实验1-常规生化实验仪器的使用及基本操作
生物化学与分子生物学实验技术
实验安全与实验基本操作
2实验室安全规则
3实验室安全事故案例
●1995年9月香港科技大学化学系大四学生梁同学因吸入别的同学泼洒的酸
酐而不治身亡。
●1997年香港科技大学物理系访问学者因未按规定使用通风橱造成他人肺部
伤害而永不被香港各大学录用。
4推行实验室安全规则的目的
1.为了达到研究所研究学习安全之目的。
2.为了满足人性安全感的基本需要。
3.为了人性的尊严─生命是无价的。
4.减少工作中产生灾害，确保全教职工和学生之安全及健康。
5. 保护大家共同的环境。
5安全事故原因分类分析
天灾
占2％
凡不知、不顾、不理、不能、粗心、迟钝、疲劳、失检、情绪各种内在外在的行为
不安全行为
人为因素
占98%
工作场所中，工作环境、设备设施对人所产生之危险因素
不安全环境
6专业性实验室安全工作守则
●化学药品的操作
●放射性物质（另有专门培训）
●废料处理
●紫外线的接触
●化学药品溢泼的处理
7实验室常用化学试剂的使用安全
8二甲苯
●无色液体，有芳香气味，易挥发。用来制造、染料、塑料和药物。属低毒类，
对皮肤和黏膜有刺激作用，高浓度有麻醉作用。神经系统会受损害，还会使肾和肝受时性损伤。
●眼毒性：蒸气会刺激眼睛，液体导致严重刺激，发红肿胀和灼伤。通常影响
是暂时性的。皮肤毒性：产生灼伤感、干燥。可以用微温的缓慢流水冲洗至少20分钟，用无摩擦性的肥皂从皮肤上洗去二甲苯。
●易燃，有爆炸危险。属于甲类防火危险物质。用二氧化碳或干粉或泡沫灭火
剂，不宜用水。
9三氯甲烷
●无色透明易挥发液体，有特殊的香甜气味。沸点：61.2℃，医药上用作麻醉
剂。也用作萃取剂和溶剂。
●有很强的麻醉作用，在光的作用下，能被空气中的氧反应生成氯化氢和剧毒
的光气。通常加入1—2%乙醇，使生成的光气与乙醇作用而生成碳酸乙酯，以消除其毒性。
●吸入高浓度蒸汽时，开始刺激眼、口腔、鼻孔粘摸，发生流泪、感觉麻醉、
呕吐、痉挛、直到昏睡、不省人事。
●在空气、水分和光的作用下，酸度增加，因而对金属有强烈的腐蚀性
10乙醚
●透明、无色、易挥发有芳香刺激性气味的液体。沸点：34.6℃；对人体有麻
醉性能。当吸入含量为3.5%时，30~40分钟就可失去知觉。
●人体过量吸入，会引起严重的急性中毒。呼气中带醚味，并出现呕吐、出汗、
喷嚏、咳嗽、头痛、记忆力减退、无力、兴奋。
●微溶于水，易溶于盐酸，能与醇、醚、石油醚、苯、氯仿等有机溶剂混溶。
应储存于阴凉、干燥、通风的低温库房内，库温最好控制在25℃以下。远离热源、火种，避免阳光直射。
●本品易燃。与强氧化剂反应能起火爆炸。在空气中与氧长期接触或受光照会
生成不稳定的过氧化物，受热能自行着火爆炸。着火时，可用干粉、泡沫、二氧化碳、沙土灭火。用水灭火无效，但可用水保持火场容器冷却。
11乙醇
●无色有酒味，易挥发的澄清液体。沸点78.5℃：用于溶剂、清洗剂、分析
试剂等。属微毒类，对眼睛黏膜有轻微刺激作用。
●乙醇可使皮肤发干，长期受大剂量作用时，可使神经系统、消化器官等发生
严重的器质性疾病。
●易燃，手热或遇明火有燃烧爆炸危险，燃烧时，发出兰色火焰。蒸气能与空
气形成爆炸性混合物，在火场中，受热的容器有爆炸的危险。着火时，用二氧化碳、雾状水、干粉、1211或抗泡沫灭火。用水冷却火场中的容器，驱散蒸气，赶出溢出液体，使其稀释成为不燃性混合物
12冰醋酸
●有酸性气味的无色透明液体，沸点：118.1℃。用于制造氯乙烯塑料、醋酐、
有机醋酸酯、醋酸盐（铅、铝、铜等）及醋酸纤维；也可用于染料、制药、罐头食品、食品防腐、色素生产等工业。
●属低毒类，可经消化道、呼吸道、皮肤吸收，对眼、皮肤和上呼吸道有刺激
作用。眼睛接触：引起眼睑水肿、结膜充血；皮肤接触：轻者出现红斑，重者出现化学灼伤，有水泡和疼痛。
●吸入：当空气中蒸气浓度不明时，应佩带有黄色色标滤毒盒（罐）的防毒面
具。使用时应有良好的通风条件和有效的防护用品，如有醋酸的泄露或溅污，应以碱液中和，然后用水冲洗，经稀释的污水排入废水系统。
13盐酸
●透明或黄色冒烟液体，蒸气有强烈刺激味。易溶于水，用于油井活化剂、矿
石还原剂，食品处理剂、清洁剂、锅炉除垢剂及化学中间体。
●对皮肤和黏膜有较强刺激腐蚀作用。眼睛接触：导致刺激、严重灼伤和失明。
皮肤接触：浓溶液（大于38%）导致严重灼伤。
●与强碱类（如氢氧化钠）起激烈反应，与硫化物、磷化物、氰化物、乙酯基
化合物、氟化物、硅化物和碳化物起反应，释放出易燃和有毒的气体，与氧化剂（如过氧化物）能起激烈反应。
14注意
●实验过程中产生的废气、废液、废渣大多数是有害的，必须经过处理才能排
放。少量有毒气体可以通过排风设备排出室外，被空气稀释。毒气量大时，必须处理后再排出。如氧化氮、二氧化硫等酸性气体用碱液吸收。可燃性有机废液可于燃烧炉中通氧气完全燃烧。
●大家在实验室里，接触到的化学试剂多半都有危害性，所以每个人都应该
注意保护自己，注意规范操作，同时对别人也是一种保护，而不能因为图省事或者别的什么原因而放松对安全的注意。
15实验误差
16二者区别
●误差：在正确测量的前提下，所测得的数值和真实值之间的差异。
●特点：不可避免
●原因：例如人的眼睛不能对量筒的刻度线观察得十分精准
●错误：不正确的结果
●特点：可以避免
原因：不遵守测量仪器的使用规则，或读取、记录测量结果时粗心等原因造成的。
17误差的种类
●绝对误差及相对误差
●系统误差：方法误差，仪器/试剂误差，操作误差
●随机误差
181.绝对误差（absolute error）：
绝对误差是测量值与真实值之差。
δ= x?μ
(δ：绝对误差；x：测量值；μ：真实值）
绝对误差是以测量值的单位为单位，可以是正值，也可以是负值。测量值越接近真实值，绝对误差越小。
真实值是一个可以接近而不可达到的理论值。上式可以写成：
μ= x-δ
说明在已知绝对误差值的情况下，真实值可以从测定值减去绝对误差而求得。
19相对误差（relative error）：
反映误差在测量结果中所占的比例，分析工作中经常使用相对误差。相对误差是以真实值的大小为基础表示的误差值，没有单位。
δ/μ=(x-μ)/μ
通常以%，‰或 ppm表示。
例如：测定纯NaCl中Cl的百分含量为60.52%，而其真实含量（理论值）为60.66%。则
绝对误差=60.52%?60.66% = -0.14%
相对误差=[（60.52% ? 60.66%） / 60.66% ]×1000 ‰ = -2.3 ‰
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如果不知道真实值，而知道绝对误差值，则相对误差也可以表示为：
相对误差 = δ× 100%
x
例如：用分析天平称两个重量，一个是0.0021g，另一个是0.5432g，两个重量的绝对误差都是0.0001g，可是相对误差却大不相同，一个是（1/21 ）×100%，另一个是（1/5432 ）×100%。
可见，由于两个被测组分含量高低不同，即使绝对误差相同，相对误差也不同。对高含量组分测定的相对误差应当要小些，低含量组分测定的相对误差要求允许大些。
例如：用重量法和滴定法测量样品主要成分，相对误差需要达到千分之一，而用比色法测定样品重微量成分时，相对误差只要求达到百分之几即可。
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2. 系统误差
系统误差（systematic error）也叫“可定误差”，是由某种确定的原因引起的，
一般有固定的方向（正或负）和大小，重复测定时重复出现。根据系统误差的来源，可分为：
（1）方法误差
方法误差是由于不适当的实验设计或所选方法不恰当所引起的，通常影响较大。
（2）仪器或试剂误差
是由于仪器未经校准或试剂不合规格引起的。例如：天平砝码不准、容量仪器刻度不准或试剂不纯等，均能产生这种误差。
（3）操作误差
操作误差是由于分析者操作不符合要求引起的。
例如：分析者对滴定终点颜色改变的判断能力不够高，总是偏深或偏浅，便会产生误差。
由于系统误差是重复的以固定方向和大小出现，所以不能用增加平行测定次数的方法消除。
3.随机误差（accidental error ):
也称偶然误差，是由于偶然的原因，如测量条件、实验室温度、湿度等变动而未能得到控制的条件波动引起的，其大小和正负都不固定。
偶然误差的出现看起来似乎没有规律，但多次测量就会发现绝对值相同的正负偶然误差出现的概率大致相等，它们之间能完全或部分抵消。因此通过增加平行测定次数，就可以减免测定结果中这种误差。也可以通过统计学方法估计出偶然误差值，并在测定结果中予以正确表达。
