BD淋巴细胞亚群分型
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淋巴细胞亚群(详细资料)
机体免疫状态是衡量机体是否患病的重要指标，目前多采用流式细胞术来监测机体的免疫状态，其中最重要的指标是检测T、B和NK淋巴细胞的水平。 T细胞主要包括T辅助细胞（Th）和T抑制细胞（Ts）细胞亚群。CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞，理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和，但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+，这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞（真正Th细胞）和CD3-CD4+细胞（非Ts细胞），而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞（一部分NK细胞）和CD3-CD8+CD16+56-（未知细胞）。由此可见，真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞，真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。尤其当患者NK细胞明显增加时，会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞，因此，用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。 首先在淋巴细胞中识别出CD3细胞，然后在CD3细胞中再区分CD4+和CD8+细胞。NK细胞的表面无T细胞和B细胞表面标志，但有CD16和CD56等标志，用CD16+56抗体能鉴定出NK细胞（一定是CD3阴性），CD3-CD16+56+细胞才是真正的NK细胞。根据是否表达CD8，又可将NK细胞分为CD3-CD8+CD16+56+细胞（所占比例小，不影响CD8比例）和CD3-CD8-CD16+56+细胞（主要成分）。 B细胞的表面标志是CD19，理论上CD3-CD19+细胞才是真正的B淋巴细胞。但 CD3+CD19+细胞很少，可忽略不计，所以CD19+细胞就是B淋巴细胞。 在抗肿瘤效应中，CD4和CD8分别是T淋巴细胞的辅助／诱导细胞亚群与抑制/细胞毒细胞亚群，CD4细胞的主要功能是通过其分泌的淋巴因子，增强和扩大免疫应答过程，辅助诱导其它免疫细胞如杀伤性T细胞，B细胞等共同发挥抗肿瘤作用，CD4细胞的减少，导致免疫功能低下。CD4/CD8比值是重要的免疫状态监测指标，其比例的降低与免疫系统损害的程度相关。 CD4降低见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者；CD8降低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病；CD4/CD8比值升高见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、病毒感染等；CD4/CD8比值降低见于艾滋病(常小于0.5)。监测器官移植排斥反应时，CD4/CD8比值升高预示可能发生排斥反应。
淋巴细胞亚群
T细胞主要包括T辅助细胞（Th）和T抑制细胞（Ts）细胞亚群。CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞，理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和，但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+，这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞（真正Th细胞）和CD3-CD4+细胞（非Ts细胞），而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞（一部分NK细胞）和CD3-CD8+CD16+56-（未知细胞）。由此可见，真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞，真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。尤其当患者NK细胞明显增加时，会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞，因此，用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。 首先在淋巴细胞中识别出CD3细胞，然后在CD3细胞中再区分CD4+和CD8+细胞。NK细胞的表面无T细胞和B细胞表面标志，但有CD16和CD56等标志，用CD16+56抗体能鉴定出NK细胞（一定是CD3阴性），CD3-CD16+56+细胞才是真正的NK细胞。根据是否表达CD8，又可将NK细胞分为CD3-CD8+CD16+56+细胞（所占比例小，不影响CD8比例）和CD3-CD8-CD16+56+细胞（主要成分）。 B细胞的表面标志是CD19，理论上CD3-CD19+细胞才是真正的B淋巴细胞。但CD3+CD19+细胞很少，可忽略不计，所以CD19+细胞就是B淋巴细胞。 在抗肿瘤效应中，CD4和CD8分别是T淋巴细胞的辅助／诱导细胞亚群与抑制/细胞毒细胞亚群，CD4细胞的主要功能是通过其分泌的淋巴因子，增强和扩大免疫应答过程，辅助诱导其它免疫细胞如杀伤性T细胞，B细胞等共同发挥抗肿瘤作用，CD4细胞的减少，导致免疫功能低下。CD4/CD8比值是重要的免疫状态监测指标，其比例的降低与免疫系统损害的程度相关。 CD4降低见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者；CD8降低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病；CD4/CD8比值升高见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、病毒感染等；CD4/CD8比值降低见于艾滋病(常小于。监测器官移植排斥反应时，CD4/CD8比值升高预示可能发生排斥反应。 淋巴细胞担负着免疫的主要功能。淋巴细胞亚群的测定有助于了解机体免疫状况及一些疾病的监测。利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，再配合多色荧光染料，通过流式细胞仪检测分析即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的相对比例。最常检测的亚群包括T细胞（CD3）、B细胞（CD19）、NK细胞（CD16+56）、辅助性T细胞（CD3+CD4+）和抑制性T细胞（CD3+CD8+）等等。
