基因工程习题及答案
第二章习题
一、单选题
1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ）
A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶
E. RNAase
2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )
A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。
B. 它们的识别序列完全相同。
C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。
D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ）
A. 37℃
B.30℃
C.25℃
D.16℃
E.33℃
4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )
A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。
B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。
C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。
D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。
E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D )
A. 1/44
B. 1/66
C. 1/64
D.1/46
E. 1/106
6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C )
A. PH:2-4
B. PH:4-6
C. PH:6-8
D. PH:8-10
E. PH:4-10
7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )
A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。
B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。
C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。
E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。
8. II类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）
A. Na +
B. Ca2+
C. Mg2+
D. Zn2+
E. Mn2+
9. RFLP形成的原因是（ A ）
A. 由于遗传变异造成同源染色体中碱基的随机变化。
B. 使用不同的限制性内切酶进行切割。
C. 杂交时使用不同的探针。
D. 每种染色体存在两条。
E. 提取不同的染色体DNA酶切。
10. 下列关于限制酶命名的表示方法，正确的是（ E ）
A. Sau.3A I
B. B.amH I
C. pst I
D. Ecor I
E. Hind III
11. 需进行DNA部分酶切时，控制下列哪种条件最合适（ D ）
A. 反应时间
B. 反应体积
C. PH
D. 限制酶量
E.反应温度
12. 下列酶在反应中不需要ATP的是( D )
A. E coK
B. T4DNA连接酶
C. BamH I
D. EcoB
E. DNA pol I
13. 限制性内切酶可特异性识别 ( B )
A. 双链DNA的特定碱基对
B. 双链DNA的特定碱基序列
C. 单链RNA的特定碱基序列
D. 单链DNA的特定碱基序列
E 双链RNA的特定碱基对
14. 下列与RFLP相关的一条是( D )
A. 不同限制酶在单个染色体DNA上的限制性图谱。
B. 两种物种个体间的限制性图谱。
C. 同一个体等位基因的限制性图谱。
D. 同一物种不同个体的限制性图谱。
E. 非同源染色体用同种限制酶切形成的限制酶图谱。
15．限制酶的星号活性是指在非正常条件下，限制酶（ A ）
A. 识别和切割序列发生变化。
B. 切割活性大大提高。
C. 识别和切割序列与原来完全不同。
D.
可以任意切割DNA。E. 只能部分切割DNA。
二、多选题
1. 下列因素中影响限制酶切割的有( A,B,C,D,E)
A. EDTA浓度
B. 甘油浓度
C. DNA纯度
D. 酶的自身活性
E. 盐浓度
2. 限制酶反应中出现星活性的可能原因是（A B D E）
A．酶浓度太高 B 低盐 C 盐浓度过高 D 高PH E 甘油浓度>5%（V/V）
3．限制酶切割后的DNA电泳得到的电泳条带有些扩散，可能原因是（B，C，D，E）
A．酶失活 B 有蛋白质与DNA结合 C 酶切条件不合适
D 有外切核酸酶污染
E 星号活性
4．下列有关回文序列的描述正确的是（A，B，C）
A．是II类限制酶的识别序列 B 是某些蛋白的识别序列 C 是基因的旁侧序列 D 是高度重复序列
E 是卫星序列
5．下列有关回文序列的一般特征正确的是（B，C，D，E）
A．可增强基因表达 B 有对称轴 C 是自我互补的序列
D．两条链从5‘ 3‘方向的序列一致 E 是II类限制酶的识别序列
6．关于II类限制酶说法正确的是（B，D）
A．具内切核酸酶和甲基化酶活性
B．仅有内切核酸酶活性
C．只识别非甲基化的DNA序列
D． II类限制酶反应条件只需要Mg2+
E． II类限制酶反应需要Mg2+,ATP
7．通过限制性片段分析，可对等位基因进行精确比较是因为（B，C）
A．限制酶只切割两个变异等位基因中的一个
B．限制酶位点可作为遗传标记
C．它不依赖变异的等位基因的产物的功能
D．不同组织等位基因的核苷酸序列存在差异
E．同一组织等位基因核苷酸序列不会完全相同
8. 下列关于II类限制酶的叙述正确的是（B，C，D，E）
A．它既有内切酶的活性，也有外切酶活性
B．在特异位点对DNA进行切割
C．同一限制酶切割双链DNA时产生相同的末端序列
D．有些限制酶切割双链DNA产生粘末端
E．有些限制酶切割双链DNA产生平末端
9．限制酶反应结果若显示没有切割，可能原因是（A，B，C，D，E）
A．限制酶无活性 B 存在抑制剂如SDS，EDTA C DNA不纯
D．缓冲液组成不合适 E DNA甲基化
10．下列关于限制酶的叙述正确的是（B，C，D）
A．在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他限制酶就不能切割了。 B．限制酶在DNA中的识别/切割位点的二、三级结构影响酶切效率。
C．如果限制酶的识别位点位于DNA分子末端，那么接近末端的程度也影响切割。
D．已知某限制酶在一环状DNA上有3个切点，因此该酶切割这一环状DNA，可得到3个片段。
E．能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中没有该酶识别的序列。
11．酶在储存过程中迅速失活，可能原因是（A，B，C，E）
A．储存温度不合适 B 稀释后储存 C 储存缓冲液不合适
D．分装后储存 E 储存缓冲液中蛋白浓度低
12．限制酶切反应结果显示为部分切割，可能原因是（A，B，C，D，E）
A．限制酶失活 B 有抑制剂如SDS，EDTA等存在 C 反应条件不合适
D DNA不纯
E DNA结构（线形或超螺旋）的影响
13．如果用限制酶切割DNA后得到的片段比预期的多，可能原因是（B，C，E）
A．限制酶失活 B 限制酶的星号活性 C 有其他限制酶污染
D 有抑制剂存在
E 测试DNA中有其他DNA污染
14．限制酶切割后的产物连接反应效果差，可能原因是（A，B，C，E）
A．限制酶去除不完全 B 平端连接 C 核酸外切酶污染
D．连接反应温度低于16℃
E．从限制酶消化中带来太高浓度的磷酸盐或其他盐类
15．下列限制酶属同裂酶的是（A，B，D，E）
A．BamHI G↓GATCC Sau3AI ↓GATC
CCTAG↑G CTAG↑
B． Sal I G↓TCGAC Xho I C↓TCGAG
CAGCT↓G GAGCT↓C
C． BamH I G↓GATCC EcoR I G↓AATTC
CCTAG↓G CTTAA↓G
D. Hpa II G↓CGC Msp I C↓CGG
CGC↓G GGC↓C
E. Xba I T↓CTAGA Nhe I G↓CTAGC
AGATC↓T CGATC↓G
三．填空题
1．限制酶是一类专门切割 DNA 的酶，它能特异性识别切割双链（单、双）DNA。
2．II型限制酶识别位点一般长度为 4~6 个核苷酸对。
3．个体之间DNA限制酶片段长度存在差异称限制性片段长度多态性（RFLP）。
4．限制酶命名采用Smith和A thens提议的方案，第一个字母大写取自来源细菌的属名；第二、三个字母取自来源细菌的种名；第四个字母（如果有）取自来源菌的株系。
5．需要部分酶切时可采取的方法有（1）减少酶的用量（2）缩短反应时间（3）增大反应体积。
6．限制酶识别序列为n个碱基，则其切割频率的理论值应是 4n。
7．限制性内切酶通常保存在 50% 浓度的甘油溶液中。
8．甘油浓度是导致一些酶的星活性的原因之一，在酶切时反应体系中的甘油浓度应控制在 5% 以下。
9．限制与修饰是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA的限制和对自身DNA的修饰来实现的。
10．II型限制酶既具有识别位点的专一性，也具有切割位点的专一性。它作用时需要 Mg2+ 离子作辅助因子。
