微生物实验五 酵母菌的形态观察
实验五酵母菌的形态观察
13生物基地201300140059 刘洋2014-11-08
同组者：吕赞刘沛余马华峥
一、实验器材
1.菌种
酿酒酵母2d麦芽汁斜面培养物、酿酒酵母麦氏培养基产孢培养斜面培养物。
2.溶液和试剂
0.01%美蓝水溶液、5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液、95%乙醇
3.仪器和其他用品
酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，小试管，烧杯，试管架，载玻片夹，滴管，无菌水等
4.培养基
麦氏培养基、酵母合成培养基
二、实验目的
1.学习并掌握酵母菌一般形态和与细菌的区别。
2.观察酵母菌的出芽生殖，区分死活细胞。
3.学习酵母菌子囊孢子观察方法。
4.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
三、实验原理
1.美蓝染液水浸片法
单细胞的酵母菌个体是常见细菌的几倍甚至几十倍，大多数采取出芽方式进行无性繁殖，液可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。由于细胞个体大，采取涂片的方法
制片有可能损伤细胞，一般通过美兰染液水浸片法或水—碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。同时，采用美兰染液水浸片法还可以对酵母菌的死、活细胞进行鉴定。
美兰对细胞无毒，其氧化型呈蓝色，还原型无色。由于新陈代谢，活细胞内有较强还原能力，使美兰由蓝色氧化型转变为无色的还原型，染色后活细胞呈无色。死细胞或代谢能力微弱的衰老的细胞内还原能力弱，染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
2.出芽生殖
酵母菌在出芽繁殖时会在母体上长出一个芽，芽体与母体相连，但从个体大小上讲一般比母体要小一些。酵母菌的芽殖过程开始于母细胞的细胞质和壁向外突出，进而细胞核以有丝分裂方式分成两个子核，一个子核留在母细胞内，另一个子核转移到突出部分，然后细胞在突出部分缢缩而生出芽体。芽体与母细胞暂时相连，并可以重复上述过程形成一个许多芽体彼此相连的群体。当芽体长到与母细胞大小相近时，从母体上脱落下来，成为完整的新个体。
3.子囊和子囊孢子染色
酵母菌是以形成子囊和子囊孢子进行有性繁殖的。两个临近的酵母细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、融合，并形成一个通道，两个细胞核在此通道内结合，形成双倍体细胞核，然后进行减数分裂，形成4个或8个细胞核。每一子核与其周围的原生质形成孢子，即为子囊孢子，形成子囊孢子的细胞称为子囊。经染色后子囊孢子呈绿色、菌体和子囊呈粉红色。
四、实验步骤
1.美蓝染液水浸片法
1)滴加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央，无菌操作用接种环由酿酒酵母麦
芽汁斜面培养物挑取少许菌体置于染液中，混合均匀。
2)用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌液接触，缓慢将盖玻片倾斜并覆盖在菌液
上。
3)将制片放置3min后，用低倍镜及高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况，并根据细胞
颜色区分死活细胞。
4)染色后每隔一段时间再次观察，注意死活细胞比例是否发生变化。
2.子囊孢子染色
1)取一块载玻片，滴一小滴生理盐水于两个区域中央；用接种环无菌操作分别由枯草
芽胞杆菌营养琼脂斜面和金黄色葡萄球菌营养琼脂斜面挑取适量菌苔，将沾有菌苔
的接种环置于载玻片上的生理盐水中涂抹，使菌悬液在载玻片上形成均匀薄膜。
2)涂菌面朝上，通过酒精灯火焰，直至形成一层肉眼可见的干燥菌膜。在用酒精灯烘
干时，应随时用手背接触载玻片，以控制其温度适中。
3)滴加孔雀绿染液覆盖1-2min，之后水洗。
4)滴加95%乙醇覆盖30sec，之后水洗。
5)滴加番红染液覆盖1min，之后水洗。
6)自然干燥并镜检。
五、注意事项
1.用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。
2.滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时，染液过多会溢出，过少会产生大量气泡。
3.盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。
六、实验结果
美蓝染色后的酵母菌活体，其中蓝色的为已死亡酵母菌，可观察到出芽生殖。
出芽生殖
酵母菌子囊孢子染色，红色的为菌体，绿色的为子囊孢子
七、结果分析
1.酵母菌为单细胞微生物，其出芽生殖一次可生出多个芽体。
2.通过实验观察，时间越长酵母菌死活细胞的比例越大。
3.酵母菌子囊孢子的数目是偶数个。
八、思考题
1.根据你的观察结果，吕氏碱性美蓝染液浓度及作用时间与酿酒酵母死活
细胞比例变化是否有关系？试分析原因。
虽然美蓝染液无毒，但是如果美蓝染色液作用时间过长或浓度过高，会造成酵母细胞脱水死亡，使得死活比升高。
2.酿酒酵母除了通过出芽方式进行无性生殖外，还可以形成子囊孢子进行
有性生殖，你在实验中是否观察到酿酒酵母的子囊孢子？若未观察到，试分析原因。
观察到了，如果为观察到，可能是培养基条件不适宜。
九、附录
麦氏培养基配方（113℃灭菌30min）
酵母合成培养基配方（113℃灭菌30min，接种量10%）
实验五真菌的分离培养及形态观察
