发育生物学教案-2015年
实验一 秀丽隐杆线虫的培养及其发育过程的观察
一、 实验目的
1.理解线虫作为模式生物的优势以及在相关研究领域的应用；
2.掌握线虫的基本培养技术，观察并且区分两种线虫个体发育过程的异同；
3.理解线虫RNA干扰技术的基本原理，并学会使用该方法对目的基因进行干扰。
二、 实验原理
秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegan）属于线虫动物门（Nematoda）隐杆线虫属（Caenorhabditis）秀丽隐杆线虫种（C.elegans），根据命名法则中的二名法命名为Caenorhabditis elegans。上世纪六七十年代分子遗传学的奠基人之一Sydney Brenner将线虫作为分子生物学和发育生物学研究的模式生物。
C.elegans为蠕虫状，长度约1mm，因其个体结构简单、体细胞数目恒定，特定细胞位置固定，生活史短、遗传背景清楚、基因组测序已经完成等，在遗传与发育生物学、行为与神经生物学、衰老与寿命、人类遗传性疾病、病原体与生物机体的相互作用、药物筛选、动物的应急反应、环境生物学和信号传导等领域得到广泛应用。如细胞凋亡现象及其机理以及RNA干扰技术最早都是在线虫中被揭示的。
C.elegans的基本结构以及生活史
C.elegans有雌雄同体（XX）和雄虫(XO)两种性别，在自然条件下，成虫大多为雌雄同体，雄虫的个体数只占大约千分之一。其基本的结构包括口、咽、肠、性腺以及胶原蛋白角质层，雌雄同体有两个卵巢、输卵管、储精囊，及单一一个子宫（图1，2），雄性有个单叶的性腺、输精管及一个特化为交配用的尾部（图3，4）。
C.elegans是唯一一个身体中的所有细胞能被逐个盘点并各归其类的生物。其幼虫含有556个体细胞和2个原始生殖细胞，而它的成虫则根据性别不同具有不同的细胞数。最常见的雌雄同体成虫在发育期间，共产生1090个细胞，其中131个在特定时期凋亡，因此，其成熟后含有959个体细胞和2000个生殖细胞，而较少见的雄性成虫则只有1031个体细胞和1000个生殖细胞。
C. elegans有五对常染色体和一对性染色体，是一个染色体数很少的二倍体。
图1 雌雄同体线虫解剖示意图
图2 雌雄同体线虫
A．DIC（微分干涉显微镜）拍
摄的图；
B. 雌雄同体线虫解剖示意图
图3 雄虫
A. 雄虫解剖示意图；
B. DIC（微分干涉显微镜）
拍摄的图；
C. 性腺放大图；
D. 成虫尾巴放大图；
E. L3 L4时期雄虫尾巴图
（上面是L4，下面是L3）
图4：电镜下的雄虫图5 雄虫和雌雄同体线虫交配
C.elegans的生活史包括胚胎期、幼虫期（L1-L4）、成虫期三个阶段（如图6）。一个雌雄同体线虫一生约可以产300个卵，卵经过L1、L2、L3、L4 4个幼虫时期，进入成虫期，如果外部条件比较恶劣，比如：拥挤、缺乏食物等，线虫会进入一个特殊的L3时期——dauer时期来抵抗外部的不良环境。C.elegans在实验室20-22℃的条件下，约3.5天长成成虫，可存活两到三周。线虫可以自体受精，当卵母细胞经过贮精囊时受精，也可以接受雄虫的精子进行异体受精（图5）。
图6 22℃下秀丽隐杆线虫的生命周期
（二）线虫RNAi技术：
RNAi （RNA-mediated interference）技术是指与靶基因同源的双链RNA诱导的特异转录后基因沉默现象。其作用机制是双链RNA被特异的核酸酶降解，产生干扰小RNA(siRNA)，这些siRNA与同源的靶RNA互补结合，特异性酶降解靶RNA，从而抑制、下调基因表达（图7）。RNAi技术已经发展成为基因治疗、基因结构功能研究的快速而有效的方法。
图7 RNAi原理示意图
1、长的双链RNA（Long double-stranded
RNAs，dsRNAs; typically >200 nt）被引
入细胞；
2、宿主细胞对这些dsRNAs产生反应，核
酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有
特定长度和结构的小片段RNA（大约21～
23 bp），即siRNA；
3、siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下
解链成正义链和反义链，反义siRNA再与
体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶
等)结合形成RNA诱导的沉默复合物
(RNA-induced silencing complex，RISC)；
4、RISC与外源性基因表达的mRNA的同
源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的
功能，在结合部位的两端切割mRNA，使
目标mRNA降解；
1998年，Fire建立了线虫RNA干扰技术，由于线虫RNAi操作简单、特异性高、干扰效果持久，并且也是一种最简单有效的抑制特定基因表达的方法，已经成为反向遗传学研究的一个有力的工具。
线虫RNAi 干扰的方法主要有三种：一、直接显微注射dsRNA；二、将线虫培养在含有dsRNA的液体培养基中；三、喂食能够表达dsRNA的大肠杆菌。其中第三种方法由于适用于大规模的操作，简单经济等原因，使用比较普遍。
本实验采用喂食能够表达dsRNA大肠杆菌的方法，来干扰线虫Chc-1以及DAF-16两个基因的表达。
Chc-1参与卵黄的内吞作用，当RNAi使其表达量下降后可导致线虫的胚胎死亡，线虫发育阻滞在幼虫期。在做RNAi干扰实验时，通常用这个基因作为阳性对照。
Daf-16是FOXO家族的成员，该基因主要是通过其转录因子的功能调控一些基因的表达来参与细胞功能。研究表明，DAF-16基因同寿命、免疫力密切相关，是一种寿命调控因子。
实验用的大肠杆菌是OP50以及HT115（DE3）。HT115（DE3）菌株是RNAse III（dsRNA特异性降解酶）缺陷型，并且可以通过IPTG诱导T7 RNA聚合酶的大量表达。
实验用的质粒有三种：L4440空载质粒，Chc-1干扰质粒（多克隆位点插入Chc-1基因的L4440质粒），Daf-16干扰质粒（多克隆位点插入Daf-16基因的L4440质粒）。
图8 L4440质粒结构图
实验用的C.elegans有两种，野生型N2以及突变型TJ356。TJ356线虫的基因组中整合了DAF-16::GFP以及roller基因。DAF-16::GFP主要定位在肌肉细胞，肠道细胞和神经细胞，这些部位有绿色荧光产生，而roller基因可以导致线虫不能顺利呈S型游动，而是在原地转圈，所以在培养基上可看见一个一个圆圈。
三、 实验器材
（一） 实验用品
恒温生化培养箱、解剖显微镜、超净工作台、6cm培养皿、挑针、摇床、10ml 离心管以及管架、1.5ml离心管以及管架、250ml锥形瓶、酒精灯、75%酒精棉球
（二） 实验材料
野生型N2线虫、TJ356线虫、E. coli OP50以及HT115、LB固体培养基、LB液
体培养基、NGM培养基等。
四、 实验步骤
1、线虫培养板的准备：
（1）配置NGM(Nematode Growth Medium)线虫基本培养基
A. 配置以下试剂
◆1M KPO4缓冲液：108.3 g KH2PO4、35.6 g K2HPO4加水至1升（高
压灭菌）
◆1M MgSO4（高压灭菌）
◆1M CaCl2（高压灭菌）
◆ 5 mg/ml胆固醇（用无水乙醇配置，配完后，过滤，4℃保存）
B. 称取3g NaCl 、2.5g蛋白胨、20g Agar 到锥形瓶中，加入975ml H2O，
高压灭菌，121℃20 min
C. 待培养基冷却至55℃时，加入25 ml 1 M KPO4缓冲液、1 ml 1 M CaCl2, 1
ml 1 M MgSO4、1 ml 5 mg/ml 胆固醇、（4ml 1M IPTG、1ml 100mg/ml
氨苄）（用于干扰实验），混匀。
D. 将混匀的培养基倒入线虫培养皿中，约2/3培养皿高度。室温放置过夜。
（2）线虫食物的准备：
A. 配置LB液体培养基：
称取10g胰蛋白胨、5g酵母提取物、5g NaCl到锥形瓶中，加入1L H2O，
调PH值到7.0，高压灭菌
B. 吸取灭菌后的5ml LB液体培养基到10ml已灭菌的管中，挑取op50或
HT115单克隆到液体LB中，37℃振荡过夜(10-15 h)。菌液可4℃保存
2周。
（3）每个NGM平板中滴入200μl的菌液，室温放置过夜，即可用于线虫的培养。
2、线虫的观察：
每个小组在解剖显微镜下，对观察用线虫（主要是N2）按照下列提纲进行观察：
?认识线虫的各主要组织器官：头部、尾部、咽、肠、子宫；
?区别雌雄同体以及雄虫；
?观察线虫的运动方式；
?观察线虫的进食、产卵（线虫约20分钟产一次卵，每次可连续产5-10
个卵）等行为；
?区分各个发育时期的线虫。
3、挑虫、培养：
(1)将铂金丝做的笔在酒精灯上烧红后，在线虫培养基上轻划几下，即可用于挑
虫；
(2)解剖显微镜下找到合适的成虫，用“笔”将它轻轻挑起，迅速在解剖显微镜下
将之放到新的平板上，共挑取3-5只线虫；
