园艺植物组织培养完整版
植物组织培养
填空（每空1分，共10分）名词解释（共20分）
简答题（每小题8分，共40分）论述2题15分2013.12.11
名词解释
1、外植体：植物组织培养中，使用的各种器官、组织和细胞统称为外植体。
2、细胞核重编程：是细胞内的基因表达由一种类型变成另一种类型。通过这一技术，可以在同一个体上将较容易获得的细胞类型转变成另一种较难获得的细胞类型。这一技术的实现将能避免异体移植产生的免疫排斥反应。
3、直接器官发生：直接从外植体的细胞形成器官原基，然后发育成器官。
4、愈伤组织：是指在培养或自然条件下，植物细胞脱分化，不断增殖所产生的主要由薄壁细胞构成的不定形的组织.
5、褐化现象：指对于富含多酚化合物的植物，在接种时由于切割或剥离使组织收到伤害，该类物质会在多分氧化酶的作用下氧化褐变，是培养基变黑，并严重抑制外植体生长和分化，严重时导致培养物死亡。
6、复幼现象：在离体培养环境下，取自成龄植株的外植体由于适应环境而一步步向幼龄方向变化。
7、胚状体：在离体培养条件下，植物离体培养的细胞、组织、器官也可以产生类似胚的结构，其形成也经历一个类似胚胎发生和发育过程，这种类似胚的结构称为胚状体。8、植物超低温种质保存：将植物的离体材料包括茎尖、分生组织胚胎花粉愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等，经过一定的方法处理后在超低温条件下进行保存的方法。
条件培养基
9、无菌：是指使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器皿中正常生长和发育。
10、植物茎段培养：植物茎段培差是指对植物的带有一个以上定芽或不定芽的外植体进行离体培养的技术。
11、脱分化：也称去分化，是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
12、再分化：离体培养的植物细胞和组织细胞可以由脱分化状态重新进化分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株，这个过程称为再分化。
13、原球茎：原球茎是兰花种子发芽过程中的一种形态学构造。是短缩的、呈珠粒状的、由胚生细胞组成的、类似嫩茎的器官。
14、植物器官培养：对植物体各种器官及器官原基进行离体培养的方法。包括根、茎、叶、花、果实、种子等的培养。
15、胚胎培养：对植物成熟胚和未成熟胚以及胚器官进行离体培养的方法，称为胚胎培养。
16、体细胞无性系变异育种：指体细胞无性系变异在育种中可以改良作物品种拓宽种质资源，以及加强外源基因向栽培中的渐渗。
17、体细胞胚胎发生：植物离体培养细胞产生胚状体的过程。
18、离体授粉：或称试管受精、离体受精，指将未授粉的子房或胚珠从母体上分离下来，
进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术。
19、种质资源的离体保存：是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要时可重新恢复其生长，并再生植株的方法。
20、异质性现象:一个细胞或个体含有不同遗传背景细胞质的现象。
21、人工种子：植物离体培养产生胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成能发芽出苗的颗粒体。
填空题
1、
2、培养基可分为固体培养基和液体培养基，二者的区别在于是否加入凝固剂。
3、离体培养中再生植株的主要途径是器官发生和胚胎发生。而原球茎发生、绿色球状体发生、球状茎原基发生、外植体已存在的器官原基萌发等再生途径由于与器官发生有较密切联系，将之归入关以上的器官发生途径。
4、植物组织培养实验室包括准备室、无菌操作室、培养室和温室。
5、愈伤组织形成过程可分为诱导期、分裂期、分化期。-
6、德国植物学家Haberlandt提出植物细胞全能性学说。
7、在双子叶植物上，体细胞胚胎发生经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚和成熟胚5个阶段。
8、植物体细胞胚胎发生具有双极性和存在生理隔离2个特点。
9、1960年，Cocking 等用真菌纤维素酶分离植物原生质体获得成功。这是植物组织培养的第二次突破。
10、植物器官和组织培养的基本程序包括无菌外植体的获得、初代培养物的建立、形态发生和植物再生、培养物的观察记载
11、限制离体培养物生长速度的方法很多，如低温、提高渗透压、加生长延缓剂、干燥、降低氧分压、矿物油覆盖。
12、外植体经过灭菌处理后，要建立起初代无菌培养材料，并使其增殖和发育，还需无菌环境、规范操作、条件合适的配合。
13、根据材料的来源，胚培养的类型可分为幼胚培养、成熟胚培养。
14、根据器官形成方式的不同，将植物器官的再生分为短枝发生型、丛生芽发生型、不定芽发生型，胚状体发生型、原球茎发生型。
15、细胞悬浮培养可分为分批培养、半连续培养、连续培养。连续培养又分为封闭式连续培养和开放式封闭培养。
16、花粉培养方式包括平板培养、液体培养、双层培养、看护培养、微室培养、条件培养基培养。
简答题和论述题
1.请简述玻璃化现象的含义及防治措施。
含义：是指组织培养过程中的特有的一种生理失调或生理病变，表现为叶和嫩梢呈水浸透明或半透明水渍状。
措施：提高琼脂的浓度；改善容器的通气状况；调节培养基组分；减低NH4＋可以减少玻璃苗；或入根皮苷和Ca 2＋的浓度。
2.影响植物体细胞无性系变异的因素。
（一）外植体外植体的类型、生理状态等因素明显影响体细胞无性系变异的频率。一般而言，培养特异化程度高或衰老的组织，产生变异的几率大；而培养分生组织或幼龄的外植体（如顶芽、腋芽、分生组织），则发生变异较少。
（二）物种和基因型体细胞无性系变异具有对物种和基因型的依赖性，即无论再生模式如何，物种和基因型都影响着体细胞无性系变异的发生。另外，源植株的倍性也是一个重要因素，多倍体和染色体数目较多的植物其变异频率比二倍体和单倍体高。
（三）培养基 1.基本培养基基本培养基的某些成分会使培养物倍性改变。2.植物生长调节剂。生长调节剂可能是起一种诱变剂的作用。不同的激素浓度可以有选择地诱导不同倍性的细胞的分裂。激素除了引起染色体倍性的增加外，在一些培养中还发现染色体倍性减少的现象。
（四）继代培养时间继代时间越长，继代次数越多，细胞变异的几率就越高。长时间的继代培养会使愈伤组织和细胞的再生能力降低甚至完全丧失。
3.影响脱分化与再分化的因素有那些？
影响细胞脱分化的因素1损伤：外植体由于切割损伤的刺激，导致细胞内一系列生理生化的变化，促进细胞增殖，这可能使生命的一种自我调节机制2生长调节剂。主要是生长素类起作用，因而在诱导愈伤组织时常加入生长素类，但同时配合使用细胞分裂素则效果可能更好3光照。弱光或黑暗条件下常有利于脱分化中的细胞分裂。4细胞位置。外植体本身的各类细胞可能对培养条件的刺激有不同的敏感性。5外植体的生理状态。不同生理年龄和不同季节都会有不同的培养反应。6植物种类差异。不同种类的材料脱分化难易有所区别，一般情况下，双子叶植物比单子叶植物及裸子植物容易。
影响细胞再分化的因素：目前还不能让所有植物的所有活细胞都再生植株。主要原因是：（1）不同植物种类再分化的能力差异很大；（2）对某些植物的植株再生条件还没有完全掌握。影响细胞再分化的因素与影响脱分化的因素基本一样。
4.简述褐化现象的含义及防治措施。
含义：褐化是指外植体或培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基和培养材料逐渐变褐而死亡的现象。
措施：1.取材季节：冬春季节2.选择合适的外植体：分生能力强3.在培养基中加入抗氧化剂（抗坏血酸，柠檬酸，半脱氨酸，二硫苏糖醇，PVP）4.吸附剂：活性炭5加快继代转瓶速度
5.配制母液应注意的事项有哪些？
1、配制的倍数不宜过高，这样一方面可避免一时用不完造成质量的变质浪费，另一方面也可以避免母液倍数过高，吸量相对过小而影响准确性。
