选修一知识点(整理)

☆果酒和果醋和制作

（一）果酒制作

1．原理：菌种，属于核生物，新陈代谢类型，有氧时，进行呼吸，

能够。反应式为：；无氧时，进行呼吸，能够。反应式为：

。

2．条件：繁殖最适温度，酒精发酵一般控制在。

3．菌种来源：自然发酵

4．实验流程：挑选葡萄→冲洗→→→果酒（→→果醋）

5．实验结果分析与评价：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用来检验，反应呈现

色。先在试管中加入发酵液2ｍL，再滴入物质的量浓度为3mol/L3滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和

的溶液3滴，振荡试管，观察颜色

（二）果醋的制作：

1．原理：菌种：________，属于____核生物，新陈代谢类型为_________；当氧气、糖源都充

足时，它将葡萄汁中的分解成；当缺少糖源时，将变为，再将变为醋酸。醋酸生成反应式是

___________________ ________或。

2．条件：最适合温度为__________，需要充足的______________。

3．设计实验流程及操作步骤：

果酒制成以后，在发酵液中加入_________或醋曲，然后将装置转移至_________0C条件下发

酵，适时向发酵液中______________。如果没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶盖上，以减

少空气中尘土污染。

4、充气口的作用是在发酵时连接充气泵进行充气用的；

排气口是在发酵时用来排出的；出料口是用来。排气口要通过一个长而弯曲的

胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中的污染。开口向下的目的是有利于的

排出。使用该装置制酒时，应该充气口（开\关）；制醋时，应该应该充气口（开

\关），连接，输入。

疑难解答

（1）你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？

（2）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？

如：处理材料时要；要对、清洗干净，并用体积分数为的进行消毒；每次排气时只需瓶盖，不要瓶

盖等。

（3）制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～

35℃？

☆菊花的组织培养

一、基本概念

细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在、和上出现稳定性差异的过程。

离体的植物组织或细胞（叫做），在培养了一段时间以后，会通过，形成愈伤组织，愈伤组织的细胞排列

而无规则，是一种高度化的呈无定形状态的薄壁细胞。

由的植物组织或细胞产生的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的继续进行培

养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做。形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的

植物体。

二、影响植物组织培养的条件

材料：菊花组织培养一般选择作材料。

营养：离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制。常用的培养基是

激素：植物激素中和是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在存在的情况下，细胞分裂素的

作用呈现趋势。在培养基中需要添加和等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结

果。

环境条件：PH、温度、光等环境条件。

菊花的组织培养时，一般将pH控制在左右，温度控制在℃，并且每日用日光灯照射

三、操作流程

配制MS固体培养基：

·配制培养基：应加入的物质有、、、、和的母液，并用定容到1000毫升。在菊花组织培养中，可以不添

加，原因是菊花茎段组织培养比较。

·灭菌：采取的灭菌方法是。

·MS培养基中各种营养物质的作用是什么？与微生物培养基相比，MS培养基有哪些特点？

☆大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的；蔗糖提供，维持；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满

足离体植物细胞需求。

微生物培养基以营养为主，MS培养基则需提供大量营养。

外植体的消毒

菊花茎段用流水冲洗后可加少许，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右。用无菌吸水纸吸

干外植体表面的水分，放入体积分数为中摇动2~3次，持续6~7s，立即将外植体取出，在中清洗。取出

后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分，放入质量分数为溶液中1~2min。取出后，在中至少清洗3次，

漂洗消毒液。

接种：接种过程中插入外植体时端朝上，每个锥形瓶接种7～8个外植体。外植体接种与细菌接种相似，

操作步骤相同，而且都要求操作。

培养：应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度（）和光照（）

移栽：栽前应先打开培养瓶的，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植

到消过毒的等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。

☆外植体在培养过程中可能会被污染，原因有外植体；灭菌不彻底；接种中被污染；锥形瓶等。

☆微生物的实验室培养

·培养基：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质

基础。

·在液体培养基中加入后，制成固体培养基。

·虽然培养基的具体配方不同，但一般都含有、、、。

·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至，培养细菌是需要将pH调至，培养厌氧型微生物时则需要提供的条件

