农用微生物菌剂
农用微生物菌剂（GB 20287-2006）
前言
本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款，其余为推荐性条款。
本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录，附录B为资料性附录。
农用微生物菌剂
1范围
本标准规定了农用微生物菌剂（即微生物接种剂）的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。
本标准适用于农用微生物菌剂类产品。
2规范性引用文件（略）
3术语和定义（略）
4产品分类
产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型；按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。
5要求
5.1菌种
生产用的微生物菌种应安全、有效。生产者应提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。生产者应提供菌种安全性评价资料。采用生物工程菌，应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。
5.2产品外观（略）
5.3产品技术指标
5.3.1农用微生物菌剂产品的技术指标见表1，其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。
5.3.2农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。
6试验方法
6.1仪器设备（略）
6.2试剂（略）
6.3产品参数的检测
6.3.1外观(感官)的测定
取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中，仔细观察样品的颜色、形状、质地。
6.3.2有效活菌数的测定
采用平板计数法，根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。
若采用最大可能数（Most Probable Number，MPN）5管法，遵照附录C的规定。
6.3.2.1系列稀释
称取样品10 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即成母液菌悬液（基础液）。
用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
6.3.2.2加样及培养
每个样品取3个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。
6.3.2.3菌落识别
根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
6.3.2.4菌落计数
以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为10~150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。当只有一个稀释度，其平均菌落数在20～300个之间时，则以该平均菌落数计算。若有两个稀释度，其平均菌落数均在20～300个之间时，应按两者菌落总数之比值决定。若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。有效活菌数按式（1）或式（2）计算：
n m= kv1/(m0v2) ×10-8 (1)
n v = kv1/(v0v2) ×10-8 (2)
式中：
n m —质量有效活菌数，亿/g
n v —体积有效活菌数，亿/mL
—菌落平均数，个
k —稀释倍数
v1 —基础液体积，mL
v2 —菌悬液加入量，mL
v0 —样品量，mL
m0 —样品量，g
6.3.3霉菌杂菌数的测定
采用马丁培养基，测定方法同6.3.2。
6.3.4杂菌率的测定
除样品有效菌外其它的菌均为杂菌。样品中杂菌率按式（3）计算：
m = n1/(n1+n)×100 (3)
式中：
m —样品杂菌率，%
n1 —杂菌数，亿/g(mL)
n—有效活菌数，亿/g(mL)
6.3.5水分的测定
将空铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干 0.5 h，冷却后称量记录空铝盒的质量。然后称取2份平行样品（颗粒型样品，应先粉碎过1.0 mm试验筛），每份20 g（精确到0.01 g），分别加入铝盒中并记录质量。将装好样品的铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。取出置于干燥器中冷却20 min后进行称量。水分含量按式（4）计算（结果为两次测定的平均值）：w = (m1- m2)/( m1- m0) ×100 (4)
式中：
w —样品水分含量，%
m0 —空铝盒的质量，g
m1 —样品和铝盒的质量，g
m2 —烘干后样品和铝盒的质量， g
6.3.6细度的测定
6.3.6.1粉剂样品
称取样品50 g（精确到0.1 g），放入300 mL烧杯中，加200 mL水浸泡10 min~30 min后倒入孔径0.18 mm的试验筛中，然后用水冲洗，并用刷子轻轻地刷筛面上的样品，直至筛下流出清水为止。将试验筛连同筛上样品放入干燥箱中，在105 ℃±2 ℃烘干4 h ~6 h。冷却后称量筛上样品质量。样品细度按式（5）计算：
s={1- m1/[ m0（1-w）]} ×100 (5)
式中：
s —筛下样品质量分数，%
m0 —样品质量， g
w—样品含水量，%
m1 —筛上干样品质量， g
6.3.6.2颗粒样品
称取样品50 g（精确到0.1 g），将两个不同孔径的试验筛（1.0 mm和4.75 mm）摞在一起放在底盘上(大孔径试验筛放在上面)。样品倒入大孔径试验筛内筛样品，然后称小孔径试验筛上的样品质量。颗粒细度按式（6）计算：
g = m1 /m0 ×100 (6)
式中：
g —样品质量分数， %
m1 —小孔径试验筛上样品质量，g
m0 —样品质量， g
6.3.7pH值的测定
打开酸度计电源预热30 min，用标准溶液校准。
pH值的测定，每个样品重复三次，计算三次的平均值。
6.3.
7.1液体样品
用量筒取40mL样品放入50 mL的烧杯中，直接用酸度计测定，仪器读数稳定后记录。
6.3.
7.2粉剂样品
称取样品15 g，放入50 mL的烧杯中，按1:2(样品:无离子水)的比例将无离子水加到烧杯中(如果样品含水量低，可根据基质类型按1:3~1:5的比例加无离子水)，搅拌均匀。然后静置30 min，测样品悬液的pH值，仪器读数稳定后记录。
6.3.
7.3颗粒样品
样品先研碎过1.0 mm试验筛，按照6.3.7.2的方法测定。
6.3.8粪大肠菌群数的测定
应符合GB/T 19524.1《肥料中粪大肠菌群的测定》的规定。
6.3.9蛔虫卵死亡率的测定
应符合GB/T 19524.2《肥料中蛔虫卵死亡率的测定》的规定。
6.3.10纤维素酶活、蛋白酶活的测定
应符合附录D的规定。
6.3.11砷、镉、铅、铬、汞的测定
应符合GB 18877—2002中的5.12~5.17的规定。
