程序动态切片技术研究
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程序动态切片技术研究
毕业设计（论文）程序动态切片技术研究专业年级： 07 级计算机 2 班学号：
0706010234 姓名：
惠军绪指导教师：
邹阳评阅人：
2019 年 6 月中国南京 .. ...摘要程序切片技术是一种重要的程序分析技术，广泛应用于程序的调试、测试与维护等领域。
程序切片主要通过寻找程序内部的相关特性，从而分解程序，然后对分解所得的程序切片进行分析研究，以此达到对整个程序理解和认识的目的。
而动态程序切片主要是指在某个给定输入的条件下，源程序执行路径上所有对程序某条语句或兴趣点上的变量有影响的语句。
面向对象技术仍是目前软件开发方法的主流，其中封装、继承、多态、并发等特征都为程序的理解与分析提出了新的问题。
本文在程序的分析评测中引入使用基于依赖图的程序切片技术，实现其切片功能，解决在程序理解、程序复杂性度量、程序转换和评测中遇到的问题。
本文采用一种基于依赖图的面向对象的动态程序切片方法,核心算法是以静态程序的程序依赖图为基础，先从程序依赖图里提取
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徒手切片制作方法(借鉴材料)
一、目的要求 徒手切片法是观察植物内部结构的简易制片法。所需的仪器用具简单，药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。但是徒手制片对于体积过小，质地太软或太硬的材料，则难于处理，同时，也不能制成连续切片，这些均为不足之处。 二、材料、用品 1、用品 显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。1%番红水溶液（或50%酒精溶液），0.5%固绿95%酒精溶液，70%、85%、95%酒精，纯酒精、二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。 三、方法与步骤 1、选材 所用材料不宜太软或太硬。一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、叶柄等均可使用此法。质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽约5～6毫米，长1～1.5厘米的小块，夹在夹持物(如胡萝卜根或马铃薯块茎等)中进行切片。使用夹持物时，先将夹持物的中央切成两
半，然后将切好的材料夹入，合拢夹持物进行切片，也可将叶片卷成筒状再切。 2、切片 （1）盛清洁的水于培养皿中。然后用左手的拇指及食指、中指夹住材料，拇指的位置要低于食指，并使材料的上端伸出指外2～3毫米，材料的切面必须保持水平方向。 （2）右手执刀(剃头刀或刀片)，平放在左手食指之上，刀口向内，自左前方向右后方滑行切割，要用臂力，不要用腕力，不可向内平切。 (3)拉切的速度宜快，一次切下，不要中途停顿或似拉锯式，以免损伤材料或切得不平。 (4) 切片过程中，如发现由于用力不均而使材料表面倾斜时，必须立即削平。 (5) 刀片或剃刀必须锋利，材料及切片均需经常沾水，以保持材料湿润、润滑。 (6)切下的薄片可随时涮入培养皿的水中，以备观察;等切到相当数量后;再选择其中最薄的透明度最大的做成临时玻片观察。如想短期保存，可用水或甘油封藏。如希望长期保存所切的材料，则还要经过以下几个步骤做成永久玻片标本。 3、固定 挑选出符合要求的切片，用毛笔移入盛有70%酒精的染色皿中进行固
5G网络切片技术简介
5G网络切片技术简介 5G预计在2020年实现商用化因而被广泛提起，提到5G就不得不提起网络切片（NetworkSlicing），作为5G中被讨论最多的技术，网络切片对于5G的意义巨大。本文主要从以下几个方面对5G网络切片技术做一些简要介绍。 网络切片的定义网络切片可以理解为支持特定使用场景或商业模式的通信服务要求的一组逻辑网络功能的集合，是基于物理基础设施对服务的实现，这些逻辑网络功能可以看作是由EPC下的网络功能（NetworkFuncTIon）分解而来的一系列子功能（Networksub-FuncTIon）。可以看出网络切片是一种端到端的解决方案，这种端到端的解决方案不仅可以应用于核心网，还可以应用于无线接入网RAN。 网络切片从服务层（servicelayer）和基础设施层（infrastructurelayer）的角度来考虑问题。服务层从逻辑层面来描述系统架构，由网络功能和功能间的联系组成，这些网络功能通常以软件包的方式被定义，其中会提供定义部署和操作要求（连接、接口、KPI要求等）的模板。基础设施层从物理层面描述维持一个网络切片运行所需要的网络元素和资源，其中包括计算资源（例如数据中心中的IT服务器）和网络资源（例如聚合交换机、边缘路由器、电缆等）。 划分好基础设施层和服务层之后，需要考虑两个层之间的映射问题，这是一个典型的虚拟网络嵌入问题，主要包含以下两步： 1、从虚拟功能到物理功能的映射，包含网络转发元素和计算资源的选择，比如装置类型和装置地理位置的选定，需要资源的数量由服务层的需求决定。 2、从虚拟链路到物理链路的映射，分配多少物理链路带宽也取决于服务层的需求。 任何两个切片A和B之间的关系可以有以下情况中的一种： 不同服务层：比如切片A为M2M类型装置提供服务，切片B为人工操作装置提供服务。相同服务层，但是网络功能稍有修改：例如切片A支持高移动性用户，切片B提供相同
