基线漂移问题
当流量和温度设置值改变时，可能会发生基线的波动或者漂移。。果在新的条件下运行之前系统还没有稳定，那么发生基线的波动是正常的。下面例子假设自从上次改变工作条件以后已经经过了足够长的稳定时间。波动和漂移经常会伴随噪声，这个问题我们会在后面讨论。
1 运行期间基线有规律的向上漂移或者向下漂移,这在程序升温过程中最常见。使用单一柱在中档到低档衰减条件下会出现上述问题。如果使用的是双柱系统，请核对信号模式是否设定为正确的柱补偿；或者使用电子柱补偿的单柱系统。柱补偿太小或者太大也是可能的。这种漂移可以通过色谱柱的彻底老化来降到最校在低温下工作会减小漂移但是会延长分析时间。使用温度上限较高的色谱等效柱也是可以的
2 基线不稳定；上下波动可能是系统某处有泄漏。检查隔垫的状况，必要的话就更换它。检查柱子的连接。如果是在连接检测器的色谱柱端发生泄漏，则两次运行之间的
保留时间是不变的，但是灵敏度降低了。如果是在进样口端发生泄漏，则灵敏度会降低，而保留时间会变长。
噪声就是快速的基线起伏，会加宽基线，使基线出现毛刺状的外观。噪声和毛刺是不同的；毛刺是孤立的事件，不像噪声基本是连续的，后面将讨论有关毛刺的问题。
有些噪声是任何检测器都不可避免的。在高衰减值的情况下噪声是看不到的，但是当衰减减小的时候就会显现出来。噪声会减小检测器的灵敏度，所以它应当尽可能的最小化。
1 在原来很平整的基线上突然出现了噪声考虑最近对系统所做的所有改变。比如减小了衰减，即使绝对的噪声水平没有改变，也会使噪声看起来更大。新的隔垫会因为释放出低分子量物质而产生噪声。如果随进样口温度降低噪声会减小，那么很有可能就是因为这个原因。使用高质量的隔垫并保存在不会使其受到污染的地方。载气受到污染如果最近载气瓶更换过，但是旧的瓶子仍然可用并且还余下部分气体，则可以试着使用旧的瓶子看噪声是否会减校如果新的载气被严重污染并使捕集阱达到了饱和，那么在更换或再生捕集阱之前，使用旧的气瓶基线可能只是改善一点。当使用氮气作为载气时这个问题是很常见的。解决方法是从可靠的供应商那里购买气体。
检测器气体被污染。风扇或者空调吹过GC 的气流可能会影响检测器出口的气这是可能的，尽管这不是噪声最可能的原因，因为检测器保护得很好。关掉气源或者屏蔽好检测器出口就可确定是否是这个问题。
检测器的连接松动或者它的信号线松动就会产生噪声。检测器被污染也产生噪声。
2 噪声逐渐增强到不可接受的水平这个症兆表明存在逐渐累积的噪声源，而不是如上面所讨论的突然变化。
火焰离子化检测器中容易逐渐积累沉积物。在极端的情况下，随着噪声水平的增加，还会产生毛刺。不完全燃烧的溶剂可能形成炭沉积物。因此应尽量避免使用这样的溶剂。如果
必须使用，则要做好经常清洗检测器的准备。
当来自色谱柱硅酮固定相的流失物在火焰中燃烧时就会形成氧化硅。为了最大限度地避免这个问题，就要使用固定相载量低的色谱柱、选择使用温度上限高的固定相、使用前彻底
老化色谱柱、分析的时候使用尽可能低的柱箱温度。拆开检测器使用一个小刷子来清除这两种沉积物。使用一种溶剂会帮助冲洗掉颗粒状物。
保留时间漂移是指在连续的运行中保留时间持续地增加或者减少。无规律的基线漂移将在后面作为保留时间波动来
1 在一系列分析运行中，保留时间突然增加,原因可能是载气流速或柱箱温度的问题；检查设定值是否正多次进样穿刺后隔垫漏气也是一个可能的原因。如果发生这样的情况，就要在运行分析之前更换隔垫。
载气瓶可能已经接近空了。
2 在一系列运行分析中，保留时间突然减小这很有可能是柱箱温度或者载气流速设定值改变引起的，。
在实际工作中，我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移（或上下波动）的原因，可能有以下几种：
1：柱子的平衡时间长。一般来说，新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。当然，柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂，那么比普通的简单的流动相（例如二元流动相：甲醇：水，乙腈：水）
2：系统存在漏点。如果系统存在漏点，那么出现基线向下漂移。需要检漏
3：PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有气泡导致基线不稳，只需要看仪器的压力是否稳定就好。
4：流动相脱气。如果流动相没有脱气，基线肯定是不稳的。
5：柱后气泡。在柱子后有气泡产生，导致检测器中的读数有波动。
6；PUMP密封不好。密封不好，也会导致PUMP头的气泡（好象不可能）和漏夜，基线当然不稳定了。
7：系统的环境。仪器的使用，如温度的变化，流速的变化以及梯度洗脱，当然基线漂移。8：单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染，能造成流量不准确，压力波动。故也会波动，漂移。
9：检测器污染或有杂质
二：基线不平原因很多，可根据谱图的表现分析：
一直上扬或下降型：柱环境平衡慢，pH不对，流动相酸挥发等，有时和梯度洗脱也相关；小幅缓慢波动（5-10min）：温度不稳；
较大幅的波动：考虑流动相不均匀；
很高很宽的峰：流通池有气泡或被污染；
无规则上下波动：如果是旧柱子，考虑柱子污染，不容易冲平。
检查出发点不外乎几点：柱子，流动相，柱温，检测器。
可通过更换条件检查哪里出了问题，看你说的像是流动相的问题，你看看不用TBA，用同样洗脱强度的乙睛-水行不行。
气相色谱小知识（很全面）
A所有组分峰变小
可能原因建议措施
1 进样针缺陷使用新针或无缺陷的针
2 进样后漏夜判断漏夜点，维修之
3 MAE UP过大：分流比过大调整气体流速和分流比
4 分析物质分子量过大，底挥发样品时提高INJ。OVEN（主要柱子的最高使
样品的汽化温度过低，或柱温度低用温度）
5 NPD被污染物（二氧化硅）覆盖更换铷珠
6 NPD温度过高（使用或环境温度），气体不纯更换铷珠：避免高温使用
7 不分流进样，分流阀关闭快：初始OVEN温高
8 检测器与样品不匹配
9 样品的挥发调整样品的的浓度或选择合适的溶剂
B 峰伸舌
峰伸舌多右色谱柱过载减小进样量（可能需提高仪器的sensitivty
使用大容量柱子：提高OVEN，INJ温度：
增大气体流速
C 峰高峰面积不重复
1 进样不重复，偏差大自动进样器：加强手动进样的练习
2 其他峰型变化引起的峰错位，干扰
3 基线的干扰
仪器系统参数设定的改变参数标准化，规范化
D 负峰
1 Detector有数据处理系统信号极性接反信号连接倒置
2 TCD中，样品导热系数大于载气导热系数选择数据处理中的“负峰处理”
3 ECD被污染，可能在正峰后跟随负峰清洗ECD，更换之（若有必要）
E样品的检测灵敏度下降
1色谱柱，衬管被污染，使活性物质灵敏度小将清洗衬管：用溶剂（优级纯甲醇）清洗色谱柱：更换之（如有必要）
2进样时样品渗漏（对易挥发物质更甚）查找渗漏点
3 在splite汽化进样中，OVEN初始温度过高用低于样品溶剂的初始温度;致使样品汽化后扩散加剧，导致撕沸点样品灵敏度下降使用高沸点溶剂
F 峰分叉
1 进样过激，不稳定，形成二次进样练习手动进样：使用自动进样器
2色谱柱安装失败重新安装
3 spliteless或柱头进样，样品溶剂的混合使用相同的溶剂
4柱子温度波动修理稳控系统
5 spliteless进样，量大，时间长。希望用“溶剂在毛细管色谱柱前端安装5米的去
效应“谱带浓缩时，溶剂的固定相的湿润性差活化，未覆盖固定液的毛细管
溶剂将在柱子中形成几米长，厚度不等的溶剂带
破坏正常的浓缩，使峰拉宽分叉
G 峰拖尾
1衬管，色谱柱被污染;有活性点清洗，更换之（如有必要）
2衬管，色谱柱安装不党，存在死体积注射甲烷，峰若拖尾，则重新安装
3色谱柱柱头不平用金刚砂切割，使之平
4固定相的极性指标与样品分析不匹配换匹配的柱子
5 样品流通路线中有冷井消除路线中的过低温度区
6衬管或色谱柱中有堆积切割碎屑清洗更换衬管;切除柱头10cm
7 进样时间过长缩短之
8分流比低增大分流比（至少大于20/1）
9进样量过高减小进样体积或稀释样品
10 醇胺，伯胺，叔胺和羧酸类易拖尾用极性大的色谱柱;样品衍生处理H保留时间漂移
1 温度变化检查柱温箱的温度
2气体流速变化注射甲烷，测定载气线速度
3进样口泄露检查进样垫;判断其他泄露处
4溶剂条件变化样品，标准品使用相同的溶剂
5色谱柱被污染切除柱头10cm;高温老化，清洗
I分离度下降
1色谱柱被污染方法同上
2 固定相被破坏（柱流失）更换之
3 进样失败检查泄露，维修之检查吹扫时间
检查温度的适应性;检查衬管
4样品浓度过高稀释;减少进样量;用高分流比
J溶剂峰拉宽
1色谱柱安装失败
2进样渗漏
3进样量高提高汽化温度
4分流比低提高分流比
5OVEN低
6 分流进样时，初始OVEN过高降低初始柱温，使用高沸点溶剂
7吹扫时间过长（不分流进样）定义短时间的吹扫程序
基线问题
A基线向下漂移
1 新安装的柱子，基线连续向漂移几分钟继续老化
2 检测器未达到平衡延长检测器的平衡时间
3 检测器或GC系统中其他部分有沉积物被烤出来清洗之
B 基线向上漂移
1色谱柱固定相被破坏
2 载气流速下降调整载气压力;清洗压力和流量调节阀
C噪音
1毛细管末插入检测器太深重新安装色谱柱
2 使用ECD，TCD气体泄露引发基线噪音检查，维修气路
3 FID ，NPD ，FPD燃气流速或燃气选择不当高纯燃气，调整流速
4进样口被污染清洗进样口;更换搁垫;更衬管中的玻璃纤维或硅烷化
5毛细管色谱柱被污染切除首端10cm;用溶剂清洗色谱柱;更换之
6检测器发生故障维修，更换之