(3)将培养皿做好标记，放到20℃生化培养箱中培养；
(4)产卵3小时后，显微镜下可以看见培养皿上有椭圆颗粒状的线虫卵（胚胎），
此时，可以将成虫挑走。产卵当天计作day0。
(5)Day1(次日)上午，胚胎发育成幼虫L1时期。
(6)Day2下午线虫发育到L4时期，显微镜下可看见线虫的腹部有白色的点。
(7)Day3 上午线虫开始产卵，一个生活周期结束。
4、线虫RNA干扰实验
(1)含空载质粒菌作为阴性对照组、含chc-1干扰质粒菌作为阳性对照组、含
daf-16干扰质粒菌作为实验组，每组各准备一个平板（三块平板有何不同？）。
(2)每只板上挑取3-5只含有GFP的线虫（TJ356），产卵3小时。计做day0。
(3)day3观察各个平皿中线虫形态的不同。
(4)挑取day3期各个平皿中的线虫，制成Pad，在荧光显微镜下观察，拍摄各个
实验组的照片。
五、实验注意事项
1、挑虫要多加练习，不要急于做实验。
2、有些观察项目需要对同一个虫子进行连续观察，请耐心点。
3、在操作过程中，注意不要将培养基戳破，防止线虫钻进培养基内不方便观察。
4、操作过程中尽量少说话，防止污染线虫培养基。
5、如果在超净台外观察线虫，尽量不要打开培养皿的盖子。
6、线虫容易失水死亡，尽量缩短线虫离开培养基的时间。
六、思考题
1、本实验是哪种线虫的什么基因被什么干扰之后不表达了？为什么被干扰基因会不表达？这种干扰效果可以遗传吗？可以持续很长时间吗？
2、HT115（DE3）大肠杆菌和L4440质粒是线虫RNA干扰实验中最常用到的实验材料，请问它们的配合对线虫RNA干扰实验有何好处？
实验二 斑马鱼的饲养及胚胎发育过程的观察
一、 实验目的
1.学习并掌握实验室饲养斑马鱼的方法。
2.掌握斑马鱼胚胎发育过程的主要特点。
二、 实验原理
斑马鱼（Denio rerio）属鲤科短担尼鱼属，是一种常见的热带鱼，体形纤细呈梭形，体侧有水平分布均匀的条纹，成鱼体长3～4cm，最长可达6.5cm，寿命为2～3年。雄鱼鱼体较修长，腹部偏黄；雌鱼鱼体较肥大，腹部偏白。上世纪70年代初美国俄勒冈大学著名遗传学家和发育生物学家George Streisinger 教授首次提出将斑马鱼作为模式生物。目前，斑马鱼已成为重大疾病的分子发生机制、疾病模型构建及药物筛选等研究领域中重要的研究材料。斑马鱼作为研究高等脊椎动物的发育过程及其分子发育机制的重要材料主要是由于其具有：①个体小，养殖花费少，可大规模繁殖；②体外受精，产卵多，体外发育；③胚胎发育同步（25～31℃发育正常），胚胎透明；④成体长3～4cm，孵出后约3个月可达性成熟；⑤有丰富的品系资源；⑥染色体数为50，基因组序列已经全面测出等优点。
上为雌鱼，下为雄鱼
斑马鱼已经具备独立的脏器且与高等动物的相应器官在很多地方具有较大的相似性，早期胚胎是通过被动扩散的方式进行呼吸作用而存活不借助于血液循环系统维持生存，而且在任何基因缺失的条件下都不会死亡，因此较小鼠等模式动物有一定优势。斑马鱼胚胎发育主要经历受精卵（0～0.75hpf）、卵裂（0.75hpf～2.25hpf）、囊胚（2.25 hpf～5.25 hpf）、原肠胚（5.25 hpf～10.33 hpf）、分节期（10.33 hpf～24 hpf）、咽裂期（24 hpf～48 hpf）、孵化期（48 hpf～
72 hpf）等阶段。
三、实验器材
（一）实验用品：
恒温培养箱、体视显微镜、培养皿、斑马鱼养殖系统、丰年虫孵化器、粉碎机 (二）实验材料：
野生型斑马鱼、丰年虫卵、冰冻红虫、片状鱼食、培养皿、凹槽载玻片
Holt缓冲液、40g/L多聚甲醛、亚甲基蓝、5×麻醉剂(80mg/L)、30g/L甲基纤维素或甘油
四、实验步骤
（一）熟悉斑马鱼养殖系统的工作原理及基本操作。
（二）斑马鱼的喂养
1、喂食成年斑马鱼
? 准备鱼食：
– 按照每升水2克虫卵+15克盐的比例混合，置于锥形容器中，在28-30度恒温的环境中，给予强充氧，强光照，持续24小时后，
去掉卵壳及未孵化的虫卵，即可喂食斑马鱼。
? 喂鱼时间：
– 早餐（8-9点）； 午餐（12-14点）； 晚餐（18-20点）。
? 喂食：以丰年虫为主，辅以鱼粉或红虫
– 关闭鱼缸水阀；
– 将孵化好的丰年虫拿出静置；
– 用水将丰年虫冲洗干净（主要是将盐分冲掉及大部分虫壳去掉），反复3-5次；
– 用吸量管或洗瓶投放食料；
– 分批喂食，每次少量，间隔时间10-30分钟左右，至少等上批鱼食基本吃完。待鱼抢食行为减弱了，即可停止喂食；
– 清洁鱼缸，除去多余的食物，清洁各种用具，便于下次使用；
– 打开水阀，使水循环正常运行；
– 如丰年虫不够，可补充喂食鱼粉或红虫。
? 注意：
– 喂食时间一般在半小时至1小时，尽量做到少量多批次喂食。每次喂食要观察鱼的状态，若喂食后鱼没有出现向缸最前方或喂食口拥
挤，而是处于散游状态即可停止喂食；或用手弹缸，观察是否有上
述状态来判定。另外也不能喂太多，要在喂食进去的丰年虫大部分
吃完的情况下进行判定，若有太多食物残留，请及时清理。
2、喂食斑马鱼幼鱼
? 草履虫的培养
– 在1升水中放少许酵母，搅拌后，接取适当草履虫原液，置于30度恒温环境中培养4-6天。
? 幼鱼喂养
– 0-3天小鱼：无需喂食，注意除去死卵、死鱼、卵膜。
– 4-14天小鱼：喂食草履虫，注意在鱼缸多部位添加食物。
– 14-30天小鱼：逐渐喂食丰年虫，到后期以喂食丰年虫为主。
– 30天以后的小鱼：上架（带网板）喂养，以丰年虫为主食，适当喂食打碎的鱼粉/红虫。
注意：
– 每天三次定时喂食；
– 1-2天换一次水，每次换1/3的水；
– 环境温度：28度左右，可以放在恒温箱中培养。
（三） 观察斑马鱼从鱼卵发育成小鱼的胚胎发育过程，并拍照。
1、配鱼
实验前一天傍晚，最好在鱼喂完晚餐后30min配鱼，使用专用配鱼缸。
配鱼缸分为外缸和内胆两部分，内胆底部有很多小孔，以方便鱼卵漏下，避免被大鱼误食。配鱼按照雌:雄为1:1或1:2的比例，放置总数不多于4条的斑马鱼，注意用隔板将雌雄分开。放入约2/3缸的鱼水。
将配鱼缸放置在28.5℃的黑暗环境中过夜。
注意：鱼缸可以盖上盖子，但是一定要透气,避免斑马鱼因缺氧而死亡；另外，夜间需要有10h的黑暗，以保证斑马鱼的正常生物钟节律。
2、收卵
第二天早晨9点抽去隔板，雄鱼便开始追逐雌鱼。一般情况，15min左右后雌鱼开始排卵，同时雄鱼将精子排入水中使卵受精。
将配鱼缸底部的鱼卵收集到灭菌的培养皿中。如果需要收集同一时期的胚胎，则抽板后每15min收集一批胚胎。
体式显微镜下观察斑马鱼受精卵：正常胚胎呈透明状，卵黄物质致密，受精的卵细胞位于卵黄一侧的顶端。未受精卵或死卵呈不透明的灰白色。
去除死卵、粪便和其他杂物，用Holt缓冲液洗涤鱼卵数次，加入新鲜的Holt缓冲液后，放置28.5℃恒温培养箱中培养。可在培养溶液中加入
1/10000体积的亚甲基蓝，抑制霉菌生长，同时也便于区分死卵。
设定好计时器，对照斑马鱼胚胎发育图观察发育不同阶段的鱼卵形态。可以根据需要定时收集不同发育阶段的鱼卵，并使用40g/L多聚甲醛固定，为以后的实验收集材料。
3、显微观察
将盛有鱼卵的培养皿放置在28.5℃恒温培养箱中，培育斑马鱼胚胎。
观察以下各个时期的斑马鱼胚胎：
受精卵：0-0.75hpf
卵裂期：0.75-2.25hpf
囊胚期：2.25-5.25hpf
注意3hpf时，可以形成1000细胞的半球期
原肠胚：5.25-10.33hpf
注意6hpf时，胚盾形成；9hpf，可见脊索结构；10hpf，原肠胚形
成，体节、尾芽开始出现
体节期：10.33-24hpf
注意16hpf时达14体节，各主要器官开始发生；20hpf左右开始有
色素沉着
咽裂期：24-48hpf
咽弓形成，神经系统、循环系统、鳍等开始形成
孵化期：48-72hpf
幼鱼从卵膜中出来，可以自由游泳，出现觅食、躲避等主动行为
4、图片记录
1)甲基纤维素准备:甲基纤维素可配成一种黏稠的惰性水溶液，用于帮助胚
胎稳定姿态，以便长时间拍照(也可以使用100%甘油替代甲基纤维素)。使用前需高速离心5min，使其中的固体悬浮物沉降。
2)胚胎脱膜或剥膜后，用吸管将其转移到凹槽载玻片上，滴入5×麻醉剂
(80mg/L)将其麻醉。
3)在凹槽载玻片上滴一滴30g/L甲基纤维素，注意不能有气泡。
4)用吸管吸取鱼胚，竖直放置待鱼胚下沉到管口，轻轻挤压稍许，将其滴到
甲基纤维素表面，尽量不要滴下太多溶液。
5)用发针（黏有一段短头发的牙签）拨动鱼胚，调整其姿势使适合观察。如
果侧面拍照，尽量使两侧眼、体节重合，尾部与身体处于同一水平；如果腹面拍照，卵黄朝上，两个眼的位置保持同一焦面。将胚胎位置摆好后，可以在显微镜下进行观察和拍照。
6)观察拍照完毕，在甲基纤维素上滴几滴Holt缓冲液将其软化，然后温和
地吹吸，以释放胚胎。将胚胎放回培养液中待其自然苏醒。
五、实验注意事项
1、请按照值日表按时到鱼房喂食斑马鱼；
2、仔细观察鱼的生活习性，并及时记载鱼房的日志；
3、及时清理鱼缸中的杂物；
4、及时清洁各种鱼房用具及房间卫生；
5、饲养小鱼时，要及时将死鱼和杂质去除，一般一天至少清除一次。
六、作业
1、每组负责喂养成鱼1天：