2、母液配好后，应立即存放于2-4 ℃的冰箱中保存备用。
3、母液贮备时间不宜过长，尽量做到有计划配制，预计能在短期内用完。故所有母液应在评上注明配制的日期，以便于检查。
4、应定期检查母液，如果出现浑浊或者沉淀以及微生物污染，不宜再用，应重新配制。
5、称取大量元素化合物，只需在感应量为0.01克的扭力天平或者药物天平上称量。称取微量元素、维生素、氨基酸等，则要在感应量为0.0001克的精密光电分析天平上称量。
6、各种化学药品的浓度应适当，过大则会溶解不完全，而且还会引起化学反应产生沉淀，从而影响溶液中药品含量。
7、配制母液时，应用容量瓶定容，使溶液的体积精确的到达刻度线。（配制母液原则：相同类型的试剂混合；易形成沉淀的药品分开；母液浓度要适宜；用量要认真计算和核对；药品要准确称量。）
6.请简述培养基中添加活性炭的主要作用。
（1）吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物质（2）抑制外植体褐变（3）防止玻璃苗的产生（4）促进培养物生长和分化（5）促进生根。
7.请比较分析植物传统的保存方式与离体保存方式的各自优缺点？
（1）、传统包括原生境保存和移地保存:优点：能够保证物种的原有的各种生物特性稳定遗传下来。缺点：①如果需要保存大量的种质，需要耗费巨大的人力物力和土地资源，在实际工作中很难得到实施；②容易受到自然灾害、虫害、病害的侵袭，造成植物种质资源的丧失；③无性繁殖的植物难于采用种子保存；④种子生活力随贮存期的延长会逐渐丧失；⑤采用无性繁殖来保持其优良性状的植物，用种子繁殖后代会发生变异；⑥顽拗型种子植物不宜用种子保存或保存难度很大
（2）、离体保存方式：优点：①所占空间少，节省大量的人力物力和土地；②便于种质资源的交流利用；③需要时，可以用离体培养的方法很快大量繁殖；④避免自然灾害引起的种植流失。缺点：①对于限制或延缓的生长处理，需要定期转移，连续继代培养；
②易受微生物污染或发生人为差错；③多次继代培养有可能造成遗传性变异及材料的分化和再生能力的逐渐丧失
8.超低温保存的基本原理。
低温冰冻过程中，如果生物细胞内水分结冰，细胞结构就会遭到不可逆的破坏，导致细胞和组织死亡。植物材料在超低温条件下之所以可以长期保存并能在离开保存环境后正常进行细胞分化，就是在冰冻过程中避免了细胞内水分结冰，并且在解冻过程中防止细胞内水分的次生结冰而达到植物材料保存目的。
9.简述植物组织培养中准备室（化学室）的作用。
（1）器具的洗涤、干燥、灭菌、保存；(2)培养基配制，蒸馏水生产；(3)生理生化分析及切片制备；(4) 药剂的配置、存放，称取。
10.影响植物快繁的因素有哪些？
其影响因素多种多样：①外植体：a.外植体来源。b.外植体生理年龄。c.外植体大小
②培养基：a.基本培养基。b.植物生长调节剂。c.培养基的物理特性。
③培养条件：a.光照 b.温度 c.湿度 d.气体
④继代培养的形成
⑤移栽过程中影响生长的因素：a.根系结构 b.叶表皮组织
11.请简述分生组织含毒量低的原因。
①在植物体内，病毒可通过维管束组织系统长距离转移而分生组织中不存在维管束。病毒也可通过胞间连丝在细胞间移动，但速度很慢，难以追赶上活跃生长的茎尖。
②在旺盛分裂的细胞中，代谢活性很高，使病毒无法进行复制。
③在植物体内可能存在病毒钝化系统，它在分生组织中比其他任何区域具有更高的活性。
④在茎尖中存在高水平内源生长素，可抑制病毒的增殖。
12.在植物组织培养过程中，经常会发生真菌或细菌污染，试述污染发生的原因及控制措
施都有哪些？
1、污染发生原因①培养基及各种接种器皿灭菌不彻底；②外植体灭菌不彻底；③操作时人为带入；④环境不清洁；⑤超净工作区域不清洁。
2、控制污染的措施①灭菌前充分排尽灭菌锅内冷空气，当灭菌锅压力达1.055～1.406 kg ／cm2、温度为121～126 ℃时，应保持灭菌时间20～30 min；②接种器具每次使用后应用酒精灼烧；③污染的外植体材料应及时淘汰，如果种源有限，对外植体材料可进行二次灭菌；④操作人员接种时应用75 ％的酒精擦拭双手和培养瓶表面，操作区内不要放入过多待用培养瓶以防止气流被挡住；⑤接种环境应定期用福尔马林等熏蒸灭菌，经常用
紫外灯照射灭菌；⑥超净工作台应定期对初过滤器清洗和更换，提前15～20 min打开，并用75％酒精擦拭整个工作台。
13.离体条件下，由于摆脱了原来供体的束缚，离体细胞生命特征属性的表现过程和形式
都将发生哪些变化？
离体条件下，由于摆脱了原来供体（组织、器官或完整植株）的束缚，离体细胞（组织、器官）生命特征属性的表现过程和形式都将发生变化。如在新陈代谢方面，离体细胞主要依靠培养基提供碳源，没有或很少进行光合作用：在调控能力方面，培养物从自养变为异养；在生长发育与繁殖方面，离体细胞（组织、器官）可以改变原来的生长发育方向或进程，如离体细胞的胚胎发生、细胞脱分化等；在遗传变异与进化方面，离体培养可大大增加培养物的变异性，或使某些变异在短时间内大量扩增，改变其数量等。
14.请简述人工种子的含义及应用。
含义：人工种子又称合成种子，一般是指离体培养条件下的植物材料，通过繁殖获得大量的高质的成熟胚状体，把这些胚状体外面包上有机化化合物作为保护胚状体及提供营养的“种皮”，从而创造出与真种子类似的结构。
人工种子的利用（1）使自然条件下不易结实或种子昂贵的材料能快速繁殖和保存
（2）对于采用种子繁殖的蔬菜、花卉、草皮或果树砧木的植物，可以通过人工生产大量无性种子，而获得性状及生长一致的种苗，可用于生产大量良种，或良种砧木种子，后者可大大提高接穗试验的准确性。
（3）固定杂种优势，可使F1杂种优势多代利用，使优良单株快繁成无性系而多代利用，从而大大缩短育种年限，同时保持杂种材料的遗传稳定性
（4）由于理论上从任何材料都能得到胚状体，且通过组织培养产生的胚状体具有数量大、繁殖速度快、结构完整等特点，为基因工程技术应用于生产提供桥梁
（5）在人工种子的制作中，加入各种营养成分或生长调节剂，调节植物生长，提高植物抗逆性。
（6）可以保存及快速繁殖脱毒苗，克服某些植物由于长期营养系繁殖所积累的病毒。（7）不受环境因素的制约，可一年四季进行工厂化生产。
（8）人工种子的产生，在一定程度上可取代天然种子而节约粮食，成本低，体积小，贮运方便，减少试管移苗，苗木包装运输的生产环节，在生产上和研究上都肯有重要意义。
15.试述植物组织培养过程中都有哪些类型的基本培养基，各类基本培养基有何特点，以
及如何合理的选择这些基本培养基？
(1)、植物组织培养基本培养基的类型特点：1、含盐量较高的培养基如MS培养基、LS培养基、BL培养基。特点：主要特点是无机盐浓度高，特别是硝酸盐、钾离子和铵离子含量丰富。元素平衡较好，缓冲性能好。微量元素和有机成分含量齐全且丰富，是目前使用最广泛的培养基。2、硝酸钾含量较高的培养基如B5培养基、N6培养基、SH 培养基等。特点：培养基的盐类浓度较高，铵态氮含量较低，但盐酸硫胺素和硝酸钾含量较高。3、中等无机盐含量的培养基如Nitsch培养基、Miller培养基和H培养基等。特点：大量元素的含量约为MS培养基的一半，微量元素种类少含量高，维生素种类多。
4、低无机盐含量的培养基如怀特培养基、WS培养基、HE培养基等。特点：无机盐含量非常低，为MS培养基的1/4左右，有机成分也很低。
(2)、植物组织培养过程中合理选择培养基：①MS 培养基的无机盐类浓度较高，能够满足快速增长的组织对营养元素的要求，但它不适合生长缓慢、对无机盐类浓度要求比较低的植物，尤其是不适合铵盐过高易发毒害的植物。B5培养基中铵的含量比较低，在豆科植物上用得较多，也适用于木本植物。②N6培养基在水稻、小麦以及其他植物的花粉
和花药培养中被使用。③White培养基在一般植物组织培养中用途比较广泛，还非常适合于生根培养和幼胚的培养。④WPM培养基中氮的含量比较低，适合木本植物组织培养。
⑤培养基是否适合所培养的植物，可以通过试验进行筛选。必要时应该对培养基的成分进行调整，以此来获得良好的培养效果。
16.目前鉴定脱毒苗的方法有哪些？各有何特点？