7检测器电路发生故障联系生产商或维修机构（专业）
D Offset（基线位置的突然改变
1电源电压波动使用稳压器
2 电路接口处连接不好检查，清洗其接口处，拧紧接口
3进样口被污染
4色谱柱被污染
5毛细管末端插入检测器太深
6 检测器被污染
E毛刺
1 电磁干扰关闭电磁干扰源
2颗粒污染进入检测器
3气路密封松动，气体泄露拧紧松动的密封
4检测器内部电路接口或输入，输出信号接口松动检查，清洗，拧紧接口，更换之积尘或被腐蚀
F Wander（低频率的噪音）
1温度，压力等环境条件的波动找到环境因素变化与基线的关系，然后稳定之
2温度控制漂移测量检测器的温度
3 载气中含杂质（温度稳定时）更换载气或气体净化器
4进样口被污染
5毛细管被污染
6气体流速控制失灵清洗或更换气体
在实际工作中，我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移（或上下波动）的原因，可能有以下几种：
1：柱子的平衡时间长。一般来说，新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。当然，柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂，那么比普通的简单的流动相（例如二元流动相：甲醇：水，乙腈：水）
2：系统存在漏点。如果系统存在漏点，那么出现基线向下漂移。需要检漏
3：PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有气泡导致基线不稳，只需要看仪器的压力是否稳定就好。
4：流动相脱气。如果流动相没有脱气，基线肯定是不稳的。
5：柱后气泡。在柱子后有气泡产生，导致检测器中的读数有波动。
6；PUMP密封不好。密封不好，也会导致PUMP头的气泡（好象不可能）和漏夜，基线当然不稳定了。
7：系统的环境。仪器的使用，如温度的变化，流速的变化以及梯度洗脱，当然基线漂移。8：单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染，能造成流量不准确，压力波动。故也会波动，漂移。
9：检测器污染或有杂质
10：可能是改变波长后，氘灯能量不足，导致漂移。（一般是高波长区域），也可能是改变波长后，流动相吸收较大，导致漂移。（一般是低波长区域）
扫描的红外光谱图变得有很多毛刺，怎么办？
前段时间，实验室红外光谱仪扫描出的红外光谱图，毛刺非常厉害！仪器组的同事问我怎么办？
我首先怀疑的是水分干扰所引起的，问她是不是开除湿机足够时间。她说开除湿机足够时间了。再是我问她溴化钾是否干燥过，回答的也是。
我怀疑的是溴化钾没有完全干燥好，因为溴化钾没有干燥好的话，影响是最大的，因为扫描的溴化钾空白有毛刺，势必会造成待测样品的红外光谱图的毛刺。
我于是取了些溴化钾，用研钵将粗的溴化钾颗粒研细，再将其置于400摄氏度温度下干燥4小时，室温干燥条件下冷却。
通过我对溴化钾的干燥处理，再进行空白及样品扫描，问题解决了。
红外光谱的经验是：光谱毛刺，一般是水分惹的祸！
药物分析的方法学验证所要做到的事项（一）新药申报时，药品质量标准中分析方法必须验证；药物生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法必须进行验证；2005版药典中分析方法验证指导原则只规定了项目和基本方法而没有合格标准:附录XIX A；中国GMP(98)非常关注验证的过程,分析方法验证不完善是常见的问题
药物分析检验时药品生产的GMP的药物分析的方法学验证，是保证药物分析结果准确性的前提和基础，也是实现药物分析检测GMP的必然要素。
构成药物分析中的检测方法验证，这要涉及到以下些方面的内容：
1、分析方法验证成功的前提条件：
（！）仪器已经确认、校正并在有效期内（2）经过培训的人员（3）可靠稳定的对照品
（4）可靠稳定的实验试剂（5）确认受试溶液的稳定性，在规定时间内无降解。
2、分析方法学验证所要求验证的内容：（1）含量的测定（2）杂质的含量测定（3）药物的定性鉴定（4）药物的含量均匀度测定（5）药物的微生物检测（6）药物的细菌内毒素的检测
验证内容：
准确度：准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。
测定回收率R（recovery）的具体方法可采用加样回收试验法来进行测定。加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。数据要求:规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次
精密度：（重复性、中间精密度和重现性精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。
（1）重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价
（2）中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度
（3）重现性(reproducibility)不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度
（4）数据要求：需报告SD，RSD和可信限。
专属性：指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度的度量
?通常通过分析含有加了杂质、降解产物、有关化学物质或安慰剂成分的样品，将所获分析结果与未加前述成分之样品的测试结果进行比较，两组测试结果之差即专属性
?鉴别反应---应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别，不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均应呈负反应?含量测定和杂质测定---色谱法和其他方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图中应标明各组份的位置，色谱法中的分离度应符合要求?杂质可获得的情况下，对于含量测定，试样中可加入杂质或辅料，考察测试结果是否受干扰；对于杂质测定，也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质间是否得到分离
检测限：检测限系指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量。它是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。
?非仪器分析目视法：用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量
?信噪比法:用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限
?也可采用标准差法：空白值＝0时；①测定背景10次以上，求出标准差σ
②将σ乘以三倍；③在工作曲线上求出3σ相对应的浓度X，即为方法的检出值；空白值不等于0；①测定背景10次以上，求出标准差σ；②将σ乘以三倍；③在工作曲线上求出3σ相对应的浓度X；④将求得的对应浓度值加上空白值即得该方法的检出限
定量限（1imit of quantitationLOQ）
?指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求
?常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定方法的实际测定下限
定量限：
指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求
?常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定方法的实际测定下限线性：在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。线形通常用最小二乘法处理数据求得回归曲线的斜率（Slope）来表示。数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供
相关系数、y截距（是检定的可能偏差）、回归斜率及方差等参数，应列出回归方程数和线性图
注意：做线性时，应注意尽量做的点多一点、线性浓度范围宽一点，这样做的好处是：当你在准确度考察时，你做的回收率考察的浓度就大些，配制溶液时就容易操作些，否者，在你做线性考察时，你做的线性浓度范围不宽，那么你在考察回收率时，你采用加入法考察时的浓度变化范围不宽，操作浓度很难控制，造成实际操作困难。我碰到一个在做方法学研究的人，由于她在考察线性时，做的线性浓度不大，在做回收率时，加入后的量造成回收率浓度超出线性考察范围的浓度，我说那样是不行的。因为在做分析计算时又恰恰用了线性关系来计算，结果肯定是值得怀疑，结果是不能令人肯定的！（这是经验总结）
范围：指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高、低限浓度或量的区间。范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。
