高效液相色谱法分析(苹果酸、柠檬酸)原始记录
高效液相色谱法分析（苹果酸、柠檬酸）原始记录
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高效液相色谱法的应用
高效液相色谱法在药物分析中的应用与进展 摘要：主要介绍了高效液相色谱法在药物鉴别、药物杂质检查、药物含量测定等方面具体应用以及展望了高效液相色谱法在药物分析中的应用前景。 关键词：高效液相色谱法；HPLC；药物分析；联用技术 Abstract:Mainly introduced the high performance liquid chromatography in drug discrimination, drug impurity test, determination of the content and concrete application and the prospect of the high performance liquid chromatography in pharmaceutical analysis application prospect. Keywords: high performance liquid chromatography，HPLC ,pharmaceutical analysis，hyphenated techniques 引言： 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。HPLC在国内和国外的药物分析领域的应用范围很广，发展速度也很快，尤其在我国，近十几年来HPLC方法越来越受到重视。HPLC 在药物的分析中的应用主要是鉴别、有关物质的检查、有效成分及含量的测定[1]；本文对高效液相色谱法（HPLC）技术在药物分析中的应用进行概述并展望其应用前景。 1 在药物分析中的应用 1.1 在药物鉴别中的应用 在HPLC 法中，药物组分的保留时间与其结构和性质有着直接的关系，不同的药物由于结构和性质的差异在色谱图上的出峰顺序不同，是定性的重要参数，
GB1903.18-2016食品营养强化剂 柠檬酸苹果酸钙
中华人民共和国国家标准 G B1903.18 2016 食品安全国家标准 食品营养强化剂柠檬酸苹果酸钙 2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
食品安全国家标准 食品营养强化剂柠檬酸苹果酸钙 1范围 本标准适用于以碳酸钙等钙源二柠檬酸二苹果酸为原料,按一定比例混合反应后经中和二沉淀二分离二过滤和干燥等工艺而制得的食品营养强化剂柠檬酸苹果酸钙三 2化学名称二分子式二结构式 2.1化学名称 柠檬酸苹果酸钙 2.2分子式 C a x(C6H5O7)y(C4H4O5)z四n H2O 2.3结构式 以C a6(C6H5O7)2(C4H4O5)3四5H2O为例,结构式如下: C a6(C6H5O7)2(C4H4O5)3四5H2O 3技术要求 3.1感官要求 感官要求应符合表1的规定三
表1感官要求 项目要求检验方法 色泽白色 状态粉末结晶取适量试样置于清洁二干燥的白瓷盘中,在自然光线下,观察其色泽和状态 3.2理化指标 理化指标应符合表2的规定三 表2理化指标 项目指标检验方法柠檬酸苹果酸钙含量(C a,干基计),w/%20~26附录A中A.4 p H(100g/L)5~8附录A中A.5干燥失重,w/%?10附录A中A.6盐酸不溶物,w/%?0.2附录A中A.7溶解度,w/%?80附录A中A.8氟化物(以F计)/(m g/k g)?50G B/T5009.18重金属(以P b计)/(m g/k g)?10G B5009.74铅(P b)/(m g/k g)?2.0G B5009.12总砷(以A s计)/(m g/k g)?2.0G B5009.11
苹果酸
苹果酸有L一苹果酸、D－苹果酸和DL-苹果酸3种异构体。天然存在的苹果酸都是L型的，几乎存在于一切果实中，以仁果类中最多。苹果酸为无色针状结晶，或白色晶体粉末，无臭，带有刺激性爽快酸味，熔点127-130℃，易溶于水，55．59/100mL(20℃)，溶于乙醇，不溶于乙醚。有吸湿性，1%(质量)水溶液的pH值2．4。[1] （1）D－苹果酸： 密度1.595，熔点101℃，分解点140℃，比旋光度+2.92°（甲醇），溶于水、 甲醇、乙醇、丙酮。 （2）L－苹果酸： 密度1.595，熔点100℃，分解点140℃，比旋光度-2.3°（8.5克/100毫升水），易溶于水、甲醇、丙酮、二恶烷，不溶于苯。等量的左旋体和右旋体混合得外消旋体。密度1.601；熔点131-132℃，分解点150℃；溶于水、甲醇、乙醇、二恶烷、丙酮，不溶于苯。 最常见的是左旋体，L－苹果酸，存在于不成熟的的山楂、苹果和葡萄果实的浆汁中。也可由延胡索酸经生物发酵制得。它是人体内部循环的重要中间产物，易被人体吸收，因此作为性能优异的食品添加剂和功能性食品广泛应用于食品、化妆品、医疗和保健品等领域。外消旋体可由延胡索酸或马来酸在催化剂作用下于高温高压条件和水蒸气作用制得。 编辑本段 安全性 安全性兔经口LDao 5．09/kg。狗经口LD501．Og/kg。ADI不作规定。大鼠[1%(质量)水溶液]LD501．6～3．29/kg。 苹果酸是苹果的一种成分，人每日由蔬菜、水果摄取的苹果酸为1．5～3．0g左右，从未发现不良反应，毒性极低。