四．简答题
1．在酶切缓冲液中加入牛血清白蛋白（BSA）的目的与机理是什么？
答：目的是保护酶的活性；机理是通过提高反应体系中蛋白质的浓度，防止内切酶失活。
2．如果用EcoR I酶切DNA时出现星活性，试分析原因？
答：主要原因有：酶浓度太高；高PH；低盐；含Mn2+、Cu2+等非Mg2+金属离子；甘油浓度高于5%；存在某些有机溶剂。
3．下列序列中哪些可能是II类限制酶的识别序列？
ATATCG CCCGGG GATATC AGCCGA GAGTC
答：CCCGGG GATATC GAGTC
4．用Klenow酶可将5‘粘末端填补成平末端，而导致某些限制位点消失，下列酶切后用klenow处理再连接不会丢失识别位点的是哪些？
XmaI C↓CCGGG BssH II G↓CGCGC PstI CTGCA↓G
HhaI GCG↓C HpaII G↓CGC
答：BssH II, HpaII
5．当两种限制酶反应条件不同时，若要用双酶切，应采取什么措施？为什么？
答：要避免星活性及部分酶切。（1）先用低盐缓冲液中活性最高的酶切，再补盐和第二种酶；（2）用一种酶消化后，以酚：氯仿：异戊醇抽提，再经乙醇沉淀，将DNA重新溶解与适合第二种酶的缓冲液，加第二种酶消化；（3）先低温酶，后高温酶；（4）使用通用缓冲液。
6．试计算下列三种限制酶各自在某染色体DNA序列上的切割概率
Sau3A I GATC Pst I CTGCAG Hinf I GANTC
Acy I GPuCGPyC
答： 1/44；1/46；1/44；（1/44）x(1/22)
7．一长为4.2kb的DNA片段，分别用EcoRI、PstI及EcoRI+PstI消化，电泳结果如下图所示，请根据结果绘出该片段限制性图谱
0.7kb
0.7kb 0.8kb
1.5kb 1.4kb
2.0kb
2.0kb 2.8kb
EcoRI Pst I EcoRI + Pst I
答： EcoRI PstI EcoRI
0.7kb 0.7kb 0.8kb 2.0kb
回收与连接
一．单选题
1．用DEAE膜片法回收电泳分离的DNA片段时，在紧靠目的DNA片段前方的凝胶切一裂缝，以插入DEAE纤维素膜，该裂缝长度与DNA条带相比应（C）
A．略短 B. 等长 C. 略长 D. A或B都可 E . A、B、C都可
2．用透析膜插片凝胶电泳法回收DNA片段时，再区带前挖一小槽，将透析膜置于槽中，这时应注意（B）
A．透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B．透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C．透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D．透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E．随意插入槽中即可。
3．在回收DNA片段时，观察电泳结果为尽量减少对DNA的照射损伤应使用（A）
A．长波长紫外 B. 短波长紫外 C . 长波长红外 D. 短波长红外 E. ABCD都不可
4．DNA回收时，如要除去EB（溴化乙锭）可用下列那种试剂（ A ）
A．正丁醇 B. 苯酚 C. 氯仿 D. 异戊醇 E. 乙醇
5．在DNA分子克隆时，常用到部分填补法，填补时应注意（ E ）
A．控制反应温度 B. 控制酶的反应时间 C. 控制DNA聚合酶的用量
D. 控制反应PH
E. 限制dNTP的种类
6．下列关于平末端连接的说法正确的是（ B）
A．同等条件下连接效率高于粘末端连接的连接效率。
B．加入凝聚剂PEG8000可促进平末端连接。
C．平末端连接时反应温度要比粘末端连接温度高。
D．平末端连接方法的使用仅限于酶切后产生的两个平末端之间的连接。
E．平末端连接比粘末端连接更易产生自身环化。
7．用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化（ E ）
A．核酸内切酶 B. 核苷酸激酶 C. 核酸外切酶 D. 末端转移酶 E. 碱性磷酸酶
8．分子克隆中用T载体主要是与下列哪种产物连接（ D ）
A．单酶切产物 B. 双酶切产物 C. 同裂酶产物 D. PCR产物 E. 酶切后形成的平末端产物
9．采用BamH I单切载体和目的基因后，进行重组连接前要（ D ）
A． 65℃处理10分钟使BamH I灭活。
B．用碱性磷酸酶处理载体防止其自身环化。
C．电泳检测酶切结果。
D． A、B、C都正确。
E．只有A、C 正确。
10．粘末端连接的优点是操作简便且（ C ）
A．可产生新的酶切位点 B. 载体易自身环化 C. 易于回收片段
D．具有方向性 E. 选时更简便
二．多选题
1．重组连接时，反应体系必须的组分有（ A、C）
A．Mg2+ B. BSA C. ATP D. PO43- E . EDTA
2．DNA片段重组连接可用下列哪些方法（A、B、C、D、E）
A．平末端连接 B. 粘末端连接 C. 加接头连接 D. 同聚尾连接
E . T载体连接
3．酚抽提法回收DNA片段后残余的哪些物质可能会影响连接反应（A、C）
A．酚 B.微量的EB C.琼脂糖 D. 少量的乙酸钠 E .少量的乙醇
4．产生平末端的方法主要有（A、B、E）
A．用产生平末端的限制酶切。
B．用klenow片段补齐5‘粘末端。
C．用末端转移酶补齐粘末端。
D．用Taq聚合酶补齐粘末端。
E．用S1核酸酶降解粘末端。
5．在DNA重组连接时，常采用连接头连接（linker ligation），其作用是（A、B、C、E）
A．引入某些限制酶切位点。 B. 人工构建载体。
C．增加调控元件。 D. 调整阅读框。
E．通过接头引入与目的基因相同的限制酶位点，并对目的基因相应酶切点进行甲基化修饰保护，可保护目的基因不受限制酶破坏。
6．构建载体时，使用双酶切相对于单酶切的优点在于（A、B、C、D）
A．避免载体自身环化 B. 提高连接效率 C. 控制外源基因的插入方向
D. 便于转化后的筛选 E . 便于修改阅读框
7．下列关于同聚物加尾法的说法正确的是（A、B、C、D、E）
A．其核心是利用末端转移酶的功能，将载体和外源DNA的3‘端再加上一端寡核苷酸。
B．不易自身环化。 C. 连接效率高 D. 适用于CDNA克隆
E．可能会产生某种限制酶切位点。
8．下列与DNA重组连接相关的说法正确的是（A、D、E）
A．不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B．同聚尾法连接不仅连接效率高，也易回收插入的片段。
C．限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性，将有利于重组连接。
D．Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E．平末端连接时，在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
9．下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的（A、C、D）
A．高纯度DNA。
B．载体与目的基因摩尔数之比为1：1。
C．载体与目的基因摩尔数之比为1：3~5。
D．连接反应体系中DNA浓度较高。
E．连接反应体系中DNA浓度较低。
10．如果DNA分子重组时，需要用平端连接，下列哪些方法可形成平末端（B、C、D、E）。
A．3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
B．3‘突出的粘末端用核酸酶切平。
C．5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
D．5‘突出的粘末端用核酸酶切平。
E．利用切口为平末端的限制酶。
三、填空题
1．形成平末端的方法有用产生平末端的限制酶切，用S1核酸酶切除粘末端，用DNA聚合酶填平粘末端。
2．载体与CDNA连接重组可用的方法有同聚尾连接酶，加人工接头连接法。
3．DNA片段重组连接时，如要克隆PCR产物，PCR产物可直接用 T载体连接，而无须用限制酶处理。
4．回收DNA片段时，在确定DNA条带位置时，应使用长波长紫外灯，以最大限度减少对DNA的照射损伤。
5．回收DNA片段时，常用正丁醇处理以除去EB。
6．在用单一限制酶切载体和目的基因并进行连接时，为防止载体自身环化，常用碱性磷酸酶处理载体，或用
α-互补进行筛选。
7．DNA片段重组连接的方法主要有平端连接、粘端连接、同聚尾连接、加接头连接。
四．简答题
1．如何将一平末端的DNA片段与BamH I形成的粘末端连接？
答：使用加接头连接法。人工合成一段含BamH I酶切位点的DNA短片段，然后与该平末端片段两端连起来，用BamH I切割连接片段，即可形成BamH I的粘末端。
2．什么是同聚尾连接法？具有哪些优缺点？
答：同聚尾连接法是利用末端转移酶在载体和外源DNA的3‘端各加上一段互补的寡聚核苷酸，形成人工粘性末端，然后在DNA连接酶的作用下，连接成重组DNA。
其优点在于（1）由于同一DNA两端粘尾相同，不会自身环化；（2）连接效率高；（3）用任何一种方法制备的D NA都可用这种方法连接。
其缺点在于（1）方法复杂；（2）外源片段较难回收；（3）由于添加了同聚尾，可能会影响外源基因表达。
3．什么是接头连接法？
答：人工合成或来源于某一质粒的小段含某限制酶位点的DNA与载体或外源DNA分子相连，这样便在载体或外源DNA 上制造出新的酶切位点，即接头连接。
4．为什么用同裂酶进行体外重组效率最高？
