固相萃取小柱的选择

固相萃取柱的种类很多，具体实验工作中，需根据分析对象、检测手段及实验室条件合理选择合适填料、合理规格的固相萃取柱。要考虑固相萃取柱对分析对象的萃取能力、样品溶液的体积、洗脱后溶液的最终体积、及样品溶液中被测物及干扰物的总量。一般被柱中吸附剂吸附的被测物及干扰物的总质量不应超过吸附物总质量的5%。洗脱剂的体积一般应是萃取柱柱床体积的2-5倍。

固相萃取的一般操作

固相萃取柱知识点

1、使用阳离子固相萃取柱前为什么要用甲醇和水活化要是使用的是高聚物基质的阳离子柱，可直接上样，不用活化，要是使用的是硅胶基质的阳离子柱，活化是为了打开键合在硅胶上的碳基团链，使之充分发生作用，甲醇是为了与碳链互溶，用水过度是为了能和样品溶液相溶。 2、固相萃取技术原理及应用一、固相萃取基本原理与操作 1、固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的 1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等 2）离子交换作用：SAX, SCX，COOH、NH2等 3）物理吸附：Florsil、Alumina等 2、p H值对固相萃取的影响 pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲，因为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。而目标物的离子化程度则与pH值有关。如对于弱碱性化合物来讲，其pH值必须小于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其pH值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。

3、固相萃取操作步骤及注意事项针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。 1）填料保留目标化合物固相萃取操作一般有四步（见图1）： ? 活化---- 除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸） ? 上样---- 将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜，最大不超过5ml/min）? 淋洗---- 最大程度除去干扰物。（建议此过程结束后把小柱完全抽干） ? 洗脱---- 用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜）如下图1:

固相萃取装置及操作步骤

固相萃取的装置及操作程序最简单的固相萃取装置就是一根直径为数毫米的小柱（图10-2-15），小柱可以是玻璃的，也可以是聚丙烯、聚乙烯、聚四氟乙烯等塑料的，还可以是不锈钢制成的。小柱下端有一孔径为20μm, 的烧结筛板，用以支撑吸附剂。如自制固相萃取小柱没有合适的烧结筛板时，也可以用填加玻璃棉来代替筛板，起到既能支撑固体吸附剂，又能让液体流过的作用。在筛板上填装一定量的吸附剂（100-1000mg，视需要而定），然后在吸附剂上再加一块筛板，以防止加样品时破坏柱床（没有筛板时也可以用玻璃棉替代）。目前已有各种规格的、装有各种吸附剂的固相萃取小柱出售，使用起来十分方便（图10-2-16）。固相萃取的一般操作程序分为如下几步。 1. 活化吸附剂在萃取样品之前要用适当的溶剂淋洗固相萃取小柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用溶剂不同。 ①反相固相萃取所用的弱极性或非极性吸附剂，通常用水溶性有机溶剂，如甲醇淋洗，然后用水或缓冲溶液淋洗。也可以在用甲醇淋洗之前先用强溶剂（如己烷）淋洗，以消除吸附剂上吸附的杂质及其对目标化合物的干扰。 ②正相固相萃取所用的极性吸附剂，通常用目标化合物所在的有机溶剂（样品基体）进行淋洗。 ③离子交换固相萃取所用的吸附剂，在用于非极性有机溶剂中的样品时，可用样品溶剂来淋洗；在用于极性溶剂中的样品时，可用水溶性有机溶剂淋洗后，再用适当pH值，并含有一定有机溶剂和盐的水溶液进行淋洗。为了使固相萃取小柱中的吸附剂在活化后到样品加入前能保持湿润，应在活化处理后在吸附剂上面保持大约1ml 活化处理用的溶剂。 2. 上样将液态或溶解后的固态样品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空（图10-2-17），加压（图10-2-18）或离心（图10-2-19）的方法使样品进入吸附剂。