[1] 编辑本段 质量指标 按日本食品添加剂标准，苹果酸应符合下列质量指标：含量≥99．0%(质量)，溶状、水溶液澄清，熔点127～130℃，重金属≤0．002%(质量)，氯化物≤0．0035%(质量)，铁≤0．004%(质量)，灼烧残留物≤o．05%(质量)。[1] 按美国食用化学品法典(1983)规定，苹果酸应符合下列质量指标：含量≥99．5%(质量)。熔点130～132℃，灰分≤0．1%(质量)，重金属(以Pb计)≤0．002%(质量)，砷(以As计)≤0．0003%(质量)，铅≤0．001%(质量)，富马酸≤0．5%(质量)，顺丁烯二酸≤0．05%(质量)，水不溶≤o．1‰(质量)。[1] 编辑本段 生产现状 由于L－苹果酸属于发酵生产的产品，安全性能有保障，因此，国际市场上需求量快速增加，近年来需求量保持在年均10%左右的高速度。目前世界苹果酸主要生产国有美国、加拿大、日本等，世界总产量每年约为10万吨，其中L－苹果酸产量每年约为4万吨，而世界市场潜在需求量达到每年6万吨，可见市场发展空间之大。其中日本是世界主要的L－苹果酸生产国与出口国 编辑本段 制备 (1)萃取法将未成熟的苹果、葡萄、桃等的果汁煮沸，加入石灰水，生成钙盐沉淀，然后再
L-苹果酸的功能与应用
L-苹果酸的功能及应用 摘要：L-苹果酸是一种天然有机酸，具有重要的生理功能，广泛应用于食品工业、医药工业以及其他行业中，本文着重介绍了L-苹果酸的作用，以及其在各行业中应用情况。 关键词：L-苹果酸，功能，应用 1.前言 L-苹果酸（L-羟基丁二酸）是一种重要的天然有机酸，广泛分布于植物、动物、微生物细胞中。L - 苹果酸是一种四碳酸，因为具有手性结构，因此一般有以下三种形式存在，即D- 苹果酸、DL- 苹果酸和L- 苹果酸，自然界存在的苹果酸都是L- 苹果酸[2]。L-苹果酸所具备的抗氧化作用、抗疲劳作用、增强改的吸收的功能让其成为广受欢迎的产品，并应用与食品、医药的多种领域。本文主要对L-苹果酸的作用与应用进行了概述，让读者更直接，容易的了解L-苹果酸。 2. 苹果酸的功能 2.1 苹果酸的抗氧化作用 L-苹果酸可以促进细胞内ATP生成，强化机体的能量代谢，在苹果酸脱氢酶的作用下L－苹果酸生成NAD(P)H，NAD(P)H作为生物体重要的电子载体和供氢体，参与多种抗氧化物质的还原再生，维持机体的抗氧化能力，而且可以直接清除自由基，发挥抗氧化作用。研究表明，L-苹果酸在苹果酸脱氢酶和苹果酸酶的作用下，能够大量生成NAD(P)H，外源性补充苹果酸，影响机体氧化还原状态，从而提高机体的抗氧化能力[3]。 2.2 苹果酸的抗疲劳作用 苹果酸对正常体力劳动及紧张劳动后体力的恢复有显著影响。研究发现，瓜氨酸- 苹果酸盐能促进肝脏的氨代谢，增强了肝脏功能，同时促进肾脏重碳酸盐的再吸收，缓解代谢性酸中毒，表明瓜氨酸- 苹果酸盐能促进疲劳的消除，在人体中具有抗疲劳的作用。苹果酸和氢氧化镁混合物还用于治疗肌纤维疼痛综合症(fibromyalgia syndrom) ，该病症的主要症状是长期肌肉酸痛且无力，混合物中的苹果酸能在低氧情况下产生ATP。Bendahan 等的研究发现，摄入瓜氨酸- 苹
柠檬酸综述
柠檬酸测定综述 摘要：柠檬酸作为一大有机酸，广泛应用于有关行业，为此对于其量的测定至关重要。例如在食品中，柠檬酸作为添加剂，其含量是检测食品质量的一项重要指标。本综述简述了柠檬酸测定的方法，如高效液相色谱法、反相高效液相色谱法、离子色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等。 关键词：柠檬酸；测定方法；高效液相色谱法；反相高效液相色谱法；离子色谱法；气相色谱法 1．前言 柠檬酸是一种广泛存在于动植物组织和各种水果、蔬菜中的有机酸，与人类的健康密切相关，可增强人体的正常代谢[1]。由于其物理性能、化学性能、衍生物的性能,被广泛应用于一些食品加工领域。如用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造 [2]。在食品上，柠檬酸的含量对其味道的影响很大，并且在某些食品的品质指标测定的一大指标。但是柠檬酸的使用范围是受到严格限制的[2]，不能无限制的添加。为此，如何定性和定量的测定柠檬酸的含量有重要的意义。 目前，测定柠檬酸的方法有高效液相色谱法[3]、反相高效液相色谱法[4]、离子色谱法[5]、气相色谱法[6]、微分电位溶出法[7]、毛细管电泳法[8]、动力学法[9]、酶法[10]等。现将各种测定方法在柠檬酸测定中的使用逐一介绍。 2．分析方法 2．1 高效液相色谱法（HPLC） 高效液相色谱法是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成. 与经典液相色谱相比有以下优点:速度快、分辨率高、灵敏度高、色谱柱可反复使用、样品量少且易回收等。 利用高效液相色谱法测定柠檬酸有以下优点：能够直接进行检测，避免杂质等的影响；测定方法简便，时间短，结果准确。特别是对于芳香族有机酸和多元酸,已被广泛用于各种食品和天然物中有机酸的测定[2]。王永军等[3]在利用HPLC 检测方法时，建立了一种准确对发酵液中柠檬酸含量测定的仪器方法,在检测范围6～16mg/ mL 之间呈线性, R = 0. 999 7 , RSD 为±0. 8 %～1. 2 %( n = 6) ,最低检测浓度为0. 02mg/mL。这种方法简单、灵敏、重现性好，避免了由于化学转化所引起的测定误差，以及发酵液中色素的影响。 对于采用HPLC法测定柠檬酸的方法，在文献中有很多。刘加兰等[11]用Atlantis C18(5μm，4．6×150mm)色谱柱，以0．05 mol／L Na2HPO4(pH 2．8)溶液做流动相，流速0．8mL／min，紫外检测波长210 nm，一次性分离柠檬酸发酵液中的草酸、苹果酸、a一酮戊二酸、柠檬酸、富马酸、乌头酸、柠康酸。建