6.3.12保质期的检验
在产品说明书标明的保质期前，按6.3.1~6.3.11方法测定产品相应指标。
7检验规则
本标准中产品技术指标的数字修约应符合GB 8170的规定；产品质量合格判定应符合GB 1250中修约值比较法的规定。
7.1抽样
按每一发酵罐菌液（或每批固体发酵）加工成的产品为一批，进行抽样检验，抽样过程严格避免杂菌污染。
7.1.1抽样工具
无菌塑料袋(瓶)，金属勺、抽样器、量筒、牛皮纸袋、胶水、抽样封条及抽样单等。
7.1.2抽样方法和数量
一般在成品库中抽样，采用随机法抽取。
抽样以件为单位，小包装以每一包装箱为一件。随机抽取3~5件，每件中随机抽取一袋(瓶)；若每袋(瓶)包装小于500 g（mL）的产品，应多抽几件。大包装产品以一袋(桶)为一件，随机抽取5~10件，在无菌条件下，每件取样500 g(mL)，然后将抽取样品混匀，按四分法分装3袋(瓶)，每袋（瓶）不少于500 g(mL)。
7.2检验分类（略）
7.3判定规则
7.3.1具下列任何一条款者，均为合格产品
a. 检验结果各项技术指标均符合标准要求的产品；
b. 在产品的外观、水分、细度、pH值等检测项目中，有1项不符合要求，而其它各项技术指标符合要求的产品。
7.3.2具下列任何一条款者，均为不合格产品
a. 有效活菌数不符合技术指标；
b. 霉菌杂菌数不符合技术指标；
c. 杂菌率不符合技术指标；
d. 粪大肠菌群不符合技术指标；
e. 蛔虫卵死亡率不符合技术指标；
f. 砷、镉、铅、铬、汞中任一含量不符合技术指标；
g. 有机物料腐熟剂产品中所测酶活不符合技术指标；
h. 在外观、水分、细度、pH值等检测项目中，有2项（含）以上不符合要求。
8包装、标识、运输和贮存
参见NY 885-2004《农用微生物产品标识要求》
附录 A 常用检测培养基
参见NY/T 1114-2004《微生物肥料实验用培养基技术条件》
附录 B
（资料性附录）
常用染色剂
B.1革兰氏染色剂
B.1.1结晶紫染色液（Hucker氏配方）
甲液：结晶紫（Crystal violet） 2.0 g
乙醇(95%) 20.0 mL
乙液：草酸铵[(NH4)2C2O4?H2O] 0.8g
蒸馏水 80.0 mL
甲、乙两液相混，过滤，棕色瓶保存。
B.1.2卢哥(Lugol)氏碘液
碘(I2)片 1.0 g
碘化钾(KI) 2.0 g
蒸馏水 300 mL
先溶碘化钾于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，可稍加热，最后加足蒸馏水，棕色瓶保存。
B.1.3脱色液95%的乙醇液。
B.1.4复染液0.5%的番红水溶液（Safranin O)
2.5%的番红酒精溶液 20 mL
蒸馏水 80 mL
B.2芽胞染色液
B.2.1孔雀绿染色液（Malachite green）
孔雀绿 5.0 g
蒸馏水 100 mL
B.2.20.5%番红染色液
B.3石碳酸复红染色液
甲液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 g
95%酒精 10.0 mL
乙液：石碳酸(Phenoecrystals C.P) 5.0 g
蒸馏水 95 mL
将甲、乙两液混合后即得石碳酸复红染色液原液。染色时，将原液稀释5~10倍使用。
附录 C
（规范性附录）
稀释法（MPN 5管法）
C.1稀释
称取样品10.0 g，加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即得到1×101稀释度的菌悬液。
用无菌移液管吸取5.0mL上述菌悬液加入到装有45mL无菌水的三角瓶中，充分振荡摇匀，得到1×102稀释度的菌悬液，依此方法制成1×103、1×104、1×105……稀释度的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
C.2加样
选择适宜的5个连续稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度的菌悬液1.0 mL，加到已准备好的盛有9.0 mL无菌培养基的螺口试管中，每一稀释度重复接5支试管（不同稀释度间更换无菌移液管），同时用无菌培养液作对照。
C.3培养
接种后立即拧紧塑料帽并摇匀，将接种好的试管放到适宜的条件下培养。
C.4计算
根据各稀释系列试管中有无待测微生物生长或其生理反应的正或负得出数量指标，并在相应的MPN统计表中查出近似值（见表C1），即可计算出待测样品的有效活菌数，以亿个/mL 或亿个/g表示。
计算方法：
1mL（g）样品中的有效活菌数=菌数近似值×数量指标第一位数的稀释倍数
C.5计数规则
在稀释系列中必须最后一个稀释度所有重复间都没有微生物生长。确定数量指标系取稀释系列中所有重复都有生长(或是正反应)的最高稀释度为数量指标的第一位数字，总共取三个连续稀释管的结果查表。
C.5.1在全部5支试管中均出现生长的稀释度中，把出现生长的稀释度倍数最高的那一级放入数列。例如：为5-5-3-0-0时，则取5-3-0数列；
C.5.2在全部5支试管中均不出现生长的稀释度中，把稀释度倍数最低的那一级放入数列。例如：为5-3-0-0-0时，则取5-3-0数列；
C.5.3如果应用上述两条规则，会出现采用如5-5-4-3-0这样的4个等级的稀释度的情况。此时，可先取前面的5-4-3数列，后取4-3-0数列，分别求出lgMPN，然后算出其真数的平均值。在此列中，数列5-4-3的lgMPN为1.447，数列4-3-0的lgMPN为0.431+1（后一数列与前一数列相应稀释了10倍，故要加1进行校正），（1.447+1.431）/2=1.439，所以MPN=27.5。
表C.1 MPN，lgMPN表
阳性试管数MPN
（相当于第一稀释管1毫升）LgMPN
阳性试管数MPN
（相当
于第一
稀释管1
毫升）
LgMPN
第一稀释管第二
稀释
管
第三
稀释
管
第一
稀释
管
第二
稀释
管
第三
稀释
管
0 0 0 0 - 5 0 0 2.3 0.362
0 1 0 0.18 0.255-1 5 0 1 3.1 0.491
1 0 0 0.20 0.301-1 5 1 0 3.3 0.519
1 1 0 0.40 0.602-1 5 1 1 4.6 0.663
2 0 0 0.45 0.653-1 5 2 0 4.9 0.690 2 0 1 0.68 0.833-1 5 2 1 7.0 0.845 2 1 0 0.68 0.833-1 5 2 2 9.5 0.978
2 2 0 0.9
3 0.968-1 5 3 0 7.9 0.898
3 0 0 0.78 0.892-1 5 3 1 11.0 1.041 3 0 1 1.1 0.041 5 3 2 14.0 1.146 3 1 0 1.1 0.041 5
4 0 13.0 1.114
3 2 0 1.
4 0.146
5 4 1 17.0 1.230
4 0 0 1.3 0.114
5 4 2 22.0 1.342 4 0 1 1.7 0.230 5 4 3 28.0 1.447 4 1 0 1.7 0.230 5 5 0 24.0 1.380 4 1 1 2.1 0.322 5 5 1 35.0 1.544 4 2 0 2.2 0.342 5 5 2 54.0 1.732 4 2 1 2.
