空气培养操作方法

1、采样时间

I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；II类、III类、IV类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。

2、人员要求：

测试人员穿着整洁，戴口罩，手消毒或戴手套。动作要轻，避免产生污染干扰。

3、采样方法

（1）I类环境：

被测区域洁净度级别最少培养数*（ф90 m m，沉降

计）

最大平均浓度

（个/30min·ф90

m m皿）

洁净手术室I级洁净手术

室

II级洁净收术

室

III级洁净手

术室

IV级洁净手

术室

100级区13点，周边1000级区

8点，各有一个对照皿。

1000级区5点，周边10000级

区6点，各有一个对照皿。

10000级区3点，周边100000

级区4点，各有一个对照皿。

面积>30m2时4点，面积≤30m2

时2点，各有一个对照皿。

手术区，

周边

手术区, 周边

手术区，

周边

洁I级（1000级）局部100级区13点，1000级区局面，周边

净

辅助用房II级（10000

级）

III级（100000

级）

IV级（300000

级）

5点

3点

2点

（2）II类、III类、IV类环境采用平板暴露法。室内面积≤30m2，设内中外对角3点，内、外点应距墙壁1米处；室内面积>30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1米处。将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样高度为距离地面—；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（II类环境暴露15min；III 类、IV类环境暴露5min）后盖上平皿盖及时送检。

4、放置方法、次序：放置培养皿从平面中最靠里的房间布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的最后收。培养皿放置后后拿开皿盖，搭放在皿边上，沉降后30分钟，盖上盖子收起。

5、对照皿：对照皿放置方法为将皿盖拿开后，马上重新盖上，同样放置30分钟后，收起。目的是模拟整个检验过程，看培养皿、培养基以及人员操作过程是否对结果有影响。

附：

Ⅰ级～Ⅱ级需要无菌操作的特殊用房

Ⅰ级假体植入、某些大型器官移植、手术部位感染可直接危及生命及生活质量等手术。关节置换手术、器官移植手术及脑外科、心脏外科和眼科等手术中的无菌手术。

Ⅱ级～Ⅲ级体外循环室

Ⅱ级涉及深部组织及生命主要器官的大型手术。胸外科、整形外科、泌尿外科、肝胆胰外科、骨外科和普通外科中的一类切口无菌手术。

Ⅲ级～Ⅳ级手术室前室

Ⅲ级其他外科手术。普通外科(除去一类切口手术)、妇产科等手术。

Ⅳ感染和重度污染手术。肛肠外科及污染类等手术。

Ⅳ级刷手间、术前准备室、无菌物品存放室、预麻室、精密仪器室、护士站、洁净走廊或任何洁净通道、恢复(麻醉苏醒)室

检验科空气培养操作要求

1.请用记号笔在空气培养皿上标明科室及其所采集的空气培养的房间名称（或者用圆珠笔将科室及采集房间名称写在布的胶布上，然后牢固地粘贴在培养皿上）

2.请对采集好的空气培养仔细核对房间名称及个数，并记录在一张清单上，空气培养清单需要标明的项目包括：科室，时间、采集人、采集日期、房间名称及相应房间所采集的空气培养的个数，然后把空气培养清单和所采集的空气培养皿一同送到检验科，如有遗漏上面所写的项目，检验科拒收！

3.因为细菌生长是需要特殊的环境，采集标本后不能放冰箱内保存，所以各科室尽量安排好采集空气培养的时间，请在晚上21:00前送到检验科，以免影响的检测的结果。

4.采集好后将培养皿倒扣着放置送检验科。

空气培养方法

图 1 (< 30 m2) O O O O O 图2 （大于〉30 m2）盖面朝下斜扣到底盘边上空气细菌培养、流程: 1 1 关好门窗，用紫外线消毒1小时 1 二、注意事项： 1、取培养基时，应用手托住培养基的底座，避免污染。 2、打开培养基时，盖子向下扣放于平板旁。 3、取样后将培养基的盖子盖好，方可离开治疗室。 4、送检时间不超过6h，若样品保存于2-8度条件时，送检时间不能超过24 小时。 5、送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取标本送检。三、放置培养皿示意图操作者洗净双手，取培养基进行取样

三十三、物体表面培养（细菌）注意事项： 1、要在台面的工作区或需重点监测的区域采取。 2、送检时间不超过6小时，若样品保存于1-4度条件时，送检时间不超过24h。 3、送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取标本送检。

三十四、紫外线消毒清理及抹拭治疗室台面，关治疗室门窗，熄照明灯注意事项： 1、在使用过程中，应保持紫外线灯表面的清洁，每日用95%勺酒精擦拭灯管一次，发现灯管表面有灰尘，油污时，应随时擦拭。 2用紫外线等消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥，减少尘埃和水雾，温度低于20C 或高于40C，相对湿度大于60%寸应适当延长照射时间。 3、用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射。不得使紫外线光源照射到人，以免引起损伤。 4、紫外线灯使用过程中其辐射强度逐渐降低（一般紫外线使用时限为1000 小时），故应定期测定消毒紫外线的强度，一旦降到要求的强度以下时，应即使更换。 5、每月一次空气培养，空气消毒后作空气培养。 6、如消毒时，仍有补液未接完，将剩余补液放在治疗室外，备治疗盘及部分必用治疗用物。

