培养基灵敏度检验原始记录
培养基灵敏度检查原始记录
检验人: 复核人：
培养基的灵敏度测试
培养基的灵敏度测试 培养基的灵敏度测试是其质量控制的一个重要检测部分。方法如下： 1.用于菌数计数的半固体琼脂培养基促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培养基均应进行灵敏度检查（促菌生长检查）。取预先制备好的琼脂培养基平皿3~5个，用表面涂布法每块平板表面接种30~100个试验菌，同时用已知质量保证的同型号培养基平皿3~5个（如较著名的如MERCK，DIFICOL产品）做对照试验，待培养基表面的菌液被琼脂培养基吸干或风干后，将培养皿倒置于培养箱的使用温度下培养48~72小时，（也可采用浇碟法进行）取出培养后的平皿点计菌落数。样品培养基上的微生物数量应不得低于对照培养基上微生物生长数量的70%。否则，需重新检查，或该培养基被视为不符合促生长要求。 2.用于控制菌检查的富集培养基的促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培养基均应进行灵敏度检查。每100ml培养基内分别接入试验菌小于100cfu，每个菌种接种两瓶培养基，将接过种的培养基置于指定条件下培养。应在16~18小时后可明显观察到培养基内有微生物生长，则证明此培养基合格。 原则上无论是采用脱水培养基还是按相关处方配制的培养基，一旦制成成品培养基，则应对每个配制批号培养基进行促菌生长（灵敏度检查）试验，以考察培养基的质量。按脱水培养基的生产批号做灵敏度检查是基于培养基的灭菌程序已经经过验证。 如果实验室使用的是商购的成品培养基，供应商应随培养基提供相应批次的培养基质量检测报告，报告包括培养基的PH值、无菌检查结果和促菌生长（灵敏度）试验结果等项目。建议在使用某一新的成品培养基（新供应商或新培养基品种）时，应至少考察三个不同批次的培养基质量，只有三批质量均合格方可使用该培养基。微生物限度检查用成品培养基一旦初试确认合格后，可审查供应商的质检报告，而不必每批再作无菌检查和灵敏度检查，但半年应至少检查一次，以复核其质量。用于无菌检查试验的每批培养基，均必须按规定进行灵敏度检查试验，此规定同样适用于实验室自行配制的培养基。。 建议在正式使用前即应完成对培养基的质量检查。如果在进行灵敏度试验的同时，也使用该培养基进行样品检查，那么，一旦培养基的无菌性或灵明度不符合规定，则检验结果应无效。无论这些质量控制检查试验何时完成，实验室都必须在相关产品放行之前或检验报告发出之前，对所用培养基的无菌性及灵敏度试验资料的完整性和合格予以确认。 灵敏度（促生长）检查试验用菌悬液，可用标准菌种制得，也可向具备适当资质的供应商购买。目前市场上的商用产品，如microball公司的培养基质量检查用的定量质控菌株，小瓶内一个小球上含有10~100CFU。此类产品使用简单，但操作者需严格遵守供应商的使用要求。另外，尽管所购试菌种均附有质量证书，正式使用前，仍必须用倾注平皿法或铺表面法等标准检测方法对菌悬液的微生物数量进行复核确认。
无菌培养基灵敏度验证
××公司 无菌检查用培养基适用性验证资料 文件编号：YZ-GC -004
1.验证目的：为证明硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基适合于细菌，真菌的无菌检查，特制定本验证方案。 2.参照标准：2005版中国药典二部附录XI H无菌检查法。 3.验证项目： 硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基灵敏度检查。 4.验证小组 4.试验材料： 4.1. 被验证培养基： 品名：硫乙醇酸盐流体培养基 规格：批号：生产厂家： 品名：营养肉汤培养基 规格：批号：生产厂家： 品名：改良马丁培养基 规格：批号：生产厂家： 4.2. 仪器设备： 4.2.1. YM50立式压力蒸汽灭菌器 4.2.2. SW-CJ-2F双人净化工作台 4.2.3. JC101型电热鼓风干燥箱 4.2.4.JY-B型生化培养箱(23～28℃) 4.2. 5.PHX-DHS-40x50恒温培养箱(35～37℃) 4.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液 4.4. 验证用培养基：
4.5. 验证用菌株： 5.菌液制备： 5.1.取经培养18~24小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤新鲜培养物1ml加入到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至小于100cfu∕ml的菌悬液备用。 5.2.取经培养24~48小时的白色念珠菌的改良马丁培养物1ml加入到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至小于100cfu∕ml的菌悬液备用。 6.菌液计数：（每种菌液接种2个平皿） 分别取上述制备的金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌各1ml加入培养皿，每种菌液平行做2皿，注入不超过45℃营养琼脂培养基15~20ml，置30～35℃培养箱培养二天，取上项制备的白色念珠菌菌液1ml加入培养皿，平行做2皿，注入不超过45℃的玫瑰红钠琼脂培养基约15~20ml，置23～28℃培养箱培养三天。 7.无菌培养基的无菌性检查 7.1培养基的配制 硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基29.25g，加1L蒸馏水，加热煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml。 营养肉汤培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基18g，加1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml。 改良马丁培养基的配制：取改良马丁培养基28.5g，加1L蒸馏水，加热搅拌使其完全
培养基适用性检查记录
