肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析
发表时间：2018-02-02T15:22:23.477Z 来源：《临床医学教育》2017年12月作者：邹单东韦柳华程红革[导读] 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。
广西医科大学第四附属医院广西柳州545005 [摘要] 目的：了解肺泡灌洗液中细菌种类及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定及药敏试验。结果：灌洗液细菌培养阳性率56.2%；195例细菌中革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%；主要细菌依次是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。主要革兰阴性菌对亚胺培南耐药率为0～15.1%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰
胺酶 (ESBLs)阳性率为62.5%、64.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为60.0%，细菌多药耐药现象严重。结论：不同细菌对抗菌药物的耐药性不同，灌洗液细菌培养及药敏试验可为临床合理用药提供依据。 [关键词] 肺泡灌洗液；细菌分布；耐药性 [Abstract] Objection: in order to understand the type of bacteria and susceptibility test results in irrigating solution, and provide an according to rational use of drug for clinical.Methods: the instrument of identification and susceptibility test is Microscan Autoscan-4, USA.Result: the positive rate of irrigating solution is 56.2%; the Gram-negative bacteria has 90.8% in these 195 bacterias, and Gram-positive bacteria has 9.2%; the main type of these bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii . the tate of the bacterias, which resist to imipenem, is 0~15.1% in these Gram-negative bacterias; the rate of Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii, which product ESBLs, is 62.5%、64.1%,respectively; and the rate of MRSA is 60.0%. and the phenomenon of multidrug resistant is Very serious.Conclusion: the drug resistance of bacteria is differrent, the bacterial culture and susceptibility test results of irrigating solution can provide basis of rational drug use for clinical. [Key words] irrigating solution; Bacteria distribution; drug resistanc 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障，临床价值有限。肺泡灌洗液与痰液相比，对下呼吸道感染诊断具有更高特异性和敏感性，同时细菌药敏结果对临床抗感染治疗更具价值【l】。因此，我们对2010年从肺泡灌洗液中分离到的195例细菌的药敏结果进行回顾性分析，以期为临床抗感染治疗提供依据，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源 251例灌洗液为2010年我院住院患者予以纤支镜支气管肺泡灌洗治疗后采集所得。同一患者多次分离到的细菌不重复计入。
1.2 细菌鉴定和药敏试验采用Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定和药敏试验。药敏试验判断标准、结果解释、MRSA、ESBLs检测参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准【2】。定期用标准菌株做药敏质量控制。
1.3 数据处理数据均由WHONET 5.4软件分析处理所得。
2 结果
2.1 细菌分布 251例灌洗液细菌培养阳性率为56.2%(141/251)。共分离细菌195例，革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%，细菌构成比见表1。
2.2药敏结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs株为10例、25例，阳性率为62.5%、64.1%，MRSA 6例，检出率为60.0%。主要细菌对抗菌药物的耐药率，见表2。
支气管肺泡灌洗液检查
支气管肺泡灌洗液检查 痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。 支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。 一、标本采集和处理 通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例； ②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。 二、细胞学检查 1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106/L。 2．淋巴细胞亚群分析：BALF中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者BALF中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。 3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。 