环境空气和废气布点与烟尘烟气采样监测技术规范作业指导书

环境空气和废气布点与烟尘烟气采样监测技术规范作业指导书 (依据标准: GB/T5468-1991、GB/T16157-1996) 一、点检烟气分析仪 1、适用范围：本规定适用于现场监测前烟道气分析仪的点检工作。 2、点检项目与基准： 2.1电源能否接通； 2.2面板按键接触是否良好； 2.3抽气泵是否正常； 2.4水收集器及采样探针中是否有冷凝水； 2.5粉尘过滤器是否清洁； 2.6仪器充电电池的电量是否充足； 2.7整个抽气系统的气密性是否良好。 3、点检记录：点检的时间、内容与结果应有完整详细的记录。 4、问题与纠正：点检人员对点检中发现的问题应及时解决，有不能解决的问题应立即向采样负责人报告。二、点检烟尘采样仪

1、适用范围：本规定适用于现场监测前烟尘采样仪的点检工作。 2、点检项目与基准： 2.1电源能否接通； 2.2面板按键接触是否良好； 2.3抽气泵是否正常； 2.4皮托管及采样嘴是否完好； 2.5干燥器中硅胶是否失效； 2.6洗气瓶中双氧水是否混浊； 2.7打印机是否正常； 2.8整个采样系统的气密性是否良好。 3、点检记录：点检的时间、内容与结果应有完整详细的记录。 4、问题与纠正：点检人员对点检中发现的问题应及时解决，有不能解决的问题应立即向采样负责人报告。三、样品交接（滤筒、样品瓶） 1、适用范围：本规定适用于现场监测结束后采样人员与实验室内分析人员的样品交接。 2、操作步骤：

2.1 采样人员在现场监测结束回到实验室后应立即与样品分析人员进行样品交接。 2.2 在样品交接后，采样人员与分析人员应共同、完整、正确地填写样品交接单上各栏内容。 2.3 采样人员与分析人员必须在样品交接单上签字。 3、注意事项：样品交接单应随测试报告归档。四、样品分析（滤筒、重量法） 1、适用范围：本方法适用固定污染源排气中颗粒物采样前后滤筒的称重。 2、一般事项：依照“固定污染源排气中颗粒物测定与气态污染物采样方法”的有关规定。 3、器具与材料： 3.1器具（1）分析天平精度0.1mg （2）烘箱 0－300℃ 3.2材料：圆筒状玻璃纤维滤筒，28×70mm 4、操作步骤： 4.1用铅笔将滤筒编号。(新规定不能用铅笔) 4.2将已编号的滤筒（或采样后的滤筒）在105～110℃烘箱中烘烤1

(推荐)硝化菌的培养方法

硝化菌的培养方法硝化反应影响因素： 1、温度在生物硝化系统中，硝化细菌对温度的变化非常敏感，在5～35℃的范围内，硝化菌能进行正常的生理代谢活动。当废水温度低于15℃时，硝化速率会明显下降，当温度低于10℃时已启动的硝化系统可以勉强维持，硝化速率只有30℃时的硝化硝化速率的25%[1]。尽管温度的升高，生物活性增大，硝化速率也升高，但温度过高将使硝化菌大量死亡，实际运行中要求硝化反应温度低于３８℃[2]。 2、pH值硝化菌对pH值变化非常敏感，最佳pH值是8.0～8.4，在这一最佳pH值条件下，硝化速度，硝化菌最大的比值速度可达最大值。Anthonison认为pH对硝化反应的影响只是表观现象，实际起作用是两个平衡H++NH3 = NH4+和H++NO2-= HNO2中的NH3（FA）和HNO2（FNA），pH通过这两个平衡影响FA和FNA的浓度起作用的。 3、溶解氧氧是硝化反应过程中的电子受体，反应器内溶解氧高低，必将影响硝化反应得进程。在活性污泥法系统中，大多数学者认为溶解氧应该控制在1.5～2.0mg/L内，低于0.5mg/L则硝化作用趋于停止。当前，有许多学者认为在低DO（1.5mg/L）下可出现SND现象。在DO＞2.0mg/L，溶解氧浓度对硝化过程影响可不予考虑。但DO浓度不宜太高，因为溶解氧过高能够导致有机物分解过快，从而使微生物缺乏营养，活性污泥易于老化，结构松散。此外溶解氧过高，过量能耗，在经济上也是不适宜的。 4、生物固体平均停留时间（污泥龄）为了使硝化菌群能够在连续流反应器系统存活，微生物在反应器内的停留时间（θc）N必须大于自养型硝化菌最小的世代时间（θc）minN，否则硝化菌的流失率将大于净增率，将使硝化菌从系统中流失殆尽。一般对（θc）N的取值，至少应为硝化菌最小世代时间的2倍以上，即安全系数应大于2。 5、重金属及有毒物质除了重金属外，对硝化反应产生抑制作用的物质