实验五真菌的分离培养及形态观察 真菌分离培养应考虑所分离真菌的特性，配制合适的培养基，选择所需的气体环境。同时, 由于真菌分离材料常污染有大量细菌，所以可在培养基中加入抗菌素并在分离培养过程中严格执行无菌操作。 目的要求 1．掌握真菌分离培养方法。 2．认识真菌菌落的特征，比较与细菌菌落有何不同。 3．了解真菌载片培养法。 4．掌握观察真菌的基本方法，并观察其形态特征。 操作步骤 —、真菌的分离培养方法 （－）平板划线分离法 1．取适合真菌的琼脂培养基融化，冷至45℃，注入无菌平皿中，每皿15～20ml，制成平板待用。 2．取要分离的材料（如田土、混杂的或污染的真菌培养物、真菌）少许，投入盛无菌水的试管内，振摇，使分离菌悬浮于水中。 3．将接种环经火焰灭菌并冷却后，蘸取上述菌悬浮液，进行平板划线(同细菌的划线法)。 4．划线完毕，置温箱中培养2～5d，待长出菌落后，钓取可疑单个菌落先作制片检查，若只有一种所需要的真菌生长，即可进行钓菌纯培养。如有杂菌可从单个菌落中钓少许菌制成悬液，再作划线分离培养，有时需反复多次，才得纯种。另外，也可在放大镜的观察下，用无菌镊子夹取一段待分离的真菌菌丝，直接放在平板上作分离培养，可获得该种真菌的纯培养。 （二）稀释分离法 1．取盛有无菌水的试管5支（每管9ml），分别标记1、2、3、4、5号。取样品（如田土等）1g，投入1号管内，振摇，使悬浮均匀。 2．用1ml灭菌吸管，按无菌操作法，从1号管中吸取1ml悬浮液注入2号管中，并摇匀；同样由2号管取1ml至3号管，依此类推，直至5号管。注意每稀释一管应更换一支灭菌吸管。 3．用2支无菌吸管分别由4号、5号试管中各取1ml悬液，并分别注入2个灭菌培养皿中，再加入融化后冷至45℃的琼脂培养基约15ml，轻轻在桌面上摇转，静置，使冷凝成平板。然后倒置温箱中培养，2～5d后，从中挑选单个菌落，并移植于斜面上。 二．真菌培养性状观察 （一）真菌在固体培养基上的生长表现 1 .酵母菌菌落：酵母菌在固体培养基上多呈油脂状或蜡脂状，表面光滑、湿润、黏稠，有的表面呈粉粒状、粗糙或皱褶。菌落边缘有整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色或红色等。 2. 霉菌菌落：将不同霉菌在固体培养基上培养2～5d，可见霉菌菌落呈绒毛状、絮状、蜘蛛网状等。菌落大小依种而异，有的能扩展到整个固体培养基，有的有一定的局限性（直径1～2mm或更小）。很多霉菌的孢子能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、青色、黑色、橙色等。 （二）真菌在液体培养基中的生长表现 1. 酵母菌注意观察其混浊度、沉淀物及表面生长性状等。
几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察
微生物实验报告 几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察 姓名： 学号： 系别： 班级： 日期： 同组成员：
一、摘要 通过对酵母菌、霉菌形态结构观察，了解酵母菌、霉菌形态结构的形态结构知识。实验结果为： 1、酵母菌一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬性。菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。 2 二、实验目的 1、学习酵母菌、霉菌形态结构。 2、学习酵母菌、霉菌观察方法。 3、了解酵母菌、霉菌在实际中的意义。 三、实验原理 酵母菌：酵母菌多呈圆形、卵圆形，有的呈分支的菌丝状。无性繁殖以出芽生殖为主，少数以分裂方式繁殖；有性生殖是通过不同遗传性的细胞接合产生子囊孢子的方式进行。子囊孢子可用孔雀绿进行染色观察。观察细胞形态和内部结构可采用染色的方法。美蓝是无毒性的染料，新陈代谢旺盛的细胞具有较强的还原能力，使美蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型；而死亡细胞无此还原力，故被染成蓝色。 霉菌：霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌丝、气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍/高倍显微镜即可观察。 四、实验材料与仪器 1、菌种：产黄青霉、黑曲霉、黑根霉、总状毛霉、酿酒酵母、热带假丝酵母斜面菌种。 2、培养基：PDA培养基、0.05%美蓝染液、5%孔雀绿染液、半固体PDA培养基、乳酸苯酚固定液等。 3、仪器及用具：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、滴管、吸水纸等。 五、实验内容和步骤 酵母菌形态观察
实验五 微生物菌落形态观察
