结核感染t细胞检测方法
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生活常识分享结核感染t细胞检测方法
导语：我们都晓得结核方面的疾病是会传染的，如果患者不能及时接受治疗的话，就会将疾病通过痰传染给其他人，这显然是大家不愿意看到的。结核感染
我们都晓得结核方面的疾病是会传染的，如果患者不能及时接受治疗的话，就会将疾病通过痰传染给其他人，这显然是大家不愿意看到的。结核感染的疾病是需要通过结核感染t细胞检测的，很多人对这个检测还不是很了解，下面来听听结核疾病方面的专家是怎么说的吧！
结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性感染性疾病。我国是结核病高负担国家，现有结核病患者499万，传染性患者72万，在法定传染病报告中结核病的发病率和病死率始终占据前两名的位置。在1979年、1984-1985年、1990年、2000年、2010年5次全国性结核病流行病学抽样调查显示，结核病的发病呈下降趋势，但近20年来我国的结核病患病率下降缓慢，2000年到2010年发病率有上升趋势。目前，纳入规范治疗管理的结核病患者治愈率达到80%以上，而结核病面临的主要问题是发现率低。
目前以用于肺结核检查方法包括涂片抗酸染色、MTB培养、结核病的分子诊断技术、血清抗体检测、结合菌素实验，这些方法具有各自的优点，但都具有一定方法局限性。结核感染T细胞检测技术是结核病诊断的新技术。其基本原理是：结核感染者体内存在特异的效应T 淋巴细胞，经体外全血培养，通过结核分枝杆菌特异性重组抗原刺激感染者效应T淋巴细胞增殖，并释放λ-干扰素(IFN-λ)，通过检测IFN-λ水平，从而判断其是否具有针对结核分枝杆菌特异性的T细胞反应。该方法特异性好，不受卡介苗接种和环境分枝杆菌的影响;同时灵敏度高，在免疫力低下/受抑制人群中有很高的检出率。该方法的局限性在
(仅供参考)结核感染T细胞检测
结核感染T细胞检测 （T-SPOT.TB） 一、背景 结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的传染性疾病。全世界每年大约有8，000，000新增的结核病例。据此估计，三分之一的世界人口已被结核杆菌感染并成为潜在的或活动性结核患者。亚洲结核发病率约占世界结核病发病率的７０％，我国结核发病率则位居世界第二位。２０００年第四次全国结核病流行病学抽样调查结果估计，我国活动性结核患者约有４５０万人，占全球结核患者总数的１／４，其中痰菌阳性的结核患者约有２００万人，痰涂片阳性的结核患者约１５０万人。每年约有１３万人死于结核病。 由于卡介苗的使用，现在结核病的发病率比过去有所下降，但是由于艾滋病、吸毒、免疫抑制剂的使用，酗酒与贫困，难民迁移等诸多因素的影响，结核及其它分枝杆菌所致的感染发病率又呈上升趋势。如何能够快速、准确的诊断结核病，有效的控制结核病的继续蔓延，已经成为我们首要重视的问题。然而，目前结核诊断的标准仍局限于临床检查结核细菌培养和涂片直接镜检再辅以X线检查和结核菌素皮肤测试观察。这些方法均依赖于病人的临床症状，不能达到早期检测潜在结核感染的目的。
结核感染T细胞检测试剂用于肺结核和肺外结核诊断与鉴别诊断具有独特优势： （1）具有非常高的灵敏度和特异性 （2）不受环境分枝杆菌感染和卡介苗（BCG）接种影响 （3）基本不受机体免疫抑制影响，适用于HIV感染和免疫抑制剂治疗人群 （4）简单的实验室血液检查，24小时快速报告结果 二、产品的检测原理和方法 结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB）为英国Oxford Immunotec公司生产，应用的方法学为酶联免疫斑点技术（ELISPOT），产品的检测原理和检测方法如下。 这类反应统称为γ干扰素释放试验（γ Interferon Release Assay, IGRA），目前已经列入美国、欧洲等地结核病诊疗指南，用于结核病辅助诊断。 2．2 产品的检测方法 2．2．2 检测过程