培养基适用性检查记录 质量部
培养基名称：沙氏葡萄糖琼脂培养基来源：批号： 对照培养基：来源：批号： 检验依据：检验人：检验日期： 一、实验菌种： 白色念珠菌[CMCC(F)98 001]第代 黑曲霉[CMCC(F)98 003]第代 二、菌液制备 将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。将黑曲霉接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天。加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。 三、培养基适用性检查 取5个无菌平皿，分别接种白色念珠菌、黑曲霉各2皿，每皿接种1ml菌液（含 菌适宜浓度），另一皿接种1ml PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作为空白对照，倾注对照沙 氏葡萄糖琼脂培养基，混匀。凝固后倒置培养，20-25℃培养5天计数。被检培养基同 法操作。 四、结果判断 五、结论 本品按《中国药典》2015年版“非无菌产品微生物检查：微生物计数法”及培养基适用性检验操作规程检验，结果：□符合规定□不符合规定。
培养基名称：胰酪大豆胨琼脂培养基来源：批号： 对照培养基：来源：批号： 检验依据：检验人：检验日期： 一、实验菌种： 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]第代 铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104]第代 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501]第代 白色念珠菌[CMCC(F)98 001]第代 黑曲霉[CMCC(F)98 003]第代 二、菌液制备 将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌分别接种于胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24 小时；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。将黑曲霉接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天。加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml 的菌悬液。 三、培养基适用性检查 取11个无菌平皿，分别接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2皿，每皿接种1ml菌液（含菌适宜浓度），另一皿接种1ml PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作为空白对照，倾注对照胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀。凝固后倒置培养，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌皿30-35℃培养3天计数；白色念珠菌、黑曲霉20-25℃培养5天计数。被检培养基同法操作。 四、结果判断
无菌检查用培养基的适用性检查标准操作规程
无菌检查用培养基的适用性检查标准操作规程 目的：建立无菌检查用培养基适用性检查标准操作规程。 范围：适用于无菌检查使用培养基的适用性检查。 依据：中国药典》2015年版 《药品生产质量管理规范》2010年修订 《中国药品检验标准操作规程》2010年版 责任：QC化验员对实施本规程负责。 内容: 1、概要：无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基等应符合培养基的无菌检查及灵敏度检查要求。本检查可在供试品的检查前或与供试品的检查同时进行。 2、材料及设备 2.1 生化培养箱 2.2 生物安全柜 2.3 中国浊度标准管（由中国药品生物制品检定所提供） 2.4 灭菌试管、灭菌注射器 2.5 0.9%无菌氯化钠溶液 2.6 0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液：取聚山梨酯80 0.05ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠至100ml，混匀，灭菌即可。3、无菌检查培养基的适用性检查 3.1无菌性检查 取新鲜配制灭菌的培养基各5瓶，硫乙醇酸盐流体培养基置30～35℃，胰酪大豆胨液体培养基置20～25℃，培养14天，应无菌生长。 3.2灵敏度检查 3.2.1菌种 培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的干燥菌种为第0代），
并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌[Staphylococcus aureus CMCC(B) 26003] 铜绿假单胞菌[Pseudomonas aeruginosa CMCC(B) 10104] 枯草芽孢杆菌[Bacillus subtilis CMCC(B) 63501] 生孢梭菌[Clostridium sporogenes CMCC(B) 64941] 白色念珠菌[Candida albicans CMCC(F) 98001] 黑曲霉[Aspergillus niger CMCC(F) 98003] 3.2.2菌液制备 3.2.2.1 金黄色葡萄球菌菌悬液制备 3.2.2.1.1 取金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体或胰酪大豆胨琼脂培养基上，30～35℃培养18～24小时，取新鲜传代菌种一支待用。取一支灭菌中试管，加入3ml 0.9%无菌氯化钠溶液，把新鲜传代菌种培养物用接种环轻轻刮取，在加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液的试管壁上研磨，使之成为均匀悬液。 