疟原虫、检查
血液疟原虫检查
[试验名称] 血液疟原虫检查
[试验方法] 薄血片法或厚血片法
[操作]
1.薄血片法：以常法薄推血片，血膜完全干燥后即可染色。染色法同白细胞分
类检查
2.厚血片法：在洁净玻片上，滴患者血液2滴，用推片角将血液由内向外转涂
成直径约1cm，厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟，脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。不必待干，进行染色，干后镜检。
[结果报告]
查见或未查见疟原虫
[注意事项]
1.采血时间：间日疟级三日疟患者应在发作后数小时至10余小时才学，此时，
早期滋养体已发育至易于鉴别的形态晚期；恶性疟患者，应在发作20小时左右采血。
2.厚血片的溶血要及时，厚血片的放置期限在夏季不超过48h，冬季不超过72h，
否则溶血不完全，会影响检验质量。
3.染色后，水洗时不要先倒去染液，应让清水流进染液，使沉渣飘浮冲走。
4.玻片油镜检查，须找100或100个以上视野才能报告“未检出疟原虫”。厚
血片至少20个视野以上。
5.疟原虫须分类报告，找到环状体后，须在仔细寻找更为成熟的阶段，以便分
类。如确实未找到更为成熟的疟原虫，可报告为“检出环状体疟原虫”
6.有可能出现2种或3种疟原虫混合感染时，以间日疟与恶性疟混合感染最常
见，须注意鉴别。
7.注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。特别是厚血片检查时，缺乏经验者必
须在薄血片上仔细寻找证实，才能报告。
8.除上述3种疟原虫外，在我国云南曾发现过少数卵形疟原虫引起的病例。卵
形疟原虫的基本形态与三日疟原虫相似，但虫体稍大，受感染的红细胞略胀
大，滋养体后期与裂殖体前期的原虫呈圆形或卵圆形。
sop微生物检查操作规程
sop微生物检查操作规程 1目的 建立微生物限度检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2 范畴 适用于本厂质监科化验室对本厂生产的固体制剂及物料进行微生物限度的检查。 3 责任 化验员有责任按照本操作规程进行检验、判定,并对检验结果负责。 4 定义 微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及操纵菌的检查。 5 内容 5.1 总则： 5.1.1供试品应随机抽样。一样抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的 3倍量。 5.1.2 供试品在检查前不得开启，检查全过程均应严格遵守无菌操作规程，严防 再污染。 5.1.3 操纵菌的污染检查应做相应的已知菌对比试验，对比菌株为大肠杆菌 [CMCC（B）44102]，每批试验已知菌加入量为50-100个。 5.1.4 染菌量的检查或操纵菌的检查均应做空白对比试验。 5.1.5 供试品稀释成稀释液后应在平均状态下取样，凡有抑菌成份或防腐剂的供 试品应做专门处理后进行检验。 5.1.6 供试品稀释后应在1小时内操作完毕。
第2页/共6页 5.1.7 除另有规定外，细菌培养温度为30-35℃，霉菌、酵母菌培养温度为 25-28℃，操纵菌培养温度为36℃±1℃。 5.1.8细菌、霉菌检验结果的报告以1g、1ml或10cm2为单位；操纵菌检验报告 以每1g、每1ml或每10cm2为单位报告“检出”或“未检出”。 5.2仪器、用具 恒温培养箱、隔水式生化培养箱、电子天平，移液管(1ml、10ml)、试管、离心管、双碟、镊子、剪刀、不锈钢吸管筒、酒精灯、取样勺、称量纸、研钵一个、不锈钢双碟筒。 5.2.1用具的包扎 移液管：用纱布包住移液管，然后放入不锈钢灭菌筒内。 试管、双碟：试管在管口塞上纱布棉塞、双碟放入不锈钢双碟筒内。 无菌衣、裤、帽、口罩：用布口袋将洗净的衣裤、帽子、口罩配套后装入，扎紧袋口，再用牛皮纸包好。 5.2.2用具的灭菌 将包扎好的用具，在121±0.5 ℃蒸汽灭菌柜中灭菌30 分钟，物品取出时切勿赶忙置冷处，以免急速冷却灭菌物品内蒸汽凝造成负压，易致染菌，应置烘箱烘干。 5.3培养基、试剂 5.3.1营养琼脂培养基 称取本品36克，加1升蒸馏水，加热溶解后，按需要进行分装，经121℃15分钟灭菌备用。 5.3.2虎红培养基 称本品30克，加1升蒸馏水，加热溶解，分装，高压灭菌116℃20分钟。 5.3.3胆盐乳糖培养菌（BL） 称本品36克，加1升蒸馏水，加热溶解，分装，高压灭菌116℃20分钟。 5.3.4曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB） 称本品42克，加1升蒸馏水，加热溶解，分装，高压灭菌116℃20分钟。 5.3.5生理盐水 称取9 g 氯化钠，加水1000 ml 溶解，分装后于121℃±0.5℃湿热灭菌30分钟，供作稀释剂用。 5.3.6 75%酒精棉 量取无水乙醇75ml，加水稀释至100ml，摇匀，将脱脂棉与75%酒精混合即得。
疟原虫
疟原虫种类繁多，寄生于人类的疟原虫有4种，即间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫，1890]和卵形疟原虫[Plasmodium ovale Stephens，1922]，分别引起间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。在我国主要有间日疟原虫和恶性疟原虫，三日疟原虫少见，卵形疟原虫罕见。 形态 疟原虫的基本结构包括核、胞质和胞膜，环状体以后各期尚有消化分解血红蛋白后的最终产物—疟色素。血片经姬氏或瑞氏染液染色后，核呈紫红色，胞质为天蓝至深蓝色，疟色素呈棕黄色、棕褐色或黑褐色。四种人体疟原虫的基本结构相同，但发育各期的形态又各有不同，可资鉴别。除了疟原虫本身的形态特征不同之外，被寄生的红细胞在形态上也可发生变化。被寄生红细胞的形态有无变化以及变化的特点，对鉴别疟原虫种类很有帮助。 1．疟原虫在红细胞内发育各期的形态 疟原虫在红细胞内生长、发育、繁殖，形态变化很大。一般分为三个主要发育期。 (1)滋养体(trophozoite)：为疟原虫在红细胞内摄食和生长、发育的阶段。按发育先后，滋养体有早、晚期之分。