结核感染t细胞检测方法
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 生活常识分享结核感染t细胞检测方法 导语：我们都晓得结核方面的疾病是会传染的，如果患者不能及时接受治疗的话，就会将疾病通过痰传染给其他人，这显然是大家不愿意看到的。结核感染 我们都晓得结核方面的疾病是会传染的，如果患者不能及时接受治疗的话，就会将疾病通过痰传染给其他人，这显然是大家不愿意看到的。结核感染的疾病是需要通过结核感染t细胞检测的，很多人对这个检测还不是很了解，下面来听听结核疾病方面的专家是怎么说的吧！ 结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性感染性疾病。我国是结核病高负担国家，现有结核病患者499万，传染性患者72万，在法定传染病报告中结核病的发病率和病死率始终占据前两名的位置。在1979年、1984-1985年、1990年、2000年、2010年5次全国性结核病流行病学抽样调查显示，结核病的发病呈下降趋势，但近20年来我国的结核病患病率下降缓慢，2000年到2010年发病率有上升趋势。目前，纳入规范治疗管理的结核病患者治愈率达到80%以上，而结核病面临的主要问题是发现率低。 目前以用于肺结核检查方法包括涂片抗酸染色、MTB培养、结核病的分子诊断技术、血清抗体检测、结合菌素实验，这些方法具有各自的优点，但都具有一定方法局限性。结核感染T细胞检测技术是结核病诊断的新技术。其基本原理是：结核感染者体内存在特异的效应T 淋巴细胞，经体外全血培养，通过结核分枝杆菌特异性重组抗原刺激感染者效应T淋巴细胞增殖，并释放λ-干扰素(IFN-λ)，通过检测IFN-λ水平，从而判断其是否具有针对结核分枝杆菌特异性的T细胞反应。该方法特异性好，不受卡介苗接种和环境分枝杆菌的影响;同时灵敏度高，在免疫力低下/受抑制人群中有很高的检出率。该方法的局限性在
免疫功能评估报告
免疫功能评估 解读 重庆斯德姆生物技术有限公司干细胞与再生医学技术研究院重庆再生医学与健康技术研究院
2018 年美国免疫学家詹姆斯·艾利森(James P.Alison) 和日本免疫学家本庶佑 (Tasuku Honjo) 因为在抑制消极免疫调节机制的研究 中发现了新癌症疗法作出的贡献，荣获年度诺贝尔生理学或医学奖。 詹姆斯·艾利森发现阻断CTLA-4 能够激活免疫系统的T 细胞，激活的 T 细胞会重新攻击癌细胞。 本庶佑首先鉴定PD-1 为活化 T 淋巴细胞上的诱导型基因，这一发现为 PD-1 阻断建立癌症免疫治疗原理作出了重大贡献。曾在201 3 年被《 Science 》评为年度十大科学突破之首。
2011 年美国免疫学家和遗传学家布鲁斯·博伊特勒(Bruce A.Be utler) 、卢森堡科学家朱尔斯·霍夫曼 (Jules A.Hoffmann) 和加拿大生 物学家拉尔夫·斯坦曼(Ralph M.Steinman) 三名科学家发现免疫系统 激活的关键原理，革命性地改变人们对免疫系统的理解，从而分享年 度诺贝尔医学奖。 布鲁斯·博伊特勒和朱尔斯·霍夫曼发现了关键受体蛋白质， 称为Toll 样受体（ Toll-like receptors ， TLR ）。 拉尔夫·斯坦曼在上世纪 70 年代第一个发现 DC(树突状细胞 )。D C 是目前已知功能最强大的专职抗原递呈细胞，具有强大的活化T 细胞能力，在获得性免疫启动中发挥重要的“信使”作用，从而引起一系列反应，制 造出抗体和“杀手”细胞等“武器”杀死被感染的细胞以及入， 侵的病原体。
