地衣芽孢杆菌发酵过程
地衣芽孢杆菌发酵过程
2009-12-03 13:37:10 阅读21 评论0 字号：大中小
牛肉膏,蛋白胨液体培养基
初始Ph7.0、摇床温度35℃、摇床转速180r/min、
发酵时间,到生长对数期要24小时,一般40小时可以到最大生长曲线活菌数和产芽孢率测定采用稀释平板计数法；
菌体生长曲线的测定采用比浊法；
pH测定仪测定菌液pH；
以发酵后活菌数为衡量标准。
地衣芽孢杆菌应用的研究进展-中国饲料
地衣芽孢杆菌应用的研究进展-中国饲料
地衣芽孢杆菌的研究进展 山东宝来利来生物工程股份有限公司张菊*李 金敏张志焱李伟谷巍 摘要:地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一。近年来，国内外对于地农芽孢杆菌各方面应用的研究日益增多,主要对地衣芽孢杆菌的作用机理、饲料生产和环境防治中的应用做一综述。 关键词：地衣芽孢杆菌；作用机制；饲料；环境防治 Research Advances of Bacillus licheniformis Abstract: Bacillus licheniformis is one of more application potential in Bacillus strains. In recent years, all aspects of application to Bacillus are increasing. It was reviewed about main mechanism of action, feed production and environmental control applications of Bacillus licheniformis. Keywords: Bacillus licheniformis; mechanism; feed; environmental prevention 抗生素滥用引起的畜禽耐药性问题和食品安全问题日益严重，寻找安全可靠的抗生素替代
品成为人们关注的焦点。微生态制剂因其安全、无毒副作用及不污染环境等优点受到人们的关注，其中的有益菌能刺激肠道免疫器官生长发育，提高抗体水平，促进动物的生长，增加养殖效益。地衣芽孢杆菌是目前具有应用潜力的菌种之一，本文就地衣芽孢杆菌的作用机理、畜牧生产和环境防治中的应用做一综述。 1. 地衣芽孢杆菌的生物学特性 地衣芽孢杆菌为中生芽孢的革兰氏阳性需氧菌，它的最适生长温度大约为50℃，但也能在更高的温度下存活。酶分泌的最适温度为37℃。它可能以孢子形式存在，从而抵抗恶劣的环境；在良好环境下，则可以生长态存在。地衣芽孢杆菌是我国农业部2003年3l8号公告批准使用的饲料级菌株之一。与传统的益生菌、双歧杆菌和乳酸菌相比，地衣芽孢杆菌的活菌成份是芽孢休眠体，并具有耐高温、耐干燥、耐酸性、耐胆盐和人工胃液等特点（刘燕等，2002；全艳玲，2002）。 2. 地衣芽孢杆菌作用机制研究 地衣芽孢杆菌在医药和畜牧养殖方面具有较高的应用价值。具有调节动物微生态平衡，促
地衣芽孢杆菌文献综述
地衣芽孢杆菌的研究进展 应用生物科学一班，卜亚平，01142102 摘要：地衣芽孢杆菌在作用机理，饲料中应用，医药研究，环境污染防治研究，病虫害防治研究方面做一综述。 关键词：地衣芽孢杆菌，作用机理，饲料，医药，环境污染，病虫害防治。 地衣芽孢杆菌为中生芽孢的革兰氏阳性需氧菌，是芽孢杆菌中目前较具有应用潜力的菌种之一，具有调节动物微生态平衡，促进肠道有益菌生长，降低病原菌的数量，增加动物机体的抗病力，提高机体的免疫功能。在自然界分布非常广泛, 生理特性丰富多样 , 是土壤和植物微生态优势种群之一。它可产生多种抗生素, 包括脂肽类、肽类、磷脂类、多烯类、氨基酸类、核酸类物质, 对多种动、植物及人类病原菌起到很好的抑制作用。而且芽孢杆菌还具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性[ 1] 。因此, 芽孢杆菌被广泛应用于医药、农药、食品、饲料加工、环境污染治理等各个行业。本文就地衣芽孢杆菌在作用机理，饲料中应用，医药研究，环境污染防治研究，病虫害防治研究方面做一综述。 地衣芽孢杆菌( Bacillus licheniformis) 是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一。近年来, 国内外对于地衣芽孢杆菌各方面应用的报道日益增多。在医药、饲料加工、农药等行业 , 取得了较好的研究成果。根据文献显示, 关于地衣芽孢杆菌的专利有: 用地衣芽孢杆菌生产生物农药的方法; 地衣芽孢杆菌新菌株及其微生态制剂; 地衣芽孢杆菌 T1 菌株的术, 改变地衣芽孢杆菌 NCIB8061 a- 淀粉酶的耐温性和耐酸性酶的性质等。 1地衣芽孢杆菌的生物学特性 地衣芽孢杆菌是兼性厌氧菌，属于益生菌。细胞形态排列呈杆状，单生，细胞内无聚PHB颗粒芽孢形态，产生近中生的椭圆形芽孢，孢囊稍膨大；在肉质培养基上菌落为扁平，边缘不整齐，白色，表面皱褶，24小时后菌落直径3mm，适生长温度大约为 50℃但也能在更高的温度下存活。酶分泌的最适温度为37℃。可能以孢子形式存在，从而抵抗恶劣的环境；在良好环境下，则可以生长态存
地衣芽孢杆菌介绍