早期滋养体胞核小，胞质少，中间有空泡，虫体多呈环状，故又称之为环状体(ring form)。以后虫体长大，胞核亦增大，胞质增多，有时伸出伪足，胞质中开始出现疟色素(malarial pigment)。间日疟原虫和卵形疟原虫寄生的红细胞可以变大、变形，颜色变浅，常有明显的红色薛氏点(Schuffner’s dots)；被恶性疟原虫寄生的红细胞有粗大的紫褐色茂氏点(Maurer’s dots)；被三日疟原虫寄生的红细胞可有齐氏点(Ziemann’s dots)。此时称为晚期滋养体，亦称大滋养体。 (2)裂殖体(schizont)：晚期滋养体发育成熟，核开始分裂后即称为裂殖体。核经反复分裂，最后胞质随之分裂，每一个核都被部分胞质包裹，成为裂殖子(merozoite)，早期的裂殖体称为未成熟裂殖体，晚期含有一定数量的裂殖子且疟色素已经集中成团的裂殖体称为成熟裂殖体。 (3)配子体(gametocyte)：疟原虫经过数次裂体增殖后，部分裂殖子侵入红细胞中发育长大，核增大而不再分裂，胞质增多而无伪足，最后发育成为圆形、卵圆形或新月形的个体，称为配子体；配子体有雌、雄(或大小)之分：雌(大)配子体虫体较大，胞质致密，疟色素多而粗大，核致密而偏于虫体一侧或居中；雄(小)配子体虫体较小，胞质稀薄，疟色素少而细小，核质疏松、 寄生于人体的4种疟原虫生活史基本相同，需要人和按蚊二个宿主。在人体内先后寄生于肝细胞和红细胞内，进行裂体增殖(schizogony)。在红细胞内，除进行裂体增殖外，部分裂殖子形成配子体，开始有性生殖的初期发育。在蚊体内，完成配子生殖(gametogony)，继而进行孢子增 疟原虫的主要致病阶段是红细胞内期的裂体增殖期。致病力强弱与侵入的虫种、数量和人体免疫状态有关。 1．潜伏期(incubation period) 指疟原虫侵入人体到出现临床症状的间隔时间，包括红细胞外期原虫发育的时间和红细胞内期原虫经几代裂体增殖达到一定数量所需的时间。潜伏期的长短与进入人体的原虫种株、子孢子
GMP-无菌检查操作规程
1.目的： 建立无菌检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2.范围： 适用于本厂质监科化验室对本厂生产的注射剂进行无菌检查。 3.责任： 化验员有责任按本操作规程操作，并对检验结果负责。 4.定义： 无菌检查法系指检查药品是否无菌的一种方法。 5.内容： 5.1无菌操作设备： 无菌操作室或超净工作台，无菌衣、口罩、帽子、消毒鞋、酒精灯等。5.1.1无菌室分无菌操作室和缓冲间。在缓冲间内应有洗手盆、干手器、无菌衣放置架及挂钩、拖鞋等。无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局 部洁净度100级超净工作台。缓冲间及操作室内均设置能达到空气消毒的紫外光灯和照明灯，操作室或工作台应保持空气正压。 5.1.2无菌室应每周和每次操作前用0.1％新洁尔灭或2％甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，开动无菌空气过滤器及紫外光灯杀菌1小时。在每次操作完毕，同样用2％甲酚或0.1％新洁尔灭溶液擦拭工作台面，用紫外光灯杀菌半小时。 5.1.3无菌室的无菌程度检查：无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数。取直径90mm双碟，在接种室内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将双碟半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml，制成平板：
在35-37℃预培养48小时，证明无菌后将3个平板以无菌方式带入无菌操作间的洁净区域左、中、右各放1个；打开碟盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将盖盖好，置35-37℃培养48小时，取出检查，3个平板上生长的菌落数相加总数不得超过10个。 无菌操作台面或超净工作台应定期请有关部门检测其洁净度，应达到100 级（一般用尘埃粒子计数仪），检测尘埃粒径≤5μm的粒数不得超过3.5个／升；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s；细菌菌落数平均<1个，可根据无菌状况定期置换过滤器。 5.1.4无菌室内应准备好盛有消毒用5％甲酚的玻璃缸、酒精灯、火柴、镊子、75％酒精棉及拖鞋等。 5.2仪器、用具： 5.2.1真空泵、恒温培养箱、生物显微镜、托盘天平（精度0.1g）、抽滤瓶（500ml）、三角瓶（100、500 ml）、移液管（1、10ml）、注射器（要求规格）、试管、双碟（9cm）、注射针、镊子、剪刀、白金耳、橡皮管、纱布、棉花（原棉）、不锈钢吸管筒、接种环、微孔滤膜（直径约5cm），孔径应在0.45±0.02μm )载玻片、洒精灯、取样勺、吸耳球、喷雾瓶。 5.2.2用具的包扎： 5.2.2.1移液管 在移液管上端管内,松松地塞进少许原棉,然后放入不锈钢灭菌筒内。 5.2.2.2试管 在管口塞上纱布棉塞。 5.2.2.3无菌衣、裤、帽、口罩
血疟原虫检检查标准操作规程
血疟原虫(MP)厚血片检查法（手工法）标准操作规程1. 实验原理 应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。 2. 标本采集 2.1标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。 2.2标本种类：全血或末梢血 2.3标本要求：厚血片的溶血要及时。 3. 标本储存：厚血片的放置期限在夏季不超过48h，冬季不超过62h。 4. 标本运输：室温运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染。 6. 操作步骤 6.1 在洁净玻片上，滴患者血液2滴。 6.2 用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。 6.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟。脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。 6.4 不必待干，进行瑞氏染色。 6.5 干后镜检。 7. 结果判断与分析：在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。 8. 临床意义：本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。 9. 操作性能：快速简便、阳性检出率高、利于人群普查初筛 10. 方法局限性 10.1 易受溶血不完全的影响。 10.2 经验缺乏者易受其他杂物的影响。 10.3 存在主观判断的失误 10.4 不易鉴别出疟原虫的种类。 11. 参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,85-86 12. 注意事项 12.1 染色后，水洗时不要先倒去染液，应让清水流进染液，使沉渣冲走。 12.2 注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。
医学昆虫对人类的危害
医学昆虫对人类的危害 医学昆虫是指骚扰人类安宁，吮吸疾病与病原体的昆虫，包括：蚊、蝇、蠓、蚋、蛉、蚤、臭虫、蜚蠊、蜘蛛、恙螨、革螨、蝗、蜈蚣、马陆等。它们可以通过吸血、刺螫、机械携带并传播各种病原体，有些直接寄生致病，有的引起过敏性疾病，有些还可以长期在体内保存病原体，甚至将病原体经卵传递至后代，不仅具有媒介的作用，而且具有宿主的作用。 我国地处亚热带、温带区域，地域辽阔，幅员广大，各地环境、气候和自然条件差异很大，医学昆虫的种类繁多。据调查，我国已知蚊类有370多种，蝇类386种，室内蜚镰9种，蚤类520多种，白岭类40种，嵘类280多种，纳类约100多种，蟀类110种，蜗类534种。苍蝇、蚊子、蜚蠊等医学昆虫早已成为与人类建筑物、城市化联系密切的世界性伴生种，这些媒介生物对我们人类的身体健康造成严重的威胁。下面就几种常见的医学昆虫对人类的危害做以简单的介绍。 一蚊虫 蚊虫是所有医学昆虫中最重要的害虫。蚊虫的分布很广，全世界从高山到矿井内都有，约2400种以上，我国已发现约350种。最常见的有按蚊属：中华按蚊、微小按蚊、大劣按蚊等；库蚊属：淡色库蚊、致倦库蚊、三带咏库蚊；伊蚊属：埃及伊蚊、白纹伊蚊、刺扰伊蚊等。它们不仅叮人吸血，影响人们的睡眠和休息，更重要的是蚊虫传播疟疾、丝虫、乙脑、登革热、黄热病等传染病，严重地危害人们的健康，影响军事行动。 （1）疟疾：疟疾的自然传播媒介是按蚊。按蚊的种类很多，可传播疾疟的有60余种，传染性据其吸血习性、数量、寿命及对疟原虫的感受性决定。我国公认中华按蚊、巴拉巴蚊、麦赛按蚊、雷氏按蚊、微小按蚊、日月潭按蚊及萨氏按蚊等七种为主要传疟媒介按蚊。当受染的雌性按蚊吮吸人血时，疟原虫子孢子随蚊唾液进入人体血循环，约半小时全部侵入肝细胞，速发型子孢子即进行裂体增殖，迟发型子孢子则进入休眠状态，在肝细胞内裂体增殖的疟原虫，经过5～40天发育成熟，胀破肝细胞逸出成千上万的裂殖子进入血流，进入血流的裂殖子部分侵入红细胞并在其内发育增殖，人即被感染。 感染后人会出现剧烈头痛，发冷发热，恶心呕吐；意识障碍，烦燥不安，进而嗜
SOP-11-CP-001-00 甘草酸二铵注射液检验标准操作规程
黑龙江宝庆隆生物技术有限责任公司 1 目的 建立甘草酸二铵注射液检验标准操作规程。 2 范围 适用于甘草酸二铵注射液的检验。 3 责任者 中心化验室、质量管理部 4 职责 4.1中心化验室QC组长负责本标准操作规程的起草。 4.2中心化验室主任负责本标准操作规程的审核。 4.3 质量管理部部长负责本标准操作规程的审核。 4.4 质量受权人负责本标准操作规程的批准。 5 依据 《甘草酸二铵注射液质量标准》 6 内容 6.1 性状 本品为无色的澄明液体。 6.2 鉴别
6.2.1 6.2.1.1 检验仪器：电子天平、烘箱、电热恒温水浴锅 6.2.1.2 试剂及试液：盐酸、乙醇、10%2,6-二叔丁基对甲苯酚乙醇溶液、20%氢氧化钠溶液、稀盐酸 6.2.1.3 试液配制：照《试剂配制标准操作规程》配制。 6.2.1.4 检验方法：取本品60ml，加盐酸6ml，煮沸10分钟，放冷，滤过，取沉淀及滤液备用。沉淀用水洗涤至中性，105℃干燥1小时，加乙醇10ml，使溶解，取乙醇溶液1ml，加10%的2，6-二叔丁对甲苯酚乙醇溶液0.5ml和20%氢氧化钠溶液1ml，置水浴加热30分钟，液面出现紫红色悬浮物。 6.2.2 鉴别（2） 6.2.2.1 检验仪器：紫外-可见分光光度计 6.2.2.2 检验方法：取含量测定项下溶液，照《紫外-可见分光光度法标准操作规程》，在200nm～400nm范围内测定紫外吸收图谱，本品在252nm波长处有最大吸收。 6.3 检查 6.3.1 pH值 6.3.1.1 检验仪器：酸度计 6.3.1.2 检验方法：取本品，照《pH值测定法标准操作规程》测定。 6.3.1.3 限度：pH值应为6.3~ 7.8。 6.3.2 有关物质 6.3.2.1 检验仪器：高效液相色谱仪 6.3.2.2 试剂及试液：色谱乙腈、0.01mol/L磷酸溶液、流动相 6.3.2.3 试液配制 0.01mol/L磷酸溶液：取磷酸0.64ml，加水溶解稀释至1000ml，即得。 流动相：取乙腈430ml与0.01mol/L磷酸溶液570ml混合均匀，即得。 6.3.2.4 系统适用性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.01mol/L磷酸溶液（43：57）为流动相，波长252nm；理论板数按甘草酸二铵峰计算应不低于2000。 6.3.2.5 检验方法 照《高效液相色谱法标准操作过程》测定。 系统适用性：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.01mol/L磷酸溶液=43:57为
疟原虫检测试剂盒作业指导书