〉〉〉安全防御系统 居家地点不同，保护住家安全的方法就不同。有些公寓有看门卫，有些房子建有栅栏，如果你有城堡，就需要配备一条护城河和一支弓箭部队，或者你可以选择其他一些特殊的家庭防御装置，比如安装锁、电子安全系统，养一只狗。 无论你选择的防御方法是什么，输入通行密码也好，用链条拴门也罢，还是要那种看门护院狗，其中的原因都在于你想要一个的安全 系统来保护你家里所有有价值的东西，从相册、立体声音响设备到传 家宝以及孩子们。 你的身体内也有自己的安全体系来抵御入侵者。皮肤和骨骼能在车祸中或是遇到打偏的高尔夫球时保护体内器官，头发保护头皮不受 紫外线侵害，眼睑保护眼球以防伸向眼睛的指头，但是你体内最重要 的安全系统是一个隐形的系统，你无法感觉或是看见它，而它却承担着抵御入侵病原体和帮助你康复的重任，这个系统就是人体的防御系统。 〉〉〉人体防线 人体有三道防线构成的防御系统，主要功能是抵御病原体的攻击。是由皮肤、黏膜、黏膜分泌物、杀菌物质 (如溶菌酶 )、免疫器官、免疫细胞、免疫活性物质等构成。 第一道防线 是由皮肤和黏膜构成的，他们不仅能够阻挡病原体侵入人体，而
结核感染T细胞T-SPOTTB检测项目酶联免疫斑点技术
结核感染T细胞（T-SPOT.TB） 一、名称 结核感染T细胞（T-SPOT.TB） 二、项目简介、临床意义及收费标准 T-SPOT.TB是一种记数单个结核特异的效应T细胞的酶联免疫斑点（ELISPOT）检测方法，其灵敏高于ELISA方法。该检测通过检测受结核分枝杆菌抗原刺激而活化的效应T细胞来诊断结核感染。 该检测适用于所有具有结核潜伏感染风险或怀疑是结核病的人群，无论年龄、性别、种族、治疗还是免疫状况，其诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。 对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。 收费标准：740元/人份，收费依据：混合淋巴细胞培养（W0309050020）（250元）×2次；干扰素测定（W0309060008）（120元）×2种抗原。 三、标本采取 1.静脉血：肝素锂（绿头管）抗凝管采集静脉血4ml，立即颠倒数次，充分混匀， 以免血液凝固。采血后向试管中注入血液时请缓慢进行，避免用力过猛造成细胞破坏影响检测结果。 2.脑脊液：无菌小瓶留取4ml以上，每毫升加125IU肝素（0.02ml）抗凝并立即混 匀。 3.浆膜腔积液（胸水、腹水、心包积液）：无菌密闭容器留取50ml以上，每100毫 升加2500IU（0.4ml）抗凝并立即混匀。 4.关节液：无菌小瓶留取4ml以上，每毫升加125IU肝素（0.02ml）抗凝并立即混 匀。 四、检测时间、报告时间 检测时间：每周二（节假日除外）进行检测，标本必须在上午9点前送达实验室。 报告时间：周三出报告。 五、注意事项 1.标本采集后4小时内必须送到实验室进行检测，标本采集后如果超过4小时未送 检将严重影响检测结果。 2.检测脑脊液、浆膜腔积液、关节液，须同时送检静脉血。 3.冬季运送标本时注意保温，避免冷冻。 六、联系科室和电话 检验科微生物室(TeL：84205491)
结核感染T细胞酶联免疫法常见问题
1.采血要求： 成人4-6ml儿童2-3ml 2.血样应如何保存或者运输？ 室温（18-25℃）保存或运输，不能冷冻或冷藏。 3.为什么要用BD公司的肝素锂采血管？ 由于国内采血管中存在内毒素含量过高等原因，可能会导致非特异性y-干扰素分泌，影响检测结果。 4.结核TB-IGRA产品的检测目的是什么？ 结核TB-IGRA系列产品是一种检测机体是否感染结核分枝杆菌的精准检测方法，可用于结核分枝杆菌引起的肺内结核.肺外结核和潜伏结核感染的辅助诊断。 5.结核TB-IGRA产品是否可区分活动性结核或者潜伏性结核？ 目前市场上任何一种IGRA产品均无法区分活动性结核还是潜伏性结核，阳性结果均需结合临床症状进行判断。 6.结核TB-IGRA产品是否有强阳.强弱之分？ 无。本系列产品为定性产品，目前还无确切的临床研究证明检测结果数值的高低与疾病程度有相关性。 7.TB-IGRA检测是否需空腹采血？采血到分装培养的时间要求？ 无需空腹采血，但需保证样本不能溶血，采血后再尽量短的时间内分装到培养管。如果时间长，由于细胞活性下降，可能会导致实验结果偏差。 8.TB-IGRA能否判断出患者是否处于结核活动期?