3.2.2.1.2 取菌悬液1ml于比浊管中，用0.9%无菌氯化钠溶液逐步稀释至与标准管的浊度一致。记录下所加入的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液的量，余下的2ml菌液盖上试管塞以备用。 3.2.2.1.3 打开试管塞，取1ml菌液于中试管中，加入比浊时所需的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液的量一致的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，此时试管中的细菌浓度与标准比浊管相一致。根据细菌浊度标准菌数表的菌数，将菌悬液用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9％无菌氯化钠溶液系列稀释至不大于100cfu/ml。 3.2.2.1.4 铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌悬液制备方法同金黄色葡萄球菌。 3.2.2.2 生孢梭菌菌悬液的制备 3.2.2.2.1取生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基上，30～35℃培养18～24小时，取一支灭菌中试管，用灭菌注射器吸取硫乙醇酸盐流体培养基中底部三分之二处的新鲜菌液1ml，加入
实验用培养基适用性检查标准操作规程
起草人Prepared by: 起草日期 Date: _____________________ QC 审核人Reviewed by: 审核日期 Date: _____________________ QC 审核人Reviewed by: 审核日期 Date: QA 批准人Approved by: 批准日期 Date: 质量部QD
目的Purpose 为保障微生物检验的准确性及相关工作特制定本规定。 范围Scope 本程序适用于微生物限度测定培养基的适用性检查及相关工作。 职责Responsibility 分析员：严格按照本操作规程执行。及时完成各类相关记录。在主管的指导下进行任何可能的OOS及偏差调查。 主管：监督本操作规程的执行。对检验员进行必要的培训。指导任何可能的OOS和偏差调查。 内容procedure 1检验员应根据培养基配制程序或培养基各自的说明书配制培养基。 2试验用菌种及培养基 2.1菌种: 2.1.1培养基灵敏度测试所用的菌株传代次数不得超过5代，从国家药检所或菌种保藏中心购买。 2.1.2枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[ATCC 6633] 2.1.3大肠埃希菌(Escherichia coli) [ATCC 8739] 2.1.4金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) [ATCC 6538] 2.1.5白色念珠菌(Candida albicans) [ATCC 10231] 2.1.6黑曲霉(Aspergillus niger)[ATCC 16404] 2.1.7伤寒沙门菌(Salmonella) [ATCC 14028] 2.1.8铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [ATCC 9027] 2.2培养基 2.2.1按照培养基说明书进行配制灭菌。 2.2.2大豆酪蛋白消化肉汤Soybean-Casein Digest Broth 2.2.3大豆酪蛋白消化琼脂Soybean-Casein Digest Agar 2.2.4沙氏葡萄糖琼脂Sabouraud Dextrose Agar 2.2.5肠道菌增菌肉汤Enterobacteria Enrichment Broth Mossel
食品厂干燥失重(水分)检验原始记录
干燥失重（水分）检验原始记录 生产日期： 检测项目检验方法水分含量（％） 样品名称及编号器号容器重 m3(g) [容器+样品 重]m1(g) 样品质量 m(g) 烘后[容器+样 品重]m2(g) 失水质量 (g) 测定 结果 平均值 备注： 计算公式：m1－m2 X1=————×100 m1－m3 式中：X1－样品中水份的含量，﹪m3－容器的质量，g m1－容器+样品重，g m2－烘后[容器+样品重]，g 检验员审核人检验日期 长春XX食品厂 干燥失重（水分）检验原始记录 生产日期： 检测项目检验方法水分含量（％） 样品名称及编号器号容器重 m3(g) [容器+样品 重]m1(g) 样品质量 m(g) 烘后[容器+样 品重]m2(g) 失水质量 (g) 测定 结果 平均值 备注： 计算公式：m1－m2 X1=————×100 m1－m3 式中：X1－样品中水分的含量，﹪m3－容器的质量，g m1－容器+样品重，g m2－烘后[容器+样品重]，g 检验员审核人检验日期
物资采购计划单 物资名称数量规格、型号申请部门批准人批准日期执行情况合同号 长春XX食品厂 物资采购计划单 物资名称数量规格、型号申请部门批准人批准日期执行情况合同号
成品入库记录 入库时间产品名称产品规格入库数量库存量库房总量交货人收货人备注
长春XX食品厂 成品出库记录 出库时间产品名称产品规格出库数量库存量库房总量发货人领货人发往地备注