注：Mac巨噬细胞；Lym淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析 摘要] 目的：了解肺泡灌洗液中细菌种类及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定及药敏试验。结果：灌洗液细菌培养阳性率56.2%；195例细菌中革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%；主要细菌依次是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。主要革兰 阴性菌对亚胺培南耐药率为0～15.1%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)阳性率为62.5%、64.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检 出率为60.0%，细菌多药耐药现象严重。结论：不同细菌对抗菌药物的耐药性不同，灌洗液细菌培养及药敏试验可为临床合理用药提供依据。 [关键词] 肺泡灌洗液；细菌分布；耐药性 [Abstract] Objection: in order to understand the type of bacteria and susceptibility test results in irrigating solution, and provide an according to rational use of drug for clinical.Methods: the instrument of identification and susceptibility test is Microscan Autoscan-4, USA.Result: the positive rate of irrigating solution is 56.2%; the Gram-negative bacteria has 90.8% in these 195 bacterias, and Gram-positive bacteria has 9.2%; the main type of these bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii . the tate of the bacterias, which resist to imipenem, is 0~15.1% in these Gram-negative bacterias; the rate of Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii, which product ESBLs, is 62.5%、 64.1%,respectively; and the rate of MRSA is 60.0%. and the phenomenon of multidrug resistant is Very serious.Conclusion: the drug resistance of bacteria is differrent, the bacterial culture and susceptibility test results of irrigating solution can provide basis of rational drug use for clinical. [Key words] irrigating solution; Bacteria distribution; drug resistanc 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原 诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障，临床价值有限。肺泡 灌洗液与痰液相比，对下呼吸道感染诊断具有更高特异性和敏感性，同时细菌药 敏结果对临床抗感染治疗更具价值【l】。因此，我们对2010年从肺泡灌洗液中 分离到的195例细菌的药敏结果进行回顾性分析，以期为临床抗感染治疗提供依据，现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本来源 251例灌洗液为2010年我院住院患者予以纤支镜支气管肺泡灌洗治疗后采集所得。同一患者多次分离到的细菌不重复计入。 1.2 细菌鉴定和药敏试验采用Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作 鉴定和药敏试验。药敏试验判断标准、结果解释、MRSA、ESBLs检测参照美国临 床实验室标准化协会(CLSI)标准【2】。定期用标准菌株做药敏质量控制。 1.3 数据处理数据均由WHONET 5.4软件分析处理所得。 2 结果 2.1 细菌分布 251例灌洗液细菌培养阳性率为56.2%(141/251)。共分离细菌195例，革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%，细菌构成比见表1。
RED-C-001.03-V1.0肺泡灌洗液标本采集的标准操作规程(优质参考)
文件名称支气管肺泡灌洗液标本采集 的标准操作规程 编码RED-C-001.03-V1.0 文件类型标准操作规程文件页数共4页 编订部门呼吸内科 专业 编订人编订日期年月日 审核部门呼吸内科 专业 审核人审核日期年月日 批准人批准日期年月日颁发部门GCP办公室生效日期年月日分发部门 本文件为郑州市第一人民医院产权所有机密；未经相关部门许可, 不得擅自使用、泄露、公布及出版 目录 1. 目的： (2) 2. 范围： (2) 3. 责任人 (2) 4. 依据： (2) 5. 定义： (2) 6. 内容： (2) 7. 附件： (3)
1.目的： 建立支气管镜检查肺泡灌洗术标准操作规程，使检查过程规范化，保证支气管镜检查及肺泡灌洗治疗的进行，保肺泡灌洗液检验结果的可靠性。 2.范围： 适用于II~IV期所有临床试验中支气管镜检查中操作 3.责任人： 专业负责人 4.依据： 支气管镜术指南（2009版）及科室相关标准操作规程。 5.定义： 利用肺泡灌洗术治疗肺部疾病及明确病因 6.内容： 6.1灌洗方法： ?术前与家属谈话，告知支气管镜检查目的、检查可能引起的风险后果、应对措施，以及不同意检查后的替代治疗方法及后果，并由法定监护人或法定监护人授权委托人签署知情同意书。填写支气管镜检查申请单。 ?术前3-4h禁食。术前口服可待因0.06g，有条件时刻雾化吸入利多卡因0.1g，将患者、相应病历、检查结果、影像学检查原件带入内镜中心气管镜室。床边检查者，于床边进行上述步骤。 ?术前核对患者姓名、性别、年龄、住院号，核对申请单及确认知情同意书。 打开支气管镜检查工作电脑及工作站，登入患者信息后进入检查图像获取界面，确认工作情况良好。 ?患者术前用2%利多卡因鼻腔、气道局部粘膜喷洒或滴入麻醉。 ?将患者平躺于检查床，予床单或约束带固定，吸氧鼻导管口放入左鼻孔，用医用透明胶带固定，眼部用单层消毒纱布覆盖，以免水及其他液体滴入眼中。 并接心电监护仪，确认氧饱和度>90%（氧饱和度具体数值视患者病情轻重程度而定）。 ?由助手固定患者头部，操作医生带好一次性消毒手套，将支气管镜连接部件与工作站连接好，并打开光源及视频采集，术中严格无菌操作，防止继发感