疟原虫检测试剂盒作业指导书 1.目的 指导实验室检验人员正确操作疟原虫检测试剂盒胶体金法 快速检测，保证人员及设备安全。 2.范围 适用于实验室检验人员 3.职责 样品检验员负责正确使用疟原虫检测试剂盒胶体金法快速检测，并做好原始记录； 技术负责人负责解决操作中出现的技术问题。 4.作业指导 4.1试剂储存条件4℃-30℃保存。 4.2使用方法 4.2.1.在紫色加样区滴加 15μ l 血样。 4.2.2.立即在加样垫下方的白色垫片上滴加 2 滴试剂 A。 4.2.3.在书形检测卡左边一侧最上方的白色垫片上滴 4 滴试A。 4.2.4 15 分钟内读取结果，30分钟显示的结果无临床意义。
4.3. 结果判断 2 阳性 间日疟（P.v.）阳性，或卵形疟（P.o.） T1 阳性阳性，或三日疟（P.m.）阳性，在一些病 恶性疟阳性，恶性疟（P.f.）感染。例中，仅 T2 线出现表明可能是（P.v.） （P.o.）、（P.m.）的 2 种或 3 种混合 感 染。 T1+T2 阳性 恶性疟（P.f.）阳性，恶性疟（P.f.）感染。 阴性 在一些病例中，T1 和 T2 线均出现，可能表明是 检测结果阴性，未检测到疟疾抗原。（P.f.）与其它 3 种（P.v.）、（P.o.）、（P.m.） 的不同组合感染。 无效结果或无法解释的结果 如果控制线没有出现，无论出现几条检测线， 检测结果均无效。 4.4注意事项 4.4.1质控区与检测区域均不出现红色反应线，表明发生错误的检验应重试。 4.4.2当疟原虫密度很高时检测线很明显，质控线可能变得很弱，为正常结果。 4.4.3不要混合使用来自不同批次的试条/试卡和裂解液。 4.4.4操作时应注意做好生物安全防护，用过的试条/试卡、裂解液等在废弃之后，进行高压灭菌。
无菌检查法标准操作规程
无菌检查法标准操作规程 目的： 建立无菌检查的基本操作，为无菌检查人员提供正确的操作规程。 2.依据： 《中华人民共和国药典》2000年版二部。 3.范围： 本标准适用于QC无菌检查的操作。 4. 职责： QC无菌检查人员对本标准的实施负责。 5.程序： 5.1. 定义： 无菌检查法：系指检查药品、无菌器具及适用于药典要求无菌检查的其它品种是否无菌的一种方法。 5.2. 无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局部洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温控（18~26）℃及除湿装置，操作室或工作台应保持空气正压。 5.2.1. 无菌室的清洁与消毒应符合QC洁净室清洁、消毒规程（SOP ZL0014）。 5.2.1.无菌室无菌程度的检查应符合规定：见沉降菌监测规程（SOP ZL0006）、悬浮粒 子监测规程（SOP ZL0005）。 实验设备及用具： 5.3.1.电热干燥箱、电热手提式压力蒸汽灭菌器、电热恒温培养箱、试管、注射器、针头、试管架、刻度吸管、手术剪、手术镊、砂轮、注射器盒、搪瓷托盘、双碟、75%酒精棉球、无菌工作服（衣、裤、帽、口罩等）。 5.3.2.微孔滤膜：直径50mm、孔径0.45μm，应符合规定。 5.3.3.除菌滤器： 除菌滤器采用的是HTY-2000型全封闭式薄膜过滤器。 5.3.4. 所有进入无菌室的物品必须经过消毒或灭菌，应严格按照进入QC无菌室物品清洁、消毒、灭菌规程（SOP ZL0015）进行操作。
5.4. 稀释剂：灭菌注射用水。 5.5. 培养基： 5.5.1.需气菌、厌气菌培养基（流体硫乙醇酸盐培养基）；真菌培养基。 5.5.2. 培养基的使用，配制、管理及灵敏度检查应按照培养基管理规程（SMP ZL0036）、培养基灵敏度检查规程（SOP ZL0019）、培养基配制规程（SOP ZL0016）进行操作。 5.6. 对照用菌液： 5.6.1. 金黄色葡萄球菌（Staphyoccus sureus）菌液：取金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]的营养琼脂斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，在30~35℃培养16~18小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10~100个菌。 5.6.2. 生孢梭菌（Clostridum sporgenes）菌液：取生孢梭菌[CMCC（B）64 941]的需气菌、厌气菌培养基新鲜培养物1白金耳，接种至相同培养基内，在30~35℃培养18~24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至1ml中含10~100个菌。 5.6.3. 白色念珠菌（Candida albicans）菌液：取白色念珠菌[CMCC（F）98 001]的 真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳，接种至真菌培养基内，在20~25℃培养24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10~100个菌。 5.7. 操作法： 5.7.1. 供试品、培养基在移入缓冲间之前应先编号，并用75%酒精棉球擦拭瓶（管）外壁，然后连同其它用具（包括无菌衣、帽、口罩等）移入缓冲间，打开无菌间紫外光 灯和空气过滤装置开关，并使其工作在30分钟以上。 5.7.2. 将所需物品移入无菌室，每次试验中所用物品，必须计划好，并有备用物。操作人员进入无菌室应严格遵守QC洁净室进出规程（SOP ZL0013）。 5.7.3. 供试品外部消毒： 5.7.3.1. 橡皮塞、铝盖、压封小瓶：先用75%酒精棉球擦拭外壁及瓶塞，待干，用消毒镊子剔去铝盖上的铝质小圆片，用酒精棉球擦拭瓶盖及橡皮塞，并将酒精棉球盖于橡皮塞上待取样。 5.7.3.2. 安瓶：先用酒精棉球将安瓶外部擦拭消毒待干，用砂轮轻轻割安瓶颈部，便于折开安瓶。 5.7.4. 供试品溶液的制备：取供试品加入该药品项下规定的稀释剂用量，制成该药品项下规定浓度的供试品溶液。 5.7.5. 根据供试品的抑真菌和抑细菌试验，判定该供试品有无抑菌性，而决定采用直接
检验项目标准操作规程(SOP)