动物组织标本制作技术及注意事项
动物组织标本制作技术 第一章：取材及固定 一、动物致死法 1、麻醉法 第二章可将浸有乙醚或氯仿的棉球连同小动物一起密封于钟罩或有盖玻璃瓶内进行麻醉；也可用4%戊巴比妥作静脉注射，剂量按动物体重1ml/kg；或用20%氨基甲酸乙脂作腹腔注射，剂量一般按动物体重5ml/kg。 2、空气栓塞法 如家兔可用50ml注射器将空气由耳静脉推入，使动物很快死亡。 3、击头法 如大、小鼠，可用重物击头后部或将其头后部猛撞桌沿，最好一击而死。 4、断头法 青蛙、小鼠等小动物，可用剪刀剪去其头部，较大动物如兔子等，可用斧头迅速砍头致死。 5、股动脉放血法 动物经吸入乙醚或氯仿稍麻醉后，立即切开股动脉放血。 注意：上述各法，应根据制片需要选用，如空气栓塞法不宜用作血管注射标本的制作；乙醚麻醉对丘脑下神经部分泌物染色标本不利；股动脉放血法有利于肠系膜铺片的制作。 二、取材注意事项 1、材料新鲜 最好是动物心脏还在跳动时取材，立即投入固定液内，脏器的上皮组织最易变质，应争取在死后半小时内处理完毕。 2、组织块力求小而薄 组织块的厚度以不超过5毫米为宜，较理想的厚度为2毫米左右，主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。 3、勿使组织块受挤压 切取组织块时刀剪要锋利，不要来回挫动，夹取组织时切勿猛压，取材时组织块可稍大，以便固定后修块。 4、尽量保持组织的原有形态 新鲜组织经固定后，或多或少产生收缩现象，为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 5、要熟悉取材部位 要能准确的按解剖部位取材，如胰腺，一般取胰岛较多的胰腺尾部；肺应取有细支气管及带有软骨片的小支气管部。 6、动物品种的选择 如观察肥大细胞，以大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜铺片为佳，欲观察运动终板，可用小鼠的肋间肌等。 7、选好组织块的切面 熟悉某些器官组织成分安排，然后决定其切面的走向；如一长管状器官以横切面较好。 8、保持材料的清洁 组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗，然后再入固定液，但要注意防止组织损伤。9、切除不需要的部分 特别是组织周围的脂肪等，应尽可能清除掉，否则给固定、脱水、浸蜡、切片等带来一些不必要的问题。 三、组织固定法 （一）、固定的方法 1、小块组织固定法：从人体和动物取下的小块组织，立即置入液态固定剂中进行固定，这是应用最广泛最经常的方法。 2、注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部或需要对整个脏器或整个动物进行固定。这时宜采用注射固定法，将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 3、蒸汽固定法:比较细小而薄的标本，可用锇酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或细胞涂片以及某些薄膜组织的固定。（二）、固定的目的 1、迅速阻止组织、细胞的死后变化，防止自溶与腐败，使之尽量保持生前的状态与结构。 2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持其原有状态。 3、使组织内各种物质成分产生不同的折光率，以便染色后易于鉴别和观察。 4、使组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程中不易损坏。 5、使不同组织成分对染料有不同的亲和力，经染色处理后易于辨认。 6、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态结构。
实验二 徒手切片法和临时装片的制作方法以及植物细胞和组织观察