?原料药和制剂含量测定范围为80%-120%；制剂含量均匀度范围为70%-130%；杂质测定应为被测杂质汇报值到限度的120%；溶出度应为测定范围的±20%，如规定了限度范围，应为下限的-20%至上限的+20%，例如缓释片1h<20%,7h>70%,则验证范围定为0-90%。
耐用性：指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度;如果方法易受到分析条件的影响，或要求苛刻，应注明。典型的变动包括：分析溶液的稳定性，提取时间等。
药物分析的方法学验证所要做到的事项（二）
含量测定方法验证的接收标准
?容量分析法：用原料药精制品(含量>99.5％)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于0.2％；进行回收率试验。回收率一般在99.7～100.3％之间
?UV法：用适当浓度的精制品进行测定，其RSD一般不大于1％。制剂的测定，回收率一般应在98％～102％之间；线性：吸光度A一般在0.2～0.7，浓度点n＝5。用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，r应达到0.9999(n＝5)，方程的截距应近于零含量测定方法验证的接收标准
?HPLC法：
?要求RSD<2％，回收率98％～102％之间。
?线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点n应为5～7，用
浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r应大于0.999，截距应趋于零
分析方法验证步骤：
?验证方案的制订
?验证目的、方法改进背景、
?提供的原料药和产品、仪器概要、试剂、对照品
?待验证的方法，项目，合格标准
?实施人员的培训
?参考文献
?验证的实施
?收集完整的验证过程记录和原始图谱
?复核
?验证报告
?评价该方法是否通过验证
方法确认和方法转移
?对新产品的方法验证通常在产品开发阶段完成；大规模生产后的验证通常包括方法确认和方法转移
?分析方法确认是指当国家标准或药典标准拟变化或已经变化时在本实验室进行的对所涉及产品是否适用的确认实验
?确认之前应对新旧方法进行核对，标明所有变更细节
?检验样品的信息（批号、规格),变更项目的接收标准
?确认试验的样品通常包括正常产品、稳定性产品
?方法转移指检验方法由转移方转移至接收方时进行的实验。
?流动相PH（±0.5)
?流动相组成(有机相±5%）
?色谱柱（同一厂家的三个批号，或两个不同厂家（同固定相和填充物，尺寸）
?温度（20-25C)和流速(±10%）
?检测波长(±5nm)
检验项目和验证内容总结
?鉴别试验除专属性、耐用性外，其它都不要求。
?杂质的限度检查除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求
?杂质的定量测定除检测限外，其它都要求。
?含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求
如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化
漂移现象
1．温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定
2．流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等
3．柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡
快速变化现象
1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定
2．泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
3．流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
色谱工作者应具备的良好习惯
1、按仪器说明书的规程操作
验收仪器时，不仅要清点所有零部件是否齐全，还要检查仪器说明书是否齐备，并妥善保存这些资料。在独立操作仪器之前，一定要认真阅读有关说明书，并严格按规程操作。这是做好仪器分析的前提条件，而且一旦仪器出了问题，也好与厂商交涉。
2、准备一份色谱柱测试标样
色谱柱性能是保证分析结果的关键。新买的色谱柱，首先要用测试样品评价其性能。如果用色谱柱厂商提供的测试条件测试而结果不合格时，就可要求退货或换货。更重要的是，此后的使用过程中色谱柱性能会变化，当分析结果有问题时，可以用测试标样测试色谱柱，并将结果与前一次测试结果相比较，这有助于确定问题是否出在色谱柱，以便于采取相应的措施排除故障。
3、及时更换色谱柱密封垫
石墨密封垫漏气是GC最常见的故障之一。一定不要在不同的柱上重复使用同一密封垫，即使同一根柱卸下重新安装时，最好也要换新密封垫，这样能保证更高的工作效率。如果装上色谱柱后发现漏气而再更换密封垫，就要花费更多的时间，即使旧垫仍能使用，也要比原来多拧紧一些，弄得不好就会拧断毛细管色谱柱。
4、使用纯度合乎要求的载气
载气一定要用高纯级的，以避免干扰分析和污染色谱柱或检测器。要知道一根色谱柱的价格是一瓶高纯氮气或氢气价格的20倍以上。如果因为要省钱而用普通气体作载气，可能是丢了西瓜拣了芝麻。检测器用辅助气体最好也用高纯级的。虽然在灵敏度要求不高时，可用普通气体，但其代价可能是检测器被污染。
5、定期更换气体净化器填料
变色硅胶可据颜色变化来判断其性能，但分子筛等吸附有机物的净化器就不好用肉眼判断了。所以须定期更换，最好3个月更换一次。如果硅胶与分子筛装在一起，则更换硅胶时也要更换分子筛。
6、使用性能可靠的气体减压器
新的减压器在使用时一定要试漏，在长期的使用过程中也要经常检漏，这是发现问题的一个好习惯。如果不注意这个问题，轻则造成气体浪费，重则出现安全问题，到时悔之晚矣。
7、定期更换进样衬垫
进样口衬垫漏气是GC常见故障之一。另外，衬垫的老化降解也会给分析带来干扰。比如其碎屑掉进汽化室内也可能导致鬼峰。至于多长时间换一次衬垫，则要看所分析的样品性质和分析条件而定。常规实验室一般每天更换一个进样衬垫。无论如何，一个衬垫的连续使用时间不要超过一周。
8、及时清洗注射器
保持注射器清洁能避免样品记忆效应的干扰。更换样品时要清洗，用同一样品多次进样时也要用样品本身清洗注射器。一支注射器暂时不用时（比如下班），更要彻底清洗，否则残留其中的样品可能将针芯粘牢，造成注射器报废。使用自动进样器的用户也应注意此问题，最好是经常更换和清洗注射器。
9、定期检查并清洗进样衬管
仪器长期使用后，进样衬管内会有焦油状物质，这是样品中的不挥发成分造成的。此外还会有颗粒状物质积存（隔垫碎屑，样品中的固体物质）这些都会干扰分析的正常进行。因此要定期检查，及时清洗。注意，在衬管中填充一些经硅烷化处理的石英玻璃毛，既可提高样品的汽化效率，又能防止隔垫碎屑进入色谱柱造成堵塞。
10、更换零部件要逐一进行
修理仪器时，不要一次更换多个部件，那样会造成故障原因的判断失误。应该一次更换一件，经测试后再更换另一件。这样可能更便于准确地判断故障原因，同时避免不必要的开支。
11、做好仪器使用和分析记录并定期归档
这是仪器的履历，应逐日记录，包括操作者、分析样品及条件、仪器工作状态等等。一旦仪器出现问题，这是查找原因的重要资料。
高效液相色谱法含量测定的感受
做了很长一段时间的药物含量的测定，发现的问题也很多，心里的感想也不少，在此，在我我的私家空间里，我聊以感受，以促进自己的进步。
做药物含量的测定，采用高效液相色谱法，关键在于方法的重现性和重复性。而我们在做检测过程中，由于内、外在因素的影响，很难做到较好的重现
性和重复性。比如柱子的柱效降低问题、色谱柱的污染、色谱柱的塌陷、管路的污染和堵塞等，从而引起一系列的仪器的变化因素，造成对测量结果的准确度和精确度的影响。
由于不是专人做液相，所以有些人在使用后，没有去好好的冲洗柱子，造
成了柱子和管路的污染的累积。当你去去使用时，你会发现，柱子的柱效一下子下来、上不去了，柱压力也居高不下，从而影响了药物保留时间的不重现，保留时间有时候发生波动和漂移，大多没有冲好柱子的情形的结果是：保留时间发生负向漂移，也就是保留时间慢慢的减小，随即而带来了药物成分峰面积的减小。我在仪器分析的时候，我最强求的是仪器柱子的冲洗工作和保养，但是别人可就不这样做，你不是主管，别人也就不一定听你，有何办法。我不是推卸责任，要是我在管理，我一定会首抓的是仪器的维护和保养的。在企业用仪器检测分析的不足之处是：由于检测结果的急迫需要，所以就在检测时，就不注重色谱柱流动相在柱中的平衡，也是造成药物保留时间波动和漂移的根本原因了。其实保留时间的漂移和波动，也间接说明和暗示了流速的波动的变化的可能性。所有这些均影响色谱数据结果的准确性和精确性。
我特意考察了同种药物浓度的同一溶液，在不同间接时间后进行测定峰
面积，发现保留时间负向减小时，其峰面积均减小的结论。所以以此来检测时，结果误差在0.5%左右，不能正确和较好的接近真实结果。对于这种情形：大多数企业要求你教快得到分析结果的数据，你一般是先进对照品溶液，平行称量两份药品，各进三针，然后是再进待测品溶液，也是平行称量两份药品，各进两针。这样的话，势必是先测的对照品峰面积偏大，而后测的待试品溶液的峰面积小，从而引起测量结果的数据偏小。我想：在柱子不好的情形下，但是还可满足或没有好柱子而不得不检测下的情形,那就讲求检测的技巧了,我认为:最好先进待试品溶液,中间再进对照品溶液,相对来说,可以减少误差的大小.是不是最好方法
中的好方法了.