长春XX食品厂 细菌总数检测原始记录 室温：℃湿度：% 第页共页检测依据接种时间 使用主要仪 器 报告时间 样号样品 名称 36+1 ℃培养 24～48h 稀释度报告数 cfu/ml(g) 空白 接种量ml 皿号 计数方式 菌落总数（个/皿） 皿号 计数方式 菌落总数（个/皿） 备注：1.√表示全皿计数，×表示多不可计数。2.选取菌落数在30-300之间的平皿作为菌落总数测定标准。参照GB/T4789.2-7.3.2稀释度的选择报告菌落数。3.菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用两位有效数字用10的指数来表示。 检验员：审核人：审核时间： 总大肠菌群检测证实试验记录 环境温度：℃环境湿度 % 第页共页 检测依据接种时间 使用主要仪 器 报告时间 样号样品 名称 培养温度、时间培养基名称结果判定报 告数 （MPN） /100ml(g) ℃ h乳糖发酵培养基 分析号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 复发酵产酸、气 EMB分离培养 革兰氏染色 复发酵产酸、气 EMB分离培养 革兰氏染色 备注：乳糖发酵阳性管转种培养实验：1.复发酵：+/+表示产酸、产气为阳性；-/-表示不产酸、不产气为阴性；+/-表示产酸、不产气。接种量在1ml以上者，用双料发酵管；1ml以下者，用单料发酵管。2.在鉴别性琼脂平板EMB上36±1℃培养18～24h,观察菌落形态，具有大肠菌群其典型特征“+”表示，不具有大肠菌群其典型特征“-”表示3.做革兰氏染色，“⊕”表示阳性，“⊙”表示阴性 检验员：审核人：审核时间：
食品检验原始记录模板
检验原始记录 实验环境：a、温度：℃b、干湿度：% 样品名称：样品编号：产品批号： 样品状态：状态完好，符合检验要求取样数量：执行标准：————————————————————————————————————————————————— 感官测定原始记录 检测依据：GB/T 14454.2 色泽：□正常□异常气味：□正常□异常 形态：□正常□异常滋味：□正常□异常 结论————————————————————————————————————————————————— 干燥失重测定原始记录 检测依据：GB/T 5009.3—2010 序号检验 方法 检验用仪器设 备 测试 温度 称量瓶质 量 称量瓶+ 样品质量 称量瓶+样品 干燥后的质量 检测结果 检测结果 平均值 报出值直接 干燥 法 分析天平、称 量瓶、恒温干 燥箱等 （℃）（g）（g）（g）（%）（%）（%） 1 2 ————————————————————————————————————————————————— 氯化物测定原始记录 检测依据：QB/T 1500—1992 硝酸银标准滴定溶液c[ 0.1 ]/（mol/L) 序号检验 方法 检验用仪器设 备 样品 质量 样品定容 总体积 测定用样 品溶液体 积 标准滴定溶液 消耗量 检测结果 检测结果 平均值 报出值 直接 沉淀 滴定 法 分析天平、酸 式滴定管等 （g）（ml）（ml）（ml）（g/100g） （g/100g ） （g/100 g） 1 2 空 白 mL ————————————————————————————————————————————————— 酸价测定原始记录 检测依据：GB/T 5009.37—2003 氢氧化钾标准滴定溶液c[ 0.050 ]/(mol/L) 序号检验 方法 检验用仪器设备样品质量 标准滴定溶液消 耗量 检测结果 检测结果平 均值 报出值 滴定 法 分析天平、碱式滴定管、 恒温水浴锅等 （g）（ml） （mgKOH/ 100g） （mgKOH/ 100g） （mgK OH/100 g） 1 2 —————————————————————————————————————————————————
计数培养基适用性检查记录
计数用培养基适用性 检查记录 1检查方法：《中国药典2015版》四部非无菌药品微生物限度检查法：微 生物计数法（通则1105）。 2.验证用仪器型号及编号: 霉菌培养箱：型号 3 ?菌液制备：验证用菌种第（）代 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆 胨液体培养基上，于30?35C 培养18?24h ;上述培养物用氯化钠蛋白胨缓冲液 10倍递增稀释至1ml 含菌数为50?lOOcfu 的菌悬液备用。 接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基上，于 20?25C 培养 2?3天;上述培养物用氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml 含菌数为50? 100cfu 的菌悬液备 用。 将黑曲霉菌菌悬液用氯化钠蛋白胨缓冲液 10倍递增稀释至1ml 含菌数为50? 100cfu 的菌悬液备用。 4.培养基配制 立式蒸汽灭菌锅： 型号 编号: 生化培养箱 型号 编号: 编号:
按相应培养基产品说明分别配制胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养 基、玫瑰红钠琼脂培养基、R2A琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙氏 葡萄糖琼脂对照培养基、玫瑰红钠琼脂对照培养基、R2A琼脂对照培养基，并按 照相应的灭菌方式灭菌备用。 5、培养基计数适用性检查 胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查 分别接种不大于lOOcfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、 白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不 接种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45C熔化的胰酪大豆胨琼脂对照培养 基，混匀，凝固。将接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的平皿 倒置于30-35C的生化培养箱培养不超过3天，计数；将接种白色念珠菌、黑曲霉菌的平皿倒置于30-35C的生化培养箱培养不超过5天，计数。被检培养基同法操作。结果见表1。 表1 培养基适用性检查结果 且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
SOP-QC-03000培养基灵敏度检查标准操作规程471