实验五微生物菌落形态观察 1、本次实验的目的和要求 （1）观察细菌、酵母菌、霉菌三大类微生物具体菌落的形态特征。 （2）总结三类微生物菌落的一般特征并能识别。（特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、光泽、质地等。） 2、实验内容或原理 菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖形成的肉眼可见的群体。 区分和识别各类微生物可从菌落形态（群体形态）和细胞形态（个体形态）两方面进行，菌落形态是无数细胞形态的集中反映，因此每一大类微生物都有其一定的菌落特征，可通过这些特征差异区分和识别。 特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、光泽、质地等。 细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。 酵母菌菌落特征（与细菌相似) ：比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、粘稠，易用针挑起。多呈乳白色，少数呈红色。 霉菌的菌落特征：比细菌菌落大，由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状，有的无固定大小，延至整个培养基中，产色素，使菌落显色。 3、需用的仪器和试剂 （1）培养基：PDA培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、YEPD培养基 （2）菌落观察： （a）霉菌：黑曲霉、黑根霉、青霉、犁头霉、毛霉 （b）酵母菌：酿酒酵母菌 （c）细菌：大肠杆菌 4、实验步骤 1.细菌菌落形态观察包括：菌落大小、颜色、形状（圆形、不规则、假根形）、边缘（整齐光滑、叶状、波浪状、锯齿状、丝状）、隆起（扁平、低凸起、高凸起）、透明度（透明、半透明、不透明）、光泽（金属光泽、油脂性光泽）、质地（油脂状、膜状、粘稠状）、表面状态（光滑、褶皱、颗粒状、龟裂状）等。 2.大多数酵母菌的菌落与细菌相似，呈圆形，湿润有粘性，不透明，表面光滑，有油脂光泽。多数为白色或乳白色，少数为红色，培养时间长了，颜色会变暗。与培养基结合不紧，易被挑起。质地粘稠，边缘皱褶状。 3.霉菌由分枝状菌丝组成，菌丝粗而长，形成菌落疏松，菌丝有绒毛状、棉絮状、蜘蛛网状，菌落很大是细菌的几十倍，表面蔓延，有多种颜色，菌落正反面颜色多有不同。
酵母菌形态观察
酵母菌形态观察 酵母菌形态观察 微生物实验报告 酵母菌的形态观察 一、目的要求： 1、掌握普通光学显微镜的使用方法和注意事项 2、观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别 3、学习鉴别死活酵母细胞的实验方法 二、器材和器皿： 2、生理盐水、美蓝染色液、 3、显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种针、擦镜纸 酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。 四、操作步骤： （一）显微镜的主要构造： 普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。 （二）显微镜的使用方法 1．低倍镜的使用方法 （1）取镜和放置：
显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将 显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。 （2）调节光源 （3）低倍镜观察 先将标本玻片置于载物台上，并将标本部位处于物镜的正下方，以左手按逆时针方向 转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注在上升镜台时，切勿 在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。 然后，两眼同时睁开，左眼看目镜，同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮，当在视野内 出现物象后，改用细调节轮，上下微微转动，直至视野内获得清晰的物象。然后认真观察 标本各部位，确定并将需进一步要观察的部位移视野中央，准备用高倍镜观察。 观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油镜）转回到 低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油镜）下换片，以防损坏镜头。 （五）美蓝浸片观察步骤 在载玻片上滴一小滴0.1%美蓝液，无菌操作用接种环取酵母少许，与美蓝液混合均匀，染色2-3min。 2.加盖玻片： 先将盖玻片一端与菌液接触，然后慢慢放下使其盖在菌液上。 先低倍镜，后高倍镜，观察酵母细胞的形态、构造和出芽情况，并注意区分死细胞 （蓝色）与活细胞（不着色）。 4.30min后再镜检。 五、实验现象 1.都是单个细胞 2.都是透明的 3.基本是活的 5. 用美兰染色后蓝色是死细胞，透明的是活细胞 1.美蓝染液浓度和作用时间的不同，对酵母菌死细胞数量有何影响?试分析其原因。 答：吕氏碱性美蓝染液无毒性，在浓度不大的情况下，对酵母菌死细胞的数量影响几 乎没有。在浓度高的情况下，会导致酵脱水死亡。作用时间短对死细胞数量影响不大，时
酵母菌形态观察
酵母菌的形态观察 实验目的：掌握常见真菌的不同结构特征； 熟悉普通光学显微镜低倍镜与高倍镜的使用方法； 实验材料：菌种：啤酒酵母 试剂：乳酸石炭酸 实验内容： 1.酵母菌的形态观察 酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。 基本原理：本实验是通过水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。 基本步骤：酵母培养物→制片→镜检 注意事项： （1）取菌量不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液溢出或出现大量气泡。 （2）用镊子取一块盖玻片，先将一侧与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上，盖玻片不宜平着放下，避免气泡产生。 