城市环境空气监测点的布设方法杨志林

城市环境空气监测点的布设方法杨志林发表时间：2017-12-11T15:12:21.360Z 来源：《基层建设》2017年第25期作者：杨志林[导读] 摘要：合理布设环境空气质量监测站点，在环境空气质量监测的过程中是非常重要的一点。上海创蓝检测技术有限公司上海 200233 摘要：合理布设环境空气质量监测站点，在环境空气质量监测的过程中是非常重要的一点。他和能否反应区域空气环境质量息息相关，为环境决策提供了非常关键可靠的数据。在进行实际操作的过程中，需要合理布局监测站点，以便可以对人力、物力、财力进行一定的节约。关键词：城市环境；空气监测点；布设方法；注意要素引言环境监测是对污染进行治理的一个非常重要的关键点，环在环保监测工作的过程中需要注意合理选择空气污染监测点，这一点是十分重要的。合理选择监测点对监测数据的稳定性和真实性影响重大。利用环境监测工作的开展，可以让后续的空气污染治理的工作提供非常重要的数据支持，然而，在进行环保监测工作调查的过程中，发现由于很多其他因素的影响和干扰，空气污染监测点在布设的过程中有诸多不足之处。 1 空气污染监测点布设概述 1.1 空气污染监测目的在进行空气检测的过程中，不单单是对城市环境空气质量的监测，还需要对乡村城市空气质量的监测，都是同等重要的，和整个城市污染息息相关。然而在实际调查的过程中，发现很多工作人员对城市空气污染的监测非常重视，但是对乡村空气污染的节奏就比较忽视，在调查一些城市污染物分布的过程中，在乡村的监测点比较少。 1.2 监测点布设基本原则在开展环境监测工作的过程中，布设空气污染点一定要根据相关的环保监测区域的实际情况，对城市的空气进行一定的等级划分，在实际布设的过程中需要根据规划的具体要求来操作，一般情况下，对于空气污染监测点的布控一定要科学合理的分析监测区域的风向情况以及周围的环境情况，另外，上风口和下风口方向不同部位的空气污染监测点在设置的数量和种类方面也有一定的讲究。然而在环保监测过程中，很多工作人员都非常重视下风向空气污染监测点的布控情况，综合对比监测采集到的数据样本，可以获得一个相对比较真实的监测信息数据。相关的工作人员在布设空气污染监测点的时候还需要注意城市人口的分布情况，需要根据城市人口密度的情况来对优化和改良空气污染监测布设方案，这样才能更好的体现环境监测信息的准确性提供一定的依据。在空气污染监测点布设的时候，一定要注意设置在一些比较合适的区域，尤其是在一些宽敞的地方。相关的监测点设置人员需要注意，防止在监测点设置在附近有很多草地以及林地的地方，若是在这个监测点的附近出现了很大规模的绿化带或是这个区域的植被覆盖情况比较好的话，对监控污染监控点的设置是比较不利的，会造成结果和实际情况出现一定程度的偏差。 2 空气污染监测点布设注意要素在实际进行布设前，一定要提前对本区域内出现了污染源分布以及构成情况进行调查，这些因素往往会对空气污染造成直接影响，在调查空气污染过程中起到非常重要的作用，比如说在一些污染源分布比较均衡的地方，一定要通过网格法来进行分布，还需要对污染源形成的规律进行分析，同时还要在实际分析的过程中，结合实际情况进行具体问题具体分析，只有这样才能保证整个分析的结果具有准确性和合理性，才能为后面的工作提供很好的依据，保证整个空气监测的效果。 2.1 城市与农村空气污染监测点需要区别设置在布设空气污染监测点的过程中，城市和农村同样重要，需要摆在相同的位置上，然而由于农村的污染程度相对比较小，而且城市的人口比较密集，空气污染治理的难度非常大，因此，相关的环保部门需要积极重视城市环保监测，在进行空气污染的检测过程中，不单单需要对城市污染物分布的情况进行了解，还需要对空气中出现的一些敏感物进行了解，需要在最短的时间内，将这些污染源查找出来，只有这样才能给后续的环境治理工作提供一定的数据支持。在进行城市和农村空气污染监控点布设的过程中，往往具有比较大的差异，一定要根据现场的真实情况来进行区别设置，只有这样才能确保环境监测工作可以有效地、有针对性的展开。 2.2 污染源状况在布设空气污染监测点的过程中，一定要事先深入了解污染源的分布情况，主要是污染源的构成情况、属性情况、重点分布区域的相关内容，需要有针对性地进行环境污染监测点的设置，只有这样才能很好的控制污染源。由于一些污染源的种类不同、特性不同，这样对其进行监测的频率也是不一样的，需要根据污染源的等级来进行划分。一般情况下等级比较高的区域，监控的要求也最高，需要进行重点控制，还需要注意对污染源的排放情况进行判断，一些排放比较敏感的位置需要注意重点监测。 2.3 地理条件在开展环保监测的过程中，往往会被诸多因素所影响，这其中就包含了一些地形地貌等的条件，相关的环保监测工作人员在进行空气污染监测点布设的时候，也需要注意到这些影响因素。防止这些影响因素影响到环境监测数据的准确性和真实性，确保整个环境监测的数据具有有效性。 3 城市环境空气监测点的布设方法 3.1 确定采样站的数目在环境监测的过程中一定要注意合理进行，是否需要进行站点的布设需要结合实际情况来进行操作，若是没有根据当地实际的人口密度等条件来进行布设的话，所获取的数据准确性不高，不具有科学性，不能很好地代表当地的环境情况。当进行环境监测的过程中，往往需要结合人口数量来对采样点的实际数目来进行判断，在具体应用的时候，一般情况下需要采用两种监测手段来操作主要有自动监测方法和人工连续采样方法。在对我国空气环境污染例行监测采样数目进行设置的时候，一定要充分掌握和了解各监测点数据的情况。这其中需要重点了解城市的主导风向。 3.2 布设采样站的具体方法