高效液相色谱法的分类及原理
高效液相色谱法地分类及其分离原理 高效液相色谱法分为：液固色谱法、液液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法. .液固色谱法（液固吸附色谱法） 固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相上地吸附作用不同来进行分配地. ①液固色谱法地作用机制 吸附剂：一些多孔地固体颗粒物质，其表面常存在分散地吸附中心点. 流动相中地溶质分子（液相）被流动相带入色谱柱后，在随载液流动地过程中，发生如下交换反应： （液相）（吸附）<>（吸附）（液相） 其作用机制是溶质分子（液相）和溶剂分子（液相）对吸附剂活性表面地竞争吸附. 吸附反应地平衡常数为： 值较小：溶剂分子吸附力很强，被吸附地溶质分子很少，先流出色谱柱. 值较大：表示该组分分子地吸附能力较强，后流出色谱柱. 发生在吸附剂表面上地吸附解吸平衡，就是液固色谱分离地基础.资料个人收集整理，勿做商业用途 ②液固色谱法地吸附剂和流动相 常用地液固色谱吸附剂：薄膜型硅胶、全多孔型硅胶、薄膜型氧化铝、全多孔型氧化铝、分子筛、聚酰胺等. 一般规律：对于固定相而言，非极性分子与极性吸附剂（如硅胶、氧化铜）之间地作用力很弱，分配比较小，保留时间较短；但极性分子与极性吸附剂之间地作用力很强，分配比大，保留时间长.资料个人收集整理，勿做商业用途 对流动相地基本要求： 试样要能够溶于流动相中 流动相粘度较小 流动相不能影响试样地检测 常用地流动相：甲醇、乙醚、苯、乙腈、乙酸乙酯、吡啶等. ③液固色谱法地应用 常用于分离极性不同地化合物、含有不同类型或不；数量官能团地有机化合物，以及有机化合物地不同地异构体；但液固色谱法不宜用于分离同系物，因为液固色谱对不同相对分子质量地同系物选择性不高.资料个人收集整理，勿做商业用途 .液液色谱法（液液分配色谱法） 将液体固定液涂渍在担体上作为固定相. ①液液色谱法地作用机制 溶质在两相间进行分配时，在固定液中溶解度较小地组分较难进入固定液，在色谱柱中向前迁移速度较快；在固定液中溶解度较大地组分容易进入固定液，在色谱柱中向前迁移速度较慢，从而达到分离地目地.资料个人收集整理，勿做商业用途 液液色谱法与液液萃取法地基本原理相同，均服从分配定律：固液 值大地组分，保留时间长，后流出色谱柱. ②正相色谱和反相色谱 正相分配色谱用极性物质作固定相，非极性溶剂（如苯、正己烷等）作流动相. 反相分配色谱用非极性物质作固定相，极性溶剂（如水、甲醇、己腈等）作流动相.
柠檬酸消毒液的适用范围
世上的污渍有多种多样，相对应的消毒液也是品种繁多。对于不同的医疗器械上的清洗、消毒也对现代医院与企业来说，提出了清洁的更高标准。 柠檬酸是一种重要的有机酸，又名枸橼酸，无色晶体，常含一分子结晶水，无臭，有很强的酸味，易溶于水。其钙盐在冷水中比热水中易溶解，此性质常用来鉴定和分离柠檬酸。而柠檬酸消毒液专业适用于本消毒剂消毒条件的血液透析机的消毒。 柠檬酸消毒液包括聚六亚甲基胍、柠檬酸、乳酸、苹果酸，余量为去离子水。所述消毒液的组分配比是聚六亚甲基胍0.001-5.0%、柠檬酸10-50％、乳酸20.0％-40％、苹果酸10％～30％、余量为去离子水。本消毒液是由柠檬酸、聚六亚甲基胍、乳酸和苹果酸为主要原料配制而成。
【适用范围】： 该消毒液是专门用于清洗和消毒各种类型的血液透析机，具有较强的消毒和去除有机物能力。 【使用方法】 1、对于具有自动加热功能的血液透析机，设备自动吸入一定的量的消毒液原液稀释到有效成分1.0%以上浓度并加热到80℃，然后对设备进行至少15分钟的冲洗消毒。 2、其他适用医疗器械参照设备自身的消毒使用要求来进行使用。 【注意事项】 1、外用消毒液，不得口服。置于儿童不易触及处。 2、本品在80℃时对不锈钢无腐蚀作用，对碳钢有腐蚀作用。 3、切勿让眼睛、皮肤接触本产品。 4、避光、密封，置于通风处保存。 如有柠檬酸消毒液的相关需求，可以考虑咨询专业公司。比如杭州绿萌医疗用品有限公司就很合适，该公司主要从事医用消毒剂和医用清洗剂等清洗消毒产
品生产，经过几年跨越式发展，正逐步成为行业内的优质消毒产品的供应商。公司将以优质的产品和周到的服务，回馈予新老客户对我们的信任和支持，为健康事业做出新贡献。
福乐片中柠檬酸的含量测定(柠檬酸、琥珀酸、苹果酸)