早：8点；中：13点；晚：19点
2、每组学习斑马鱼的配鱼、收卵、显微观察、图片记录等步骤，得到新鲜鱼卵，
观察并培养，至少养到第三天；
3、观察斑马鱼从鱼卵发育成小鱼的胚胎发育全过程，并拍照：至少记录受精卵、
卵裂期、囊胚期、原肠期、体节期、咽裂期、孵化期各个时期的典型照片1张，加以注释。
七、思考题
斑马鱼的发育主要经历哪几个时期？分别在发育的哪个时间段？请以自己拍到的照片展示这些时期的典型特征。
实验三 GFP在斑马鱼胚胎中表达的观察
——附：显微注射技术
一、实验目的
1、学习显微注射技术；
2、观察GFP在斑马鱼早期胚胎发育中的表达情况。
二、实验原理
显微注射技术是利用显微操作系统和显微注射技术将外源目的基因直接注入到受精卵的原核中，使外源基因整合到受体细胞的基因组内，从而获得转基因动物。它是目前基因转移效率较好的一种基因转移方法，可直接用不含原核载体DNA片段的外源基因进行转移，实验周期相对比较短。显微注射技术在动物细胞发育研究方面的应用为研究体内生理和体外的生化过程提供了更便捷的方法，同时将特定的分子探针及衍生的细胞间质成分导入活体细胞，为研究控制细胞功能的调控机制提供了新视野。
目前，研究生物基因功能的方法之一是通过一些精心设计的实验，减弱或者终止其表达，观察生物整体功能的变化，进而推测相应的基因功能，其中最常用的实验方法就是基因敲除(gene knockout)技术。上图是运用于斑马鱼中的基因敲除等突变诱导技术的发展历程，其中最新的TALENs实验技术，因为其实验周期相对较短、成功率高（低毒、低脱靶，），且克服了前一代基因敲除技术的不能识别任意目标基因序列，识别序列受下游序列影响等缺点，目前已经成为斑马鱼中反向遗传学研究的主要技术。TALENs原理见后面附录部分。
本实验拟通过向斑马鱼卵中注射pEGFP质粒来学习显微注射技术。
三、实验器材
（一） 实验用品
恒温培养箱、体视显微镜、显微注射仪、拉针仪、毛细管、培养皿、塑料模具等。 （二） 实验材料
酚红、琼脂糖、质粒
四、实验步骤
1、实验准备
1)用试剂盒提取pEGFP质粒，并稀释至100ng/ul；
2)斑马鱼卵固定槽的制备；
配制1.5%的琼脂糖溶液，将琼脂糖熔化后倒入培养皿中，将模具放在琼脂糖表面，除去气泡后待琼脂糖凝固，取出模具，将平板放入冰箱保存。
3)注射针头的拉制；
4)注射试剂的准备与灌注；
将质粒灌注到注射用针头中，固定到操纵器上，调整操纵器，调节针头角度；
用尖头镊子将针头开口，调节注射仪的相关参数，直至每次注射的液滴在合适的大小（0.1mm ≈ 500nl，需要调整到1-100nl，约为受精卵的十分之一，可以在样品中加入酚红，用甘油液滴上试验。）
5)铺卵：将鱼卵如图排列在固定槽中。
将取出的受精卵小心均匀铺在琼脂糖固定槽的凹槽中，保持受精卵的湿润，但不要有太多水残留，否则会影响显微注射操作。
2、显微注射
将装有质粒的注射针安装在显微注射仪上，在显微镜下调整注射针和铺有鱼卵的平板至处于视野中央，调整注射针的角度。
用镊子小心将针头尖端夹断，针头开口不要太大，会使注射时在卵上穿出较
大的孔，对卵造成损伤，也不要开口过小，会使液体流出不畅。
打开液氮和恒压器电源，通过调节电压调整每次注射时从针头中流出的液体约为1～100nl，可用酚红进行测试。
开始注射。尽量将针头插入到受精卵细胞的动物极以及植物极之间。
3、受精卵的孵化
显微注射结束后，将已注射过的卵小心洗入另一培养皿中，注意将死卵剔除，然后放入28.5℃培养箱中培养。作为对照可同时用另一培养皿盛装未进行显微注射的卵，同时放入培养箱中培养。
4、胚胎发育过程的观察
每隔一段时间在解剖镜下观察胚胎发育情况并做好记录，每次观察的时候注意将死卵剔除。若是在上午注射则受精卵在下午5～7点阶段容易死亡，因此在晚上离开之前必须检查受精卵的生长情况，及时将死卵挑出，否则由于死卵的作用大部分正常卵也会死亡。
五、实验注意事项
1、受精卵胚胎发育的时间应该从受精卵收集时开始计时。
2、在观察过程中应及时用吸管去除死胚胎。
3、正常发育的胚胎会在鱼幼苗初步形成后破卵而出，但也有需要借助外力将卵膜撕开后，才能出来。
4、显微注射时，注意针的开口不能过大，开始时可以适当加大气压打出液体。注射后受精卵膨大核膜清晰说明外源基因己导入核内
5、显微注射时受精卵的注射位置依注射溶液的特性或目的而有不同，转基因鱼的注射在受精卵细胞质的核区附近。注射应尽快完成，尽量在一细胞期完成外源基因注入，以减少对受精卵造成的损伤和因注射时间太长而造成的受精卵发育时期上的差异。
6、注射针抽离受精卵时速度要稍慢一些以避免受精卵内的物质随着注射针被
抽出。
7、注射完成后受精卵应尽快移入28℃下培养以避免胚胎发育延迟或造成胚胎死亡。
六、作业
1、注射pEGFP 质粒进入斑在荧光显微镜下进行观察并拍照七、思考题
如何判断经过显微注射发育
附录：
TLAENS即转录激活因子效nucleases, TALENs）,由TALE 核酸内切酶结构域人工融合而成有核定位信号（Nuclear locali AD），而中部则是介导其与DNA 33~35氨基酸残基的串联重复单序列。在每个重复单位中，种碱基中的一种或多种，被称作重复可变双残基（其中+12位氨基酸主要起到稳定能。分别与这4种碱基相对应的Asp) 和NN (Asn Asn)。每个可
序列就可以特异性的识别一段进入斑马鱼的受精卵，收集并培养注射过的鱼卵，不同时期在荧光显微镜下进行观察并拍照。
射发育而来的斑马鱼是否整合了外源基因？ 转录激活因子效应蛋白核酸酶（transcription activator-lik TALE（transcription activator-like effector）结核酸内切酶结构域人工融合而成。TALE蛋白N端有转运信号（Translocation Nuclear localization signal，NLS）和转录激活结构域（Activa DNA特异识别与结合的结构域。其序列是一个包含氨基酸残基的串联重复单位以及末尾加上含20个氨基酸残基的半重复单序列。在每个重复单位中，+12和+13位的氨基酸残基能够特异性的分别识别种碱基中的一种或多种，被称作重复可变双残基（Repeat variable di-res 位氨基酸主要起到稳定RVD环的作用，而只有第13位氨基酸才起到识别种碱基相对应的最常见的4种RVD分别是NI (Asn Ile)、NG (Asn G 。每个可特异性的识别一种碱基的重复单位串联起来构成的序列就可以特异性的识别一段DNA序列（如下图）
。
的鱼卵，不同时期
like effector ）结构域和Fok I tion signal），C端ctivation domain，包含1到33个长度为重复单位的可变重复位的氨基酸残基能够特异性的分别识别A、T、C、G 4residue，RVD）。到识别特异碱基的功NG Gly)、HD (His 起来构成的TALE重复
根据所要敲除的靶基因特定位后以显微注射的方式将中的转录激活结构域（AD）替换TALENs 的TALE 部分结合到特定结合位点之间的DNA 双链进行下图）。DSB 能够激活细胞内固有或同源重组（Homologous reco 生DNA 的小片段插入和/或缺失还可以通过HR 的方式进行修复变从而引起永久性的基因沉默，即达到特异性基因敲除的目的。
图：TALE 重复序列碱基识别示意图。
特定位点的序列构建TALENs 质粒，并在体外转录出相应mRNA 注射入斑马鱼受精卵中表达出融合蛋白。融合蛋白中把）替换成核酸内切酶的切割结构域，构建成TALE 核酸常需要以二聚体的形式发挥其切割DNA 序列的功能，因此， TALENs 通常是成部分结合到特定的DNA 序列后，Fok I 核酸内切酶发生二聚化双链进行切割，诱发DNA 双链断裂（Double-strand bre 能够激活细胞内固有的非同源末端连接（Non-homologous end j Homologous recombination，HR）机制，对这种DNA 损伤进行修复是一种较为简单的修复方式，但是保真度不高，很容易造成DNA 断裂处的序列或缺失（indel），进而造成基因突变。在存在同源序的方式进行修复，不过效率相对较低。这两种修复方式都可能引起靶基因突变从而引起永久性的基因沉默，即达到特异性基因敲除的目的。
录出相应的mRNA，然融合蛋白中把TALE 核酸酶。FokI 通常是成对使用。两个核酸内切酶发生二聚化，对两个TALE break，DSB）（如nd joining，NHEJ）进行修复，其中NHEJ 的序列发生改变，产），进而造成基因突变。在存在同源序列的情况下，
。这两种修复方式都可能引起靶基因突
实验四 环境因子对发育程序的干扰
一、实验目的
1、通过观察乙醇及小分子药物cyclopamine对于斑马鱼胚胎发育的致畸作用，了解化学致畸物质对发育程序的干扰效应。
2、加深理解Sonic hedgehog信号通路在脊椎动物胚胎发育中的重要作用，同时也对环境因子介入发育程序的现象和机制进行基本了解。
二、实验原理