答：同裂酶是指来源不同的限制酶切割DNA后，产生相同的末端。多数同裂酶产生的粘性末端并非完全一致而是有四个碱基相同，这样用同裂酶切割载体和目的基因后的连接产物常会失去原有的限制酶位点，这样用同裂酶进行重组时，限制酶切割反应后不用将该酶失活，即可直接进行重组连接，由于连接体系中原有限制酶存在，载体自连不会发生，从而保证了载体只同外源DNA的连接。
转化
一．单选题
1．下列哪种DNA结构在转化时能获得最高转化效率（）
A．线形双链DNA B. 单链线形DNA C. 完整的环状双链DNA
D．开口环状双链DNA E. A和C
2．下列表型中，哪种是基因工程上的理想的受体菌表型（ B ）
A. r+m+rec+
B. r-m-rec-
C. r- m+rec+
D. r+m+rec-
E. r-m-rec+
3．大肠杆菌出现感受态的生理期是（ B ）
A．潜伏期 B. 对数期 C. 对数后期 D. 平衡期 E. 衰亡期
4．CaCl2法制备E.coli感受态细胞时，摄入ＤＮＡ温度是（E ）
A．0℃ B. 16℃ C. 37℃ D. 25℃ E. 42℃
5．关于感受态细胞的下列说法不正确的是（ C ）
A．有人工感受态细胞和自然感受态细胞。
B．具有可诱导性。
C．有可转移性。
D．不同种细菌出现感受态的生理时期不同。
E．不同种细菌出现感受态的比例不同。
二．多选题
1．C aCl2诱导E.coli感受态细胞时，下列哪些因素会影响转化效率（A、B、C、D、E）
A．Ca2+浓度 B. DNA纯度与构象 C. DMSO D. 温度 E. PH
2．人工诱导感受态细胞，下列方法哪些正确（A、B、C、D）
A．CaCl2处理 B. 核酸酶抑制法 C. 饥饿法 D. PEG处理 E. DMSO
3．下列有关利用粘尾质粒将外源DNA导入E.coli中的说法正确的是（B、C、D、E）
A．空cosmid质粒可直接体外包装导入E.coli，也可用CaCl2法导入E.coli 。
B．Cosmid/DNA与头部蛋白、尾部蛋白混合，体外包装后可进入E.coli。
C．Cosmid虽然只有4~6kb ,但可容纳约40~50kb的外源DNA。
D．Cos序列是DNA包装到λ噬菌体颗粒中所需的DNA序列。
E．Cosmid/DNA重组体包装后以双链线性分子形式导入E.coli。
4．下列有关λDNA重组体导入E.coli 说法正确的是（A、B、C）
A．λDNA重组体必须有效包装后才能有感染E.coli的活性。
B．λDNA重组体包装要有头部蛋白、尾部蛋白的参与。
C．λDNA重组体包装长度为野生型λDNA的75~105%。
D．λDNA重组体是以双链环状形式导入E.coli。
E．λDNA重组体用CaCl2法导入E.coli也能取得高转化率。
5．下列关于CaCl2处理获得感受态方法的说法正确的是（A、B、C、D）
A．DNA与Ca2+结合后吸附在细胞表面，该复合物可抵抗细胞表面的DNAase作用。
B．DNA—Ca2+在0℃时吸附于细胞表面，温度高或温度波动会大大降低转化效率。
C．有可能将两种质粒转入同一细胞但最终选择板上的菌落只含一种质粒。
D．42℃热休克是为了让DNA进入感受态细胞。
E．热休克后要37℃温育1小时，目的是使含有外源DNA的细胞分裂1~2代，更易筛到重组子。
三．填空题
1．感受态细胞是指具有摄取外源DNA分子能力的细胞。
2．λ噬菌体蛋白对重组DNA体外包装时，包装长度为野生型λDNA的 75~105%。
3．感受态大肠杆菌细胞在温度为 0℃时吸附DNA，42℃时摄入DNA。
4．CaCl2法制备感受态细胞转化DNA时，DNA以 DNA-Ca2+ 复合物形式吸附于细胞表面。
5．基因工程受体菌的基因型常为r-m-rec-, r-表示限制缺陷型， m-表示修饰缺陷型，rec-表示重组缺陷型。
6．CaCl2法制备感受态细胞转化DNA时，热休克的温度是 42℃。
7．E.coli感受态出现的生理时期是对数期。
四．简答题
1．简述在CaCl2法制备感受态细胞转化DNA时，影响转化效率的各种因素。
答：影响因素有：Ca2+浓度、PH值、感受态细胞活力、DNA浓度、DNA纯度和构象、温度、DMSO处理、还原剂处理、氯化六氨合高钴处理。
2．CaCl2法制备感受态细胞转化DNA时，低温的主要目的是什么？热休克温度和目的是什么？
答：低温目的：（1）抑制细胞的旺盛生理代谢；（2）有助于DNA—Ca2+吸附于细胞表面；（3）防止DNAase 降解DNA 。
热休克温度是42℃；目的是使细胞摄入吸附于其表面的DNA。
3．简述利用Cosmid将外源DNA导入E.coli的特点是什么？
答：（1）Cosmid大小为4~6 kb，可用常规CaCl2法直接导入E.coli扩增。
（2）Cosmid含cos位点，是DNA包装到λ噬菌体蛋白颗粒中所需的DNA序列，cosmid/DNA重组体需与λ噬菌体头、尾部蛋白混合体外包装后，才能导入E.coli。
（3）其包装长度为野生型λ噬菌体DNA的75~105%，可容纳较大片段（30~50kb）DNA，可用于建立真核细胞文库。
（4）只有重组体可包装，未重组cosmid不能包装，因而不能进入E.coli有利于克隆的筛选。
第三章习题
选择题
1.关于PCR扩增停滞的原因有很多种，但下列各项中（B）项不是主要原因。
A.底物（模板）过剩
B.dNTP的大量消耗
C.产物的聚集
D.非特异性产物的竞争性抑制
2.Clark作了一个有趣的实验，发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板，在双链DNA的末端加一个碱基，主要是加（B）
A. dGTP
B.dATP
C.dCTP
D.dTTP
3.有简并引物的3’端尽量使用具有简并密码的氨基酸，这是因为（A）
A. TaqDNA聚合酶具有一定的不精确性
B.便于排除错误碱基的掺入
C.易于退火
D.易于重组连接
4.PCR实验的特异性主要取决于（C）
A.DNA聚合酶的种类
B.反应体系中模板DNA的量
C.引物序列的结构和长度
D.四种dNTP的浓度
E.循环周期的次数
5.有关PCR的描述下列哪项不正确：（D）
A.是一种酶促反应
B.引物决定了扩增的特异性
C.扩增的产量按Y=m(1+X)n
D.扩增的对象是氨基酸序列
E.扩增的对象是DNA序列
6.有关PCR的描述下列哪项正确：(ABC)
A.polymerase chain reaction的字首缩写
B.1993年获诺贝尔化学奖
C.已广泛的应用于医学各学科
D.能够准确对扩增模板定量
E.以上都对
7.PCR反应产物的特异性取决于(E)
A镁离子浓度 B退火温度 C引物碱基组成和长度
D循环次数 E.A+B+C
填空
1.Clark发现用TaqDNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。
2.在简并引物的设计中，常常要用到dI（次黄嘌呤），原因是。
3.简并引物PCR主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计引物来合成相应的基因。
4.SSC是由NaCl和柠檬酸钠组成的试剂，其中NaCl的作用是使，而柠檬酸钠的作用是
。
KEY
1.T-载体
2.dI可以和任何载体相匹配
3.一组混合
4.DNA溶解；作为螯合剂抑制核酸酶的活性
简答题
1.你打算扩增下图所示的两段序列之间的DNA，请从所列出引物中选出合适的一对，
5’-GACCTGTGGAAGC CATACGGGATTG-3’
3’-CTGGACACCTTCG GTATGCCCTAAC-5’
引物1 引物2
5’-GACCTGTGGAAGC 5’-CATACGGGATTG
5’-CTGGACACCTTCG 5’-GTATGCCCTAAC
5’-CGAAGGTGTCCAG 5’-GTTAGGGCATAC
5’-GCTTCCACAGGTC 5’-CAATCCCGTATG
答：引物1：5’-GACCTGTGGAAGC；引物2：5’-CAATCCCGTATG
2.PCR反应包括引物与DNA模板链间的解链与复性。讨论循环温度范围对引物-DNA双螺旋稳定性的影响及对PCR产率的影响。
答：由于GC对间是三个氢键的作用力，比两个氢键作用力的AT对要稳定，因此DNA的解链与退火都是依赖于G+C的含量与A+T的含量的比例。GC对普遍比AT对更倾向于非特异性的复性，所以GC含量高的引物比AT含量高的引物更适合于PCR反应。
PCR的基本原理是什麽？用PCR扩增某一基因，必须预先得到什麽样的信息？
（1）利用DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、复性和引物延伸。
（2）至少要预先知道足够合成一对引物的靶DNA序列。
3.何谓简并引物？简并引物设计的一般原则是什麽？
答：简并引物是指根据肽链的氨基酸序列（或部分序列），并充分考虑密码子的简并性而设计的，用于PCR扩增的混合引物之间具有不同的碱基组成，但碱基数量是相同的。由于充分考虑了密码的简并性，在这种混合引物中必定有一种引物可以和该基因的DNA序列精确互补。
简并引物设计的一般原则是：
（1）选择保守区设计简并引物；
（2）选择简并性低的氨基酸密码区设计引物；
（3）注意密码的偏爱性；
（4）使用尽可能短的引物，以降低简并性，最短可用15~20个碱基。
（5）由于TaqDNA聚合酶在PCR扩增时容易掺入错误碱基，所以设计的引物，其3’端尽量使用具有简并密码的氨基酸。
4.在古生物学中，尚不知道恐龙是否是温血爬行动物，而不像今天的变温爬行动物。假如你得到一些恐龙的DNA，你如何通过PCR和基因克隆来检测恐龙是否是温血爬行动物？
答：用PCR扩增恐龙的高度保守的酶的基因，然后将扩增的DNA克隆到大肠杆菌表达载体，每可能被合成。然后测定酶的最适温度和热的稳定性并与相应的温血动物（如鸟类）进行比较。来自于冷血动物的酶与来自于温血动物的酶相比，温血动物最适的温度范围较宽。
5.PCR反应同大肠杆菌体内的DNA复制有哪些不同？你认为最根本的差别在哪里？