（－）直接测定法直接观察植株生长状态是否异常，茎叶上有无特定病毒可见症状，从而可判断病毒是否存在。优点：简便、直观、准确。
（二）指示植物法接种某种病毒后能快速表现特有症状。
（三）血清鉴定方法最主要的是酶联免疫吸附法。特点：灵敏度高；快速；专化性强，重复性好；检测对象广；适用于处理大批样品，所用基本仪器简单，试剂价格较低，且可较长期保存。
（四）核酸分析法用互补DNA（cDNA）检测病毒。不仅可以检测到目标病毒的核酸，而且还可以检测出相近病毒间的同源程度。
（五）电镜鉴定法优点：这种方法比指示植物法直观，速度快；缺点：病毒粒子的形状易与细胞器和其它成分（如蛋白纤维）的形状混淆；病毒浓度低时不易观察到。
17.培养基的组成成分有哪些？各有什么作用？
成分：①水分②无机盐类③有机营养成分④植物生长调节物质⑤天然有机添加物质；⑥pH⑦凝固剂
作用：1.水分：是一切生物生命活动的物质基础。细胞内的生化反应都以水为介质，而水分又是很多生物化学反应的原料或代谢产物。构成培养基的绝大部分组分为水分。2.无机盐类：根据植物的需要量可以分为大量元素和微量元素。植物从培养基中吸收的大量元素是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的营养元素。微量元素是很多酶和辅酶的重要成分，直接影响着蛋白质的活性。铁又是叶绿素的重要成分，在没有铁的培养基上生长，组织会产生黄化或死亡现象3.有机营养成分：①糖类物质：培养基中的糖类物质就成了其生命活动中必不可少的碳源和能源。糖类的添加还有调节培养基渗透压的作用②维生素类：对于植物组织的生长和分化有良好的促进作用；对愈伤组织和器官形成有促进效果。维生素C还有防止组织褐变的作用。肌醇促进愈伤组织形成和不定芽不定胚的分化③氨基酸类：为培养物提供有机氮源，对外植体的生长及不定芽不定胚的分化促进作用。水解酪蛋白和水解乳蛋白对胚状体的形成也有良好的促进效果4.植物生长调节剂：促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织诱导不定芽不定胚的形成。包括生长素和细胞分裂素，①生长素类。在植物组织培养中，用于诱导愈伤组织形成，诱导根的分化和促进细胞分裂、伸长生长。②细胞分裂素类：多用于诱导不定芽的分化，茎、苗的增殖，而避免在生根培养时使用。③赤霉素：促进细胞的伸长生长，促进不定胚发育成小植株。赤霉素和生长素协同作用，对形成层的分化有影响，当生长素／赤霉素比值高时有利于木质部分化，比值低时有利于韧皮部分化。5、天然有机添加物质：椰子汁；酵母提取液；番茄汁；黄瓜汁；香蕉泥6、pH：在灭菌前，培养基的pH一般被调节到5.0~6.0 之间，最常用的pH为5.7~5.8。pH过高时，培养基会变硬；pH过低时，则影响培养基的凝固。7、凝固剂：配制固体培养基需要使用凝固剂。最常用有琼脂。当培养基pH偏低或琼脂纯度不高时，应适当增加其用量。8、其他添加物：为了减少外植体褐变，需向培养基中加入一些防止褐化的物质。在灭菌比较困难的植物材料添加一些抗生素物质，来抑制杂菌生长。
18.以兰科植物铁皮石斛或金线莲为例，试述快速繁殖的程序及移栽过程中的要点。
铁皮石斛：快速繁殖程序：外植体的选取和预处理--外植体的灭菌--培养基的灭菌--组织
培养室中培养（22 ℃，每天光照12 h ，光照强度为2O00 lx）-- 壮苗与生根
移栽过程中的要点：出瓶后出瓶时根系含水量高，根系脆弱，易碰伤。用清水洗净根部培养基，并晾干，能有效提高成活率。根部脱水后栽植在穴盘中，用基质填充空隙，做到“上松下紧”。基质的主要成分是陶瓷碎片、树皮和锯糠，保水透气性好。置于苗床上，不易积水，且四周透风。要保持湿度70%左右，通风良好，而且处在半阴半阳的状态。长出新芽后只留1-2个健壮的新芽，其余抹去，并及时分开穴盘里的大小植株，进行不同的肥水管理。注意病虫害的防治，及时发现并处理老叶、病叶，消除病害来源。
兰花
一、外植体选择
兰花的茎尖、叶片（应选择带有嫩叶的花梗）、花器官、种子等都可作为外值体用于组织培养、诱导再生植株。
二、外植体的消毒和接种
（一）外植体的消毒
在兰花茎尖组织培养中，首先从生长健壮的植株上切取约10 cm长的茎尖，去掉苞叶，经过常规的消毒后备用。
（二）外植体的接种
①茎尖生长点的剥取
在超净工作台上，借助体视显微镜，用镊子将消毒茎段的幼叶剥下，露出生长点后，用解剖刀切取0.5~0.8 mm大小的芽〈应尽量小，以利脱毒），接种于培养基上。
②叶片外植体的切取
从茎段切下的幼叶连同花梗上的幼叶一起，在无菌条件下切割成0.3~0.5 cm2的小片，接种到培养基上。
(三）培养基诱导兰花茎尖形成原球茎的培养基组成为：MS或B5＋NAA0.5-1.0 mg/L＋6-BA0.1~1.θ mg/L＋椰子汁10%；诱导叶片形成原球茎的培养基组成为：改良Kyoto＋NAA0.l mg/L＋6-BA 1.0 mg/L 十肌醇100 mg/L十烟酸0.l mg/L＋维生素B1 0.05 mg/L十腺嘌呤20 mg/L十蔗糖2%十尿素0.2%。原球茎生芽的培养基组成为：1/3~1/2 MS或3/4~4/5 B5，其余成分与诱导原球茎形成的培养基相同。三、原球茎的诱导
茎尖生长点或叶片接种在原球茎诱导培养基上。因兰花种类而异，可以用固体培养基或液体培养基（液体培养基中应加比较多的蔗糖）。凡原球茎切口处不变褐或变褐物质排出量较少的种类，可用固体培养基，而易变褐的种类，最好用液体培养基。
四、种子的无菌发芽
（－）种子灭菌为保证种子的灭菌效果，可在蒴果开裂时将它采下，用纸包好，保存在干燥器内。在冷藏室内保存5 ~ 6年，种子仍能发芽。经过保存的兰花种子带菌少，可用7 %漂白粉处理20 min，或按常规灭菌方法进行处理。
（二）无菌培养把无菌的兰花种子接种在培养基上，培养基可用KC、Kyoto和MS基本培养基，添加蔗糖20~35 g/L、琼脂l0 g/L，必要时可加复合肥料、苹果汁，甚至生长调节物质（KT 0.04 ~ 10.0 mg./L，IAA 1.0~30.0 mg/L）。
五、原球茎的增殖
形成的原球茎可以不断分割，进行继代培养，加速其繁殖，直到获得所需的数量为止。继代培养所用的培养基同诱导培养，可采用固体培养或液体培养，培养条件也一样。
六、苗的分化培养与移栽
较大的兰花个体才便于移栽，新形成的小苗必须移人较大的培养容器内生长到一定大小时才能移栽。
一般是将lcm高的幼苗转移到壮苗培养基上培养3 ~ 6个月，使其长到约10 cm高，方可移栽。
兰花组织培养的关键技术（－）培养基的选择（二）材料的褐变（三）原球茎球状体的苗分化（四）变异
三、兰花组织培养的关键技术
（－）培养基的选择
兰花组织培养使用过的培养基有10余种，但常用的为MS培养基。基本培养基的选择不是关键问题，关键是离子浓度，一般用较低的离子浓度，且注意不同培养阶段要求不同。培养基中可适当添加生长调节物质、生物活性物质、氨基酸和植物组织提取物。
（二）材料的褐变
防止材料变褐是兰花组织培养成功的关键。变褐的主要原因是材料从伤口分泌出酚类化合物，酚类物质在多酚氧化酶的作用下转变成醌类物质而引起褐变。2,4-D的使用、灭菌技术和培养中的温、光条件对褐变都有影响。防止褐变的方法主要是采取降低培养基中的离子浓度和采用液体培养基，也可向培养基中加人维生素C、半胱氨酸等抗氧化剂，以减轻褐变。
（三）原球茎球状体的苗分化
原球茎球状体一般可分化成苗，但有些种往往不分化出苗，或者产生畸形苗。除了品种的差异外，培养条件也很关键，可向培养基中添加香蕉汁、椰子汁等植物组织提取物，或添加一定浓度的IAA、KT、NAA等，或降低培养基的离子浓度来加以调整。
（四）变异
兰花组织培养中的变异原因主要与高浓度的激素、长期继代培养、主芽的部位和大小、自身的芽变等有关。前三者可以在培养中加以改善和防止，后者是无法避免的，这在兰花的良种繁殖上也应十分注意。要慎重选择外植体、培养基、培养条件，在继代和扩繁过程中应及时淘汰那些变异材料，保留正常的材料。利用兰花组织培养变异的特性，可以从中选育出新的优良兰花品种。
植物组织培养实验基本步骤。。