实验二临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察 一、实验目的 1、掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法 2、了解植物细胞结构。 二、实验材料 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、 0.9%的NaCl溶液；洋葱、马铃薯、芹菜、番茄 三、实验内容和实验方法 （一）临时装片的制作 1、擦净载玻片和盖玻片 （1）擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘，右手用纱布将载玻片上下两面包住，然后反复擦拭，擦好后放在干净处备用。 （2）擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角，再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住，然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。 2、取样 用滴管滴一点水或其他溶液（根据需要）于载玻片的中央，把观察物放于载玻片上的液滴中，展开或摇匀。 3、盖盖玻片 右手持镊子，轻轻夹住盖玻片的一角，使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触，然后慢慢倾斜下落，最后平放于载玻片上，避免气泡的产生。如盖玻片下的液体过多，可用吸水纸将多余的液体吸掉。
（二）徒手切片法 徒手切片法不需要任何的机械设备，只需要一把锋利的刀片就可以完成切片的制作，方法简单，也容易保持物的生活状态，有很大的实用价值。 1、选材 选择软适度的材料，先截成适当的段块。一般直径大小以3~5mm、长度以20~30mm为宜。若材料太软，如幼叶等，不能直接拿在手中进行切片，可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物，将材料夹入其中，一起切片。 2、切片 用左手拇指、食品指和中指夹住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低于食指，以免刀口损伤手指。材料和刀刃上蘸水，使其湿润。右手拇指和食指横向平握刀片，刀片要与材料断面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置，以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。切片时要用臂力而不用腕力，手腕不要动，靠肘、肩关节的屈伸来切片，拉切要快，中途不要停顿，更不能用拉锯方式进行切片。 每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。如发现材料切面出现倾斜，应修平切面后再继续切片。 3、镜检观察 连续切下很多切片后，挑选最薄的切片放于加了1滴清水的载玻片，盖上盖玻片，制成临时装片，进行镜检、观察。 （三）植物细胞的结构观察 1、洋葱表皮细胞的观察 取一洁净载玻片，于载玻片中央加上一滴水。取洋葱一个，剥下一片新鲜的带紫色的南鳞叶，和刀片从外表面（或内表面）切一个面积为4mm2左右的方形小格，然后用镊子将表皮撕下，迅速入入载玻片上的小水滴中（表面向上）。并使其平展，盖上盖玻片，即制成临时装片。将装片放在显微镜下，用低倍镜观察细胞结构。
徒手切片制作方法
、目的要求 徒手切片法是观察植物内部结构的简易制片法。所需的仪器用具简单，药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。但是徒手制片对于体积过小，质地太软或太硬的材料，则难于处理，同时，也不能制成连续切片，这些均为不足之处。 二、材料、用品 1、用品 显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。1%番红水溶液（或50%酒精溶液）， 0.5%固绿95%酒精溶液，70%、85%、95%酒精，纯酒精、二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。 三、方法与步骤 1、选材 所用材料不宜太软或太硬。一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、叶柄等均可使用此法。质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽约5?6毫米，长1? 1.5 厘米的小块，夹在夹持物（如胡萝卜根或马铃薯块茎等）中进行切片。使用夹持物时，先将夹持物的中央切成两半，然后将切好的材料夹入，合拢夹持物进行切片，也可将叶片卷成筒状再切。 2、切片 （1 ）盛清洁的水于培养皿中。然后用左手的拇指及食指、中指夹住材料，拇指的位置要低于食指，并使材料的上端伸出指外2?3毫米，材料的切面必须保持水平方向。 (2) 右手执刀(剃头刀或刀片)，平放在左手食指之上，刀口向内，自左前方向右后方滑行切割，要用臂力，不要用腕力，不可向内平切。