答：PCR用双引物，体内复制用单引物。
染色体DNA的提取
选择题
1.基因组是：（D）
A．一个生物体内所有基因的分子总量 B．一个二倍体细胞中的染色体数C．遗传单位D．生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量
2.下列关于酵母和哺乳动物的陈述哪些是正确的？（ABD）
A．大多数酵母基因没有内含子，而大多数哺乳动物基因有许多内含子
B．酵母基因组的大部分基因比哺乳动物基因组的大部分基因小
C．大多数酵母蛋白比哺乳动物相应的蛋白小
D．尽管酵母基因比哺乳动物基因小，但大多数酵母蛋白与哺乳动物相应的蛋白大致相同
3.下列哪些基因组特性随生物的复杂程度增加而上升？（ABD）
A．基因组大小B．基因数量C．基因组中基因的密度D．单个基因的平均大小
4.细胞器DNA能够编码下列哪几种基因产物？（ABCDE）
A．mRNAB．大亚基rRNAC．小亚基rRNAD．tRNAE．4.5SrRNA
5.从细胞或组织中分离DNA时，常用蔗糖溶液，目的是：（B）
A.抑制核酸酶的活性
B.保护DNA，防止断裂
C.加速蛋白质变性
D.有利于细胞破碎
6.用SDS-酚来抽提DNA时，SDS的浓度是十分重要的，当SDS的浓度为0.1%时：（B）
A.只能将DNA抽提到水相
B. 只能将RNA抽提到水相
C. 可将DNA、RNA一起抽提到水相
D.DNA和RNA都不能进入水相
7.变色的酚中含有氧化物，这种酚不能用于DNA分离，原因主要是：（A）
A. 氧化物可使DNA的磷酸二酯键断裂
B. 氧化物同DNA形成复合物
C. 氧化物会改变pH值
D. 氧化物在DNA分离后不易除去
8.在分离DNA时，异戊醇的作用是：（D）
A．使蛋白质脱水B．使DNA脱水C．帮助DNA进入水相；D．减少气泡，促进分相
填空题
1.酚是蛋白变性剂用酚抽提细胞DNA时，具有两方面的作用：（1）
（2）
2.用酚-氯仿抽提DNA时，通常要在氯仿或酚-氯仿中加少许异戊醇，这是因为：异戊醇
。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相，中间的变性蛋白及下层有机溶剂相维持稳定。
3.同其他水解蛋白酶相比，蛋白水解酶K具有两个显著的优点：（1）
（2）。
4.在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是
5.用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加入单价的阳离子，如NaCl、NaAc，其目的是
。
6.浓缩DNA的方法有（1）（2）
（3）（4）。
7.通常可在三种温度下保存DNA：4~5℃，-20℃，-70℃，其中以最好。
8.用于分离质粒DNA的细菌培养浓度达到0.8 109细胞/ml时，即通过离心收集菌体。收集菌体使用定角转子，离心的速度以为宜。
9.在用SDS分离DNA时，要注意SDS的浓度，0.1%和1%的SDS的作用效果是不同的，前者
，后者。
10.在DNA分离过程中，通常要进行透析，其目的是。
11.在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素很多，主要有（1）
（2）（3）。
12.在DNA分离过程时，常用（1）（2）
（3）（4）等方法去除蛋白质。
13.在DNA保存液中，常加一滴氯仿，主要是起的作用。
14.在分离DNA时，要戴手套操作，原因是。
15.乙醇沉淀DNA的原理是。
填空题答案：
1.（1）使蛋白质变性；（2）由于它能使蛋白质变性，故也能使核小体和核糖体解聚，释放出DNA和RNA，提高DNA的得率。
2.是一种有机试剂，可以降低表面张力，从而减少气泡产生。
3.（1）水解能力很强，作用范围广；（2）在SDS和EDTA中保持高活性，可以同SDS和EDTA同时使用。
4.螯合Mg2+，抑制核酸酶的活性。
5.中和DNA分子的负电荷，增加DNA分子间的凝聚力。
6.（1）包埋吸水法（2）蒸发（3）膜过滤法（4）有机溶剂抽提法
7. -70℃
8.8000rpm
9.只将RNA分离出来；可将DNA与RNA一起分离出来。
10.除去小分子的无机离子。
11.（1）核酸酶降解；（2）化学降解；（3）物理减切
12.（1）酸变性；（2）碱变性；（3）热变性；（4）酶水解
13.抑制真菌污染
14.手上常有核酸酶
15.乙醇使DNA分子脱水
简答题
1.溶菌酶是破碎细菌细胞的有效方法，但有些细菌的孢子对溶菌酶不敏感，应该如何处理？
答：添加DTT、 -巯基乙醇，或8.0mol/L的尿素等增加敏感性。
2. SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂，它在这里的主要作用是什麽？
答：（1）溶解膜蛋白及脂肪，从而使细胞膜破裂；（2）溶解核膜和核小体，使其解聚，将核酸释放出来；（3）对RNase、DNase有一定的抑制作用；（4）SDS能够与蛋白质结合形成R-O-SO3-…R-蛋白复合物，使蛋白质变性沉淀。
3.比较基因的大小和基因组复杂性的不同：
一个基因组有两个序列，一个是A，另一个是B，各有2000bp长，其中一个是由400bp的序列重复5次而成，另一个则由50bp的序列重复40次而成，问：
（1）这个基因组的大小怎样？
（2）这个基因组的复杂性如何？
答：基因组的大小是指在基因组中DNA的总量。复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。这个基因组的大小为400 0bp；复杂性为450bp。
4.从细菌中分离总DNA，应采取哪些措施获得高分子量的DNA？
答：添加酶抑制剂抑制核酸酶活性，温和操作，加保护剂等。
用于克隆的DNA在质量上有什麽要求？
答：（1）首先是稳定性：保持DNA的高分子量和原有的构型。
（2）低蛋白质含量
（3）DNA样品中应不含RNA
（4）不含可透析的小分子
5.为什么从细胞中分离DNA时往往会断裂？
答：（1）细胞内存在很高的核酸酶活性，DNA裸露后，很容易遭到核酸酶的降解；
（2）在分离DNA的过程中，要用到一些酸碱等化学试剂，也会使DNA断裂；
（3）在DNA的分离过程中要经过多次离心、吸取、转移等，产生的机械张力剪切会使DNA断裂。
实验习题
一、填空
1．质粒提取中细菌的裂解可采用多种方法，包括：非离子型或离子型去圬剂，有机溶剂，碱或加热处理。2．用于分离质粒DNA的细菌培养浓度达到0.8×109细胞/ml时，即可通过离心收集菌体。收集菌体使用定角转子，离心的速度以8000r/min为宜。
3．在分离质粒DNA的菌体培养过程中，加入氯霉素有两个好处：可以扩增质粒DNA；抑制了菌体的数量，有利于裂解。
4．常使用的质粒纯化方法都利用了质粒DNA相对较小和共价闭合环状两个性质。
5．由于不同构型的DNA插入EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，超螺旋的共价闭合环状结构的质粒DNA（SC）的泳动速度最快，一条链断裂的开环状质粒DNA（OC）泳动速度最慢，二条链断裂的线性DNA （L）居中，通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。
6．超离心法纯化质粒DNA时，选用CsCl作介质的优点是：CsCl与不同DNA起反应；CsCl可以自动形成密度梯度，从而使不同分子量的DNA分子得以分开。
7．SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂，它有四个作用：溶解膜蛋白及脂肪，从而使细胞膜破裂；溶解核膜和核小体，使其解聚，将核酸释放出来；对RNase、Dnase有一定的抑制作用；SDS能够与蛋白质结合形成R1 -O-SO3-…R2+-蛋白质复合物，使蛋白质变性沉淀。
8．碱裂解法所用溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的体积比为：2:4:3
9．质粒提取中溶液Ⅱ的主要成分为SDS和NaOH。
10．溶液Ⅲ中钾是3mol/L，乙酸根是5mol/L
11． LiCl可沉淀大量蛋白质和高分子RNA。
12． 1OD260=50μg质粒DNA/ml。
13．在碱变形法提取质粒DNA实验中，聚乙二醇用于沉淀质粒DNA。
14．残留在DNA样品中的酚可抑制酶的活性。
15．质粒DNA提取中酚的pH值范围是pH7.8～pH8.0。
16．乙醇沉淀核酸的沉淀混合液中常用的单价阳离子的类型有：乙酸铵、氯化钠和乙酸钠。
17． SSCP电泳方式为非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
18． SSCP是依据点突变引起单链DNA分子立体构象的改变来实现电泳分离的。
19．影响SSCP重复性的主要因素为电泳的电压和温度。
20． SSCP中使DNA双链起变性作用的试剂是：甲酰胺
21．点突变对SSCP检出率的影响不仅仅取决于该点在DNA链上的位置，更取决于该位置对维持立体构象作用的大小。
二、选择
1．质粒提取中溶液Ⅱ的主要成分为：B
A. SDS和EDTA
B. SDS和NaOH
C. EDTA和NaOH
D. SDS和冰乙酸
2．分离质粒DNA时，用蔗糖的目的是：B
A. 抑制核酸酶的活性
B. 保护DNA，防止断裂
C. 加速蛋白质变性
D. 有利于细胞破碎
3．关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？：D
A. 溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体
B. 溶液Ⅱ的作用是使DNA变性
C. 溶液Ⅲ的作用是使DNA复性
D. 质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性