植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：称
FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ，把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml 细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、 1、生长素类： （1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织
植物组织培养报告
植物组织培养报告内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
大蒜茎尖的组织培养 谢婷婷江宋青万嫣文吕凌宇一、实验目的 掌握植物组织培养的相关理论知识及操作方法； 通过自行设计并完成实验，提高动手能力和思维能力； 利用植物细胞的全能性，使大蒜茎尖经过脱分化作用形成愈伤组织，再分化为有结构的组织和器官，最终增殖培育出大量品质优良的大蒜试管苗。二、实验原理 植物组织培养是利用植物细胞的全能性原理。植物组织培养是在无菌环境下，将离体的植物器官、组织以至单个细胞，在人工配置的培养基上培养，使其能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化”。已经脱分化的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化”。 三、实验材料、试剂和器材 1 供试材料 以购于府前菜场的大蒜为实验材料，实验在丽水学院生态学院组培实验室进行。 2 仪器与设备 超净工作台、培养事、电子天平、烧杯、容量瓶、玻璃棒、量筒、移液
管。 3 试剂 70%酒精、95%酒精、0.1%升汞、蔗糖、琼脂条、6-BA（1.5 mg/L；2.0 mg/L）、2,4-D（2.0 mg/L）、NAA（1.0 mg/L；）、IBA（2.0 mg/L）、10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物。 四、实验步骤 1.培养基的配制及灭菌 诱导培养基：MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L 出芽培养基：MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L 生根培养基：MS+IBA 2.0 mg/L （1）将MS母液（10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物）按顺序排列、检查是否失效。 （2）在装有3/4蒸馏水的容器中加入0.7%琼脂和3%蔗糖，加热溶化。（3）依次吸取适量各种母液移到容器中。 （4）用蒸馏水定容到相应体积。 （5）调节pH值(用0.1M的NaOH或HCl调节)至5.8-6.0。 （6）向培养基中加入适量激素。 （7）将配制好的培养基进行分装（20-30ml/瓶）。 （8）用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（烧杯、培养皿、灭菌水等），需同时灭菌。 （9）将灭菌后的培养基于常温下放置一星期，观察有无污染。
植物组培培养基的成分
植物组培培养基的成分 培养基是人工配制的，满足不同材料生长，繁殖或积累代谢产物的营养物质。在离体培养条件下，不同种类植物对营养的要求不同，甚至同一种植物不同部位的组织以及不同培养阶段对营养要求也不相同。筛选合适的培养基是植物组织培养极其重要的内容，是决定成败的关键因素之一。 大多数植物组织培养基的主要成分是无机营养物质（大量营养元素和微量营养元素）、碳源、有机添加物、植物生长调节剂和凝胶剂。一些组织可以生长在简单的培养基上，这些培养基只含无机盐和可利用的碳源（蔗糖），但大多数组织必须在培养基中添加维生素、氨基酸和生长物质，而且经常还将一些复合的营养物质加入到培养基中，这种由“化学定义”的化合物组成的培养基称为“合成”培养基。 人们已设计了许多培养基用于特殊组织和器官的培养。 怀特培养基是最早的植物组织培养基之一，最初作为根培养的培养基。为了诱导培养组织器官发生和再生植株，广泛使用含有大量无机盐成分的MS（Murashige和Skoog，1962）和LS(Linsmaier 和Skoog，1965)培养基。原本为细胞悬液或愈伤组织培养而设计的B5培养基，经过改良后，被证实有利于原生质体培养。同时，B5培养基也被用于诱导原生质体再生植株。尽管Nitshch(1969)为花药培养设计的培养基仍然使用频繁，但另一个称为N6的培养基，专门用于禾谷类花药培养和其他组织培养。类似的，N6培养基越来越多地
用于大豆、红三叶草和其他豆科植物的培养。该培养基营养成分促进胚性细胞和原生质体再生细胞快速生长。使用这些培养基成功的原因很可能是营养元素的比例和浓度基本上满足不同培养体系中细胞或组织生长和分化的最适需要。 植物组织培养基中无机和有机成分的浓度用质量浓度（mg/L 或ppm，但现在习惯用mg/L）或物质的量浓度(mol/L)表示。按照国际植物生理学协会的推荐，应该用mol/L表示大量营养元素和有机营养成分浓度，用μmol/L表示微量营养元素、激素、维生素和有机成分浓度。用物质的量浓度的优点是，每一种化合物每一摩尔的分子数是常数，所以按照特定培养基配方配制培养基时，无论无机盐化合物的水分子数为多少，原物质的量浓度都可以使用。但是，用质量浓度来表示浓度的话，就不能不考虑无机盐化合物的水分子数目了。 1、水分 水分是植物体的主要组成部分，也是一切代谢过程的介质和溶媒，在植物生命活动过程中不可缺少。配制培养基母液时要用蒸馏水或纯水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止储藏过程中发霉变质。研究培养基配方时尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。而在大规模工厂化生产时，为了降低生产成本，常用自来水代替蒸馏水。如自来水中含有大量的钙、镁、氯和其他离子，最好将自来水煮沸，经过冷却沉淀后再使用。
植物组织培养基础理论与基本知识
第一章植物组织培养的基础理论与基本知识 第一节植物组织培养的基本概念及类型 一、教学目标： 通过对植物组织培养的概念和植物组织培养的类型的学习,使同学们对植物组织培养技术有大概的了解和认识,让同学们建立起对该学科学习兴趣。 二、教学效果目标： 1、理解、掌握植物组织培养的概念； 2、掌握植物组织培养的类型。 三、教学重点： 1、理解、掌握植物组织培养的概念； 2、掌握植物组织培养的类型。 四、教学难点： 1、理解、掌握植物组织培养的概念； 2、掌握植物组织培养的类型。 五、教学效果评价： 1、为了激发学生的学习积极性和主动性，不宜采用百分制的方法进行评价，而是采用A、B、C、D四个评价等级进行评价。 2、评价标准： A、能用自己的语言对植物组织培养的概念和类型等几个基本概念进行正确的描述，能熟练的判断植物组织培养的类型。能按时按量甚至超量完成
作业，并且无误。 B、能基本用自己的语言植物组织培养的概念和类型等几个基本概念进行正确的描述，能基本会判断植物组织培养的类型。能按时按量完成作业，基本无误。 C、在老师的指引下或参照课本基本用自己的语言对植物组织培养的概念和类型等几个基本概念进行正确的描述，能基本判断植物组织培养的类型。能按时按量完成作业，但错误较多。 D、基本不认真听课，课堂很随意，基本不听老师教导，对所学内容基本不懂，很少作作业。 六、采用理论教学。 七、教学时数： 2学时 教学过程 一、新课导入：约（10分钟） 以同学们感兴趣的动物克隆技术人手，向同学讲述克隆技术基础技术，然后转到植物组织培养技术上来。 二、新课：（约80分钟） 板书： 第一章植物组织培养的基础理论与基本知识
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件