名称：地衣芽孢杆菌 英文名：PWD一1 (Baclicus lincheniformis PWD一1） 俗称：整肠生（地衣芽孢杆菌胶囊） 种属：芽孢杆菌科细菌 革兰氏染色性；为革兰氏阳性杆菌 细胞大小：0．8μm×（1．5～3．5）μm 细胞形态及特点：细胞形态和排列呈杆状、单生。细胞内无聚-β-羟基丁酸盐（P HB）颗粒 芽孢形态：产生近中生的椭圆状芽孢，孢囊稍膨大 培养特性：在肉汁培养基上的菌落为扁平、边缘不整齐、白色、表面粗糙皱褶，24h后菌落直径为3mm 生化形状：本菌有动力 地衣芽孢杆菌的作用机制是以菌治菌，活菌进入肠道后，对葡萄球菌、酵母样菌等致病菌有拮抗作用，而对双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、消化性链球菌有促进生长作用，从而可调整菌群失调达到治疗目的。可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。此外通过夺氧生物效应使肠道缺氧，有利于大量厌氧菌生长，造成肠道低氧环境，对肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、消化链球菌等有益健康的厌氧菌的生长繁殖有促进作用；对葡萄球菌、白色念球菌、酵母样菌等致病菌则有拮抗作用。通过这种双重作用可以调整肠道菌群失调，维持机体肠道微生态平衡，从而对肠道疾病达到治疗和预防的目的。 【性状】地衣芽孢杆菌高纯粉≥250亿／克水分≤10％ 【主要用途】 1、促进肠道内正常生理性厌氧菌的生长，调整肠道菌群失调，恢复肠道功能； 2、对肠道细菌感染具有特效，对轻型或重型急性肠炎，轻型及普通型的急性菌痢等，均有明显疗效； 3、能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖。 【适用对象】适用于细菌原因引起的肠道菌群失调症以及肠道需要保健的养殖动物。 【用法用量】添加在饲料中的量为：50～100克／吨（全价料），注意混合均匀。
枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌对生长猪生长性能、干物质、氮的消化率和排泄物中有害气体排放的影响
枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌对生长猪生长性能、干物质、氮的消化率和排泄物中有害气体排放的影响 摘要：在这项研究中，进行了2个实验，以评估在生长猪日粮中添加枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的作用。实验1，64头杂交猪（体重为26.70 ±0.50公斤），进行了35天的饲养试验（2头猪/圏，8圏/处理），其中以下为以玉米和豆粕为基础日粮的四种处理的比较：1）对照组（基础日粮）; 2）B 0.05（基础日粮+0.05% BioPlus 2B?）；3) B 0.1 (基础日粮+ 0.1% BioPlus 2B?) 4) B 0.2 (基础日粮+ 0.2% BioPlus 2B?)。试验期间，平均日增重（ADG）与日粮中的BioPlus 2B?)增加呈线性相关（P = 0.08）。此外，BioPlus 2B的含量增加，平均日采食量（ADFI）也随之增加。然而，当考虑到干物质（DM）和氮（N），在料肉比（G：F）或在全消化道表观消化率系数（CTTAD）没有线性或二次的关系。实验2，16头杂交公猪（体重为25.60± 0.10公斤），随机分组到实验1（1猪/圏，4圏/处理），各1/4头数按试验1的处理。每120h测量一次有害气体排放和排泄物中的pH值。从BioPlus 2B?组猪粪样中获得的氨气（NH3）排放量显著低于对照组（P ＜0.05），然而，添加BioPlus 2B?对硫化氢（H2S）和硫醇的排放量无影响。此外，pH值随时间下降，并且48小时后排泄物中的pH值，经B0.1和B0.2处理的猪显著高于其他组（P ＜0.05）。 ?2008 爱思唯尔BV公司保留所有权利。 关键词：枯草芽孢杆菌；地衣芽孢杆菌；消化率；生长性能；有害气体排放；猪1.简介 最近有人担忧关于抗生素耐药性和在畜牧使用微生态制剂导致了替代战略需求，以改善而不需要抗生素的动物生产和健康。乳酸菌，芽孢杆菌等被广泛用作人体微生态制剂。据报道，微生态制剂的使用带来健康上面的好处，调整胃肠功能紊乱包括腹泻，肠炎病，乳糖不耐症和抵抗痢疾杆菌或沙门氏菌感染（马德
地衣芽孢杆菌的作用机理及应用
地衣芽孢杆菌的作用机理及应用 一、形态特征 地衣芽孢杆菌(Bacillus Subtilis) 是芽孢杆菌属的一种，细胞大小0.8卩1.5?3.5)卩m，细胞形态和排列呈杆状、单生，细胞内无聚-伊羟基丁酸盐颗粒，革兰氏阳性杆菌。菌落为扁平、边缘不整齐、白色。为兼性厌氧菌。 二、作用机理 1 、生物夺氧 枯草芽孢杆菌为需氧菌，在生长过程中需要大量的氧气，进入动物肠道内，消耗大量的游离氧，降低肠道内氧浓度和氧化还原电势，改善了乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长环境，保持肠道微生态系统的稳衡，提高动物机体抗病能力，减少胃肠道疾病发生几率。 2、拮抗致病微生物，改善体内外生态环境动物饲喂芽孢杆菌 后，能显著降低肠道大肠杆菌、产气 荚膜梭菌、沙门氏菌的数量，使机体内的有益菌增加而潜在的致病菌减少，因而排泄物、分泌物中的有益菌数量增多，致病性微生物减少，从而净化体内外环境，减少疾病的发生 3、增强动物体的免疫功能枯草芽孢杆菌能促进动物肠道相关 淋巴组织处于高度 的“免疫准备状态”，同时使免疫器官发育加快，免疫系统成熟快
而早，T、 B 淋巴细胞数量增多，动物体液和细胞免疫水平提高。 4、产生营养物质枯草芽孢杆菌在动物肠道内生长繁殖，能产生多种营养物质如维生素、氨基酸、有机酸、促生长因子等，参与动物机体新陈代谢。 5、产生多种消化酶枯草芽孢杆菌能提高动物生产性能是其产生多种消化酶的一个重要体现。研究表明，枯草芽孢杆菌能产生多种消化酶，帮助动物对营养物质的消化吸收。芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶，如果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等，这些酶能够破坏植物饲料细胞的细胞壁，促使细胞的营养物质释放出来,并能消除饲料中的抗营养物质。 三、产品功效 1、环境污水处理、废物处理、景观水处理强效去除DOD 、COD 及TSS ，消除硫化氢、氨氮等臭味及气泡，降解有机质。 2 、生态畜牧业 A、畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖消除动物废料臭味，分解动物舍内的残渣，降解粪浆，消除臭味*本品能有效降解高分子物质为低分子物质，促进营养成分的吸收，提高饲料的利用率，同时还能抑制病害微生物的生长，提高动物的免疫力，增强动物的抗病能力，减少疾病的发生，提高成活率。 B 、水产养殖净化水质，有效降解水中有机质，改善水色，