系统误差和随机误差往往不能区分。比如：在观察滴定终点的颜色变化时，有人总是偏深，产生系统误差。但多次测定中偏深程度不一样，又必然有随机误差。
4.提高分析准确度的方法
（1）选择恰当的分析方法
不同方法的准确度和灵敏度不同。重量分析法和容量分析法灵敏度虽然不高，但对常量组分的测定可以获得比较准确的结果，一般相对误差不超过千分之几。但对于微量和痕量组分的分析，常常做不出来，谈不上精确度。
仪器分析法对测定常量组分无法准确，但对测定微量和痕量组分灵敏度很高，尽管相对误差较大，但绝对误差不大，能符合准确度的要求。
总之，必须根据分析对象，样品情况以及对分析结果的要求，选择恰当的分析方法。
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（2）减小测量误差
为了保证分析结果的准确度，必须尽量减小各步的测量误差。
例如：一般分析天平的称量误差为+0.0001g，用减重法称量两次，可能引起的最大误差是+0.0002g，为了使称量的相对误差小于0.1%，取样量就不能小于0.2g。
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（3）消除测量中的系统误差
A、校准仪器：对砝码、滴定管和移液管进行校准。
B、做对照实验：用含量已知的标准试样或纯物质当样品进行分析，由分析
结果和其已知含量的差值，确定分析的误差。
C、做空白实验：在不加样品的情况下，以与样品相同的方法、步骤进行分析，把所得的结果作为空白值从样品分析结果中减去。这样可以消除由于试剂不纯或容器不符合要求所带进的误差。
27基本操作
28pH值的测定
测定溶液pH值通常有两种方法，最简便但较粗略的方法是用pH试纸，分为广泛和精密pH试纸两种。
广泛pH试纸的变色范围是pH=1-14、9-14等，只能粗略确定溶液的pH值。
精密pH试纸，可以较精确地测定溶液的pH值，其变色范围是2-3个pH单位，例如有pH=1.4-3.0、5.4-7.0、9.5-13.0等许多种，可根据待测溶液的酸、碱性选用某一范围的试纸。
29pH值的测定
测定方法：将试纸条剪成小块，用镊子夹一小块试纸，用玻璃棒蘸少许溶液与试纸接触，试纸变色后与色阶板对照，估读出所测pH值。切不可将试纸直接放入溶液中，以免污染样品溶液。
30离心机操作的注意事项
离心机是利用转子高速旋转产生离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。
离心机是生化实验教学和生化科研的重要精密设备，因其转速高，产生的离心力大，使用不当或缺乏定期的检修和保养，都可能发生严重事故，因此使用离心机必须严格遵守操作规程。
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离心操作的注意事项
1.使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围，每个离心机不同的转头有各自的允许差值，转头中绝对不能装载单数的管子，当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。
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离心操作的注意事项
2.离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。离心时不准开盖，不准用手停止转头。
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离心操作的注意事项
3.装载溶液时，要根据各种离心机的具体操作说明进行，根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀，而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。每次使用后，必须仔细检查转头，及时清洗、擦干，转头是离心机中须重点保护的部件，搬动时要小心，不能碰撞，避免造成伤痕，转头长时间不用时，要涂上一层上光腊保
护，严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管。
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移液器的使用
●
1 设定移液体积
l 从大体积调节到小体积时，为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可；
l 从小体积调节至大体积时，可先顺时针调至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证最佳的精确度。
2 装配移液器吸头
l 单道移液器，将移液端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可
用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是不可取的，这样操作会导致移液器部件因强烈撞击而松散，严重的情况会导致调节刻度的旋钮卡住。
l 多道移液器，将移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，前后稍许摇动上紧，吸头插入后略超过O型环即可。
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●养护：
1、如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物；
2、移液器使用完毕后，把移液器量程调至最大值，且将移液器垂直放置在
移液器架上；
3、根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用 60 ％的异丙醇消
毒，再用双
蒸水清洗并晾干；
4、避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准；
5、发现问题及时找专业人员处理。
☆注意事项
1、当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活
塞室腐蚀移液器活塞；
2、正确使用移液器吸液、排液，以达高精准度。尤其注意排液的 2) 、 3)
操作；
3、平时检查是否漏液的方法：
吸液后在液体中停 1-3 秒观察吸头内液面是否下降；如果液面下降首先检
查吸头是否有问题，如有问题更换吸头，更换吸头后液面仍下降说明活塞组件有问题，应找专业维修人员修理。
4、移液管操作
●移液管的手持方法吸液调零读数放液
●放液完后要移液管停留15秒或绕管壁旋转三圈。
只有取全液的时候移液管才能放空！
45操作细节
●移液前应当把洗耳球内的空气尽量排尽，把洗耳球口对准移液管后部在吸取
少量液体時要留心不要吸入空氣，以免污染洗耳球完成吸取後，盡快以手指代替洗耳球阻塞移液管。请用食指释放液体時，应把試管侧放，让试管协助液体由移液管排放出來。释放时時，不应強行把有关液体排出。因为会影响所量度之結果。當把液体由移液管释放出來時，由于水份子的附著力，會有部份液体依附在移液管的管尖中，這是正常現象。
生物化学常用缓冲液
1.基本概念
⑴ Bronsted-Lowry酸碱理论（酸碱质子理论）:
1923年由丹麦化学家J.N.Brφnsted和英国化学家T.M.Lowry同时提出了酸碱质子学说，认为凡能释放质子的分子或离子（如：H2O，HCl，NH4+，HSO4- 等）称为酸，凡能接受质子的分子或离子（如：H2O，NH3，Cl-等）称为碱。因此，一种酸释放质子后即成为碱，称为该酸的共轭碱，同样一种碱与质子结合后，形成对应的酸，称为该碱的共轭酸。
如盐酸在水中的解离：
HCl Cl- ＋H+
HCl是酸，Cl-是它的共轭碱。
pH = pKa+log{[质子受体]/[质子供体]}
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⑵缓冲体系的设计：
1960年，N.E.Good和他的同事们提出，适合生命科学研究使用的缓冲体系应具有以下特性：
① pKa值在6-8之间；
②在水中的溶解度高；
③不易穿透生物膜；
④盐效应小；
⑤离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小；
⑥不与金属离子生成复合物或沉淀；