6 0.415 5 5 3 92.0 1.964
4 3 0 2.7 0.431
5 5 4 160.0 2.204
5 5 5 >180.0 >2.255
农用微生物菌剂
农用微生物菌剂（GB 20287-2006） 前言 本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款，其余为推荐性条款。 本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录，附录B为资料性附录。 农用微生物菌剂 1范围 本标准规定了农用微生物菌剂（即微生物接种剂）的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。 本标准适用于农用微生物菌剂类产品。 2规范性引用文件（略） 3术语和定义（略） 4产品分类 产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型；按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。 5要求 5.1菌种 生产用的微生物菌种应安全、有效。生产者应提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。生产者应提供菌种安全性评价资料。采用生物工程菌，应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。 5.2产品外观（略） 5.3产品技术指标 5.3.1农用微生物菌剂产品的技术指标见表1，其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。
表1 农用微生物菌剂产品的技术指标
表2 有机物料腐熟剂产品的技术指标 5.3.2农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。 表3 农用微生物菌剂产品的无害化技术指标
6试验方法 6.1仪器设备（略） 6.2试剂（略） 6.3产品参数的检测 6.3.1外观(感官)的测定 取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中，仔细观察样品的颜色、形状、质地。 6.3.2有效活菌数的测定 采用平板计数法，根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。 若采用最大可能数（Most Probable Number，MPN）5管法，遵照附录C的规定。 6.3.2.1系列稀释 称取样品10 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min 充分振荡30 min，即成母液菌悬液（基础液）。 用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。 6.3.2.2加样及培养 每个样品取3个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。 每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。
微生物肥料生产新技术
微生物肥料生产新技术 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
微生物肥料生产新技术 一、微生物肥料生产新工艺及流程 一般传统的微生物肥料生产工艺是：保藏菌种→斜面菌种培养活化→摇瓶扩大培养→发酵罐液体发酵→按一定的比例用草炭吸附后包装或按一定的比例稀释后直接包装。建立这样的生产企业需要建立大面积的无菌培养室、购置发酵罐、空压机、过滤器等设备，而且培养、发酵条件不易控制，菌种质量难以保证，投资大、成本高。 河北省生物工程技术公司针对众多微生物肥料生产企业中存在的上述难题，联合河北农业大学、河北大学、河北省科学院微生物研究所等单位微生物专家，经多年研究攻关、多次实验，开发出微生物肥料生产新工艺，成功解决了上述难题，非常适合中小微生物肥料生产企业采用，尤其是特别适合现有的复混肥料、有机肥料生产企业生产生物有机无机肥料、生物有机肥料，作为其产品功能更新、升级或提高应用效果而添加。 河北省生物工程技术公司微生物肥料新的生产工艺是：使用公司新开发出的高活性、高含量微生物菌粉按一定比例直接加入或包衣到有机肥或复混肥料中，即可生产出符合国家农业部登记标准要求的微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料、微生物冲施肥、拌冲剂等产品。 具体工艺流程为： （1）微生物菌剂工艺： 草炭或其他吸附剂 + 菌粉微生物固体菌剂或颗粒肥包装 （2）生物有机肥工艺： 有机肥粉状或颗粒 + 菌粉生物有机肥包装 （3）复合微生物肥料（生物复混肥）：
化肥（N、P、K）配料→混合→造粒→烘干冷却→筛分→ 包装 菌粉 （4）微生物冲施肥微生物拌种剂 和其他辅料配比制成微生物冲施肥及拌种挤 上述新工艺，实际上相当于将微生物肥料生产中投资大、工艺复杂、技术难度大、质量要求高、用量少的菌剂生产环节交给我们来完成，由我们统一规模化生产提供给每个企业。这样将使微生物肥料的生产变得简便、高效、低成本。就象手机市场研发出强大的手机芯片，从而使手机生产变得简化进而出现山寨手机一样，高活性的菌粉就是这种“芯片”，只需嫁接到你的产品中，即可生产出各种成分、含量的微生物肥料。所不同的是：高活性菌粉中的有效菌是国家已认可、明确用于农业生产的菌种，用于生产出来的各种微生物肥料均可获得农业部的微生物肥料登记证。 河北省生物工程技术公司提供的菌粉产品，采用现代化的生产设备，在工业化发酵生产生物肥料的基础上，将菌剂进一步浓缩低温脱水精制而成，实现了菌剂生产的规模化、现代化，保证了菌剂的质量，降低了成本。 二、高活性菌粉技术指标： 含（胶质芽孢杆菌）活性芽孢100亿/克个以上，有效期24个月 三、在微生物肥料生产中使用高活性菌粉的特点及优势 1、生产投资成本低
微生物菌种保藏及复壮
微生物菌种保藏及复壮 5.1. 微生物菌种保藏 在发酵工业中，具有良好性状的生产菌种的获得十分不容易，如何利用优良的微生物菌种保藏技术，使菌种经长期保藏后不但存活健在，而且保证高产突变株不改变表型和基因型，特别是不改变初级代谢产物和次级代谢产物生产的高产能力，即很少发生突变，这对于菌种极为重 要。 微生物菌种保藏技术很多，但原理基本一致，即采用低温、干燥、缺氧、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂等方法，挑选优良纯种，最好是它们的休眠体，使微生物生长在代谢不活泼，生长受抑制的环境中。具体常用的方法有：蒸馏水悬浮或斜面传代保藏；干燥-载体保藏或冷冻干燥保藏；超低温或在液氮中冷冻保藏等方法。 5.1.1. 蒸馏水悬浮法 这是一种最简单的菌种保藏方法，只要将菌种悬浮于无菌蒸馏水中，将容器封好口，于10℃保藏即可达到目的。好气性细菌和酵母等可 用此法保存。 5.1.2. 斜面传代保藏 斜面传代保藏方法是将菌种定期在新鲜琼脂斜面培养基上、液体培养基中或穿刺培养，然后在低温条件下保存。它可用于实验室中各类微生物的保藏，此法简单易行，且不要求任何特殊的设备。但此方法易发生培养基干枯、菌体自溶、基因突变、菌种退化、菌株污染等不良现象。