化学致畸剂(chemicaI teratogen) 动物胚胎发育的正常进行，依赖于自身发育程序的完整执行，而外界环境因子对发育过程也有着重要的影响。很多外源的化学物质在进入胚胎后能够破坏正常发育过程，导致胚胎发育的迟缓、组织器官的畸变甚至是胚胎的死亡，因此被统称为化学致畸剂。对化学致畸效应的研究可以帮助我们更深入地理解发育的分子调控机制，特别是与环境因子间的相互作用。
Sonic hedgehog信号通路(sonic hedgehog signaling pathway)：Sonic hedgehog 蛋白是一种分泌蛋白，在脊椎动物的胚胎发育过程中由基板和脊索的特定细胞表达，作为形态发生原以剂量依赖的方式，激活或者抑制不同的转录因子，诱导不同的腹侧细胞的命运。
Hedgehog是一种共价结合胆固醇的分泌性蛋白，在动物发育过程中作为形态发生原激活受体细胞中的下游信号转导通路从而行使调控功能。脊椎动物中至少有3个基因编码Hedgehog蛋白，即:Shh，Ihh，Dhh，其中Shh与果蝇中的Hedgehog基因同源性最强，并且在脊椎动物中高度保守，研究表明Shh在人、鼠、蛙、鱼、鸡等动物的发育过程中都起着重要的调控作用。在脊椎动物的研究中发现，脊索和神经管的基板细胞分泌Shh蛋白，直接控制腹侧神经元细胞类型的分化，导致腹神经管形成。Shh蛋白作为一个形态发生原，以浓度梯度的方式，参与调控胚胎发育不同时空的许多事件，包括肢体、脊髓、肺、牙齿和毛发、眼等的形成。目前Shh信号通路在脊椎动物发育中的研究主要集中在神经系统、体轴对称性、造血和血管形成、心脏、骨骼、垂体发育等方面。近年来的研究进一步表明，Shh信号通路相关基因的变异与人类一些肿瘤发生和出生畸形密切相关。当Shh信号通路被抑制时，胚胎发育过程中会形成多种畸形；当Shh信号通路
发育生物学教学大纲(新、选)
《发育生物学》教学大纲 （供生物科学专业四年制本科使用） 一、课程性质、目的和任务 发育生物学被公认为是当今生命科学的前沿分支学科，是研究生物体发育过程及其调控机制的一门学科。发育生物学不同于传统的胚胎学，它是生物化学、分子生物学、细胞生物学、遗传学等学科与胚胎学相互渗透的基础上发展形成的一门新兴的学科，是胚胎学的继承和发扬。发育生物学是生物学各专业的限选课程，是在学习一定的专业基础课的基础上进一步学习的高级专业课程。根据本科教学加强基础、注重素质、整体优化的原则，使学生将所学习的专业基础课和专业课形成一个完整的知识体系。过本课程的学习，应对各种生物体的胚胎发育过程、发育规律、发育生物学的基本研究技术，以及发育生物学的研究进展有一定的了解。 二、课程基本要求 本课程分为掌握、熟悉、了解三种层次要求。掌握的内容要求理解透彻，能在本学科和相关学科的学习工作中熟练、灵活运用其基本理论和基本概念。熟悉的内容要求能熟知其相关内容的概念及有关理论，并能适当应用。了解的内容要求对其中的概念和相关内容有所了解。 通过本课程的学习，使学生掌握生物个体发育中生命过程发展的机制。在学习和掌握发育生物学知识的过程中，要求将所学过的其他相关学科，如分子生物学、细胞生物学、遗传学、生物化学、生理学、免疫学和进化生物学等的知识融会贯通，串联整合形成完整的知识体系，并结合当今的研究进展开拓学生的眼界。 考试内容中掌握的内容约占70%，熟悉、了解的内容约占25%，5%左右的大纲外内容。 本大纲的参考教材是面向21世纪教材《发育生物学》第二版（张红卫主编，北京，高等教育出版社，2006年）。 三、课程基本内容及学时分配 发育生物学教学总时数为72学时，其中理论为54学时，实验为18学时，共22章。本课程共分四篇，第一篇从第一到四章，主要内容为发育生物学基本原理，第二篇从第五章到第十一章，主要内容为动物胚胎的早期发育，第三篇从第十二章到第十八章，主要内容为动物胚胎的晚期发育，第四篇从第十九章到第二十二章，主要内容为发育生物学的新研究领域。 绪论（3学时） 【掌握】 1．发育生物学的概念。 2．发育生物学研究的内容与研究范围。 【熟悉】 1．发育生物学的发展与其他学科的关系。 2．发育生物学的展望与应用。 3．发育生物学的模式生物。 【了解】
植物发育生物学资料
一、名词解释 1、花器官发生ABC模型：完全花器官由花萼（1轮）、花瓣（2轮）、雄蕊（3轮）、雌蕊（4轮）组成。A类（AP1、AP2）、B类（AP3/PI）、C类（AG）调控因子分别与SEP1、 2、3形成不同的聚合体，分别在1轮（A）、2轮（AB）、3轮（BC）、4轮（C）控制相应部位花器官的分化和形成。 2、春化作用：是植物需要经过一段时间的低温处理才能开花的现象。目前发现低温促进开花是由于三种蛋白VRN1、2、VIN3在低温下诱导表达，它们抑制开花负调控基因FLC的表达，从而促进开花。 3、光敏素（PHY）：是一种N端感光区与线形四环吡咯发色团共价结合的蛋白质复合体，接收红光/远红光后，蛋白质的构象改变，C端激酶活化，通过磷酸化将光信号传导下去。 4、根边界细胞：是生长到一定长度的根尖处由根冠外围细胞脱离的、有组织的活细胞，其功能是防御和帮助植物吸收营养。环境因素和遗传因素控制边界细胞的释放。 5、近轴-远轴极性决定基因：近轴远轴特性是指以某器官中心轴为基准，近的是近轴，远的是远轴。例如 HD-ZIP III 类基因PHB、PHV、REV决定植物的近轴特性，抑制远轴特性。 KANl\2\3 类基因、YAB类的YAB3、FIL决定远轴特性，抑制近轴特性。 6、拟南芥生物钟分子结构：是由三个蛋白构成的一个光周期调控的反馈循环。这三个蛋白是 CCA1 、 LHY 、 TOC1 。前两者被磷酸化后抑制 TOC1 的表达，TOC1 转录翻译后促进 CCA1 、 LHY 的转录表达。光通过光受体促进 CCA1 、 LHY 的表达，抑制 TOC1 的表达。 7、隐花素：是吸收蓝光紫外光，在 N 端非共价结合 FAD 发色团，感受光能，并将能量传给 C 端激酶区域，使具备进行磷酸化催化反应的能力的光受体蛋白。植物中是 CRY 。 （趋光素：是吸收蓝光紫外光，在 N 端非共价结合 FMN 发色团，感受光能，并将能量传给 C 端激酶区域，使具备进行磷酸化催化反应的能力的光受体蛋白。）8、TPD1/EMS1：是花药发育中决定小孢子囊发生范围的一对信号肽 / 受体激酶 信号转导蛋白，它们的分布范围决定小孢子囊发生的范围。 9、近轴 - 远轴极性基因：是决定植物器官发生中近轴特性和远轴特性的基因。 近轴基因有 HD ZIP III 类基因 PHB 、 PHV 、 REV 等，远轴基因有KAN1\2\3 , YAB 类的 YAB3 、 FIL 等。 10、泛素蛋白质降解复合物：一种降解蛋白质的复合物，能在特定识别酶的 作用下，将目标蛋白标记上泛素后降解目标蛋白，是细胞内通过有目的降解的方式调控蛋白含量的方式。 11、植物发育生物学是从分子生物学、生物化学、细胞生物学、解剖学和 形态学等不同水平上，利用多种实验手段研究植物体的外部形态和内部结构的发生、发育和建成的细胞学和形态学过程及其细胞和分子生物学机理（调控机制）的科学。是研究植物生长发育及其遗传控制的科学。 12、增殖分裂：产生的两个子细胞的大小、形态和细胞器的分布等都相同。 如：顶端分生组织中央细胞的分裂。木栓形成层和维管形成层母细胞的垂周分裂分化分裂：产生的两个子细胞的命运不同，它们将发育成完全不同的细胞。 分化分裂是细胞分化的开始。如：受精卵的第一次分裂，形成气孔器母细胞的分裂，形成层细胞的平周分裂等。
发育生物学重点
一、绪论 1.1分化：细胞的多样性产生的过程（从单个全能的细胞--受精卵，产生各种类型分化细胞的发育过程。）。 形态发生：由分化而产生多样性的细胞构成组织、器官建立结构的过程。 图式形成：胚胎形成不同组织、器官和构成有序空间结构的过程 1.2大多数动物的发育要经历胚胎期、幼体期、变态发育期和成体期 1.3胚轴：胚胎前段到后端的前-后轴，背侧到腹侧的背-腹轴。对称动物还具有中侧轴或左-右轴 1.4调整型：胚胎为了保证正常发育，可以产生细胞位置的移动和重排（海胆、两栖类和鱼类等动物）。 嵌合型：合子的细胞核含有大量的特殊信息物质-决定子，卵裂过程中被平均分配到子细胞中去控制子细胞的发育命运，子细胞的发育命运由卵裂时获得的合子信息所预定，这一类型发育（青蛙、海鞘、栉水母、环节动物、线虫、软体动物）。 形态发生决定子(成形素、胞质决定子）：细胞质中含有的决定细胞分化的特定物质。 二、细胞命运决定 2.11)细胞定型：细胞在分化之前，将发生一些隐蔽的变化，使细胞朝特定方向发展的过程。 2)定型分为特化和决定两个阶段 特化：当细胞或组织放在中性环境如培养皿中可以自主分化时，该细胞或组织已经特化。已特化的细胞或组织的命运是可逆的。 决定：当一个细胞或者组织放在胚胎另一部位可以自主分化时，该细胞或组织已经决定。已决定的细胞或组织的发育命运是不可逆的 3)定型有两种方式： （1）自主特化：细胞命运完全由内部细胞质决定。特点：a.通过胞质隔离实现：卵裂时，受精卵内特定的细胞质分离到特定的卵裂球中，卵裂球中所含的特定细胞质决定它发育成哪一类细胞，而与邻近细胞无关。b.镶嵌型发育：以细胞自主特化为特点的胚胎发育模式（2）有条件特化（渐进特化、依赖型特化）：细胞的发育命运完全取决与其相邻的细胞或组织.特点：a通过胚胎诱导实现：胚胎发育过程中，相邻细胞或组织之间通过相互作用，决定其中一方或双方细胞的分化方向。相互作用之前，细胞具有多种分化潜能，但和邻近细胞或组织相互作用后逐渐限制了它们的发育命运，使之朝某一特定方向分化。b调整型发育：以细胞有条件特化为特点的胚胎发育模式。……… 2.21）胞质定域：形态发生子在卵细胞质中呈一定形式分布，受精后发生运动，被分隔到一定区域，并在卵裂时分配到特定的卵裂球中，决定裂球的发育命运。这一现象称为胞质定域，或胞质隔离、胞质区域化、胞质重排。 2）形态发生决定子(成形素、胞质决定子）：细胞质中含有的决定细胞分化的特定物质。作用或性质：（1）激活某些基因转录的物质（2）某些m RNA 3）胚胎诱导：胚胎一部分细胞可以对邻近另一部分细胞施加影响，并决定其分化方向，这种作用称为胚胎诱导。 2.3命运渐进特化实验系列： 1）Roux 缺损实验-蛙（镶嵌型发育缺损实验奠定实验胚胎学） 2）Driesch分离组合实验-海胆 3）Horstadius 分离实验-海胆（既镶嵌型发育, 又调整型发育） 2.4双梯度模型(P48 图1.19) 三、细胞分化的分子机制 3.11）细胞分化的本质：基因的差异性表达。