空气细菌培养的采样方法

1空气的采样方法检测空气的培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。在处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好平板，采样高度距地面～，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。2细菌数的细菌总数（c f u/m3=4500N/A×T）式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）这个计算公式是根据在面积100cm3的表面，5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500c f u/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间，采用，或喷雾消毒。据统计，目前世界上有41种主要，其中经空气传播的就有14种，占首位［1］。空气是疾病的主要传播媒介，而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方，的好坏，不仅对患儿的影响很大，也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的，也对提出严峻的考验。调查表明，空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时，就有发生感染的危险性，而如果细菌总数不足180 cfu/m3时，则这种危险性似乎很小［2］。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3，并随着时间的推移，细菌总数逐步上升，在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致疾病通过空气传播。儿科门诊患者大多是急性或，在患者咳出的、痰液及分泌物中含有多种致病菌，同时每个患儿通常都有家长陪护，导致空气细菌含量较高。因为患儿本身较低，所以儿科输液室空气质量的好坏更能影响患儿疾病的转归，这一点应该引起高度重视。本次研究发现，儿科门诊输液室空气消毒后效果监测，符合标准，而且指数较低，输液患者后细菌数逐渐上升，2 h、4 h均超标，因此，儿科门诊输液室在人员流动的情况下，无法持续进行，仅靠一天两次的紫外线消毒是不能保证空气质量。降低菌落数的效果较持久。自然通风通过换气持续30 min，可以显着减少空气中的含量，降低室内CO及废气的浓度。每天累计通风2 h~3 h，能持久降低中的菌落数。有报道通风流出和进入的空气达到本房间容积时为换气1次，可清除原细菌数的%，所以通风是最简单的消毒方法［3］。另外，也应注意及时关闭,保持已清洁消毒后的室内净化效果。通过对空气中菌落的初步鉴定发现主要以革兰阳性菌为主，其中葡萄球菌、微球菌、奈瑟

空气培养采样方法

医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1） 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）图2 四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开后盖面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。五、结果分析 I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。

洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。

四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方； 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟； 3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养24小时； 4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。 5.放置培养皿示意图：盖面朝下斜扣到底盘A边上六、洁净室空气细菌菌落总数标准

校园空气质量监测方案 -

环境监测课程设计 ………校园空气质量监测方案专业：环境工程姓名：姚显阳学号：B11070412 课题名称：校园空气质量监测方案组员：康耀宗、王齐浩、潘凯飞、雷斌专业班级：B110704 系（院）：环境工程与化学系指导老师：葛晓燕

目录第1章检测背景 (1) 1.1此次课程设计的目的 (1) 1.2课程设计的现实意义 (1) 第2章污染物调查情况及基础资料的搜集 (2) 2.1污染源情况的调查 (2) 2.2基础资料的搜集 (2) 2.2.1气象资料 (2) 2.2.2地形及功能区划分 (3) 2.3设计方案的标准和规范 (3) 2.4设计思路 (4) 第3章采样点的设置 (5) 第4章检测项目及其方法原理和数据处理的确定 (7) 第5章采样时间和采样频率的确定 (13) 第6章样品的采集和保存 (15) 6.1采样方法的选择 (15) 6.1.1采样方法的选择 (15) 6.1.2气体的采样 (15) 6.2气体的保存 (18) 第7章样品的预处理 (19) 第8章质量保证、评价方法和实施计划 (20) 8.1质量保证 (20) 8.2评价方法 (21) 8.3实施计划 (25) 第9章保护校园环境质量的方案和建议 (26) 9.1 NO2的防治 (26) 9.2 二氧化硫（SO2）的防治 (26) 9.3 PM10的防治 (26) 第10章小结 (27) 参考文献 (28)