因此要求最好在基本培养基上传代，目的是能淘汰突变株，同时转接菌量应保持较低水平。斜面培养物应在密闭容器中于5℃保藏，以防止培养基脱水并降低代谢活性。此方法一般不适宜作工业生产菌种的长期保藏，一般保存时间为3~6个月。如放线菌于4~6℃保存，每3个月移接一次；酵母菌于4~6℃保存，每4~6个月移接一次；霉菌于4~6℃保存，每6个月移接一次。 5.1.3. 矿物油中浸没保藏 此方法简便有效，可用于丝状真菌、酵母、细菌和放线菌的保藏。特别对难于冷冻干燥的丝状真菌和难以在固体培养基上形成孢子的担子菌等的保藏更为有效。是将琼脂斜面或液体培养物或穿刺培养物浸入矿物油中于室温下或冰箱中保藏，操作要点是首先让待保藏菌种在适宜的培养基上生长，然后注入经160℃干热灭菌1~2h或湿热灭菌后120℃烘去水分的矿物油，矿物油的用量以高出培养物1cm为宜，并以橡皮塞代替棉塞封口，这样可使菌种保藏时间延长至1~2年。以液体石蜡作为保藏方法时，应对需保藏的菌株预先作试验，因为某些菌株如酵母、霉菌、细菌等能利用石蜡为碳源，还有些菌株对液体石蜡保藏敏感。所有这些菌株都不能用液体石蜡保藏，为了预防不测，一般保藏菌株 2~3 年也应做一次存活试验。 5.1.4. 干燥-载体保藏 此法适用于产孢子或芽孢的微生物的保藏。是将菌种接种于适当的载体上，如河砂、土壤、硅胶、滤纸及麸皮等，以保藏菌种。以沙土保藏用得较多，制备方法为：将河砂经24目过筛后用10%~20%盐酸浸泡
微生物菌剂
农用微生物菌剂 在番茄上的试验报告 试验委托单位：陕西绿农生物科技有限公司试验执行单位：澄城县土壤肥料工作站试验主持人：（高级农艺师）试验参加人：（助理农艺师）时间：二0一一年七月二十日
农用微生物 在番茄上作物田间试验报告 为了验证陕西绿农生物科技有限公司研制生产的生物有机肥（商品名“田露”）水剂，主要技术指标：有效活菌数≥2亿/ml，在番茄上的应用效果，按照农业部登记肥料肥效要求的技术规程，于2011年在番茄上进行了田间试验，现将试验结果报告如下： 1、试验目的 为了观察农用微生物菌剂与相同类型肥料在番茄生长发育中的作用及增产效果。今年我们在番茄上安排了试验，为大面积推广应用提供科学试验依据。 2、试验时间与地点 试验于2011年3—9月份安排在我县赵庄镇乔庄村春茬番茄生产基地进行实施。 3、试验田概况 试验田地势平坦，海拔763m，土壤类型为黄盖塿，土壤质地为壤土类，土壤肥力中等，试验前采集0—30cm深度土样测得各种养分含量如下：
供试田块土壤基本养分状况 4、试验设计 4.1试验设计 试验设四个处理，采用随机排列，三次重复，小区面积66.7平方米。 4.2试验处理 ①喷施农用微生物菌剂800倍 ②喷施灭活微生物菌剂800倍 ③喷施同类型肥料800倍 ④ (CK)喷施等量清水 5、试验实施及田间管理 5.1试验实施：番茄品质为金棚一号，田间作物管理水平较高，试验肥力于番茄生产发育的坐果期、果实膨大期、着色期个喷施一次。 5.2田间管理：试验番茄在生育期喷药防治病虫害8次，灌水5次。 6、本年度气候特点与番茄生长发育 6.1降水：今年3—9月份在番茄生长期共降水438.8mm，较历年平均426.4mm增加22.4mm降雨量集中在7、8、9三个月，占总降雨量86.3%。
微生物菌剂与微生物菌肥之间有什么联系
微生物肥和微生物菌肥一字之差有啥区别？ 微生物肥料含有特定微生物活体的制品，应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。 微生物肥料包含微生物接种剂（农用微生物菌剂）、复合微生物肥料、生物有机肥。田小二冲施肥厂家小编先来说说什么是微生物肥、微生物菌肥。 农用微生物菌剂：目标微生物（有效菌）经过工业化生产扩繁后加工制成的活菌制剂，它具有直接或间接改良土壤、恢复地力，维持根际微生物区系平衡，降解有毒、有害物质等作用；应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长、改善农产品品质及农业生态环境。 复合微生物肥料：目的为生物经工业化生产增殖后与营养物质复合而成的活菌制品。 生物有机肥：特定功能微生物与主要以动植物残体（如畜禽粪便、农作物秸秆等）为来源，并经无害化处理、腐熟的有机物料复合而成的一类兼具微生物肥料和有机肥效应的肥料。 接下来田小二冲施肥厂家小编来说说微生物菌剂与微生物菌肥的区别 菌剂是农用微生物菌剂的简称，对应的标准是《农用微生物菌剂》（即微生物接种剂）（GB 20287-2006），是指1种或1种以上的目标微生物经工业化生产扩繁后直接使用或仅与利于该培养物存活的载体吸附所形成的活体制品，它是菌肥大类的其中一种。 菌肥是老百姓和部分经销商对微生物肥料的简称，是指目标微生物经工业化生产扩繁后与营养物质等复合而成的、含有该培养物活体的制品，它在单位面积上的用量较大，目前可分为复合微生物肥料、生物有机肥和农用微生物菌剂，即涵盖菌剂。 菌肥一般包装较大，多为40kg，也有25kg和50kg包装的，一般亩用量较大，按照目前全国各地亩有机质含量在1.0%左右的情况，一般果树要200-500公斤左右。大肥料菌肥目前的市场价格比较集中在2000-3000之间，以逐步成为市场的主流肥料。一般复合微生物肥料和生物有机肥的每亩使用量超过200kg，而农用微生物菌剂在单位面积上的用量少，一般每亩用量2-5kg。 为区别，一般农用微生物菌剂简称菌剂，是小肥料，是配剂。把复合微生物肥料和生物有机肥简称菌肥，是大肥料。 最后田小二水溶肥厂家小编再来说说微生物菌剂与微生物菌肥之间的联系 在国家标准制定中，微生物菌剂是微生物肥料中的一类，目前在微生物菌剂产品登记的152种菌种中，使用频率较大的前10位菌种分别为：枯草芽孢杆菌、胶冻样类芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、酿酒酵母、侧孢短芽孢杆菌、细黄链霉菌、植物乳杆菌、黑曲霉，其中芽孢杆菌占75%。 根据不同地区不同作物，微生物菌剂大多以4种方式使用，作底肥每亩用量2kg，耕地时均匀撒施；作追肥，每亩用量1-2kg追施；作滴灌与冲施，取清液配合常规肥料浇灌，残渣作基肥用，改良土壤；作种肥，适量拌种，按常规育苗或播种方法使用。 目前在市场上推广时，微生物菌剂按内含的微生物种类或功能特性分为：根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂；剂型以液体为主，也有粉剂、颗粒型。
微生物菌种保藏方法