⑦该缓冲剂化学稳定；
⑧紫外和可见光波长范围内光吸收小；
⑨易制得高纯度的盐。
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（二）生物化学常用缓冲液
⑴磷酸盐缓冲液：
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由於它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：
NaH2PO4： pKa1＝2.12， pKa2＝7.21
Na2HPO4： pKa1＝7.21， pKa2＝12.32
配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1-4，
配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6-8，
配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10-12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS（十二烷基硫酸钠）会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
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磷酸盐缓冲液的优点为：
①容易配制成各种浓度的缓冲液；
②适用的pH范围宽；
③pH受温度的影响小；
④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释十倍后pH的变化小于0.1。
其缺点为：
①易与常见的钙Ca++离子、镁Mg++离子以及重金属离子缔合生成沉淀；
②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
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⑵ Tris（三羟甲基氨基甲烷）缓冲液：
Tris缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多，有超过磷酸盐缓冲液的趋势，如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液，而很少再用磷酸盐。 Tris缓冲液的常用有效pH范围是在“中性”范围，例如：
Tris-HCl缓冲液： pH＝7.5-8.5
Tris-磷酸盐缓冲液： pH＝5.0-9.0
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Tris-HCl缓冲液的优点是：
①因为Tris的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；
②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
其缺点是：
①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；
②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，而37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃-4℃。
③易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。
④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
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⑶有机酸缓冲液：
这一类缓冲液多数是用羧酸与它们的盐配制而成，pH范围为酸性，即pH＝3.0-6.0，最常用的是甲酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸等。
有机酸缓冲液的缺点是：
①所有这些羧酸都是天然的代谢产物，因而对生化反应过程可能发生干扰作用；
②柠檬酸盐和琥珀酸盐可以和过渡金属离子（Fe3+、Zn++、Mg++等）结合而使缓冲液受到干扰；
③这类缓冲液易与Ca++离子结合，所以样品中有Ca++离子时，不能用这类缓冲液。
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⑷硼酸盐缓冲液：
常用的有效pH范围是：pH＝8.5-10.0，因而它是碱性范围内最常用的缓冲液，其优点是配制方便，只使用一种试剂，缺点是能与很多代谢产物形成络合物，尤其是能与糖类的羟基反应生成稳定的复合物而使缓冲液受到干扰。
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⑸氨基酸缓冲液：
此缓冲液使用的范围宽，可用于pH=2.0-11.0，例如最常用的有：
甘氨酸-HCl缓冲液：pH=2.0-5.0，
甘氨酸-NaOH缓冲液：pH=8.0-11.0，
甘氨酸-Tris缓冲液：pH=8.0-11.0，（广泛使用的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的电极缓冲液），
组氨酸缓冲液：pH=5.5-6.5，
此类缓冲体系的优点是：为细胞组份和各种提取液提供更接近的天然环境。
其缺点是：
①与羧酸盐和磷酸盐缓冲体系相似，也会干扰某些生物化学反应过程，如代谢过程等。
②试剂的价格较高。
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5.有效数字
有效数字是指分析工作中实际测到的数字，允许最后一个数字是可疑数，反映测量值的准确度，要与测量的方法相适应。
一般分析数据保留4位有效数字，保留的位数太多无实际意义，反而增加计算的麻烦。要注意0.0052的有效数字只有2位，3个0是用于定位的无效数字。
修约有效数字的原则是四舍六入五成双。如23.455±0.546修约为23.46±0.55， 28.445±0.675修约为28.44±0.68，要避免出现0.00002±0.00001之类的数字，或3658.2543±0.0058之类的数字。
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滤纸的使用
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6.每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。每一转头都要有一份使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用限时，则须按规定降速使用。
2.离心前必须仔细检查转头各孔内有无异物。
3.若要在低于室温的温度下离心时。转头在使用前应放置在冰箱或置于离心机的转头室内预冷。
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实验室常用仪器及其使用
实验室常用仪器及其使用 1.能区分和识别常用的仪器，了解化学实验常用仪器的主要用途 2.掌握常见反应器、加热仪器、计量仪器、分离仪器、干燥仪器的使用方法 3.能懂得选择合适的实验仪器进行实验，会绘制简单的仪器装置图 4.知道质谱仪、核磁共振仪、红外光谱仪等现代仪器在测定物质结构中的作用。 知识点1 反应器的使用方法 6.集气瓶
知识点2 计量仪器的使用方法 2.量筒 3.容量瓶 4.托盘天平 知识点3 加热、蒸发、蒸馏、结晶的仪器2.表面皿、蒸发皿
知识点4过滤、分离、注入液体的仪器 干燥管 干燥器 铁架台、 铁夹 试管夹 坩埚钳 二、质谱仪、核磁共振仪、红外光谱仪等现代仪器在测定物质结构中的作用 1.质谱仪 用途 。 2．核磁共振仪 用途 。 3．红外光谱仪