检验项目标准操作规程（SOP -1 -检验标本的米集 一、标本的正确采集 标本米集必须符合 2个条件，即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情，避免干扰因素的存在。 二、标本的贮存 标本采集后尽快送至实验室，若不能及时送检，已采集的标本要按检验规定的贮存条 件，如室温、冰浴、温浴或防腐贮存，将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中， 避免振摇，以免标本遗洒或溶血影响检测结果。 三、标本的运送 必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结 果一致。 四、标本的签收 临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验 室人员接收临床标 本，均应按标准化要求进行，做到认真核对，包括标本来源、标本属
性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等，标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。 五、标本的处理 1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理，否则会影响检测结果的准确 性。 2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆，血清与血块簪时间接触可发生变化。 3、实验室接收标本后处理应注意事项： （1）、时间：实验室接收标本后应尽快予以分类和离心。①、促凝 标本应尽早处理，可在米血5-15分钟后离心；②抗凝标本可米血后立即离 心；③非抗凝（无促凝）标本采血30-60分钟后离心； ④抗凝全血标本（全血细胞分析、ESF等）不需要离心。 （2）、温度：一般标本为室温（最好是22-25 C）放置；冷藏标本（对温度依赖性分析物）应保持在2-8 C直到温度控制离心。 （3）、采血管放置：应管口（盖管塞）向上，保持垂直立位放置。 （4）、采血管必须封口：管塞移去后会使血PH改变，影响检测结果, 封口可以减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。 六、分析前的可变因素 1、生物因素：可引起所检测物质在体内的变化，此种变化与检测方法无 关，分为可变的和固定的生物因素。 2、干扰因素：在收集和分析标本过程中，干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符。 七、标本采集的基本原则
第二章原虫--疟原虫(DOC)
第五节疟原虫 一．概述 疟原虫是疟疾的病原体，疟疾是严重危害人体健康的一种寄生虫病，其流行遍及全世界，尤以亚非拉的热带亚热带地区尤为严重。目前已知的疟原虫种类有130多种，主要寄生于人和哺乳动物，少数可寄生于鸟类、爬行类。 但能寄生于人体的疟原虫仅有四种：间日疟原虫常见恶性疟原虫常见三日疟原少见虫卵形疟原虫几例 二．生活史 疟原虫的生活史需要二个宿主：人和蚊。 因而其发育过程可分成二个阶段：在人体内发育和在蚊体内发育。 在人体内发育又可分为红细胞外期和红细胞内期。 ㈠在人体内发育： 感染阶段是子孢子，子孢子是在蚊体内发育成熟并存在于蚊涎腺管中，当蚊叮咬时即可随涎液进入人体。 红外期： 子孢子进入人体后，约在血液中停留30分钟左右，然后陆续进入肝脏，并侵入肝细胞内发育，这过程即为红细胞外期。目前多数学者认为间日疟原虫的子孢子具有遗传学上不同的二个类型：速发型和迟发型。 速发型子孢子进入肝细胞后，虫体由长形变成圆形，核开始分裂而形成一个红外期裂殖体，约经8天裂殖体分裂成许许多多圆形或椭圆形的小体，即裂殖子。最后使肝细胞破裂，裂殖子逸出并进入肝血窦，其中有部分被吞噬细胞消灭，而另一部分可进入红细胞。在红细胞内开始红细胞内期发育。 相反，迟发型子孢子在进入肝细胞后却不马上发育，而是进入休眠状态，休眠时间长短视疟原虫种株不同而不同，然后才完成红外期裂体增殖。 这也是作为感染不同种株疟原虫潜伏期不同以及复发间隔时间不同的原因。 红内期： 红外期裂殖子进入红细胞后，在红细胞内发育经由环状体（早期滋养体）、
滋养体、裂殖体前期，发育到成熟裂殖体（内含12～24个裂殖子），最后胀破红细胞，裂殖子逸出，又侵入新的红细胞，又继续上面由环状体到裂殖体的发育过程。 每循环发育一次称为一次生殖周期（或发育周期）。不同种的疟原虫生殖周期的长短是基本固定的：间日疟原虫和恶性疟原虫约需48小时，即隔天； 三日疟原虫需72小时，隔2天。一般认为人类红内期疟原虫不可能再回到肝脏细胞内发育。 配子体形成： 在经几次裂体增殖后，部分裂殖子进入红细胞后则不再发育成环状体，而是沿着另一种形式——有性生殖世代发育成有性别区分的有性生殖前体，即雌雄配子母体。雌雄配子母体成熟后存留于血液中，在体内约可生存30～60天。在这期间如有机会被合适的蚊媒吸入，则可在蚊体内继续发育，否则将在血液中退化变性而终被吞噬细胞所消灭。 另外，四种判寄生的红细胞时期不同，间日疟原虫和卵形疟原虫主要寄生于幼稚红细胞即网织红细胞。三日疟原虫多寄生于较衰老的红细胞，而恶性疟原虫则不分老幼寄生于各期红细胞。 ㈡在蚊体内发育 血液中各期疟原虫随蚊叮咬进入蚊胃后，其他各期被消化，仅雌雄配子母体能存活并继续发育。雄配子体在几分钟内核即分裂成4～8块，发育成4～8个雄配子（也称小配子）。雌配子体的核进行染色体的减数分裂，发育成为不活动的圆形或椭圆形的雌配子（大配子）。雌雄配子即结合成合子，即所谓受精。合子在几小时内又形成香蕉状或腊肠状能活动的动合子。动合子可穿过蚊胃上皮细胞，在蚊胃弹性纤维膜下形成圆形的囊合子，或称卵囊。虫体核迅速分裂增殖，在卵囊内分化成为孢子细胞，最后发育为成熟的子孢子。 每个卵囊可含成千上万个子孢子，每个蚊胃可形成数个至数十个卵囊。成熟的子孢子可从卵囊壁微孔逸出或由于卵囊破裂而进入蚊体腔，最后集中于涎腺内。当蚊子重新叮咬人时，子孢子即可随涎液而侵入新宿主，重又开始上面的循环过程。 从上面生活史过程还可看到：
无菌检查标准操作程序