(3) 拉切的速度宜快，一次切下，不要中途停顿或似拉锯式，以免损伤材料或切得不平。 (4) 切片过程中，如发现由于用力不均而使材料表面倾斜时，必须立即削平。 (5) 刀片或剃刀必须锋利，材料及切片均需经常沾水，以保持材料湿润、润滑。 (6) 切下的薄片可随时涮入培养皿的水中，以备观察;等切到相当数量后;再选择其中最薄的透明度最大的做成临时玻片观察。如想短期保存，可用水或甘油封藏。如希望长期保存所切的材料，则还要经过以下几个步骤做成永久玻片标本。 3、固定 挑选出符合要求的切片，用毛笔移入盛有70%酒精的染色皿中进行固定。固定时间为16 分钟或更长时间。 4、染色、脱水、透明 ( 1)用吸水管吸去70%酒精，染以1%番红( 50%酒精溶液)约30 分钟。 (2)再用吸管吸去番红，换用70%>85%>95%酒精进行冲洗、脱水，每级酒精3?5分钟。 ( 3)复染色。吸去酒精，用 0.5%固绿(95%酒精溶液)进行复染色，时间为 0.5 分钟。 ( 4)冲洗、脱水。用95%酒精冲洗1 次，时间10 秒。后移入纯酒精中脱水2?3 次，每次3?5 分钟。 （5）透明。吸去纯酒精，放入二甲苯—纯酒精溶液中脱水和透明1 次，时间5 分钟。 （6）吸去脱水透明液，换以纯二甲苯透明2次，时间5 分钟。 5、封片、贴标签将已透明材料用镊子或解剖针轻挑于清洁的载玻片上，滴上中性树胶，盖上盖玻片进行干燥。
切片实验技术
Cross section experiment introduction Cross section experiment introduction ECSM QE department Issue date:Sep. 2006
Preface-----金相切片分析方法特點n破壞性方法 n試樣製備週期長（1d以上，最好3d）n試樣製備要求高 n可直觀地獲取材料內部大量資訊 n對操作和分析人員要求較高
內容 一. 切片前焊接性評估 二. 切片的目的和意義 三. 名詞解釋 四. 設備及材料介紹 五.操作步驟. 六. 相關標准 七. 不良圖片分析 八. 注意事項
X光檢驗(X-ray inspection) (1) 檢驗零件重點：BGA Evaluation components: BGA (2) 檢驗錫洞、錫橋以及大小錫球 Inspect for voids or bridges, large/small balls 4.4.3.3 切片檢驗Crossing sectioning: (1) 檢驗零件重點：BGA, IC, PTH connector,Via hole, RLC. Evaluation components: BGA, IC, PTH connector, Via hole, RLC (2) 著重在檢驗焊錫外觀、錫裂、錫洞及PTH連接器零件腳的吃錫狀況。 Inspection for solder joint structure, crack, void, solder fill condition of PTH connector.
徒手切片制作方法
一、目的要求徒手切片法是观察植物内部结构的简易制片法。所需的仪器用具简单，药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。但是徒手制片对于体积过小，质地太软或太硬的材料，则难于处理，同时，也不能制成连续切片，这些均为不足之处。 二、材料、用品 1、用品 显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。1%番红水溶液（或50%酒精溶液），0.5%固绿95%酒精溶液，70%、85%、95%酒精，纯酒精、二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。 三、方法与步骤 1 、选材所用材料不宜太软或太硬。一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、叶柄等均可使用此法。质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽约5?6毫米，长1?1.5厘米的小块，夹在夹持物（如胡萝卜根或马铃薯块茎等）中进行切片。使用夹持物时，先将夹持物的中央切成两半，然后将切好的材料夹入，合拢夹持物进行切片，也可将叶片卷 成筒状再切
2 、切片 (1) 盛清洁的水于培养皿中。然后用左手的拇指及食指、中指夹住 材料，拇指的位置要低于食指，并使材料的上端伸出指外2?3毫米，材料的切面必须保持水平方向。 (2) 右手执刀( 剃头刀或刀片)，平放在左手食指之上，刀口向内， 自左前方向右后方滑行切割，要用臂力，不要用腕力，不可向内平切。 (3) 拉切的速度宜快，一次切下，不要中途停顿或似拉锯式，以免损 伤材料或切得不平。 (4) 切片过程中，如发现由于用力不均而使材料表面倾斜时，必须立即削平。 (5) 刀片或剃刀必须锋利，材料及切片均需经常沾水，以保持材料湿润、润滑。 (6) 切下的薄片可随时涮入培养皿的水中，以备观察; 等切到相当数量后; 再选择其中最薄的透明度最大的做成临时玻片观察。如想短期保存，可用水或甘油封藏。如希望长期保存所切的材料，则还要经过以下几个步骤做成永久玻片标本。 3、固定 挑选出符合要求的切片，用毛笔移入盛有70%酒精的染色皿中进行固定。固定时间为16 分钟或更长时间。 4、染色、脱水、透明
植物组织切片制作以及注意事项