【例1】下列实验中所选用的仪器合理的是（） A. 用200mL量筒量取5.2mL稀硫酸 B. 用250mL容量瓶配制250mL0.2mol/L的氢氧化钠溶液 C. 用托盘天平称量11.7克氯化钠晶体 D. 用碱式滴定管量取25.1mL溴水 解析：这是一道考查称量仪器使用的题目。选用量筒时应注意选合适规格，量取5.2mL 稀硫酸要用10mL量筒，所以A不正确；滴定管量取液体时应精确到0.01mL，所以D不正确。 托盘天平可称量精确到0.1克，一般配制多大体积的溶液就选用多大体积的容量瓶。 答案：BC 【变式】准确量取25.00 mL高锰酸钾溶液，可选用的仪器是（ C ） A . 50 mL量筒 B. 10 mL量筒 C. 50 mL酸式滴定管 D. 50mL碱式滴定管【例2】一支40mL碱式滴定管注入苛性钠溶液后，液面正好在10mL刻度处，则苛性钠溶液体积为（） A . 10mL B. 大于10mL C. 30 mL D. 大于30 mL 解析：滴定管的0刻度线在上方，40mL刻度线下至尖嘴处仍有溶液，所以大于30 mL 答案：D 【变式】下列量器和温度计的刻度表示正确的是（CD） A.量筒的刻度值是由下向上增大，“0”刻度在下 B.250毫升容量瓶上一般刻有30℃250毫升的标记 C.滴定管的刻度值由上而下增大，“0”刻度在上 D.温度计的刻度是由下而上增大，“0”在有刻度标记区域 【例3】现有下列仪器或用品：①铁架台（含铁圈，各种铁夹）；②锥形瓶；③酸式滴定管与碱式滴定管；④烧杯（若干）；⑤玻璃棒；⑥胶头滴管；⑦天平（含砝码）；⑧滤纸；⑨量筒；⑩过滤漏斗。 （1）过滤时，应选用的上述仪器是（填编号）。 （2）配制一定物质的量浓度的溶液时，还缺少的仪器是。 （3）在中和滴定使用滴定管前，首先应。 解析这类试题的解题方法是首先看题目选项的具体操作。联想该操作的仪器、方法、注意事项等，对比题目中所给的仪器进行组合，看仪器是否完全具备进行某一项实验，这样才能得出正确结论，有时试题是给出一些仪器来完成某些实验操作，而所给的仪器不全，其解题方法与之类似，即通过联想完成。 答案（1）过滤所用的仪器有：铁架台、烧杯、玻璃棒、滤纸、过滤漏斗。 （2）配制一定物质的量浓度的仪器有：天平（含砝码）、容量瓶、烧杯、玻璃棒、胶头滴管。 （3）检查活塞是否漏水，在确保不漏水后方可使用。
八种常用生化实验步骤
实验一基因的PCR扩增技术 一、实验目的与原理简介 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）是体外克隆基因的重要方法，它可在几个小时内使模板分子扩增百万倍以上。因此能用于从微量样品中获得目的基因，同时完成了基因在体外的克隆，是分子生物学及基因工程中极为有用的研究手段。 常规PCR反用于已知DNA序列的扩增，具体可分为三个主要过程：一、变性。通过升高温度使DNA双链模板分子中氢断裂，形成单链DNA分子，温度为94℃，时间1min。二、复性。降低温度使DNA单链分子同引物结合。温度为55℃，时间1min。三、延深。升高温度，在DNA聚合酶最佳活性的条件下在引物3端加入dNTP，实现模板的扩增，温度为72℃，时间2min。同时第一步变性前要在94℃下预变性5分钟，使DNA双链完全解开。经过 25-35个循环之后，在72℃下继续延伸10分钟。 PCR反应包含的七种基本成分： 1）热稳定性DNA聚合酶：Taq DNA聚合酶是最常适用的酶，商品化Taq DNA酶的特异性活性约为80000单位/mg. 2）寡核苷酸引物：寡核苷酸引物的设计是影响PCR扩增反应的效率与特异性的关键因素。 3）脱氧核苷三磷酸（dNTP）：标准的PCR反应体系应包括4种等摩尔浓度的脱氧核苷三磷酸，即dATP、dTTP、dCTP和dGTP。每种dNTP的浓度一般在200-250μl之间，高浓度的dNTP对扩增反应会起抑制作用，可能是dNTP与Mg2+螯合有关。 4）二价阳离子：一般需要Mg2+来激活热稳定的DNA聚合酶，由于dNTP与寡聚核酸结Mg2+合，因而反应体系中阳离子的浓度一般要超过dNTP和引物来源的磷酸盐基团的摩尔浓度。Mg2+的最佳浓度为1.5mmol/L。 5）维持PH值的缓冲液：用Tris-Cl在室温将PCR缓冲液的PH值调至8.3-8.8之间，标准PCR缓冲液浓度在10mmol/L。在72℃温育时，反应体系的温度将下降1个多单位，致使缓冲液的PH值接近7.2。 6）一价阳离子：标准PCR缓冲液内含有50mmol/L的KCl，它对扩增大于500bp长度的DNA是有益的。 7）模板DNA：含有靶序列的模板DNA可以以单链或双链形式加入到PCR混合液中，闭环DNA的及增效率略低于线性DNA。 学习PCR反应的基本原理和基本技术。 了解引物设计的一般要求。 二、材料和试剂 10Х扩增缓冲液 4种dNTP贮存液（20mmol/L，PH 8.0） Tap DNA 聚合酶 5端引物（20μmol/L）及3端引物（20μmol/L） 模板DNA 琼脂糖凝胶 PCR仪（Bio-Rad公司）移液枪（0.5-10μL 5-50μL）枪头微量移液管 一、实验操作 1）按照以下次序，将各成分加到微量离子管内混合： 10Х扩增缓冲液2.5μl M g2+1.5μl 5端引物1μl
有机实验室常用仪器设备与使用
有机实验室常用仪器设备与使用 一、有机化学实验常用仪器、设备和应用范围 现将有机化学实验中所用的玻璃仪器、金属用具、电学仪器及一些其它设备分别介绍如下： 1、玻璃仪器 有机实验玻璃仪器(见图2.1、图2.2)，按其口塞是否标准及磨口，而分标准磨口仪器及普通仪器两类。标准磨口仪器由于可以相互连接，使用是既省时方便又严密安全，它将逐渐代替同类普通仪器。使用玻璃仪器皆应轻拿轻放。容易滑动的仪器(如圆底烧瓶)，不要重叠放置，以免打破。
图2.1普通玻璃仪器 除试管、烧杯等少数玻璃仪器外，一般都不能直接用火加热。锥形瓶不耐压，不能作减压用。厚壁玻璃器皿(如抽滤瓶)不耐热，故不能加热。广口容器(如烧杯)不能贮放易挥发的有机溶剂。带活塞的玻璃器皿用过洗净后，在活塞与磨口间应垫上纸片，以防粘住。如已粘住可在磨口四周涂上润滑剂或有机溶剂后用电吹风吹热风，或用水煮后再用木块轻敲塞子，使之松开。 此外，不能用温度计作搅拌棒用，也不能用来测量超过刻度范围的温度。温度计用
后要缓慢冷却不可立即用冷水冲洗以免炸裂。 有机化学实验，最好采用标准磨口的玻璃仪器。这种仪器可以和相同编号的磨口相互连接，即可免去配塞子及钻孔等手续，也能免去反应物或产物被软木塞或橡皮塞所玷污。标准磨口玻璃仪器口径的大小，通常用数字编号来表示，该数字是指塞(或橡皮塞)所玷污。标准磨口玻璃仪器口径的大小，通常用数字编号来表示，该数字是指磨口最大端直径的毫米整数。常用的有10，14，19，24，29，34，40，50等。有时也用两组数字来表示，另一组数字表示磨口的长度。例如14/30，表示此磨口直径最大处为14mm，磨口长度为30mm。相同编号的磨口、磨塞可以紧密连接。有时两个玻璃仪器，因磨口编号不同无法直接连接时，则可借助不同编号的磨口接头(或称大小头)[见图2.2(9)]使之连接。 图2.2 标准口玻璃仪器
生化实验报告资料
生物化学实验报告 姓名：吴瑞 学号： 3120016004 专业年级： 2012级临床医学（妇幼保健) 组别：第四实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心
一、实验室规则 1．实验前应认真预习实验指导，明确实验目的和要求，写出预实验报告。 2．进入实验室必须穿白大衣。严格遵守实验课纪律，不得无故迟到或早退。不得高声说话。严禁拿实验器具开玩笑。实验室内禁止吸烟、用餐。 3．严格按操作规程进行实验。实验过程中自己不能解决或决定的问题，切勿盲目处理，应及时请教指导老师。 4．严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用，对贵重的精密仪器必须先熟知使用方法，才能开始使用；仪器发生故障，应立即关闭电源并报告老师，不得擅自拆修。 5．取用试剂时必须“随开随盖”，“盖随瓶走”，即用毕立即盖好放回原处，切忌“张冠李戴”，避免污染。 6．爱护公物，节约水、电、试剂，遵守损坏仪器报告、登记、赔偿制度。 7．注意水、电、试剂的使用安全。使用易燃易爆物品时应远离火源。用试管加热时，管口不准对人。严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在实验台上。 8．废纸及其它固体废物严禁倒入水槽，应倒到垃圾桶内。废弃液体如为强酸强碱，必须事先用水稀释，方可倒入水槽内，并放水冲走。 9．以实事求是的科学态度如实记录实验结果，仔细分析，做出客观结论。实验失败，须认真查找原因，而不能任意涂改实验结果。实验完毕，认真书写实验报告，按时上交。 10．实验完毕，个人应将试剂、仪器器材摆放整齐，用过的玻璃器皿应刷洗干净归置好，方可离开实验室。值日生则要认真负责整个实验室的清洁和整理，保持实验整洁卫生。离开实验室前检查电源、水源和门窗的安全等，并严格执行值日生登记制度。