支气管肺泡灌洗液细菌培养及药敏试验在重症监护病房的肺炎诊治中的价值
支气管肺泡灌洗液细菌培养及药敏试验在重症监护病房的肺炎诊治中的价值 【摘要】目的探讨支气管肺泡灌洗液（BALF）细菌培养及药敏试验在重症监护病房（ICU）的肺炎诊治中的价值。方法选取2010年10月至2012年08月收住我院重症医学科重症监护病房(ICU)的肺部感染并行气管插管或气管切开机械通气的患者126例，经人工气道留取痰培养，同时行支气管肺泡灌洗，BALF及痰液做细菌培养和药敏试验。结果 BALF细菌培养阳性率为65.2%，常规痰培养阳性率46.03%。培养前3位细菌分别为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌，其对头孢西丁、头孢他啶、氨苄西林的耐药率超过90%，鲍曼、铜绿对亚胺培南耐药率超过50%，氨基糖苷类药物仍保持较高的敏感性。结论经纤支镜获取BALF 培养，可获得相对更高的阳性结果，药敏结果对ICU的肺炎临床治疗具有指导意义。 【关键词】细菌；支气管肺泡灌洗液；ICU；肺炎 在重症监护室下呼吸道感染是临床最为常见的感染，其病原菌种类多、耐药率高，导致较高的死亡率。目前病原诊断主要采用痰培养，常规经口留取痰培养，由于受口咽部污染可能大，诊断价值有限。本文旨在探讨经纤维支气管镜肺泡灌洗液对肺部感染病原学诊断的价值。 1.资料与方法 1.1 病例收集选取2010年10月至2012年08月收住我院ICU的肺部感染并行气管插管或气管切开机械通气的患者126例，男52例，女74例，年龄38—97岁，平均75．67岁；经口或经鼻气管插管104例，气管切开22例。大部分患者在行纤维支气管镜检查前反复应用广谱抗菌药物时间>1周，其中2种药物联合2周者120例，占95.24％。基础病：慢性阻塞性肺疾病61例，重症肺炎23例，中风后遗症33例，外伤5例，肿瘤癌术后4例。以上患者均符合以下条件：发热，体温>38℃；气道分泌物黏稠，呈黄色或黄白色；肺内均可闻及不同程度湿罗音或干罗音；外周血白细胞计数>10×10 儿或<4×10 ／L；中性粒细胞增多>70％；肺部影像学检查均显示双肺或多肺叶浸润性病灶；需行机械通气治疗。排除标准：有严重的心律失常或有出血倾向。 1.2 纤支镜检查及BALF收集方法所有患者利多卡因局部麻醉下行纤支镜检查并行支气管肺泡灌洗，纤支镜先端插入病变部位支气管开口处，以1 mL／(kg·次)的温盐水(37℃，9 g ／L)灌洗3次，随即通过负压吸引将BALF回收入灭菌痰液收集器中送细菌培养，并进行药敏试验。行纤支镜前予吸痰管经人工气道留取痰液，两种标本均立即送至细菌室，置营养肉汤增菌培养后分别接种于5％羊血平板和巧克力平板。BALF培养菌落菌落≥104CFU／ml，痰培养菌落≥105CFU／ml，两种采样方法检出的草绿色链球菌和低于以上菌落计数的细菌作为阴性结果。 1.3 统计学处理采用WHONET软件统计菌株数和耐药率，用SPSS13．0统计软件进行分析，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。 2.结果 2.1细菌的检出率 BALF细菌培养阳性75例，阳性率为65.20%，其中两种病原菌混合感染的20例，占26.67%，常规痰培养阳性58例，阳性率46.03%，两种以上病原菌感染的15例，占20.55%，两种采样方法阳性率比较存在统计学差异（P<0.05） 2.2 细菌分布本研究126例患者均行常规取痰和经纤维支气管镜肺泡灌洗。BALF细菌培养分离革兰氏阳性菌8例，占8.42%，革兰氏阴性菌85例，占89.47%，真菌2例，占2.11%。两种采样方法细菌培养分布结果见表1。 表1 两种采样方法细菌培养阳性结果比较 分离细菌BALF培养菌株构成常规痰培养菌株构成 鲍曼不动杆菌23（24.21）19（26.03） 铜绿假单胞菌17（17.89）14（19.18）
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析 发表时间：2018-02-02T15:22:23.477Z 来源：《临床医学教育》2017年12月作者：邹单东韦柳华程红革[导读] 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。 广西医科大学第四附属医院广西柳州545005 [摘要] 目的：了解肺泡灌洗液中细菌种类及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定及药敏试验。结果：灌洗液细菌培养阳性率56.2%；195例细菌中革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%；主要细菌依次是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。主要革兰阴性菌对亚胺培南耐药率为0～15.1%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰 胺酶 (ESBLs)阳性率为62.5%、64.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为60.0%，细菌多药耐药现象严重。结论：不同细菌对抗菌药物的耐药性不同，灌洗液细菌培养及药敏试验可为临床合理用药提供依据。 [关键词] 肺泡灌洗液；细菌分布；耐药性 [Abstract] Objection: in order to understand the type of bacteria and susceptibility test results in irrigating solution, and provide an according to rational use of drug for clinical.Methods: the instrument of identification and susceptibility test is Microscan Autoscan-4, USA.Result: the positive rate of irrigating solution is 56.2%; the Gram-negative bacteria has 90.8% in these 195 bacterias, and Gram-positive bacteria has 9.2%; the main type of these bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii . the tate of the bacterias, which resist to imipenem, is 0~15.1% in these Gram-negative bacterias; the rate of Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii, which product ESBLs, is 62.5%、64.1%,respectively; and the rate of MRSA is 60.0%. and the phenomenon of multidrug resistant is Very serious.Conclusion: the drug resistance of bacteria is differrent, the bacterial culture and susceptibility test results of irrigating solution can provide basis of rational drug use for clinical. [Key words] irrigating solution; Bacteria distribution; drug resistanc 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障，临床价值有限。肺泡灌洗液与痰液相比，对下呼吸道感染诊断具有更高特异性和敏感性，同时细菌药敏结果对临床抗感染治疗更具价值【l】。因此，我们对2010年从肺泡灌洗液中分离到的195例细菌的药敏结果进行回顾性分析，以期为临床抗感染治疗提供依据，现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本来源 251例灌洗液为2010年我院住院患者予以纤支镜支气管肺泡灌洗治疗后采集所得。同一患者多次分离到的细菌不重复计入。 1.2 细菌鉴定和药敏试验采用Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定和药敏试验。药敏试验判断标准、结果解释、MRSA、ESBLs检测参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准【2】。定期用标准菌株做药敏质量控制。 1.3 数据处理数据均由WHONET 5.4软件分析处理所得。 2 结果 2.1 细菌分布 251例灌洗液细菌培养阳性率为56.2%(141/251)。共分离细菌195例，革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%，细菌构成比见表1。 2.2药敏结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs株为10例、25例，阳性率为62.5%、64.1%，MRSA 6例，检出率为60.0%。主要细菌对抗菌药物的耐药率，见表2。
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果的分析
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果的分析 发表时间：2018-03-20T09:52:21.447Z 来源：《临床医学教育》2018年1期作者：邹单东韦柳华程红革[导读] 呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障 广西医科大学第四附属医院广西柳州 545005 [摘要] 目的：了解肺泡灌洗液中细菌种类及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定及药敏试验。结果：灌洗液细菌培养阳性率56.2%；195例细菌中革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%；主要细菌依次是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。主要革兰阴性菌对亚胺培南耐药率为0～15.1%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰 胺酶 (ESBLs)阳性率为62.5%、64.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为60.0%，细菌多药耐药现象严重。结论：不同细菌对抗菌药物的耐药性不同，灌洗液细菌培养及药敏试验可为临床合理用药提供依据。 [关键词] 肺泡灌洗液；细菌分布；耐药性 [Abstract] Objection: in order to understand the type of bacteria and susceptibility test results in irrigating solution, and provide an according to rational use of drug for clinical.Methods: the instrument of identification and susceptibility test is Microscan Autoscan-4, USA.Result: the positive rate of irrigating solution is 56.2%; the Gram-negative bacteria has 90.8% in these 195 bacterias, and Gram-positive bacteria has 9.2%; the main type of these bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii . the tate of the bacterias, which resist to imipenem, is 0~15.1% in these Gram-negative bacterias; the rate of Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii, which product ESBLs, is 62.5%、64.1%,respectively; and the rate of MRSA is 60.0%. and the phenomenon of multidrug resistant is Very serious.Conclusion: the drug resistance of bacteria is differrent, the bacterial culture and susceptibility test results of irrigating solution can provide basis of rational drug use for clinical. [Key words] irrigating solution; Bacteria distribution; drug resistance 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障，临床价值有限。