地衣芽孢杆菌发酵豆粕的工艺优化及其应用
地衣芽孢杆菌发酵豆粕的工艺优化及其应用凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）病毒性疾病频发,严重影响了对虾养殖业在世界各地的发展。水产养殖业如今正遭受着水生动物病害带来的巨大损失,在一系列养殖水生动物病害的防治方法中,益生菌已取得广泛的应用。 基于本实验室的前期菌种筛选工作,得到了一株分离自凡纳滨对虾消化道的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,编号LV005,该菌株添加到对虾饲料中能有效提高对虾抗WSSV感染能力。豆粕经微生物发酵后其营养价值得到提高,可作为饲料当中鱼粉的替代物。 益生菌发酵豆粕可作为一种经济、实用、高效的新型益生菌饲料添加技术。本文对该株地衣芽孢杆菌发酵豆粕的工艺进行了优化,并考察了发酵豆粕在对虾养殖中的应用前景,主要包括以下研究内容:1豆粕实验室小试发酵工艺优化对 地衣芽孢杆菌LV005的豆粕固态发酵实验室小试工艺中豆粕的粒度和容器内堆料条件进行初步优化。 比较不同混匀方式对发酵豆粕中菌量计数的影响;比较不同发酵容器,豆粕粒径,堆料厚度对发酵豆粕菌浓度的影响。得到最佳条件:发酵后豆粕在PBS震荡1min能最大程度地释放其中的细菌以便后续计数;以4层报纸封口的50 ml离心管为发酵容器,采用经80目筛孔的豆粕颗粒和1.5 cm堆料厚度能获得最优的实验室小试发酵效果,豆粕菌浓度可达1.65×1010—1.76× 1010 cfu/g。 本研究为发酵豆粕实验室小试方法提供了技术支持。2地衣芽孢杆菌发酵豆粕条件的优化通过单因素实验和响应面实验对地衣芽孢杆菌LV005的固态发酵豆粕条件进行优化,得到最佳发酵条件:料水比1:0.8、浸泡水盐度0、发酵温度
地衣芽孢杆菌变异株发酵工艺研究[设计+开题+综述]
开题报告 生物工程 地衣芽孢杆菌变异株发酵工艺研究 一、选题的背景与意义 地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)属硬壁菌门（Firmicutes）、杆菌纲（Bacilli）、芽孢杆菌科（Bacillaceae）、芽孢杆菌属（Bacillus）。由于地衣芽孢杆菌安全性高、生长快速、抗逆性强、有高效的产酶能力、在较高温度下仍可存活等特点而被人们所广泛应用。近年来, 国内外对于地衣芽孢杆菌各方面应用的报道日益增多。在发酵产酶、医药、饲料加工、农药等行业, 取得了较好的研究成果。根据文献显示, 关于地衣芽孢杆菌的专利有: 用地衣芽孢杆菌生产生物农药的方法; 地衣芽孢杆菌新菌株及其微生态制剂; 地衣芽孢杆菌T1菌株的构建及其粗酶提取物的发酵生产; 利用基因突变技术, 改变地衣芽孢杆菌NCIB8061 a-淀粉酶的耐温性和耐酸性酶的性质等。 本实验室在经60Co照射后的东海香参中分离得到一株能高效分解东海香参的菌株A，对该菌进行形态学特征、生理生化指标、16S rDNA和MIDI全自动微生物鉴定等发现其为地衣芽孢杆菌。该菌株为突变株，因此对其在医药和产酶等功能方面的研究具有重大的意义。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题 （一）基本内容： 1.碳源种类对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 2.碳源量对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 3.氮源种类对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 4.氮源量对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 5.金属离子对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 6.初始PH值对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 7.接种量对地衣芽孢杆菌产蛋白酶发酵的影响 （二）拟解决的主要问题： 浒苔水解最佳条件摸索，检测指标的选择将成为主要问题 三、研究的方法与技术路线： （一）实验安排 以碳源种类、碳源量、氮源种类、氮源量、金属离子、初始Ph值、接种量为变量进行单
地衣芽孢杆菌活菌胶囊说明书
浙江京新药业股份有限公司 浙江京新药业股份有限公司 地衣芽孢杆菌活菌胶囊说明书 请仔细阅读说明书并按说明使用或在药师指导下购买和使用 【药品名称】 通用名称：地衣芽孢杆菌活菌胶囊 商品名称：京常乐 英文名称：Bacillus Licheniformis Capsule, Live 汉语拼音：DiYiYaBaoGanJunHuoJunJiaoNang 【成份】本品主要成份为地衣芽孢杆菌，每粒2.5亿活菌。辅料为乳糖、淀粉。 【性 状】胶囊内为白色或灰白色粉末。 【作用类别】本品为消化类非处方药药品。 【适应症】用于细菌或真菌引起的急、慢性肠炎、腹泻。也可用于其他原因引起的胃肠道菌群失调的防治。 【规格】每粒025克（2.5亿活菌） 【用法用量】口服，成人，一次2粒；儿童，一次1粒；一日3次；首次加倍。对吞咽困难者，服用时可打开胶囊，将药粉加入少量温开水或奶液混合后服用。 【不良反应】超剂量服用可见便秘。 【禁 忌】尚不明确。 【注意事项】 1.本品为活菌制剂，切勿将本品置于高温处，溶解时水温不宜高于40℃。 2.服用本品时应避免与抗菌药合用。 3.对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。 4.本品性状发生改变时禁止使用。 5.请将本品放在儿童不能接触的地方。 6.儿童必须在成人监护下使用。 7.