无菌检查标准操作程序 1.目的：建立无菌检查标准操作程序，规范检验操作。 2.范围：适用于本公司产品无菌检查—薄膜过滤法的操作。 3.职责：检验人员对本程序的实施负责。 4.本规程的编制依据为2010年版《中华人民共和国药典》二部附录“无菌检查法”中的“薄膜过滤法”。 5.检验环境要求： 5.1本项检查应在环境洁净度C级下的局部洁净度A级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。 5.2检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 5.3单向流空气区、工作台面及环境应按《洁净厂房环境监测规程》（SOP-）及《沉降菌监测的标准操作规程》（SOP-）、《洁净室悬浮粒子数测定的标准操作规程》（SOP-）定期进行洁净度监测。隔离系统按相关要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。 6.操作规程： 6.1培养基的准备： 6.1.1培养基的制备：按《培养基配制、灭菌的标准操作规程》（SOP-）制备。 ①硫乙醇酸盐流体培养基（用于培养好氧菌、厌氧菌）。 注意：在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并应防止污染。 ②改良马丁培养基（用于培养真菌）。 6.2培养基的适用性检查 每批培养基应按《无菌检查的标准操作规程》（SOP-）进行培养基的无菌性检 查及灵敏度检查。 只有本项检查合格的培养基方可用于供试品无菌检查。 本项检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。 6.3稀释液、冲洗液及其制备方法： 6.3.1 0.1%蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，调节pH值至 7.1±0.2，分装，灭菌。
非无菌产品微生物限度检查标准操作规程
非无菌产品微生物限度检查 标准操作规程 1 制定目的 为使QC检验人员在非无菌产品微生物限度检查工作中能规范和正确地进行检验工作，特制定本操作规程。 2 适用范围 本操作规程适用于非无菌产品进行微生物限度检查。 3 职责 3.1 QC负责按照本操作规程进行非无菌产品微生物限度检查的检验工作； 3.2 QC检验员在进行非无菌产品微生物限度检查的检验工作时出现异常现 象，包括微生物计数、微生物负载、控制菌检测超标和超趋势时要向QC 主管汇报，并照《微生物检查超标、超趋势调查标准管理规程》（文件编号：SMP-QC-020）配合调查； 3.3 QA及管理人员负责监督其实施情况。 4 规程细则 4.1 实验环境：按《微生物实验室标准管理规程》（文件编号：SMP-QC-002）， 《化验室洁净区标准管理规程》（文件编号：SMP-QC-004）。 4.2 培养基的制备：按《培养基标准管理规程》（文件编号：SMP-QC-019）；
微生物计数用的商品化预判培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。 4.3 稀释剂的制备：称取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液14.63g，置1000ml三 角瓶中，加纯化水1000ml，摇匀，加热溶解，于121℃高压蒸汽灭菌15min，备用。 4.4 微生物计数法：适用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数； 计数方法应进行方法适用性试验；按《微生物计数方法适应性确认》（文件编号：）。 4.4.1 供试液的制备（经计数方法适用性试验确认） 4.4.1.1 取样：按《取样标准管理规程》（文件编号：SMP-QC-026）；一般 应随机抽取不少于2个最小包装的供试品，除另有规定外，一般供试 品的检验量为10g或10ml。 4.4.1.2 供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃；供试 液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。 4.4.1.3 水溶性供试品：取供试品，用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，或 pH 7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1： 10供试液。若需要，调节供试液pH值至6～8。必要时，用同一稀 释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的 供试品原液作为供试液。 4.4.1.4 水不溶性非油脂类供试品：取供试品，用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨 缓冲液，或pH 7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基制备成 1：10供试液。分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂 如0.1%（ml/ml）的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。若需要，调节 供试液pH值至6～8。必要时，用同一稀释液将供试液进一步10倍 系列稀释。 4.4.1.5 油脂类供试品：取供试品，加入无菌十四烷酸异丙酯使溶解，或与最 少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无抑菌性的无菌表 面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃（特殊情况 下，最多不超过45℃），小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加
防治寄生虫疟原虫的论文(共2篇)
防治寄生虫疟原虫的论文（共2篇） 本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！ 第1篇：延缓寄生虫恶性疟原虫产生的研究 疟疾（Malaria)是全球性严重危害人类健康的重要传染病之一，目前全球有90多个国家和地区的20多亿人居住在疟疾流行区。撒哈拉以南的非洲国家感染疟疾疫情最重，疟疾是非洲儿童死亡的最主要原因之一。东南亚的感染情况仅次于非洲，据世界卫生组织2008年的报告，全球30%的疟疾发病率和8%的死亡率集中在这里。虽然2010年世界卫生组织报告：疟疾发病案例由2005年亿人次降到2009年亿人次；死亡人数由2000年万例降到2009年的万例，其中非洲地区死亡人数虽然大幅下降，但是目前疟疾仍然是世界六大热带病和我国五大寄生虫病之一，是威胁人类健康的主要疾病，给疫区带来沉重的经济负担，阻碍社会的发展。由于恶性疟发病凶险，愈后差，其病死率可高达50%，并且恶性疟原虫对多种抗疟药已存在耐药性，因此恶性疟已经成为一个严重的公共卫生问题。 自上世纪60年代以来，全球范围内恶性疟原虫对主要抗疟药物氯喹产生了抗药性，疟原虫的抗药性由