固相萃取装置及操作步骤

固相萃取的装置及操作程序【色谱世界】【本书目录】【引用网址】https://www.360docs.net/doc/5d9233531.html,/books/C/1182/0.html 最简单的固相萃取装置就是一根直径为数毫米的小柱（图10-2-15），小柱可以是玻璃的，也可以是聚丙烯、聚乙烯、聚四氟乙烯等塑料的，还可以是不锈钢制成的。小柱下端有一孔径为20μm, 的烧结筛板，用以支撑吸附剂。如自制固相萃取小柱没有合适的烧结筛板时，也可以用填加玻璃棉来代替筛板，起到既能支撑固体吸附剂，又能让液体流过的作用。在筛板上填装一定量的吸附剂（100-1000mg，视需要而定），然后在吸附剂上再加一块筛板，以防止加样品时破坏柱床（没有筛板时也可以用玻璃棉替代）。目前已有各种规格的、装有各种吸附剂的固相萃取小柱出售，使用起来十分方便（图10-2-16）。固相萃取的一般操作程序分为如下几步。 1. 活化吸附剂在萃取样品之前要用适当的溶剂淋洗固相萃取小柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用溶剂不同。 ①反相固相萃取所用的弱极性或非极性吸附剂，通常用水溶性有机溶剂，如甲醇淋洗，然后用水或缓冲溶液淋洗。也可以在用甲醇淋洗之前先用强溶剂（如己烷）淋洗，以消除吸附剂上吸附的杂质及其对目标化合物的干扰。 ②正相固相萃取所用的极性吸附剂，通常用目标化合物所在的有机溶剂（样品基体）进行淋洗。 ③离子交换固相萃取所用的吸附剂，在用于非极性有机溶剂中的样品时，可用样品溶剂来淋洗；在用于极性溶剂中的样品时，可用水溶性有机溶剂淋洗后，再用适当pH值，并含有一定有机溶剂和盐的水溶液进行淋洗。为了使固相萃取小柱中的吸附剂在活化后到样品加入前能保持湿润，应在活化处理后在吸附剂上面保持大约1ml 活化处理用的溶剂。 2. 上样将液态或溶解后的固态样品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空（图10-2-17），加压（图10-2-18）或离心（图10-2-19）的方法使样品进入吸附剂。

固相萃取柱

SPE固相萃取各个填料等的区别 CNWBOND Carbon-GCB(碳黑) 石墨化碳黑(CNWBOND Carbon-GCB)固相萃取小柱在萃取很多极性物质，如氨基甲酸酯和硫脲等农药，有着比C8或C18更高更稳定的回收率。有数据显示，石墨化碳黑SPE同时提取食品中超过200多种农残有很好的效果，如有机氯、有机磷、含氮以及氨基甲酸酯类农药等。Carbon-GCB石墨化碳黑由于其非多孔性，对样品的吸附不要求扩散至有孔区域，所以萃取过程非常迅速。此外，虽然其比表面积小于硅胶基质，对化合物的吸附容量却比硅胶大一倍有余。由于Carbon-GCB碳表面的正六元环结构，使其对平面分子有极强的亲和力，非常适用于很多有机物的萃取和净化，尤其适于分离或去除各类基质如地表水和果蔬中的色素（如叶绿素和类胡萝卜素）、甾醇、苯酚、氯苯胺、有机氯农药、氨基甲酸盐、三嗪类除草剂等。技术参数：目数120-400目，比表面积100 m2/g。 CNWBOND Coconut Charcoal(活性炭) 椰子壳活性炭专用于美国环保署EPA 521方法（饮用水中亚硝胺的检测）以及EPA 522方法（饮用水中1，4-二噁烷的检测）。技术参数：目数80-120目。 CNWBOND Si (硅胶) CNWBOND Silica硅胶是极性最强的小柱，填料为酸洗硅胶，它通常从非极性溶剂中通过氢键相互作用提取极性化合物，然后再通过提高溶剂的极性来洗脱物质。技术参数：粒径40-63μm，平均孔径60Å，未封尾。 CNWBOND Florisil PR 农残级弗罗里硅土同样适合于分离有机氯农残、胺类、多氯联苯(PCBs)、酮类以及有机酸等，粒径更大，满足EPA 608方法。技术参数：目数60-100目。 CNWBOND Florisil(弗罗里硅土) 弗罗里硅土作为氧化镁复合的极性硅胶吸附剂（硅镁吸附剂），适合于从非极性基质中吸附极性化合物，如分离有机氯农残、胺类、多氯联苯(PCBs)、酮类以及有机酸等。技术参数：目数100-200目，比表面积289 m2/g。