把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加
常见园艺植物组织培养培养基配方
常见园艺植物组织培养培养基配方 信息来源：生物谷更新时间：2004-12-21 1:34:00 诱导培养 草莓匍匐茎1/2MS+BA0.2 吊钟海 堂 叶片MS+BA1.0+NAA0.2 MS+BA1.0+NAA0.1 MS+NAA0.2 海石竹叶片MS+BA1.0+NAA0.2 MS+BA1.0+NAA0.1 MS+NAA0.2 马铃薯苗尖MS+BA1.0+IAA0.01 MS+BA1.0+IAA0.01 MS+BA1.0+IAA0.01 分生组织MS+NAA0.07+GA0.004 MS+NAA0.07+GA0.004 MS+NAA0.07+GA0.004 大蒜顶端分生 组织 MS / MS+NAA1.0 芽顶端B5+2ip0.5+NAA0.1 B5+2ip0.5+NAA0.1 B5+2ip0.01+NAA0.2 洋葱鲜茎B5+2,4-D1 B5+2ip1 / 花椰菜分生组织LS+IAA8.0+KIN2.56 LS+IAA8.0+KIN2.56 LS+IAA8.0+KIN0.02 油菜下胚轴、 茎段 B5+BA1.5~2.0+IBA0.2+GA0.5 B5+BA1.5~2.0+IBA0.2+GA0.5 1/2B5+NAA0.05+IAA0.1 西瓜苗端LS+KIN1.0+IAA0.05 LS+KIN2.0+IAA0.05 LS+IAA2.0 葡萄茎尖MS+NAA0.1 MS+NAA0.1 / 麝香石 竹 茎段MS+BA1.0+IAA0.01 MS+BA1.0+IAA0.01 MS+IAA0.1 唐昌蒲腋芽MS+KIN2.0+NAA0.1 MS+KIN2.0+NAA0.1 MS+NAA0.5+AC0.3 月季萌枝MS+BA0.5+NAA0.1 MS+BA0.5+NAA0.1 MS+BA0.5+NAA0.1 非洲菊茎尖MS+KT1+IAA2 MS+KT10+IAA0.5 MS+IAA10 MS+BA2+NAA0.2~0.5 MS+BA2+NAA0.2~0.5 MS+White+IBA1 康乃馨茎尖MS+KT0.5+NAA0.1 MS+KT2+NAA0.02 / MS+KT2+NAA0.2 MS+KT0.5+NAA0.02 / 仙客来球茎White+KT2.5 / / 满天星茎尖MS(或White)+BA1+ NAA0.05 MS(或White)+BA1+ NAA0.05 / 香雪球茎MS+IAA2+2,4-D5 MS+BA1+IAA0.02~0.2 / 变叶木茎段MS+BA1.5+NAA0.15 MS+BA2.5+NAA或IAA0.1 MS+NAA0.5 风信子鲜茎、花 序MS+NAA0.5~10+2,4-D 0.2~1 / / 矢车菊茎Bonner+2,4-D0.7 / / 大丽菊侧芽MS+BA1+NAA1 MS+BA1+NAA1 MS+NAA0.5~1
多肉植物组织培养
多肉植物是指植物营养器官的某一部分，具有发达的薄壁组织用以贮藏水分，在外形上显得肥厚多汁的一类植物。常见的有仙人掌科的仙人掌、仙人球、昙花、蟹爪兰、金琥；番杏科的生石花、肉锥花；百合科的康平寿、玉露、卧牛；大戟科的虎刺梅、彩春锋；景天科的石莲花、长寿花、虹之玉；龙舌兰科的金边龙舌兰、虎尾兰；菊科的翡翠珠等。 肉植物耐干旱，净化空气，具有外观小巧玲珑，植株肥厚多汁，造型特异等特点，是近年来逐渐流行的一类观赏植物。组织培养技术，对保存多肉植物优良的种质资源、繁殖名优珍稀品种、快速繁殖出口需要和园林绿化需要的优良品种。 传统多肉植物可依靠分株、扦插繁殖，分株繁殖如芦荟、仙人球、虎尾兰；扦插繁殖如蟹爪兰、长寿花、落地生根，仙人掌则是分株和扦插繁殖都可以。值得一提的事，生石花在生长中有一个脱皮、分裂的过程。通常在冬末春初，植株中缝逐渐开裂，在开裂处有一个或两三个新的植株逐渐长大，而原有的植株逐渐枯萎，为新株所取代。这个由新植株替代老植株的过程，就是脱皮生长和分裂繁殖过程。 外植体的选择 取优良母株新萌发的幼嫩侧芽、幼嫩枝条；一些没有侧芽的珍稀名贵品种的母株则可等待植株开花期间取其较充实的花梗作为外植体。夏季休眠期，多肉植物外植体在培养基中对激素常反应迟钝，生长静止，不易培养成功。 1.????????? 消毒灭菌 2.1选择合适的培养基的，配置好、调节适当的激素浓度。 2.2制作好的培养基须立即放入高压灭菌锅灭菌，备用。， 2.3外植体材料的消毒：切取多肉植物幼嫩的侧芽或花梗→肥皂水或洗洁精洗涤→在自来水下冲洗→超净工作台中用 75%酒精浸泡数秒→ 0.1%升汞处理 10～30min，→无菌水冲洗 6 遍，→消毒滤纸吸干水分 3.接种 无菌条件下操作→手术刀切取所需的培养材料→无菌操作植入初代诱导培养基中培养。 3.培养
植物组织培养的基本步骤
植物组织培养的基本步骤 成熟细胞离体——（脱分化）——分生细胞——（分裂）——愈伤组织——（再分化）——形态建成————完整植株。 培养基的主要成分 【水分】 【无机盐】1.大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S（由相关的无机盐提供） 2.微量元素：Fe，B，Cu，Mn，Mn，Zn，Co 【有机营养成分】1.糖类 2.维生素 3.氨基酸 4.肌醇 5.天然有机物【植物生长调节剂】1.生长素 2.细胞分裂素 3.其他生长调节剂 【凝固剂】琼脂 【其他物质】1.活性炭 2.抗生素 3.抗氧化物质 4.硝酸银 培养基和组织培养用具的灭菌方式 【培养基，无菌水】高压蒸汽灭菌，0.105MPa灭菌15~30分钟 【移栽基质】曝晒，甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h 【接种室，缓冲室】紫外线灯照射30min，或气雾消毒剂 【超净工作台】紫外线灯30min，之后打开风机过滤除菌 【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒 【接种工具】70%乙醇浸泡或擦拭，之后用火焰灼烧灭菌 【培养室】3%来苏尔喷雾，或甲醛，气雾消毒熏蒸 【皮肤】先用肥皂洗手，接种前用70%乙醇擦拭 【瓶口，管口】70%乙醇擦拭，用火焰封口
【培养瓶表面】70%乙醇擦拭 【台面，桌面】70%乙醇擦拭或喷雾消毒 植物外植体的灭菌方式 【茎尖，茎段，叶片】1. 用70%乙醇浸泡30秒，再用无菌水冲洗1次。 2.用2%次氯酸钠浸泡15min或0.1%升汞浸泡5~10min。 3.若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴吐温。 4.消毒时要不断震荡，使植物材料与消毒剂充分接触。 5.最后用无菌水冲洗3~5次。 【果实】1.用乙醇迅速漂洗一下，再用无菌水冲。 2.用2%次氯酸钠浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【种子】用10%次氯酸钠浸泡20~30min，或0.1%升汞消毒5~10min，然后再用无菌水冲洗3~5次。 【花蕾】1.用70%乙醇浸泡10~15秒，无菌水冲洗一次。 2.在漂白粉中浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【根及地下部器官】用0.1%升汞浸泡5~10min 或用次氯酸钠浸泡10~15min，再用无菌水冲洗3~5次。 【消毒后的外植体应及时按照无菌操作技术接种在适宜的培养基上】
园艺植物组织培养形考一-0003
园艺植物组织培养形考一 -0003 试卷总分：100 判断题(共26题,共52分) 开始说明： 结束说明： 1.(2分) 琼脂本身营养丰富，是一种由海藻中提取的高分子碳水化合物。 √ × 2.(2分) 根据培养方式植物组织培养可分为固体培养和液体培养，其中液体培养是最常用的方法。 √ × 3.(2分)