暑假假期安全教育教案
暑假假期安全教育教案 活动目的 1、“安全第一”、“安全无小事”，暑假之前，提高学生安全意识，过上一个平安、快乐的假期。 2、围绕“消防安全，防意外事故”的校外安全教育，真正把学生的暑假安全教育落到实处。 活动过程： 一、导入： 1、同学们，生命是宝贵的，它对于每个人都只有唯一的一次。时间飞逝，快乐的暑假又要到来了，我们在高兴之余，又有几分担忧，暑假里同学们应该怎样珍爱生命，注意安全呢?下面，我们来交流一下要注意哪些方面的安全，知道的同学请畅所欲言哦! 教师先让学生以小组为单位各抒己见，然后指名说。 2、老师小结：同学们说得真好!大家都提到了要注意防火、防电、防水以及交通安全等等。那么，这些方面在遇到时候，我们又该注意怎么做，才能保证自己生命的安全呢? 二、暑假了，我们应该怎样注意安全呢? (一) 用电安全 1、请同学们说说你们家里有哪些电器? 电视、电冰箱、烤箱、电脑、洗衣机、消毒柜、电饭锅、音响、电磁炉、空调等等。
2、俗话说，有了电，真方便。有了电器就更方便了，这不，这些电器给我们的生活带来了无穷无尽的精彩和方便。可用完电器时，打雷时要注意什么? 学生回答，教师补充指点。 (关掉电源，特别是电视机，不能图方便只用遥控关掉。) 3、教师出示夜里全家睡觉电视机爆炸等电器爆炸的幻灯片让学生观看。 4、教师讲述收集到了有关电器雷击事件。 5、教师总结：同学们，我们不要因为好奇，私自拆卸、维修电器，更不要不要私自拉或乱接电线和随意拆装电器。使用和操作电器还要注意不能湿水，一旦电器出现故障，应立即切断电源。(二) 防火安全 1、教师提出问题让学生讨论：万一，生活中出现了火灾，我们该怎样做? 让学生各抒己见，说做法，对正确的肯定，错误的及时纠正。 2、根据讨论，教师总结：同学们，我们一定不玩火，同时，你们还要告诉家长，煤气管要定期检查，煤气用完要关掉。 3、教师结合《安全教育读本》向学生补充一些防火知识。 (三) 防溺水
发育生物学复习资料重点总结
绪论 1、发育生物学：是应用现代生物学的技术研究生物发育机制的科学。它主要研究多细胞生物体从生殖细胞的发生、受精、胚胎发育、生长到衰老和死亡，即生物个体发育中生命现象发展的机制。 2、（填空）发育生物学模式动物：果蝇、线虫、非洲爪蟾、斑马鱼、鸡和小鼠。 第一篇发育生物学基本原理 第一章细胞命运的决定 1、细胞分化：从单个的全能细胞受精卵开始产生各种分化类型细胞的发育过程称细胞分化。 2、细胞定型可分为“特化”和“决定”两个阶段：当一个细胞或者组织放在中性环境如培养皿中培养可以自主分化时，可以说这个细胞或组织发育命运已经特化；当一个细胞或组织放在胚胎另一个部位培养可以自主分化时，可以说这个细胞或组织发育命运已经决定。（特化的发育命运是可逆的，决定的发育命运是不可逆的。把已特化细胞或组织移植到胚胎不同部位，会分化成不同组织，把已决定细胞或组织移植到胚胎不同部位，只会分化成同一种组织。） 3、（简答）胚胎细胞发育命运的定型主要有两种作用方式：第一种通过胞质隔离实现，第二种通过胚胎诱导实现。（1）通过胞质隔离指定细胞发育命运是指卵裂时，受精卵内特定的细胞质分离到特定的裂球中，裂球中所含有的特定胞质可以决定它发育成哪一类细胞，而与邻近细胞没有关系。细胞发育命运的这种定型方式称为“自主特化”，细胞发育命运完全由内部细胞质组分决定。这种以细胞自主特化为特点的胚胎发育模式称为“镶嵌型发育”，因为整体胚胎好像是由能自我分化的各部分组合而成，也称自主型发育。（2）通过胚胎诱导指定细胞发育命运是指胚胎发育过程中，相邻细胞或组织之间通过互相作用，决定其中一方或双方细胞的分化方向。相互作用开始前，细胞可能具有不止一种分化潜能，但是和邻近细胞或组织的相互作用逐渐限制它们的发育命运，使之只能朝一定的方向分化。细胞发育命运的这种定型方式成为“有条件特化”或“渐进特化”或“依赖型特化”，因为细胞发育命运取决于与其邻近的细胞或组织。这种以细胞有条件特化为特点的胚胎发育模式称为“调整型发育”，也称有条件发育或依赖型发育。 4、（名词）形态发生决定因子：也称成形素或胞质决定子，其概念的形成源于对细胞谱系的研究。形态发生决定子广泛存在于各种动物卵细胞质中，能够指定细胞朝一定方向分化，形成特定组织结构。 5、胞质定域：形态发生决定子在卵细胞质中呈一定形式分布，受精时发生运动，被分隔到一定区域，并在卵裂时，分配到特定的裂球中，决定裂球的发育命运，这一现象称为胞质定域。也称为胞质隔离、胞质区域化、胞质重排。 第二章细胞分化的分子机制——转录和转录前的调控 1、根据细胞表型可将细胞分为3类：全能细胞、多潜能细胞和分化细胞。（1）全能细胞：指它能够产生有机体的全部细胞表型，或者说可以产生一个完整的有机体，它的全套基因信息都可以表达。（2）多潜能细胞表现出发育潜能的一定局限性，仅能分化成为特定范围内的细胞。（3）分化细胞是由多潜能细胞通过一系列分裂和分化发育成的特殊细胞表型。 2、（简答）差异基因表达的调控机制主要是在以下几个水平完成：（1）差异基因转录：调节哪些核基因转录成RNA。（2）核RNA的选择性加工：调节哪些核RNA进入细胞质并加工成为mRNA，构成特殊的转录子组。（3）mRNA的选择性翻译：调节哪些mRNA翻译成蛋白质。（4）差别蛋白质加工：选择哪些蛋白质加工成为功能性蛋白质，即基因功能的实施者。不同基因表达的调控可以发生在不同的水平。 3、克隆和嵌合技术的区别画图P59 第三章细胞分化的分子机制——转录后的调控 第四章发育中的信号转导
暑期安全教育教案
暑期安全教育教案 【教学目标】 1、围绕“道路交通安全”、“家庭防火”、“外出旅游”、“游泳安全”、 “饮食卫生”等夏季易发的安全问题对学生进行放假前的安全教育。 2、提高学生的安全意识，使学生学会一些自救的方法，让学生在遇到危险时能 采取一定的措施，保护自己，真正把安全教育落到实处。 【教学过程】 一、导入： 1、同学们，你们好！我们是祖国的未来、民族的希望,是充满生机的新一代，所以要“时时处处注意自身的安全”，健康、快乐、茁壮地成长。可是，每逢假期，我们却总会听到一些小学生遭遇无端横祸的噩耗；看到一些触目惊心的灾难在我们身边发生。那么放假了，我们应该怎样注意安全呢 （一）用电安全 1、学生说说家里有哪些电器 2、教师根据学生的回答及时教育：现代家庭，随着生活水平不断提高，家庭中的电器也越来越多，给我们学习、生活带来了好多方便及乐趣。但是，如果我们没有掌握一定的用电知识，不注意用电安全，就会很危险。所以，我们不要出于好奇，自行拆卸、维修电器，不要私自拉或乱接电线和随意拆装电器。使用和操作电器要注意不能湿水，一旦电器出现故障，应立即切断电源。 （二）防火安全 1、提出问题讨论：如果你发生火灾或看到邻居有火灾怎么做（学生各自发表意见，说做法，对正确的肯定。） 2、根据讨论，结合《安全教育读本》向学生补充一些防火知识。 （三）防溺水 回忆以前因游泳、钓鱼、玩水等引发的溺水事故，为学生再次敲响警钟；结合安庆本地江河湖泊众多的地理情况，要求学生不能私自到河滩、水库游泳。（四）交通安全 （1）道路、交通（2）交通安全（3）交通法规 （4）道路交通标志和交通信号（5）看图识标志 引导讨论（1）行人为什么要在人行道上行走，没有人行道要靠路边行走 （2）行人横穿马路为什么要走斑马线（3）没有划设人行横道的马路应该注意哪些（4）为什么不能翻越护栏 （5）为什么不准扒车、追车、强行拦车（6）为什么走路时不能看书或做其它活动（7）骑自行车应该注意什么（8）乘汽车时要注意什么（9）遇到交通事故怎么办 （五）食品卫生。 在我们的生活中，离不开饮食，可你知道吗良好的饮食习惯，合理的、营养平衡的膳食，正确的饮食卫生习惯，有效预防传染病的发生，是我们身体健康的重要保证。 1、一日三餐，不可偏废，要合理搭配饮食，各类事物都要吃，不能偏食、挑食。 2、早餐要吃饱吃好，要多吃鸡蛋、牛奶、豆类食品，不能马马虎虎随便吃一点，或干脆不吃。
发育生物学教案-2015年