第1章检测背景此次课程设计是对洛阳理工学院进行空气质量的监测，分析校园空气中各物质的含量，了解污染物对空气质量的影响程度，对空气质量进行评述并提出对策和建议来保护校园及其周边的空气环境。 1.1此次课程设计的目的（1）课程实践，巩固所学的专业知识。（2）熟悉环境监测从布点、采样、样品处理、分析测试、数据处理到分析评价等一系列整套工作程序。（3）能够准确及时、全面的反应空气环境质量现状及其发展趋势，为环境管理、污染源的控制、环境规划提供科学依据。（4）收集环境监测背景数据、积累长期监测资料，为制定和修订此类环境标准、实施总量控制、目标管理提供依据（5）实施准确可靠的污染的污染监测，为环境执法部门提供执法依据。（6）在深入广泛开展环境监测的同时，结合环境状况的改变和监测理论及技术的发展，不断改革和更新监测方法和手段，为实现环境保护和可持续发展提供可靠的技术保障 1.2课程设计的现实意义（1）巩固所学的专业知识，加深了解我们对大气污染监测的基本理论。（2）利用所学的知识来解决实际问题，增强我们的运用能力。增强布点、采样、处理、分析、评价等一系列步骤与方法，为以后毕业论文和毕业后尽快适应实际工作打下良好基础。

大肠杆菌一般培养方法

使用牛肉膏蛋白胨培养基? 组成成分：牛肉膏 3g,蛋白胨 10g,Nacl 5g,琼脂 15～20g,水1000mL,～。? 具体配置步骤：? 1.称药品?按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中.牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放入热水中,牛肉膏使与称量纸分离,立即取出纸片.蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速.? 2.加热溶解?在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量.若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入己溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分.? 3. 调pH?检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加lmol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围.若偏碱,则用lmol/L HCl进行调节.pH 的调节通常放在加琼脂之前.应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度.?

4.过滤?液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利培养的观察.但是供一般使用的培养基,这步可省略.? 5.分装?按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内.分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染. 分装量:固体培养基约为试管高度的l/5,灭菌后制成斜面.分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜.半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.? 6.加棉塞?试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞.棉塞的形状,大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用.要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内,以防棉塞脱落.有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞.有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞.? 7.包扎?加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞.若培养基分装于试管中,则应以5支或7支在一起,再于棉塞外包一层牛皮纸,用绳扎好.然后用记号笔注明,培养基名称,组别,日期.?

解析大气环境监测布点方法

解析大气环境监测布点方法【摘要】大气环境监测是预防大气污染、进行大气保护的前提，大气环境对人类生活的质量甚至安全有着直接影响，大气环境监测的主要内容有选择监测项目、选择监测布点、试样采集、项目分析、处理监测数据，文章重点分析了大气环境监测布点的方法。【关键词】大气环境监测；大气保护；布点方法大气环境监测主要是对环境中的污染物按照实际需要进行定时定点观测，观测不同种类污染物的分布规律，进而进行环境评估、预报和研究。通过大气环境监测，对大气环境进行判断，评估是否符合国家标准，对外预报大气环境质量，分析大气污染发展的趋势，为环境质量状况研究提供依据。大气环境监测的对象主要是大气中的氮氧化物、硫氧化物、碳氧化物、臭氧、挥发性有机物等分子状污染物和可吸入颗粒物（PM10）、总悬浮颗粒物、细颗粒物等颗粒状污染物。在我国的监测历史并不太长，从学科角度来看，大气环境监测属于环境科学的分支学科，对环境科学的发展具有基础性的作用。 1.大气环境监测的意义 2007年国家环保总局公告《环境空气质量监测规范（试行）》实施以来，我国的大气环境监测取得了很大的进展，但是随着我国工业化、城镇化程度的不断推进，我国大城市的大气环境问题不容乐观，已经影响到了人民的健康水平，对我国的大气环境监测工作提出了新的要求和挑战。进行大气环境监测的意义主要体现在三个方面：第一，对人的意义。人作为社会活动主体最基本的权利是生存权，大城市的大气环境在无形中对人的身体产生极大的影响，恶劣的大气环境甚至威胁人的生命，因此，对大气环境进行日常监测是保证人的生存权的最基本的要求。第二，对动植物的意义。动植物动过光合作用或呼吸作用来存活，在这个过程中与空气进行融合；空气中的污染物对周围环境，如土壤、水等的不良影响也会导致动植物受害，甚至导致动物大批死亡，植物大量枯萎。第三，对社会环境的意义。大气污染物通过对人、动植物的影响，最终会导致活动的承受体——社会环境不断恶化，大气监测最后是通过对社会环境的监测观察来实现，通过对社会环境中不同时空、不同种类污染物的浓度进行监测，最后有利于对污染浓度进行有效控制，保持社会的可持续发展。 2.大气环境监测布点的方法监测点的布设，应尽量全面、客观、真实反映评价范围内的环境空气质量。大气环境监测布点方法不是一成不变的，根据污染物浓度、环境人口的密集度、工业发展水平、重要动植物分布、河流水源地的重要程度、监测地形、监测地气候环境等等进行监测布点分析和选择。 2.1大气环境监测布点点位选取的原则