再分化是指脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化工程，重新形成各类组织和器官甚至形成完整植株的过程。 √ × 4.(2分) 一般来说，愈伤组织的增殖生长只发生在与琼脂接触的表面，而不与琼脂接触的一面极少细胞增殖，只是细胞分化形成紧密的组织块。 √ × 5.(2分) 继代培养（增殖培养）就是将初代培养得到的培养物转移到新的相同培养基上进行培养。 √ × 6.(2分) 天然有机复合物的成分比较复杂，大多含有氨基酸、激素等一些活性物质，因而能明显促进细胞和组织的增殖和分化。 √ × 7.(2分) 缓冲间是进入无菌操作区域的缓冲场地，缓冲间的门应该与无菌操作区域的门对开，使缓冲间形成空气对流，从而减少污染。
√ × 8.(2分) White培养基无机盐含量较低，常用于诱导芽的培养。 √ × 9.(2分) 超净工作台能将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成无尘无菌的超净空气层流，从而使超净工作台面保持无菌状态。 √ × 10.(2分) 胚状体就是离体培养条件下没有经过受精过程，但经过胚胎发育过程，所形成的胚的类似物的统称。 √ × 11.(2分) 植物组织培养技术可使再生作用在更大范围内表现出来，表现为种类增加及再生部位扩大。
多肉植物组织培养那点事
偶尔就能听到关于多肉植物组培的各种传言，组培苗是什么一回事？组培苗到底好不好？为什么有那么多组培苗?如何鉴别组培苗？等等关于多肉植物组培苗的那点事，你都可以在面这篇文章里看到（文字较多，耐心观看），lansemeiyan 什么是组培苗？ 组织培养技术，指代的是利用植物体的某个部分，通过无性营养繁殖来获得新苗（克隆苗）的过程，又叫植物克隆。从广义上来说，利用多肉植物的侧芽、叶插、根插、砍头进行繁殖，都属于组织培养范畴。组培这个概念，很多人一开始可能都误解了。 那么导致市场动荡的“组织培养”到底是指代什么呢？确切的说应该是“离体快速繁殖”，即组织培养技术的一个分支——离体快速繁殖，简称“快繁”。这门技术是从叶插、根插技术演变来的，我们用土壤做叶插和根插，“快繁”则是用人工合成的基质来做，这种人工基质看上去很像果冻，而容器也由花盆变更为玻璃瓶。这就是后来大家在电视上看到的植物组织培养工厂。 为什么在玻璃瓶里的培养基可以实现快速繁殖呢？原因在于优越的外环境和植物激素的作用。快繁实验室的温度、光照和湿度都是恒定的，“培养基”里含有足够的营养和强大的植物激素。这些激素可以按照人为意愿调整植物的生长状态，让它出根还是让它出芽（但这也取决与操作者的学术水平和经验，能够从容操作激素的人在国内是有限的）。 我们平时做叶插和砍头的时候，也会取巧的使用一些激素，其实往叶插和砍头株上滴加激素的行为和“快速繁殖”的性质和道理是一样的，所获得苗也是完全一样的。很多人并没有意识到这点，而觉得不同繁殖方式获得的苗性状会不同，其实差异只在于营养富集度，就是苗的饱满度而已，叶插的总是比砍头的弱一些，
性状呈现晚一些，这是所在部位的内源激素和营养导致的，但是基因组完全一致，不会出现性状漂移。只有嵌合性性状，比如斑锦，才可能在叶插和砍头之间存在“概率学”上的差异。 回头再说大众眼中的“组织培养”（实际上是离体快速繁殖），由于人为操控植物激素的动态变化，使得离体的植物组织可以按照人的意愿出芽，一个两个无数个，因为植物的无性繁殖被认为是无限的，所以在组织培养的“快速繁殖”模式中可以无限的扩增该品种种苗，这也是“危害”市场最致命的地方。不过，必须指出的是，组培苗的无限繁殖也是有成本的，不是像刘谦的魔术一样天上掉下来的，很多人认为组培无成本或低成本，一文不值等等言论，其实都是不了解组培。 如果想获得上万株的种苗，必须有专门的组织培养实验室或工厂，这个运行成本相当巨大，可以说一般的生产商是做不到的。迄今为止，大型的组培工厂都是ZF出资建立的，换句话说大多数搞组培苗生产的人，成本是国家掏腰包的。真正自己掏钱搞组培工厂，是玩不起的。 组培技术早在70年代就出现在欧美，广泛用于种苗繁育和小体型植物的生产。温度、光照、湿度、水、肥等的人工合成、调控技术的成熟，特别是高效植物补光灯的出现推动了组培快速发展。原来只能单层平面日光棚内养植的植物，现在可以在室内人造光环境中，使用多层立体组合栽培方式进行植物的繁育和生产。 “组织培养”（离体快速繁殖）到底好不好呢？ 快繁苗，由于几乎完全是激素调控获得的，这就导致一个问题，操控激素的人是否理解植物的特性、是否熟悉激素的理论和植物生理、是否有足够的经验来
2010-2014植物组织培养高考题汇编(含详解)汇总
1.（2014广东卷）（16分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下： 在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图17所示，请回答下列问题： ⑴选用新生营养芽为外植体的原因是，诱导外植体形成PLBs的过程称。 ⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在，，。 ⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题： ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs（2分）；细胞的脱分化（2分）（2）生长起始快（2分），快速生长时间较长（2分）；PLBs产量较高（2分）；（3）①灭菌、冷却（2分）；②75（2分）；③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大（3分） 【解析】（1）新生营养芽分裂能力强，全能性容易表达；根据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是光照有利于细胞增殖、叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物。（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA ②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取样5次，4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，因此每次取样需要记录15个样品中的数据，共需要测定样品数75 ③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的平均值最大时，所对应的ABA浓度和时间为最适。 2.（2014江苏卷）（9分）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题： （1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。 （2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如右图所示。细胞干重在12d后下降的原因有；培养液中蔗糖的作用是、。 （3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经处理，会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常采用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是、。 （4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有（填序号）。 ①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条件下培养
植物组织培养MS培养基配方