植物组织石蜡切片的制作以及注意事项 1 植物组织石蜡切片的制作方法 ⑴固定：用50%或70% FAA固定液（50%或70%酒精：甲醛：冰乙酸=16:1:1; 幼 嫩材料用50 % FAA；老的材料用70%的FAA），置于4℃固定24 h。 ⑵脱水：将固定液倒去，加入50%乙醇，室温静置30 min；重复一次，室温静置 20 min。换成1%番红O溶液(用70%酒精配制)，室温脱水染色过夜。次日继续 脱水，酒精浓度梯度和时间依次为：80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min（2次）。 ⑶透明：1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h，纯二甲苯1h、40 min（2次）。最后加入 少量二甲苯（浸没材料即可）和碎蜡，放入38℃温箱中过夜。 ⑷浸蜡：将温箱温度调至56℃，计时1h；换成二级蜡1h；三级蜡（3次）各1h、 1h、40min（从温度上升到56℃开始计时）。 ⑸包埋：将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中，迅速放入冰水中使蜡凝固，防止 气泡产生，以及凝蜡不匀。 ⑹切片：修整蜡块，用Lica RM2126切片机切片，厚度5-10 μm。 ⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂，将切好的蜡带放入温水中，捞至载玻片上，最 后置于37℃恒温箱过夜烤片。 ⑻脱蜡及染色： ①番红-固绿对染 ⅰ脱蜡：二甲苯60min，二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。 ⅱ染色：80%乙醇5 min，1%固绿（用95%酒精配制）迅速蘸一下，大约10s，直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min（2次）。
数字切片处理系统的生产技术
本技术提供一种数字切片处理系统，属于病理组织切片分析处理技术领域，包括：云服务器，用于建立切片库存储数字切片的相关信息；管理器，连接云服务器，用于记录关联于数字切片的用户操作，对切片库以及用户操作进行数据分析得到相应的算法方案，根据算法方案管理切片库；多个远程会诊平台，分别连接云服务器，用于提供给用户对数字切片进行用户操作；多个终端，分别通过云服务器连接远程会诊平台，用于提供给用户向云服务器传输相关信息以及提供给用户对数字切片进行用户操作。本技术的有益效果：优化存储方式和算法分析，解决了数字病理大数据集成分析上的归档分类问题，使用户能够有效利用数字切片。 权利要求书 1.一种数字切片处理系统，其特征在于，包括： 云服务器，用于建立切片库存储数字切片的相关信息； 管理器，连接所述云服务器，用于记录关联于所述数字切片的用户操作，对所述切片库以及所述用户操作进行数据分析得到相应的算法方案，根据所述算法方案管理所述切片库； 远程会诊平台，连接所述云服务器，用于提供给用户对所述数字切片进行所述用户操作；
多个终端，通过所述云服务器连接所述远程会诊平台，用于提供给用户向所述云服务器传输所述相关信息以及所述提供给用户对所述数字切片进行所述用户操作。 2.根据权利要求1所述的数字切片处理系统，其特征在于，每个所述终端分别包括： 信息采集模块，用于采集所述数字切片的所述相关信息并输出。 3.根据权利要求2所述的数字切片处理系统，其特征在于，每个所述终端分别包括： 分类处理模块，连接所述切片扫描模块，用于接收所述相关信息，并根据预设规则对所述相关信息进行分类得到分类信息并输出。 4.根据权利要求3所述的数字切片处理系统，其特征在于，每个所述终端分别包括： 存储模块，连接所述切片扫描采集模块和所述分类处理模块，用来接收所述相关信息和所述分类信息。 5.根据权利要求4所述的数字切片处理系统，其特征在于，每个所述终端分别包括： 上传模块，连接所述存储模块，用于接收所述相关信息和所述分类信息并输出至所述云服务器。 6.根据权利要求1所述的数字切片处理系统，其特征在于，所述相关信息包括所述数字切片的图像数据、免疫组化分类信息、病变结论信息以及备注信息。 7.根据权利要求1所述的数字切片处理系统，其特征在于，所述终端为台式电脑、或便捷 式电脑、或平板电脑、或移动智能手机。 8.根据权利要求1所述的数字切片处理系统，其特征在于，所述远程会诊平台包括：
切片制作方法
切片制作步骤 取材与分割→固定→洗涤→脱水→透明→浸蜡和埋蜡→切片→粘片→脱蜡→染色→脱水→透明→封片 1、固定液 （1）FAA：福尔马林—冰醋酸—酒精 50%或70%乙醇90mL+冰醋酸5 mL+福尔马林（37%-40%甲醛）5 mL 固定时间最短需10h，一般不低于24h，可兼做保存液 幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。如材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林；如材料易收缩，可稍增冰醋酸。久置时可加5 mL甘油，以防止蒸发和材料变硬。