程为: Y =1388+10531X ,r =0 9994 2 6 精密度考察 分别精密吸取对照品溶液1 L,注入气相色谱仪测定峰面积,结果愈创木酚和薄荷脑的RSD 分别为1 01%、1 20%(n =5)。2 7 重现性考察 对同一批号的样品,依法平行测定5次,求得愈创木酚和薄荷脑的含量,RSD 分别为0 49%和1 69%。 2 8 空白试验 对由厂方提供的不含木馏油和薄荷脑的空白样品,按正文方法进行测定,结果没有干扰。 2 9 回收率 精密称取已知含量的样品1g,精密加入适量对照品,依法测定,计算加样回收率。结果5次测定平均回收率愈创木酚为100 4%,RSD 为1 67%;薄荷脑为99 4%,RSD 为1 84%。 2 10 样品测定 吸取供试品溶液和对照品溶液各1 L,注入气相色谱仪,依法测定其峰面积,计算,测得三批样品愈创木酚含量为2 05%、2 02%、2 05%,薄荷脑含量为2 12%、2 10%、2 13%。 3 讨论 3 1 样品处理曾比较了乙醚、石油醚、醋酸乙酯等溶剂,经试验采用醋酸乙酯可以提取完全,且损失少、干扰小。 3 2 试验中对提取时间进行了比较,从10min 至30min 进行了比较试验,结果在20min 可得到良好的结果。参考文献 1王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.中国医药科技出版社,1994.188,430 2夏伯庆.痰咳净中的冰片含量测定.中成药,1988,10(7):16 3 叶崇义等.大口径厚液膜毛细管柱气相色谱法用于风油精成分的分析.中成药,1990,12(12):30 福乐片中柠檬酸的含量测定 中国药品生物制品检定所 北京 100050 高天兵 田金改 福乐片 [1] 是由日本西川制药公司生产的制剂, 具有抗疲劳等作用,是由柠檬酸、琥珀酸、苹果酸等多味药组成[2],其主要成分为柠檬酸,本文采用 薄层扫描法测定了福乐片中柠檬酸的含量,方法可靠,重现性好。1 仪器和试药 日本岛津CS-9000型双波长薄层扫描仪;聚酰胺薄膜(浙江黄岩);柠檬酸对照品由本所提供。 所用试剂均为分析纯。2 色谱条件 2 1 溶剂系统与显色剂 溶剂系统:乙腈-醋酸乙酯-甲酸(9 1 1)溶液;显色剂:溴甲酚绿试液。2 2 扫描条件 R =700nm, S =450nm,锯齿扫描,DE LT Y =0 1,线形化因子SX =3。 2 3 对照品溶液的制备 柠檬酸对照品约10mg,精密称定,置5mL 量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,为对照品溶液。 2 4 供试品溶液制备 取本品20片,研细,精密称取200mg,置50mL 三角瓶中,精密加入甲醇25mL,超声提取30min,取出,放至室温后,补足重量,滤过,弃取初滤液,精密吸取续滤液1m L 于2mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,为供试品溶液。 3 方法与结果 吸取供试品溶液与对照品溶液各2 L,分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上,以乙腈-醋酸乙酯-甲酸(9 1 1)溶液为展开剂,展开,取出,晾干至无酸味,喷以溴甲酚绿试液[2],放置10min,于可见光450nm 下进行扫描。 3 1 工作曲线的绘制 精密吸取柠檬酸对照品溶液1、2、3、 4 L,点于同一聚酰胺薄膜上,依法展开,取出,晾干,显色,依法扫描测定对照品溶液吸收度积分值,点样量在0~8 g 内线性关系良好,求得回归方程为: Y =-3377 8+59275X r =0 9993 3 2 精密度及稳定性 在同一薄膜上,点5个相同量(2 L)的供试品溶液,依法展开,显色,扫描测定其吸收值。结果其RSD 为2 79%。每隔30min 测定其稳定性,结果表明峰面积在2h 内基本不变。3 3 重现性试验 对同一批号的样品,依法平行测 定5次,求得柠檬酸含量,X =49 9%,RSD =1 36%。 3 4 空白试验 对由厂方提供的空白样品,按正文方法进行测定,可见光下检视在与柠檬酸色谱图相应位置上没有斑点,薄层扫描结果没有干扰。3 5 回收率 精密称取已知含量的样品100mg,置50mL 三角瓶中,精密加入柠檬酸对照品50mg,依 114 药物分析杂志
高效液相色谱法的计算方法
高效液相色谱法的计算方法 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1、对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定。常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料，用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符合紫外分光光度法（附录ⅣA）项下对溶剂的要求。 正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。一般色谱图约于20分钟内记录完毕。 2、系统适用性试验 按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。 (1) 色谱柱的理论板数(N，用于定量表示色谱柱的分离效率，简称柱效)。 在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t R（以分钟或长度计，下同，但应取相同单位）和半高峰宽(W h/2)，按n＝5.54(t R/W h/2)2计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等），使理论板数达到要求。 (2) 分离度(R)
柠檬富含维生素C、柠檬酸、苹果酸、高量钠元素和低量钾