常用固相萃取柱

常用固相萃取柱 HLB是英文"亲水-亲脂平衡"(hydrophilic-l;pophilicbalance)的缩写，它是. 一种新型的反相吸附剂，能同时表现出对亲水性化合物和亲脂性化合物的双重保留特性。固相萃取柱产品和应用指南(SPE column)返回提供VARIAN公司BondElut、Agilent公司AccuBond系列固相萃取柱，另可提供经济型国产萃取小柱及填料，并可根据用户需要订做各种规格产品填料含量容量包装应用范围填料含量容量包装应用范围 ODS(C18) 硅胶上键合十八烷基 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲苯酸取代酯, 苯酚, 邻苯二甲酸酯,类固醇, 表面活化剂,茶碱,水溶性维生素。 EVIDEXII 辛烷和阳离子交换树脂 200mg 400mg 3ml 6ml 50 30 Amphetamina/Methamphetamine、 PCP、 Benzoylecgonine、 Codeine/Morphine、 THC- COOH(Marijuana) Cctyl(C8) 硅胶上键合辛烷 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲基酸取代酯, 苯酚,邻苯二甲酸酯,类固醇,表 SAX 硅胶上键合卤化季氨盐 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 强阴离子交换萃取,适合于阴离子,有机酸,核酸, 核苷酸, 表面活化剂。容量:0.2毫当量/克。

液相色谱SPE固相萃取小柱

国达SPE固相萃取小柱|固相萃取仪|固相萃取法SPE固相萃取小柱广泛用于的应于医药检测、食品安全、农药残留、预防疾控、环境保护等领域的样品分析及制备。尤其在食品中三聚氰胺、瘦肉精的检测、《2010中国药典》的应用等。我们还可以按客户要求定制产品或开发应用方法！国达SPE固相萃取小柱的特点及简单的技术说明 1．硅胶基质：目前在SPE中最常用的吸附剂仍然是硅胶或键合硅胶，其pH适用范围2-8。硅胶基质填料种类多，具有多选择性的优点。郑州市国达仪器设备有限公司供应的硅胶基质SPE固相萃取小柱包括C18E(封尾)，C18(未封尾)，C8, CN, NH2,DIA,Phenyl, SCX, SAX, WCX, PRS，Silica, Diol等13种填料。 2．非硅胶类无机吸附剂：电话400-1158-566 有Florisil（弗洛里硅土），GraphiCarb（石墨化碳），Alumina-N（中性氧化铝），Alumina-A（酸性氧化铝），Alumina-B（碱性氧化铝）和Celite（硅藻土）等6种常见的正相吸附剂，选择性和吸附作用和正相硅胶不完全一样。它们具有不同程度的极性和表面碱性，主要用途是对分析前复杂基体的样品进行清洗净化。 3．混合型吸附剂：郑州市国达仪器设备有限公司供应的SPE固相萃取小柱系列中包括GraphiCarb/NH2、C8/SCX和C18E/SiO2等三种混合吸附剂。 4．聚合物基质：聚合物基质填料克服了传统硅胶基质填料存在的缺点，在SPE固相萃取小

柱中的使用比例有逐年上升的趋势。聚合物基质SPE固相萃取小柱相对于硅胶基质，有如下优势： 1）pH适用范围广（0-14），且能与大部分有机溶剂适配使用； 2）聚合物表面没有活性羟基，消除了次级吸附作用所引起碱性化合物