IGRA方法用于结核分枝杆菌感染的辅助诊断，不能作为判断患者是否处于结核活动期的唯一指标，其结果不能代替痰涂.细菌培养等其他较为经典的结核病的诊断方法，需结合临床症状，影像学指征等进行诊断。TB-IGRA采用TBRD1区特异性抗原，特异性高于TST，敏感度由于现在常用的痰涂.菌培.结核抗体检测，结核感染诊断效率远高于其他方法。 9.什么是潜伏性结核? LTBI是宿主感染结核杆菌后尚未发病的一种特殊状态，以免疫学试验阳性而无活动性结核的临床表现和影像学改变为特征。而大多数的活动性结核是由LTBI演变而来。 10.没有活动性肺结核临床症状但是为阳性的结果，对于临床医生诊断的意义？ 没有活动性肺结核临床症状但是TB-IGRA为阳性的结果提示，有很高的潜伏性感染风险或有肺外结核，需结合其他检测手段和临床信息综合判断是否感染，如有条件，建议跟踪检查。如短期内Y干扰素释放量急剧升高，提示近期这种潜伏性感染发展成活动性结核的可能性很大，对结核患者早防早治可起到非常关键的作用。 11.免疫抑制治疗对TB-IGRA检测有无影响？ TB-IGRA是针对结核分枝杆菌的特异性细胞免疫检测，免疫抑制治疗会造成T细胞的反应强度降低，甚至导致TB-IGRA检测产生不确定结果。因此建议免疫抑制治疗前进行TB-IGRA筛查。 12.什么情况下导致不确定的结果？
免疫检测点介绍
（一）免疫检测点简介 “免疫检验点”，为抑制受体和抑制信号通路，这些“检验点”在正常情况下能抑制T 细胞的功能，同时在肿瘤组织中可能被肿瘤利用形成免疫逃逸。 PD-1 、PD-L1、CTLA-4、B 和T 细胞衰减器（B and T cellattenuator，BTLA）、T 细胞免疫球蛋白以及Tim-3 等分子均属于“检验点”分子，在肿瘤组织中可能被肿瘤利用形成免疫逃逸，它们通过控制胞外以及胞内信号来控制细胞周期进程。 淋巴细胞活化基因3（LAG-3）是表达在活化T细胞、NK细胞及 B细胞上的免疫抑制检验点分子。目前已知的唯一配体是MHC-II分子。 NK细胞表面存在杀伤抑制受体（KIRs，可抑制NK细胞的杀伤作用），在肿瘤微环境中可能会被诱导表达，从而抑制NK细胞的杀伤功能。因此，KIRs也被认为是免疫抑制检验点，通过阻断其信号可增强NK细胞的杀伤肿瘤的功能[53]。目前已有针对KIRs单抗进入临床实验（lirilumab单抗治疗急性粒细胞白血病已进入I期临床实验）很多免疫抑制检验点在肿瘤细胞中与PD-1/PD-L1共表达，另一方面，免疫抑制检验点的联合阻断中可供选择的目标增多有利于筛选出最佳组合从而达到最佳效果。 （二）临床常用的检测点 “程序性死亡分子1”（programmed deah-1，PD-1）和“细胞毒T淋巴细胞相关抗原4”（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）表达在T细胞表面，同属于抑制性共刺激分子，在免疫系统