如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。 【药物相互作用】 1.抗菌药与本品合用时可降低其疗效，故不应同服，必要时可间隔3小时服用。 2.铋剂、鞣酸、药用炭、酊剂等能抑制、吸附活菌，不能并用。 3.如与其它药物同时使用可能会发生药物相互作用，使用本品前请咨询医师或药师。 【药理作用】本品以活菌进入肠道后，对葡萄球菌、酵母样菌等致病菌有拮抗作用，而对双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、消化链球菌有促进生长作用，从而可调整菌群失调达到治疗目的。本品可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。此外通过夺氧生物效应使肠道缺氧，有利于大量厌氧菌生长。 【贮 藏】于室温条件下避光、干燥处保存、运输。 【包 装】聚氯乙烯固体药用硬片+药用铝箔，6粒/板×1板/盒；6粒/盒×3板/盒；12粒/板×1板/盒；12粒/板×2板/盒；12粒/板×3板/盒。 【有 效 期】自生产之日起，有效期为24个月 【执行标准】YBS00902008及《中国药典》2015年版三部 【批准文号】国药准字S2******* 【生产厂家】浙江京新药业股份有限公司
地衣芽孢杆菌
地衣芽孢杆菌 【菌种成分】地衣芽孢杆菌【菌种状态】原菌粉 【菌溶解性】可溶【菌种含量】有效活菌数≥2×1010cfu/g 【产品规格】2×1010cfu/g、5×1010cfu/g、1×1011cfu/g、2×1011cfu/g 【适用范围】制作有机肥料、生物肥料、饲料添加。 【产品概述】 地衣芽孢杆菌细胞形态和排列呈杆状、是芽孢杆菌科细菌，为革兰氏阳性杆菌，单生；可调整菌群失调达到治疗目的，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌；能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖。本公司生产的地衣芽孢杆菌具有繁殖快速、生命力强、安全无毒等特点。【产品功效】 种植、肥料制作： 1、用于种植可改善土壤团粒结构，提高土壤蓄水、蓄能、和地温，缓解重茬； 2、拌种使用可提高种子的出芽率和保苗率；预防种子自身的遗传病害，提高作物成活率，促进根系生长； 3、可提高作物抗病能力；抑制土壤中病原菌的繁殖和对植物根部的侵袭，减少植物中土传病害，预防多种害虫爆发； 4、可抑制有害菌的能力强；抑制生长环境中的有害菌的滋生繁殖，降低和预防各种菌类病害的发生； 5、促进作物生长，成熟，相对降低成本、增加产量、提高收入。 饲料添加: 1、用于饲料添加，可促进肠道内正常生理性厌氧菌的生长，调整肠道菌群失调，恢复肠道功能； 2、对肠道细菌感染具有特效，对轻型或重型急性肠炎、轻型及普通型的急性菌痢等，均有明显疗效； 3、能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖； 4、有效抑制有害病原菌在养殖品种体内的生长繁殖，控制动物细菌病和真菌病，对动物的肠道疾病预防效果尤其显著； 5、可减轻病毒危害：调节动物体内微生态平衡，增强免疫力和抗应激力，提高成活率8-20％。 【产品特点】 1、改善土壤微生态环境，促进土里结构形成，改良土壤质地； 2、刺激作物根系发育、促进作物生长，增加产量，改善作物品质； 3、减轻病虫害、降低农药残留，提高化肥利用率，降低硝酸盐含量； 4、耐高温：特有的抗高温活菌菌系，饲料添加中加工后饲料中仍保持活性； 5、常温下生长旺盛：本产品的活菌适应性强，从4℃开始就能生长，15-30℃高速生长繁殖，亦可用于水产中，能有效的起到净化水质和增强免疫力的作用； 6、高稳定性：对胃的酸性环境有很强的抵抗力，适应PH3.0-9.8，在高污染环境中保持特性不变 【用法用量】 种植、肥料制作（2×1010cfu/g）：
地衣芽孢杆菌
地衣芽孢杆菌 提高免疫力，促进动物生长，提高日增重； 抑制致病细菌，减少肠道疾病的发生，降低动物死淘率； 促进营养物质的消化吸收，提高饲料转化效率； 降低养殖场所内氨气、吲哚等有害气体的浓度，有效改善养殖环境。 活性成份：地衣芽孢杆菌 原料组成：地衣芽孢杆菌、复合酶、矿物质、氨基酸、维生素、稻壳粉。 产品特点： 1．精选芽孢杆菌稳定型菌株，以全新的深沉液体发酵技术和独特的包埋干燥工艺加工而成。产品中地衣芽孢杆菌以孢子形式存在，有耐高温最高耐受温度为115℃（2—4分钟)、耐酸碱、耐挤压和耐温度变化等特点，能够满足各种饲料加工的要求； 2．产品可产生多种酶类(如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶)及营养物质(如多种氨基酸和维生素类物质)； 3．孢子进人肠道后，在肠道上部能够迅速复活，复活率接近l00％。可直接添加到畜、禽、水产、特种经济动物、预混料等各类饲料中使用，水产养殖现场可直接水体投放。
作用机理： 1．产品含地衣芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制酶菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；调节畜禽及水产动物胃肠道菌群平衡，促进动物胃肠道有益微生物生长，抑制有害微生物繁殖，预防和治疗腹泻下痢、细菌性肠炎等胃肠道疾病。 2．地衣芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌养菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH 值，间接抑制其它致病菌生长； 3．刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力，提高生长速度； 4．地衣芽孢杆菌茵体自身合成α一淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用，可提高饲料的消化与吸收，降低饲料成本； 5．能合成维生素Bl、B2、B6、烟酸等多种B族维生素。提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。 6．分解粪便、残饵、生物残骸中有机物质，消除鱼塘、虾塘过多氨氮，减少动物粪便臭味和塘底淤泥污染度，改善圈舍卫生和池塘水质。 添加量：(克／吨)