事情的发展还是应该做到能避免的尽量避免之,那就要求我们在实验中,
要注重仪器的保养和维护了,这是最有效的方法了.每天要养成良好的习惯,不管你有多忙,冲洗柱子不可少,不能敷衍了事.试剂过滤器和管路过滤器要定期用异丙醇或10%的硝酸溶液清洗;实验完后,特别是含盐流动相的,要先用10%的甲醇
水溶液清洗,至少40分钟以上,再用纯甲醇冲洗30分钟以上.这样才对你第二天的实验有所保证的,切记!
柱压不稳定的可能因素
我们在进行高效液相色谱分析时，最常常碰到的现象就是：色谱柱压的不停的上下波动的现象，而柱压的不停的上下波动造成的结果就是：一是主峰保留时间也产生不同程度的上下波动，二是主峰的峰面积也不断变化，所以结果是：含量检测结果不准确。
考察色谱柱压不停的上下波动的现象的原因可能有多种，可能是色谱仪器泵的本身泵压不稳定；也可能是排压阀的密封圈破损，引起些微的密封不严实；也可能管路的杂质部分堵塞；也可能是流动相还没有完全平衡；或者是柱温的波动等。
所以在考察柱压波动时，可以综合以上因素，进行各个排除
更换流动相的最佳方法
在做高效液相色谱分析时，最常碰到的事情：就是要换流动相和水或有机熔剂，在更换流动相和水或有机熔剂时，你是怎么做的呢？
我的经验就是：（反相色谱柱）在试验前，我首先是（1）排上次冲柱子管道中的有机溶剂，让有机溶剂和气泡从排液管排出，再冲10%甲醇水，冲足甲醇水达到基线平衡后，换流动相，再打开排液阀，排出管道中甲醇水，关闭排液阀门，让流动相冲至基线平衡。（2）实验完毕后，移走流动相，换上10%甲醇水，打开排液阀，排出管道中的流动相，冲10%甲醇水近1小时，再换上色谱甲醇，打开排液阀，排出10%甲醇水，再冲色谱甲醇40分钟。
我上面那样做的目的是，能让管道中的流动相尽快替换，节约交换时间，达到快速平衡和排液，提高了工作效率！更容易达到系统平衡，最大优点是：可防止试验中色谱系统的漂移，特别是药物保留时间的漂移！
基线漂移问题
当流量和温度设置值改变时，可能会发生基线的波动或者漂移。。果在新的条件下运行之前系统还没有稳定，那么发生基线的波动是正常的。下面例子假设自从上次改变工作条件以后已经经过了足够长的稳定时间。波动和漂移经常会伴随噪声，这个问题我们会在后面讨论。 1 运行期间基线有规律的向上漂移或者向下漂移,这在程序升温过程中最常见。使用单一柱在中档到低档衰减条件下会出现上述问题。如果使用的是双柱系统，请核对信号模式是否设定为正确的柱补偿；或者使用电子柱补偿的单柱系统。柱补偿太小或者太大也是可能的。这种漂移可以通过色谱柱的彻底老化来降到最校在低温下工作会减小漂移但是会延长分析时间。使用温度上限较高的色谱等效柱也是可以的 2 基线不稳定；上下波动可能是系统某处有泄漏。检查隔垫的状况，必要的话就更换它。检查柱子的连接。如果是在连接检测器的色谱柱端发生泄漏，则两次运行之间的 保留时间是不变的，但是灵敏度降低了。如果是在进样口端发生泄漏，则灵敏度会降低，而保留时间会变长。 噪声就是快速的基线起伏，会加宽基线，使基线出现毛刺状的外观。噪声和毛刺是不同的；毛刺是孤立的事件，不像噪声基本是连续的，后面将讨论有关毛刺的问题。 有些噪声是任何检测器都不可避免的。在高衰减值的情况下噪声是看不到的，但是当衰减减小的时候就会显现出来。噪声会减小检测器的灵敏度，所以它应当尽可能的最小化。 1 在原来很平整的基线上突然出现了噪声考虑最近对系统所做的所有改变。比如减小了衰减，即使绝对的噪声水平没有改变，也会使噪声看起来更大。新的隔垫会因为释放出低分子量物质而产生噪声。如果随进样口温度降低噪声会减小，那么很有可能就是因为这个原因。使用高质量的隔垫并保存在不会使其受到污染的地方。载气受到污染如果最近载气瓶更换过，但是旧的瓶子仍然可用并且还余下部分气体，则可以试着使用旧的瓶子看噪声是否会减校如果新的载气被严重污染并使捕集阱达到了饱和，那么在更换或再生捕集阱之前，使用旧的气瓶基线可能只是改善一点。当使用氮气作为载气时这个问题是很常见的。解决方法是从可靠的供应商那里购买气体。 检测器气体被污染。风扇或者空调吹过GC 的气流可能会影响检测器出口的气这是可能的，尽管这不是噪声最可能的原因，因为检测器保护得很好。关掉气源或者屏蔽好检测器出口就可确定是否是这个问题。 检测器的连接松动或者它的信号线松动就会产生噪声。检测器被污染也产生噪声。 2 噪声逐渐增强到不可接受的水平这个症兆表明存在逐渐累积的噪声源，而不是如上面所讨论的突然变化。 火焰离子化检测器中容易逐渐积累沉积物。在极端的情况下，随着噪声水平的增加，还会产生毛刺。不完全燃烧的溶剂可能形成炭沉积物。因此应尽量避免使用这样的溶剂。如果 必须使用，则要做好经常清洗检测器的准备。 当来自色谱柱硅酮固定相的流失物在火焰中燃烧时就会形成氧化硅。为了最大限度地避免这个问题，就要使用固定相载量低的色谱柱、选择使用温度上限高的固定相、使用前彻底 老化色谱柱、分析的时候使用尽可能低的柱箱温度。拆开检测器使用一个小刷子来清除这两种沉积物。使用一种溶剂会帮助冲洗掉颗粒状物。 保留时间漂移是指在连续的运行中保留时间持续地增加或者减少。无规律的基线漂移将在后面作为保留时间波动来 1 在一系列分析运行中，保留时间突然增加,原因可能是载气流速或柱箱温度的问题；检查设定值是否正多次进样穿刺后隔垫漏气也是一个可能的原因。如果发生这样的情况，就要在运行分析之前更换隔垫。 载气瓶可能已经接近空了。 2 在一系列运行分析中，保留时间突然减小这很有可能是柱箱温度或者载气流速设定值改变引起的，。
ERP基线校正
52Brain独家发布 王一峰 西南大学 ERP数据分析中的基线校正就是一个线性平移。说来简单，内中却有很深的学问。下面从几个方面简单谈一下个人经验： 1 分析时程： 一般而言基线选取不短于分析时长的1/5，由于ERP分析时程多在1000ms之内，基线则多选为100-200ms。分析时程的延长对整个分析过程中参数的选取都产生影响，其中，基线延长也是必须的。就个人经验来看，基线一般没有超过500ms的。除基线选取外，其他参数如滤波、去除伪迹等也要选取适当的参数。由于分析时程增加，受到慢电位漂移及其他伪迹干扰的可能性也增大；此时可以增加伪迹的范围，比如将去伪标准从±80调到±100. 基线的长度也不宜过短，10ms的基线不能保证锁时之前是平稳的。即使是简单的视听觉任务，基线的长度原则上也不应短于50ms。 2 基线位置： 通常基线选取位于刺激呈现前100-200ms。 如果从反应开始分析就比较复杂：做出反应时与动作相关的ERP成分还存在，此时波形还是有一定斜率的，因此单纯选取反应后的200ms或其他时长作为基线有时效果并不好。如果不同条件的反应没有差异，或者说反应后的波形可以重叠到一起，采用反应后基线是可以的。如果不同条件的反应过程存在差异，如混有决策信心等因素，反应阶段的波形就可能不一致。此时，选取反应后基线不是最佳选择。此时，可以在反应后较长时间内（如500ms）检查波形是否恢复平稳。原则上，反应锁定时也是可以用刺激锁定的基线的。由于刺激诱发的心理反应不同，可能在较长时间段内都存在差异，此时，只能假定刺激呈现前的心理过程是一致的，其后的过程就不适宜作为基线了。 还有一种就是灵活基线，说白了就是峰峰检验对应的取基线方法。最近几年ERP分析中用峰峰检验并不多，一个重要原因就是它的使用有很大的局限性。严格地说，前后两个峰值应该具有同样的地形分布，这样才能确定二者确实是相互影响的。宽松一点，前后两个峰值的地形分布应该相似，或者说，所分析的电极点都在两个峰值的主要效应区域内。如果用头皮前中部的N2和中后部的P3做峰峰检验是不合适的。一旦确定了可以做峰峰检验，则前一个峰值就可以作为后一个峰值的基线。在此基线基础上，可以观察到后一个峰值的差异波分布在哪些位置。而如果应该进行峰峰检验时没有用前一个峰值去校正，则后一个峰值处的差异波就会有误差。以前中部的P2和N2为例，如果P2波幅很大，我们往往看到N2的电压值是正的。见过很多人纠结于这个具有正值的负向偏转应该叫什么名字，其实，只要用P2作一下基线校正，N2自然就是负值了。这里要补充一个重要问题：ERP分析中没有绝对电压值，所有值都是减去基线后的相对值。因此，ERP的主要任务是检验差异，而不可建立一个绝对刻度。 3 基线平稳问题： 很多人会纠结于实验的基线不稳，这可能由很多原因造成。 其一，叠加次数过少，噪音过大。此时基线往往产生较大波动，直观感觉就是很乱。这个在可能的范围内增加每个条件的叠加次数就可以解决。
基线问题