菌种保藏 （一）、菌种保藏的目的 微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡,因而常常造成菌种的衰退,并有可能使优良菌种丢失.菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定,确保菌种不死亡、不变异、不被污染,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要. （二）、菌种保藏的原理 无论采用何种保藏方法,首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏,最好保藏它们的休眠体,如分生孢子、芽孢等.其次,应根据微生物生理、生化特点,人为地创造环境条件,使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态.这些人工造成的环境主要是干燥、低温和缺氧,另外,避光、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂也能有效提高保藏效果. （三）、菌种保藏的方法 1、斜面低温保藏法 将菌种接种在适宜的斜面培养基上,待菌种生长完全后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定时间（保藏期）再转接至新的斜面培养基上,生长后继续保藏,如此连续不断.此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种.放线菌、霉菌和有芽孢的细菌一般可保存6个月左右,无芽孢的细菌可保存1个月左右,酵母菌可保存3个月左右.如以橡皮塞代替棉塞,再用石蜡封口,置于4℃冰箱中保藏,不仅能防止水分挥发、能隔氧,而且能防止棉塞受潮而污染.这一改进可使菌种的保藏期延长. 该法的优点是简便易行,容易推广,存活率高,故科研和生产上对经常使用的菌种大多采用这种保藏方法.其缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力,保藏期短,传代次数多,菌种较容易发生变异和被污染. 2、石蜡油封藏法 此法是在无菌条件下,将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面（或半固体穿刺培养物）上,石蜡油层高出斜面顶端lcm,使培养物与空气隔绝,加胶塞并用固体石蜡封口后,垂直放在室温或4℃冰箱内保藏.使用的液体石蜡要求优质无毒,化学纯规格,其灭菌条件是：150～170℃烘箱内灭菌lh；或121℃高压蒸汽灭菌60～80min,再置于80℃的烘箱内烘干除去水分. 由于液体石蜡阻隔了空气,使菌体处于缺氧状态下,而且又防止了水分挥发,使培养物不会干裂,因而能使保藏期达1～2年,或更长.这种方法操作简单,它适于保藏霉菌、酵母菌、放线菌、好氧性细菌等,对霉菌和酵母菌的保藏效果较好,可保存几年,甚至长达10年.但对很多厌氧性细菌的保藏效果较差,尤其不适用于某些能分解烃类的菌种. 3、砂土管保藏法 这是一种常用的长期保藏菌种的方法,适用于产孢子的放线菌、霉菌及形成芽孢的细菌,对于一些对干燥敏感的细菌如奈氏球菌、弧菌和假单胞杆菌及酵母则不适用. 其制作方法是,先将砂与土分别洗净、烘干、过筛(一般砂用60目筛,土用120目筛),按砂与土的比例为(1～2)：1混匀,分装于小试管中,砂土的高度约1cm,以121℃蒸汽灭菌1～1.5h,间歇灭菌3次.50℃烘干后经检查无误后备用.也有只用砂或土作载体进行保藏的.需要保藏的菌株先用斜面培养基充分培养,再以无菌水制成108～1010个/ml菌悬液或孢子悬液滴入
生物有机肥国家标准
生物有机肥国家标准 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
生物有机肥国家标准 本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。 本标准起草单位：农业部微生物肥料质量监督检验测试中心、中国农业科学院土壤肥料研究所。 本标准主要起草人：李俊、沈德龙、姜昕、陈慧君、关大伟、曹凤明、李力。 1 范围 本标准规定了生物有机肥的要求、检验方法、检验规则、标识、包装、运输和贮藏。 本标准适用于生物有机肥。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 8170—1987 数值修约规则 GB 18877—2002 有机-无机复混肥料 GB ××××—2004 农用微生物菌剂 GB/T 1250-1989 极限数值的表述方法和判定方法 GB/T ××××—2004 肥料中粪大肠菌群的测定
GB/T ××××—2004 肥料中蛔虫卵死亡率的测定 NY 525—2002 有机肥料 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 生物有机肥是指特定功能微生物与主要以动植物残体（如畜禽粪便、农作物秸秆等）为来源并经无害化处理、腐熟的有机物料复合而成的一类兼具微生物肥料和有机肥效应的肥料。4 要求 菌种 使用的微生物菌种应安全、有效，有明确来源和种名。 外观（感官）：粉剂产品应松散、无恶臭味；颗粒产品应无明显机械杂质、大小均匀、无腐败味。 技术指标 生物有机肥产品的各项技术指标应符合表1的要求。 表1 生物有机肥产品技术要求
菌种保存方法
菌种保存方法 未知 微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种： 1．传代培养保藏法 又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4—6℃冰箱内保存。 2．液体石蜡覆盖保藏法 是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。 3．载体保藏法 是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。 4．寄主保藏法 用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。 5．冷冻保藏法 可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。 6．冷冻干燥保藏法 先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水 分（真空干燥）。
有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 三、器材 细菌、酵母菌，放线菌和霉菌； 肉膏蛋白胨斜面培养基，灭菌脱脂牛乳，灭菌水，化学纯的液体石蜡，甘油，五氧化二磷，河沙，瘦黄土或红土，冰块、食盐，干冰，95％酒精，10％盐酸，无水氯化钙； 灭菌吸管，灭菌滴管，灭菌培养皿，管形安瓿管，泪滴形安瓿管（长颈球形底），40目与100目筛子，油纸，滤纸条（0．5×1．2cm），干燥器，真空泵，真空压力表，喷灯，L形五通管，冰箱，低温冰箱（-30℃），液氮冷冻保藏器。 四、操作步骤、各保藏法的应用范围及优缺点 下列各法可根据实验室具体条件与需要选做。 1．斜面低温保藏法 将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。 保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。 此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而影响微生物的性状；污染杂菌的机会亦较多。 2．液体石蜡保藏法 （1）将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。 （2）将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。 （3）用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm为准（图Ⅶ-12），使菌种与空气隔绝。
什么是微生物菌剂