单一性向多药抗性发展。恶性疟原虫抗药株的不断出现已成为重大的公共卫生问题，给疟疾防治工作带来新的挑战，疟原虫抗药性研究迫在眉睫。鉴于全球恶性疟原虫对传统的氯喹、乙胺嘧啶、甲氟喹等已产生耐药，由于具有抗药性疟原虫会很快遍布所有恶性疟流行地区，抗药强度会不断增加，原虫产生抗药性的速度远比新药研发的进度快得多，从保护青蒿素及其衍生物的角度考虑，世界卫生组织建议各国在青蒿素及其衍生物的基础上联合其他药物（ACTs)来治疗恶性疟，以延缓疟原虫对青蒿素和其他药物抗药性的产生。 1青蒿素类药物抗药性的现状 青蒿素及其衍生物是一类全新结构的抗疟药，自其问世以来即以高效、速效、低毒的抗疟活性得到世界公认，对氯喹耐药的恶性疟依然有效。现在多重抗药的恶性疟原虫株已在东南亚和南美洲等地广泛流行，虽然疟原虫已对多种药物产生了抗药性，青蒿素类药物仍能够在几天内治愈超过90%的疟疾患者，目前被全世界公认为是一种很有效的抗疟新药，但是目前已有很多的研究提示青蒿素类药物的敏感性正逐渐下降，抗药性的产生是难以避免的。世界卫生组织曾经警告说，如果失去了ACTs，人们将再也没有一个治
芽孢显微镜检查标准操作规程 SOP09-501-00
郑州瑞泽欣生物技术有限公司 正文 1 操作前的准备工作 1.1 分别检查无菌操作室、菌种室、培养室、镜检室、准备室是否已清洁，且不存在与本批生产无关的记录或残留物。 1.2 是否有本批的菌种制备岗位空白生产记录，状态标识、周转容器等是否足够、齐全，生产区的设备和容器是否已标示好。如培养箱、超净工作台、显微镜、冰箱等。 1.3 检查空调和空气净化系统是否检测，是否清洁并且在合格期限内。 1.4 检查待用的物品是否准备到位，是否已灭菌并在合格的有效期之内。如菌种（菌落或芽孢悬液）、无菌PB溶液、工作服装、纯化水、接种针、移液枪及其配套枪头、酒精灯、染色剂（孔雀绿溶液、沙黄溶液）、擦镜纸、香柏油、载玻片、计数板、盖玻片等。 1.5 有没有上批产品的清场合格证副本。 1.6 检查操作间的温度、相对湿度等环境卫生条件是否符合工艺规定的要求。 2 镜检操作 2.1 玻片染色法 2.1.1 PB溶液配制：按规定的标准操作要求配制，浓度0.2M，pH值7.2。 2.1.2 孔雀绿溶液配制：按规定的标准操作要求配制，浓度7.6%。 2.1.3 沙黄溶液配制：按规定的标准操作要求配制，浓度0.5%。 2.1.4 制标本片 芽孢菌落标本制作时，按无菌操作，先将洁净载玻片用酒精灼烧杀菌，标识出明显标本区域，在区域内滴一小滴PB溶液，用接种环刮取2--3个菌落，在滴的PB溶液内均匀涂成薄膜，晾干固定，如有必要时刻将涂片通过火焰3次温热固定，但不可使温度过高，将菌烧死或烧变形。晾干后，滴孔雀绿溶液与菌膜上，要全部覆盖涂的菌膜区，染色15--20分钟，水洗脱色，直至流出的水无绿色为止，淋去表面水，晾干后，复染，滴上沙黄溶液，染色2--3分钟，倾去染液稍微用水冲去染液并用滤纸吸干残液，晾干。标注清楚标本的品名、批号、编号、培养时间、日期等。即制成芽孢菌落标本。
疟原虫的病例 2016-1-21
马山县医院罗晓成病例（来自CDC的考核片）2016-1-21 阿米巴样大滋养体环状体多重感染，红细胞巨大红细胞皱缩明显，陈旧血标本
环状体多重感染，红细胞巨大 环状体感染的红细胞都大未成熟裂殖体，大于红细胞
早期阿米巴样大滋养体裂殖体2个核 李素娟上林中医 疟原虫 马红萍（新疆自治区人民医院）
恶性疟环状体,滋养体.裂殖体，还有个小的象配子体? 郭彩茹扶风人民 虫体量很多，各阶段形态均有，很好的片子，谢谢老师分享 李华洋宜宾二院 哇！很典型 玉吉昆明附一院 恶性疟原虫 徐莉汶-昭通市一院 恶性虐 黄小华-重庆云阳中医院 没看见配子体，其他阶段都有 鲁冯洋临泉医院 卵型虐吧，感染红细胞有凸起，恶性虐只看到环状体和配子体， 罗艳卲二医院 @鲁冯洋临泉医院对卵型疟来说，是不是虫体太小了点 唐杰—中信中心医院 个人倾向卵形疟，貌似是反复感染，另外制片不好红细胞皱缩也影响判断 何兴娟，河北三院 红细胞中可见多个疟原虫和双核疟原虫，应该很恶，但是恶性疟一般看不到滋养体，只看到环状体和配子体，配子体是腊肠状，你的第一张图似乎不符，这跟前几天陈要朋老师的病例很像啊，那个还怀疑是巴贝虫呢，(这个虫我还不太掌握详细)要做PCR。治疗上两虫基本相同吧。你这个怀疑恶性但有不符。 周峰－泗洪分金亭 红细胞里的疟原虫
吴斌斌(甘肃天水407医院） 图片由柏世玉老师（泰安中心医院）标注。 柏世玉老师点评：间日疟原虫感染。 一、先看整个片子，红细胞皱缩明显，提示陈旧血（CDC的标本都是下边送 去的，再制片细胞形态及原虫形态都不典型）。不要轻易考虑卵形疟，有其他未感染红细胞对比。 二、要熟悉疟原虫发育史，恶性疟一般外周只见环状体及配子体，除非重度 感染可见大滋养体及裂殖体。 三、要熟悉疟原虫感染导致红细胞的体积及外形的变化，非常重要。 四、现在疟疾感染基本是输入性的，患者往往都有抗疟药，随时可以吃药， 所以感染症状、原虫形态及数量大都不会很典型，甚至有的恶性疟感染者也可能薄血膜见不到或偶尔见到。 五、混合感染非常罕见，除非见到两种原虫的典型形态，或有基因鉴定（尤 其只见到环状体时）。 六、重复感染现象不是恶性疟的专利。
疟疾的危害与预防