化学实验仪器、基本操作讲解
第一讲化学实验仪器、基本操作 考点一化学实验仪器的创新使用 1．漏斗的“一材多用” (1)组成过滤器进行过滤 (2)向酒精灯中添加酒精 (3)倒置使用，防止倒吸 2．广口瓶的“一材多用” (1)收集气体 ①若气体的密度大于空气的密度且不与空气中的成分反应，则气体应是 长进短出，即向上排空气法； ②若气体的密度小于空气的密度且不与空气中的成分反应，则气体应是 短进长出，即向下排空气法； ③排液体收集气体时，气体应从短管通入。 (2)洗气瓶：用于气体的除杂，如除去Cl2中的HCl。注意气体应是长进短出(如图A)。 (3)量气瓶：气体应从短管通入(如图B)。 (4)安全瓶——防倒吸装置(如图C)。 (5)贮气瓶——暂时保存气体(如图D)。 (6)用于监控气体流速(如图E) 广口瓶中盛有液体，从a端通入气体，根据液体中产生气泡的速率来监控通入气体的速率。 3．干燥管的“一材多用” (1)位置不同，作用不同 ①在整套实验装置的中间横放——干燥、吸收及检验装 置 a．干燥管内装有干燥剂，可用于干燥气体。 b．干燥管内盛有无水硫酸铜时，可用于水的检验。 c．可用于定量测定气体的质量。 ②在整套实验装置的最后横放——左吸右挡 既可以吸收多余的尾气，防止污染空气，又可以阻挡外界空气中的干扰气体(如CO2、水蒸气等)进入装置中，简记为“左吸右挡”。
(2)干燥管的创新使用 4.“多材一用” 5.化学实验安全的 创新设计 (1)防倒吸装置
(2)防堵塞安全装置 (3)防污染安全装置 ①实验室制取Cl2时，尾气的处理可采用b装置。 ②制取CO时，尾气处理可采用a、c装置。 ③制取H2时，尾气处理可采用a、c装置。 1．(2019·邢台模拟)硫酸亚铁铵[(NH4)2SO4·FeSO4·6H2O]又称摩尔盐，是常用的分析试剂，实验室用FeSO4和(NH4)2SO4两种溶液混合很容易得到摩尔盐晶体。为了确定产品中Fe2＋的含量，研究小组用KMnO4(酸化)溶液来滴定摩尔盐溶液中的Fe2＋。滴定时必须选用的仪器有() A．①④⑤⑥ B．②③⑦⑧ C．②④⑤⑥ D．④⑤⑥⑧ 2．(2019·安徽江南十校综合素质检测)下列有关实验操作的主要仪器、注意事项及应用举例都正确的是()
生物化学实验报告
实验一糖类的性质实验 （一）糖类的颜色反应 一、实验目的 1、了解糖类某些颜色反应的原理。 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、颜色反应 （一）α-萘酚反应 1、原理糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后 者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。 2、器材 试管及试管架，滴管 3、试剂 莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100 mL，贮于棕色瓶内。用前配制。 1％葡萄糖溶液100 mL 1％果糖溶液100 mL 1％蔗糖溶液100 mL 1％淀粉溶液100 mL ％糠醛溶液100 mL 浓硫酸 500 mL 4、实验操作 取5支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、％糠醛溶液各1 mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。倾斜试管，小心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL，慢慢立起试管，切勿摇动。 观察记录各管颜色。 （二）间苯二酚反应 1、原理 在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮醣的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。 2、器材 试管及试管架，滴管 3、试剂 塞氏试剂：％间苯二酚－盐酸溶液1000 mL，称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL 浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000 mL。 1％葡萄糖溶液100 mL 1％果糖溶液100 mL 1％蔗糖溶液100 mL 4、实验操作
初中化学实验常用仪器和基本操作
初中化学实验常用仪器与基本操作 一、化学实验常用仪器及使用: 分类名称图形主要用途使用时的注意事项 用于加热的仪器 试管 ①在常温或加热时用作少 量试剂的反应容器;②用于 少量物质的溶解或收集少 量气体或作简易气体发生 装置 ①加热前应擦干试管外壁,先预 热后加热,加热后不能骤冷;② 加热时,试管夹或铁夹应夹在试 管的中上部;③加热固体时,试 管口部要略向下倾斜;④加热液 体时,液体不能超过试管容积的 1/3,且管口应与桌面成45o角,试 管口不能对着自己或别人 蒸发皿 用于少量溶液的蒸发、浓 缩与结晶 ①可耐高温,能直接用火加热; ②热的蒸发皿应避免骤冷及被 溅上水,以防炸裂;③用完之后 立即清洗干净;④蒸发皿中的液 体不能超过其容积的2/3,注意 及时搅拌 烧杯 用作配制溶液与较大量试 剂的反应容器,也可用于加 热 ①加热时,应擦干烧杯外壁并放 在石棉网上,以使其均匀受热; ②溶解固体时,要轻轻搅拌 锥形瓶 滴定中的反应器,也可收集 液体,组装洗气瓶 加热要垫石棉网 圆底 烧瓶 用作加热或不加热条件下 较多液体参加的反应容器 加热要垫石棉网 平底 烧瓶 用作加热或不加热条件下 较多液体参加的反应容器 加热要垫石棉网 燃烧匙少量固体燃烧反应器 可以直接加热;硫磺等物燃烧实 验应在匙底垫少许石棉或细砂
加 热仪器酒精灯用于加热 ①添加酒精时,不得超过酒精灯 容积的2/3,也不能少于1/3;②严 禁用燃着的酒精灯去点燃另一 只酒精灯;③用酒精灯的外焰给 物质加热;④不加热时,应用灯 帽盖灭,不可用嘴吹灭 盛放物质的仪器细口瓶用于盛放液体试剂 不能用于加热; 广口瓶 用于盛放固体试剂,也可以 做洗气瓶 不能用于加热; 集气瓶 ①用作收集或贮存少量气 体;②用于有关气体的化学 反应 ①不能用于加热;②做物质在气 体里燃烧的实验时,如有高温固 体物质生成,应预先在瓶底铺一 薄层细沙或装入少量的水 滴瓶 用于吸取与滴加少量液体, 滴瓶用于盛放液体药品 ①滴液时,滴管应悬空放在容器 口上方,不要接触容器壁,以免 沾污滴管或造成试剂污染;②胶 头滴管用过后应立即洗净,再去 吸取其她药品;③取液后的滴管 应保持橡胶乳头在上,不要平放 或倒置,防止试液倒流,腐蚀橡 胶乳头 计量仪器托盘 天平 用于粗略称量物质的质量, 一般只能称准至0.1g ①称量前,将游码拨到标尺“0” 处,调节螺母调节零点;②称量 时,左盘放称量物,右盘放砝码, 不能称量热物质;③称量物需放 在纸、表面皿或烧杯中 量筒度量液体体积 ①不能加热;②不能用作反应容 器;③根据量取液体体积的多 少,选择适合的量筒;④读数时, 量筒必须放平,视线应与液体凹 液面的最低处保持水平 漏斗漏斗 用于过滤或向小口容器里 加液体 过滤时要放在三角架或铁架台 的铁圈上
九基本实验仪器的使用和基本实验方法
九基本实验仪器的使用和基本实验方法 命题趋势 一些基本仪器的原理、使用方法、注意事项和读数等，在近几年的高考试题中不断出现。长度和电学量的测量及相关仪器的使用是出题最频繁的知识点。如游标卡尺、螺旋测微器的读数在近十年的全国高考中就考了8次，往往是游标卡尺、螺旋测微器交替考查。电压表、电流表、欧姆表使用方法的考查几率则更高。另外，打点计时器、电阻箱、秒表的使用有时也出现。 高考中基本仪器的考察，用的比较多的题型是填空题和作图题，时而也有选择题。高考中常有连接电路实物图的题，这类题设置的目的就是考查电流表、电压表、滑动变阻器等器材的操作和使用方法。 关于实验方法的考查，预计是两种形式：一是以学过的分组或演示实验为背景，考查对实验方法的领悟情况；二是考查灵活运用学过的实验方法设计新的实验。 由于目前设计型实验是高考实验题的热点，而掌握一些有普遍意义的实验方法又是设计实验的基础，所以在复习已学过的实验时，有意识的、积极的提取、积累一些有价值的方法是很有意义的。 教学目标： 1．通过专题复习，掌握基本实验仪器的使用和基本实验方法，提高解答物理实验题的能力。 2．能根据要求灵活运用已学过的自然科学理论、实验方法和仪器，设计简单的实验方案并处理相关的实验问题 教学重点： 掌握基本实验仪器的使用和基本实验方法，，提高解答物理实验题的能力。 教学难点： 根据要求灵活运用已学过的自然科学理论、实验方法和仪器，设计简单的实验方案并处理相关的实验问题。 教学方法：讲练结合，计算机辅助教学 教学过程： 一、知识概要 （一）基本仪器的使用 基本仪器是指通用性强，在各种实验中经常用到的仪器。中学阶段，要求掌握的基本仪器如下：测量长度的仪器------刻度尺、游标卡尺、螺旋测微器 测量质量的仪器------天平 测量时间的仪器------打点计时器、秒表