如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果更好： 50%乙醇89mL+冰醋酸6 mL+福尔马林（37%-40%甲醛）5 mL （2）卡诺氏固定液：酒精—醋酸—氯仿 配方1：纯酒精3+冰醋酸1（3:1） 配方2：纯酒精6+冰醋酸1+氯仿3（或纯酒精30 mL +氯仿5 mL +冰醋酸10 mL） 一般材料不超过24h，固定根尖和花药只需40-60min，固定后用95%酒精（85%酒精）冲洗，每级20min;如不能立即处理，需转入70%酒精中保存。 2、洗涤：FAA固定液无需洗涤直接脱水。 3、脱水：材料中含水，水与石蜡不能混合，通常由50%、70%、80%、90%、无水乙醇， 每次1h，其中无水乙醇需2次。材料大的需延长脱水时间（一般此后进行预染色） 4、透明：常用透明剂为二甲苯和氯仿。先经乙醇和二甲苯混合液（1/2乙醇+1/2二甲苯）， 后纯二甲苯（2次），每次1-2h 氯仿不宜在染色后透明。5级进行;1/5氯仿（4/5无水乙醇）→2/5→3/5→4/5→纯氯仿（2次）每级3-4h；最后一次纯氯仿中，放入纯石蜡粉末数次，盖好瓶盖，36℃温箱36h，使材料慢慢浸蜡。 5、浸蜡、包埋：石蜡必须纯净、不含杂质；浸蜡是使石蜡逐渐取代透明剂 石蜡:熔点52-56℃，一般50-60℃ 选用与乙醇和石蜡均能互溶的有机溶剂，如二甲苯，温箱设置高于石蜡熔点2℃ 25%→50%→75%（石蜡、二甲苯溶液） 材料透明好后，换入新的二甲苯，然后加入等体积的碎蜡，40℃温箱，不断加入碎蜡至饱和，然后升温保持3-5h，其间换纯蜡3次，每次约1-2h。（30min也可）包埋是将材料和石蜡一块倒入小盒中，用加热的镊子迅速将材料按需要的切面和一定的间隔排列整齐，将小盒放入冷水中，凝固 6、修块：包埋好的材料，按需要的切面将蜡块切成梯形，然后用蜡铲把蜡块底部牢固的粘在木质蜡座上
病理组织切片制作过程详解
病理组织切片制作过程详解 -森贝伽生物实验代做中心 公司中心实验室建设有病理学，分子生物学，细胞生物学，免疫学，蛋白质组学，实验动物模型构建，生物芯片，生物信息学等实验技术服务平台。此外，还提供技术咨询培训，课题合作设计与申报，论文翻译润色等实验技术服务。 1．取材 取材的好坏，直接影响切片的质量。取材时，首先要有一把锋利的取材刀，在切割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2 ～0.3cm 为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织，如碰到不可避免的钙化组织，一定要非常小心。在切取纤维组织、肌肉组织、胃肠道时，应注意纤维及肌肉的走向，取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。 (1）材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2）组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm ×2.0cm ×0.2cm ，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm ，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 （3）勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 （4）规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 （5）选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 南京森贝伽生物科技有限公司 实验技术服务，代做实验
动物组织切片观察
光学显微镜的使用及动物组织切片观察 丁曦钰 141140015 一、实验目的 1、了解显微镜的工作原理，学习光学显微镜的使用。 2、基本组织切片的观察与记录。 3、实验报告的书写要求。 4、生物量级、生物系统及生物类别。 二、实验原理 1.光学显微镜的工作原理：标本经物镜和管镜放大后，形成倒立的实像： 实像经目镜再次放大后，形成放大的虚像。 2.光学显微镜的使用：先将低倍物镜的位置固定好，然后放置标本片，转 动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。除少数显微镜外，聚光镜的位置都要放在最高点。如果视野中出现外界物体的图像，可以将聚光镜稍微下降，图像就可以消失。 聚光镜下的虹彩光圈应调到适当的大小，以控制射入光线的量，整理增加明暗差。 3.生物量级：残基（氨基酸，核苷酸，脂肪酸，甘油）→生物大分子→亚 细胞结构（subcellular structure）→细胞器→细胞→组织（器官）→系统→种群→群落→生态系统→生物圈 物理量级：基本粒子（夸克，轻子）→电子（自旋反平行）→质子→原子→分子（物体：生物量级）→天体→星系→星云→宇宙→宇宙膜 4.各胚层细胞发育走向 1）外胚层：神经系统（脑、脊髓、脊神经、自主神经、视网膜、耳、肾上腺髓质），表皮（毛发、汗腺、油脂腺、乳腺、晶体、口腔黏膜）2）中胚层：肌肉、骨骼、血液、真皮、心脏血管系统、泌尿生殖系统以及结缔组织（固有结缔组织、骨与软骨、血液） 3）胚层：消化系统、呼吸系统的上皮和有关腺体（胰，肝）、膀胱上皮 5．分辨力：能分辨最小间隔的能力，单位距离（人眼距目标物25cm处） R=Kλ nsin(a 2) K是透镜品质，光镜在0.61~1.0之间，λ光波波长或电子波长，n是光镜介质折射率，a是镜口角（样本对物镜的镜口角，一般<180度），sina/2<1。 三、动物与器材 1.实验材料：13组织标本 2.实验设备：光学显微镜（生物显微镜） 四、方法与步骤 1.实验分组 2.实验原理讲解 3.实验报告要求介绍 4.使用显微镜进行操作观察 1）安放显微镜