柠檬富含维生素C、柠檬酸、苹果酸、高量钠元素和低量钾元素，是最有药用价值的水果之一，对人体十分有益。 1.扎鲜汁，配以糖做柠檬水喝 2.扎鲜汁，当作酸味剂，调制沙拉、凉菜，或放入炒菜中 3.想长期享用的话，买新鲜柠檬，切片曝干（放暖气上烘干效果也好），然后放到蜂蜜中，3~4个月后，柠檬的酸味和蜜的甜美杂糅在一起，可长期储存食用，消食健胃 柠檬可说是女性的水果，因它能安胎，故称「宜母子」。它又能美颜，因其柠檬酸能去斑、防止色素沉著，内服外涂均有效果。柠檬本身就是美容妙品，可以促进胃里蛋白分解砪的分泌，增加肠胃蠕动，帮助消化吸收。在国外的美容专家称其为美容水果，认为柠檬汁可以洁肤美容，防止及消除皮肤色素的沉积(即是去斑) ，能令肌肤光结细腻。所以，每晚睡前如果用柠檬片擦面部皮肤(要持续)，即能改善消除脸部上的油脂污垢和瑕疵，并且可以改善皱纹。用蛋白加柠檬汁来做面膜，可以紧肤及去除黄气，令人容光焕发。而且原来一星期至少一次用柠檬汁来按摩指甲，有令指甲坚固的效用。 柠檬口味宜人，直接食用可以补充人体水分和维生素C。维生素C的摄入可以使铁的吸收增加3倍。吸烟者要多吃柠檬，因为他们需要的维生素C是不吸烟者的2倍。柠檬热量低，且具有很强的收缩性，因此有利于减少脂肪，是减肥良药。柠檬能防止心血管动脉硬化并减少血液粘稠度。热柠檬汁加蜂蜜对治疗支气管炎和鼻咽炎十分有效。柠檬对鼻窦炎、咽峡炎、肝病、胆病和胰腺病都有一定疗效。柠檬还可以治腹泻，有碱化尿液的作用，有利于消除结石和尿道感染。柠檬可以使粉刺在短时间内结疤，还有利于治疗消化不良。在此介绍几种柠檬外用方法：每天往鼻子里滴几滴柠檬可以治疗鼻窦炎。柠檬直接外敷可治愈伤口。用柠檬摩擦手脚能治疗冻疮。柠檬还治蚊虫叮咬，驱赶蝇虫。将柠檬敷在痛处并按摩可以减轻神经痛。风湿病也可以用柠檬在患处摩擦多次来减轻症状。晚上用橄榄油和柠檬汁的混合液涂抹手脚能治皲裂。柠檬可以直接用作除臭剂。往眼睛里滴一滴柠檬汁可以治结膜炎。将柠檬与盐混合擦洗半小时能除氧化污点。柠檬是最好的自然保健品之一。柠檬中含有糖、钙、磷、铁和维生素B1、B2、A和P，特别是维生素C的含量更高，此外还含有机酸和黄酮类、香豆素、挥发油、果胶等。它的丰富的维生素，对改半善血压、缓和神经、帮助消化和分解体内毒素都有一定的辅助作用。 果汁中所含的柠檬酸盐，还能防止肾结石。 柠檬还是世界上最有药用价值的水果之一。中医认为，柠檬性温、味苦、无毒，具有生津止渴、开胃健脾、防毒解毒、软化血管、维持血液健康等功效，也可预防皮肤癌。高血压、心肌梗塞患者常馀柠檬饮料，对改善症状缓解病情非常有益。 柠檬与钙离子结合能生成一种可溶性“络合物”，可有效地缓解钙离子对血液的凝固作用。我国民间常用柠檬治疗高血压，方法简单，取一枚柠檬和十枚荸荠放在一起用水煎，经常服用效果明显。 柠檬汁则是一种鲜美爽口的饮料，制作起来更是非常简单方便，直接用鲜果压榨出果汁，再配以糖或蜂蜜、冰块、冰水，搅拌后即可饮用。那淡淡的酸甜，幽幽的清香直沁人心脾，令人心神清爽，唇齿留香。 柠檬汁可以让人振奋精神、消除疲劳、保持长时间的注意力，是最佳的工作饮品。常饮柠檬汁还能洁白牙齿，帮助消化。 天气炎热时，以30g的浓柠檬汁泡开水饮用，更具有生津、止渴、解暑的作用。对于渴望好肌肤的你而言，每天享受一杯简单的柠檬饮品，盛夏净白肌肤又省心又省力！
苹果酸和柠檬酸的测定报告[详实参考]
生物仪器分析课程实验报告 姓名： 开课时间：2016－2017学年第 2学期 授课教师：
一、实验目的 1、了解液相色谱仪的基本原理、结构及使用注意事项。 2、掌握液相色谱的操作方法。 二、实验原理 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱，是色谱法的一个重要分支。它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 果汁中含有多种有机酸，苹果酸和柠檬酸是果汁中重要的有机酸。样品经离心及过滤后，直接注入反相液相色谱体系，以磷酸二氢铵为流动相，经分离后采用紫外检测器在210nm处外标法定量分析。 三、实验简要步骤（最好以流程图形式表达） 1、标准溶液的配制：分别准确称取100mg苹果酸及柠檬酸标准标准品并用超纯水定容至100mL，配制成1000mg/L的贮备液。然后分别吸取上述溶液2mL、4mL、8mL、10mL定容到10mL（相当于浓度200mg/L、400mg/L、800mg/L、1000mg/L），配制标准品混合溶液； 2、样品的处理：将样品经0.45μm水相微孔滤膜过滤后备用； 3、流动相的配制及过膜：0.05mol/L磷酸二氢铵溶液（磷酸调节至pH=2.5）配制，并过膜，脱气； 4、高相液相色谱仪操作流程： 1）开机顺序：
点击电脑图标，听到哔哔两声则说明仪器和LCsolution工作站已连接上。（关机顺序完全相反） 2）柱平衡 排气（Purge）：使用前按A泵、B泵和进样器的Purge键进行自动排气排杂。
实例解析——高效液相色谱(hplc)