中扮演着类似“刹车”的角色。 CTLA的配体（即CD80和CD86）只表达在抗原递呈细胞上，而非肿瘤细胞表面，因此CTLA-4抑制T细胞活化发生在次级免疫器官（淋巴结）内，而不是肿瘤微环境中。同时CTLA-4主要表达在CD4+ T细胞而非CD8+ T细胞，CTLA-4单抗的抗肿瘤作用可能是通过增强CD4+ T细胞间接促进CD8+ T细胞的功能。 不同于CTLA-4的是，PD-1的配体PD-L1在肿瘤细胞及肿瘤浸润淋巴细胞上均有表达，而不是在抗原递呈细胞上，因此PD-1/PD-L1抑制T细胞活化主要在肿瘤微环境中[5-7]。目前，在肺癌领域研究得比较多的免疫检验点抑制剂有抗PD-1（Nivolumab，Pembrolizumab）和PD-L1单抗（MPDL3280A和MEDI-4736）。 PD-L1仍然是现阶段PD-1/PD–L1类药物最有前景的预测疗效的生物标记物之一 在黑色素瘤相关研究中发现，抗PD-1抗体的疗效要好于抗CTLA-4抗体。在NSCLC，CTLA-4抗体单药治疗鲜有疗效，而PD-1/PD-L1阻断剂的单药均表现出肿瘤活性。 PD-1有两个配体，PD-L1和PD-L2；PD-L1有两个受体PD-1和CD80（B7.1）。所以，尽管抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体都作用于PD-1/PD-L1信号轴，但阻断PD-1并不等同于阻断PD-L1。抗PD-1抗体能阻断PD-1与PD-L1、PD-L2结合，却不能阻断PD-L1与CD80相互作用，而抗PD-L1抗体能阻断PD-L1与PD-1、CD80结合，却不能阻断PD-1与PD-L2的结合。
细胞免疫功能测定
项目14：细胞免疫功能测定 【目的要求】 1、熟悉非特异性免疫细胞功能的测定方法 2、了解特异性免疫细胞的测定方法和应用 【实验内容】 一、吞噬细胞吞噬功能测定 【原理】 具有吞噬功能的细胞称为吞噬细胞，包括小吞噬细胞和大吞噬细胞二类。小吞噬细胞一般指血液中的中性粒细胞，大吞噬细胞则是存在于组织中的巨噬细胞和血液中的大单核细胞。 病原微生物、红细胞等异物侵入机体或在体外与吞噬细胞接触，吞噬细胞即进行吞噬。取细胞作涂片，镜检计算吞噬百分率和吞噬指数，可估计吞噬细胞的吞噬功能。吞噬细胞（巨噬细胞）在体液免疫和细胞免疫中均起着重要作用，吞噬细胞（巨噬细胞）与抗肿瘤免疫也有重要的关系。因此，测定吞噬细胞的吞噬和消化功能，可在一定程度上反映机体的免疫状态，也可作为判断疗效的指标之一。 【实验动物与试剂】 1、实验动物：小白鼠 2、实验试剂：无菌生理盐水、5%无菌可溶性淀粉溶液、瑞氏染液、白色葡萄球菌培养物 3、实验器材：无菌注射器、吸管、载玻片、解剖器械、显微镜等。 【方法】 1、试验前3天，小鼠腹腔注射5%无菌可溶性淀粉溶液1ml。 2、试验当天，小鼠腹腔注射1mL白色葡萄球菌悬液。 3、注射后30min，断颈处死小鼠，仰位固定小鼠，正中剪开腹部皮肤，吸出腹腔液制定涂片，自然干燥后瑞氏染液染色。 4、瑞氏染液染色：在涂片上滴3~5滴瑞氏甲液，30~60sec后,滴加瑞氏乙液,并用洗耳球吹数下,将乙液与甲液充分混均,5~10min后,水洗,干燥,镜检. 5、镜检：低倍对光，用油镜下观察巨噬细胞吞噬细菌的情况。 【结果观察】 1、吞噬细胞吞噬现象镜下观：如染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而白细胞浆则为淡红色。 2、吞噬细胞吞噬功能的测定 （1）吞噬百分率：观察100个吞噬细胞，计数被吞噬百分率以表示吞噬