高产碱性蛋白酶地衣芽孢杆菌的研究进展
高产碱性蛋白酶地衣芽孢杆菌的研究进展 杨金龙潘康成 （四川农业大学动物科技学院，雅安，8250014） 碱性蛋白酶（Alkaline protease）广泛存在于微生物中，最早发现在猪胰脏中，1913年Rhom首先将胰蛋白酶做为洗涤浸泡剂使用[1]。1945年瑞士的Dr.Jagg等发现了微生物碱性蛋白酶[2]，可用于洗涤剂，以致成为洗涤剂的主要添加剂之一，在丝绸，制革工业，饲料工业，动物食品加工中也有广泛用途[3]，由于市场的需求，高产、高效、耐高温、耐高碱的四高型碱性蛋白酶研究成为国内外当前的热点[4、5、6、7、8]。本文综述了我国有关地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶菌株的选育，酶生产工艺条件和碱性蛋白酶基因工程等三个主要方面的研究现状。 1 菌株选育的研究 1.1 从土样中筛选菌株 1994年冯清平等采集全国有关生态土样28份，分离筛选高产碱性蛋白菌株，其方法为：分别取土样各5g，放入增殖培养基中,60℃保温增殖12—15h,过滤，滤液置80℃水溶液中保温10min，冷却，取一定量的上清液，常规稀释涂布在分离平板上，50℃培养20—24h，测定水解圈直径与菌落直径比值大的菌落，经纯化，镜检后斜面保存，共挑选55株后再次进行复选，将初选获得的菌株进行摇床培养测定，反复比较，挑选出生长快,易过滤，性状好，酶活力较高的一株菌为实验菌株，将其接种在生孢子培养基上50℃培养72h，洗下孢子置80℃水浴中处理15min，然后稀释涂皿，挑选单菌落进行摇瓶培养,进一步选育出活力在45℃为1250u/ml的菌株53—A6[9]。 1999年胡承等在成都采集土样11个，经富集培养后，用专一性作用底物分离法，淘汰了大量不产蛋白酶的菌株，从11份样品中分离到124株产碱性蛋白酶的菌株，根据水解圈和菌落直径比值，选择了活力较大的56株进行摇瓶复选，经反复比较后，最终得到8株产酶活力超过1000u/ml,其中来自成都佳丰食品厂下水道的土样，编号JF—ld菌株产酶活力高达1400u/ml,且产酶稳定，发酵液澄清，粘度小[10]。 1.2 紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株 1995年薛林贵等以地衣芽孢杆菌53号菌为出发菌株，在原生质形成和再生的最佳条件下制备原生质体，并对原生质体进行了多次诱变处理，从大量突变株再次筛选最终获得了高产，稳定，耐高温的碱性蛋白酶产生菌株53—G38—6,产酶活力由1104U/ml提高到22080U/ml [11]。 2 酶生产工艺条件的研究 2.1 地衣芽孢杆菌A—57碱性蛋白酶提取新工艺 1993年周晓云等研究了以Na2SO4为主要盐析剂提取碱性蛋白酶的工艺，分别就Na2SO4加量，PH值和温度3个因素进行实验，得出Na2SO4最佳用量为25%，最佳PH值为8.5和最佳温度30℃，其中Na2SO4是影响盐析的主要因素，而PH值和温度的影响较小，由于Na2SO4的溶解度在低温下较小，因此，盐析温度最好控制在30℃左右，从而提出了用Na2SO4取代有严重恶臭味的（NH4）2SO4做盐析剂的新工艺路线[12]。 2.2 提高碱性蛋白酶生产效率的工艺条件
地衣芽孢杆菌应用的研究进展-中国饲料
地衣芽孢杆菌的研究进展 宝来利来生物工程股份菊*金敏志焱伟谷巍 摘要:地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一。近年来，国外对于地农芽孢杆菌各方面应用的研究日益增多,主要对地衣芽孢杆菌的作用机理、饲料生产和环境防治中的应用做一综述。 关键词：地衣芽孢杆菌；作用机制；饲料；环境防治 Research Advances of Bacillus licheniformis Abstract:Bacillus licheniformis is one of more application potential in Bacillus strains. In recent years, all aspects of application to Bacillus are increasing. It was reviewed about main mechanism of action, feed production and environmental control applications of Bacillus licheniformis. Keywords:Bacillus licheniformis; mechanism; feed; environmental prevention 抗生素滥用引起的畜禽耐药性问题和食品安全问题日益严重，寻找安全可靠的抗生素替代品成为人们关注的焦点。微生态制剂因其安全、无毒副作用及不污染环境等优点受到人们的关注，其中的有益菌能刺激肠道免疫器官生长发育，提高抗体水平，促进动物的生长，增加养殖效益。地衣芽孢杆菌是目前具有应用潜力的菌种之一，本文就地衣芽孢杆菌的作用机理、畜牧生产和环境防治中的应用做一综述。 1. 地衣芽孢杆菌的生物学特性 地衣芽孢杆菌为中生芽孢的革兰氏阳性需氧菌，它的最适生长温度大约为50℃，但也能在更高的温度下存活。酶分泌的最适温度为37℃。它可能以孢子形式存在，从而抵抗恶劣的环境；在良好环境下，则可以生长态存在。地衣芽孢杆菌是我国农业部2003年3l8号公告批准使用的饲料级菌株之一。与传统的益生菌、双歧杆菌和乳酸菌相比，地衣芽孢杆菌的活菌成份是芽孢休眠体，并具有耐高温、耐干燥、耐酸性、耐胆盐和人工胃液等特点（燕等，2002；全艳玲，2002）。 2. 地衣芽孢杆菌作用机制研究 地衣芽孢杆菌在医药和畜牧养殖方面具有较高的应用价值。具有调节动物微生态平衡，促进肠道有益菌生长，降低病原菌的数量，增加动物机体的抗病力，提高机体的免疫功能。具体作用机理如下： 2.1 生物夺氧
枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌产酶研究分析
个人收集整理仅供参考学习 枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌产酶分析 一、概述 1. 枯草芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属地一种.单个细胞0.7～0.8 ×2～3微米，着色均匀. 无荚膜，周生鞭毛，能运动.革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9 ×1.0～1.5 微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大.菌落表面粗糙不透明， 污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭.需氧菌.可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚.b5E2RGbCAP 有地菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶地重要生产菌；有地菌株具有强烈降解核苷酸地酶系，故常作选育核苷生产菌地亲株或制取5'-核苷酸酶地菌种.在遗传学研究中应用广泛，对此菌地嘌呤核苷酸地合成途径与其调节机制研究较清楚.广泛分布在土壤及腐败地有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名.p1EanqFDPw
2.地衣芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌，种属芽孢杆菌科细菌为革兰氏阳性杆菌；细胞大小：0．8μm×（1．5～3．5）μm；细胞形态及特点：细胞形态和排列呈杆状、单生.细胞内无聚-β-羟基丁酸盐（PHB ）颗粒，产生近中生地椭圆状芽孢，孢囊稍膨大. 在肉汁培养基上地菌落为扁平、边缘不整齐、白色、表面粗糙皱褶，24h 后菌落直径为3mm.本菌有动力.可调整菌群失调达到治疗目地，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌.能产生抗活性物质，并具有独特地生物夺氧作用机制，能抑制致病菌地生长繁 殖.DXDiTa9E3d 二、产酶地种类 1.枯草芽孢杆菌代谢产酶种类枯草芽孢杆菌产生多种酶和其他代谢产物，主要由以下几个方面：枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中产生地枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对致病菌或内源性感染地条件致病菌有明显地抑制作用；RTCrpUDGiT 枯草芽孢杆菌能迅速消耗消化道内环境中地游离氧，形成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH 值，间接抑制其它致病菌地生长；5PCzVD7HxA 枯草芽孢杆菌能刺激动物免疫器官地生长发育，激活淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力； jLBHrnAILg 枯草芽孢杆菌菌体能自身合成消化性酶类，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪
地衣芽孢杆菌对于改善土壤提高农作物品质的作用
地衣芽孢杆菌对于改善土壤提高农作物品质的作用 地衣芽孢杆菌地衣芽孢杆菌的简介革兰氏阳性杆状细菌，可产生内生芽孢，耐热抗逆性强，在土壤和植物的表面普遍存在。是植物体内常见的一种内生菌，对人畜无毒无害，不污染环境。生长速度快、营养需求简单，在植物的表面易于存活、定殖与繁殖，生产工艺简单，制剂稳定，施用方便，储存期长。因此是一种理想的生防微生物。 1、生防机制对植物病菌的作用机制和方式是多样的，主要包括竞争作用、抗生作用、溶菌作用和促进植物生长等几个方面。 1.1 竞争作用竞争方式：主要包括营养竞争和位点竞争。营养和空间位点的竞争是指存在于同一微小生物环境中的两个或两个以上微生物之间争夺这一环境内的空间、营养、氧气等的现象。地衣芽抱杆菌具有较强的竞争和定殖能力，从而抢占病原菌的侵染位点，消耗其周围养分，阻止和干扰病原菌对植物叶面和其他器官的侵染，起到防病抑菌的作用。 1.2 抗生作用抗生作用是指拈抗微生物通过产生代谢产物在低浓度下就能够对病原微生物的生长和代谢产生抑制作用，从而来影响病原微生物的生存和活动。近半个世纪以来，人们从地衣芽孢杆菌不同菌株的代谢产物中分离纯化了多种有效的抗菌物质。 1.3 溶菌作用地衣芽孢杆菌的溶菌作用主要表现在是通过吸附在病原菌的菌丝上，并随着菌丝生长而生长，而后产生溶菌物质造成原生质泄露使得菌丝体断裂；或者是产生抗菌物质通过溶解病原菌孢子的细胞壁或细胞膜，致使细胞壁穿孔、畸形等现象从而抑制孢子萌发。 2、保护环境。以及提高农作物产品品质和食品安全等方面表现出了不可替代的作用。 2.1 地衣芽孢杆菌对土壤中的菲与苯并[a]芘的吸附及生物降解功能土壤与其相连的水环境称为土壤-水环境系统，其中存在着大量的土壤固有微生物，并在表面存在生物膜，因为生物膜形成了隔离层，有机污染物在接触到支撑生物膜的固体基底之前，必须首先到达并且穿过这个隔离层，这样就强烈地改变矿物颗粒或基底的吸附行为，对吸附作用有重要的影响．近年的研究表明，由于受污染影响，导致土壤中含有多环芳烃（PAHs），沉积物中PAHs 主要为原油污染以及工业或民用煤不完全燃烧所致．地衣芽孢杆菌对菲与苯并
地衣芽孢杆菌发酵过程的优化