空气细菌总数的测定教案资料

空气细菌总数的测定

空气细菌总数的测定一、实验原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以彻底高效杀死各种细菌及其高度耐热的原理。空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等，它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面，可较长时间停留在空气中。某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处，给身体健康带来严重危害，也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区，给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量，是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。 ----测定方法--平皿沉降法二、测定原理空气中飘浮着各种微生物，将盛有无菌培养基的平皿放于监测点上，暴露 5min，空气中的细菌便会落到培养基上，然后在37°C恒温箱中培养24h，计数每个平皿表面的菌落数，由于一个菌落由一个细菌繁殖而来，菌落总数便可认为是细菌总数。三、试剂营养琼脂 1、成分 A蛋白胨 1g

水及大气监测采样布点方法

水及大气监测采样布点方法集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#

1、河流采样点位的确定采样点泛指水体中一个具体的取样点，它受水面宽度和深度影响。在一个监测断面上设置的采样垂线数与各垂线上的采样点数应符合表1—1 和表 1—2，其中，中泓线设置在除去河流两岸滩涂部分后的中间位置；左、右两垂线布设在中线至岸边的中间部分。表1—1 采样垂线数的设置 2 污水采样点位的确定污水源一般经管道或渠、沟排放，无须设置监测断面，可直接确定采样点位。工业污（废）水对第一类和第二类污染物第一类污染物是指在环境和动植物内蓄积，对人体健康产生长远不良影响者。此类污染物，不分行业和污水排放方式，也不分受纳水体的功能类别，一律在车间或车间处理设施排放口采样（采矿行业的尾矿坝出水口不得视为车间排放口）。此类污染物有总汞、烷基汞、总镉、总铬、六价铬、总砷、总铅、总镍、苯并(a)芘、总铍、总银、总α放射性、总β放射性13种。第二类污染物指长远影响小于第一类的污染物。在排污单位排放口采样。此类污染物有pH 、色度、SS 、、、、、、、、-----34235PO F S CN N NH COD BOD Cr 石油类、动植物油、挥发酚、LAS 、类大肠菌群数、TOC 等56种。对整体污水处理设施效率监测时，在处理设施的入口和总排口设置采样点；对各污水处理单元效率监测时，在各处理单元的入口和排口设置采样点。城市污水

采样点位应根据地方环境保护行政主管部门的要求确定。为了保证两股水流的充分混合，采样点布设在离污水（或支管）入口约20～30倍管径的下游处。在污水入河排污口的上、下游分别设置采样点。采样位置设在采样断面的中心，当水深大于1m时，位于1/4水深处；水深小于或等于1m时，位于1/2水深处。 3流量测量流量测量原则测定瞬时流量：对“流量-时间”排放曲线波动较小的污水排放渠道，用瞬时流量代表平均流量所引起的误差值小于10%时，可以用某一时段内的任意时间测得的瞬时流量乘以该时段的时间即为该时段的流量。排放污水的“流量-时间”排放曲线有明显波动，但其波动有固定的规律，可以用该时段中几个等时间间隔的瞬时流量来计算出平均流量，然后用平均流量后再乘以时间表示该时段的流量。排放污水的“流量-时间”排放曲线既有明显波动又无规律可循，则必须连续测定流量，流量对时间的积分即为总流量。 .流量测量方法 a）污水流量计法：污水流量计的性能指标必须符合污水流量计技术要求。 b）容积法：将污水纳入已知容量的容器中，测定其充满容器所需要的时间，从而计算污水量的方法。本方法简单易行，测量精度较高，适用于计量污水量较小的连续或间歇排放的污水。适用于流量小于每日50t的排放口。但溢流口与受纳水体应有适当落差或能用导水管形成误差。

院感细菌培养操作

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用，影响病人免疫机能下降，大量使用抗生素，引起耐药菌株增多，菌群失调，以及先进医疗仪器广泛应用等原因，增加消毒灭菌的难度，致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍，直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序，更好、更快检测病原微生物的生长情况，预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 VITEK 32鉴定药敏分析系统美国FORMAⅡ级生物安全柜显微镜酒精灯接种环恒温培养箱各种培养基革兰氏染色液触酶试剂氧化酶试剂移液器无菌吸嘴 3.院感标本采集 3．1空气的采样 3．1．1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3．1．2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3．1．3布点方法室内面积＜30m2，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距墙1m 处各取一点；室内面积＞30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。 3．1．4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。