淋巴细胞亚群分析与临床---陈建林
一、流式淋巴细胞亚群检测的临床意义 1.了解不同情况下机体免疫功能状态 肿瘤（手术、放化疗患者的免疫功能检测） 感染（脓毒血症、重症监护患者等） 自身免疫病、免疫缺陷病等 不孕不育 某些血液系统疾病 其他：慢性肾病、骨髓移植恢复期等 2.辅助临床疾病的诊断 3.探索疾病的发病机理、病程及预后 4.观察监测疗效，指导临床建立治疗方案 二、淋巴细胞的分类及功能 B细胞(CD19+)：体液免疫 辅助/诱导T细胞(Th):介导和增强免疫应答 (CD4+) 淋巴细胞T细胞(CD3+）细胞毒性(Tc) /抑制性T细胞(Ts): 抗病毒、抗肿瘤 (CD8+) 调节性T 细胞(Treg):抑制免疫应答、维持免疫耐受 (CD4+CD25+) NK细胞：抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节 (CD16+/CD56+) 三、流式淋巴细胞亚群检测的临床应用 淋巴细胞亚群检测与儿科疾病 （一）评估机体免疫功能状态 多种小儿疾病原发或继发疾病均存在T细胞异常，观察T细胞变化，对小儿疾病病因、发病机制以及协助临床诊断与治疗等具有重要价值。 类型指标CD3+ CD4+CD8+CD4+/CD8+细菌性肺炎↓↓↓↓↑↓↓ 支原体肺炎↓↓↓↓↓↓↓↓ 病毒性肺炎↓↓↓↓↓↓↓↓ 传单增多症↑↑↓↓↑↑↓↓ 支气管哮喘↑↓↑
T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----结合退热、消咳、肺罗音消失时间观察T 细胞变化，特别针对儿科患者可合理调节抗生素使用，改善预后，避免药物损伤. （二）原发性免疫缺陷病的早期识别和干预 1.流式细胞仪分析T细胞亚群(包括CD3+、CD4+和CD8+)、B细胞(CD19+) 和NK细 胞(CD16+/CD56+)比例等主要检查项目,可对大多数原发性免疫缺陷病患儿作出诊断。 2.评估免疫接种前机体免疫状态 案例：T/B细胞联合免疫缺陷患 儿，未评价免疫系统功能，直接 接种灭活疫苗，造成严重感染T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----结合患儿科反复感染的临床症状及时检测； 在疫苗接种前2-3天作出评估。 淋巴细胞亚群检测在肿瘤临床的应用 恶性肿瘤的发生、发展、转移与人体免疫功能下降密切相关。人体的抗肿瘤免疫以细胞 免疫为主，体内发挥抗肿瘤免疫作用主要由CD4和CD8细胞完成。 （一）评价肿瘤患者的整体免疫功能 1．肿瘤患者处免疫抑制状态，T淋巴细胞降低。 2．肿瘤患者T淋巴细胞与病程相关，随病程逐渐降低。 CD3、CD4、CD4/CD8细胞数下降程度：Ⅳ期> Ⅲ期> Ⅱ期>Ⅰ期3．肿瘤患者T淋巴细胞持续低下，转移率高、易复发
淋巴细胞亚群检测方案
目和相对比例都在一定的范围内。那么临床常见的淋巴细胞亚群包括哪些项 目？ 一、淋巴细胞亚群 二、抗体组合方案
联合CD45的三色方案主要是有四种不同的试剂。 1.CD45/CD3/CD4 这个抗体组合主要用来检测T3细胞和T4细胞。 2.CD45/CD3/CD8 用来检测T3细胞和T8细胞。 3.CD45/CD3/CD19 用来检测T3细胞和B细胞。 4.CD45/CD3/CD16和/或CD56 用来检测T3细胞和NK细胞。 （三）双色方案 如果实验室在边远的地区，条件不足，只能做双色方案，但是在双色方案中建议要把CD3加进来，因为CD45能很好地将白细胞和其他的干扰细胞，尤其是红细胞进行区分。如果不能用CD45，最好能用到 CD3，CD3可以特异的标记T淋巴细胞，T淋巴细胞和CD4做双标可以克服单一的CD4抗体。为此，双色方案中也分为四管，每管当中建议都包含有CD3。 1.CD3/CD4 用来检测T3细胞和T4细胞。 2.CD3/CD8 用来检测T3细胞和T8细胞。 3.CD3/CD19 用来检测T3细胞和B细胞。 4.CD3/CD16和/或CD56 用来检测T3细胞和NK细胞。 尽管检测条件不允许做四色或三色的分析，但也至少要用CD3和其他的直标抗体进行双免疫荧光染色方案，不建议采用单色方案进行淋巴细胞亚群分析。 （四）7-氨基放线菌素D(7-AAD)联合CD45方案 1．目的 对于超过24小时的标本或肉眼观察发现已经变质的标本，需使用7-氨基放线菌素D（7-AAD）结合 CD45（评估淋巴细胞、单核细胞和粒细胞死亡）复染评估细胞活力。 2.判定 7-AAD荧光染料主要染活细胞，主要用来鉴定细胞活性。 （1）7-AAD阴性者是活细胞群。
淋巴细胞亚群检测的临床意义