实验一 秀丽隐杆线虫的培养及其发育过程的观察 一、 实验目的 1.理解线虫作为模式生物的优势以及在相关研究领域的应用； 2.掌握线虫的基本培养技术，观察并且区分两种线虫个体发育过程的异同； 3.理解线虫RNA干扰技术的基本原理，并学会使用该方法对目的基因进行干扰。 二、 实验原理 秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegan）属于线虫动物门（Nematoda）隐杆线虫属（Caenorhabditis）秀丽隐杆线虫种（C.elegans），根据命名法则中的二名法命名为Caenorhabditis elegans。上世纪六七十年代分子遗传学的奠基人之一Sydney Brenner将线虫作为分子生物学和发育生物学研究的模式生物。 C.elegans为蠕虫状，长度约1mm，因其个体结构简单、体细胞数目恒定，特定细胞位置固定，生活史短、遗传背景清楚、基因组测序已经完成等，在遗传与发育生物学、行为与神经生物学、衰老与寿命、人类遗传性疾病、病原体与生物机体的相互作用、药物筛选、动物的应急反应、环境生物学和信号传导等领域得到广泛应用。如细胞凋亡现象及其机理以及RNA干扰技术最早都是在线虫中被揭示的。 C.elegans的基本结构以及生活史 C.elegans有雌雄同体（XX）和雄虫(XO)两种性别，在自然条件下，成虫大多为雌雄同体，雄虫的个体数只占大约千分之一。其基本的结构包括口、咽、肠、性腺以及胶原蛋白角质层，雌雄同体有两个卵巢、输卵管、储精囊，及单一一个子宫（图1，2），雄性有个单叶的性腺、输精管及一个特化为交配用的尾部（图3，4）。 C.elegans是唯一一个身体中的所有细胞能被逐个盘点并各归其类的生物。其幼虫含有556个体细胞和2个原始生殖细胞，而它的成虫则根据性别不同具有不同的细胞数。最常见的雌雄同体成虫在发育期间，共产生1090个细胞，其中131个在特定时期凋亡，因此，其成熟后含有959个体细胞和2000个生殖细胞，而较少见的雄性成虫则只有1031个体细胞和1000个生殖细胞。 C. elegans有五对常染色体和一对性染色体，是一个染色体数很少的二倍体。 图1 雌雄同体线虫解剖示意图
发育生物学期末考试复习资料
发育生物学期末复习资料 一、发育的主要功能：产生细胞的多样性（细胞分化）；保证世代的连续（繁殖）。 二、发育的基本阶段：①胚前期:配子发生、成熟、排放的时期—生殖生物学（）。②胚胎期：受精、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官发生、新个体（幼虫、幼体，变态）。③胚后期：性成熟前期、性成熟期、衰老期（老年学）、死亡。 三、发育的主要特征和普遍规律： 细胞增殖（）：伴随发育的整个过程中，不同时期、不同结构增殖速度不同 细胞分化（）：从受精卵产生各种类型细胞的发育过程称为细胞分化。或者说，细胞的形态、结构和功能上的差异性产生的过程为细胞分化。 图式形成：胚胎细胞形成不同组织、器官和构成有序空间结构的过程。 形态发生（）：不同表型的细胞构成组织、器官，建立结构的过程。 卵裂：细胞分裂快、没有(或短)细胞生长的间歇期，因而新生细胞的体积比母细胞小。 胚胎在基本的形成之后，其体积会显著增长，原因在于细胞数量增加、细胞体积增加、胞外物质的积累。不同组织器官的生长速度也各异。 :指细胞特性发生了不可逆的改变，发育潜力已经单一化。 :指一组细胞在中性环境下离体培养，它们仍按其正常命运图谱发育。 诱导信号在细胞之间传递的三种方式：扩散性信号分子、跨膜蛋白的直接互作、间隙连接 信号传导特点:传递距离有限；并非所有细胞都能对某种信号发生反应；不同类型细胞可对同一信号发生不同反应, ., 乙酰胆碱使心肌收缩频率下降，但促使唾液腺分泌唾液。 模式生物的主要特征：取材方便；胚胎具有较强的可操作性；可进行遗传学研究 脊椎动物模式生物：两栖类：非洲爪蟾；鱼类：斑马鱼；鸟类：鸡；哺乳动物：小鼠。
1. 非洲爪蟾主要优点：1. 取卵方便，不受季节限制； 2. 卵1.4、胚胎体积大，易于操作； 3. 发育速度快，抗感染力强，易于培养。4、卵母细胞减数分裂。 主要缺点：异源四倍体，突变难。 2. 斑马鱼主要优点：1. 易于饲养，性成熟短，3个月；产卵力强；2.体外受精和发育，胚胎透明，易于观察; 3. 易于遗传操作：如杂交、诱变； 4. 基因组测序已完成;5、胚胎发育机理和基因组研究。 3. 鸡主要优点：1. 体外发育，易于实验；2. 器官（肢、体节）发育的重要模型；3. 基因组测序已完成。 4. 小鼠主要优点:1. 世代周期短2个月；2. 人类疾病的动物模型；3. 基因组测序已完成，遗传背景清楚，实验手段完善。 无脊椎动物模式生物：果蝇；线虫;其他：海胆；海鞘；文昌鱼；水螅；涡虫；拟南芥 1. 黑腹果蝇主要优点:1. 个体小，生命周期短，易于繁殖，产卵力强，操作简便，成本低； 2.染色体巨大，易于基因定位。其胚胎和成体表型特征丰富。胚胎发育图式； 3. 基因组测序已完成，遗传背景清楚，实验手段完善。 2、线虫主要优点：1. 成虫体长1，结构简单，细胞数目少，谱系清楚；2. 性成熟短2.5-3d 易于培养，便于突变筛选，两种成虫；3. 基因组测序已完成。 3、海胆主要优点：1. 最早的发育生物学模式动物；2、早期发育的模型，受精；3、已完成紫海胆基因组的破译、分析工作。 希腊哲学家在公元前第4世纪在对鸡胚和一些无脊椎动物胚胎观察后提出胚胎发育的两种假设：后成论() 与先成论()。 细胞的命运早在卵裂时，由细胞所获得的合子核信息决定——镶嵌型发育 发育生物学五大未解难题（中心问题）：①分化难题：相同的基因组怎样产生不同类型的细胞？②形态发生难题：细胞是如何组建自己又如何形成恰当的排序？③生长难题：生物体内的细胞如何知道它何时该长，何时该停？④生殖难题：生殖细胞是如何发出指令形成下一代的？细胞核和细胞质中允许它们完成这一使命的指令又是什么？⑤进化难题：在发育中的变化怎样创造新体型呢？哪些变化能够起到进化的作用？ 第一章细胞命运的决定
福师1203考试批次《发育生物学》复习题及参考答案讲课教案
福师1203考试批次《发育生物学》复习题及参考答案
福师1203考试批次《发育生物学》复习题及参考答案一 一、单选题（每小题1分，共30分） 1.生精细胞的基因表达在何期停止？（） A.初级精母细胞阶段； B.次级精母细胞阶段； C.精子细胞阶段； D.精原细胞阶段。 2.在卵母细胞发育的双线期，细胞核（） A.称为卵泡； B.又叫胚泡； C.中出现多线染色体； D.中出现灯刷染色体。 3.在昆虫卵母细胞中，许多mRNA和蛋白质是由（） A.卵母细胞自身合成的； B.滤泡细胞合成的； C.抚育细胞合成的； D.卵室以外的细胞合成的。 4.在蛙的卵母细胞发育过程中，细胞核中出现了多核仁。出现多核仁表明：（） A.卵母细胞能够合成大量的DNA； B.卵母细胞处于减数分裂的中期阶段； C.卵母细胞能够合成大量的核糖体； D.卵母细胞能够合成大量的tRNA。 5.哺乳动物的精子在受精之前要发生一个重要的变化。这个变化叫（） A.“获能”； B.皮层反应； C.蜕膜反应； D.透明带反应。 6.海胆受精卵起着永久阻止多精入卵的作用。（） A.质膜电位的升高； B.的透明带反应； C.的皮层反应； D.蜕膜反应。 7.下列哪一种动物的卵裂属于盘状卵裂？（） A.昆虫类的卵裂； B.鸟类的卵裂； C.哺乳动物的卵裂； D.蛙的卵裂。 8.下述哪一项不是哺乳动物卵裂的特点？（） A.早期的分裂，卵裂球数量逐个增加； B.卵裂间隔时间较长； C.8细胞阶段经历一个致密化过程； D.卵裂属于螺旋型卵裂。
9.在昆虫的原肠胚形成中，胚带伸展到背部时，形成了14个（） A.体节； B.副体节； C.尾节； D.顶节。 10.鱼胚的卵裂球往胚盘边缘集中，在胚盘的边缘形成了一个环状的结构。这个结构叫 （） A.胚盾； B.原条； C.胚环； D.胚孔。 11.在爪蟾的原肠胚形成过程中，（） A.原先位于胚胎表面的预定内胚层进入胚胎内部； B.原先位于胚胎表面的预定外胚层进入胚胎内部； C.原先位于边缘带区域内胚层下方的预定中胚层移到原肠腔的上方； D.原先位于边缘带区域内胚层下方的预定中胚层移到原肠腔的两侧。 12.鸟类的原肠胚形成时会产生一个结构，胚胎的将通过该结构进入胚胎内部。（） A.神经外胚层； B.脊内部版本索中胚层； C.表皮外胚层； D.以上各胚层。 13.在哺乳类的原肠胚形成过程中，（） A.胚胎同时植入子宫内膜； B.预定中胚层通过胚孔内卷； C.形成的卵黄囊的底壁就是上胚层； D.形成的羊膜的底壁就是下胚层。 14.神经外胚层先形成，再形成神经管。（） A.三个脑泡； B.神经板； C.五个脑泡； D.脊髓。 15.在神经板分化形成神经管的过程中，与神经板分离。（） A.间介中胚层； B.脊索中胚层； C.内胚层； D.神经嵴细胞。 16.以下哪一项不是从间介中胚层发育来的？（）
发育生物学复习重点