跑基线的过程一般我们会理解为HPLC系统的平衡过程，我们的色谱柱要经常更换流动相，检测不同的物质，造成固定相中吸附的各类杂质等，色谱柱固定相和流动相淋洗过程中需要适时的平衡过程。系统未平衡，直接采样图谱中出现鬼峰、基线漂移，将导致你的检测失败。当然，还有许多其他导致基线不平的原因。 基线漂移的原因 流动相的基线常会有漂移现象，即使是等度洗脱。当然，如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话，完全可以忽略。 1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。）可以通过控制柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图。 2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 可以通过使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂解决。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。 3、流通池被污染或有气体，用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N 的硝酸。（不要用盐酸） 4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线），取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 5、流动相配比不当或流速变化，更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时，用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成，检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。 9、使用循环溶剂，但检测器未调整。重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。 10、检测器没有设定在最大吸收波长处。将波长调整至最大吸收波长处 基线噪音（规则的）原因、解决方法 1、在流动相、检测器或泵中有空气，流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 2、漏液，检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。 3、流动相混合不完全，用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂。 4、温度影响（柱温过高，检测器未加热），减少差异或加上热交换器。 5、在同一条线上有其他电子设备，断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 6、泵振动，在系统中加入脉冲阻尼器 基线噪音（不规则的）原因、解决方法 1、漏液，检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。 2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成，检查流动相的组成。 3、流动相各溶剂不相溶，选择互溶的流动相。 4、检测器/记录仪电子元件的问题，断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。 5、系统内有气泡，用强极性溶液清洗系统。
分光光度计基线校正的原理和方法
【原创】关于分光光度计基线校正的原理和方法 对于双光束 分光光度计 而言在使用前必须要做基线校正（也称为基线记忆），对于此项工作的原理和 操作方法许多使用者的认识不尽相同；为此谈谈我的认识。 （一）为何要做基线校正？ 众所周知、光度计的光学系统基本是由光源（氘灯、钨灯） 一单色器（光栅、狭缝） 一检测器（光敏 二极管、光电倍增管）等三部分组成的。在我们使用的波长区域中（一般紫外可见仪器均在 190 nm 110Onm 范围里，）上述部件在不同的波长下的响应值（光源的发射强度、单色器的色散强度、检测 器的放大倍数）均不相同；通俗地说、即使没有样品，仪器如果不做基线校正，那么在 190nm 至110 Onm 的范围中，吸光值或透过率不会是一条直线，这是 尽管上图反映的是单光束的能量图，但在基线未校正状态下，即使改用双光束测量方式来扫描一个样 品，其所得到的图谱或吸光值也是不可信的。 （二）被校正的基线种类和用途 （1）系统基线： 所谓系统基线就是仪器固有的波长范围的总基线；例如一台仪器出厂设计的波长全程范围是 190nm 至 110Onm ，那么它的系统基线就是这个范围。一般来讲，作为分析人员对一台仪器做全程扫描测试是比45.000 -a.2oo eoo.oo 种客观的物理现象，如下图; 4C.000 30.000 20.000 10.000 190.00 细 DOO SOOOO
较少见的；之所以要做系统基线的目的一般是将仪器的光学系统的响应值校正到基本一致；这就类似马拉松赛跑一样，只要大家在同一起跑处（注意：不是起跑线）比赛，前后差几米出发无所谓。 （2）用户基线： 所谓用户基线就是分析者自己设定的测量波长区域的一段基线；由于这是分析所需要的区域，为了保证测试的准确性，故用户基线的校正是非常重要和必要的；这就类似百米赛跑一样，运动员要在同一个起跑线上比赛而不能抢跑，否则无法准确计算成绩。 （三）基线校正的方法 （1）系统基线： 系统基线的校正较为简单，一般情况下样品室内不放样品，仅做光学系统的校正；如果一定要使用全波段的测量那另当别论。同时需要注意的是：系统基线无需经常校正，一般半个月或一个月校正校正一次即可。对有的仪器来说，系统基线校正过于频繁反而会造成基线漂移严重。 （2 ）用户基线校正： 正确的校正方法是：两只比色杯盛有空白溶液分别放置在样品及参比光路中，校正波长范围要大于分 析波长范围；例如、分析设定范围为220nm?500nm，那么校正波长就要设定为210nm?510nm ;等 待校正结束后再将波长设定回到原来的220nm?500nm范围。这种校正方法的优点是：如果校正波长 与分析波长完全吻合一致，有可能在校正后的基线两端出现大的噪声；如果校正范围大于实际分析范围并掐头去尾后可以提高分析精度。我将这种校正方法起名为豆芽菜原理”，目的是便于记牢；（因为 我们吃豆芽菜时均要掐头去根，仅吃中间部分，故以前的饭馆将炒豆芽这道菜称为炒掐菜”；对不起、跑题了）。关于这种校正方法，许多使用者往往不知晓或忽略掉了，在此顺便介绍给版友。 值得注意的是，有的仪器操作者在做基线校正时，参比一侧不放参比溶液，也就是用空气来做参比对照。这种方法在可见区对有的样品也许有时影响不大，但在紫外区影响就会很明显了。严格的说，用空气做参比所测得的结果不是真正意义上的校正光谱。 （四）基线校正的注意事项 （1）基线校正时要保证仪器有一定的预热时间 （2 ）每更换一种参比溶液后均要重新做基线校正 （3）如果参比溶液的吸光度大于样品的吸光度值时测试结果会出现负值，此时要考虑使用何种溶液做基线校正了。 （4）做基线校正时要考虑试剂的使用波长范围问题，因为有的试齐恠某个波长以下的吸光度值会无限大，这时去做校正会超出仪器的有效量程范围，无法得到真正的结果。关于试剂的使用波长范围，目前一般在试剂瓶的标签上会有标注。我有个简单资料表供大家参考如下：
分光光度计基线校正的原理和方法
【原创】关于分光光度计基线校正的原理和方法 对于双光束分光光度计而言在使用前必须要做基线校正（也称为基线记忆），对于此项工作的原理和操作方法许多使用者的认识不尽相同；为此谈谈我的认识。 （一）为何要做基线校正？ 众所周知、光度计的光学系统基本是由光源（氘灯、钨灯）—单色器（光栅、狭缝）—检测器（光敏二极管、光电倍增管）等三部分组成的。在我们使用的波长区域中（一般紫外可见仪器均在190nm～1100nm范围里，）上述部件在不同的波长下的响应值（光源的发射强度、单色器的色散强度、检测器的放大倍数）均不相同；通俗地说、即使没有样品，仪器如果不做基线校正，那么在190nm至110 0nm的范围中，吸光值或透过率不会是一条直线，这是一种客观的物理现象，如下图； 尽管上图反映的是单光束的能量图，但在基线未校正状态下，即使改用双光束测量方式来扫描一个样品，其所得到的图谱或吸光值也是不可信的。 （二）被校正的基线种类和用途 （1）系统基线： 所谓系统基线就是仪器固有的波长范围的总基线；例如一台仪器出厂设计的波长全程范围是190nm至1100nm，那么它的系统基线就是这个范围。一般来讲，作为分析人员对一台仪器做全程扫描测试是比
较少见的；之所以要做系统基线的目的一般是将仪器的光学系统的响应值校正到基本一致；这就类似马拉松赛跑一样，只要大家在同一起跑处（注意：不是起跑线）比赛，前后差几米出发无所谓。（2）用户基线： 所谓用户基线就是分析者自己设定的测量波长区域的一段基线；由于这是分析所需要的区域，为了保证测试的准确性，故用户基线的校正是非常重要和必要的；这就类似百米赛跑一样，运动员要在同一个起跑线上比赛而不能抢跑，否则无法准确计算成绩。 （三）基线校正的方法 （1）系统基线： 系统基线的校正较为简单，一般情况下样品室内不放样品，仅做光学系统的校正；如果一定要使用全波段的测量那另当别论。同时需要注意的是：系统基线无需经常校正，一般半个月或一个月校正校正一次即可。对有的仪器来说，系统基线校正过于频繁反而会造成基线漂移严重。 （2）用户基线校正： 正确的校正方法是：两只比色杯盛有空白溶液分别放置在样品及参比光路中，校正波长范围要大于分析波长范围；例如、分析设定范围为220nm～500nm，那么校正波长就要设定为210nm～510nm；等待校正结束后再将波长设定回到原来的220nm～500nm范围。这种校正方法的优点是：如果校正波长与分析波长完全吻合一致，有可能在校正后的基线两端出现大的噪声；如果校正范围大于实际分析范围并掐头去尾后可以提高分析精度。我将这种校正方法起名为“豆芽菜原理”，目的是便于记牢；（因为我们吃豆芽菜时均要掐头去根，仅吃中间部分，故以前的饭馆将炒豆芽这道菜称为“炒掐菜”；对不起、跑题了）。关于这种校正方法，许多使用者往往不知晓或忽略掉了，在此顺便介绍给版友。 值得注意的是，有的仪器操作者在做基线校正时，参比一侧不放参比溶液，也就是用空气来做参比对照。这种方法在可见区对有的样品也许有时影响不大，但在紫外区影响就会很明显了。严格的说，用空气做参比所测得的结果不是真正意义上的校正光谱。 （四）基线校正的注意事项 （1）基线校正时要保证仪器有一定的预热时间 （2）每更换一种参比溶液后均要重新做基线校正 （3）如果参比溶液的吸光度大于样品的吸光度值时测试结果会出现负值，此时要考虑使用何种溶液做基线校正了。 （4）做基线校正时要考虑试剂的使用波长范围问题，因为有的试剂在某个波长以下的吸光度值会无限大，这时去做校正会超出仪器的有效量程范围，无法得到真正的结果。关于试剂的使用波长范围，目前一般在试剂瓶的标签上会有标注。我有个简单资料表供大家参考如下：