植物组织培养MS培养基配方 （一）母液配制与保存 配制培养基时，如果每次配制都要按着杨成分表依次称量，既费时，又增加了多次称量误差。为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍，甚至1000倍的浓缩贮备液，即母液。母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用，并在配制较多数量的培养基时，降低工作强度，也提高试验的精度。 基本培养基的母液有四种：大量元素（浓缩20倍），微量元素（浓缩100倍），铁盐（浓缩200倍），除蔗糖之外的有机物质（浓缩100倍） 1大量元素 配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保存。 表1大量元素母液（配1L20倍的母液） 序号成分配方浓度/（mg.L-1）称取量/mg 配1mL培养基吸取 量/mL 1 硝酸铵NH4NO3 1650 33000 50 2 硝酸钾KNO 3 1900 38000 3 磷酸二氢钾KH2PO 4 170 3400 4 七水合硫酸镁MgSO4.7H2O 370 7400 5 氯化钙无水CaCl2 440 6644 2微量元素母液 在配制微量元素母液时，也应分别称量和分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容（表2），一般不会出现沉淀现象。倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保有存。 表2微量元素母液(配制1L100倍母液) 成分配方浓度/(mg.L-1) 称取量/mg 配制1L培养基吸取 量/mL 碘化钾KI 0．83 83 10 硫酸锰MnSO4.H2O 22．3 2230 硼酸H3BO3 6．2 620 硫酸锌ZnSO4.7H2O 8．6 860 钼酸钠Na2MoO4.2H2O 0．25 25 硫酸铜CuSO4.5H2O 0．025 2．5 氯化钴CoCl2.6H2O 0．025 2．5 3铁盐母液 由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用，只有基螯合物才能被植物吸收利用，因此需要单独配成螯合物母液表3）。 配制方法：称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠，分别用450ml的去离子水溶解，分别适当加热不停搅拌，分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中，将两种溶液混合在一起，最后用去离子水定溶于1000mL，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签和做好记录后放入冰箱内保存。
植物组织培养实验报告
如对你有帮助，请购买下载打赏，谢谢！ 院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分
园艺植物组织培养形考一-0002-浙江电大辅导资料
请认真阅读完再下载：预览的题目顺序完全和您自己的试题顺序完全相同再下载！ 园艺植物组织培养形考一-0002 浙江广播电视大学形成性测评系统课程代码：3305830 参考资料 试卷总分：100 判断题(共26题,共52分) 1.(2分) 缓冲间是进入无菌操作区域的缓冲场地，缓冲间的门应该与无菌操作区域的门对开，使缓冲间形成空气对流，从而减少污染。 √ × 参考答案：× 2.(2分) 愈伤组织的器官发生各种途径中，最常见的、也是多数植物具有的是“先形成芽，再在芽伸长后，在其茎的基部长出根，从而形成小植株”的再生途径。 √ × 参考答案：√ 3.(2分) 植物组织培养具有生长周期长、繁殖率较低的特点，所以短期内推广难度较大。 √ × 参考答案：× 4.(2分) 已污染的玻璃器皿需经124℃灭菌消毒处理。 √ × 参考答案：√ 5.(2分) 配制母液所需药品应采用等级较高的化学纯或分析纯试剂。 √ × 参考答案：√ 6.(2分) 相比其他培养基，MS培养基的硝酸盐含量较低。 √ × 参考答案：× 7.(2分) 胚状体就是离体培养条件下没有经过受精过程，但经过胚胎发育过程，所形成的胚的类似物的统称。 √ × 参考答案：√ 8.(2分)
Gautheret、White、Nobecourt一起被誉为组织培养学科的奠基人。 √ × 参考答案：√ 9.(2分) 琼脂本身营养丰富，是一种由海藻中提取的高分子碳水化合物。 √ × 参考答案：× 10.(2分) 天然有机复合物的成分比较复杂，大多含有氨基酸、激素等一些活性物质，因而能明显促进细胞和组织的增殖和分化。 √ × 参考答案：√ 11.(2分) 人工配制培养基的主要成分包括：水分、无机盐、有机物、植物激素、培养物的支持材料五大类。 √ × 参考答案：√ 12.(2分) 胚状体发生途径的有性后代遗传性更接近母体植株. √ × 参考答案：√ 13.(2分) 脱毒培养和器官离体快繁是植物组织培养中应用规模较小、经济效益较差的技术应用。 √ × 参考答案：× 14.(2分) 用量筒定容时，应平视溶液凹面与刻度线卡齐。 √ × 参考答案：√ 15.(2分) 在组培实验室装修时，尤其注意灭菌、洗涤区域的地面应耐湿防滑、并排水良好。 √ × 参考答案：√ 16.(2分) 根据培养方式植物组织培养可分为固体培养和液体培养，其中液体培养是最常用的方法。√
植物组织培养的培养基
植物组织培养的培养基中，需要添加糖类作为碳源物质，因此糖类是影响植物组织培养成功与否的关键之一。高中生物教材中明确指出，植物组织培养的培养基中添加的糖类是蔗糖。那么为什么不添加葡萄糖呢？很多资料上解释为蔗糖较葡萄糖便宜，易被植物细胞吸收。其实并非如此。之所以以蔗糖作为碳源，主要有三个方面的原因： （1）同样作为碳源为植物细胞提供能量来源，蔗糖较葡萄糖能更好地调节培养基内的渗透压。配制相同质量分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，因此若采用葡萄糖作为碳源，易使植物细胞脱水而生长不良。同时，植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率，所以蔗糖形成的渗透压可相对长期的保持稳定。 （2）植物组织培养过程中，要时刻注意防止培养基受到微生物的污染。微生物生长所需的碳源最常用的是葡萄糖，一般很少利用蔗糖。因此，采用蔗糖作为培养基的碳源，可一定程度上减少微生物的污染。 （3）诱导作用。在培养基成分中，增加生长素的浓度，导致木质部形成，增加蔗糖浓度则导致韧皮部形成。当生长素水平恒定时，2％蔗糖使分化出的全部是木质部，4％蔗糖使分化出的几乎全部是韧皮部，3％蔗糖则可以分化出两者。所以，生长素和蔗糖浓度决定愈伤组织中维管束的类型与数量。因此，在植物组培中要选用蔗糖而不选用葡萄糖。 通过细胞膜内外的液体的浓度差来调节 当细胞膜内的浓度小于细胞膜外的时候蔗糖救能进入细胞中了 植物细胞培养中最常用的培养基的碳源是蔗糖，已知葡萄糖和果糖也能使某些植物生长得很好。植物细胞可以分解蔗糖，蔗糖是由一分子果糖和一分子葡萄糖组成的，蔗糖是可以直接进入细胞的，蔗糖跨质膜从质外体进入细胞是由载体介导并需要消耗能量的质子-蔗糖共运输机制进行的，另外，植物能够利用的某些其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖等。葡萄糖更不稳定，培养基需添加葡萄糖一般都在灭菌后再兑换。实在要添加葡萄糖那么灭菌温度一般控制在108~110左右，120度灭出来的就有一定程度的碳化了。所以用蔗糖更简单 动物细胞只能吸收葡萄糖，二糖蔗糖是无法吸收的。 以蔗糖为植物培养基碳源有两个原因: 1.抑制杂菌生长.细菌等不能直接以蔗糖为碳源,故可起抑制其生长的作用 2.蔗糖被植物细胞利用机理目还无定论.主要有以下两个学说(1)植物细胞先以次级主动运输的方式在细胞内外形成质子梯度,然后蔗糖就会利用这个梯度被吸收进细胞. (2).植物的细胞壁中含有能分解蔗糖的相关酶,蔗糖先在细胞膜外被分解为单糖,然后这些单糖再以主动运输的方式进入细胞,从而被细胞利用.