注意事项：观察时，宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，更换高倍镜观察 2.显微镜油镜的使用与保养 低倍镜的使用方法： （1）取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部 位调到通光孔的正中。 （2）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上 观察。一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标 本片的损坏。然后，两眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动 粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。
（3）如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适， 可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦 距时，镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次 操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。 高倍镜的使用方法 （1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。 （2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明 低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。 （3）调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1 圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)如果视野的亮度不合适， 可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换玻片标本时，必须顺时 针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。 显微镜使用的注意事项： （1）持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。 （2）轻拿轻放，不可把显微镜放置在实验台的边缘，以免碰翻落地。（3）保持显微镜的清洁，光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。 （4）水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，如果沾污应立即擦净。 放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，防止压坏玻 片或碰坏物镜。不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要 任意拆卸各种零件，以防损坏。使用完毕后，必须复原才能放回镜 箱内，其步骤是：取下标本片，转动旋转器使镜头离开通光孔，下 降镜台，平放反光镜，下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈， 推片器回位，盖上外罩，放回实验台柜内。
细菌、酵母菌、霉菌和放线菌接种方法和形态观察
注意：由于实验内容较多，所以我们只要把蓝色字体部分写在实验报告上即可，黑体字部分自己看一下。由于11-13周为教学质量检查周，督导随时可能来查，所以预习报告还是要写。 细菌、酵母菌、放线菌和真菌接种方法和形态观察 一、微生物的接种技术 1 目的 1.1学习掌握微生物的几种接种技术 1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节 2 基本原理 将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上的操作技术称为接种。接种的关键是严格进行无菌操作。常用的接种方法有斜面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种和固体接种等。 3 实验材料 3.1 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、玫瑰暗黄链球菌、曲霉、荨麻青霉的斜面培养物 3.2 培养基：营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基及高氏1号培养基的斜面和平板3.3 试剂：5ml无菌生理盐水试管 3.4 仪器与其他用品 酒精灯、记号笔、试管、橡胶塞、试管架、接种环、培养皿、超净台等。 4 操作步骤 4.1 斜面接种法 斜面接种法主要用于传代活化、纯化培养、鉴定或保存菌种。通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，液体培养基中的纯培养物接种到斜面培养基上。操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行。 4.1.1准备工作 将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在外侧，接种管在内侧，斜面向上管口对齐，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。 4.1.2接种环灭菌 右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍。 4.1.3拔管塞和烧烤试管口 用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。