4．质粒DNA提取中酚的pH值范围：D
A. pH6.5～pH7.0
B. pH8.0～pH8.5
C. pH6.8～pH7.0
D. Ph7.8～pH8.0
5．CsCl-EB密度梯度离心法纯化质粒DNA的原理是：C
A. 氯化铯可以较多地插入到线状DNA中去
B. 氯化铯可以较多地插入到SC DNA中去
C. EB可以较多地插入到线状DNA中去
D. EB可以较多地插入到SC DNA中去
6．同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：B
A. OC DNA>SC DNA>L DNA
B. SC DNA>L DNA>OC DNA
C. L DNA>OC DNA.SC DNA
D. SC DNA>OC DNA>L DNA
7．用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：C
A. 染色体DNA断成了碎片
B. 染色体DNA分子量大，而不能释放
C. 染色体变性后来不及复性
D. 染色体未同蛋白质分开而沉淀
8．1OD260相当于每毫升质粒DNA：A
A. 50μg
B. 100μg
C. 50ng
D. 100ng
9．加入溶液Ⅲ后出现的白色絮状沉淀不包括：A
A. 质粒DNA和小分子量RNA
B. 染色体DNA和高分子量RNA
C. 钾离子和SDS
D. 蛋白质和细胞膜
基因工程作业题及答案
第二章 1. 名词解释：核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶 答： 核酸内切酶：是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。 核酸内切限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 同裂酶：识别位点的序列相同的限制性内切酶。 同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。 核酸外切酶：是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。 末端脱氧核苷酸转移酶：可以不需要模板，在单链DNA或突出的双链DNA 3’-OH端随机 添加dNTPs的酶 2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么？ 答：限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的，即：属名+种名+株名+序号； 首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写； 第二字母：取种名的第一个字母，斜体小写； 第三字母：(1)取种名的第二个字母，斜体小写； (2)若种名有词头，且已命名过限制酶，则取词头后的第一字母代替。 第四字母：若有株名，株名则作为第四字母，是否大小写，根据原来的情况而定，但用正体。 顺序号：若在同一菌株中分离了几种限制酶，则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等，用正体。 3．部分酶切可采取的措施有哪些？ 答：1）缩短保温时间 2）降低反应温度 3）减少酶的用量 4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 答：回文序列是：5'-CATA TG-3， 5．什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响? 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松 动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因 条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星 活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(>5％, v／v)；(2)限制性 内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；(3)低离子强度(<25 mmol／L)；(4)高pH(8．0 以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 第三章 1．如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体? 答：①删除λ噬菌体的非必需区，留出插入空间；并在余下的非必须区内制造限制酶切点 ②引进某些突变表型，作为选择标记 ③突变某些基因，使它成为安全载体 ④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点
(完整版)【人教版】生物选修三：1.3《基因工程的应用》课后习题(含答案),推荐文档
【优化设计】2018-2019 学年高中生物 1.3 基因工程的应用课后 课时演练·促提升 1. A.黑麦与六倍体普通小麦杂交,杂种通过秋水仙素或低温处理得到八倍体小黑麦 B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株 C.用紫外线照射青霉菌,使其 DNA 发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株 D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上 解析:A 选项八倍体小黑麦的培育利用的是染色体变异。C 选项利用的原理是基因突变。D 选项属于基因重组,但是发生在自然条件下,不符合基因工程“按照人们的愿望,进行严格的设计”的概念。答案:B 2.下列关于基因工程的说法中,正确的是( ) A.基因工程的设计和施工是在细胞水平上进行的 B.基因工程都是在生物体外完成的 C.基因工程是对蛋白质进行的操作 D.基因工程能打破物种间的界限,定向改造生物性状 解析:基因工程是 DNA 分子水平上进行设计和施工的。DNA 重组技术是在生物体外完成的,目的基因的表达是在细胞内完成的。 答案:D 3.下列高科技成果中,根据基因重组原理进行的是( ) ①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻②我国科学家将苏云金芽孢杆菌的某些基因 移植到棉花体内,培育出抗虫棉③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒 A.① B.①② C.①②③ D.②③ 解析:自然界的基因重组发生在减数分裂过程中,同源染色体的两条非姐妹染色单体间的互换和非同源染色体间的自由组合都可以发生基因重组;人工的基因重组就是基因工程。在题目给出的选项中:①袁隆平利用杂交技术培育出的超级水稻,其原理是自然界的基因重组。②将苏云金芽孢杆菌的某些基因移植到棉花体内,培育出的抗虫棉,属于通过基因工程进行的基因重组,该方法将目的基因移植到某种生物,整合到该生物的 DNA 分子中,并使目的基因得以表达,其最大优点就是克服了远缘杂交不亲和的障碍。③是利用宇宙射线,诱发种子发生基因突变,从而培育出太空椒。 答案:B 4.切取牛的生长激素基因和人的生长激素基因,用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中, 从而获得了“超级鼠”,此项研究采用的技术及遵循的原理是( ) A.基因突变DNA→RNA→蛋白质 B.基因工程RNA→RNA→蛋白质 C.细胞工程DNA→RNA→蛋白质 D.基因工程DNA→RNA→蛋白质 解析:把牛的生长激素基因和人的生长激素基因分别导入小鼠的受精卵中,并在个体发育过程中表达,从而获得了“超级鼠”,此项研究采用的是基因工程技术,遵循的原理为基因的表达。 答案:D 5.利用基因工程技术将生长激素基因导入绵羊体内,转基因绵羊生长速率比一般的绵羊提高30%,体型大50%。在基因操作过程中,生长激素基因的受体细胞最好采用( ) A.乳腺细胞 B.体细胞 C.受精卵 D.精巢细胞 解析:在基因操作过程中生长激素基因的受体细胞最好采用受精卵,因为动物细胞受精卵全能性最高。 答案:C 6.转基因动物表达重组蛋白多以乳腺、唾液腺和膀胱为靶位。在这些表达器官中,通过构建合适的载体,选择适当的启动子和调控序列可产生比正常水平高得多的重组蛋白。选择不同表达器官生产重组蛋白时,关于它们的“相同点”判断正确的是( ) A.转基因动物的性别相同
基因工程试题及答案
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸 序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然 后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在 真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约20 0bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转 变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影向？ 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二
基因工程练习题带答案