SOP-QC-03000培养基灵敏度检查标准操作规程471 GMP标准文件分发号: 流水号:471 编码: SOP-QC-03000 共2页第1页题目: 培养基灵敏度检查标准操作规程 制定人 QA审核批准人制定日期审核日期批准日期颁发部门质量技术部 颁发日期生效日期 质量技术部分发部门 目的:建立培养基灵敏度检查标准操作规程，保证无菌检查结果的准确性、可 靠性。范围:适用于培养基灵敏度检查。 职责:QC无菌检验员。 规程: 1 实验设备及用具: 高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、注射器、针头、注射器盒、试管、试管架、搪 瓷托盘、时钟、75,酒精棉球、无菌服。 2 培养基:需气菌、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐液体培养基)、真菌培养基，培 养基的配制详见《培养基配制标准操作规程》。 3 测试用菌种 3.1 藤黄微球菌[CMCC (B) 28 001] 3.2 生孢梭菌[CMCC (B) 64 941] 3.3 白色念珠菌[CMCC (F) 98 001] 4 操作 4.1 取藤黄微球菌的营养琼脂斜面和白色念珠菌的真菌培养基琼脂斜面的新鲜 培养物，分别用0.9,无菌氯化钠溶液制成均匀的菌悬液;将生孢梭菌不含琼脂的需 气菌、厌气菌培养基新鲜培养物，吸至无菌离心管，离心，弃去上清液,菌体用
0.9,无菌氯化钠溶液制成均匀的菌悬液。分别取上述菌悬液,用0.9,无菌氯化钠溶液稀释至与细菌浊度标准管相同的浓度，然后作10倍系列稀释，制成1ml中含10-100个菌并计数。 4.2 取藤黄微球菌、生孢梭菌的需气菌、厌气菌培养基新鲜培养物，白色念珠菌的真菌培养基的新鲜培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液作10倍系列稀释，制成1ml中含10—100个菌并计数。 4.3 将藤黄微球菌的上述4.1或4.2的稀释菌液各1ml，分别接种至每管装量为9ml的需气菌、厌气菌培养基3管，生孢梭菌的上述4.1或4.2的稀释菌液各1ml，分别 GMP标准文件接种至每管装量为12ml需气菌、厌气菌培养基3管，白色念珠菌的上述4.1或4.2的稀释菌液各1ml，分别接种至每管装量为9ml的真菌培养基3管，以未接种的培养基作对照，按规定的温度培养5天并逐日记录结果。 5 结果判定:以每珠菌接种后的培养基不得少于2管呈现生长，即该培养基的灵敏度检查符合要求。 题目: 培养基灵敏度检查标准操作规程共2页第2页
培养基的灵敏度检查操作SOP
培养基的灵敏度检查操作SOP 1 目的建立培养基灵敏度试验的操作规程，是为了规范、统一培养基灵敏度检测，确保微生物检测准确、安全进行。 2 适用范围本标准适用于2015版中国药典培养基灵的敏度检查。 3 责任者QC检验人员。 4 内容 4.1 试验设备及用具： 无菌培养皿、移液枪或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、培养箱等。 4.2 使用的菌株： 金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003, 铜绿假单胞菌CMCC(B)10104， 枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501， 生孢梭菌CMCC(B)64941， 白色念珠菌CMCC(F)98001， 黑曲霉CMCC(F)98003， 培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代，并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验用菌株的生物学特性。 4.3 检测频率 每批新买的培养基配制、灭菌后均应做灵敏度测试。 4.4 操作方法 4.4.1 对照标准培养基 用已经过试验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培养基。 4.4.2 试验培养基 将琼脂类的试验培养基加热融化后，冷却至45℃左右，以无菌的方式在无菌培养皿中注入15～20mL，备用。液体类的培养基直接使用。 4.4.3 菌悬液的制备 购买对应的商业化定量菌株。使用时直接稀释成规定菌含量的菌悬液。目前有进口的bioball和国产的microball等。使用方便，定量精确。
4.4.4 培养基的生长促进实验 4.4.4.1 琼脂类培养基的生长促进试验 每株菌用2个试验培养基平皿，用表面涂布法在每个平皿表面接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌），同时用2个对照标准的培养基平皿做对照，接种相同量的菌悬液试验，在规定温度下培养，取出平皿点计菌落数。试验培养基上的微生物数量应为对照培养基上微生物生长数量的70%-150%范围内。（注：每种培养基生长促进实验的具体菌株见附录1） 4.4.4.2 液体类培养基的生长促进实验 每株菌用2管（或瓶）试验培养基，接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌），同时用2个对照标准的培养基或用已知合格的酪蛋白大豆消化琼脂平皿做对照，接种相同量的菌悬液试验，在规定温度下培养，对比或计数，在规定时间内能生长菌落为合格。 4.4.5 培养基的生长促进和抑制特性试验 4.4. 5.1 液体培养基的生长促进特性试验 接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌）于一定量适合的培养基。在特定温度下培养，培养时间不超过试验中规定的最短期限。与对照标准的培养基获得的微生物生长相比，接种微生物的生长应明显。 4.4. 5.2 固体培养基的生长促进特性试验 采用表面涂布法，在每一块平皿上接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌）适宜微生物。在特定温度下培养，培养时间不长于试验中规定的最短期限。接种微生物的生长与对照标准的培养基获得的微生物生长相当。 4.4. 5.3 液体或固体培养基的抑制特性试验 用适当培养基接种至少100 CFU适宜微生物。在特定温度下培养，培养时间至少为试验中规定的最长期限。无受试微生物生长。
培养基的灵敏度检查操作规程
