需放置几分钟，使反应进行完全。 主要仪器：分析天平。250ml烧瓶三个，50ml滴定管，称量瓶，干燥器，量筒，250ml容量瓶 主要试剂：NaoH溶液，酚酞指示剂，甲醛溶液，尿素试样
实验步骤：准确称量尿素试样0.5~0.6g于100ml烧杯中，加入6ml 浓硫酸，盖上表面皿。在通风处中缓缓加热，当有密集的CO2溢出时，移走煤气灯，直至无二氧化碳气泡冒出时，用大火加热至冒出的浓白烟又变稀时再加热2min.，在通风厨中冷却。吹洗表面皿和杯壁，加30ml纯水稀释，稍冷后完全转移至250ml 容量瓶中，稀释至标线，摇匀。准确移取25.00ml试剂三份，分别加3滴甲基红指示剂，先用2mol/l,后用0.1mol/l的NaoH 溶液中和过剩的硫酸至纯黄。取30ml的甲醛溶液，以酚酞为指示剂，用0.1mol/l的氢氧化钠溶液中和(甲醛与铵盐反应后生成的含H 化合物)至微红色，在中和好的消化液中，加入10ml甲醛溶液，充分摇动，放置五分钟。加入五滴1%的酚酞指示剂，溶液由红色至金黄色，至纯黄，最后到金黄色即为终点。 思考题：中和硫酸过程中氢氧化钠的两是否要准确控制？若不足或过量时对实验结果由和影响？ 要准确控制，不足时氢氧化钠消耗偏大，实测出单的含量偏高，反之，过量则偏低。 一、实验目的 1. 学习尿素试样测定前的消化方法。 2. 学习以甲醛强化间接法测定尿素中的氮含量的原理和方法。 二、实验原理 尿素CO(NH２)２经浓硫酸消化后转化为(NH４)２SO４，过量的H２SO４以甲基红作指示剂，