高效液相色谱基线的各种问题44560
高效液相色谱基线的各种问题 L、基线漂移 原因解决方法 1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） 1、控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图 2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。 3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸） 4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） 4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 5、流动相配比不当或流速变化 5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 8、使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。 9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 10、将波长调整至最大吸收波长处 M、基线噪音（规则的） 原因解决方法 1、在流动相、检测器或泵中有空气 1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 2、漏液图2、见第三部分。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。 3、流动相混合不完全3、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂 4、温度影响（柱温过高，检测器未加热） 4、减少差异或加上热交换器 5、在同一条线上有其他电子设备 5、断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 6、泵振动6、在系统中加入脉冲阻尼器 N、基线噪音（不规则的） 原因解决方法 1、漏液图1、见第三部分。检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。 2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 2、检查流动相的组成。 3、流动相各溶剂不相溶3、选择互溶的流动相 4、检测器/记录仪电子元件的问题 4、断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。
关于分光光度计基线校正的原理和方法
关于分光光度计基线校正的原理和方法 对于双光束分光光度计而言在使用前必须要做基线校正（也称为基线记忆）， 对于此项工作的原理和操作方法许多使用者的认识不尽相同；为此谈谈我的认 识。 （一）为何要做基线校正？ 众所周知、光度计的光学系统基本是由光源（氘灯、钨灯）—单色器（光栅、狭 缝）—检测器（光敏二极管、光电倍增管）等三部分组成的。在我们使用的波长 区域中（一般紫外可见仪器均在 190nm～1100nm范围里，）上述部件在不同的 波长下的响应值（光源的发射强度、单色器的色散强度、检测器的放大倍数）均 不相同；通俗地说、即使没有样品，仪器如果不做基线校正，那么在 190nm至 1100nm的范围中， 吸光值或透过率不会是一条直线， 这是一种客观的物理现象， 如下图； 尽管上图反映的是单光束的能量图，但在基线未校正状态下，即使改用双光束测 量方式来扫描一个样品，其所得到的图谱或吸光值也是不可信的。 （二）被校正的基线种类和用途 （1）系统基线：
所谓系统基线就是仪器固有的波长范围的总基线； 例如一台仪器出厂设计的波长 全程范围是 190nm 至 1100nm，那么它的系统基线就是这个范围。一般来讲， 作为分析人员对一台仪器做全程扫描测试是比较少见的； 之所以要做系统基线的 目的一般是将仪器的光学系统的响应值校正到基本一致； 这就类似马拉松赛跑一 样，只要大家在同一起跑处（注意：不是起跑线）比赛，前后差几米出发无所谓。 （2）用户基线： 所谓用户基线就是分析者自己设定的测量波长区域的一段基线； 由于这是分析所 需要的区域，为了保证测试的准确性，故用户基线的校正是非常重要和必要的； 这就类似百米赛跑一样，运动员要在同一个起跑线上比赛而不能抢跑，否则无法 准确计算成绩。 （三）基线校正的方法 （1）系统基线： 系统基线的校正较为简单， 一般情况下样品室内不放样品， 仅做光学系统的校正； 如果一定要使用全波段的测量那另当别论。同时需要注意的是：系统基线无需经 常校正，一般半个月或一个月校正校正一次即可。对有的仪器来说，系统基线校 正过于频繁反而会造成基线漂移严重。 （2）用户基线校正： 正确的校正方法是：两只比色杯盛有空白溶液分别放置在样品及参比光路中，校 正波长范围要大于分析波长范围；例如、分析设定范围为 220nm～500nm，那 么校正波长就要设定为 210nm～510nm；等待校正结束后再将波长设定回到原 来的220nm～500nm范围。这种校正方法的优点是：如果校正波长与分析波长 完全吻合一致，有可能在校正后的基线两端出现大的噪声；如果校正范围大于实 际分析范围并掐头去尾后可以提高分析精度。我将这种校正方法起名为“豆芽菜 原理”，目的是便于记牢；（因为我们吃豆芽菜时均要掐头去根，仅吃中间部分， 故以前的饭馆将炒豆芽这道菜称为“炒掐菜”；对不起、跑题了）。关于这种校正 方法，许多使用者往往不知晓或忽略掉了，在此顺便介绍给版友。 值得注意的是，有的仪器操作者在做基线校正时，参比一侧不放参比溶液，也就 是用空气来做参比对照。这种方法在可见区对有的样品也许有时影响不大，但在 紫外区影响就会很明显了。严格的说，用空气做参比所测得的结果不是真正意义
怎么处理气相基线漂移
怎么处理气相基线漂移 在GC 中使用程序升温时常常会出现基线漂移的现象。这种现象通常有以下几个原因：柱子流失、进样垫流失、进样器或检测器污染、气体流速的变化。如果使用高灵敏度检测器，即便是微弱的柱流失或系统污染都可能带来显著的基线漂移现象。为了提高定性和定量分析的可靠性，应尽可能的降低或消除基线漂移。 下面主要从四个方面来介绍一下基线漂移问题： 一、问题来自柱子流失还是系统污染？ 最简单的方法就是把柱子从色谱仪上取下，堵住检测器的入口，再观察在程序升温时基线的漂移情况。 1、如果基线不稳，请参考下方的“如何降低检测器带来的基线漂移？”； 2、如果基线是稳定的，用一小段熔融石英管把进样器和检测器连接起来，走一个升温程序，观察基线漂移情况： 2.1、如果基线不稳，请参考下方的“如何降低进样器带来的基线漂移？” ； 2.2、如果基线稳定，把柱子重新装上，走同样的升温程序，来确定是不是柱子流失带来的基线漂移。 二、如何降低样品和进样器带来的基线漂移？ 柱子上如果有高分子量不挥发性物质残留，那么在程序升温时就容易产生基线漂移，因为这些物质的保留较强，在柱子中移动缓慢，常常采用重新老化的方法将这种强保留组分从柱子上赶出，但这种方法增加了固定液氧化的可能性；此外，还可以使用溶剂冲洗的方法：（冲洗
之前请阅读柱子的使用注意事项）；也可以选用保护柱消除柱子污染于未然。 如果是进样器被污染造成基线漂移，可以通过更换进样垫、衬管和密封圈来解决，同时用溶剂冲洗进样口，维护完毕之后，用一段熔融石英管将进样器和检测器连接起来，进一针空样，以确认进样器已经干净。 三、如何降低检测器带来的基线漂移？ 由检测器带来的基线漂移通常是由补偿气或者燃气当中少量的烃类物质引起的，使用高纯气体净化器处理补偿气或者燃气可以减少这种基线漂移；使用高纯气体发生器可以改善FID 的基线稳定性；正确的检测器维护，包括定期的清洗，都可以减少这种漂移。 四、如何降低柱子流失带来的基线漂移？ 在使用新柱之前，按照以下方法老化可以使柱流失降到最低：用高于实验操作温度20℃或者用低于柱子的最高操作温度10-20℃（使用两者中较低者）来老化，长时间低温老化相对于短时间高温老化有利于降低柱子的流失，如果在载气当中含有少量的氧气或者水分或者气体管路漏气，在高温条件下，固定液就容易被氧化，从而造成柱流失，带来基线漂移。一旦固定液被氧化，必须使用高纯载气老化数小时，才有可能使基线趋于水平，这种对固定液的破坏是无法弥补的，所以如果有氧气连续通过柱子，即便是再老化之后基线将再也无法降到最低水平。因此，在实验过程中，应在气体管路当中使用高质量的氧气/ 水分过滤器，同时用高质量的电子检漏仪严格检漏。