培养基的灵敏度检查操作规程 1 目的建立培养基灵敏度试验的操作规程，是为了规范、统一培养基灵敏度检测，确保微生物检测准确、安全进行。 2 适用范围本标准适用于培养基灵敏度检查。 3 责任者 QC 检验人员。 4 内容 4.1 试验设备及用具：无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯 等。 4.2 使用的菌株： EP 检测用 ATCC 的菌株： 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus ATCC 6538 大肠埃希菌 Escherichia coli ATCC 8739 沙门氏菌 Salmonella enterica subsp ATCC 14028 黑曲霉 Aspergillus niger ATCC 16404 培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5 代，并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验用菌株的生物学特性。 4.3 检测频率 每批新买的培养基配制、灭菌后均应做灵敏度测试。 4.4 操作方法 4.4.1 对照标准培养基 用已经过试验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培养基。 4.4.2 试验培养基 将琼脂类的试验培养基加热融化后，冷却至45 C左右，以无菌的方式在无菌培养皿 中注入15?20mL,备用。液体类的培养基直接使用。 4.4.3 菌悬液的制备 4.4.3.1 细菌菌悬液的制备
取细菌的斜面培养物1耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中30-35C培养18-24h,取上述培养物用无菌水按10倍系列稀释，分别制成10-7-10-8的菌悬液备用。 4.4.3.2 霉菌菌悬液的制备 取黑曲霉的斜面培养物加入无菌水 4mL 制成孢子悬液，取上述孢子悬液按 10 倍系列稀释，分别制成 10-6-10-7的菌悬液备用。 4.4.4 培养基的生长促进实验 4.4.4.1 琼脂类培养基的生长促进试验 每株菌用 2 个试验培养基平皿，用表面涂布法在每个平皿表面接种 0.1-0.5mL 的菌悬液（约10-100CFU 试验菌），同时用 2个对照标准的培养基平皿做对照，接种相同量的菌悬液试验，在规定温度下培养，取出平皿点计菌落数。试验培养基上的微生物数量应为对照培养基上微生物生长数量的 70%-150%范围内。（注：每种培养基生长促进实验的具体菌株见附录 1） 4.4.4.2 液体类培养基的生长促进实验 每株菌用2管（或瓶）试验培养基，接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌），同时用 2 个对照标准的培养基或用已知合格的酪蛋白大豆消化琼脂平皿做对照，接种相同量的菌悬液试验，在规定温度下培养，对比或计数，在规定时间内能生长菌落为合格。 4.4.5 培养基的生长促进和抑制特性试验 4.4. 5.1 液体培养基的生长促进特性试验 接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌）于一定量适合的培养基。在特定温度下培养，培养时间不超过试验中规定的最短期限。与对照标准的培养基获得的微生物生长相比，接种微生物的生长应明显。 4.4. 5.2 固体培养基的生长促进特性试验 采用表面涂布法，在每一块平皿上接种0.1-0.5mL的菌悬液（约10-100CFU试验菌）适宜微生物。在特定温度下培养，培养时间不长于试验中规定的最短期限。接种微生物的生长与对照标准的培养基获得的微生物生长相当。 4.4. 5.3 液体或固体培养基的抑制特性试验 用适当培养基接种至少 100 CFU 适宜微生物。在特定温度下培养，培养时间至少为试验中规定的最长期限。无受试微生物生长
支原体培养基灵敏度检査(变色单位试验法)
支原体培养基灵敏度检査（变色单位试验法） 及供试品检查方案 目的： 建立支原体培养基灵敏度检査（变色单位试验法）及供试品检查方案。 范围： 适用于支原体培养基灵敏度检査及供试品检查。 依据： 《中国药典》2015年版 内容: 1、概要： 除药典推荐培养基外，亦可使用可支持支原体生长的其他培养基，但灵敏度必须符合要求。 2、设备 生化培养箱、生物安全柜。 3、培养基灵敏度检査（变色单位试验法） 3.1干粉培养基及对应菌种 产品号产品名称菌种名称菌种编号11109 支原体肉汤培养基肺炎支原体ATCC 15531株11C21 精氨酸支原体肉汤培养基口腔支原体ATCC 23714株11A09 支原体半流体培养基肺炎支原体ATCC 15531株11321 精氨酸支原体半流体培养基口腔支原体ATCC 23714株 3.2 培养基配制 按照标签处方量配制成液体培养基，并按标签规定的温度和时间进行湿热灭菌，待用。 3.3灵敏度检查 3.3.1菌液制备 将菌种接种于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲传两代。
3.3.2培养基接种及培养 将培养物接种至待检培养基中，做10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7?10-9，接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3?10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基内。每个稀释度接种 3 支试管，置36℃±1℃培养7?14天，观察培养基变色结果。 3.3.3结果判定： 以接种后培养基管数的2 / 3 以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。 灵敏度应达到： 支原体肉汤培养基：肺炎支原体（ATCC 15531株）应达到10-8； 精氨酸支原体肉汤培养基：口腔支原体( ATCC 23714株)应达到10- 4。 3.3供试品检查法 3.1干粉培养基及对应菌种 产品类型产品名称产品号 液体培养基支原体肉汤培养基11109 精氨酸支原体肉汤培养基11C21 半流体培养基支原体半流体培养基11A09 精氨酸支原体半流体培养基11321 或：琼脂培养基支原体琼脂培养基11C23 3.2配制 半流体培养基（或琼脂培养基) 按照标签处方量配制，并按标签规定的温度和时间进行湿热灭菌；在使用前应煮沸10?15分钟，冷却至56°C左右，然后加人灭能小牛血清（培养基: 血清为8 ：2) ，并可酌情加入适量青霉素，充分摇匀。液体培养基除无需煮沸外，使用前亦应同样补加上述成分。 3.3检查 取每支装量为10ml的支原体液体培养基各4 支、相应的支原体半流体培养基各2 支（已冷至36℃±1℃) ，每支培养基接种供试品0 .5?1.0ml，置培养21天。于接种后的第7 天从4 支支原体液体培养基中各取2 支进行次代培养，每支培养基分别转种至相应的支原体半流体培养基及支原体液培养基各2支，置