淋巴细胞亚群与临床 人体外周血的淋巴细胞是机体重要的免疫细胞，主要包括三种：T淋巴细胞（TC）、B淋巴细胞（BC）、自然杀伤细胞（NK）。TC主要表达CD3+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的60--80%；BC主要表达CD19+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的15--20%；自然杀伤细胞（NK）主要表达CD3--CD16+CD56+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的10--20%。 通过T淋巴细胞亚群的监测可以了解在不同疾病状态下患者的细胞免疫功能状态，已经广泛在肿瘤、自体免疫、感染性疾病中, 辅助临床诊断、帮助了解发病机理、判断预后和指导临床治疗。T淋巴细胞亚群检测的内容为总T细胞（CD3+）及其亚群（辅助性T淋巴细胞，CD4+；抑制性或细胞毒T淋巴细胞，CD8+）的数量和比例。 在某些自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、自体免疫性溶血性贫血患者中CD3+/CD4+细胞的比值升高。在病毒感染（上感，AIDS等）、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等疾病中，患者CD4+/CD8+比值降低，三种淋巴细胞的数量和比例均可能有相应的改变。T细胞亚群已被用来监测器官移植病人的免疫状态，协助发现和使其避免受到GVHD的攻击。由于在感染性、肿瘤性疾病、自体免疫性疾病和器官移植中患者的免疫功能和预后之间有着密切的关系，对其给予密切注意并及时采取适当措施、调节患者的免疫状态以改善预后就成为现代医学的一个重要内容。 常见疾病T淋巴细胞的改变（参考） 疾病 T细胞亚群 CD4+/CD8+ CD4+（辅助T） CD8+（抑制T） 类风关↑（活动期）↑↑ SLE --或↓（活动期）↑↓↑ 胰岛素依赖性糖尿病↑ 多发性硬化症↓↓↑ 乙型肝炎↑ 自身免疫溶血性贫血↑↑ 上呼吸道感染↓↓↓ 结核↓ AIDS ↓↓↑ CD4+/CD8+ CD3+ （总T） CD4+（辅助T） CD8+（抑制T）恶性肿瘤（白血病）↓↓↓↓↑↑↑↑ 再障及粒细胞减少症↓↑↓ CMV感染↓↑↓ 血小板减少↓↓↓↓↓↓ CD19为全部B细胞共有的表面标志，增高见于B细胞系统的恶性肿瘤，减低见于体液免疫缺陷病。BC主要介导抗感染等体液免疫，故不作为肿瘤患者的检测指标。 NK细胞主要表达CD3--CD16+CD56+ ，约占淋巴细胞的10--15%左右。NK细胞能非特异性杀伤肿瘤细胞，是机体第一道肿瘤防线，其杀伤活性可被IL-2等细胞因子诱导而显著增强。 通常在肿瘤患者外周血中， CD3+、CD4+、NK细胞减少，而CD8+细胞增加，CD4+/ CD8+的比值降低，。说明肿瘤病人的细胞免疫功能处于免疫抑制状态，识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长与转移。因此，淋巴细胞亚群的检测对了解肿瘤发病机制、了解某些药物或治疗方法对机体免疫功能的影响，了解患者自身免疫功能状态的变化，指导临床治疗和科研应用等，都有着极其重要的理论意义和应用意义。
免疫功能淋巴细胞亚群检测的临床意义修订版
免疫功能淋巴细胞亚群检测的临床意义修订版 IBMT standardization office【IBMT5AB-IBMT08-IBMT2C-ZZT18】
免疫功能（淋巴细胞亚群）检测的临床意义 外周血淋巴细胞根据生物学功能和细胞表面抗原表达分为3个群：T淋巴细胞 （CD3+）、B淋巴细胞（CD19+）和NK淋巴细胞【自然杀伤细胞（natural killer)， CD3-CD16+和/或CD56+】。T细胞又分为辅助T细胞（CD3+CD4+）和抑制T细胞 （CD3+CD8+)。淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它 总体反应机体当前的免疫免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病，如自身 免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等，分析发病机制，观察疗效 及检测预后有重要意义。 T淋巴细胞百分率或计数绝对值可用于区别和监测某些免 疫缺陷病和自身免疫性疾病。辅助T淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺 陷病、艾滋病、应用免疫抑制患者。抑制T淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病， 如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。抑制T细胞百分率在一些免 疫性疾病表现出超出正常参考范围，在许多先天性或获得性免疫缺陷病人中升高（如重症 综合性免疫缺陷SCID,AIDS）。 CD4+/CD8+>2.5表明细胞免疫功能处于“过度活 跃”状态，容易出现自身免疫反应，见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。CD4+/CD8+ 在肿瘤病人外周血中T淋巴细胞亚群数值都有异常，其特征是患者体内CD3+细胞、CD4+ 细胞明显减少，而CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+比值显着降低，说明肿瘤患者的细胞免 疫功能处于免疫抑制状态，患者对识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长转移。骨髓造血细胞的增殖和分化障碍也与T细胞亚群异常有关。如在再生障碍性贫血与粒 细胞减少症中，患者的外周血CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，CD4+/CD8+比值明显下降。 NK细胞介导某些肿瘤和病毒感染细胞的细胞毒性反应。 B淋巴细胞为 体液免疫的重要指标。
免疫功能淋巴细胞亚群检测的临床意义