肺泡灌洗液与痰液相比，对下呼吸道感染诊断具有更高特异性和敏感性，同时细菌药敏结果对临床抗感染治疗更具价值【l】。因此，我们对2010年从肺泡灌洗液中分离到的195例细菌的药敏结果进行回顾性分析，以期为临床抗感染治疗提供依据，现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本来源 251例灌洗液为2010年我院住院患者予以纤支镜支气管肺泡灌洗治疗后采集所得。同一患者多次分离到的细菌不重复计入。 1.2 细菌鉴定和药敏试验采用Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定和药敏试验。药敏试验判断标准、结果解释、MRSA、ESBLs检测参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准【2】。定期用标准菌株做药敏质量控制。 1.3 数据处理数据均由WHONET 5.4软件分析处理所得。 2 结果 2.1 细菌分布 251例灌洗液细菌培养阳性率为56.2%(141/251)。共分离细菌195例，革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%，细菌构成比见表1。 2.2药敏结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs株为10例、25例，阳性率为62.5%、64.1%，MRSA 6例，检出率为60.0%。主要细菌对抗菌药物的耐药率，见表2。
第二节 支气管肺泡灌洗液检查
第二节 支气管肺泡灌洗液检查 痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL ）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL 是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。 支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。 一、标本采集和处理 通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa 负压吸出，要防止负压过大，过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF 方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF 应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。 二、细胞学检查 1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF 细胞数见表13-1，正常人的BALF 含有核细胞为（5-10）×106/L 。 2．淋巴细胞亚群分析：BALF 中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR 等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者 BALF 中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。 3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF 沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。 表13-1 正常非吸烟者BALF 细胞 作者 年 例数 注入量 回收量（ %） 总细胞数（× 106） 细胞（× 106/ml ） Mac Lym Neut Eos Hunninghske 1983 8 100 52 14 ．0 26 ．9 93 7 0 0 北医大三院 1987 10 150 62 13 ．4 14 ．7 86 13 0 ．9 0 ．05 Ettensohn 1988 78 120 63 7 ．3 9 ．4 95 4 1 0 注：Mac 巨噬细胞； Lym 淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞 表13-2 正常非吸烟者 BALF 中淋巴细胞表面抗原表型 作者 年 例数 淋巴细胞（ %） 总 -?/FONT>T TH TS H ：S B 细胞 Yamada 1986 25 13 ．8 63 ．0 45 ．4 25 ．3 1 ．90 5 ．3 Wallaert 1987 12 7 ．7 66 ．4 48 ．4 27 ．5 1 ．8 ?/FONT> 三、可溶性物质检查 BALF 离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份，例如各种蛋质、酶类、脂类等（表 13-3）。这些成分的来源有：①被动漏出者（如白蛋白、血清类粘蛋白）；②主动转运者；③局部产
肺泡灌洗液细胞计数
肺泡灌洗液细胞计数 1、开胸，游离出气管，，靠喉部结扎剪断气管。 2、向下贴着胸后壁分离出整个心肺。 3、留置针插入气管，350umL冰冻生理盐水灌洗，共3次，每次反复灌吸3个回合。 4、灌洗液1200g，4℃离心10分钟。 5、取上清保存-20℃冰箱用于蛋白检测，重悬浮下部细胞用于细胞计数。 1.小鼠肺泡灌洗时总量为350uL×3次，估计收集的好的话，有1mL回收。立即放入ice中。 2.离心，弃上清，在沉淀中加入200uL 红细胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer），1分钟后加入1mL NS或者PBS，离心， 3，弃上清，如果沉淀的红色还是很厉害，可以再做一次第二步。 4，沉淀用NS或者PBS 100mL 重悬，取10mL在计数板计数。 整个过程应该都在on ice的状态下进行，以防细胞死亡。 - Centrifuge 2000rpm 4°C 5min BAL - preparing CASY: empty measurement: if count >50 units, cleaning program, repeat empty measurement - fill tube with 10ml CASY fluid - SN of BAL to new Eppendorf tube, put in freezer - Pellet resuspend with 200μl cold PBS, shake it —> 10μl in CASY tube with 10ml CASY fluid - measure tube with CASY machine - after measurement, hit CLEAN, put a CASY tube under the probe, CYSA should never stay without tube covering the probe