组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片的制作流程 1．取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
组织病理切片的制作过程
组织病理切片的制作过程 1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。
植物组织石蜡切片
植物组织石蜡切片的制作 https://www.360docs.net/doc/147636495.html, 2005-5-25 14:04:43 来源：生命经纬 一、实验目的 1．熟练掌握石蜡切片的方法。 2．掌握永久制片的制作过程，为研究植物的内部结构奠定基础。 3．学会植物内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与试剂 1．器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。 2．试剂 10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。 三、实验材料 幼嫩植物各部分，根据季节选择材料。 四、实验内容与方法 石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种方法。它是把材料封埋在石蜡里面，用旋转切片机切片，可以切出很薄的切片。凡是精细的工结构，大都用石蜡切片。全都过程如下： 1．固定 2．洗涤 3．脱水与硬化 4．脱酒精 2．封埋 6．切片 7．粘片 8．脱蜡 9．染色 10．脱水 11. 透明 12．胶封 （一）固定 1．固定的意义：固定就是用药品把细胞杀死，使细胞的原生质凝固，死后不发生变化，尽可能保持原来的结构以供我们观察。良好的固定剂，应是穿透力强，使细胞立刻致死，原生质全部凝固；不发生任何变形，增强折光率，并且不妨碍染色。 2．固定液的种类：固定液的种类很多，根据配制成分可划分为： (1) 简单固定液：以一种化学药品配制的固定液。常用的简单固定液有： A．酒精即乙醇，用作固定液，常用纯酒精或95％酒精。酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。高浓度酒精有使材料收缩的作用。70％的酒精可作保存液。配制低度酒精必需要用普通酒精即95％的酒精，绝不可用纯酒精。酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。酒精可使核酸，蛋白质及肝醣等发生沉淀，但能溶解脂肪及拟脂。 B．福尔马林即甲醛，具强烈刺激性的气味，纯净的甲醛，为无色透明液体。固定用的浓度为4-10％甲醛也是强还原剂。不能与铬酸、锇酸等氧化剂配合。经固定后，材料变硬，通常不引起皱缩，但随后经过他种药剂处理时，就每每出现皱缩。所以甲醛一般不单独作固定，而与其他液体混合使用。 C．醋酸：为无色透明的液体，刺激性极强，冷则凝结成冰，故又叫冰醋酸。醋酸以与水和酒精配成各种比例的溶液，所用浓度为0.2～5％，也常与其他固定剂配合使用。醋酸穿透性很强，单独
病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术 病理组织切片常用的制作方法有三种。即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是： 组织取材T固定T冲洗T脱水T透明T浸蜡T组织包埋T组织切片T展片附贴T切片脱蜡 T染色T脱水T染片透明T封固。 以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。 一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。切取的工具要清洁。采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24 小时。应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。特殊病料应根据器官的结构特点切取。管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。 