·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：

1、实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和。

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。

④实验操作时应避免已经处理的材料用具与周围的物品相接触。

无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？

答：。

·消毒与灭菌的区别

消毒方法常用消毒法，消毒法（对于一些不耐高温的液体）,还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、消毒。灭菌方法有灭菌、灭菌、灭菌。

灭菌方法：

①接种环、接种针、试管口等使用法；

②玻璃器皿、金属用具等使用法，灭菌器械是；

③培养基、无菌水等使用法，灭菌器械是。

④表面灭菌和空气灭菌等使用法，灭菌器械是。

·倒平板操作的讨论

1.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

答：通过灭菌，防止瓶口的污染培养基。

2.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

答：平板冷凝后，皿盖上会凝结，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的更好地挥发，又可以防止皿盖上的落入培养基，造成污染。

纯化大肠杆菌

（1）微生物接种的方法最常用的是法和法。

（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列操作和操作两步。

（4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：。

·平板划线操作的讨论

1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，上残留的菌种，使下一次划线时，上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐，以便得到单个细菌形成菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

答：以免温度太高，杀死。

3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

菌种的保存

（1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。将菌种接种到试管的培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入℃的冰箱中保藏。以后每个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。

（2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的瓶中，装入1mL后灭菌。将1mL培养的菌液转移到瓶中，与充分混匀后，放在℃的冷冻箱中保存。

疑难解答：怎样确定培养基制作是否合格的方法

☆土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

尿素：是一种重要的农业氮肥，尿素（能\不能）直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成

1、筛选菌株

（1）实验室中微生物的筛选应用的原理:人为提供有利于菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止微生物生长。

（2）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作。

2、统计菌落数目

稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理

当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在的平板进行计数，并取平均值。

统计的菌落数往往比活菌的实际数目，因此，统计结果一般用数而不是数来表示。

3、设置对照

设置对照的主要目的是排除实验组中因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。对照实验是指除了条件以外，其他条件都的实验，其作用是比照试验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是条件引起相应的结果。

☆血红蛋白的提取和分离

1．凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由构成的多孔球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

2．缓冲溶液的作用是。缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，例如：血浆的pH是，要在实验条件下准确模拟生物体内的过程，必须保持体外的pH与体内的基本一致。

3．电泳是指。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理：SDS所带负电荷的量大大蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖不同蛋白质间的差别，使电泳迁移率完全取决于

4．蛋白质的提取和分离一般分为四步：、、和。

5．样品处理

血液由和组成，其中红细胞最多。红细胞具有的特点。红细胞中有一种非常重要的蛋白质，其作用是，血红蛋白有个肽链组成，包括，其中每条肽链环绕一个，此基团可携带。血红蛋白因含有呈现红色。

红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时采用分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的倒入烧杯，再加入，缓慢搅拌，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。

血红蛋白的释放在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。

分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去之溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。

透析取1mL的血红蛋白溶液装入中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的中，透析12h。透析可以去除样品中的杂质，或用于更换样品的。

6．凝胶色谱操作

第一步要制作，第二步要，因为，所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时，不得有存在。因为气泡会，降低分离效果。第三步是。

☆胡萝卜素的提取

1.胡萝卜素：从中提取出来的色物质包括多种结构类似物。胡萝卜素是色结晶；化学性质比较,不溶于、微溶于、易溶于等有机溶剂

2.水溶性萃取剂有；水不溶性萃取剂

3.萃取胡萝卜素的有机溶剂要求：较高的、能充分溶解、不与混溶。还要考虑萃取、对人的、是否易燃、有机溶剂能否从产品中完全除去、会不会影响产品质量等。

4.影响萃取的因素：萃取剂的和；原料颗粒的、、；萃取的、等

5.提取胡萝卜素的实验流程:

6.提取胡萝卜素注意事项：1、干燥胡萝卜时，温度、时间会使胡萝卜素分解。2、采用加热，原因是都是易燃物，直接使用加热容易引起燃烧、爆炸。3、加热瓶口安装装置，目的是防止加热时挥发。

7.胡萝卜素的纸层析鉴定注意事项：1.预先干燥处理；2.点样时要、样点圆点尽量；3.滤纸筒的竖直边缘（能/不能）接触；4.石油醚易，注意层析容器要。