支气管-肺泡灌洗检查技术操作规范(详细参考)
支气管-肺泡灌洗检查技术 【概述】 60年代后期随着可曲性纤维支气管镜（简称纤支镜）的开发与 应用，逐渐兴起支气管-肺泡灌洗（Bronchoalvoelar lavage）技术。1974年由Reynolds和Newball首次发表了有关BAL的文章，1989 年欧洲肺病学会建立了BAL协作组并报导了正常人和各种肺疾病患 者支气管-肺泡灌洗液（BALF）多中心检查结果。中华医学会呼吸分 会根据我国具体情况分别于1993年和2002年也制定出有关BALF细 胞学检查技术规范（草案），使此项检查技术在国内得到推广应用。由于BAL能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病 理过程的一种相对比较安全有用的检查方法。因此，BAL已成为某 些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病以及免疫受损患者肺部感染 等疾病的辅助临床诊断、病变活动性和预后判定的重要检测手段。【适应症】 1.凡能接受纤支镜检查患者均能承受支气管肺泡灌洗的检查。 2.弥漫性间质性肺疾病诊断：特发性肺纤维化、结节病、外源 性过敏性肺泡炎、结缔组织病伴肺纤维化、组织细胞增生症X 以及嗜酸细胞肺浸润等。 3.弥漫性肺部肿瘤和免疫受损患者肺部感染诊断，如卡氏肺孢 子虫肺炎、细支气管肺泡癌。 4.用于肺泡蛋白沉积症的诊断与治疗，行局部和全肺灌洗。
5.用于肺部感染细菌学检测及肺化脓症冲冼引流治疗。 【禁忌证】 1．凡纤支镜的禁忌证均为支气管肺泡灌洗的禁忌证。 2．精神高度紧张不能配合完成纤支镜检查患者。 3．严重通气和换气功能患者，PaO2小于50mmHg或吸氧状态下PaO2小于70mmHg。 4．冠心病、高血压病、心律失常、频发心绞痛患者。 5．主动脉瘤和食道静脉曲张有破裂危险的患者。 6．近期发热、咯血和哮喘发作患者。 【术前准备】 同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤支镜于活检刷检前做BAL。局部麻醉剂为2%利多卡因。 【操作程序】 1.灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中（B4或B5）或左肺舌叶，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL。 2.BAL操作步骤：①首先要在灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注入2%利多卡因1-2ml，做灌洗肺段局部麻醉；②然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶管快速注入37℃灭菌生理盐水。每次25-50ml,总量100-250ml，一般不超过300 ml；③立即用50-100mmHg负压吸引回收灌洗液，通常回收率为40-60%；④将回收液体立即用双层无菌沙布过滤除去粘液，并
间质性肺疾病的支气管肺泡灌洗检查
间质性肺疾病的支气管肺泡灌洗检查 支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage ,BAL）是经纤维支气管镜获取下呼吸道主要是肺泡来源的细胞与生化成分，分析探讨肺疾病病理学过程的一种比较安全而实用的技术。自从20世纪70年代开始应用BAL的操作技术，还是支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）的检测手段，检测项目及其应用范围都有了长足的进步。许多国家的医学团体包括我国还先后制定并发表了指南性意见，规范了BAL技术操作及BALF实验室处理过程，使其结果更加标准可靠，从而进一步促进了BAL的发展和应用，使其作为研究肺疾病的一种检查手段得到了广泛的认可。最新发布的关于结节病和特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）的诊断和治疗的国际性联合声明也将BAL推荐为常规诊断手段。 一、支气管支气管肺泡灌洗的应用指征 因为相对无创，没有明显的并发症，患者容易耐受，所以BAL目前已经成为肺活检的替代或补充手段，用于各种原因引起的弥漫性实质性肺疾病的临床诊断、疗效判断与预后评价以及病理和发展机制的研究。临床上BAL检查主要用于感染性原因、非感染性原因（包括免疫性原因和肿瘤性原因）引起的弥漫性实质性肺部疾病（diffuse parenchyma lung disease,DPLD）或间质性肺疾病（interstitial lung disrase,ILD）的诊断和鉴别诊断（表6-1）。 在ILD的诊断过程中，BAL结果对于提示或除外某些疾病，缩小
鉴别诊断范围确定具有非常重要的意义。这些疾病主要包括结节病、外源性过敏性肺泡炎（extrinsic allergic alveolitis,EAA）、闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（bronchoaliotltis obliterans organizing pneumonia,BOOP）、慢性嗜酸性粒细胞肺炎（chronic rosinophilic pnrumonia,CEP）、特发性肺纤维化，药物性肺损伤、结缔组织疾病（connective tissue disease,CTD）等。如果临床和功能异常提示ILD，而胸片正常，这时有必要进行BAL，相反BAL结果正常，则可除外某些活动性ILD。 有时候，通过BAL也可以发现疾病的特征性异常，做出特异性的疾病诊断。这些疾病包括肺孢子菌（pneumocystis pneumonia PCP）、巨细胞病毒（cytomegalovirus ,CMV）性肺炎、肺结核、石棉沉着病、肺出血、肺部肿瘤或癌性淋巴管炎、肺泡蛋白沉积病症（pulmonary alveolar proteinosis,PAP）、肺朗格汉斯细胞组织增生症（pulmonary Langerhans cell histocytosis,PLCH）等。 表6-1 BAL对不同ILD的诊断价值 A．BAL（不需要活检）足以建立诊断的疾病（高敏感性，高特异性） a 肺泡蛋白沉积症 b 肺孢子菌肺炎 c 支气管肺癌 d 嗜酸性粒细胞性肺炎 B．BAL结合临床与HRCT特征足以建立诊断的疾病（高敏感性，