培养基灵敏度试验
培养基灵敏度试验 计数培养基适用性检查记录 环境温度 ? 湿度 % 培养基名称批号配制日期 2011年月日玫瑰红钠琼脂 培养基 对照培养基批号生产厂家实验日期 2011年月日仪器型号及编号: 立式灭菌器型号:LMQ.R 3260B 编号:H085 霉菌培养箱型号:MJ-160B-Z 编号: 电热恒温干燥箱型号:202-3AB 编号:H001 菌液制备: 接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，置30~35?培养24~48小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50~100cfu的菌悬液。接种黑曲 霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，置20~25?培养5~7天加入3~5ml 含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出孢 子悬液至无菌试管中，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成 每1ml含孢子数50~100cfu的孢子悬液。 阳性对照菌液: 白色念珠菌[CMCC(F)98 001] 编号: 黑曲霉[CMCC(F)98 003] 编号: 检查方法: 取5个无菌平皿，吸取白色念珠菌、黑曲霉菌各1ml，分别注入2个无菌平皿 中，另一平皿不接种菌作为空白对照，立即倾注对照玫瑰红钠琼脂培养基，混匀， 凝固，置23~28?培养72小时，计数。同时，用被检培养基同法操作。 检查结果: 被检培养基对照培养基回收率被检培养基菌与 阳性菌 (A/B对照培养基上菌 皿1 皿2 平均A 皿1 皿2 平均B
)% 落形态、大小 白色念珠菌 黑曲霉菌结果判断: 若被检培养基上的平均菌落数与对照培养基上的平均菌落数相比大于70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致，判该培养基适用性检查符合规定。 结论: 复核人: 检验人: 年月日 ,
RBT214-2017版检验检测机构内审全套资料(含检查表)
2018年*** 月内部审核计划 受控编号：****************** 共页第页
内部审核实施计划表 受控编号：********* 共2页第1页 ********质量检测有限公司 *****（****）第****号 实验室各科室： 根据《检验检测机构资质认定能力评价检验检测机构通用要求》（RBT 214-2017）和本实验室质量体系计划的安排，拟于2018年***月***日至***日进行2018年度****月份内部质量体系审核。现将内审实施计划发给你们，请按照计划表内容结合质量手册、程序文件、记录、报告等体系资料做好准备，迎接内审。 审核目的：审核2018年本公司的检验检测活动是否符合本公司质量管理体系的要求，确保质量体系持续、有效的运行，并为质量体系的改进提供依据。 审核要求：采用集中式审核，要求实事求是、不徇私舞弊、做到严格、公正、客观。 审核范围：检验检测机构资质认定评审准则各要素涉及的实验室各部门。 审核依据：《检验检测机构资质认定能力评价检验检测机构通用要求》（RBT 214-2017），质量体系文件【例如：《质量手册》、《程序文件》】，相关法律、法规和试验标准等。 审核时间：2018年****月****日至***日 审核组：组长：**** 审核组成员：*****（技术负责人、*****）、*****（检测一室主任、内审员、监督员）、*****（检测二室主任、内审员、监督员）、****（业务室主任、内审员）、******（内审员）。
首、末次会议参加人员：质量负责人、技术负责人、各科室负责人、办公室成员、设备管理员、内审组成员。
培养基适用性检查记录
一、无菌培养基适用性检查记录 培养基名称检验日期配制批号报告日期生产单位检验人检验依据核对人1、培养基灵敏度检查 菌液（小于100cfu） 硫乙醇酸盐流体培养基 （12ml / 管）菌液 （小于100cfu） 改良马丁培养基 （9ml/ 管） 第1天第2天第3天第1天第2天第3天第4天第5天 金黄色葡萄 球菌 白色念珠菌 铜绿假单胞 菌 黑曲霉 枯草芽孢 杆菌 空白 生孢梭菌--- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- 空白--- --- --- --- --- --- 结果判定 2、培养基无菌性检查 瓶数 培养基名称： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 1 2 3 4 5 结果判定
二、计数培养基适用性检查记录 培养基名称检验日期配制批号报告日期生产单位检验人检验依据核对人培养基灵敏度检查 菌液（小于100cfu） 营养琼脂培养基对照培养基 24h 48h 24h 48h 大肠埃希菌金黄色葡萄球菌 枯草芽孢 杆菌 菌液（小于100cfu） 玫瑰红钠琼脂培养基对照培养基 24h 48h 72h 24h 48h 72h 白色念珠菌黑曲霉 菌液（小于100cfu）酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基对照培养基 24h 48h 72h 24h 48h 72h 白色念珠菌结果判定