免疫功能（淋巴细胞亚群）检测的临床意义外周血淋巴细胞根据生物学功能和细胞表面抗原表达分为3个群：T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+）和NK淋巴细胞【自然杀伤细胞（natural killer)，CD3-CD16+和/或CD56+】。T细胞又分为辅助T细胞（CD3+CD4+）和抑制T细胞（CD3+CD8+)。淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它总体反应机体当前的免疫免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病，如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等，分析发病机制，观察疗效及检测预后有重要意义。T淋巴细胞百分率或计数绝对值可用于区别和监测某些免疫缺陷病 和自身免疫性疾病。辅助T淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制患者。抑制T淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。抑制T细胞百分率在一些免疫性疾病表现出超出正常参考范围，在许多先天性或获得性免疫缺陷病人中升高（如重症综合性免疫缺陷SCID,AIDS）。 CD4+/CD8+>2.5 表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自身免疫反应，见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。CD4+/CD8+ 在肿瘤病人外周血中T淋巴细胞亚群数值都有异常，其特征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少，而CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+比值显著降低，说明肿瘤患者的细胞免疫功能处于免疫抑制状态，患者对识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长转移。骨髓造血
细胞的增殖和分化障碍也与T细胞亚群异常有关。如在再生障碍性贫血与粒细胞减少症中，患者的外周血CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，CD4+/CD8+比值明显下降。 NK细胞介导某些肿瘤和病毒感染细胞的细胞毒性反应。 B淋巴细胞为体液免疫的重要指标。
淋巴细胞亚群
淋巴细胞亚群 T淋巴细胞亚群分析 T淋巴细胞及亚群的检测结果可以解释一些疾病发病机理、对患者的免疫功能和预后做出判断以及指导治疗。这些疾病主要包括：1.病毒感染性疾病；2.肿瘤性疾病；3.自身免疫性疾病；4.器官移植患者；5.其他免疫缺陷或异常的患者。 淋巴细胞是白细胞中非常重要的一类。它分为主要参与细胞免疫的T淋巴细胞（CD3+）和主要参与体液免疫的B淋巴细胞（CD19+）。而T淋巴细胞又分为辅助性T淋巴细胞（CD3+C D4+）和抑制性/细胞毒性T淋巴细胞（CD3+CD8+）。在正常情况下，各群淋巴细胞的数目和相对比例都在一定的范围内。 在T淋巴细胞亚群的报告中提供了以下内容： 1. 总T（CD3+）淋巴细胞的绝对计数： 就如白细胞计数一样，该细胞的绝对计数(个/ul)一般也在一定范围内。在一些情况下，如病毒感染、化学和物理因素、免疫系统的衰竭或其它功能紊乱、造血系统异常等疾病时此值可能会有异常。 2. 辅助T（CD3（+）CD4（+））细胞的绝对计数和百分比。 3. 抑制T（CD3（+）CD8（+））细胞的绝对计数和百分比。 无论是CD3（+）CD4（+）还是CD3（+）CD8（+）细胞，都可以进一步划分为更进一步的亚群。 4. CD3(+)细胞中的CD4、CD8双阳性或双阴性细胞： 在淋巴细胞的分化增殖异常时，CD4、CD8双阳性或双阴性细胞的数量和百分比会有相应的升高和降低。 5. CD4（+）和CD8（+）细胞的比值----T细胞亚群报告中最为简单和明确的指标：
在淋巴细胞的分化中产生的总T细胞的数量是有限的，加之在病变中主要为辅助T或抑制T的升高或降低，因而CD4（+）和CD8（+）细胞的比值会发生相应的变化，该值就成为一个简单和明确的指标. 若其比值＞正常值表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应。 CD4／CD8＜正常值一般被称为“免疫抑制”状态，常见于 （1）免疫缺陷病，如艾滋病时的比值常显著小于正常值 （2）恶性肿瘤； （3）再生障碍性贫血、白血病； （4）某些病毒感染； （5）自体免疫性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等的活动期。 免疫性不孕不育 自然流产是生殖过程中一种常见的现象,一次流产的发生率时13%~17%。复发性流产(r ecurrent spontaneous abortion, RSA)是指连续发生2次或2次以上的自然流产，又称习惯 性流产,而流产常发生在同一妊娠月份,约占妊娠总数的1%~3%,是临床上难以处理的不育症,严重影响广大妇女的生殖健康。临床研究发现,此类患者再次妊娠发生流产的风险高达70%~80%。RSA的病因复杂,除了胚胎染色体(孕8周以前流产的胚胎60%为非整倍体)或流产夫妇染色体 异常(常见者为平衡易位、罗伯逊易位、和染色体数目异常)、解剖异常(如先天性苗勒管发育异常、子宫动脉发育异常、宫腔粘连、子宫肌瘤、子宫内膜异位症、子宫腺肌症等)、内分泌异 常(如黄体功能不全、甲状腺功能异常、胰岛素抵抗等)、感染(如弓形虫、巨细胞病毒、细菌、支原体、衣原体感染等)等经典的四大病因外,
T淋巴细胞亚群
T淋巴细胞亚群 T细胞是具有高度异质性的细胞群体，摘要介绍如下几种不同的分类方法：（1）根据TCR 肽链组成情况的不同，可将T细胞分为αβT细胞和γδT细胞；（2）根据T细胞是否接受过抗原刺激或接受抗原刺激后的分化情况，可将其分为初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞；（3）根据T细胞内外标志和功能特性，可将其分为CD4+Th细胞、CD8+CTL细胞和CD4+调节性T细胞。 （一）αβT细胞和γδT细胞 1. αβT细胞是执行适应性免疫应答的T细胞，主要分布于外周淋巴组织和血液中；其TCR由α和β两条肽链组成，具有高度多样性和抗原识别特异性。αβT细胞只能识别MHC分子提呈的抗原肽，即表达在APC表面的抗原肽-MHC分子复合物，并且具有自身MHC限制性；其主要功能是执行适应性细胞免疫应答，辅助B细胞产生适应性体液免疫应答和参与免疫应答的调节。 2. γδT细胞是执行固有免疫应答的T细胞，主要分布于粘膜和皮下组织，其TCR由γ和δ两条肽链组成，缺乏多样性。γδT细胞可直接识别某些细胞表面的糖蛋白、MIC A/B分子、热休克蛋白或CD1分子提呈的脂类抗原和磷酸化抗原，且不受MHC限制。他们对某些肿瘤细胞和病毒或胞内寄生菌感染的靶细胞具有泛特异性杀伤作用，也可通过分泌不同类型的细胞因子发挥免疫调节和介导炎症反应。αβT细胞与γδT细胞主要特征及其分布和功能如表所示。 αβT细胞与γδT细胞主要特征及其分布和功能