地衣芽孢杆菌发酵过程的优化 吴俊罡阎英凯刘吉华王梅雪 (大连开发区松岚街11号,大连翔大生物技术有限公司） 本文通过对培养基配方的调整和发酵培养过程中对发酵工艺的调整，从而节约生产中成本，提高了产量，通过实验所得的工艺条件不但大大降低了成本而且使产量在原有的基础上有了大幅度的提高，极大的提高了产品的市场竞争力。 关键词：地衣芽孢杆菌发酵 抗生素作为饲料添加剂，在畜禽防疫方面虽起到积极的作用，但近10多年来由于科学水平的提高，国外饲料业和饲养业中很多人反对用抗菌素做饲料添加，这是因为抗菌素在预防性应用时，其化学残留污染肉、蛋、奶；另外，抗菌素会抑制和杀死肠道内的有益菌群，造成肠道正常菌群生态失调，导致疫病的发生，出现二重感染，有害于人畜健康。鉴于此，国内外专家学者对研究开发微生态制剂用于畜禽养殖日趋关注，从而也促进了这一产业的迅猛发展，国内用于制作微生态添加剂的主要是一些芽孢菌类和乳酸菌类，但长期以来生产成本一直居高不下，对企业的发展造成了障碍，本文阐述了如何通过对地衣芽孢菌发酵过程进行优化，来提高产量，降低生产成本。 １材料与方法 １.1材料 １.1.1菌种 地衣芽孢杆菌（Bacillus lichenniformis），大连翔大生物技术研究中心保存。 １.1.2主要试剂：淀粉、豆汁、硫酸锰、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等。 １.1.3主要设备：控温摇床、蒸汽消毒器、托盘式扭力天平、显微镜、发酵罐等。 １.２方法 １.2.1检测方法 活菌计数采用平皿活菌计数法，芽孢率采用芽孢染色后显微镜下计算。 １.2.2 摇瓶正交实验 １.2.2.1 以一适合生产的经验培养基为基础进行正交试验 经验培养基为：淀粉1.0％尿素0.2％磷酸氢二钾0.6％磷酸二氢钾0.3％酵母膏0.04％硫酸镁0.1％硫酸锰0.02％豆汁1.0％ 1 0.5 0.5 0.01 0.02 2 0.5 1.0 0.02 0.04 3 0.5 1.5 0.03 0.06 4 1.0 0. 5 0.03 0.06 5 1.0 1.0 0.02 0.04 6 1.0 1.5 0.01 0.02
芽孢杆菌形态特征
1.蕈状芽胞杆菌： 蕈状芽胞杆菌——营养琼脂48h菌落： 蕈状芽胞杆菌——革兰氏染色：
2.地衣芽胞杆菌： 地衣芽孢杆菌:革兰氏阳性杆状。0.6～0.8×1.5～3.0微米。无荚膜，不成链，能运动。芽孢椭圆形至柱状，中生或次端生，0.6～0.9×1.0～1.5微米。菌落粗糙，不透明，粘着，扩展。明胶液化，淀粉水解，V.P试验阳性，柠檬酸盐利用。广泛分布在土壤和食品中。也是实验室中普遍存在的污染菌。从某些菌株培养物中可获得杆菌肽素和地衣形杆菌素。有的能产生碱性蛋白酶。但也是引起罐头食品腐败的平酸腐败 菌，是罐头生产中应严加注意的一种污染菌。 地衣芽胞杆菌——18h革兰氏染色：
地衣芽胞杆菌——24h营养琼脂菌落： 地衣芽胞杆菌——36h革兰氏染色： 地衣芽胞杆菌——36h芽胞染色：
地衣芽胞杆菌——48h营养琼脂菌落： 地衣芽胞杆菌卵磷脂酶阳性：
腊样芽胞杆菌卵磷脂酶: 附：卵磷脂酶试验操作： １．鸡蛋一枚浸泡于７５％酒精中３０min ～24h; 2.50或１００ml小三角烧瓶，放置１０粒左右玻璃珠，盛１０ml生理盐水，１5Ｐ灭菌15min; 3. 根据用量配制营养琼脂，１５Ｐ灭菌１５min（与盐水同时高压； ４．用无菌小镊子在已灭菌的鸡蛋两端打孔，让蛋清流出，弃之不用； ５．打开蛋壳使蛋黄全部留入三角瓶中，轻轻摇匀，玻璃珠起搅匀蛋黄的作用； ６．琼脂温度至４５度左右，以１０％量加入蛋黄液（无菌吸管），摇匀，倒平板（4mm 规格平即 可，太大浪费）； ７．将待检菌点种（穿刺）入平板，３５孵育，菌落周围有如图所示混浊圈即为卵磷脂酶阳性．否 则，阴性． 试验结果如下图：
地衣芽孢杆菌活菌颗粒非处方药说明书范本
地衣芽孢杆菌活菌颗粒非处方药说明书范本 请仔细阅读说明书并按说明使用或在药师指导下购买和使用。[药品名称] 通用名称：地衣芽孢杆菌活菌颗粒 商品名称： 英文名称： 汉语拼音： [成份] [性状] [作用类别]本品为消化类非处方药品。 [适应症]用于细菌或真菌引起的急、慢性肠炎、腹泻。也可用于其他原因引起的肠道菌群失调的防治。 [规格]每袋0.5克（5亿活菌）。 [用法用量]口服，成人，一次1袋；儿童，一次0.5袋；一日3次；首次加倍。服用时将颗粒溶于水或牛奶中混匀后服用。[不良反应]个别患者可见便秘。 [禁忌] [注意事项] 1.本品为活菌制剂，切勿将本品置于高温处，溶解时水温不宜超过40℃。 2.避免与抗菌药同服，必要时需间隔3小时服用。 3.对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。 4.本品性状发生改变时禁止使用。 5.请将本品放在儿童不能接触的地方。
6.儿童必须在成人监护下使用。 7.如果正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或者药师。[药物相互作用] 1.抗菌药与本品合用时可减低其疗效。 2.铋剂、鞣酸、药用炭、酊剂等能抑制、吸附活菌，不能并用。 3.如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医生或药师。 [药理作用]本品以活菌进入肠道后，对葡萄球菌、酵母样菌等致病菌有拮抗作用，而对双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、笑话链球菌有促生长作用，从而可调整菌群失调达到治疗目的。本品可促使机体产生抗菌活性物质，杀灭致病菌。此外通过夺氧生物效应使肠道缺氧，有利于大量厌氧菌生长。 [贮藏] [包装] [有效期] [执行标准] [说明书修订日期] [生产企业] 企业名称： 生产地址： 邮政编码： 电话号码： 传真号码： 网址： 如有问题可与生产企业联系。
微生物肥料菌种使用方法-枯草芽孢杆菌-地衣芽孢杆菌