三、控制菌检查用培养基适用性检查记录 培养基名称检验日期配制批号报告日期生产单位检验人检验依据核对人促生长能力检查 菌液（小于100cfu） 培养基对照培养基 24h 48h 72h 24h 48h 72h 结果判定抑制能力检查 菌液（小于100cfu） 培养基 24h 48h 72h 结果判定指示能力检查 菌液（小于100cfu） 培养基对照培养基 24h 48h 72h 24h 48h 72h 结果判定
培养基适用性检查规程
培养基适用性检查规程 目的：建立一个培养基的灵敏度检查，确保培养基性能可靠。 范围：适用于微生物检验。 责任：微生物检验员。 依据：《中国药典》2010年版一部附录、2010版GMP实施指南 规程： 1.不应在同一无菌室内同时操作2个或2个以上菌株。 2.菌株传代次数不得超过5代（以菌种保存中心获及的冷冻干燥菌种为第0代）。 一、计数培养基的适用性检查 1、菌液制备 取大肠埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤或营养琼脂培养基中，30-35℃培养18-24h；取白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中，培养24～48小时，取上述培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50-100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。 菌液制备后若在室温下放置，应在两小时内使用；若保存在2-8℃，可在24小时内使用。 2、适用性检查 取大肠埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各1ml（50-100cfu）,分别注入无菌平皿中，立刻注入待检查营养琼脂培养基和对照营养琼脂培
养基，每株试验菌平行制备4个平皿（其中2个注入待检查营养琼脂培养基，另两个注入对照营养琼脂培养基）。30-35℃培养48h，计数。 取白色念珠菌1ml（50-100cfu）,注入无菌平皿中，立刻注入待检查玫瑰红钠琼脂培养基和对照玫瑰红钠琼脂培养基，平行制备4个平皿（其中2个注入待检查玫瑰红钠琼脂培养基，另两个注入对照玫瑰红钠琼脂培养基）。23-28℃培养72h，计数。 3、结果判断 若被检培养基上的菌落数不小于对照培养基上的菌落数的70%，且菌落大小、形态两者一致，判断该培养基的适用性检查符合规定。 二、控制菌检查用培养基的适用性检查 1.菌液制备 取大肠埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤或营养琼脂培养基中，30-35℃培养18-24h；取白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中，培养24～48小时，取上述培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10-100cfu、每1ml50-100cfu和每1ml大于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。 菌液制备后若在室温下放置，应在两小时内使用；若保存在2-8℃，可在24小时内使用。 2、适用性检查 控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。 (1)、液体培养基促生长能力检查，分别接种不大于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。 （2）、固体养基促生长能力检查，取试验菌各0.1ml（50-100cfu）分别涂布于被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养
食品检验原始记录模板
资料收集于网络，如有侵权请联系网站删除只供学习与交流 只供学习与交流检验原始记录 实验环境：a、温度：℃b、干湿度：% 样品名称：样品编号：产品批号： 样品状态：状态完好，符合检验要求取样数量：执行标准：————————————————————————————————————————————————— 感官测定原始记录 检测依据：GB/T 14454.2 色泽：□正常□异常气味：□正常□异常 形态：□正常□异常滋味：□正常□异常 结论————————————————————————————————————————————————— 干燥失重测定原始记录 检测依据：GB/T 5009.3—2010 序号检验 方法 检验用仪器设 备 测试 温度 称量瓶质 量 称量瓶+ 样品质量 称量瓶+样品 干燥后的质量 检测结果 检测结果 平均值 报出值直接 干燥 法 分析天平、称 量瓶、恒温干 燥箱等 （℃）（g）（g）（g）（%）（%）（%） 1 2 ————————————————————————————————————————————————— 氯化物测定原始记录 检测依据：QB/T 1500—1992 硝酸银标准滴定溶液c[ 0.1 ]/（mol/L) 序号检验 方法 检验用仪器设 备 样品 质量 样品定容 总体积 测定用样 品溶液体 积 标准滴定溶液 消耗量 检测结果 检测结果 平均值 报出值 直接 沉淀 滴定 法 分析天平、酸 式滴定管等 （g）（ml）（ml）（ml）（g/100g） （g/100g ） （g/100 g） 1 2 空 白 mL ————————————————————————————————————————————————— 酸价测定原始记录 检测依据：GB/T 5009.37—2003 氢氧化钾标准滴定溶液c[ 0.050 ]/(mol/L) 序号检验 方法 检验用仪器设备样品质量 标准滴定溶液消 耗量 检测结果 检测结果平 均值 报出值 滴定 法 分析天平、碱式滴定管、 恒温水浴锅等 （g）（ml） （mgKOH/ 100g） （mgKOH/ 100g） （mgK OH/100 g） 1 2 —————————————————————————————————————————————————