基因工程练习题 一、单项选择题 1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用 A.同种限制酶 B.两种限制酶 C.同种连接酶 D.两种连接酶 2．基因工程常用的受体有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④ 3．有关基因工程的叙述正确的是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞内完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料 4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的DNA 5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是 A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达 6．不是基因工程方法生产的药物是 A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D.乙肝疫苗 7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是 A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和运载酶 D.连接酶和运载酶 8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件 A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存 C.能够在宿主细胞中复制 D.有一个或多个限制酶切点 9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用 A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制 C.使目的基因容易被检测和选择 D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指 A.用于检测疾病的医疗器械 B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 10 / 1 C.合成β—球蛋白的DNA D.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段 11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的 A．高效性 B.专一性 C．多样性 D.催化活性受外界条件影响
高中生物选修三“基因工程”综合练习(20题含答案)
高中生物选修三“基因工程”综合练习 (20题含答案) 请回答下列有关克隆技术和基因编辑的问题： 1）克隆技术是指通过人工手段复制出与原体完全一样的 生物体。目前，克隆技术主要分为三种：体细胞核移植克隆、胚胎分裂克隆和基因克隆。其中，最常见的克隆方法是。 2）基因编辑技术是指通过改变生物体的基因序列来实现 对其性状的调控。CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因编辑技术之一，其中CRISPR指的是，Cas9则是。 3）基因编辑技术的应用非常广泛，其中包括疾病基因治疗、农业生产、生物安全等领域。以疾病基因治疗为例，基因编辑技术可以通过修复或替换患者体内的有缺陷基因，从而达到治疗疾病的目的。目前，基因编辑技术已经被用于治疗包括血友病在内的多种疾病。 答案：（1）体细胞核移植克隆（1分）（2）“类细菌重 复间隔簇”、“CRISPR相关蛋白9”（1分）（3）血友病（1分）逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。它可以将外源基因插入到受体细胞染色体中，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达。研究发现逆转录病毒基因组
（RNA）的核心部分包括三个基因：gag基因（编码病毒的核 心蛋白）、pol基因（编码逆转录酶）、env基因（编码病毒 的表面糖蛋白）。位于这些基因的两端有LTR序列（含有启 动子、调节基因等），控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移。下图展示了构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程。 1）逆转录病毒的遗传信息储存在RNA中，其中包含四 种核苷酸排列顺序中的四种脱氧核苷酸。 2）过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR 序列中的启动子后，其主要目的是控制外源基因的表达。 3）过程③中，导入病毒蛋白编码基因（gag，pol和env）的目的是合成组成病毒的蛋白质。 4）过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细 胞团细胞，因为这类细胞能发育成新个体的各种组织器官（具有发育的全能性），处于囊胚期。
高三生物基因工程练习题及答案
高三生物基因工程练习题及答案 第一节：选择题 1. 现代基因工程技术的突破是建立在下列发现的基础之上的： A. DNA双螺旋结构 B. 基因重组的概念 C. DNA复制的机制 D. 基因的表达调控机制 正确答案：A. DNA双螺旋结构 2. 下列哪个是基因工程的主要应用领域： A. 农业领域 B. 医学领域 C. 环保领域 D. 以上都是 正确答案：D. 以上都是 3. 基因工程按操作方式可分为以下几类，下面哪个选项顺序正确： A. 提取、分离、重组、转移 B. 分离、转移、提取、重组
C. 提取、分离、转移、重组 D. 分离、提取、转移、重组 正确答案：C. 提取、分离、转移、重组 4. 以下哪项不属于基因工程的基本技术之一： A. PCR B. SDS-PAGE C. DNA测序 D. 基因克隆 正确答案：B. SDS-PAGE 5. 哪个技术代表了原创性的DNA测序方法，为测序领域的巨大进步奠定了基础： A. Sanger测序法 B. PCR法 C. 杂交技术 D. 聚合酶链式反应技术 正确答案：A. Sanger测序法 第二节：填空题
1. 基因工程主要通过重组DNA来完成基因的操纵和转移。其中，常用的DNA序列寻找方法是______。 答案：PCR （聚合酶链式反应） 2. 基因工程筛选转化细胞常用的方法是______。 答案：筛选抗生素（抗生素筛选法） 3. 基因工程中，将外源基因与载体进行重组，得到重组DNA，这个过程称为______。 答案：基因克隆 4. 基因工程常用的工具酶是______。 答案：限制性内切酶 5. 将基因工程所重组得到的DNA片段转入细胞内部的过程称为 ______。 答案：转化（也可接受转染） 第三节：解答题 1. 请描述一下基因工程中的PCR技术的原理和应用。 答案：PCR（聚合酶链式反应）技术是一种体外人工合成DNA片段的技术。其原理是通过DNA解旋、引物延伸和DNA复制等步骤，使得DNA在体外被无限制地复制增加。PCR技术能够在短时间内扩增特定的DNA序列，具有高度灵敏性和特异性。在基因工程中，PCR技
基因工程试题库及答案
基因工程习题集 一、名词解释：（20×4/） 1、基因 2、克隆 3、基因定位 4、PCR 5、基因工程工具酶 6、组织培养 7、限制性核酸内切酶 8、受体细胞 9、生物技术 10、基因沉默 11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术 15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程 20、生物反应器 二、单项选择题：(60×2/) 1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（） A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不．正确的是（） A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染 D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（） A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是（） A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子 B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
高中生物选修三《基因工程》单元测试题(含答案)