《疟疾的危害与预防》教案 教学目标： 1、了解什么是疟疾，明确疟疾的传播方式，提高对疟疾的警觉性； 2、知道疟疾的主要症状，树立疟疾治疗必须规范用药的意识，学会预防疟疾的关键措施----防蚊、灭蚊。 教学重点：预防疟疾的关键措施----防蚊、灭蚊。 教学过程： （一）谈话：同学们听说过疟疾吗？关于疟疾的基本知识有哪些呢？谁能说一说 （二）新授 1、疟疾的流行状况：疟疾是全球最严重的公共卫生问题之一，全世界超过三份之一的人口目前居住在非洲中部，南亚、东南亚及男美北部等疟疾流行地区。目前，在我国流行区 90％以上的县（市、区）的发病率控制在 1 万以下，其中半数以上在 1／10 万以下，病例呈高度散发状。流行仍较严重的地区已局限到安徽、湖北、河南、江苏 4 剩的局部地区以及云南的边境和海南的中南部山区。 2、疟疾是由疟原虫引起的一种传染病使人们患上疟疾的凶手是一种肉眼看不见的单细胞寄生虫。它叫做疟原虫。属于原生动物，只有在显微镜下被放大后才能看见。寄生于人体的有间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫卵型疟原虫四种，他们分别能引起间日疟、恶性疟、三日疟和卵型疟。间日疟目前在我国较为常见，主要分布在云南、海南、安徽、湖北、河南和江苏等省。恶性疟次之，主要分布在云南和海南省。三日疟偶尔发现，卵型疟已无病例报告。 3、疟疾是通过蚊子传播的（1）传播的媒介----按蚊那么，疟原虫由是怎样进入人体的呢[出示挂图 1]？在天热的时候，我们穿的衣服很少，大部分四肢都暴露在衣服外面，这时很容易被蚊子叮咬而患疟疾。我们每个人都曾经被蚊子叮咬过，但并没有患疟疾，这是怎么回事呢？原来，蚊子分为很多种，疟原虫寄生在按蚊的胃中，当带有疟原虫的按蚊叮吸人血时，疟原虫就进入了人体，才能传播疟疾。（2）传播的过程：在人体内，疟原虫首先侵犯肝脏，以后又进入红细胞。在红细胞内它可以成倍地增殖，将红细胞胀破。大量的红细胞残渣和疟原虫进入血液，使人发病。 4、疟疾的主要症状是发冷、发热、出汗患了疟疾，人会出现哪些症状呢？疟疾的主要症状是发冷、发热、出汗，可以分为以下几个期：前驱期：患者有疲乏、头痛，不适，厌食、畏寒和低热。发冷期或寒战期：常伴有头痛、恶心和呕吐。此时患者感觉全身发冷、颤抖、面色苍白、口唇与指甲发紫等；夏天几层棉被也不暖。此时体温多已超过 38℃。发热期：一般持续 3—6 小时，头痛加剧。患者表现面色绯红、皮肤灼热；体温高者可超过 40℃。出汗期：患者表现为大汗淋漓、体温急降，全身乏力。在此期内体温迅速恢复正常。间歇期：指前后两次发作的间隔时间。恶性疟病例很不规则，间日疟为 48 小时。总之，疟疾的典型症状可以概括为：发冷、发热、出汗。 5、疟疾治疗应该规范用药患了疟疾，应该如何治疗呢？患了疟疾，要及时到医院或乡村卫生所去就医，并且遵照医生的要求，坚持连续服药（氯喹加伯喹）8 天。如果做到这一点，疟疾就会根治。但是，千万要注意不要感觉身体好转了，就擅自做主停止服药，这样就会导致疟疾复发。
无菌检验标准操作规程SOP
(SOP) 无菌检验标准操作规程 劲芳生物医药孵化器有限公司 目的：制定无菌检验标准操作规程，确保检验操作正确。范围：本标准适用于
本公司大容量注射剂无菌检验操作。 QC检验员责任者：质管部、化验室主任、内容： XI H。《中国药典》2015年版二部附录、标准依据：1、简述：无菌检查方法系用于检查药品是否无菌的一种方法。检查项目包括需气菌、2厌气菌及真菌检查。若供试品符合该项检查方法的有关规定，仅表明了在该检验条件下未发现微生物污染。级）的单向级）背景下的局部百级（A3、环境要求：该项检查应在环境洁净度万级（C流区域内或隔离系统中进行。其全过程必须严格遵守无菌操作。防止微生物污染，但所采取的措施不得影响供试品中微生物的检出。操作前环境洁净度应经验证。日常检验需对试验环境进行监控。、方法验证：进行该项检查前应按照《无菌检查方法验证规程》确认该方法的适用性。5 、人员要求：无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术培训。4 、检验数量及检验量：6，供试品无菌检查若个（取较少者）或10、接种每种培养基所需的最少检验数量6.1:2%的最小检验数量作阳性对照用；若采用直接过滤法，应 增加供1/2采用薄膜过滤法，应增加试品无菌检查时每个培养基容器接种的样品量作阳性对照用。，采用薄膜过滤法200ml）≤半量（100mlV≤6.2、每支供试品接入每种培养基的最少量:时，检验量应不少于直接接种的供试品总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。℃。～℃，真菌培养温度为23287、细菌培养温度为30～35、仪器用具：垂直层流超净工作台、生化培养箱、电热恒温水浴箱、显微镜、离心机、8％酒精棉75双碟、试管、三角瓶、刻度离心管、注射器（针头）、剪刀、镊子、注射器盒、、真空泵、一次性使用集菌培养器。球、紫外光灯365nm 、消毒剂配制：9 ％乙醇溶液（配制 酒精棉球用）。9.1、75 。、9.20.2％新洁尔灭溶液（配制消毒棉球用）％来苏尔溶液（配制消毒棉球用）2。9.3、 10、试剂及培养基的配制： PH1000ml,1.0g0.110.1、％蛋白胨水溶液：取蛋白胨，加水微温使溶解，滤清，调节 劲芳生物医药孵化器有限公司 值至7.1±0.2，分装，灭菌。 10.2、pH7.0灭菌氯化钠－蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml微温溶解，滤清，分装，灭菌。 10.3、根据供试品特性，可选用其他经验证的适宜溶液作为稀释液、冲洗液。如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂。10.4、硫乙醇酸盐流体培养基：按商品说明称取培养基，配制，摇匀，分装，按培养基说明高压灭菌，保存备用。分装的容器应适当，其装量与容器高度比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却只限加热一次，并应防止被污染。10.5、改良马丁培养基：取商品干燥培养基28.5g，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟（若干燥培养基结块应勿使用）。 10.6、选择性培养基： 按上述硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适量的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法验证试验 10.7、营养肉汤培养基：按商品说明称取培养基，配制，加热，溶解，分装，按培养基说明高压灭菌，保存备用。 10.8、营养琼脂培养基：取商品干燥培养基3.4g，加蒸馏水1000ml，加热溶解分装，121℃高压灭菌15分钟。