微生物菌剂是一种新型肥料，恰当使用可以提高农产品产量、改善农产品品质、减少化肥用量、降低成本、改良土壤、保护生态环境。那么微生物菌剂的作用是什么呢？如何分类呢？下面就来了解一下吧。 什么是微生物菌剂 微生物菌剂是指目标微生物（有效菌）经过工业化生产扩繁后，利用多孔的物质作为吸附剂（如草炭、蛭石），吸附菌体的发酵液加工制成的活菌制剂。这种菌剂用于拌种或蘸根，具有直接或间接改良土壤、恢复地力、预防土传病害、维持根际微生物区系平衡和降解有毒害物质等作用。农用微生物菌剂恰当使用可以提高农产品产量、改善农产品品质、减少化肥用量、降低成本、改良土壤、保护生态环境。 按剂型可分为：液体、粉剂； 比如目前市场效果比较好的蔚蓝生物的溶菌酶，此菌剂为液体，植物乳杆菌含量大于2亿/毫升。生物溶菌酶的特点是促进根系的修复与再生，活化养分、防治早衰、预防土传病害的发生。 蔚蓝生物另一款产品：活菌9元素，植物乳杆菌和胶冻样芽孢杆菌含量大于2亿/克，此产品为粉剂，完全水溶，方便使用，可底施、滴灌、冲施、喷施。此产品兼具中微量
元素和枯草芽孢杆菌，因此生根壮苗、抗逆防病、活化土壤、补充养分、膨果着色等作用明显。 颗粒军级由于方便机播，更多使用大面积机械化作业。 微生物菌剂的作用 1、提高产量：实践证明，微生物菌剂特定的肥料效应不仅为农作物提供营养元素，其有效菌还能分泌赤霉素、细胞分裂素、生长素等活性物质，刺激、调节、促进作物的生长发育，有利于农作物增产。 2、改善品质：微生物菌剂能有效地改善农产品品质。实践证明，施用微生物菌剂收获的农产品，蛋白质、糖分、维生素、氨基酸等有益成份含量明显提高，籽粒、果实丰满光滑，蔬菜果品色泽亮丽，既好吃又好看，价值还高。有的微生物肥料产品，还可以减少硝酸盐的积累，提高农产品的安全性。 3、增强作物的抗逆性能。大多微生物菌剂中的有效菌，具有分泌抗生素类物质和多种活性酶的功能，能抑制或杀死致病菌，降低病害发生及增强作物的抗逆性，如可增强农作物的抗旱、耐寒、抗倒伏、防病及抗盐碱能力，同时还能有效预防作物生理性病害的发生。 4、提高化肥利用率。微生物菌剂有效菌大多能分解土壤中有机质，有机质分解过程中生成腐殖酸，腐殖酸与土壤中的氮形成腐殖酸铵，可减少氮肥的流失。解钾溶磷有效菌能将
设计实验：微生物菌种的分离纯化、培养、、鉴定 以及保藏技术
设计实验：微生物菌种的分离纯化、培养、、鉴定以及保藏技术 一．实验目的 1.学习大肠菌群分离纯化、鉴定的原理。 2.掌握平板表面涂布法、平板划线法的分离技术。 3.学习掌握菌种保藏的原理和方法。 二.实验原理 菌种的分离纯化 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”，防止其他微生物的混入。 1.涂布平板法 因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。 2.平板划线法 最简单的分离微生物的方法是平板划线法，其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。 大肠菌群的培养鉴定 大肠菌群能在乳糖胆盐液体培养液中生长，并且产气产酸，使培养液变色。还能在伊红美兰固体培养上生长，形成黑紫色的菌落，有的还有金属光泽。其他病原菌的菌落呈粉红色。再做镜检观察是无芽孢的革兰氏阴性杆菌（呈红色）。即可鉴定是有大肠菌群的菌存在。 菌种保藏 菌种保藏是将微生物的菌种经长时间的保存，不污染其它杂菌，及可保持其形态特征和生理性状，减少变异，防止衰老，以便于将来使用。 保藏菌种一般是选用它的休眠休，如孢子；芽孢等等，并且要创造一个低温；干燥；缺氧；避光和缺少营养的环境条件，以利于休眠体能长期地处于休眠状态。对于不产孢子的微生物，应使其新陈代谢处于最低状态，又不会死亡，从而达到长期保存的目的 三.实验器材 1.菌种：污水中的大肠菌群、酵母菌和霉菌 2、培养基：乳糖胆盐液体培养基、伊红美蓝琼脂（EMB）、营养琼脂培养基、麦芽汁固体斜面培养基 和马铃薯固体斜面培养基。 3.器材：接种环、安培瓶、干燥器、冰箱、产气管、试管、培养皿、无菌平皿、无菌玻璃涂棒移液管、电炉、双目显微镜、恒温培养箱、无菌操作台、高压灭菌锅、恒温干燥箱等。 4.试剂：革兰氏一(草酸铵结晶紫)、革兰氏二(路哥氏碘液) 、革兰氏三（95%乙醇）、 革兰氏四（蕃红）；试剂：医用液体石腊（比重0.83～0.89）。 四．试验方法及步骤 1.大肠菌群的分离纯化 第一天 a．涂布平板法：将已熔化的营养琼脂培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的含大肠菌群的污水滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，置培养箱中37℃培养24小时。经培养后挑取单个菌落。 第二天 b．平板划线法：经培养后挑取单个菌落，接种环以无菌操作沾取少许菌落，在无菌伊红美兰琼脂培养基平板表面进行连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果
农业部肥料登记标准与含量指标
农业部肥料登记标准及含量 在此列出相关肥料标准，以供参考。 1、大量元素水溶肥料固体产品技术指标（标准号 NY1107-2006) 2、大量元素水溶肥料液体产品技术指标（标准号 NY1107-2006) 3、微量元素水溶肥料固体产品技术指标(标准号 NY1428-2007) 4、微量元素水溶肥料液体产品技术指标(标准号 NY1428-2007) 5、含氨基酸水溶肥料（微量元素型）液体产品技术指标(标准号 NY1429-2007) 6、含氨基酸水溶肥料（微量元素型）固体产品技术指标(标准号 NY1429-2007) 7、含氨基酸水溶肥料（钙元素型）固体产品技术指标(标准号 NY1429-2007) 8、含氨基酸水溶肥料（钙元素型）液体产品技术指标为(标准号 NY1429-2007) 9、含腐植酸水溶肥料（大量元素型）固体产品技术指标(标准号 NY1106-2006 ) 10、含腐植酸水溶肥料（大量元素型）液体产品技术指标(( 标准号 NY1106-2006 ) 11、含腐植酸水溶肥料（微量元素型）产品技术指标(标准号 NY1106-2006 ) 12、生物有机肥技术指标（ NY 884-2004） 13、农用微生物菌剂技术指标（GB20287-2006 ） 14、复合微生物肥料技术指标（NY/T798—2004 ） 15、有机肥料技术指标（NY525 —2002 16、氨化硝酸钙技术指标（HG/3733-2004） 17、农林保水剂技术指标（标准号 NY886）
1、大量元素水溶肥料固体产品技术指标（标准号NY1107-2006) 项目指标 大量元素含量，%≥50.0 微量元素含量，%≥0.5 水不溶物含量，%≤ 5.0 PH值(1:250 倍稀释) 3.0-7.0 水分 (H2O)，%≤ 3.0 注： a大量元素含量指N、P2O5、K2O含量之和。大量元素单一养分含量不低于 6.0%。 b微量元素含量指铜、铁、锰、锌、硼、钼元素含量之和。产品应至少包含两种微量 元素。含量不低于 0.1%的单一微量元素均应计入微量元素含量中。 2、大量元素水溶肥料液体产品技术指标（标准号NY1107-2006) 项目指标 大量元素含量， g/L≥500 微量元素含量， g/L≥5 水不溶物含量， g/L≤50 PH值(1:250 倍稀释) 3.0-7.0 注： a 大量元素含量指 N、 P2 O5、 K2O 含量之和。大量元素单一养分含量不低于 60g/L 。 b微量元素含量指铜、铁、锰、锌、硼、钼元素含量之和。产品应至少包含两种微量 元素。含量不低于 1g/L 的单一微量元素均应计入微量元素含量中。 3、微量元素水溶肥料固体产品技术指标(标准号 NY1428-2007) 项目指标 微量元素含量，%≥10.0 水不溶物含量，%≤ 5.0 PH值(1:250 倍稀释) 3.0-7.0 水分 (H2O)，%≤ 6.0 注：微量元素含量指铜、铁、锰、锌、硼、钼元素含量之和。产品应至少包含两种微量元素。含量不低于 0.1%的单一微量元素均应计入微量元素含量中。钼元素含量不高于 1.0%。