专题1 《基因工程》单元测试题 一、单选题(每小题只有一个正确答案) 1.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是( ) A．限制酶和DNA连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和载体 D． DNA连接酶和载体 2.下列说法正确的是( ) A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的载体 D．利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆” 3.某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。 下列有关叙述错误的是( ) A．步骤①所代表的过程是反转录 B．步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶 C．步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态 D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性 反应试验 4.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是( ) A．反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D．解旋酶 5.转基因抗虫棉的研制过程中，为了检测抗虫基因是否成功导入，最简捷有效的方法是( ) A．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否存在 B．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否转录出相应的mRNA C．直接将培育出的棉株叶片饲喂原本的棉花害虫 D．检测标记基因是否正常地表达出来
6.下列哪项不是表达载体所必需的组成( ) A．目的基因 B．启动子 C．终止子 D．抗青霉素基因 7.下列说法正确的是( ) A．限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC，只能在G和A之间切断DNA B． DNA连接酶能够将任意2个DNA片段连接在一起 C．质粒是能够自主复制的小型双链环状DNA分子 D．基因工程的载体只有质粒一种 8.应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是( ) A．图中①～⑤过程中都发生了碱基互补配对现象 B．图中①过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶 C．将PrG导入细胞Ⅱ，则Ⅱ最可能是浆B细胞 D．图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料 9.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是( ) A．化学合成法 B．基因组文库法 C． cDNA文库法 D．多聚酶链式反应 10.中国新闻网报道，阿根廷科学家近日培育出了世界上第一头携带有两个人类基因的牛，因此有望生产出和人类母乳极其类似的奶制品。下列叙述正确的是( ) ①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶将目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
6.2基因工程及其应用习题(含答案)
6.2基因工程及其应用（含答案) 一、单选题 1．改良缺乏某种抗病性的水稻品种，不宜采用的方法是（） A．诱变育种B．单倍体育种 C．基因工程育种D．杂交育种 2．下列说法正确的是 A．基因工程能够按照人类意愿改造生物 B．所有转基因食品都不安全，不能食用 C．所有转基因生物都很安全，应无限制推广 D．我国对转基因生物没有规定 3．下列实践活动包含基因工程技术的是 A．水稻F1 花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种 B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C．将含抗病基因的重组DNA 导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆4．某生物的基因型为AaBB,通过下列技术可以分别将它转变为以下基因型的生物:①AABB②aB③AaBBC④AAaaBBBB。则以下排列正确的是() A．诱变育种、转基因技术、花药离体培养、细胞融合 B．杂交育种、花药离体培养、转基因技术、多倍体育种 C．花药离体培养、诱变育种、多倍体育种、转基因技术 D．多倍体育种、花药离体培养、诱变育种、转基因技术 5．基因工程的正确操作步骤是（） ①使目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 ④提取目的基因 A．③②④①B．②④①③ C．④①②③D．③④①② 6．下列各项中育种原理相同的一组是 A．太空椒与抗虫棉 B．抗除草剂的玉米和无子西瓜 C．高产优质杂交水稻和高产青霉素菌株
D．无子西瓜和八倍体小黑麦 7．下列关于培育生物新品种的叙述，正确的是 A．杂交育种培育的新品种必须是纯合子 B．单倍体育种是为了获取单倍体新品种 C．空间诱变育种获得的优良性状均可稳定遗传 D．培育三倍体转基因植物，可以防止基因污染 8．下列不能作为基因工程操作工具的是（） A．限制酶B．DNA连接酶 C．DNA聚合酶D．噬菌体 9．各种育种方法或技术都有其优劣之处，下列相关叙述不正确的是（） A．传统的育种方法周期长，可选择的范围有限 B．通过人工诱变，人们有目的地选育新品种，能避免育种的盲目性 C．杂交育种难以将不同物种的优良基因集中在一起 D．基因工程可以实现基因在不同物种之间的转移，人们可以定向选育新品种 10．下列新品种是利用分子生物学和基因工程的手段，将某种生物的基因转移到相应生物体内而获得的是 A．高产青霉素菌株B．高产优质杂交水稻 C．“太福一号”小麦D．转基因抗冻番茄 11．下列几种育种方法，能改变原有基因的分子结构的是() A．诱变育种B．单倍体育种 C．基因工程育种D．杂交育种 12．下列有关生物遗传变异的叙述中，正确的是（） A．三倍体无子西瓜高度不育，但其无子性状可遗传 B．单倍体的体细胞中不存在同源染色体，其植株比正常植株弱小 C．转基因技术是通过直接导入外源基因，使转基因生物获得新性状 D．家庭中仅一代人出现过的疾病不是遗传病，若几代人中都出现过才是遗传病13．下图中的①②③表示培育番茄新品种的三种育种方法。下列说法不正确的是()。
基因工程试题及答案【范本模板】
《基因工程》 一、选择题(每小题1.5分，共15分) 1．基因工程的创始人是（ ). A A。 Kornberg B W。 Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( ）不太恰当。 A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 D 不同的宿主系统具有不同的限制—修饰系统 3．在DNA的3’—5’链上,基因的起始密码子是 ( ） A ATG（或GTG) B AGT C TAG D TGA 4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( ）。 A 双链DNA的特定碱基对 B 双链DNA的特定碱基序列 C 特定的三联密码 D 以上都正确 5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。 A 3’→5'DNA聚合酶 B 5’→3’DNA聚合酶 C 5'→3'DNA内切酶 D 5’→3’DNA外切酶 6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。 A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 C 通常带有抗药性标记。 D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子. 7．关于cDNA的最正确的说法是（ )。 A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确 8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确？（） A 是最常用的DNA连接酶。 B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 C 不但能连接粘性末端. D 最适温度37 ℃。 9．下列关于建立cDNA文库的叙述中,（ )是错误的？ A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA D 新合成的双链DNA克隆到载体上,并导入受体细胞 10．用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D 原位菌落杂交 二、填空题（每空1分，共25分) 1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是____________ _。 2．为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________. 3．切口平移（nick translation）法标记DNA探针时应用的酶是_____ ___ __。 4．基因工程中的3种主要类型的载体是_______________、_____________、__________。 5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是、和。 6．黏粒（cosmid）是杂合载体。 7．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1） (2) 、 (3) （4) 。 8．Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别：（1)_ __、,（2)________ 9．PCR反应中常用的酶是______ _ .