肺泡灌洗液细菌培养以及药敏结果分析
肺泡灌洗液细菌培养以及药敏结果分析 摘要] 目的：了解肺泡灌洗液中细菌种类及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定及药敏试验。结果：灌洗液细菌培养阳性率56.2%；195例细菌中革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%；主要细菌依次是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。主要革兰 阴性菌对亚胺培南耐药率为0～15.1%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)阳性率为62.5%、64.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检 出率为60.0%，细菌多药耐药现象严重。结论：不同细菌对抗菌药物的耐药性不同，灌洗液细菌培养及药敏试验可为临床合理用药提供依据。 [关键词] 肺泡灌洗液；细菌分布；耐药性 [Abstract] Objection: in order to understand the type of bacteria and susceptibility test results in irrigating solution, and provide an according to rational use of drug for clinical.Methods: the instrument of identification and susceptibility test is Microscan Autoscan-4, USA.Result: the positive rate of irrigating solution is 56.2%; the Gram-negative bacteria has 90.8% in these 195 bacterias, and Gram-positive bacteria has 9.2%; the main type of these bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii . the tate of the bacterias, which resist to imipenem, is 0~15.1% in these Gram-negative bacterias; the rate of Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii, which product ESBLs, is 62.5%、 64.1%,respectively; and the rate of MRSA is 60.0%. and the phenomenon of multidrug resistant is Very serious.Conclusion: the drug resistance of bacteria is differrent, the bacterial culture and susceptibility test results of irrigating solution can provide basis of rational drug use for clinical. [Key words] irrigating solution; Bacteria distribution; drug resistance 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原 诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障，临床价值有限。肺泡 灌洗液与痰液相比，对下呼吸道感染诊断具有更高特异性和敏感性，同时细菌药 敏结果对临床抗感染治疗更具价值【l】。因此，我们对2010年从肺泡灌洗液中 分离到的195例细菌的药敏结果进行回顾性分析，以期为临床抗感染治疗提供依据，现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本来源 251例灌洗液为2010年我院住院患者予以纤支镜支气管肺泡灌洗治疗后采集所得。同一患者多次分离到的细菌不重复计入。 1.2 细菌鉴定和药敏试验采用Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作 鉴定和药敏试验。药敏试验判断标准、结果解释、MRSA、ESBLs检测参照美国临 床实验室标准化协会(CLSI)标准【2】。定期用标准菌株做药敏质量控制。 1.3 数据处理数据均由WHONET 5.4软件分析处理所得。 2 结果 2.1 细菌分布 251例灌洗液细菌培养阳性率为56.2%(141/251)。共分离细菌195例，革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%，细菌构成比见表1。
2020ICU患者支气管肺泡灌洗液采集、送检、检测及结果解读规范
2020ICU患者支气管肺泡灌洗液采集、送检、检测及结果解读规范 与普通病房及病情相对稳定的患者相比。ICU环境微生态更为复杂，标本采集和送检污染机会多，危重症患者接受气管镜检查和支气管肺泡灌洗要求也更为苛刻，标本检测程序和结果解读需要精细准确。因此，ICU 危重症患者合格的BALF获取、及时送检、规范检测和结果的正确判读直接影响到患者的诊治，直接决定患者预后。因而有必要制定针对ICU危重症患者的BALF标本留取、送检、检测及结果解读规范。由中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组和中国医师协会呼吸医师分会危重症医学工作委员会牵头撰写ICU中BALF的操作规范，对提高BALF的诊断价值有积极意义。 支气管肺泡灌洗液（b ro n ch o al ve o l ar l a v age f l u i d，B AL F）的规范化采集和送检流程，是获得正确B A L F微生物学和细胞学结果的前提，而通过不恰当的操作方式获得的结果易误导临床诊疗。1999年欧洲呼吸学会颁布了"支气管肺泡灌洗技术规范化操作和非细胞成分检测指南"[1]，2012年美国胸科医师协会颁布了"B A L F的细胞学分析在肺间质性疾病中的临床应用"[2]，2017年中华医学会呼吸病学分会颁布了"肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识"[3]，均对支气管肺泡灌洗规范化操作流程提出具体指导意见，但上述指南或共识并不适用于重症监护病房（i n te n si ve c ar e u n i t，ICU）这一特殊医疗单元，亟需