加速度基线校正问题探讨
加速度时程积分中的基线校正问题探讨 1引言 目前，地震反应分析中所采用的地震波源于真实地震动的数据采集和地震动的人工合成。地震动采集的数据大都以加速度时程的形式给出，而速度和位移时程通常由加速度积分得到。但强震仪记录的不仅是地震时纯粹的地面运动信息，还包含复杂的噪音，其中的低频噪音会导致加速度时程出现基线漂移[1]。基线漂移对加速度时程本身的影响很小（一般不超过峰值加速度的2%）,但通过积分求速度、位移时程时，基线的漂移被逐步放大，从而对速度、位移时程产生很大的影响[2]。因此，在使用加速度记录时，一般需要对其进行基线校正。 2加速度基线漂移的原因及其影响 对于数字强震仪而言，导致加速度基线漂移的原因主要有传感器的磁滞现象、传感器的背景噪声以及传感器的倾斜等[3]。 传感器的磁滞效应主要源于传感器的物质疲劳。Iwan等人通过对美国凯尼公司生产的PDR-1和FBA-13型强震仪的性能研究发现，当加速度超过一定界限时，相应记录的基线会发生跳跃现象。尽管这种现象对加速度本身影响很小，但通过积分放大，会对速度时程和位移时程产生较大影响。Iwan等人认为，这种现象可能是由于传感器系统机械或电路的微小磁滞作用引起的。对于PDR-1和FBA-13型强震仪，这种磁滞效应在加速度≥50gal时开始出现。 背景噪音与记录场地条件密切相关，主要特征是频率丰富的随机波形。背景噪音导致加速度记录的初始值不为零，从而对加速度基线产生影响。 传感器的倾斜主要发生在近场区强震观测台。在地震中，近场区域可能伴随强烈的地表变形（地表破裂、垂直抬升、水平位移等），从而导致传感器发生倾斜。传感器的倾斜可能导致加速度记录的基线漂移。 强震地面运动反应谱以及峰值加速度（PGA）、峰值速度（PGV）、峰值位移（PGD）、地面永久位移（D-last）在理论研究和工程实践中应用十分广泛，因此研究基线漂移对上述参数产生的影响很有必要。相关研究表明，基线漂移对峰值加速度时程影响很小，但通过积分求速度，基线漂移被放大；当通过积分求位移时程时，基线漂移被进一步放大，往往与真实的位移时程相差甚远。下面以Elcentro波（EW）原始记录为例来简要说明这个问题。为了简便起见，本节假定Elcentro波基线漂移是加速度记录中包含的线性趋势造成的，在此基础之上采用最小二乘拟合进行基线校正。需要注意的是通过去这种方法进行基线校正得到的结果未必是真实可信的，此处只是为了简要说明基线漂移在积分过程中被逐步放大的问题。此处积分采用线性加速度法。作出加速度、速度、位移校正前后比较图，分别见图2.1~2.3。具体matlab程序见附录。
高效液相常见问题及解决
高效液相色谱仪使用中常见问题及解决方法 高效液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对 于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 常见问题及解决方法 高效液相作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 1 柱压问题 柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI（针对Waters高效液相色谱仪）之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。压力过高、过低都属于柱压问题。 1.1 压力过高 这是高效液相在使用中最常见的问题，指的是压力突然升高， 1、一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。 2、(1).首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查； 3、(2).打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI以下，过滤白头正常，在检查； 4、(3).把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。问题无法解决可考虑更换色谱柱。 5、流速设定不正确：可重新设定正确流量。 6、流动相配比不正确：不同配比的流动相其黏度系数不相同，较高黏度的流动相相应的系统压力也大，如果可能可更换黏度较小的溶剂或重新设定配比。 7、系统压力零点漂移：调节压力传感器的零点。 8、阻尼器堵塞：拆下后进行超声波清洗或更换新的阻尼器。
液相常见问题
液相的常见问题： 一、在实际工作中，我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移（或上下波动）的原因，可能有以下几种： 二、1、柱子的平衡时间长。一般来说，新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。当然，柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂，那么比普通的简单的流动相（例如二元流动相：甲醇：水，乙腈：水，，，，，，） 三、2、系统存在漏点。如果系统存在漏点，那么出现基线向下漂移。需要检漏 四、3、PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有气泡导致基线不稳，只需要看仪器的压力是否稳定就好。 五、4、流动相脱气。如果流动相没有脱气，基线肯定是不稳的 六、5、柱后气泡。在柱子后有气泡产生，导致检测器中的读数有波动。 七、6、PUMP密封不好。密封不好，也会导致PUMP头的气泡（好象不可能）和漏夜，基线当然不稳定了。 八、7、系统的环境。仪器的使用，如温度的变化，流速的变化，，，，，，，以及梯度洗脱，当然基线漂移 九、8、单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染，能造成流量不准确，压力波动。故也会波动，漂移
十、9、检测器污染或有杂质 10、如果是紫外或二极管阵列检测器（PDA），排除以上原因还出现基线噪音大，就有可能是氘灯的能量不足了 二、主峰后面有很多杂质峰可能原因 1，仪器问题：最有可能的就是系统污染，尤其是管路，比如，入口单向阀或各接口处等有盐残留； 2，色谱柱问题：这个好办，换新的色谱柱，大部分能解决问题； 3，试剂试药问题：所用试剂、试药达不到色谱级别所需，或者不同批号不同厂家的东西都有可能影响，最直接影响的就是物质的纯度影响流动相的吸收； 4，梯度洗脱程序：梯度洗脱程序设置不合理，比如在某个时间段急剧变化； 5，其他：如配制方法不同，超声方法不同等。 如今，看似很简单的问题，在经过很长一段时间的摸索后发现，上述原因其实都是比较客观的，如果以上4点都解决不了，可以考虑以下原因：仪器本身功能上的区别导致。比如安捷伦低压梯度和高压梯度做的同样的东西，能重复出来，而且梯度峰都很小，甚至没有，而用岛津的低压和高压梯度仪器，所表现的就不一样了，具体原因，因只具有经验所得，所以目前只能作为讨论的一个话题，仅供各位参考。 三、冲洗液相管路
HPLC---基线漂移的各种问题及解决的方法
HPLC－基线漂移的各种问题及解决的方法 原因 解决方法 1柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） 1.1控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图 2流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2.1使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。 3流通池被污染或有气体 3.1用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸） 4 检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） 4.1取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 5流动相配比不当或流速变化 5.1更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 6柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6.1用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 7流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 7.1检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 8样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 8.1使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。 9使用循环溶剂，但检测器未调整。 9.1重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。 10检测器没有设定在最大吸收波长处。 10.1将波长调整至最大吸收波长处基线噪音（规则的） 原因 解决方法 1、在流动相、检测器或泵中有空气 1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 2、漏液。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。 3、流动相混合不完全。用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂 4、温度影响（柱温过高，检测器未加热） 4、减少差异或加上热交换器 5、在同一条线上有其他电子设备 5、断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 6、泵振动。在系统中加入脉冲阻尼器基线噪音（不规则的） 原因解决方法 1、漏液图1、见第三部分。检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪
几种去心电基线漂移算法的实现和比较
技术技术报告 Technology Report 几种去心电基线漂移算法的实现和比较 汪家旺1吴玲燕2杨涛3苑颐萍3林宛华4 1南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院（南京210000) 2南京医科大学生物医学工程研究所（南京210000) 3南京普澳医疗设备有限公司（南京210032) 4中南大学信息物理工程学院生物医学工程研究所(长沙410083) 内容提要：本文介绍了中值滤波、曲线拟合、高通滤波、形态学处理等几种不同的去心电基线漂移算法的实现。 通过对MIT/BIH数据库中36份数据的比较，发现在处理效果上，中值滤波和基于形态学的方法处理效 果都比较好，形态学结果比中值滤波的结果在正方向上略有偏移。高通滤波的方法对平整的S-T段的抬 升很明显，而曲线拟合在处理较大的漂移时，效果就不明显了。 关键字：心电基线漂移 The Implement and the Relative of Several Kinds of Arithmetic to Take Base-Line Excursion from ECG Signal YANGTao3 WANG Jia-wang2 WULing-yan1 YUANYi-ping4 LINWan-hua3 1N an-Jing Medical University Affiliated Jiangsu Renmin Hospital (Nanjing 210000) 2Institute of Biomedical Engineering，Nan-Jing Medical University (Nanjing 210000) 3Nan-Jing Pu-Ao Medical Equipment Company (Nanjing 210032) 4Institute of Biomedical Engineering, School of Info-physics，Central South University (Changsha 410083) Abstract: The paper introduce the implement of several kinds of arithmetic to take base-line excursion from ECG signal，including median filtering，curve fitting，high pass filtering and morphologic process. After comparing the processing result of 36 shares of MIT/BIH ECG data，we found that median filtering and morphologic process is better than else, the morphologic process has a little offset in positive direction comparing with median filtering; high pass filtering is obvious in raising smooth S-T segment; The result is unobvious when processing high base-line excursion using curve fitting. Key words: ECG，Base-line Excursion 文章编号：1006-6586(2008)06-0030-04中图分类号：R540.4+2 文献标识码：A 引言 心电信号中的基线漂移一般是由于人体呼吸、电极移动而产生，频率较低，一般在0.7Hz以下，属于低频干扰。由于基线漂移的频率与ST段的频率有重叠的部分，故漂移零电位的基线会对ST段产生重大影响，影响医生对心肌损伤或缺血等病变的判别。而在去除基线漂移时，也要尽量避免ST段等低频部分产生明显变形导致检测和分析失真。去除基线漂移的基本思想是：对ECG信号中漂移了的基线进行估计和提取，再将它从原始信号中减去，得到滤除漂移后的新信号。对滤波效果的判断主要是观察ECG的PR段是否与基线基本持平。 去除ECG基线漂移的方法有很多，但处理速度不尽相同，所以在实时和非实时系统的应用中有些区别。对于实时系统需要在处理速度和处理效果中找到最好的平衡点。下面比较了几种不同的算法，不仅在心电信号基线调整中有效，简单调整后也能应用于其他类型的信号预处理。 1中值滤波 简单的来说，中值滤波就是取该点前长度为N(取奇数）的一段数据，对这段数据进行排序，然后取中间 收稿日期：2008-03-28 作者简介：汪家旺，博士，主任医师，硕士生导师，南京市政府科技计划项目(项目编号：200701032)负责人；吴玲燕，硕士研究生; 杨涛，工程师；苑颐萍，高级工程师；林宛华，硕士研究生基 金项目：南京市政府科技计划项目（项目编号：200701032) ?30 <中国医疗器械信息> 2008年第14卷第6期Vol.14 No.6 ? 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved, https://www.360docs.net/doc/513901541.html,
基线噪音和基线漂移
l、基线漂移 原因 解决方法 1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） 1、控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图 2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。 3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸） 4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） 4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 5、流动相配比不当或流速变化 5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 8、使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。 9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。 10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 10、将波长调整至最大吸收波长处
m、基线噪音（规则的） 原因 解决方法 1、在流动相、检测器或泵中有空气 1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 2、漏液 2、见第三部分。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。 3、流动相混合不完全 3、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂 4、温度影响（柱温过高，检测器未加热） 4、减少差异或加上热交换器 5、在同一条线上有其他电子设备 5、断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 6、泵振动 6、在系统中加入脉冲阻尼器 n、基线噪音（不规则的） 原因 解决方法 1、漏液 1、见第三部分。检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。 2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 2、检查流动相的组成。 3、流动相各溶剂不相溶 3、选择互溶的流动相 4、检测器/记录仪电子元件的问题 4、断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。 5、系统内有气泡