生化实验报告模版
生物化学实验报告 姓名：郭玥 学号： 3120100021 专业年级： 2012级护理本科 组别：第8实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心
【实验报告第一部分（预习报告内容）：①实验原理、②实验材料（包括实验样品、主要试剂、主要仪器与器材）、③实验步骤（包括实验流程、操作步骤和注意事项）；评分（满分30分）：XX】 实验目的：1、掌握盐析法分离蛋白质的原理和基本方法 2、掌握凝胶层析法分离蛋白质的原理和基本方法 3、掌握离子交换层析法分离蛋白质的原理和基本方法 4、掌握醋酸纤维素薄膜电泳法的原理和基本方法 5、了解柱层析技术 实验原理：1、蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。 2、不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等都有所不同。利用这些性质的差别， 可分离纯化各种蛋白质。 3、盐析法：盐析法是在蛋白质溶液中，加入无机盐至一定浓度或达饱和状态，可 使蛋白质在水中溶解度降低，从而分离出来。蛋白质溶液中加入中性盐后，由 于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化膜减弱乃 至消失。中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷 大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，蛋白质分子之间聚集而沉淀。
4、离子交换层析:离子交换层析是指流动相中的离子和固定相上的离子进行可逆 的交换，利用化合物的电荷性质及电荷量不同进行分离。 5、醋酸纤维素薄膜电泳原理：血清中各种蛋白质的等电点不同，一般都低于pH7.4。 它们在pH8.6的缓冲液中均解离带负电荷，在电场中向正极移动。由于血清中 各种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不同，因而在醋酸纤维素薄膜上电 泳的速度也不同。因此可以将它们分离为清蛋白（Albumin)、α1-球蛋白、α 2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带。 实验材料：人混合血清葡聚糖凝胶（G-25)层析柱 DEAE纤维离子交换层析柱饱和硫酸铵溶液 醋酸铵缓冲溶液 20%磺基水杨酸 1%BaCl 溶液氨基黑染色液 2 漂洗液 pH8.6巴比妥缓冲溶液 电泳仪、电泳槽 实验流程：盐析（粗分离）→葡聚糖凝胶层析（脱盐）→DEAE纤维素离子交换层析（纯化）→醋酸纤维素薄膜电泳（纯度鉴定） 实验步骤： （一）盐析+凝胶柱层析除盐：
生物化学实验内容
《生物化学》实验教学大纲 课程类别：专业基础 适用专业：本科临床学专业 课程总学时：实验学时：32 实验指导书：生物化学与分子生物学实验教程 开课实验室名称：生化实验室 一、目的和任务 生物化学是一门在分子水平上研究生命现象的学科，也是一门重要的实验性较强的基础医学课程．随着医学的发展，该学科已渗透到医学的各个领域。生物化学实验技术已被广泛地应用于生命科学各个领域和医学实验的研究工作。生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分，它与理论教学既有联系，又是相对独立的组成部分，有其自身的规律和系统。我们根据国家教委对医学生物化学课程基本技能的要求，开设了大分子物质的常用定量分析法、酶活性分析、电泳法、层析技术、离心技术及临床生化，使学生对生物化学实验有一个比较系统和完整的概念，培养学生的基本技能和科学思维的形成，提高学生的动手能力。 二、基本要求 1.通过实验过程中的操作和观察来验证和巩固理论知识，加深学生对理论课内容的理解。 2.通过对实验现象的观察，逐步培养学生学会观察，比较，分析和综合各种现象的科学方法，培养学生独立思考和独立操作的能力。 3.通过对各类实验的操作和总结，培养学生严谨的科学态度。 4.进行本学科的基本技能的训练，使学生能够熟练各种基本实验方法和实验技术的操作。 三、考试方法及成绩评定方法 四、说明 实验教材及参考书： 1.揭克敏主编：生物化学与分子生物学实验教程（第2版）。科学出版社，2010 参考资料： 1..袁道强主编：生物化学实验（第1版）。化学工业出版社，2011 五、实验项目数据表
2）要求：0：必修1选修 3）类型：0：演示1：验证2：综合3：设计 4）每组人数：指教学实验项目中一次实验在每套仪器设备上完成实验项目的人数。 六、各实验项目教学大纲 实验一蛋白质的沉淀反应 【预习要求】 预习四个小实验的具体实验原理和操作内容。 【实验目的】 1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识； 2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。 【实验内容】 （一）蛋白质的盐折 1. 原理 大量中性盐类如硫酸铵((NH4)2SO4)、硫酸钠(Na2SO4)和氯化钠(NaCl)等加入到蛋白质溶液后，可引起蛋白质颗粒因失去水化膜和电荷而沉淀。各种蛋白质分子的颗粒大小和电荷数量不同，用不同浓度中性盐可使各种蛋白质分段沉淀。例如血清中的球蛋白可在半饱和硫酸铵溶液中沉淀。当硫酸铵浓度达到饱和时血清中的白蛋白使沉淀下来。盐析沉淀蛋白质时能保持蛋白质不变性，加水稀释降低盐浓度，能使沉淀的蛋白质重新溶解，并保持其生物活性。因此，利用盐析法可达到分离提纯蛋白质的目的。 2. 操作步骤 ①取小试管1支、加入5％鸡蛋清溶液20滴，饱和硫酸铵溶液20滴，充分摇匀后静置5min，记录结果。
实验1-常规生化实验仪器的使用及基本操作
生物化学与分子生物学实验技术 实验安全与实验基本操作 2实验室安全规则 3实验室安全事故案例 ●1995年9月香港科技大学化学系大四学生梁同学因吸入别的同学泼洒的酸 酐而不治身亡。 ●1997年香港科技大学物理系访问学者因未按规定使用通风橱造成他人肺部 伤害而永不被香港各大学录用。 4推行实验室安全规则的目的 1.为了达到研究所研究学习安全之目的。 2.为了满足人性安全感的基本需要。 3.为了人性的尊严─生命是无价的。 4.减少工作中产生灾害，确保全教职工和学生之安全及健康。 5. 保护大家共同的环境。 5安全事故原因分类分析 天灾 占2％ 凡不知、不顾、不理、不能、粗心、迟钝、疲劳、失检、情绪各种内在外在的行为 不安全行为 人为因素 占98% 工作场所中，工作环境、设备设施对人所产生之危险因素 不安全环境 6专业性实验室安全工作守则 ●化学药品的操作 ●放射性物质（另有专门培训） ●废料处理 ●紫外线的接触 ●化学药品溢泼的处理 7实验室常用化学试剂的使用安全 8二甲苯 ●无色液体，有芳香气味，易挥发。用来制造、染料、塑料和药物。属低毒类， 对皮肤和黏膜有刺激作用，高浓度有麻醉作用。神经系统会受损害，还会使肾和肝受时性损伤。