文春根发育生物学复习重点 名词解释 1、形态发生决定子：也称形成素或胞质决定子，存在于卵细胞质中的特殊物质，能够制定细胞朝一定方向分化，形成特定组织结构。 2、顶体反应：是指受精前精子在同卵子接触时精子顶体产生的一系列变化。顶体反应释放的水解酶溶解和精子结合的卵黄膜或透明带，并在该位置进行精卵细胞膜的融合。 3、初级神经胚形成：原肠胚的脊索中胚层诱导其上方的外胚层形成神经系统这个关键的诱导作用，传统地被称为初级胚胎诱导。 4、卵裂：从受精卵到囊胚阶段的细胞分裂，是一系列的有丝分裂，在卵裂过程中，细胞质没有增加，受精卵的细胞质被分配到越来越小的卵裂球之中，卵裂过程中，并没有生长的时期，相邻的两次卵裂之间的间隔时间很短，从而使细胞质与细胞核的比率越来越小。 5、ZP3：称为透明带蛋白，它与ZP1、ZP2以网状的骨架结构存在于透明带中，ZP3能结合精子，并引发顶体反应。 6、多线染色体：分裂间期形成的染色体，由于复制多次而没有分离其复制产物， 许多染色线集合在一个染色体中，同时由于染色线折叠形成带与间带很明显区别的结构（2分）。 7、拟常染色体：含有与X染色体共有的DNA序列（1分），这使它能在有丝分 裂期间与X染色体配对（1分）。 8、乌尔夫氏再生：将成体蝾螈晶状体除去后（1分），可以从虹膜背缘再生出 新的晶状体。 9、阈值：变态过程中涉及的主要问题是发育事件的相互协调，协调变态的工具 好象是产生不同的特异影响需要不同数量的激素（2分）。 10、Bohr 效应：多数脊椎动物的血红蛋白显示出与氧的结合随pH的升高而增加 11、原肠作用：胚胎细胞剧烈的、高速有序的运动过程，通过细胞运动实现囊胚细胞的重新组合。 12、精子获能：是指精子获得穿透卵子透明带能力的生理过程，是精子在受精前必须经历的一个重要阶段。 13、胚胎诱导:在有机体的发育过程中，一个区域的组织与另一个区域的组织相互作用，引起后一种组织分化方向上的变化的过程称为胚胎诱导。 14、原条：鸟类和哺乳类原肠胚形成中的结构，由上胚层中预定中胚层和内胚层细胞组成，这些细胞通过原条进入胚胎内部，胚胎形成了三胚层，原条最终消失。 15、组织者：能够诱导外胚层形成神经系统，并能和其他组织形成次级胚胎的胚孔背唇称为组织者。 16、类坏死：指细胞处于活的和死亡之间（1分），有着一整套原生质的临界状态（1分），这种变化是可逆的。 17、转分化：虹膜背缘或神经视网膜上皮分化（1分）为晶状体或类晶状体。（1分） 18、全能细胞：能产生有机体的全部细胞表型，或可以产生一个完整的有机体， （1分）它的全套基因信息都可以表达，如合子或早期的分裂球等。（1分）
中小学暑期安全教育主题班会教案
中小学暑期安全教育主题班会教案 活动目的： 暑假快到了，为了能让孩子们平平安安过好假期，通过本次活动，让学生学习防溺水、防交通事故、防暴力伤害、预防中暑、防拐骗等安全知识。 活动过程： 一、防溺水： 1.不私自外出到方塘、水库、海边等有水的地方去玩或游泳。 2.要对防溺水安全有足够的认识，严禁同学们私自玩水。家长陪同时也要注意安全。 二、防交通事故： １.遵守道路交通法规，树立道路交通安全意识。 ２.行路时遵守道路交通规则，不翻越栏杆，不在道路上开展娱乐、游戏活动，更不能扒车、强行拦车或朝车上扔石子、翻越、倚坐道路隔离设施等。横过公路、铁路时，要“一站二看”确认安全后快速通过。 3.骑自行车时应在非机动车道内顺序行驶，无非机动车道的，应靠路右侧行驶。不超速、逆向行驶，更不能追逐骑车、脱把骑车。 4.不乘坐非营运车辆和营运超员车辆，乘车时，头、手不能伸出车窗外，以免发生意外，下车时应确认无车辆来往后再离开。 三、机智勇敢斗坏人。
●不要听信陌生人的话。不要单独在街上乱走、乱看。 ●贵重物品不要随身带。平时不要乱花钱，也不要带太多钱。 ●遇到勒索等情况，要及时报警。 ●遇到抢劫时，要首先保护自己的生命安全，不要为了财物与歹徒硬拼。 ●遇到色狼侵犯时，要大胆拒绝，并尽快把详细情况告诉父母。 ●如果看到有人拿着凶器冲着你，要赶快躲避。 ●如果被坏人绑架时，看到周围有成年人可以帮助自己，就应大声呼救。 ●被绑架后，要保持镇定，细心观察周围环境，并装出很配合的样子，使坏人大意。然后，想办法报警或逃跑。 ●如果被拐卖，要想办法报警。如果被卖到陌生的地方，要想办法了解自己所在地方的名称，以便求救。 ●如果想尽一切办法都不能自救，就要耐心地等待家长和警察的救助。 ●平时要牢记父母的手机号码、家里的电话号码及区号、家庭通讯地址和邮政编码等。 四、预防中暑的措施： 1.不要长时间暴露在烈日下；不要把温度调得过低，室内外温差太大易加重中暑；在室外活动时尽量多饮一些水等等。 2.一旦出现上述症状，应立即到阴凉通风处休息，补充清凉含盐饮料；重者送医院抢救。
细胞生物学教案(完整版)
细胞生物学教案 （来自https://www.360docs.net/doc/3318222547.html,）目录 前言 第一章绪论 第二章细胞结构概观 第三章研究方法 第四章细胞膜 第五章物质运输与信号传递 第六章基质与内膜 第七章线粒体与叶绿体 第八章核与染色体 第九章核糖体 第十章细胞骨架 第十一章细胞增殖及调控 第十二章细胞分化 第十三章细胞衰老与凋亡
前言 依照高等师范院校生物学教学计划，我们开设细胞生物学。 一、学科本身的重要性 要最终阐明生命现象，必须在细胞水平上。细胞是生命有机体最基本的结构和功能单位，生命寓于细胞之中，只有把各种生命活动同细胞结构相联系，才能在细胞水平上阐明各种生命现象。世界著名生物学家Wilson（德国人）曾说过：“一切生物学问题的答案最终要到细胞中去寻找”。 二、学科发展特点 细胞生物学涉及知识面广、内容浩繁且更新迅速。它同生物化学、遗传学形成生命科学的鼎立三足，既是当代生命科学发展的前沿，又是生命科学赖以发展的基础。 三、欲达到的目的 通过系统地学习细胞生物学，丰富细胞学知识，以适应当代人类社会知识结构发展的需求，也是为考研做准备。 本课程讲授51学时，实验21学时，共72学时。 参考资料 1 De.Robertis，《细胞生物学》，1965年（第四版）；1980年（第七版）《细胞和分子生物学》 2 Avers，“Molecular Cell Biology”， 1986年 3 Alberts，《细胞的分子生物学》，“Molecular biology of the cell”，1989年 4 Darnell，《分子细胞生物学》，1986年（第一版）；1990年（第二版）“Molecular Cell Biology”5郑国錩，细胞生物学，1980年，高教出版社；1992年，再版 6 郝水，细胞生物学教程，1983年，高教出版社 7 翟中和，细胞生物学基础，1987年，北京大学出版社 8 韩贻仁，分子细胞生物学，1988年，高等教育出版社；2000年由科学出版社再版 9 汪堃仁等，细胞生物学，1990年，北京师范大学出版社 10 翟中和，细胞生物学，1995年，高等教育出版社，2000年再版 11 郑国錩、翟中和主编《细胞生物学进展》， 12翟中和主编《细胞生物学动态》，从1997年起（1—3卷），北师大出版社 13徐承水等，《分子细胞生物学手册》1992，中国农业大学出版社 14徐承水等，《现代细胞生物学技术》1995，中国海洋大学出版社 15徐承水，《细胞超微结构研究》2000，中国国际教育出版社 学术期刊、杂志 国外：Cell、Science、Nature、J.Cell Biol.、J.Mol. Biol. 国内：中国科学、科学通报、实验生物学报、细胞生物学杂志等
植物发育生物学
一．侧根及不定根是如何发生的？ 不论主根，侧根或不定根所产生的支根统称为侧根。当侧根开始发生时，中柱鞘的某些细胞开始分裂。最初的几次分裂是平周分裂，结果使细胞层数增加，因而新生的组织就产生向外的突起。以后的分裂，包括平周分裂和垂直分裂是多方向的，这就是使原有的突起继续生长，形成侧根的根原基的分裂，生长，逐渐分化出生长点和根冠。生长点的细胞继续分裂，增大和分化，并以根冠为先导向前推进，由于侧根不断的生长所产生的机械压力和根冠所分泌的物质能溶解皮层和表皮细胞，这样，就能使侧根较顺利无阻地依次穿越内皮层，皮层和表皮，而露出母根以外，进入土壤。由于侧根起源于母根的中柱鞘，也就是发生于根的内部组织，因此它的起源是内起源 不定根通常泛指植物的气生部分，地下茎以及较老的，特别是有次生生长的根部所形成的根。不定根的起源和发育像侧根一样，通常是内起源，发生在十分靠近维管组织的地方，其生长过程必须经过该部位以外的组织。 二．关于种子植物茎端结构和活动方式有哪些学说，其主要内容有哪些？ （1）顶端细胞学说：1844年Nageli根据对大多数隐花维管植物的研究提出的。主要观点是最简单的顶端分生组织，结构上只有一个大的原始细胞-顶端细胞。 （2）组织原学说：1868年Hanstein根据种子植物的顶端分生结构特点提出的。顶端分生组织可划分为三个原始细胞区，即表皮原、皮层原和中柱原。这些细胞普遍地排列成行，最外面一层为表皮原分化为表皮层；其下为皮层原分化为皮层；中央是中柱层分化出维管组织和髓。 （3）原套-原体学说：1924年Schmidt 提出。该学说认为顶端分生组织的原始区域包括1：原套，只沿垂直于分生组织表面的方向进行分裂（垂周分裂）的一层或几层周围细胞；2：原体，包括原套下的基层细胞，其中的细胞向各个方向分裂，不断增加而使茎的顶端增大。 （4）细胞组织分区概念：1938年Forster 提出。 （5）等待分生组织学说：1955,1961年 Buvat根据对根端结构研究提出的。