3．2．1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3．2．2采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面＞100cm2，则取100cm2。3．2．3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板，放在被检物体表面，用无菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪支手接触部位，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。3．3医护人员手采样 3．3．1采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 3．3．2采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一枝在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30 cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。 3．4医疗用品采样 3．4．1采样时间在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 3．4．2采样方法右用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等，取其中的一部分放培养液中培养。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。 3．5使用中消毒剂的采集 3．5．1采样时间采取使用中的消毒剂。 3．5．2采样方法在无菌条件下，用无菌注射器抽取1ml被检样品，加入10ml稀释液混匀。（对于醇类与酚类消毒剂稀释液用灭菌生长盐水；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入3%（w/v）吐温80和%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入3%（w/v）吐温80，以中和被检样液的残效作用。）

空气培养的采样方法精选版

空气培养的采样方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】

医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1） 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。五、结果分析 I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：

共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。采样布置点示意图：四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方； 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟； 3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时； 4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。 5.放置培养皿示意图：盖面朝下斜扣到底盘A边上六、洁净室空气细菌菌落总数标准?

环境空气质量现状监测布点原则

环境空气质量现状监测布点原则发表日期：2010/11/26 来源：中大网校[在线考试] 熟悉环境空气质量现状监测布点原则 3.2熟悉环境空气质量现状监测布点原则知识点： 3.2.1监测布点要求（1）设置依据：根据①项目的规模和性质；②地形复杂性；③污染源及环境空气保护目标的布局。综合考虑监测点设置数量。（2）监测点位数一级评价项目，监测点应包括评价范围内有代表性的环境空气保护目标，点位不少于10个；二级评价项目，监测点应包括评价范围内有代表性的环境空气保护目标，点位不少于6个。对于地形复杂、污染程度空间分布差异较大，环境空气保护目标较多的区域，可酌情增加监测点数目。三级评价项目，若评价范围内已有例行监测点位，或评价范围内有近3年的监测资料，且其监测数据有效性符合本导则有关规定，并能满足项目评价要求的，可不再进行现状监测，否则，应设置2～4个监测点。（3）公路、铁路等项目应分别在各主要集中式排放源（如服务区、车站等大气污染源）评价范围内，选择有代表性的环境空气保护目标设置监测点位（4）城市道路项目可不受上述监测点设置数目限制，根据道路布局和车流量状况，并结合环境空气保护目标的分布情况，选择有代表性的环境空气保护目标设置监测点位。 3.2.2监测布点原则监测点的布设，应尽量全面、客观、真实反映评价范围内的环境空气质量。依项目评价等级和污染源布局的不同，按照以下原则进行监测布点：（1）一级评价项目 a)

以监测期间所处季节的主导风向为轴向，取上风向为0°，至少在约0°、45°、90°、135°、180°、225°、270°、315°方向上各设置1个监测点，在主导风向下风向距离中心点（或主要排放源）不同距离，加密布设1～3个监测点。具体监测点位可根据局地地形条件、风频分布特征以及环境功能区、环境空气保护目标所在方位做适当调整。各个监测点要有代表性，环境监测值应能反映各环境空气敏感区、各环境功能区的环境质量，以及预计受项目影响的高浓度区的环境质量。 b) 各监测期环境空气敏感区的监测点位置应重合。预计受项目影响的高浓度区的监测点位，应根据各监测期所处季节主导风向进行调整。（2）二级评价项目 a) 以监测期间所处季节的主导风向为轴向，取上风向为0°，至少在约0°、90°、180°、270°方向上各设置1个监测点，主导风向下风向应加密布点。具体监测点位根据局地地形条件、风频分布特征以及环境功能区、环境空气保护目标所在方位做适当调整。各个监测点要有代表性，环境监测值应能反映各环境空气敏感区、各环境功能区的环境质量，以及预计受项目影响的高浓度区的环境质量。 b) 如需要进行2期监测，应与一级评价项目相同，根据各监测期所处季节主导风向调整监测点位。（3）三级评价项目 a) 以监测期所处季节的主导风向为轴向，取上风向为0°，至少在约0°、180°方向上各设置1个监测点，主导风向下风向应加密布点，也可根据局地地形条件、风频分布特征以及环境功能区、环境空气保护目标所在方位做适当调整。各个监测点要有代表性，环境监测值应能反映各环境空气敏感区、各环境功能区的环境质量，以及预计受项目影响的高浓度区的环境质量。 b) 如果评价范围内已有例行监测点可不再安排监测。（4）城市道路评价项目对于城市道路等线源项目，应在项目评价范围内，选取有代表性的环境空气保护目标设置监测点。监测点的布设还应结合敏感点的垂直空间分布进行设置。（5）监测点位置的周边环境条件