基因工程习题及答案
基因工程习题及答案 基因工程这部分内容在高中生物必修2及选修3教材中都有出现。接下来店铺为你整理了基因工程习题及答案，一起来看看吧。 基因工程习题 基因工程习题答案 1—5 BDBDD;6—10 BCDBA;11—15 DADCD;16—20 CCCDD。 21、(1)基因的运载体 DNA (2)限制性内切酶 DNA连接酶 (3) 转录翻译 (4) 氯化钙细菌细胞壁的通透性 22、(1)①将从细胞中提取分离出的目的基因作为模板，转录成mRNA 单链DNA 双链DNA;②据蛋白质中氨基酸序列 mRNA中碱基序列 DNA碱基序列目的基因。 (2)①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口;②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的粘性末端;③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒。 (3)普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因。 (4)有的能生长，有的不能生长。导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因插在抗四环素基因中，抗四环素基因的结构被破坏。 (5)受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质，即人的生长激素。 23、(1)限制性内切酶微生物一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸系列，并在特定的点位切割 (2)限制性内切酶DNA 分别与载体结合载体复制带有目的基因的DNA片段 (3)提取目的基因目的基因与载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达 24 (1)原核复制 (2)T-DNA 土壤农杆菌
(3)相对没有分化的活的薄壁细胞团 (4)表型(蛋白质) 自交
基因工程试题及答案
《基因工程》 一、选择题（每小题1.5分，共15分） 1．基因工程的创始人是 ( )。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。 A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ( ) A ATG（或GTG） B AGT C TAG D TGA 4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。 A 双链DNA的特定碱基对 B 双链DNA的特定碱基序列 C 特定的三联密码 D 以上都正确 5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。 A 3’→5’DNA聚合酶 B 5’→3’DNA聚合酶 C 5’→3’DNA内切酶 D 5’→3’DNA外切酶 6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。 A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 C 通常带有抗药性标记。 D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 7．关于cDNA的最正确的说法是( )。 A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确 8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( ) A 是最常用的DNA连接酶。 B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 C 不但能连接粘性末端。 D 最适温度37 ℃。 9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的? A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA D 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞 10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D 原位菌落杂交 二、填空题（每空1分，共25分） 1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是____________ _。 2．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 3．切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶是_____ ___ __。 4．基因工程中的3种主要类型的载体是_______________、_____________、__________。 5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是、和。 6．黏粒(cosmid)是杂合载体。 7．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) 、 (3) (4) 。 8．Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别：(1)_ __、，(2)________ 9．PCR反应中常用的酶是______ _ 。
基因工程原理练习题及答案
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 11．EDTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测 不出质粒，这种现象叫。 19．pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。 20．Y AC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。 21．pSCl01是一种复制的质粒。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。 23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。 24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 和。 25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。 26．野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。 28．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基 因组的的范围内。 29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。 30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc， 其目的是。 31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。 32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。 33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。 34．乙醇沉淀DNA的原理是。 35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)
高中生物《基因工程》练习题 题号一二总分 得分 一、单选题（本大题共20小题，共20.0分） 1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（） A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快 D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 3.如图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程的说法错误的 是（） A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建 B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别 C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子 D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体 4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避 限制酶的降解。下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（） A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体 B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子
C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合 D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫 5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒 作为载体（） A. B. C. D. 6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。下列相关 叙述正确的是（） A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键 B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞 C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测 D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术 7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（） A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列 B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合 C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确 的是（）
基因工程课后习题答案
基因工程课后习题答案 【篇一：基因工程习题及答案】 选题 1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（b） a ． i 类限制酶 b. ii 类限制酶 c. iii 类限制酶 d. 核酸内切酶 e. rnaase 2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是 (b ) a. 是从不同菌种分离到的不同的酶 , 也称异源同工酶。 b. 它们的识别序列完全相同。 c. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 d. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 e. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别 位点。 3. 多数限制酶消化 dna 的最佳温度是（a） a. 37 ℃ b.30 ℃ c.25 ℃ d.16 ℃ e.33 ℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是 (b) a. i 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 和 s- 腺苷蛋氨酸。 b. ii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 。 c. iii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp ， s- 腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 d. i 、 iii 类限制酶对 dna 有切割和甲基化活性， ii 类限制酶对 dna 只有切割活性而无甲基化活性。 e.ii 类限制酶要求严格的识别 序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为 6bp , 则其在 dna 上识别 6bp 的切 割概率为 ( d ) a. 1/44 b. 1/66 c. 1/64 d.1/46 e. 1/106 6. 多数 ii 类限制酶反应最适 ph 是 (c ) a. ph:2-4 b. ph:4-6 c. ph:6-8 d. ph:8-10 e. ph:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( d) a.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 b.许多限制酶对线性 dna 和超螺旋 dna 底物的切割活性是有明显差 异的。
基因工程习题及参考答案
基因工程习题及参考答案01 绪论部分 一、填空题 1．基因工程是年代发展起来遗传学一个分支学科。基因工程技术诞生, 使人 们从简单地利用现存生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统生物技术时代, 走向时代。 2．伴随基因工程技术诞生和发展, 人类能够经过、和等三种关键生产方法, 大量取得过去只能从组织中提取珍稀蛋白, 用于研究或治病。3．Cohen 等在年构建了第一个有功效重组DNA 分子。 4．基因工程两个基础特点是: (1) , (2) 。 5．基因克隆中三个基础关键点是: ; 和。6．年, 美国斯坦福大学等在上发表了题为: “将新遗传信息插入SV40 病毒DNA 生物化学方法: 含有λ噬菌体基因和E．coli 半乳糖操纵子环状SV40 DNA”论文, 标志着基因工程技术诞生。这一工作含有划时代意义, 不过她们并没有。 7．克隆基因关键目有四: (1) ; (2) ; (3) ; (4) 。 二、选择题(单选或多选) ( )1．因研究重组DNA 技术而取得诺贝尔奖科学家是 (a)A．Komberg (b)W．Gilbert (c) P．Berg (d)B．McClintock ( )2．第一个作为重组DNA 载体质粒是( ) （a）pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 ( )3．第一个用于构建重组体限制性内切核酸酶是( ) (a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoRⅡ ( )4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了多个不一样酶, 其中( )作用是制造隐蔽5’端。 (a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA 连接酶
基因工程习题题目练习附答案版
基因工程原理复习题思考题 测试时间：2021.06.21 上午9: 00-11: 00 地点5D305 基因工程绪论 1、基因工程的定义与特征. 定义：在体外把核酸分子〔DNA的别离、合成〕插入载体分子,构成遗传物质的新组合〔重组DNA 〕,引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖, 培育符合人们需要 的新品种〔品系〕,生产人类急需的药品、食品、工业品等. 特征：1、具跨越天然物种屏障的水平. 2、强调了确定的DNA片段在新寄主细胞中的扩增. 2、试述基因工程的主要研究内容. 1〕、目的基因的别离 2〕、DNA的体外重组〔载体、受体系统等〕 3〕、重组DNA分子转移到受体细胞及其筛选 4〕、基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析. 3、基因工程在食品工业上有何应用开展 主要是通过基因重组,使各种转基因生物提升生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的 产率；或者改进这些有机物组成成分,提升利用价值. 4、转基因是一把双刃剑,请客观谈谈对转基因及转基因食品平安性的熟悉. 转基因技术所带来的好处是显而易见的,在人类历史进步和开展中起到了积极作用. 首先,通过该项技术可以提供人们所需要的特性,改进培育新品种； 第二,延长食品保存时间或增加营养成分； 第三,将抗虫防菌基因转入到作物中,使作物本身产生反抗病虫害侵袭的水平,减少了农 药的使用量,有利于环境保护； 第四,转基因技术及基因食物在医学方面得到广泛研究和应用. 人们对转基因技术的主要担忧在于环境方面.外源基因的导入可能会造就某种强势生物,产生新物种或超级杂草、损害非目标生物、破坏原有生物种群的动态平衡和生物多样性,也即转基因生物存在潜在的环境平安问题. 转基因作物的大面积种植已有数年,食用转基因食品的人群至少有10亿之多,但至今 仍未有转基因食品对生命造成危害的实例；更何况目前每一种基因工程食品在上市前,都要 经过国家法律认可,食品卫生部门和环境部门的严格检测.只有测试合格了,才能投放市 场.因此公众完全可以平安地消费、大胆地食用转基因食品. 第一章DNA的分子特性与利用 1、原核生物和真核生物的基因表达调控有何差异 1〕原核基因表达调控的三个水平：转录水平调控、译水平调控、蛋白质加工水平的调控原核基因表达调控主要是在转录水平上的调控. 2〕真核生物基因表达的特点： 1.基因组DNA存在的形式与原核生物不同； 2.真核生物中转录和译分开进行； 3.基因表达具有细胞特异性或组织特异性； 4.真核基因表达的调控在多个水平上进行：DNA水平的调控、转录水平调控、转 录后水平调控、译水平调控、蛋白质加工水平的调控；