（二）初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞 1. 初始T细胞（naive T cell，Tn）是指离开胸腺进入外周后，从未与其特异性抗原相遇，即对相应抗原尚未产生应答的成熟T细胞。该种T细胞表达CD45RA和高水平与其归巢相关的L-选择素（CD62L）及其他粘附分子，参与淋巴细胞再循环。在外周免疫器官，CD4+初始T细胞通过表面TCR-CD3复合体和粘附分子与树突状细胞表面相应抗原肽-MHC分子复合物和相应粘附分子结合相互作用后，首先分化为CD4+Th0细胞；后者在局部微环境中不同病原体和/或细胞因子作用下，可增殖分化为功能不同的T细胞亚群，参与适应性免疫应答，并最终分化为效应T细胞和记忆T细胞。 2. 效应T细胞（effector T cell,Te）是指接受抗原刺激后，经克隆扩增和分化形成的能够发挥免疫效应的终末T细胞。效应T细胞不表达CD45RA和L-选择素（CD62L），而表达CD45RO和高水平IL-2R,借此能与初始T细胞相区别。效应T细胞能向外周炎症部位或某些器官组织迁移,而不参与淋巴细胞再循环。CD4+/ CD8+效应T细胞与APC或肿瘤和病毒感染靶细胞表面相应抗原肽-MHC分子复合物特异性结合后，可通过释放IL-2、IFN-γ、TNF-β等多种细胞因子或分泌穿孔素、颗粒酶等细胞毒性物质，介导产生细胞免疫效应或细胞毒作用。 3. 记忆T细胞（memory T cell，Tm）是指接受抗原刺激后，在增殖分化过程中停止分化，成为静息状态的具有免疫记忆功能的长寿T细胞。记忆T细胞介导再次免疫应答，他们对相应抗原和细胞因子的刺激较初始T细胞更为敏感；在与相应抗原相遇后可迅速活化、增殖分化为效应T细胞和产生新的记忆T细胞。记忆T细胞主要存在于血液和外周淋巴器官，也能向外周炎症组织等部位迁徙；其中参与淋巴细胞再循环的记忆T细胞称为中央型记忆细胞（central memory cell,Tcm）。此型记忆T细胞为CD45RO+ CD62L+ CCL7+ T细胞，能与表型为CD45RO- CD45RA+ CD62L+的初始T细胞和表型为CD45RO+ CD62L- CCL7-的效应T细胞相区别。 （三）CD4+Th细胞、CD8+CTL细胞和CD4+调节性T细胞
淋巴细胞亚群研究分析与临床---陈建林
淋巴细胞亚群分析与临床---陈建林
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、流式淋巴细胞亚群检测的临床意义 1.了解不同情况下机体免疫功能状态 肿瘤(手术、放化疗患者的免疫功能检测) 感染(脓毒血症、重症监护患者等) 自身免疫病、免疫缺陷病等 不孕不育 某些血液系统疾病 其他：慢性肾病、骨髓移植恢复期等 2.辅助临床疾病的诊断 3.探索疾病的发病机理、病程及预后 4.观察监测疗效，指导临床建立治疗方案 、淋巴细胞的分类及功能 B细胞(CD19+): 体液免疫 辅助/诱导T细胞(Th):介导和增强免疫应答 (CD4+) 细胞毒性(Tc) /抑制性T细胞(Ts):抗病毒、抗肿瘤淋巴细胞T 细胞(CD3+) (CD8+) 、调节性T细胞(Treg):抑制免疫应答、维持免疫耐受 V (CD4+CD25+) NK细胞：抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节 (CD16+/CD56+) 三、流式淋巴细胞亚群检测的临床应用 淋巴细胞亚群检测与儿科疾病 (一)评估机体免疫功能状态 多种小儿疾病原发或继发疾病均存在T细胞异常，观察T细胞变化，对小儿疾病病因、 发病机制以及协助临床诊断与治疗等具有重要价值。 类型指标CD3+CD4 +CD8+CD 4+ /CD 8+ 细菌性肺炎T JJ 支原体肺炎JJ 病毒性肺炎JJ 传单增多症TT JJ
细胞变化，特别针对儿科患者可合理调节抗生素使用，改善预后，避免药物损伤 （二）原发性免疫缺陷病的早期识别和干预 1.流式细胞仪分析 T 细胞亚群（包括CD3+、CD4+和CD8+）、B 细胞（CD19+）和NK 细 在疫苗接种前2-3天作出评估。 淋巴细胞亚群检测在肿瘤临床的应用 恶性肿瘤的发生、发展、转移与人体免疫功能下降密切相关。人体的抗肿瘤免疫以细胞 2 .肿瘤患者T 淋巴细胞与病程相关，随病程逐渐降低。 3 .肿瘤患者T 淋巴细胞持续低下，转移率高、易复发 T 细胞 CD4、CD8、CD3检测介入时间 结合退热、消咳、肺罗音消失时间观察 胞（CD16+/CD56+） 比例等主要检查项目 ，可对大多数原发性免疫缺陷病患儿作出诊断。 ■A CI ' ■ ■ Pe ■上珂.；弓* 直胞 直接 免疫为主，体内发挥抗肿瘤免疫作用主要由 CD4和CD8细胞完成。 琳旦细胞亚群分析 利1?屮|?耳1 I MK 血 CO3 , CD56 + 如施如雎[T a 1 co3+cr?a+ 调书?tt.T 细 Jl6.(TrGA) [SD4fC 口 35+CQ1.2 丁 lcw/\ 恤^^抑删，比如 普怦 IW ■痫 CP 切cos A 1.5 = （一）评价肿瘤患者的整体免疫功能 1 .肿瘤患者处免疫抑制状态, T 淋巴细胞降低。 CD4 CD3、CD4、CD4/CD8细胞数下降程度: 川期＞ n 期＞ I 期 Ft- 儿卜"価《种心?? 和 MiM 曝 mH 结合患儿科反复感染的I 临床） T 细胞 CD4、CD8、CD3 检测介入时间 2.评估免疫接种前机体免疫状态 i￥f -* . r PM - i TM 轧 9M - *.* ' ■ # K ：寸詁■贮 t ? rgp, 畔 h- ■. WT 赳：' "■ HuEWJ*， h 亡*七 '■■ ■■匕 _、. T 卡斗得—忙 U ?: hE i 瞬邑细J9包 吕性?■MT X T 如胞 CDSXU. /* * ** A 可《 4, J*.- B 加曲 CO 19. CD2O