●眼毒性：蒸气会刺激眼睛，液体导致严重刺激，发红肿胀和灼伤。通常影响 是暂时性的。皮肤毒性：产生灼伤感、干燥。可以用微温的缓慢流水冲洗至少20分钟，用无摩擦性的肥皂从皮肤上洗去二甲苯。 ●易燃，有爆炸危险。属于甲类防火危险物质。用二氧化碳或干粉或泡沫灭火 剂，不宜用水。 9三氯甲烷 ●无色透明易挥发液体，有特殊的香甜气味。沸点：61.2℃，医药上用作麻醉 剂。也用作萃取剂和溶剂。 ●有很强的麻醉作用，在光的作用下，能被空气中的氧反应生成氯化氢和剧毒 的光气。通常加入1—2%乙醇，使生成的光气与乙醇作用而生成碳酸乙酯，以消除其毒性。 ●吸入高浓度蒸汽时，开始刺激眼、口腔、鼻孔粘摸，发生流泪、感觉麻醉、 呕吐、痉挛、直到昏睡、不省人事。 ●在空气、水分和光的作用下，酸度增加，因而对金属有强烈的腐蚀性 10乙醚 ●透明、无色、易挥发有芳香刺激性气味的液体。沸点：34.6℃；对人体有麻 醉性能。当吸入含量为3.5%时，30~40分钟就可失去知觉。 ●人体过量吸入，会引起严重的急性中毒。呼气中带醚味，并出现呕吐、出汗、 喷嚏、咳嗽、头痛、记忆力减退、无力、兴奋。 ●微溶于水，易溶于盐酸，能与醇、醚、石油醚、苯、氯仿等有机溶剂混溶。 应储存于阴凉、干燥、通风的低温库房内，库温最好控制在25℃以下。远离热源、火种，避免阳光直射。 ●本品易燃。与强氧化剂反应能起火爆炸。在空气中与氧长期接触或受光照会 生成不稳定的过氧化物，受热能自行着火爆炸。着火时，可用干粉、泡沫、二氧化碳、沙土灭火。用水灭火无效，但可用水保持火场容器冷却。 11乙醇 ●无色有酒味，易挥发的澄清液体。沸点78.5℃：用于溶剂、清洗剂、分析 试剂等。属微毒类，对眼睛黏膜有轻微刺激作用。 ●乙醇可使皮肤发干，长期受大剂量作用时，可使神经系统、消化器官等发生 严重的器质性疾病。 ●易燃，手热或遇明火有燃烧爆炸危险，燃烧时，发出兰色火焰。蒸气能与空 气形成爆炸性混合物，在火场中，受热的容器有爆炸的危险。着火时，用二氧化碳、雾状水、干粉、1211或抗泡沫灭火。用水冷却火场中的容器，驱散蒸气，赶出溢出液体，使其稀释成为不燃性混合物
初中化学实验仪器基本操作大全及对应经典习题
化学实验基本操作 化学实验操作及注意事项： 1. 药品的取用： （1）取用原则 ①“三不”原则：不摸——不用手接触药品。 不闻——不要把鼻孔凑到容器口直接闻药品气味。 不尝——不尝任何药品的味道。 ②节约原则：若没有说明用量时，液体一般取1~2ml，固体以盖满试管底部为宜。 ③处理原则：实验剩余药品既不能放回原瓶，也不能随便丢弃，要放在指定的容器内。 （2）取用方法 ①固体药品一般放在广口瓶中，固体药品的取用：用药匙取， 块状——用镊子夹取,一横二放三慢立 固体粉末——用纸槽送入,一斜二送三直立 ②液体药品的取用： a. 液体药品一般放在细口瓶（试剂瓶）中，取用时注意：瓶塞倒放，手握标签，瓶口紧挨试管口，回收一滴。 b. 少量液体药品可用滴管取用。一般做到“垂直悬空四不要”，即应在仪器的正上方垂直滴入，胶头滴管不要接触烧杯等仪器壁；不要平放或倒置，保持橡胶乳头在上；不要把滴管放在实验台或其它地方，以免沾污滴管；不能用未清洗的滴管再吸别的试剂，（但滴瓶上的滴管不能交叉使用，也不能冲洗）。 c. 定量取用——量筒读数时量筒必须放平稳，视线与量筒内液体凹底保持水平 注意：量筒的0刻度在下，读数时俯视——数值偏高（大） 仰视——数值偏低（小） 先将液体倾倒入量筒至接近刻度时，用滴管逐滴滴入至刻度值。 （3）浓酸、浓碱的使用 使用时注意保护眼睛，若不慎溅到皮肤、衣服或实验台上要采取相应的措施。 2. 托盘天平的使用： （1）构造：托盘、指针、标尺、平衡螺母、游码、分度盘。 （2）称量范围：砝码5~50g，精确称至0.1g（只用于粗略称量）。 （3）操作： ①称量前应把游码放在标尺的零刻度处，检查天平是否平衡。
化学实验室常用仪器及使用
知识精要?化学实验常用仪器及其使用 中学化学实验常用的仪器有20多种，对这些仪器应该在反复使用和训练规范操作的基础上，努力做到“三会”，即：会识别仪器的名称和能恰当地选用仪器(仪器的种类和必要的规格)；会正确地使用仪器进行实验；会画常用仪器的剖面图。 按照中学化学实验常用仪器的用途，大致可分为计量仪器、分离物质仪器、可加热的仪器、加热仪器、存放物质的仪器和其它仪器六类。现对这些仪器的名称、规格、用途和操作要领分述如下。 1．计量仪器 (1)量筒 量筒用于量度一定体积的液体。量筒的容积常见的有10mL、50mL、100mL等多种，其分度(最小刻度每格)依次为0.2mL、1mL、1mL。应该根据需要量取液体的体积大小，选用适当规格的量筒；量取液体时，以液面的弯月形最低点为准；量筒不能加热，不能作反应容器(量筒是有刻度的玻璃容器，温度的变化会使刻度不准确，且量筒受热可能引起炸裂，因此，量筒不能用做反应容器或用来稀释浓硫酸、溶解强碱，也不能量取过热的液体或用于加热等)。量取液体时，应先往量筒里注液体到接近刻度然后改用滴管，将液体逐滴加入，直到指定量。读数时量筒必须方平视线必须与量筒内液体凹液面最底处保持水平。俯视使读数偏高；仰视使读数偏低。如右图 (2)托盘天平
固体药品称量使用托盘天平，一般能精确到 0.1克。 使用步骤注意事项：①先调整零点；②称量物和砝码的位置为“左物右码”；③称量物不能直接放在托盘上，干燥的药品放在洁净的纸上称量，易潮解的和有腐蚀性的药品放在小烧杯等玻璃器皿里称量；④砝码用镊子夹取（“先大后小”）⑤称量结束后，应使游码归零，砝码放回砝码盒。 2．分离物质的仪器 漏斗漏斗内放滤纸用于过滤，也可通过漏斗向小口容器中转移液体。漏斗不能直接加热；过滤时应固定在铁架台的铁环上或固定在漏斗架上。 3．可加热的仪器 1)．试管用来盛放少量药品，常温或加热情况下进行少量试剂反应的容器，可用于制取或收集少量气体。 使用注意事项：①可直接加热,用试管夹夹在距试管口1/3管长处。 ②加热后不能骤冷，防止炸裂。③加热时试管口不能对着任何人；给固体加热时，试管要横放，管口略向下倾斜。 ④加入试管内的液体，不加热时不超过试管容积的l/2，加热时不超过l/3。 2)．烧杯用作配置溶液和加大试剂的反应容器，在常温或加热时使用。使用注意事项：①烧杯外壁擦干后方可用于加热，加热时应放置在石棉网上，使受热均匀，盛放液体的容量通常不超过容积的1/3。 ②溶解物质搅拌时，玻璃棒不能触及杯壁或杯底。
初中化学实验常用仪器和基本操作
初中化学实验常用仪器和基本操作 一、化学实验常用仪器及使用： 分类名称图形主要用途使用时的注意事项 用于加热的仪器 试管 ①在常温或加热时用作少 量试剂的反应容器；②用 于少量物质的溶解或收集 少量气体或作简易气体发 生装置 ①加热前应擦干试管外壁，先 预热后加热，加热后不能骤冷； ②加热时，试管夹或铁夹应夹 在试管的中上部；③加热固体 时，试管口部要略向下倾斜； ④加热液体时，液体不能超过 试管容积的1/3，且管口应与桌 面成45o角，试管口不能对着自 己或别人 蒸发皿 用于少量溶液的蒸发、浓 缩和结晶 ①可耐高温，能直接用火加热； ②热的蒸发皿应避免骤冷及被 溅上水，以防炸裂；③用完之 后立即清洗干净；④蒸发皿中 的液体不能超过其容积的2/3， 注意及时搅拌 烧杯 用作配制溶液和较大量试 剂的反应容器，也可用于 加热 ①加热时，应擦干烧杯外壁并 放在石棉网上，以使其均匀受 热；②溶解固体时，要轻轻搅 拌 锥形瓶 滴定中的反应器，也可收 集液体，组装洗气瓶 加热要垫石棉网 圆底 烧瓶 用作加热或不加热条件下 较多液体参加的反应容器 加热要垫石棉网 平底 烧瓶 用作加热或不加热条件下 较多液体参加的反应容器 加热要垫石棉网
燃烧匙少量固体燃烧反应器可以直接加热；硫磺等物燃烧实验应在匙底垫少许石棉或细砂 加 热仪器酒精灯用于加热 ①添加酒精时，不得超过酒精 灯容积的2/3，也不能少于1/3； ②严禁用燃着的酒精灯去点燃 另一只酒精灯；③用酒精灯的 外焰给物质加热；④不加热时， 应用灯帽盖灭，不可用嘴吹灭 盛放物质的仪器细口瓶用于盛放液体试剂 不能用于加热； 广口瓶 用于盛放固体试剂，也可 以做洗气瓶 不能用于加热； 集气瓶 ①用作收集或贮存少量气 体；②用于有关气体的化 学反应 ①不能用于加热；②做物质在 气体里燃烧的实验时，如有高 温固体物质生成，应预先在瓶 底铺一薄层细沙或装入少量的 水 滴瓶 用于吸取和滴加少量液 体，滴瓶用于盛放液体药 品 ①滴液时，滴管应悬空放在容 器口上方，不要接触容器壁， 以免沾污滴管或造成试剂污 染；②胶头滴管用过后应立即 洗净，再去吸取其他药品；③ 取液后的滴管应保持橡胶乳头 在上，不要平放或倒置，防止 试液倒流，腐蚀橡胶乳头 计 量仪器托盘 天平 用于粗略称量物质的质 量，一般只能称准至0.1g ①称量前，将游码拨到标尺“0” 处，调节螺母调节零点；②称 量时，左盘放称量物，右盘放 砝码，不能称量热物质；③称 量物需放在纸、表面皿或烧杯 中
药理学实验动物的基本操作实验心得
药理学实验动物的基本操 作实验心得 Revised by Jack on December 14,2020