种植专用EM菌种使用方法 一、产品特点 本品由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、光合菌、乳酸菌、酵母酸、和放线菌等10属80多种微生物复合培养而成的有益微生物菌群。 1、外观：灰白色粉末，略带腥臭味。 2、主要成分：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、光合菌、乳酸菌、酵母酸、放线菌和少量培养基干物质，总菌数≥200亿/克。 二、EM原液的制作方法本品10克可以制作10-20公斤EM原液 【制作方法】制作ＥＭ菌种发酵液——EM原液 A、菌种活化：取ＥＭ菌种10克、红糖0.1公斤（红糖先用热开水溶化），加入1公斤无菌的水中。注：（先把水加热到100°C后加入红塘，而后继续加热5分钟。冷却到40°C时加入ＥＭ种），密闭发酵( 35°C—37°C温度 )3-5天（第二天开始每天松动容器封口减压放气一次），打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用。 B、制作原液：将活化好的液体菌种加入二级发酵罐( 密闭 )( 加水比例按1:10-20的比例加入）。 二级发酵液配方：10% 的红糖、0.3% 微量元素、0.1% 氨基酸（尿素也可以），温度35-37度，发酵5-7天（第二天开始每天松动容器封口减压放气一次），打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为原液使用。 成品发酵液标准:（气味：酸甜，PH值：4.0-5.0，活菌含量：大于100亿/ml ） 【作用功效】 1、EM菌种原液能分解木质素、粗纤维等大分子有机物，使其转化为利于动、植物吸收利用的小分子物质。 2、EM菌种原液在发酵代谢过程中形成优势菌群和产生的多种抗生性物质，能有效抑制有机物中病原菌的滋生。 3、EM菌种原液能分泌与合成有机酸、多种酶、生理活性物质，提高肥效。 4、EM菌种原液可以鳌合有机肥料中的重金属，降解其中的有毒有害物质，防止对土壤和作物的危害。 【用法用量】 １、发酵农家肥或有机垃圾：每公斤本品可发酵农家肥（有机垃圾）500-1000公斤（生料、粗料用量大些）。具体操作方法：取1公斤本品，加入100公斤左右水制成稀释液（具体的用水量，要根据农家肥或有机垃圾自身的含水量而定），而后与有机基料均匀混合，含水量控制在40%左右（手握可见指缝有水渗出，但不下滴），压实后用塑料膜覆盖严，如发酵料多（数吨）时，当堆心温度高于65℃时，进行翻堆。共翻堆2-3次，夏季发酵20天，冬季发酵30天，即可充分发酵成
地衣芽孢杆菌,地衣芽孢杆菌的作用
本产品是采用优良的地衣芽孢杆菌，经现代生物发酵技术精制而成的高活性微生物产品，具有芽孢多、繁殖能力强、易存活、抗逆环境强等特点，是一种能促进动物生长、平衡动物肠道微生态区系、抑制病源微生物生长繁殖的活菌制剂。 作用机理 地衣芽孢杆菌为好氧菌，进入肠道后，具有生物夺氧作用，能促进肠道有益菌如双歧杆菌、乳酸杆菌等的生长，抑制大部分需氧致病菌生长繁殖，恢复肠道微生态平衡，使腹泻等症状缓解或消失。并可在生长代谢中产生多种抗菌活性物质，如短杆菌肽、枯草杆菌素、制霉菌素等，故对葡萄球菌、沙门氏菌等有明显抑制作用。地衣芽孢杆菌还可以分泌多种活性酶---如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及多种酶促因子，提高动物消化能力。 主要作用 1.促进肠道内有益菌的生长，平衡及恢复胃肠道正常的微生态区系，促进胃肠道功能恢复，提高动物消化能力。 2.产生的多种抗菌物质和生物夺氧作用可抑制病源微生物的生长和繁殖，保持胃肠道正常的生理环境。 3.增强机体特异性和非特异性免疫反应，提高抗感染能力，对轻型或重型急性肠炎，轻型及普通型的急性菌痢等，均有明显效果。 4.替代饲料中添加的抗生素，是生产无药残畜产品的必备产品。 5.可产生多种消化酶，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等，提高动物消化酶的活性，提高饲料利用率，提高动物生产性能。 6.在水产养殖中用于净化水质。 主要成分： 1、主要成分：地衣芽孢杆菌，芽孢数≥1000亿个/克。 2、技术指标如下表： 杂菌率≤2% 产品细度98%通过60目 芽孢率≥98% 干燥失重≤8% 产品规格：25千克/袋
规格价格备注 枯草芽孢杆 25kg/袋10元/kg（100亿）也可以根据要求菌数配制。菌 25kg/袋10元/kg（100亿） 地衣芽孢杆 菌 25kg/袋25元/kg 益生宝（200） 复合菌
枯草芽孢杆菌的介绍-第二版本
枯草芽孢杆菌的介绍 完成者：河岸hkfced（https://www.360docs.net/doc/5d2019824.html,/hkfced）完成时间：2012-3-23 版本：第二版本
目录 第一章芽孢杆菌的简要介绍 (1) 第一节芽孢杆菌种类 (1) 第二节芽孢杆菌的表达系统发展简史 (2) 第二章枯草芽孢杆菌的转化系统 (3) 第一节：常见转化方法 (3) 1 化学转化法 (3) 2 电转化 (3) 3 原生质体转化 (3) 4 碱金属离子转化 (4) 5 质粒的其它转移方式 (4) 第二节：标准操作 (4) 第一种方法：电转化 (4) 第二种方法：Spizizen转化 (5) 第三种方法：原生质体法(Takashi) (5) 第四种方法：原生质体转化之二 (6) 第五种转化方法：质粒混合法（BGSC推荐） (7) 第三章芽孢杆菌的表达系统 (8) 第一节芽孢杆菌表达系统的优点（相对于大肠杆菌） (8) 第二节芽孢杆菌的缺点 (9) 第三节助表达系统 (9) 第四节芽孢杆菌基因表达的主要特点 (9) 第四章枯草芽孢杆菌的转录翻译系统 (9) 第一节：转录系统 (10) 第二节：翻译系统 (11) 第五章芽孢杆菌常用的宿主和载体 (12) 第六章芽孢杆菌应用实例 (13) 1 中国 (13) 2 日本 (13) 3 加拿大 (14) 第七章芽孢杆菌的产品 (14) 第一节核苷类产品 (14) 第二节核黄素 (14) 第三节微生物制剂/益生菌 (15) 第四节工业酶制剂 (15) 第八章结语 (15) 附录一. 芽孢杆菌的相关经典文章 (16) 附录二. 枯草芽孢杆菌相关数据库 (16) 致谢及参考文献 (17)