淋巴细胞亚群检测的临床意义
淋巴细胞亚群与临床人体外周血的淋巴细胞是机体重要的免疫细胞，主要包括三种：T 淋巴细胞（TC）、B淋巴细胞（BC）、自然杀伤细胞（NK）。TC主要表达CD3+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的60--80%；BC主要表达CD19+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的15--20%；自然杀伤细胞（NK）主要表达CD3--CD16+CD56+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的 10--20%。 通过T淋巴细胞亚群的监测可以了解在不同疾病状态下患者的细胞免疫功能状态，已经广泛在肿瘤、自体免疫、感染性疾病中, 辅助临床诊断、帮助了解发病机理、判断预后和指导临床治疗。T淋巴细胞亚群检测的内容为总T细胞（CD3+）及其亚群（辅助性T淋巴细胞，CD4+；抑制性或细胞毒T淋巴细胞，CD8+）的数量和比例。 在某些自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、自体免疫性溶血性贫血患者中CD3+/CD4+细胞的比值升高。在病毒感染（上感，AIDS等）、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等疾病中，患者CD4+/CD8+比值降低，三种淋巴细胞的数量和比例均可能有相应的改变。T细胞亚群已被用来监测器官移植病人的免疫状态，协助发现和使其避免受到GVHD的攻击。由于在感染性、肿瘤性疾病、自体免疫性疾病和器官移植中患者的免疫功能和预后之间有着密切的关系，对其给予密切注意并及时采取适当措施、调节患者的免疫状态以改善预后就成为现代医学的一个重要内容。 常见疾病T淋巴细胞的改变（参考）
疾病 T细胞亚群 CD4+/CD8+ CD4+（辅助T）CD8+（抑制T） 类风关↑（活动期）↑↑ SLE --或↓（活动期）↑↓↑ 胰岛素依赖性糖尿病↑ 多发性硬化症↓↓↑ 乙型肝炎↑ 自身免疫溶血性贫血↑↑ 上呼吸道感染↓↓↓ 结核↓ AIDS ↓↓↑ CD4+/CD8+ CD3+ （总T） CD4+（辅助T） CD8+（抑制T）
淋巴细胞亚群定稿版
淋巴细胞亚群精编 W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】
机体免疫状态是衡量机体是否患病的重要指标，目前多采用流式细胞术来监测机体的免疫状态，其中最重要的指标是检测T、B和N K淋巴细胞的水平。 T细胞主要包括T辅助细胞（Th）和T抑制细胞（Ts）细胞亚群。CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞，理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和，但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+，这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞（真正Th细胞）和CD3-CD4+细胞（非Ts细胞），而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞（一部分NK细胞）和CD3-CD8+CD16+56-（未知细胞）。由此可见，真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞，真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。尤其当患者NK细胞明显增加时，会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞，因此，用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。 首先在淋巴细胞中识别出CD3细胞，然后在CD3细胞中再区分CD4+和CD8+细胞。NK细胞的表面无T细胞和B细胞表面标志，但有CD16和CD56等标志，用CD16+56抗体能鉴定出NK细胞（一定是CD3阴性），CD3-CD16+56+细胞才是真正的NK细胞。根据是否表达CD8，又可将NK细胞分为CD3-CD8+CD16+56+细胞（所占比例小，不影响CD8比例）和 CD3-CD8-CD16+56+细胞（主要成分）。 B细胞的表面标志是CD19，理论上CD3-CD19+细胞才是真正的B淋巴细胞。但CD3+CD19+细胞很少，可忽略不计，所以CD19+细胞就是B淋巴细胞。 在抗肿瘤效应中，CD4和CD8分别是T淋巴细胞的辅助／诱导细胞亚群与抑制/细胞毒细胞亚群，CD4细胞的主要功能是通过其分泌的淋巴因子，增强和扩大免疫应答过程，辅助诱导其它免疫细胞如杀伤性T细胞，B细胞等共同发挥抗肿瘤作用，CD4细胞的减少，导致免疫功能低下。CD4/CD8比值是重要的免疫状态监测指标，其比例的降低与免疫系统损害的程度相关。 CD4降低见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者；CD8降低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病；CD4/CD8比值升高见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、病毒感染等；CD4/CD8比值降低见于艾滋病(常小于0.5)。监测器官移植排斥反应时，CD4/CD8比值升高预示可能发生排斥反应。 淋巴细胞担负着免疫的主要功能。淋巴细胞亚群的测定有助于了解机体免疫状况及一些疾病的监测。利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，再配合多色荧光染料，通过