实例解析——高效液相色谱(HPLC) 一、原理 利用不同物质在两相中（液液、液固、离子交换、尺寸排阻）具有不同的分配系数，当二者相对运动时候，物质在两相中反复多次分配，从而使得物质得到完全分离 二、适用范围 高沸点、热不稳定的天然产物、生物大分子、高分子化合物、离子型样品、生化样品三、特点 高压、高效、高灵敏度 四、仪器组成 流动液贮存提供脱气，输液系统、进样系统、分离系统、检测系统，控制记录系统贮液瓶、高压泵、进样器、分离柱、检测器、记录仪 五、仪器选择 由实验条件确定是选用二元高压还是四元低压、一般来说，二元高压的准确度较高。四元低压是先将样品按比例混合再泵入，而二元高压是先泵入不同比例的溶剂再混合。确定采用的脱气系统，一般采用在线脱气。确定进样方式，人工手动六通阀进样，还是进样针自动进样，一个适用于少量样品，一个适用于大量样品。 选择检测器，如果是有较强的紫外吸收的可用紫外可见检测器(二极管阵列检测器)，如果是芳香族化合物，可选用荧光检测器，对于离子可采用电导检测器。 六、实验条件优化 配置待测物质的标准溶液 1、色谱柱的确定 分析样本确定是采用何种类型的色谱柱 (1)分配色谱，两项间分配系数 流动相选用极性的物质（甲醇、乙腈、水）则固定相选择非极性物质。一般用 C18 ODS柱。 (2)吸附色谱， (3)离子交换色谱 各种离子与树脂上交换集团的交换能力不同。固定相：离子交换树脂，流动相 为无机酸、无机碱。常用于分离离子或者可解离的化合物 (4)排阻色谱法 配置含待测物质的标准品溶液，采用不同C18柱分离，检测，对照不同色谱图像，可得到分离效能最高的色谱柱 2、最佳流动相梯度洗脱程序的确定 梯度洗脱：按照一定的程度，不断改变流动相中个溶剂组成的比例以改变流动相的 极性。将色谱柱上不同的组分洗脱出来。 配置不同的梯度洗脱方案，用标准溶液进行试验，并选取能达到最高分离效能的梯 度洗过方案作为最佳流动相梯度洗脱程序 3、流动相的确定 在分离效能相似条件下选择更经济、毒性小的流动相 4、流速确定 流速太大，待分离组分来不及与固定相充分作用，故其中的组分较易被洗脱下来，出峰时间变短，而且柱压比较高，会引起泵负荷的增加，进而导致色谱柱的使用命
柠檬酸的制备及发展
乙二酸 摘要：本人介绍了丁二醇的性质，生产方法，应用及未来发展。对甘蔗糖蜜作为廉价碳源厌氧发酵制备丁二酸进行初步研究，丁二酸是一种重要的化工原料，广泛用于食品、医药和化工等行业，市场前景广阔。微生物发酵法生产丁二酸具有高效、环保、可持续利用的特点，是一种新型的绿色化工生产工艺。详细介绍了丁二酸发酵法生产技术及研究进展, 并对其应用前景进行了展望。 关键词：丁二酸，糖蜜，发酵 丁二酸概念 丁二酸俗称琥珀酸，是一种二羧酸，能发生二元酸的大多数典型反应，由于分子中含有两个活泼的亚甲基，因此又具有许多其他的重要反应特性，如卤化、酯化、碘化等等，是合成各种复杂有机物的中间体，也是制造药物的重要原料。 丁二酸的性质 纯净丁二酸为无色晶体，无嗅、有酸味、可燃，是一种二羧基四碳酸（图1），是三羧酸循环和厌氧发酵的中间代谢物，部分微生物能量代谢的终产物可产生琥珀酸盐。天然品主要存在于海藻、地衣和真菌中。琥珀酸作为四碳饱和二羧酸，可衍生转化为四氢呋喃、1,4-丁二醇、γ丁内酯、马来酸和反丁烯二酸等衍生物化学制品。 丁二酸应用 在食品行业，琥珀酸作为酸味剂、调味剂用于饮料与糖类食品，其钠盐可改善豆酱、酱油等佐料的口味[1]。琥珀酸是影响啤酒口味的重要有机酸，还可用作奶类制品的铁强化剂以及新型乳化剂[2]，促进生长发育。用于咸菜、火腿、香肠、鱼加工产品、肉罐头等的风味改良剂， 在医药行业，琥珀酸用于合成镇静剂、pH 调节剂、避孕药、抗癌药物、抗生素及维生素等。维生素E琥珀酸酯（α-生育酚琥珀酸酯）能抑制人类乳腺、子宫内膜、前列腺和淋巴等组织肿瘤的生长，对正常细胞无影响[3]。 在化学工业，琥珀酸用于生产染料、树脂、工程塑料、酯类和农药等；电镀用的pH调节剂和助焊剂，锡膏的助焊酸；合成除锈剂、去垢剂，铝、锌的刻蚀剂；还可用于润滑剂、添加剂及弹性体纺织品中，在表面活性剂领域的应用尤为广泛。 在农业方面，丁二酸是一种植物生长激素，它能控制植物生长、调节养分、增加抗旱、抗病、抗冻能力，施用于农作物一般能增产10%-20%，还用来处理大麦黑穗病，用作除草剂的添加剂。促进种子发芽抗病毒。在动物瘤胃中作为缓冲剂和动物能量的来源。 丁二酸衍生物是一种良好的表面活性剂，是去垢剂、肥皂和破乳剂的组分；丁二酸可生产脱毛剂、牙膏、清洗剂、高效去皱美容酯。丁二酸还用于燃料、润滑剂、添加剂、弹性体中。丁二酸对化学镀镍有加速和稳定作用。 丁二酸还是合成可降解聚酯PBS的重要原料，每吨PBS消耗原料丁二酸0.62吨。预计未来我国对PBS的需求为300万吨/年，丁二酸市场需求204万吨/年，目前国内丁二酸的产能不足5万吨，满足不了市场需求，每年都需要进口丁二酸；有限的丁二酸产能成为PBS产业发展的瓶颈。 丁二酸的生产方法及菌种 目前利用廉价废弃生物质作为碳源发酵生产丁二酸成为研究热点，木质纤维素原料如秸 秆[6]、玉米芯[7]、甘蔗渣[8]等经过处理后得到的水解液中含有大量可发酵糖如木糖、葡萄糖、阿拉伯糖等。利用水解液作为生产丁二酸的原料，能够降低生产成本并减少废弃生物质对环境造成的污染。制糖工业中主要的副产物甘蔗糖蜜，与秸秆等木质纤维素原料相比，不需要进行预处理即含有大量的可发酵糖，其中绝大多数为蔗糖，同时含有无机盐、维生素
高效液相色谱法检验方法