这次是第一次药理学实验，我们学习了很多实验动物的基本操作方法。在做药理学实验之前我们就有做过人体解剖生理学实验，解剖过蟾蜍，小白鼠和家兔，这次的药理学实验更是一次对所学知识的巩固和深化，教给了我们很多在生理学实验中并没有学过的知识点。在刚做实验时，黄老师就向我们介绍了3R原则，即减少，优化，替代。动物是我们人类的朋友，首先我们应该尊重动物。它们用生命来换取人类的健康，推动着医学的进步，人类医学的发展离不开动物实验，动物为我们人类的健康做出了牺牲，我们应遵循“3R”原则。黄老师还通过视频给我们重点介绍了常用麻醉药及用法，实验动物的捉拿、麻醉、固定、给药、取血和处死方法。让我学到了很多实用性很强的东西。 之后便是分组自己做实验了，首先陈老师向我们讲解了小白鼠的标记方法，用中性品红表示十位数，苦味酸表示个位数，加上空白对照，一共可以标记一百支小白鼠。标记顺序为先左后右，从上至下。用苦味酸作为标记物的一个原因是它不容易被分解和弄掉，不会因为小鼠的活动而消失。其次是因为其有苦味，避免了被其他老鼠舔掉。之后讲解了小鼠的性别鉴定方法，除了书上说的方法外还可通过观察小鼠的乳房辨别。关于大鼠和家兔的捉持方法，大鼠在捉持前最好对其进行安抚，避免其急躁而咬人，而家兔则不可用手扯其双耳将其拉起。在给药方法方面，灌胃法要注意从口角插入口腔，用灌胃针抵住舌头，插入不可过深，一般入喉即可。腹腔注射时最好将其倒转，头部朝下，这样不容易刺入内脏。是否插入腹腔的判断方法：推注完后，轻微回抽，若有负压将注射器的推杆拉回，则已入腹腔。皮下注射时是否的入皮下的判断方法上同，皮下无负压，回抽不拉回。尾静脉注射时注意静脉在尾的两侧，不在上下，注射时用手捏住尾巴前段有利于暴露血管。 家兔的灌胃用木质开口器，使用时要想办法将其舌头压在开口器下，因为舌头会阻碍导尿管插入口腔，可以另外使用棉签配合，一边用棉签压住舌头，一边将开口器插入口腔。耳缘静脉注射时要注意选择小号针头，因家兔耳静脉较小，插入时应仔细谨慎。
生物化学实验的基本操作
一、玻璃仪器的使用及清洁 （一）玻璃仪器的洗涤及干燥 1、一般仪器：烧杯、试管、离心管等普通玻璃仪器，可直接用毛刷蘸餐洗净刷洗，然后用自来水冲洗，直至容器内不挂水珠即可。最后用少量蒸馏水冲洗内壁2－3次，倒置晾干即可。 2、容量分析仪器：容量瓶、滴定管及吸管等容量仪器，用后用自来水多次冲洗，如能清洁（壁不挂水珠），再用蒸馏水少量冲洗2~3次晾干即可备用。若仍不干净附有油污等，则须于干后放入铬酸洗液内浸泡数小时，然后倒净（或捞出）洗液，用自来水充分冲洗至水不显黄色后再冲几次，最后用少量蒸馏水冲洗2~3次晾干备用。 在做酶学实验时，对仪器的清洁要求更高，因如有极微量的污物（如重金属离子）即可导致整个实验失败。因此，必要时仪器经上述方法洗涤后，还需用稀盐酸或稀硝酸洗涤，以除去铬及其它金属离子，然后再用自来水、蒸馏水冲洗。生化实验室常用的洗液有以下几种：（1）铬酸洗液：为最常用的洗液，由重铬酸钾、粗硫酸及水配制而成，去污力强，清洗效果好。其配制方法有多种，可根据需要进行选择，常用的配方如下表。 重铬酸钾（ｇ）100 60 100 水（ｍｌ）750 300 200 粗硫酸（ｍｌ）250 460 800 清洁性能较弱较强（常用）最强 配制方法为：先将重铬酸钾溶于水，再慢慢加入浓硫酸。因配制过程产生大量热，容器需放入冷水中，边加硫酸边搅动混合。由于产热量很大，使用玻璃容器有破裂的危险，所以最好用耐高温的陶瓷或耐酸的搪瓷容器。洗液可多次反复使用，如效力变弱，可加入少量重铬酸钾及浓硫酸继续使用，但如果变为绿色，则不宜再用。 （2）10%尿素液：为蛋白质良好溶剂，帮适用于洗涤盛血的容器。 （3）草酸盐液：用于清洗过锰酸钾的痕迹。 （4）硝酸液：用1：1的硝酸水溶液，用于清洗CO2测定器及微量滴定管。 （5）乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Nａ2）液：5~10%的EDTA－Nａ2液可用于洗涤器皿内无机盐类。 玻璃仪器的干燥方法可根据不同仪器的种类而定。一般地说洗净后的玻璃仪器，如不急用应倒放在晾架上令其自然干燥。若有急用可放在烘烤箱中烤干，但容量玻璃仪器，如容量瓶、吸量管、滴定管以及烧结、结构复杂的玻璃仪器等，严禁烘烤。此类仪器，如急用可采用水泵抽气法干燥。 （二）常用玻璃仪器的使用 1、吸量管：吸量管是用来测量一定容积的液体，并把它从一个器皿转移至另一个器皿中的量器。常用的吸量管有以下几种： （1）刻度吸量管：刻度吸量管是多刻度吸量管，有0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0毫升等规格。吸量管刻度所标的数字有自上而下和自下而上两种，使用之前应仔细分辨。实验室所用之刻度吸管多属于刻度到尖端的吸管，所以要吹出尖端留存的液体。 （2）奥氏吸管：在量取粘度较大的液体如血液、血清等时，应当使用奥氏吸管。这种吸管也是单标的，并且在其下端有一个膨大部分。所以液体与吸管表面接触面积较小，当量取血液时，较他种吸管准确。奥氏吸管的容量包括遗留在尖端的液体，故在缓缓使液体流出后，再停留数秒钟，吹出最后一滴。在学生实验中常用的有1、2、5毫升等规格。
实验1基本测量仪器的使用
实验一基本测量仪器的使用 【实验目的】 1．熟悉米尺、游标卡尺、螺旋测微计、测量显微镜的构造、测量原理及使用方法，练习使用分析天平进行精密称衡； 2．学习有效数字和不确定度的计算，掌握误差理论与数据处理方法，熟悉精密称衡中的系统误差补正． 【实验仪器】 米尺、游标卡尺，螺旋测微计，测厚仪，分析天平，球体，圆柱等，金属块、玻璃块、有机被璃块等． 【实验原理】 一、米尺 “米”是国际公认的标准长度单位，历史上由保存在巴黎国际标准度量衡局的米原器二刻线间的长度决定。1983年第十七届国际计量大会通过的“米”的新定义为：1m是光在真空中于1/299792458s的时间内所传播的距离。 常用米尺（包括各种常用直尺）的分度值是1mm毫米,因此用米尺测量长度时可以读准到毫米级,估计到0.1毫米级(1/10毫米位)。 用米尺测量物体长度的要领是紧贴、对准、正视。米尺自身有一定的厚度，若不贴紧待测物，观测者从不同角度看去，将产生读数的差异，测量时应尽量减少视差。为避免端边磨损带来的误差，也可以不用零刻度线，而以某一刻度线（如1.00cm）作为测量起点，考虑到刻度的不均匀,可以不同刻度线为起点作多次测量而取其中平均值。 二、游标卡尺 （1）游标卡尺构造 游标卡尺的构造如图1-4所示，卡钳E和E'同刻有毫米的主尺A相连，游标框W上附有游标B以及卡钳F和F'，推动游标框W可使游标B连同卡钳F、F'沿主尺滑动．当两对钳口E与F，E'与F'紧靠时，游标的零点（即零刻度线）与主尺的零点相重合．用游标卡尺测定物体长度时，用卡钳E F或E'F'卡着被测物体，显然此时游标零点与主尺零点间距离恰好等于卡钳E、F间或卡钳E'、F'的距离，所以从游标零点在主尺上的位置，根据游标原理就可测出物体的长度（卡钳E'F'部分是用来测量物体的内部尺寸，如管的内径等）．图中螺钉C是用来固定油标框的，防止游标框在主尺上滑动以便于读数．
化学实验室基本操作
化学实验室基本操作 化学实验室基本操作2010-07-24 11：54一、常用仪器的主要用途和使用 方法 反应容器：试管、燃烧匙、烧杯、锥形瓶、集气瓶 存放容器：集气瓶(气体)、细口瓶(液体)、广口瓶(固体)、滴瓶(少量液体) 计量仪器：托盘天平(称固体质量)、量筒(量液体体积) 取用仪器：镊子(块状或较大颗粒)、药匙或纸槽(粉末或小颗粒)、胶头滴 管(少量液体) 夹持容器：试管夹、坩埚钳、铁架台(带铁圈、铁夹) 其它仪器：漏斗、长颈漏斗、分液漏斗、石棉网、玻璃棒、水槽、试管刷 可直接加热的：试管、蒸发皿、燃烧匙 能间接加热的(需垫石棉网)：烧杯、烧瓶、锥形瓶 加热仪器：酒精灯 1.烧杯圆柱状玻璃容器，杯口有便于倒出液体的嘴。 常用的有25mL、50mL、100 mL、250 mL、500 mL等 (1)用于大量物质的溶解和配制溶液或者进行化学反应的容器，也常用于接 过滤后的液体。 (2)实验时盛放液体的量不超过烧杯容积的1/2，以防搅拌时溅出。 (3)向烧杯中注入液体的时候，应沿烧杯内壁或玻璃棒引流。
(4)加热时要垫石棉网，也防受热不均而使其破裂。烧杯不能用作加热固体试剂。 2.试管 (1)用于少量物质的溶解或发生化学反应的仪器，也常用于制取或收集少量气体。 (2)振荡试管的方法：手持试管、手腕摆动。 3)实验时盛放液体量不能超过试管容积的1/3，以防振荡或加热时溅出。可直接加热。 (4)用试管夹或者铁夹固定时，要从试管底部向上套，夹持在试管的中上部(或离管口1/3的部位)。 3.蒸发皿 (1)用于溶液的蒸发、结晶 2)蒸发过程中需用玻璃棒不断搅拌，防止液体由于局部温度过高而飞溅 3)当溶液的量减少只有大量晶体析出时，停止加热并放至石棉网上，以防晶体飞溅 (4)取放蒸发皿，要用坩埚钳夹持 4.集气瓶 (1)用于收集气体、短时间贮存气体、用做物质在气体中的燃烧的反应器 (2)在收集气体或贮存气体时，要用毛玻璃片盖住瓶口。 5、试剂瓶 试剂瓶包括滴瓶、细口瓶、广口瓶等。分为无色和棕色两种。