淋巴细胞亚群检测
淋巴细胞亚群检测 检测对象 原则：免疫功能受损者均应常规评估淋巴细胞亚群 免疫功能包括： 免疫防御功能 免疫自稳和耐受功能 免疫监视功能 免疫防御功能受损 易发生感染 反复感染 严重感染 多种病原与特殊病原感染 常规治疗效果不佳的感染 除了宿主免疫防御受损容易造成上述少见感染状况之外，感染本身也可造成继发性免疫防御受损，因此免疫评估应注意原发和继发两方面的问题。 免疫自稳和耐受功能受损 过敏性疾病：并非所有这类患者都需要进行淋巴细胞亚群的检测。对于一些严重的过敏患者应考虑淋巴细胞亚群的检测。
①婴幼儿时期全身严重湿疹样表现。 ②嗜酸性粒细胞显著增多 ③血清IgE水平明显增高（IgE>1000IU/L） ④伴有反复、严重感染的患者 自身免疫和自身炎症性疾病 ①存在难以控制的自身免疫反应情况及出现明显的自身免疫性淋巴增殖情况 ②合并反复感染的患者 ③存在自身炎症反应 ④长期免疫抑制药物、生物制剂使用前后 免疫监视功能受损 主要引起肿瘤 血液系统肿瘤：儿童时期最为多见的是血液系统肿瘤 其他肿瘤及实体瘤：其他系统肿瘤患者也应酌情进行淋巴细胞亚群的检测，既可能存在原发性淋巴细胞亚群的异常，也可能出现继发性改变，尤其是进行各种化疗时，淋巴细胞亚群大多会受到影响 其他特殊情况 血常规中淋巴细胞明显异常 家族成员中有免疫缺陷病史
长期使用免疫抑制剂者 淋巴细胞亚群分析结果判读，应对淋巴细胞亚群的相对计数和绝对计数分别进行判别。 结果分析 (一)基本数据判断 1．相对计数的3个基本公式： FCM检测淋巴细胞亚群结果应首先根据下述3个公式进行评估[15]。公式1: CD3＋%＋CD19＋%＋CD16＋/CD56＋%＝100%±5% 公式2：CD4＋%＋CD8＋%＝CD3＋%±5% 公式3：CD4＋/CD8＋比值>1.0(1.5～2.0，新生儿期可达4.0) 2．相对计数基本公式意义： (1) CD3＋%＋CD19＋%＋CD16＋/CD56＋%明显大于或小于100%±5%，提示检测系统异常或存在明显淋巴细胞亚群异常。(2) CD4＋%＋CD8＋%之和明显大于或小于CD3＋%±5%，提示存在双阳性(CD4＋CD8＋)或双阴性(CD4-CD8-)T淋巴细胞。(3)一般情况CD4＋/CD8＋比值>1，年龄越小CD4＋/CD8＋比值越大。CD4＋/CD8＋比值<1，提示T淋巴细胞亚群存在异常。 3.绝对计数的判断： 绝对数标准不同仪器和年龄段及人群存在差别。个体间变化也比较大。各个实验室所采用的标准有所不同。应根据实验室的参考范围进
淋巴细胞亚群分析与临床---陈建林
、流式淋巴细胞亚群检测的临床意义 1. 了解不同情况下机体免疫功能状态 肿瘤(手术、放化疗患者的免疫功能检测) 感染(脓毒血症、重症监护患者等) 自身免疫病、免疫缺陷病等 不孕不育 某些血液系统疾病 其他：慢性肾病、骨髓移植恢复期等 2. 辅助临床疾病的诊断 3. 探索疾病的发病机理、病程及预后 4. 观察监测疗效，指导临床建立治疗方案 二、淋巴细胞的分类及功能 B细胞(CD19+): 体液免疫 辅助/诱导T细胞(Th):介导和增强免疫应答 (CD4+) 细胞毒性(Tc) /抑制性T细胞(Ts):抗病毒、抗肿瘤淋巴细胞T 细胞(CD3+) (CD8+) 1-调节性T细胞(Treg):抑制免疫应答、维持免疫耐受 L (CD4+CD25+) NK细胞：抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节 (CD16+/CD56+) 三、流式淋巴细胞亚群检测的临床应用 淋巴细胞亚群检测与儿科疾病 (一)评估机体免疫功能状态 多种小儿疾病原发或继发疾病均存在T细胞异常，观察T细胞变化，对小儿疾病病因、 发病机制以及协助临床诊断与治疗等具有重要价值。 类型指标CD3 +CD4 +CD8+CD4+/CD 8+细菌性肺炎 支原体肺炎 病毒性肺炎 传单增多症 支气管哮喘
细胞变化，特别针对儿科患者可合理调节抗生素使用，改善预后，避免药物损伤 （二）原发性免疫缺陷病的早期识别和干预 1. 流式细胞仪分析 T 细胞亚群（包括CD3+、CD4+和CD8+）、B 细胞（CD19+） 和NK 细 胞（CD16+/CD56+） 比例等主要检查项目，可对大多数原发性免疫缺陷病患儿作出诊断。 淋巴细胞亚群检测在肿瘤临床的应用 恶性肿瘤的发生、发展、转移与人体免疫功能下降密切相关。人体的抗肿瘤免疫以细胞 免疫为主，体内发挥抗肿瘤免疫作用主要由 CD4和CD8细胞完成。 3 ?肿瘤患者T 淋巴细胞持续低下，转移率高、易复发 T 细胞 CD4、CD8、CD3检测介入时间 结合退热、消咳、肺罗音消失时间观察 （一）评价肿瘤患者的整体免疫功能 1 ?肿瘤患者处免疫抑制状态， T 淋巴细胞降低。 2 ?肿瘤患者T 淋巴细胞与病程相关，随病程逐渐降低。 CD3、CD4、CD4/CD8细胞数下降程度: "期 ＞ 川期＞ □期＞ I 期 2.评估免疫接种前机体免疫状态 T 细胞CD4、CD8、CD3检测介入时间-----结合患儿科反复感染的临床症状及时检测; 在疫苗接种 前2-3天作出评估。 琳已细胞亚群分析 潘呂细殖 1"如应(Th) CDJ + CD2&+CD12 7I E >W / CfM/coa--. o.&ai 霸ft 和癇 CDA/COR A ， 过沽袄 GD5*CCX1 + 幻4虺_4亠电**M 也(T s ) CO1 + CQS+
Cell Quest Pro双色淋巴细胞亚群分析样本制备