生效日期20140101 负责姓名职位签名/日期 起草何瑞清QC 审核梁天静QC主管 批准张小伶质量部经理 分发部门： 部门份数部门份数QC室1 1 目的 建立高效液相色谱法检验程序 2 范围 本程序适用于高效液相色谱法检验标准操作 3 职责 3.1QC人员：严格按本程序操作 3.2QC主管：严格按本程序检查 4 内容 4.1 定义及概述 4.1.1 高效液相色谱法是一种现代液体色谱法，其基本方法是将具一 定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液作为流动相，用高压 输液泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流 动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪 或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理，得到测定结果。 由于应用各种性质的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有 分离性能高，分析速度快的特点。 4.1.2 高效液相色谱法适用于能在特定填充剂的色谱柱上进行分离的 药品的分析测定，特别是多组分药品的测定、杂质检查和大分
子物质的测定。有的药品需要在色谱分离前或后经过衍生化反 应，方能进行分离或检测。常用的色谱柱填充剂有：硅胶用于 正相色谱；化学键合固定相，根据键合的基团不同可用于反相 或正相色谱，其中最常用的是十八烷基硅烷（又称ODS）键合 硅胶，可用于反相色谱或离子对色谱离子交换填料，用于离子 交换色谱，是有一定孔径的大孔填料，用于排阻色谱。 4.1.3 仪器的组成和一般要求： 4.1.3.1 仪器的组成：高压输液泵、色谱柱、检测器、积分仪、打印机。 4.1.3.2 对仪器的一般要求： ——所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱 的填充剂和流动相的组分按各品种项下的规 定。常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学健合硅 胶，后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用， 辛基硅烷键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶 也有使用。离子交换填充剂用于离子交换色 谱；凝胶或玻璃微球等填充剂用于分子排阻色 谱等。除另有规定外，柱温为室温，检测器为 紫外吸收检测器。 ——在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符 合紫外分光光度法项下对溶剂的要求。（紫外 分光光度法项下对溶剂的要求：用1cm石英吸 收池盛溶剂，以空气为空白（即空白光路中不 置任何物质），测定其吸收度。溶剂和吸收池 所吸收度，在220～240nm范围内不得超过 0.40，在241～250nm范围内不得超过0.20，在 251～300nm范围内不得超过0.10，在300nm以 上时不得超过0.05。）
苹果酸
第一章项目建议书 项目名称：年产4000吨的L-苹果酸生产厂建设 承办单位： 项目地址：天津经济技术开发区化工区 承办人：王慧 一．项目建设的目的和意义 1.提出背景与依据 L-苹果酸产品分为食用级和工业级2种。食用级产品用于饮料水果加工等领域，工业级产品用作化学合成原料，制作酯类和盐类。 L-苹果酸广泛存在于苹果、梨及其他水果中，是三羧酸循环的重要成员之一。L—苹果酸口感接近天然苹果的酸味，与柠檬酸相比，具有酸度大、味道柔和、滞留时间长等特点，目前已广泛用于高档饮料、食品等行业，成为继柠檬酸、乳酸之后用量排第三位的食品酸味剂。用L—苹果酸配制的饮料更加酸甜可口，接近天然果汁的风味。苹果酸与柠檬酸配合使用，可以模拟天然果实的酸味特征，使口感更自然、协调、丰满。清凉饮料、粉末饮料、乳酸饮料、乳饮料、果汁饮料中均可添加苹果酸改善其口感和风味，苹果酸常与人工合成的二肽甜味剂阿斯巴甜配合使用，作为软饮料的风味固定剂添加。100克苹果酸比添加100克柠檬酸几乎要强1.25倍，或者说80克的苹果酸和100克的柠檬酸形成的酸味强度是相当的，因此要达到相同的酸味强度使用L—苹果酸可以减少用量20%，对于一些食品加苹果酸可以节省白糖10%～20%，由于它的酸味刺激效果优于柠檬酸，近几年来L-苹果酸在食品工业上的应用已逐渐取代柠檬酸。 L－苹果酸可用于药物制剂、片剂、糖浆中，还可以配入氨基酸溶液中，能明显提高氨基酸的吸收率；L－苹果酸可以用于治疗肝病、贫血、免疫力低下、尿毒症、高血压、肝衰竭等多种疾病，并能减轻抗癌药物对正常细胞的毒害作用，还用于制备与合成驱虫剂、抗牙垢剂等。另外L－苹果酸还可以作为工业清洗剂、树脂固化剂、合成材料增塑剂、饲料添加剂等。 由于L－苹果酸属于发酵生产的产品，安全性能有保障，因此，国际市场上需求量快速增加，近年来需求量保持在年均10%左右的高速度。目前世界总产量每年约为10万吨，其中L－苹果酸产量每年约为4万吨，而世界市场潜在需求量达到每年6万吨，可见市场发展空间之大。 2．投资的必要性和经济意义 据了解，1990年第68届秋季广交会上，我国首批生产的L-苹果酸产品深受欢迎，来自西欧、美国及东南亚的客商一次就订货800吨。1991年上海第一届华东四省七市外贸会上，该产品销势更旺，出口需要量在万吨以上。美国年产2.5万吨，1990年价格0.81美元/磅，1993年提到1.85美元/磅。调查表明，L －苹果酸在美国酸味剂市场上已居第三位，Miles公司是美国最大的苹果酸生产厂家，年生产能力为6810吨，还需从国外进口，日本是苹果酸的主要生产国和输出国，其产量占世界产量的一半以上，扶桑化学、三菱化成和协和发酵三大公司生产的苹果酸形成日本三足鼎立局面，田边制药公司是最早采用酶工程技术生产L－苹果酸的公司。 目前，美国FDA已开始限制柠檬酸及DL－苹果酸在老年人、肝肾功能障碍
L-苹果酸对人体的作用