实验五 放线菌与真菌形态结构观察
实验报告 课程名称：环境微生物学实验实验类型：综合实验 实验项目名称：放线菌与真菌形态结构观察 学生姓名：专业：环境工程学号： 同组学生姓名： 指导老师： 实验地点：实验日期：2018 年10月16日 一、实验目的和要求 1.学习并掌握放线菌(链霉菌)，真菌(酵母、霉菌)形态结构的观察方法，认识并理解它们的形态特 征。 2.熟练掌握显微镜的使用。 二、实验内容和原理 1.放线菌 放线菌，是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆 生性较强大的原核生物。因在固体培养基上呈辐射状 生长而得名。大多数有发达的分枝菌丝。菌丝纤细， 宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。可分为：营养菌 丝，又称基内菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的 可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌 丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝。 2.真菌 [1]酵母菌：为单细胞真核生物。呈圆形、卵形、椭圆形或柠檬型。各体直径比细菌大几倍到 几十倍。菌落大而厚，湿润光华，颜色多为乳白色、灰白色、似细菌落。繁殖方式包含无 性繁殖(芽殖或裂殖)与有性繁殖(形成子囊与子囊孢子)。 [2]酵母菌的出芽生殖：在细胞的一端初生小突起，如芽状，逐渐增大。细胞核一分为二，其 中一个进入小突起，经细胞壁缢缩。芽体与母细胞脱离，形成新个体。若芽体不脱离母体 而有继续生出新芽，而芽细胞聚集形成芽簇，芽簇细胞伸长呈丝状或藕节状，称做假菌丝。 [3]美兰染色法：美兰是一种无毒性染料，氧化型呈蓝色，还原型呈无色。活细胞具有较强还
原能力，使美兰由蓝色变成无色。染色后，酵母活细胞无色，死细胞或代谢作用微弱的衰 老细胞呈蓝色或淡蓝色。 [4]酵母菌肝糖粒碘液染色：肝糖粒是酵母细胞的内含物，属于碳源及能源性贮藏物。用碘液 染色，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。 [5]霉菌：由菌丝体构成，分为基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝长到一定阶段分化产生繁殖菌 丝。由繁殖菌丝产生孢子。菌丝和孢子的宽度比细菌和放线菌大几倍到几十倍。制片时滴 加乳酚油，防止干燥，可保持菌丝体原形。 [6]黄曲霉：唯一种常见的腐生真菌，多见于发霉的粮食、蔬菜 及水果。形态上有明显的分生孢子结构，分生孢子梗从足细 胞上生长出来，往上延伸膨大呈顶囊，顶部有一至二层结构， 分别为出生小梗及次生小梗。回曲霉在成熟时还可以产生黄 曲霉毒素，为黄曲霉的剧毒代谢产物，为强致癌物。 [7]青霉：唯一种常见的腐生植物，多见于发霉的粮食、蔬果。 形态上具有帚状的分生孢子(包含包生孢子梗、梗基、小梗、 分生孢子)。青霉常被应用于有机酸及抗生素的生产。 [8]黑根霉：亦称面包需或匐枝根霉，常出现于发霉的面包、米饭等食物上，瓜果腐烂。出现 黑斑与具有关。具有匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢了囊、包囊孢子。黑根霉常用于果胶酶、 淀粉酶的生产。黑根霉的接合孢子是黑根霉的一种有性孢子，使由两条不同性别的菌丝特 化后形成配子囊，配子囊接合后形成接合孢子。 三、主要仪器试剂（必填） 1.菌种：链霉菌5天板培养物、黄曲霉4~5天平板培养物、青霉4~5天平板培养物、黑根霉7天平 板培养物、啤酒酵母2天培养物 2.示范片:黑根霉及其接合孢子 3.仪器及相关用品:乳酚油、碘液、0.1%美兰、50%酒精、蒸馏水、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、 解剖刀、酒精灯、显微镜、镜头油、擦镜纸、吸水纸、镜头洗液。 四、操作方法和实验步骤 1.放线菌形态结构的观察： 个体形态直接观察法: 观察青色链霉菌菌丝和孢子丝自然生长的性状，包括气生菌丝(粗、亮)，基内菌丝(细、暗)和孢 子丝的形状，如分枝状况及孢子丝卷曲等。 印片染色法: 微热载玻片印片→过火固定→石炭酸复红染色→lmin水洗→干燥→镜检(高倍镜和油镜)→绘 图说明。 2.酵母菌形态观察: 美兰染色法： (1)先在载玻片上加一小滴美兰染色液，用接种环挑取一环酵母菌液，与载玻片，上的美兰染色 液充分混匀，盖上盖玻片。 (2)将制片放置约 3 min，先低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区 别死活细胞。 肝糖染色法； (1)先在载玻片，上加一小滴碘液，用接种环挑取一环酵母菌液，与载玻片上的碘液充分混匀， 盖上盖玻片后镜检。 (2)在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒，通常菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色，并
酵母菌的形态观察与微生物大小的测定
酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别, 微生物测量技术,显微镜直接计数法 一、实验目的 1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。 2．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法. 3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。 二、实验原理 染色：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。 测量：微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。 目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 计数：每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。 在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。 下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数 因1ml=1cm3=1000mm3， 三、实验仪器 1 菌种: 培养48h的酵母菌． ２染色液和试剂：0.05%、0.1%吕氏碱性美蓝． 3 器材：显微镜、血球计数板、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、吸水纸、计数器、移液器、擦镜纸。 四、实验方法 １目微尺的校正： 把Olympus目镜的下部罗圈旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长10μm，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的实际长度。 用同法分别校正在低倍镜下和高倍镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。
酵母菌观察实验报告
酵母菌观察实验报告 酵母菌观察实验报告 引言： 酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中，对于人类的生活有着重要的 意义。本次实验旨在观察酵母菌在不同条件下的生长情况，并探究酵母菌的生 长与环境因素之间的关系。 实验材料与方法： 本次实验所需材料包括：酵母菌培养基、培养皿、显微镜、显微镜玻片、盖玻片、显微镜盖玻片夹、恒温箱、显微镜台、计时器等。 1.准备工作： 首先，将酵母菌培养基均匀地倒入培养皿中，待其凝固后将其放入恒温箱中， 保持温度在25℃左右。同时，将显微镜台调整到适合观察的高度，并将显微镜 置于台上。 2.观察酵母菌的生长情况： 将培养皿取出，用显微镜盖玻片夹取一小部分酵母菌涂抹在显微镜玻璃片上， 再将盖玻片盖在上面。将玻璃片放置在显微镜台上，调整显微镜的倍数，通过 显微镜观察酵母菌的形态和数量。 实验结果与讨论： 在观察过程中，我们发现了一些有趣的现象。首先，酵母菌的形态呈现为圆形 或椭圆形，直径约为5-10微米。其细胞壁坚韧，颜色呈现为淡黄色。在培养基中，酵母菌呈现出快速生长的特点，数量迅速增加。 接下来，我们进行了一系列的实验，探究了酵母菌生长与环境因素之间的关系。
首先，我们改变了培养基的酸碱度。将酵母菌培养基分为三组，分别调整为酸性、中性和碱性。结果显示，酵母菌在中性培养基中生长最为迅速，而在酸性和碱性培养基中生长较为缓慢。这说明酵母菌对于酸碱度有一定的敏感性，适宜的酸碱度有利于其生长。 其次，我们改变了培养基中的营养成分。将培养基分为两组，一组为富含营养的培养基，另一组为贫含营养的培养基。结果显示，富含营养的培养基中酵母菌生长迅速，而贫含营养的培养基中生长缓慢。这说明酵母菌对于营养成分的需求较高，充足的营养有利于其生长繁殖。 最后，我们探究了温度对酵母菌的影响。将培养皿放入恒温箱中，分别设置不同的温度条件。结果显示，酵母菌在25℃的温度下生长最为迅速，而在较高或较低的温度下生长较为缓慢。这表明酵母菌对温度有一定的适应性，适宜的温度有利于其生长发育。 结论： 通过本次实验，我们观察了酵母菌的生长情况，并探究了酵母菌的生长与环境因素之间的关系。实验结果显示，酵母菌对于酸碱度、营养成分和温度有一定的适应性，适宜的环境条件有利于其生长繁殖。这对于我们进一步了解酵母菌的生态特点和应用具有重要意义。 参考文献： 无
酵母菌的形态观察实验报告
酵母菌的形态观察实验报告 酵母菌的形态观察实验报告 引言： 酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体和植物表面等环境中。酵母菌具有重要的经济和科学价值，不仅可以用于食品发酵和酿造业，还是许多生物学研究的模式生物。本实验旨在通过对酵母菌的形态观察，了解其基本特征和结构。 材料与方法： 1. 酵母菌培养基：将酵母菌培养基粉末溶解于适量的蒸馏水中，加热煮沸，冷却后倒入培养皿中。 2. 酵母菌培养物：取一小块酵母菌培养物，用无菌的棉签将其涂抹在培养基表面。 3. 显微镜：使用高倍显微镜观察酵母菌的形态。 结果与讨论： 在显微镜下观察酵母菌的形态，可以发现其具有以下特征和结构。 1. 细胞形态： 酵母菌的细胞形态呈椭圆形或圆形，直径约为5-10微米。在培养基上，酵母菌会形成白色或乳白色的圆形菌落。 2. 细胞壁： 酵母菌的细胞壁是由多种多糖和蛋白质组成的，具有保护细胞的作用。在显微镜下观察，可以看到酵母菌细胞表面有一层透明的薄膜，即细胞壁。 3. 细胞核：