Cell Quest Pro双色淋巴细胞亚群分析样本制备 【实验目的】：使用双色组合标记抗体对人外周血中淋巴细胞亚群进行检测，了解人的免疫状态。从而指导临床诊断和治疗。 【实验原理】：利用荧光技术，在不同的鼠抗人的抗体上标上荧光素，此荧光抗体就同人淋巴细胞表面的CD分子特异性的结合；然后用流式细 胞仪检测，结合分析软件的自动分析,便可以得出各亚群细胞的百 分比。 【主要试剂】：1、流式细胞仪（FACSCalibur）、台式离心机、涡旋震荡器，微量移液器（1000μl、200μl、20μl，流式细胞专用试管、鞘液；PBS （加0.1%叠氮钠） 2、双色检测试剂： ①Isotype Control(MouseIgG1/IgG2a) ②CD3-FITC /CD19-PE ③CD3-FITC /CD4-PE ④CD3 FITC /CD8-PE ⑤CD3-FITC /CD16+CD56-PE 3、FACS Lysing Solution红细胞裂解液。（10×,使用前用蒸馏水 稀释成1×）。 4、1%的多聚甲醛配制方法： 称1.0克多聚甲醛加少量PBS放入56℃水浴箱中使之溶解，用1N NaOH溶液和1N的HCl调整PH值在6.9~7.0，然后加入100ml 容量瓶中定容；最后用0.45um的滤膜过滤。 【实验步骤】：1、取5支流式试管，编号为1、2、3、4、5，分别取100μl抗凝全血加入每支试管中，不要碰到管壁。 2、轻轻混匀，依次加入20μl双标Isotype Control (Mouse IgG1/ IgG2a)、CD3/CD19、CD3/CD4、CD3/CD8、CD3/CD16+CD56 荧光抗体。室温避光保存20分钟。 3、取出试管，每管加入10倍稀释了的1×FACS Lysing Solution 2ml，涡旋混匀，避光〈10分钟。待管内液体透亮。然后300g 离心5min，弃去上清液。 4、每管加入2ml的PBS ，涡旋混匀，300g离心5min，弃去上清
免疫功能(淋巴细胞亚群)检测的临床意义
免疫功能（淋巴细胞亚群）检测的临床意义 外周血淋巴细胞根据生物学功能和细胞表面抗原表达 分为3个群：T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+）和NK淋巴细胞【自然杀伤细胞（natural killer)，CD3-CD16+和/或CD56+】。T细胞又分为辅助T细胞（CD3+CD4+）和抑制T细胞（CD3+CD8+)。淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它总体反应机体当前的免疫免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病，如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等，分析发病机制，观察疗效及检测预后有重要意义。T淋巴细胞百分率或计数绝对值可用于区别和监测某些免疫缺陷病和自身免疫性疾病。辅助T淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制患者。抑制T淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。抑制T细胞百分率在一些免疫性疾病表现出超出正常参考范围，在许多先天性或获得性免疫缺陷病人中升高（如重症综合性免疫缺陷SCID,AIDS）。 CD4+/CD8+>2.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自身免疫反应，见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。CD4+/CD8+ 在肿瘤病人外周血中T淋巴细胞亚
群数值都有异常，其特征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少，而CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+比值显著降低，说明肿瘤患者的细胞免疫功能处于免疫抑制状态，患者对识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长转移。骨髓造血细胞的增殖和分化障碍也与T细胞亚群异常有关。如在再生障碍性贫血与粒细胞减少症中，患者的外周血CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，CD4+/CD8+比值明显下降。NK细胞介导某些肿瘤和病毒感染细胞的细胞毒性反应。B淋巴细胞为体液免疫的重要指标。
T淋巴细胞亚群报告的阅读与分析
T淋巴细胞亚群报告的阅读与分析 彭晓 在细菌感染性疾病，我们已经习惯了用白总分检查来了解感染的状态和做出相应的处理。作为细胞免疫重要内容的T淋巴细胞及亚群的检测在一些疾病中也有相应的结果，根据这些结果可以解释发病机理、对患者的免疫功能和预后做出判断以及指导治疗。这些疾病主要包括：1.病毒感染性疾病；2.肿瘤性疾病； 3.自体免疫性疾病； 4.器官移植患者； 5.其他免疫缺损或异常的患者。在各大型医院，T细胞亚群已经成为以上疾病中常规使用的项目。 在白细胞中淋巴细胞是非常重要的一类。它分为主要参与细胞免疫的T淋巴细胞（CD3+）和主要参与体液免疫的B淋巴细胞（CD19+）。而T淋巴细胞又分为辅助性T淋巴细胞（CD3+CD4+）和抑制性/细胞毒性T淋巴细胞（CD3+CD8+）。在正常情况下，各群淋巴细胞的数目和相对比例都在一定的范围内。 淋巴细胞和主要的亚群 T h1 辅助T(分泌I F N等) (C D3+C D4+) T淋巴细胞T h2 (C D3+)(分泌I L-4等) C D28(+) 淋巴细胞抑制T\细胞毒T杀伤性细胞毒（肝炎） (C D3+C D8+) C D28（-） B淋巴细胞抑制性（肿瘤） (C D19+) （方框内为T细胞亚群报告中所包括的内容） T淋巴细胞亚群报告中包括实验室报告和医生报告。前者主要是供实验室人员进行条件和质量控制所用，后者是供医生阅读,较为方便清晰。 在T淋巴细胞亚群的医生报告中提供了以下内容： 1. 总T（CD3+）淋巴细胞的绝对计数： 就如白总分中的白细胞计数一样，该细胞的绝对计数(个/ul)一般也在一定范围内。在一些情况下，如病毒感染、化学和物理因素、免疫系统的衰竭或其它功能紊乱、造血系统异常等疾病时此值可能会有异常。曾有人报道淋巴瘤患者的淋巴细胞数目多时预后较好。由此可以推测，肿瘤患者的T淋巴细胞数目较高时（在正常范围内）预后也应该较好。 2. 辅助T（CD3（+）CD4（+））细胞的绝对计数和百分比。 3. 抑制T（CD3（+）CD8（+））细胞的绝对计数和百分比。 如上图所示，无论是CD3（+）CD4（+）还是CD3（+）CD8（+）细胞，都可以进一步划分为更进一步的亚群。 4. CD3(+)细胞中的CD4、CD8双阳性或双阴性细胞：