微生物肥料生产新技术
精心整理 ?微生物肥料生产新技术 一、微生物肥料生产新工艺及流程 一般传统的微生物肥料生产工艺是：保藏菌种→斜面菌种培养活化→摇瓶扩大培养→发酵罐液体发酵→按一定的比例用草炭吸附后包装或按一定的比例稀释后直 高。 活性、高含量微生物菌粉按一定比例直接加入或包衣到有机肥或复混肥料中，即可生产出符合国家农业部登记标准要求的微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料、微生物冲施肥、拌冲剂等产品。 具体工艺流程为：
（1）微生物菌剂工艺： 草炭或其他吸附剂+菌粉微生物固体菌剂或颗粒肥包装 （2）生物有机肥工艺： 有机肥粉状或颗粒+菌粉生物有机肥包装 （3 化肥（N、P、K）配料→混合→造粒 菌粉 （4 上述新工艺，工艺复杂、技术难度大、 的菌粉就是这种“芯片”，只需嫁接到你的产品中，即可生产出各种成分、含量的微生物肥料。所不同的是：高活性菌粉中的有效菌是国家已认可、明确用于农业生产的菌种，用于生产出来的各种微生物肥料均可获得农业部的微生物肥料登记证。 河北省生物工程技术公司提供的菌粉产品，采用现代化的生产设备，在工业化发酵生产生物肥料的基础上，将菌剂进一步浓缩低温脱水精制而成，实现了菌剂生产的规模化、现代化，保证了菌剂的质量，降低了成本。
二、高活性菌粉技术指标： 含（胶质芽孢杆菌）活性芽孢100亿/克个以上，有效期24个月 三、在微生物肥料生产中使用高活性菌粉的特点及优势 1、生产投资成本低 微生物肥料生产的投资主要是在微生物菌剂车间建设的投资，而通过添加高活性菌粉这一工艺，菌剂车间的投资便节省了。生产微生物肥料的准入门槛降低了， 2、技术工艺要求低 3 4 它的生产工艺严格，受季节和厂房设备等条件的限制较多，生产对市场的配合性差。高活性菌粉的添加不受季节、厂房、设备的限制；尤其是可随市场需求进行生产，这样就减少了产品库存和资金占压，降低了生产风险和市场风险。 5、适应市场变化，产品的多样性强 添加高活性菌粉可随时根据市场情况，设计产品配方，作成系列肥料，促进市场销售；例如：可稀释做成微生物接种剂、造粒做成生物有机复混肥、混合做
NY885-2004 农用微生物产品标识要求
NY885-2004 农用微生物产品标识要求 1 范围 本标准规定了农用微生物产品标识的基本原则、一般要求及标注内容等。 本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的农用微生物产品。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 191-2000 包装储运图示标志 GB 18382-2001 肥料标识内容和要求 GB 15063-2001 复混肥料(复合肥料) NY 525-2002 有机肥料 3 定义 本标准采用下列定义 3.1 农用微生物产品 microbial product in agriculture 农用微生物产品是指在农业上应用的含有目标微生物的一类活体制品。其主要指标是制品中的目标微生物的活菌含量，且表现出其特定的功效。农用微生物产品包括微生物菌剂和微生物肥料两大类。微生物菌剂按产品中特定的微生物种类或作用机理又可分为若干个种类，如根瘤菌菌剂，固氮菌菌剂，解磷类微生物菌剂，硅酸盐微生物菌剂，光合细菌菌剂，有机物料腐熟剂，促生菌剂，菌根菌剂，土壤生物修复剂等。微生物肥料类产品分为复合生物肥和生物有机肥。 3.2 标识 marking 用于识别农用微生物产品及其质量、数量、特征和使用方法所做的各种表示的统称。标识可以用文字、符号、图案以及其他说明物表示。 3.3 标签 label 用以表示产品其主要性能及使用方法等而附以必要的纸片、塑料片或者包装袋等容器的印刷部分。 3.4 容器 container 直接与产品相接触并可按其单位量运输或储存的密闭贮器（例如袋、瓶、桶等）。 3.5 总养分 total primary nutrient 总氮（N）、有效五氧化二磷(P2O5)和氧化钾(K2O)含量之和，以质量百分数计。 3.6 标明量 declarable content 在产品销售包装、产品标签或质量证明书中说明的有效成分含量。 4 基本原则 4.1 标识标注的所有内容，必须符合国家法律、法规和规章的规定，并符合相应产品标准的规定。 4.2 标识标注的所有内容，必须科学、真实、准确、通俗易懂。 4.3 标识标注的所有内容，不得以错误的、易引起误解的或欺骗性的方式描述或介绍农用微生物产品。 4.4 标识标注的所有内容，不得以直接或间接暗示性的文字、图形、符号导致用户或消费者将农用微生物产品或产品的某一性质与另一农用微生物产品混淆。 4.5 未经国家授权的认证、评奖等内容不得标注。 5 一般要求 产品标识应当清晰、牢固，易于识别。标注的所有内容应清楚并持久地印刷在统一的并形成反差的基底上，除产品使用说明外，产品标识应当标注在产品的销售包装上。若产品销售包装的最大表面的面积小于10cm2的，在产品销售包装上可以仅标注产品名称、生产者名称、生产日期和保质期，其他标识内容可以标注在产品的其他说明物上。
实验12-微生物菌种常用简易保藏法
实验15 微生物菌种保藏方法 一、实验原理 为了保持微生物菌种原有的各种优良特征及活力，使其存活，和丢失，不污染，不发生变异。根据微生物自身的生物学特点，通过人为的创造条件，使微生物处于低温、干燥、缺氧的环境中，以使微生物的生长受到抑制，新陈代谢作用限制在最低范围内，生命活动基本处于休眠状态，从而达到保藏的目的。 常用简易保藏法包括常规转接斜面低温保藏法、半固体穿刺保藏法、液体石蜡保藏法、含甘油培养物保藏法及沙土管保藏法等。由于这些保藏方法不需要特殊实验设备，操作简便易行，故为一般实验室及生产单位所广泛采用。 常规转接斜面低温保藏法和半固体穿刺保藏法是将在斜面或半固体培养基上已生长好的培养物置于4-5℃冰箱中保藏，并定期移植。这两种方法都是利用低温抑制微生物生长繁殖，从而延长保藏时间。 液体石蜡保藏法是在新鲜的斜面培养物上，覆盖一层已灭菌的液体石蜡，再置于4-5℃冰箱中保藏。液体石蜡主要起隔绝空气的作用，使外界空气不与培养物直接接触，从而降低对微生物氧的供应量。培养物上面的液体石蜡层也能减少培养基水分的蒸发。故此法是利用缺氧及低温双重抑制微生物生长，从而延长保藏时间。 含甘油培养物保藏法是在液体的新鲜培养物中加入15%已灭菌的甘油，然后再置于-20或-70℃冰箱内保藏。此法是利用甘油作为保护剂，甘油透入细胞后，能强烈降低细胞的脱水作用，而且，在-20或-70℃条件下，可大降低细胞代谢水平，但却仍能维持生命活动状态，达到延长保藏时间的目的。 沙土管保藏法，将待保藏菌种接种于适当的斜面培养基上，经培养后，制后孢子悬浮液，无菌操作将孢子悬浮液滴入已灭菌的沙土管中，孢子即吸附在沙土上，将沙土管置于真空干燥器中，通过抽真空达到吸干沙土管中水分，然后将干燥器置于4℃冰箱中保存。此法利用干燥、缺氧、缺乏营养、低温等因素综合抑制微生物生长繁殖，从而延长保藏时间。 二、操作步骤 (一) 斜面传代保藏法 l．贴标签取各种无菌斜面试管数支，将注有菌株名称和接种日期的标签贴上，贴在试管斜面的正上方，距试管口2～3cm处。 2．斜面接种将待保藏的菌种用接种环以无菌操作法移接至相应的试管斜面上，细菌和酵母菌宜采用对数生长期的细胞，而放线菌和丝状真菌宜采用成熟的袍子。 3．培养细菌37℃恒温培养18～24h，酵母菌于28～30℃培养36～60h，放线菌和丝状真菌置于28℃培养4～7d。 4．保藏斜面长好后，可直接放入4℃冰箱保藏。为防止棉塞受潮长杂菌，管口棉花应用牛皮纸包扎，或换上无菌胶塞，亦可用熔化的固体石蜡熔封棉塞或胶塞。