此学说 提出远轴细胞轴区是比较不活动的而真正发 生细胞分裂的区域是在周围和顶端下面的区 域，由此产生出茎的组织和叶原基，在胚胎 或后胚的生长顶端结构组成之后，远端的一 群细胞成为等待分生组织，它停留在不活动 状态，一直到生殖阶段，才在远端的细胞恢 复了分生组织活动。 （6）分生组织剩余学说：1965年 Newman提出。根据此理论把维管植物的顶 端分生组织分为三种类型：单层型；简层型； 复层型。 三．细胞周期有哪些主要阶段，各阶段 特点是什么？ 一个细胞周期包括两个阶段：分裂间期 和分裂期， 分裂间期为分裂期进行活跃的物质准 备，完成DNA分子的复制和有关蛋白质的 合成，同时细胞有适度的生长 分裂期又分为分裂前期、分裂中期、分 裂后期和分裂末期。 前期：两个中心体分开，向两极移动。 染色质逐渐浓集形成染色体，核仁核膜解体 前中期：核膜消失，染色体随机排列在 细胞中间，纺锤体形成。 中期：染色质最大程度凝集，染色体以 着丝粒非随机的排列在纺锤体中央的赤道板 上。每条染色体纵裂为两条姐妹染色单体。 后期：姐妹染色单体分离并移向细胞的 两极 末期：子代细胞的核重新形成，胞质分 裂 四.植物生长发育与动物的生长发育不 同之处有哪些？ （1）动物在胚胎发育中其组成细胞可移 动位置，植物的则不能移动，细胞间彼此联 结很紧密。 （2）动物细胞通常没有细胞壁，植物则 有，因此后者细胞死后仍保持一定的形态， 死细胞和活细胞共同组成植物体。 （3）植物细胞比动物细胞更容易表现出 全能性，容易在人工培养条件下发育形成新 的个体或器官。 （4）动物胚胎发育完成后几乎是全面地 生长，成熟动物体重不在特定部位保留干细 胞群，不再增加新的器官和组织。植物则是 在特定部位保留有分生组织细胞群，形成局 部生长，一生中不断形成新的器官和组织。 （5）动物在环境中是可以自由移动的， 因此它们就有一定逃避不良环境的能力，其 本身对环境的适应能力也就较差，而植物则 通常不能主动移动，无法逃避不良环境，因 此其内部结构和外部形态，甚至其生理活动 都较容易受环境的影响，随环境条件的变化 而发生一定的变化，以适应这些变化了的环 境而生存下来。 （6）动物的减数分裂发生于形成配子 时，只有二倍体的动物体，没有单倍体的动 物体，因此没有世代交替。而高等植物的减 数分裂则都发生于形成孢子时，既有二倍体 的植物体，也有单倍体的植物体，两种植物 体交互出现形成世代交替。种子植物的配子 体寄生在孢子体上，这就使得植物，特别是 高等植物的性别概念不同于动物，性别决定 问题也就更复杂。 五．植物生长调节剂在植物发育中有哪 些调节作用？ 植物生长调节剂是在植物生长发育中起 着重要调节作用的一类化学物质，其中绝大 部分是植物体内自身产生、自身调节浓度， 作为调节生长发育过程的信号起作用的。已 发现具有调控植物生长和发育功能物质有生 长素、赤霉素、乙烯、细胞分裂素、脱落酸 等。 1、决定细胞分化的方向：按照位置效应 理论，细胞在植物体内所处的位置决定其分 化的命运。在所有的位置信息中，激素是最 重要的信息之一。（1）开启还没通过细胞分 化临界期细胞的脱分化过程。（2）改变细胞 分化的方向。 2、在形成层活动中的控制作用（1）控 制形成层活动周期；（2）维持形成层纺锤状 细胞的形态和排列方向（3）控制木质部分化 （4）控制韧皮部分化。 3、诱导器官建成（1）根的形成（2）芽 的形成（3）茎的伸长（4）胚的极性建立和
暑假安全教育教案
暑假安全教育教案 教学内容：进行暑假安全教育。重点是出行和交通安全、防溺水防中暑安全、防雷电与用电安全、防疾病与饮食安全、远离黄赌毒与网络安全等。 教学目标：通过学习与暑假相关的安全知识，牢记安全要点与要求，牢固树立“以人为本”、“安全第一、预防为主”的理念，使同学们过一个平安、祥和、健康、安全的暑假。 教学方法：讲授法、讨论法、提问法、练习法。 教学用具：多媒体教学（配合课件） 教学时数：一课时（45分钟） 教学过程： 【谈话引入】 同学们，通过一学期的每周一课安全教育，大家掌握了丰富的安全知识，树立了牢固的安全意识。一个学年紧张又充实的学习生活已经圆满完成，随着期末考试的结束，大家即将进入假期。同学们一定想彻底放松一下身心吧，都希望拥有一个愉快而又祥和的假期生活，对吧？但我们要记住虽然我们大家放假了，但安全教育不能松懈。因为“多一份防范，少一份危险”。为保证大家过一个平安、祥和、健康、安全的暑假，今天我们以“以人为本”、“安全第一，预防为主”为原则，对大家进行一次假期安全教育。 【授课内容】 接下来就谈谈暑假安全要注意什么吧。 一句话，希望大家在暑假里能记住暑假安全“三个三”!即： “第一个三”是遵守“三个禁止”：禁止违反交通规则，禁止单独擅自下河游泳，禁止长时间看电视、玩游戏； “第二个三”是告诫“三个严防”：严防中暑、触电、雷击和火灾事件发生，严防食物中毒、煤气中毒，严防暑期打工出意外； “第三个三”是提醒“三个远离”：远离网吧、游戏机房，远离毒品、烟酒，远离不良青少年。 现在我来给大家分别解释一下。 一、要遵守“三个禁止”。 (一)、禁止违反交通规则。
就是要大家注意交通安全。不管在回家的路上还是外出社会实践，算出打工。 （图片、惨痛的教训，一系列数字。。。） 1、行走时怎样注意交通安全 1）在道路上行走，要走人行道，没有人行道的道路，要靠路边行走。 2）集体外出时，要有组织、有秩序地列队行走。 3）在没有交通民警指挥的路段，要学会避让机动车辆，不与机动车辆争道抢行。 4）穿越马路时，要遵守交通规则，做到“绿灯行，红灯停”。 5) 不横穿马路，不翻越栏杆，不在公路上玩耍。 2、骑自行车要在非机动车道上靠右边行驶，不准骑自行车搭载人员上街。 3、严禁无证驾驶机动车辆。 4、外省市的学生和家长不乘坐超载车辆，不坐非法营运车辆。在乘车、转车途中一定要遵守交通规则，注意人身、行李安全，加强防盗意识，“财不露眼”啊。如有学生假期外出旅游更应加强安全防范措施，防止意外伤害。在旅游区遇地势险峻或安全措施不到位的地方不得前往。外出要告诉家里联络的各种信息。 5、熟记警句：（先让学生讲讲自己熟悉的，再学习新的警句） 1、抢行痛快一阵子，出事悔恨一辈子。 2、实线、虚线斑马线，都是安全生命线。 3、红灯绿灯警示灯，幸福安全红绿灯。 (二) 禁止单独擅自下河游泳，就是要注意防溺水。 （前车之鉴。。。。。。。。） 暑期天气炎热，不要到水底情况不清的小河或者禁止游泳的地方游泳。 游泳时要注意的安全： 1、游泳需要经过体格检查。 2、要慎重选择游泳场所。 3、下水前要做准备运动。 4、饱食或者饥饿时，剧烈运动和繁重劳动以后不要游泳。 5、水下情况不明时，不要跳水。 6、发现有人溺水，不要贸然下水营救，应大声呼唤成年人前来相助。 (三) 禁止长时间看电视、玩游戏，就是要注意合理安排作息时间，保证充足睡眠，不要长时间沉迷于电视或电脑。要保护好眼睛。不随意模仿电视或游戏中的暴力行为。 二、告诫“三个严防”。
南昌大学发育生物学复习重点
南昌大学发育生物学复习重点 一、名词解释 1.母体效应基因：又称母体因子，在卵母中呈极性分布，受精后被翻译为在胚胎发育中起重要作用的转录因子和翻译调节蛋白的mRNA分子，他们在胚胎发育的决定中起重要作用。 2.顶体：精子头的顶端特化的小泡，叫作顶体(acrosome)，它是由高尔基体小泡发育而来。 3.缺口基因：沿果蝇前后轴最早表达的合子基因,它们均编码转录因子,参与果蝇胚胎前后轴早期模式的形成。 4.灰色新月区：精子入卵后，皮层向精子进入的方向旋转大约30°，在动物极皮层含大量色素而内层含有少量色素的物种中，这一胞质不同层次的相对运动形成了一个在精子进入点对面的新月形的灰色区域，称为灰色新月。 5.体节：随着原条退化和神经褶开始在胚胎中央合拢，轴旁中胚层分隔成细胞团块，称为体节。 6.生长锥：生长锥为轴突或树突的末端，其生长点往往呈锥形,故又称生长锥。 7.菱脑节：神经管闭合后,后脑前后轴逐渐被划分为8节,成为菱脑节,每个菱脑节是一个发育单位。 8.诱导多能干细胞：是通过基因转染技术将某些转录因子导入人或动物体细胞,使体细胞直接重构为胚胎干细胞样的多潜能细胞。 9.分子简约性：又称小型工具盒，是由相同类型的分子发育成不同的动物体的性质叫分子简约性。 10.非遗传多样性：不可遗传的、由环境诱发的非连续表型 11.ZP3：透明带中的化学组分,是一种糖蛋白。能结合精子，引起顶体反应。 12.胚后发育：在动物个体发育过程中，经过幼虫或幼体至成虫、或成体达到性成熟时的发育过程，称为胚后发育。 13.生殖质：有些动物的卵细胞质中存在着具有一定形态结构、可识别的特殊细胞质。生殖质由蛋白质和RNA 组成，定位于卵质的特殊区域。 14.盘状卵裂：盘状卵裂是鱼类、爬行类、鸟类及部分头足类的卵裂方式。属于不完全卵裂。鱼类、爬行类和鸟类的卵子是端黄卵，卵子中的细胞质集中于动物极的一个很小的区域，该区域称胚盘。卵裂只在胚盘中进行，卵黄不参与卵裂。 15.皮质反应：精子进入后,这些皮质颗粒便与卵质膜融合,使内容物释放于卵周隙中(成分可能为蛋白酶类),形成受精膜,称之为皮质反应。 16. 初级神经管形成：在脊索中胚层的诱导下,外胚层细胞增殖、内陷、对折、顶端封闭、