L-苹果酸对人体的重要性，你了解了多少？ 摘要：L－苹果酸(Malic acid)是生物体代谢过程中产生的重要有机酸，在线粒体产生 能量物质ATP的代谢过程中起到重要作用。苹果酸是苹果酸天冬氨酸穿梭的重要组成部分，对胞液和线粒体之间的还原当量（NADH）的转移起重要的作用。因此，L-苹 果酸在机体内具有重要的代谢意义，同时具有显著的生理功能。能够有效的提高运动 能力，具有抗疲劳、保护心脏、促进羧酸盐的代谢、促进线粒体呼吸、改善记忆能力、增强钙的活性、降低抗癌药物毒副作用等生理功能。 L-苹果酸的代谢意义 L－苹果酸是生物体代谢过程中产生的重要有机酸，是三羧酸循环(TCA循环) 及其支路乙醛酸循环代谢过程中的重要中间产物，也是CO2固定反应的中间产物，它是生物体细胞内存在的一种活性物质，易于吸收，可以迅速通过细胞膜，进入线粒体内直接参 与能量代谢；苹果酸又是苹果酸天冬氨酸穿梭的重要组成部分，对胞液（cytosol）和 线粒体（mitochondria）之间的还原当量（NADH）的转移起到重要的作用。 L-苹果酸的功效有哪些? 6、L-苹果酸可以提高运动能力 补充苹果酸使肝细胞胞质苹果酸脱氢酶与线粒体苹果酸脱氢酶活力增加，使三羧酸循 环中间产物迅速增加，推动了三羧酸循环的循环速率及苹果酸天冬氨酸穿梭速率，有 利于维持较高的三羧酸循环中间产物，提高肝组织产能效率；降低运动过程中血清肌 酸激酶的水平，减少运动过程中骨骼肌的损伤，从而提高运动能力。 7、L-苹果酸促进羧酸盐代谢作用
L－苹果酸有促进柠檬酸盐氧化的作用，而且延胡索酸盐及琥珀酸盐转化为苹果酸后，同样可以刺激柠檬酸的氧化，可见其主要是由苹果酸介导。L－苹果酸可以提高精子线粒体丙酮酸脱氢酶活性，从而促进丙酮酸盐的吸收利用。广州爱及恩保健品Matsuishi 等人发现苹果酸盐可以促进琥珀酸盐的氧化，能有效解除丙酸盐对肝线粒体呼吸抑制 的作用。 8、L-苹果酸促进线粒体呼吸作用 动物实验表明，机体ATP 需求增加时，肝脏线粒体内苹果酸浓度上升，线粒体内利用底物合成ATP 的作用加强。推测呼吸作用的加强由苹果酸介导，苹果酸可能是线粒体内产生ATP的动力。Bobyleva-Guarriero等人发现给大鼠注射少量苹果酸盐，肝脏线 粒体中苹果酸盐浓度上升，柠檬酸盐、爱及恩无糖钙、α- 酮戊二酸和琥珀酸盐的氧化率上升。小剂量补充外源性苹果酸，可提高线粒体苹果酸度，既节省基质中的苹果酸，又促进线粒体内的穿梭速率，从底物的供给和能量的转移两个方面推动了线粒体的代谢。 9、L-苹果酸降低抗癌药物毒副作用 Sugiyama等人的研究表明，从白芷根中提取的有效成分－苹果酸钠能够有效保护肾脏和骨髓细胞，能够显著降低因使用抗癌药物顺氯氨铂(cis-diamminedichloroplatinum，CDDP) 所产生的毒性，但不降低抗癌药自身的活性，有助于减少癌症患者因化疗引 起的副作用。广州爱及恩保健品Ueda等人对苹果酸降低抗癌药CDDP毒副作用的机理作了进一步的研究，发现服用同位素14C标记的苹果酸能很快分布在肝及肾脏等组织中，但在肿瘤细胞中苹果酸的浓度很低，且大约40％的苹果酸与抗癌药CDDP结合转化为DPM（diamminoplatinum(II) malate），DPM同样具有抗癌效果且毒性较低。因此苹果酸可以通过与抗癌药物结合来达到降低抗癌药物CDDP的毒副作用，而且还可 以提高抗癌药物的使用剂量。 10.L-苹果酸的抗氧化作用
苹果酸的生产及应用
苹果酸的生产与应用 【摘要】介绍了苹果酸的生产及实际应用。 【关键词】苹果酸、生产、应用 1、前言 苹果酸，学名为α-羟基丁二酸或羟基唬拍酸, 是一种无色或微黄色粉状、粒状或结晶状固体，无臭，略带有刺激性爽快酸味。易溶于水，微溶于究竟或醚，吸湿性强，保存时易受潮。[1] 苹果酸广泛存在于多种水果中, 因其在苹果中的含量最高而得名。苹果酸的分子式为C4H6O5, 由于苹果酸分子中有一个不对称碳原子, 故有L一型苹果酸、D一型苹果酸和DL一型苹果酸之分。自然界中广泛存在的是L一型苹果酸。近年来随着食品工业、医药工业、化学工业的迅速发展, 国内外市场对苹果酸的需求量越来越大。[2] 2、合成方法 生产苹果酸可分为化学合成法和发酵法两种方法。所不同的是, 发酵法生产利用了微生物酶的立体异构专一性, 生产的都是L一型苹果酸, 是生物体内所存有和可以利用的构型。而合成法只能生产DL一苹果酸, 如果用于食品和药物, 则有一半不能得到利用。因此,在苹果酸生产上,发酵法占有主导地位。[3]目前正在研究开发的发酵法生产L-苹果酸的工艺主要有三类： 一是一步发酵法，又称直接发酵法，即采用一种微生物直接发酵糖质原料或非糖质原料生成L-苹果酸。利用淀粉质原料生产L-苹果酸的微生物目前主要有：黄曲霉、末曲霉、寄生曲霉等，这些菌株大多具有糖化淀粉的能力，可以直接利用淀粉质原料，原料来源十分丰富，发酵工艺条件温和，产品成本低，因此一步发酵法与其他方法相比更具有优势。 目前我国通常采用直接发酵法生产苹果酸，工艺流程如下： 培养基配置→灭菌→接种→发酵→酸解→过滤→中和→过滤→酸解→过滤→精制→真空浓缩→结晶→干燥→包装→成品 二是两步发酵法，即采用两种不同功能的微生物，其中之一是先将糖质或其他原料发酵成富马酸，另一种微生物将富马酸转化成L-苹果酸。两种微生物可先后加入，也可同时加入。两步发酵法由于涉及到两种微生物，培养条件要求比较严格，发酵周期较长，产酸率相对较低，副产物较多，尚未实现工业化生产。 流程图如下：