苏云金芽孢杆菌SFZZ-03菌株发育过程的电镜观察

第３５卷第５期２０１６年１０月

电一子一显一微一学一报

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＥｌｅｃｔｒｏｎＭｉｃｒｏｓｃｏｐｙＳｏｃｉｅｔｙ

Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ ５２０１６?１０

文章编号：１０００?６２８１（２０１６）０５?０４３６?０４一一

苏云金芽孢杆菌ＳＦＺＺ－０３菌株发育过程的电镜观察

刘一忱１?，郭志红２

（１．中国医科大学细胞生物教研室，辽宁沈阳１１０１２２；

２．国家林业局森林病虫害防治总站，辽宁沈阳１１００３４）

摘一要一一本文应用透射电子显微镜观察了在林业方面具有开发利用价值的苏云金芽孢杆菌ＳＦＺＺ０３菌株在牛肉膏蛋白胨液体培养基中的发育历期三本实验在发酵的不同时间进行取样，经过电镜样品前期处理，在透射电镜下观察ＳＦＺＺ０３菌株的细胞分裂，芽孢二伴孢晶体的形成，不仅详细阐述了ＳＦＺＺ０３菌株的发育过程，而且初步判断了伴孢晶体二芽孢的最大产量期，为今后的大规模生产确定种子罐培养时间二发酵罐培养时间提供了参考数值三同时也为筛选高产量伴孢晶体菌株提供了一种有效的测定方法三

关键词一一苏云金芽孢杆菌；透射电子显微镜；伴孢晶体；芽孢；发育过程

中图分类号：Ｑ９３９ １２４；Ｑ３３６一一文献标识码：Ａ一一ｄｏｉ：１０ ３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００?６２８１ ２０１６ ０５ ０１０

一收稿日期：２０１５－１０－１４；修订日期：２０１６－０６－１５一作者简介：刘忱（１９８７－），女（汉族），辽宁沈阳人，助理实验师．Ｅ?ｍａｉｌ：５３７７０２１６７＠ｑｑ．ｃｏｍ

?通讯作者一一苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ，Ｂｔ），是一种包括许多变种的产晶体芽孢杆菌三最初是从德国苏

芸金（Ｔｈｕｒｉｎｇｅｎ）地区的一个面粉厂里自然死亡的地中海粉螟中分离出来的，对昆虫具有致病性，１９１５

年正式定为此名三苏云金芽孢杆菌可用做昆虫的微生物源低毒杀虫剂，以胃毒作用为主三在芽孢形成期可产生具有杀虫活性的伴孢晶体，使害虫停止取食，最后因饥饿而死亡三研究表明，苏云金芽孢杆菌对鳞翅目二直翅目二双翅目二膜翅目二鞘翅目等９个目

５００多种昆虫具有不同活性的致病力，同时还对线虫二螨虫等有害生物具有毒杀作用［１－２］三因而广泛应用于十字花科蔬菜二茄果类蔬菜二瓜类蔬菜二烟草二

水稻二小米二高粱二大豆二花生二甘薯二棉花二茶树二苹果二梨二桃二枣二柑橘二沙棘等多种作物的害虫杀灭工作三林业方面也应用于天幕毛虫二美国白蛾二松毛虫等林业害虫的防治工作三

该杀虫剂在害虫取食后２天左右见效，持效期约１天，是一种安全无毒的杀虫剂三同时对昆虫具高度特异性，对人类二哺乳类二鸟类二鱼类较为安全［３］三目前苏云金杆菌商品制剂已达１００多种，是世界上应用最广二产量最高二用量最大的微生物杀虫剂，已被广泛用于农业二林业及卫生害虫的防治三但是，商品Ｂｔ制剂在生产和应用上还存在着一些缺陷，例如速效性差二杀虫谱窄二持效期短以及重组工程菌株遗传性状不稳定等问题都亟待解决三为了提

高Ｂｔ制剂的杀虫效果，对其增效途径的研究已成为世界性的研究热点，主要包括：筛选高效菌株二利用化学添加剂二几丁质酶作为增效物质；昆虫病原微生物间的互作增效等［４］三

本实验选取对园林害虫天幕毛虫有较强毒杀作

用的苏云金芽孢杆菌ＳＦＺＺ?０３菌株在牛肉膏蛋白胨液体培养基中３０?条件下震荡培养，不同时间取样三经固定二脱水二包埋二切片二染色后在透射电子显微镜下观察三ＳＦＺＺ?０３菌株营养体细胞为杆状，较为粗壮，培养３０ｈ后可形成较营养体更为粗壮的芽孢囊，培养３６ ３８ｈ后芽孢囊开始破裂，释放出卵圆形的芽孢和菱形二方形等不同形态的晶体三

实验重点研究了ＳＦＺＺ?０３菌株在牛肉膏蛋白胨液体培养基中的芽孢二伴孢晶体的发育过程，为今后将苏云金杆菌ＳＦＺＺ?０３投入大规模发酵罐生产奠定理论基础三

１一材料与方法

１ １一供试菌株

实验所用菌株是本实验室经过多次筛选，对林业害虫天幕毛虫有较高致死作用的苏云金芽孢杆菌ＳＦＺＺ?０３菌株三

１ ２一仪器设备

超净工作台（德国ｋ?ｔｔｅｒｍａｎｎ８５８０），涡旋摇床（德国ＧＦＬ３０２２），透射电子显微镜（日立Ｈ－

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