切取组织块大小，以 1.5X 1.5X 0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。 二、固定 固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。材料取下后，应迅速固定。固定液数量应为病理组织块的5到20倍。由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。 最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90 毫升配成。 三、冲洗 固定后的组织块，应将固定液洗去。一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。及时 冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。 冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。酒精固定的组织材料不需冲洗。 四、脱水 经过固定的组织，冲洗后要进行脱水。脱水的目的在于将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，为石蜡等其他包埋剂浸入组织创造条件。 常用的脱水剂为酒精。由于酒精可以任何比例与水结合，对组织穿透力强，又能使组织硬化，因而不能将组织从水中直接移入浓度高的酒精中，应从低浓度逐渐到高浓度。脱水必须充分，否则给浸蜡造成困难。 除用酒精作脱水剂外，还可以用正丁醇（N—Butyla alcohol）。正丁醇微溶于水，能与各种浓 度酒精混合，也能直接溶解石蜡。故组织经正丁醇脱水后，不须经二甲苯透明。用正丁醇作脱水剂，组织块收缩减低，也不会过硬，故比酒精优越。 五、透明 透明的目的是将组织内的酒精用矿物油或植物油置换出来，并溶解石蜡，帮助石蜡浸透组织。由于经过透明剂处理的组织块用肉眼观察呈透明状，故称这一过程为透明。 常用的透明剂为二甲苯（Xylol）,因其穿透力较强，因而组织在二甲苯中停留时间不宜过长，一般透明时间在30分钟左右即可。 六、浸蜡 浸蜡是指组织经过透明作用以后，放入溶化的石蜡中浸渗，使石蜡浸入组织块中，冷却后，才能进行
切片技术自编讲义
石蜡切片技术 一、目的要求 1、掌握石蜡切片的制作方法 2、熟练掌握切片机的使用方法 3、熟练掌握H.E染色技术 二、实验原理 （一）将组织薄片通过不同的染色方法以显示组织的不同成分和细胞的形态 三、实验器材 1、切片机 2、载玻片 3、盖玻片 4、酒精灯 5、恒温箱 6、水浴锅 7、染色缸 8、玻片架 9、石蜡 10、包埋盒 11、显微镜 四、方法步骤 （一）取材：方法及注意事项 1．取材要全面，具有代表性，能显示病变的发展过程，同一组织最好包括病灶及周围的健康组织并应包含该器官的主要结构部分。 2．取材时要尽量保持组织的自然状态与完整性，避免人为变化。 3．大小适当，长宽厚以1.50×1.0×0.3CM为宜。 4．送检标本写清病例号。 （二）固定和固定液 1．常用固定液：10%福尔马林和乙醇
2．固定时注意事项： 固定液要足，用量勿少于组织块的4倍。组织固定要尽可能的掌握时间。组织不宜过厚。（三）冲洗：常用水冲洗8-12小时，以洗净固定液，停止固定作用，避免组织过度固定而影响制片效果，同时组织经过冲洗也可改变硬度。组织冲洗后即可进入脱水。 （四）脱水： 脱水剂是酒精，脱水的过程和时间如下：70%酒精轻蘸——80%酒精1.5小时——95%酒精1.5小时（可过夜）——95%酒精1.5小时（可过夜）——无水酒精1小时——无水酒精1小时 （五）透明：透明剂不仅脱酒精且还能溶解石蜡，有助于石蜡渗入组织为浸蜡创造条件。透明的时间和过程如下：1：1酒精二甲苯轻蘸——二甲苯（1）15分钟——二甲苯(2)15分钟 (六)浸蜡：过程和时间如下：石蜡(1)1.5小时 (七)包埋： 器具用平皿，先用甘油将平皿涂抹内壁，再倒入包埋蜡，用镊子夹取组织块放入平皿内摆好，再用载玻片分割开，然后放入冷水中待冷固后取出，切成立方型小块，周围留2毫米蜡边，用火烘热木板底部，再粘在木板上以待切片。 （八）切片： 石蜡切片：（1）切片时先准备好毛笔，镊子，将粘有蜡块的木板固定于切片机上，调节蜡块与刀的距离，当蜡块与刀口接触时可进行切削，当组织切全后调节切片厚度5-7u，一般为6u然后连续进行切片。 （2）展片：从一条蜡带上切取一张完整厚薄均匀的无刀口的切片，放入40度左右的温水里，使切片充分舒展，取一载玻片放入切片下面，用镊子尖接触切片边缘，使载玻片接触切片后垂直提出水面，这样切片就贴在片上了，一般贴再三分之一处，另一边用玻璃笔写上检验号码，放入37度温箱中4-8小时烤干后即可染色。 （九）染色： （一）染色的方法及步骤： 1．脱蜡：将充分烘干的切片从恒温箱中取出，依次通过下列溶液： 二甲苯（1）5分钟——二甲苯（2）5分钟——95%酒精I 1-2分钟——95%酒精II 1分钟——80%酒精1分钟(可省略) 水洗5-10分钟后染色 染色：经脱蜡的切片移入染色液中进行染色