叶虹时光微生物菌剂简介
叶虹时光微生物菌剂简介 我国大部分农田因长期片面和过量使用化肥农药，已造成土壤盐碱板结沙化、肥力下降、微生态环境失衡，作物生理性缺素和重茬病害连作障碍，农药用量增加、农产品品质下降等问题日益严重。推行平衡施肥、生态施肥方法，是改良土壤、提高肥力、实现持续稳产增产优质的根本措施之一。 土壤是天赋的植物营养库，土壤肥力的形成起源于阳光、空气、雨露和微生物，并逐步形成了以阳光、空气、雨露、微生物和动植物腐殖质为主体的土壤肥力有机循环和提高体系。 植物生长需要碳、氢、氧、氮、磷、钾、硅、钙、硫、镁、铁、铜、硼、钼、锌等十七种重要营养元素。常规化肥能提供氮磷钾；微生物肥料能够分解土壤矿物质，并释放其中的各种有效和速效养分，并减少化肥固定残留、提高其利用率、改善土壤团粒结构、提高土壤肥力，同时能平衡营养、强壮植株、减轻病害侵染；充分腐熟的有机肥料能增加土壤有机养分、提高土壤蓄水蓄肥能力、减少施生粪导致的土传和气传病害。因此，将氮磷钾化肥、微生物菌肥、腐熟有机肥料科学配合施用，是推动沃土肥田和高效生态农业可持续健康发展的根本途径。 叶虹时光微生物菌剂是河北农业大学朱宝成教授和河北大学张 爱民教授共同带领两校的微生物团队历经几年的科研探索及田间试 验而研制成功的新型生物肥料制剂，该制剂与市场常规生物肥料比较具有“两高两低三耐”特点，即工业化水平高、含菌量高；含水量低、
使用成本低；耐高温、耐高渗、耐储存。经国内外同行专家验收认定项目达到国际先进水平，获河北省科技进步三等奖。 叶虹时光微生物菌剂的作用机理 当农作物施用或者接种叶虹时光微生物菌剂以后，胶冻样类芽孢杆菌在植物根际进行大量繁殖，同时分泌酶类、多糖、激素、氨基酸和其他代谢产物，一方面直接刺激作物生长发育，同时分解转化土壤中多种矿物质为可溶性成分，供作物吸收利用，解决作物缺素，另外通过微生物及其代谢产物和植物进行相互作用，诱导作物产生抗性蛋白，增强作物对不良条件和病虫害的侵染。 叶虹时光微生物菌剂的增产原因： 叶虹时光微生物菌剂是一种生物肥料，含有繁殖力极强的高活性土壤有益微生物，施入土壤后，在作物根际进行大量繁殖，分泌多种有机酸、酶类物质，破坏含磷、钾矿物的晶格结构，从而将土壤固定态的磷、钾转化为作物可以吸收利用的速效钾和速效磷，降低化学磷钾肥的用量，避免过量施用化学肥料对于土壤和环境的污染。 胶冻样类芽孢杆菌在释放磷、钾营养的同时，也可以释放镁、铁、钙、硼和钼等营养元素，全面提供作物所需的营养，减轻作物的缺素症及其他生理病害，改善作物的商品性状，提高商品等级。 叶虹时光微生物菌剂可以降低化肥在土壤中的固定，提高化肥的利用率，同时加速秸秆还田地块有机质的腐解。 叶虹时光微生物菌剂所含高活性有益微生物通过在土壤中大量
微生物菌种保藏方法
微生物菌种保藏方法 1、传代保存法：有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时，会很快死亡，因此在这种情况下，只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生产菌种的保存。 传代保存时，培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙。 一般地，大多数菌种的保藏温度以5℃为好，像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存，而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。 传代培养保存法虽然简便，但其缺点也很明显，如：①菌种管棉塞经常容易发霉；②菌株的遗传性状容易发生变异；③反复传代时，菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低；④需要定期转种，工作量大；⑤杂菌的污染机会较多。 2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。此法可防止干燥，并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。其具有方法简便的优点，同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物（如产孢能力低的丝状菌）的保存，而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。 3、载体保存法：即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下几种，如： ①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌种的保藏。方法是在灭菌的土壤中加入菌液，立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥，然后冷藏或在室温下密封保存。保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
微生物肥料新型肥料
新型肥料的种类和介绍 微生物肥料 微生物肥料的三种产品： 1、农用微生物菌剂 农用微生物菌剂（简称菌剂类产品）是由一种或一种以上的功能微生物（有效活菌）经工业化生产增值后直接使用，或经浓缩或经载体吸附而制成的活菌制品。特点是菌数高、用量少，使用各种功能菌种，产品品种多。使用范围广，可以用在作物、土壤、秸秆、农残种类，比如大田作物、蔬菜、果树及其它经济类作物。可以做基肥、追肥，可沟施或穴施，也可用来拌种、浸种、蘸根或叶面喷施，具体因菌肥类型而异。 微生物肥料使用时一定注意勿使长时间暴露在阳光下，以免紫外线杀死肥料中的微生物。配伍禁忌是另一个必须注意的问题，有的产品不宜与化肥混施，尤其是一些与固氮有关的微生物肥料不宜与化学氮肥混施。杀菌剂(杀细菌制品)不能与各种微生物肥料混用，以免杀死其中的有效菌。 2、复合微生物肥料 复合微生物指目的微生物经工业化生产增值后与营养物质（氮磷钾等）复合而成的活菌制品。粉剂和颗粒剂型产品中的氮磷钾总含量一般不高于25%，在6%~25%范围内；液体剂型产品在4%以上，可做基肥和追肥;稀释500倍做叶面肥。储存方面一定需要注意的是，要储存在阴凉、干燥、通风的库房里，不要露天堆放，以防日晒雨淋，避免一些不良条件的影响。 3、生物有机肥标 生物有机肥是由特定功能微生物与主要以动植物残体（如畜禽粪便、农作物秸秆等）为来源并经无害化处理、附属的有机物料复合而成的一类兼具微生物和有机肥效应的肥料。 在施用生物有机肥的时候要牢记三个要点，首先，首先有机肥能改良土壤。现在化肥、农药施用量居高不下，土壤板结严重，有机质含量下降，化肥用量加大而土壤保肥功能减弱，使投入产出比例失调。为了提高农产品的产量与质量，必须从改良土壤的生态环境(温、光、水、养、气等)入手，改变作物的生存环境，