细菌的培养方法

细菌的培养方法根据培养细菌的目的和培养物的特性培养方法分为一般培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法三种。 1. 一般培养法将已接种过的培养基,置37℃培养箱内18－24小时,需氧菌和兼性厌氧菌即可于培养基上生长。少数生长缓慢的细菌，需培养3－7天直至一个月才能生长。为使培养箱内保持一定湿度，可在其内放置一杯水。培养时间较长的培养基，接种后应将试管口塞棉塞后用石腊凡士林封固，以防培养基干裂。 2. 二氧化碳培养法某些细菌，如牛流产布氏杆菌和胎儿弧菌等需要在含有10％二氧化碳的空气中才能生长，尤其是初代分离培养要求更为严格。将已接种的培养基置于二氧化碳环境中进行培养的方法即二氧化碳培养法，常用方法有以下几种： (1) 二氧化碳培养箱可将已接种的培养基直接放入箱内孵育，即可获得二氧化碳环境。 (2) 烛缸法将已接种的培养基，置于容量为2 000ml的磨口标本缸或干燥器内。缸盖或缸口处均需涂以凡士林，然后点燃蜡烛直立置入缸中，密封缸盖。待燃自行熄灭时，容

器内约含5－10％的CO2 容器置37℃培养。 (3) 重碳酸钠－盐酸法每升容积的容器内，重碳酸钠与盐酸按0.4g与3.5ml的比例，分别将两种药各置一器皿内（如平皿内），连同器皿置于标本缸或干燥器内，盖严后使容器倾斜，两种药品接触后即可产生二氧化碳。 3. 厌氧培养法目前常用的厌氧培养方法有厌氧罐法、气袋法及厌氧箱三种。 (1) 厌氧罐法是目前应用较广泛的一种方法，共分为以下几种。抽气换气法：该法适用于一般实验室，其特点是较经济并可迅速建立厌氧环境。标本接种后，将平板放入厌氧罐，拧紧盖子，用真空泵抽出罐中空气，使压力真空表至-79.98KPa，停止抽气，充入高纯氮气使压力真空表指针回0位,连续反复3次,最后在罐内-79.98KPa的情况下,充入70%的N2 、20%H2 、10%CO2 （有人改用20%CO2 及80%H2 ,亦可获得好结果）。罐中需放入冷催化剂钯粒，可催化罐中残余的O2 和H2 化合成水。同时罐中应放有美蓝指示管，美蓝在有氧的环境下呈蓝色，无氧时为红色。临用前首先将美蓝煮沸使变成无色，放入罐中先呈浅蓝色，待罐中无氧环境形成，美蓝即可持续无色。

细菌培养技术

第二节细菌培养检测技术节概述细菌的培养技术是微生物实验中基本技术之一。大多数细菌均可用人工方法培养，只有将细菌培养出来才能对它进行研究和鉴定知识点导航一.培养基的种类培养基（culture medium）是细菌生长繁殖所需要的各种营养物质的人工制品。适宜的培养基能使细菌在体外迅速生长繁殖，便于对细菌进行分离和鉴别。可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧菌用培养基和特殊培养基。（一）基础培养基只含有细菌生长所需的最基本营养成分，应用最广泛，为制备多种培养基的基础，常见的有肉汤培养基、琼脂培养基。（二）营养培养基在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的细菌生长需要或增菌用。如结核分枝杆菌培养基中添加鸡蛋、马铃薯、甘油等。（三）选择培养基利用不同种类细菌对化学物质的敏感性不同而制成，使分离菌大量繁殖而抑制其它细菌生长的培养基。培养基中含有的抑制剂能抑制非目的菌生长或使其生长不佳，有利于目的菌的检出和识别。选择培养基多为固体平板，用于从标本中分离某些特定的细菌。（四）鉴别培养基培养基中加有某些特定成分，如糖、醇类和指示剂等，用于检查细菌的各种生化反应，以资鉴别和鉴定细菌。（五）厌氧菌用培养基专性厌氧菌须在无氧条件下才能生长，故需在培养基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸钠等还原剂，降低培养基中氧化还原电势，并应与外界空气隔绝，使培养基本身为无氧的环境。（六）特殊培养基为某些需要在特殊条件下才能生长的细菌培养之用。如高渗盐增菌培养基、高渗糖增菌培养基、改良Kagan氏培养基等。二.培养基的制备制备一般培养基的主要过程基本相似，包括调配、溶化、调整pH、过滤、分装、灭菌及检定和保存。三.细菌检验室的注意事项及无菌技术

细菌培养实验报告(新)

篇一：培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求 1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2. 掌握培养基的配置原则和方法。 3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。三、实验材料 1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。 2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3. 其他物品：药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装 1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。（2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm 左右，棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时．可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，有手将移液管压紧．在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。（二）液体及固体培养基的配制过程 1．液体培养基配制