制定针对I CU危重症患者的B A L F标本留取、送检及临床应用的操作规范。为此，中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组及中国医师协会呼吸医师分会危重症医学工作委员会联合制定了本规范，以期为I C U患者的B A L F采集、送检及临床应用提供标准化流程。 一、适应证与禁忌证 （一）适应证 1．危重症患者支气管-肺疾病的诊断及鉴别诊断。 2．明确重症肺炎的病原学。 3．明确支气管-肺部疾病的病因、发病机制等需要获取标本者。 4．下呼吸道疾病的内镜治疗（气道阻塞，黏痰或痰栓的清除等）[4,5]。 （二）禁忌证 危重患者接受支气管镜下肺泡灌洗无绝对禁忌证。相对禁忌证如下，并建议有经验的医师进行操作。 1．严重的低氧血症：鼻导管吸氧、面罩吸氧、经鼻高流量氧疗及无创呼吸机的患者吸氧浓度（F i O2）为0.9~1.0不能维持脉搏氧饱和度>90%；经气管插管机械通气患者呼气末正
支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范草案
?诊疗规范? 支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案） 中华医学会呼吸病学分会，!""!年#月 支气管肺泡灌洗（$%&）操作方法’’一、术前准备 同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做$%&。局部麻醉剂为!(利多卡因。 ’’二、$%&操作技术 ’’)*灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶（$)或$+）或左肺舌段，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行$%&。 ’’!*$%&操作步骤：（)）首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注入!(利多卡因),!-.，做灌洗肺段局部麻醉；（!）然后将纤支镜顶端紧密楔人段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶管快速注入/01灭菌生理盐水，每次!+,+"-.，总量)"",!+"-.，一般不超过/""-.；（/）立即用+",)""--23（)--234"*)//567）负压吸引回收灌洗液，通常回收率为#"(,8"(；（#）将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液，并记录总量；（+）装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中（减少细胞粘附），置于含有冰块的保温瓶中，立即送往实验室检查。支气管肺泡灌洗液（$%&9）实验室检查 ’’一、$%&9细胞总数和分类计数检测 ’’)*将上述回收灌洗液装入塑料离心管内，在#1下以)!"":;-<=离心)"-<=，上清（原液或)"倍浓缩）>0"1储存，用做可溶性成分的检测。 ’’!*经离心沉淀的细胞成分用27=5?@液（不含A7!B 、C3!B ）在同样条件离心冲洗!次，每次+-<=。弃去上清后加27=5’@液/,+-.制成细胞悬液。也可以应用灌洗原液以减少细胞丢失。 ’’/*在改良的DEFG7FE:计数台上计数$%&9中细胞总数， 一般以)H )"I ;&表示。如果细胞数过高时，再用27=5?@液稀释，调整细胞数为+H )"I ;&，并同时将试管浸入碎冰块中备用。’’#*细胞分类计数：采用细胞离心涂片装置，加入备用细胞悬液（细胞浓度为+H )"I ;&）)""!.，在#1下以)!"":;-<=离心)"-<=，通过离心作用 将一定数量的$%&9细胞直接平铺于载玻片上。取下载玻片立即用冷风吹干，置于无水乙醇中固定/"-<=后进行染色，一般别J:<3KL 或2M 染色。’’+*在#"倍光学显微镜下计数!""个细胞，进行细胞分类计数。’’二、$%&9中N 淋巴细胞亚群的检测 ’’)*采用间接免疫荧光法，将上述获得的$%&9细胞成分，用)"(小牛血清O6CP )8#"培养液/,+-.制成细胞悬液。 ’’!*将细胞悬液倒人平皿中，置于/01+(AQ !培养箱中孵育!K ，进行贴 壁处理，去除肺泡巨噬细胞。’’/*取出细胞悬液，再用27=5’@液冲洗离心)次，弃上清留!",)""!.。经贴壁处理后的细胞悬液中，肺泡巨噬细胞显著减少，淋巴细胞相对增多。’’#*将经贴壁处理的细胞悬液分装/个小锥形离心管内，每管!",/"!.，用微量加样器向标本中加单克隆抗体AR /，AR #和AR S 各!",#"!.，混匀置于#1冰箱中作用),!K 。 ’’+*取出标本，先用27=5’@液冲洗离心!次，以)!""":;-<=离心!"@，然 后加羊抗鼠荧光抗体各!",#"!.，置于#1冰箱作用/"-<=。’’8*取出标本用27=5’@液以同样速度和时间离心冲洗!次，弃上清留!"!.充分混匀细胞，取)滴于载玻片 上加盖玻片。荧光显微镜下数!""个淋巴细胞并计算出标有荧光细胞的阳性率。几点说明： ’’)*用于做支气管肺泡灌洗的纤支镜顶端直径应在+*+,8*"--左右，适于紧密楔人段或亚段支气管管口，防止大气道分泌物混入和灌洗液外溢，保证$%&9回收量。 ’’!*在灌洗过程中咳嗽反射必须得到充分的抑制，否则易引起支气管壁粘膜损伤而造成灌洗液的混血，同时影响回收量。 ’’/*一份合格的$%&9标本应是：$%&9中没有大气道分泌物混入；回收率T #"(， 存活细胞占I+(以上；红细胞U )"(（除外创伤;出血因素），上皮细胞U /(,+(；涂片细胞形态完整，无变形，分布均匀。 ’’#*由于$%&9中可溶性成分检测受诸多检测因素影响，如灌注量和回收量、肺泡上皮通透性等，致使肺泡衬液稀释度亦有所不同。尽管在做$%&9可溶性成分检测时采用内或外标记物进行标化，但检测结果仍存在着差异，其临床价值有限，故本草案未做有关$%&9液性成分检测方法的规 范。 ’’+*本规范不适于少量液体做支气管冲洗（$&）和全肺灌洗技术的操作。’’8*健康非吸烟者$%&9细胞学检测正常参考值：（)）细胞总分数：细胞总数（"*I ,"*!8）H )"I ;&，其中肺泡巨噬细胞"*I/V "*"/，淋巴细胞"*"0V "*")，中性和嗜酸细胞均U "*")。（!）N 淋巴细胞亚群：总N 细胞（AR /B ）"*0，N 辅助细胞（AR #B ）"*+，N 抑制细胞（AR S B ）"*/，AR #B ;AR S B 比值)*+,)*S 。 ?8+!?CWXE:=6:7YL