酵母菌的细胞核位于细胞的中央，呈椭圆形或圆形。细胞核内含有遗传物质DNA，控制着酵母菌的生长和繁殖。 4. 胞质： 酵母菌的胞质是细胞核周围的胶状物质，其中包含了许多细胞器。通过显微镜观察，可以看到胞质内有颗粒状的物质，这是酵母菌的细胞器。 5. 酵母菌的繁殖： 酵母菌的繁殖方式有两种：无性繁殖和有性繁殖。无性繁殖是通过酵母菌细胞的分裂和芽生产生新的酵母菌。有性繁殖则需要两个酵母菌细胞进行配子体的形成和融合。 通过本次实验，我们对酵母菌的形态有了初步的了解。酵母菌的单细胞结构和繁殖方式使其成为许多研究领域的理想模式生物。酵母菌的细胞壁和细胞核等结构对其生存和功能发挥起着重要作用。进一步的研究可以探索酵母菌在食品工业、生物制药和基因工程等领域的应用潜力。 结论： 通过对酵母菌的形态观察实验，我们对酵母菌的细胞形态、细胞壁、细胞核和胞质等结构有了初步的认识。酵母菌作为一种常见的单细胞真菌，具有重要的经济和科学价值。深入研究酵母菌的形态和生物学特性，将有助于我们更好地理解其功能和应用。
微生物形态观察
微生物形态观察 微生物形态观察是生物学中一项非常重要的技术，通过观察微生物的形态，可以了解微生物的种类、结构、生长繁殖特点以及生物活动规律等。本文将介绍微生物形态观察的方法和技术，并阐述其重要性和应用。 首先，微生物形态观察需要使用一些特殊的仪器和设备，如显微镜、解剖镜、培养箱等。其中，显微镜是最常用的仪器之一，它可以通过放大和聚焦光线，将微小的微生物形态展现出来。其次，要进行观察前准备，包括制备显微镜样本、染色、固定、制备培养基等。这些步骤需要根据不同的微生物种类和观察目的进行选择和调整。 然后，在观察时需要掌握一些技巧和方法。例如，通过切片或磨片的方法，将微生物样本制作成适合观察的片状样品；通过显微镜的使用，观察样品的形态、结构、生长特点等；通过对比观察不同条件下微生物的变化，了解微生物的生物活动规律等。 微生物形态观察在生物学研究中具有广泛的应用。例如，在环境保护领域，可以通过观察不同环境中的微生物种类和数量，了解环境的污染程度和治理效果；在医学领域，可以通过观察细菌、病毒等微生物的形态和结构，研究疾病的发生和发展机制，为疾病的治疗和预防提供依据。
总之，微生物形态观察是生物学中一项非常重要的技术，它可以帮助我们了解微生物的种类、结构、生长繁殖特点以及生物活动规律等。该技术还具有广泛的应用前景，将在未来的生物学研究中发挥越来越重要的作用。 微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察 微生物实验：显微镜的使用及微生物形态观察 微生物学是一门研究微小生物及其生命活动的科学，其中显微镜的使用和微生物形态观察是实验研究中不可或缺的技能。本文将通过实验一，详细介绍显微镜的使用方法及微生物形态观察技巧，为微生物学学习和研究提供帮助。 实验一的目的在于掌握显微镜的使用方法，学会观察微生物形态，进一步理解微生物的生长、代谢和繁殖等生命活动。为了顺利完成这个实验，我们需要准备以下实验材料和设备： 1、显微镜：选择适合观察微生物的显微镜，根据实验要求选择合适的放大倍数和物镜。 2、试样：干燥的微生物样品，如细菌、酵母、藻类等。 3、载玻片和盖玻片：用于放置和观察试样。 4、实验试剂和溶液：如染色剂、固定剂等，根据实验需要选择。
酵母菌的培养和观察实验方法与步骤
酵母菌的培养和观察实验方法与步骤 目的熟悉材料器具甜酒酿汁液，新奇步骤 1.观看酵母菌 (1)用滴管从甜酒酿的汁液中吸取一滴汁液，滴在载玻片上，用针 摊开，盖上盖玻片，在低倍镜下就能清晰地看到甜酒酿的汁液中悬 浮着很多酵母菌。再换高倍镜认真观看一个酵母菌，可以看到酵母 菌是椭圆形的单个细胞，细胞中有很多小颗粒，也有几个大的液泡(图示)。有的酵母菌的一端长出大小不同的突起，这是酵母菌的芽体。芽体成长脱落，就成为新的个体，有的芽体在从母体脱落前又 长出突起。这种繁殖方法叫出芽繁殖。 (2)在盖玻片一边加一滴碘液，从另一边用吸水纸把染液引入盖玻 片下。不久就能看到被染成棕褐色的细胞核和变成蓝紫色的淀粉粒。 2.培育酵母菌 (1)用蔗糖液培育在盛有100毫升的三角烧瓶里加5克蔗糖，煮沸。等到溶液稍稍冷却，加一小块鲜酵母，用玻璃棒搅拌匀称;再用 棉絮塞紧瓶口。然后把烧瓶放在 25～30℃的暖和地方，数小时后就 可见到溶液里有气泡产生，并散发出酒味。这是由于酵母菌正在把 糖分解成乙醇和二氧化碳。 (2)二三天后吸取溶液在显微镜下观看，就可看到已培育出大量酵 母菌。 留意事项 1.观看酵母菌时，视野里杂质较多，有淀粉粒、半分解的淀粉团
块、曲霉孢子和其他杂菌等等，只要把握住酵母菌的外形和体内具 有液泡，尤其是染色后体内具有褐色的核和蓝色的淀粉粒这些特点，就可以跟其他杂菌区分开来。 2.发酵在缺氧的环境里仍能良好地进行，不必为了增加氧气去搅 拌已放入菌种的培育液。 分析和争论 酵母菌是少数能在缺氧环境里生存较长时间的一种微生物，它属 于兼性菌类。在一般状况下进行有氧呼吸。如环境中有丰富的糖类，它进行缺氧呼吸。其过程如下： 1.C6H12O6+6O2rarr;6CO2+6H2O+ 2.87103兆焦(有氧呼吸) 2.C6H12O6rarr;2CO2+2C2H5OH+109103兆焦(缺氧呼吸) 建议培育酵母菌还可以采纳下列两种方法。 1.用乳酸、豆芽汁和蔗糖液培育 (1)取10克豆芽放入100毫升水中，加热煮沸半小时，盛起，用 细布过滤。在滤液里加5克蔗糖和5毫升乳酸，配成液体培育液。 (2)把鲜酵母半块或老面(发酵后晾干的面粉团)打碎，投入培育液中，放在黑暗暖和的地方，二三天后就可以培育出大量酵母菌。 2.用巴斯德培育液培育 酵母菌需要的无机养分来自外界环境。假如在培育液内适当增加氮、磷等元素，效果会更好。巴斯德培育液的配方如下： 蔗糖15克，碳酸铵1克，磷酸氢钾0.2克，磷酸钙0.02克，硫 酸镁0.02克，蒸馏水100毫升，培育方法跟上述的相同。