植物组织培养实验参考答案9
植物组织培养实验复习题 一、名词解释 1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素，包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。 2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。 3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。 4、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官 5、细胞全能性：植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。 6、基础培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。 7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活，使酚类物被氧化成醌类物，可抑制其他酶活性，毒害外植体。 9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢，利用茎尖组培获得无病毒苗，来达到脱毒的目的。 10、不定芽：凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。 11、污染率：污染数除以接种数，再乘以100%。 12、诱导率：愈伤数除以未污染数，再乘以100%。 13、成活率：成活数除以未污染数，再乘以100%。 14、接种：将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。 15、消毒：消灭材料上的病菌（不损伤植物材料）。 16、灭菌：利用物理或化学的方法，达到组织培养所学的无菌环境。 17、母液：欲配培养液的浓缩液。 18、无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。 19、植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在无菌培养基上和人工控制的环境中，使其生长、分化、增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。 20快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式 21、继代培养：继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。 22、生根培养：将长到一定长度的微枝（>10mm）转移到生根培养基上培养。 23、玻璃化现象：试管苗的茎叶变成透明水渍状，生长畸形，增殖系数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其根系质量极差，移栽成活率极低。 24、暗培养： 25、液体培养：将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。 26、脱分化：一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。 27、分化：由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。 28、热处理脱毒：利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。 1 / 6 29、微尖嫁接技术：把极小（<0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌
园艺植物组培育苗技术分析
园艺植物组培育苗技术分析 发表时间：2018-11-14T16:23:14.937Z 来源：《建筑学研究前沿》2018年第22期作者：邓伟斌 [导读] 组培育苗，即组织培养育苗技术，其属于一种典型的生物技术，其应用范围很广。 广东美景园林建设有限公司 516000 摘要：在社会发展进程中，园林工程成为重要的项目之一，旨在为改善当前城市环境污染严重的现状，净化城市空气，为人们提供一个优质的生活环境，是促进城市可持续发展的重要举措。园林工程建设体系中，组培育苗技术不断衍生，其是园艺植物培育的一种重要途径，该种技术所产生的培育效果甚为理想。对此，在此次研究中，我们以广东地区园艺植物组培育苗技术为对象展开系统化的分析，旨在提高城市园林植物培育水平。 关键词：园艺植物；组培育苗；技术 组培育苗，即组织培养育苗技术，其属于一种典型的生物技术，其应用范围很广，其所产生的价值意义是不可替代的，其是种苗工厂化、规划化生产的主要方式。现如今，植物脱毒技术、离体快繁技术等逐步被应用到草莓、马铃薯与兰花等植物育苗之中，获取了理想的培育效果，这对于我国苗木快繁与肿瘤脱毒而言意义重大。以下我们就组织培育苗产业的基本发展现状展开分析。 一、组织育苗产业发展现状分析 关于组培育苗的研究，最早的研究起源于美国。1943年，美国的专家与学者展开了系列的分析与研究，从中发现，植物生长点周边的病毒浓度比较低，甚至很多区域根本没有病毒[1]。在此基础上，专家们利用植物的茎尖开展组织培养，获得了脱病毒苗，主要是利用脱毒苗来实现快速繁殖，进而生产出大量的脱毒种苗。1958年，我国的相关专家彭爱红等展开了研究，提出胡萝卜的韧皮部细胞培养得到了完整植株，且该植株可以开花结果，进而使得该技术逐步被应用到农业生产领域，其推广效果甚佳。 在我国，关于无病毒种苗与植物快速繁殖的研究最早开始于上世纪70年代。鉴于组织培养技术的繁殖系数比较大，且繁殖速度比较快，以获得无病毒性的植株，且获得了极高的经济效益。如今，组培育苗技术在我国得到了广泛的应用，其在育种、育苗等方面均取得了理想的效果。兰花是我国十大名花之一，其在广东地区的种植规模很大，广西省百色市乐业县与那坡县、广东省韶关市翁源县、广东省佛山市顺德区等被誉为“中国兰花之乡”。组培育苗技术在兰花种苗生产中的应用是最为典型的。1960年，茎尖组培技术研发并运用成功，获得了无病毒性的兰花组培苗，主要是借助原球茎继代培养方式来达到兰花试管苗生产的效果。目前，我国的组培技术正在逐步完善，通过应用组培技术，使得广东地区的兰花种植技术呈现商品化与规模化的态势发展，进而产生了一种新格局。我国在离体快繁育苗技术方面的研发起步比较晚，可是，发展速度还是很快的，特别是广东、广西与海南等地。当前，广东地区已然对100多种花卉观叶植物展开科学的组培，年产苗木高达500万株，其发展势头比较好。 二、园艺植物组培育苗技术 1、光自养组织培养技术 光自养组织培养技术即植物无糖组织快繁技术，其主要是在组培时，将CO2输入其中，将其作为重要的糖源，旨在为植物体生长提供所需的碳资源，经过系列的生长发育，再加之环境内各项因子的管控，能确保试管苗从兼养型逐步向自养型方向转变，进而衍生出一种生产种苗速度更快、种苗更优质的新型植物快繁技术。和传统的组培技术相比，无糖组织培养主要是将CO2作为重要的碳源，能减少糖类物质应用而产生的微生物污染问题，能实现对污染率的有效控制[2]。此外，结合植物的实际需要，需强化对组培微环境的合理化控制，其在相应条件下可以为植物的生长提供良好的生长环境，可提高植物生长速率，以确保植物可健康而茁壮的生长。同时，光自养组培主要是把多孔型无机材料视为重要的培养基质，如石沙子、纤维、成型岩棉等，这些材料不但成本低，也具有良好的透气性。据肖玉兰等专家的研究，应用此种组培技术，可大大提高小植株的生根质量。然而，在实际操作中，无糖组织培养微繁殖的试验与研究虽然成功，但是之其需要注意的问题也比较多。例如，相关人员应加深对组培苗生长环境、培养机制、生理特点等的认知，只有掌握各项条件要素，才能为无糖组织培养提供相应的参考。另外，植物材料限制问题突出。其和普通微繁殖相比，无糖组织培养要求外植体必须要具备高质量的茎和芽，若想更好的开展光合作用，促进植物健康而茁壮的成长，要求植株要具备足够的叶面积或携带子叶的体细胞胚亦可。 2、开放组织培养技术 开放组培是利用抗菌剂来代替高压灭菌与超净工作台，运用塑料杯来代替以往的组培瓶，让整个操作脱离以往组培严格无菌的环境，可在自然而开放的有菌条件下开展组织培养工作。开放组培无需作高压灭菌与超净工作台处理，仅仅是在培养基内加入抑菌剂，从而达到抑制病菌生长与蔓延的效果[3]。应用此种组培方法，其优势在于对整个组培操作过程进行简化，大大降低组培成本。然而，在实际应用过程中也遭遇了相应的问题，如植物类型不同，其应如何选择抗菌素、抗生素与防腐剂组合以及抗生素浓度、浸泡时间等问题，这些均需要通过一定的试验才可完成。 3、非试管苗快繁技术 非试管苗快繁技术主要是利用生物技术原理，将计算机控制技术作为重要的载体来打造新型育苗技术。借助计算机平台能够精确的模拟环境各要素，这为离体植物生长发育提供合适的营养、光、水、温等环境，能促进种苗健康而茁壮的成长，其为此种技术的核心点，其和以往扦插嫁接技术与新型组织培养技术具有共同之处，但是也存在着一定的差距。此种技术对果树育苗意义深远，特别是对樱桃、杏、梅、李等难以生根的果树效果明显。经过多年研究，以往的组培技术型在果树生根培养和炼苗等技术阶段存在着严重障碍。尽管很多果树品种可以完成芽增殖与培养工作，但是，仍旧无法克服生根难的问题。非试管快繁技术主要是在全光开放环境下取代了试管环境，运用蛭石、珍珠岩等透气、疏松与不含糖的无机基质[4]，使用物理灭菌方式来替代以往的灭菌方法，借助叶片自身光合作用来启动生根基因，进而达到快速成苗的效果。此种技术主要是和计算机的环控技术进行有效的结合，运用离体材料的生根与光合作用来模拟最佳环境，进而满足光合自养过程的最优化。 结束语 综上所述，为打造更为和谐、健康的城市环境，政府部门必须重视园林工程建设，重视对先进园艺植物组培育苗技术的应用，从而培育出更为优质的植物苗，进而提高园艺植物组培水平。在此次研究中，结合广东地区发展实况，笔者针对园艺植物组培育苗技术的研究进