酵母菌形态观察实验报告单
酵母菌形态观察实验报告单 酵母菌形态观察实验报告单 班级日期姓名 实验目的 认识酵母菌的形态结构，掌握其观察方法。 实验内容 1．酵母菌菌落特征的观察 2．酵母菌细胞形态及芽殖方式 3．液泡的活体染色观察 4．肝糖粒染色观察 5．脂肪粒染色观察 实验原理 酵母菌是单细胞真菌，通常呈圆形、椭圆形或卵圆形，其菌落较大而厚，湿润，较光滑，颜色多为乳白、灰黄、淡黄、灰褐色，少见粉红或红色，偶见黑色。酵母菌个体比细菌大几倍到十几倍，在高倍镜下即能观察清楚。细胞内常有明显的细胞核及其内含物。无性繁殖以芽殖为主，在细胞的一端初生小突起如芽，逐渐增大，芽缢裂而与母细胞分离，形成独立的菌体。发生的芽如不立即脱离母细胞并继续出芽，则多数芽细胞集聚成芽簇。在陈旧培养中，芽簇细胞伸长成丝状，称假菌丝。 酵母菌的有性生殖形成子囊袍子，其过程由两个菌休细胞结合后，其中配合的细胞核分裂，形成2个、4个或8个子囊孢子。 实验器材 酿酒酵母培养物 显微镜、载玻片、盖玻片、接种针 0.1％美蓝液、中性红染色液、碘液 实验步骤 1．菌落特征的观察 取少量酿酒酵母划线接种在土豆平板培养基上，28—30℃养3—
5d。用肉眼观察菌落特征，项目包括菌落表面湿润或干燥、有无光泽、隆起形状、边缘形状、大小、颜色等。 2．酵母菌细胞形态及芽殖方式 在洁净载玻片上滴加一滴无菌水或0.1%美蓝液一滴，用接种环取酵母菌菌台少许与无菌水或美蓝液混匀，盖上盖玻片，即成为水浸片。用高倍镜观察酵母细胞形态及出芽情况。 染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察 3．液泡的活体染色观察 在洁净的载玻片上滴加一滴中性红染色液，用接种环取少量酿洒酵母与染液混匀，染色4—5min后，盖上盖玻片在显微镜下观察。中性红是液泡的活体 染色剂，当细胞处于生活状态时，液泡被染成红色，细胞质及核不着色；若细胞死亡，液泡染色消失，细胞质及核呈现弥散性红色。 4．肝糖粒染色观察 用酿酒酵母涂片，自然干燥后滴加1—2滴碘液，盖上盖玻片后在显微镜下观察。肝糖粒遇碘呈深红褐色。 5．脂肪粒染色观察 加一小滴苏丹黑于洁净的载破片上，挑取少许酵母菌体与之混匀，盖上盖玻片后镜检。脂肪粒呈黑色。 实验结果及讨论 1．实验结果 绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。 2．讨论 针对实验原理、步骤、现象进行讨论。
实验五 霉菌的形态观察
实验五霉菌的形态观察、微生物的测微与计数 一．实验目的 1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法,初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。 2。学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。 3.了解血球计数板的构造和使用方法。学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。 4。总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法. 二、实验原理 1。霉菌定义及用途 ⏹霉菌不是真菌分类中的名词,而是丝状真菌的统称. ⏹霉菌在自然界中广泛分布,与食品的关系密切,是人类在实践活动中最早利用的一种 微生物，如早期进行的酱和酱油的制作等。 ⏹霉菌也可以使食品发生腐败变质或产生毒素，影响人体健康甚至危及生命。 2.霉菌特征 ⏹霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产 生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。 ⏹菌丝体(尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据. ⏹霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约3—10um),常是细菌菌体宽度 的几倍至几十倍.因此，用低倍镜即可观察。 3。霉菌的菌落 ⏹松:由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松,因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛状、 棉絮状或蜘蛛网状； ⏹大：菌落形态较大，一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍，有时会长满整个 培养皿; ⏹干：外观干燥，不透明； ⏹挑：菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取; ⏹颜色:由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同，不同的霉菌菌落表面呈现不同的颜 色，菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致. 同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。 4、霉菌的菌丝形态 ⏹构成霉菌营养体的基本单位是菌丝.菌丝的宽度一般为3-10μm，比放线菌菌丝宽很 多倍,其菌可伸长并产生分枝。 许多分枝的菌丝相互交织在一起，称为菌丝体。