固相萃取、吸附原理

不同基质固相萃取小柱的详细介绍 1、硅胶基质填料说明 C18(封端)Simon C18(封端)是以硅胶为基质的反相C18萃取柱。具有高键合密度，低流失，高回收率等特点。相当于BondElute C18，Super clean ENVI C18。主要应用于血液、血浆、尿液中药物及其代谢物、蛋白、DNA等大分子样品的脱盐、环境水样中的有机物的富集等。 C8辛基Simon C8在吸附性上与C18键合相类似，主要靠非极性碳键相互作用。但由于C8碳键较C18短，所以对非极性化合物保留弱于C18，有助于对非极性吸附过程的样品的洗脱。C8小柱可以从血浆中同时萃取脂溶性和水溶性维生素，也常用于生物分子样品脱盐。 CN氰基Simon CN氰基SPE产品是以硅胶为基质的氰丙基萃取柱。具有中等极性，可用于反相或正相萃取。 NH2(氨基)Simon NH2(氨基)是以硅胶为基质的氨丙基萃取柱。它具有极性固定相和弱阴离子交换剂，可通过弱阴离子交换（水溶液）或极性吸附（非极性有机溶液）达到保留作用，因此具有双重作用。当用在非极性溶液中（如正己烷）进行预处理时，它能与带有-OH，-NH或-官能团的分子形成氢键。氨基pKa=9.8；与阴离子的作用较SAX弱，在PH<7.8水溶液中，可用做弱阴离子交换剂，可用于去除样品中的磺酸根等强阴离子。 PAS N-丙基乙二胺Simon PAS 是与NH2相似的吸附剂。PSA有两个氨基，pKa 值分别为10.0和10.9。有比NH2柱更强的离子交换能力。同时PSA可与金属离子产生螯合作用，用于提取金属离子。常用于农残分析中样品的前处理，去除有机酸，色素，金属离子和酚类等。 Simon SAX 强阴离子交换Simon SAX是以硅胶为基质的强阴离子交换萃取柱，键合有季铵盐官能团。主要用于弱阴离子型化合物的萃取，如羧酸等。这种强阴离子交换剂可用于从水合非水溶液中萃取带有负电荷的化合物，最适合于弱酸的提取。相当于BondElute SAX。常用于除掉样品中的强阴离子（有机酸，核酸，核苷酸，磺酸根，无机离子等）生物大分子脱盐等。 Simon Simon COOH是以硅胶为基质的弱阳离子交换萃取柱。键

几种常见固相萃取柱

聚合物树脂固相萃取柱萃取柱装有高纯度和高交联度的苯乙烯－二乙烯基苯聚合物颗粒，表面键合有反相（疏水成分）和强阳离子交换官能团。它对酸性、中性和碱性化合物具有极高的重现性和回收率。StyreScreen®颗粒的平均粒径为30mm，并具有非常高的样品载量，从而使得萃取柱特别适于标准的固相萃取应用。样品载量的增加意味着只需填装更少的填料，这就有助于获得更高的流速并降低溶剂的消耗。高通量和低废液处理量将可以节约大量的时间和费用。此外，在大部分的药物滥用测试应用中也无须预处理步骤。药物滥用测试共聚物键合固相萃取柱CleanScreen®是Sepax-UCT最受认可的产品系列，用于滥用药物和临床药物的萃取。填料采用硅胶基质混合固定相，可满足生物样品中药物的高效、稳定和洁净萃取。混合相分离模式可为酸性，碱性和中性化合物提供最高的选择性。这使得CLEANSCREEN®特别适用于药物筛选，以及实际上所有药物品种的确认和分析。CLEANSCREEN®DAU和THC萃取柱已被司法鉴定和临床化学家广泛应用，包括：尸检分析•犯罪调查•尿样药物检测•运动员违禁药物检测•赛马实验室•治疗药物监测•药物筛选（注意：如果应用于比较粘稠的样品，比如组织或马血清，请使用我们的XtrackT®系列，这可以获得高的流速。同时CLEANSCREENDAU 填料及其它填料都可以提供大粒径填料低溶剂消耗固相萃取柱低溶剂消耗的萃取柱为微填充柱，这种萃取柱具有disc技术的优点，同时保留了传统SPE柱的优点。这种低溶剂消耗萃取柱与传统萃取柱相比可节省75％的溶剂。更少的溶剂意味着更快的分离，更高的通量和更少的废液处理，从而极大地节约您的时间和资金。研究结果表明，存在于尿液和血液中的治疗和滥用药物可以被干净地提取，使用低溶剂消耗的萃取柱同时也可以获得极高的回收率和一致的重复性。 RSV萃取柱的规格有1mL、3mL和10mL。这些萃取柱可以使用真空或正压装置，也可以使用传统的自动萃取装置高流速固相萃取柱。使用标准的固相萃取柱时，粘稠的样品通常流速会很慢。增加填料的粒径可以提高样品在应用和分析中的流动性。XtrackT®萃取柱专为高粘度的样品设计，包括马尿、尸体血和组织、胎粪、羊水、牛奶等。 XtrackT®也可以作为重力流动柱来分离大部分的血样和尿样。单根萃取柱可以萃取大部分的化合物，对酸性、类固醇和碱性化合物具有不同的选择性。XtrackT®无需额外的纯化步骤就可以获得更干净的提取以及极高的回收率。XtrackT®有疏水、亲水、离子交换和混合型等多种固定相，包括CLEANSCREEN®DAU填料。XtrackT®推荐用于各种高粘度样品或期望获得重力流量的情形。

常用固相萃取柱

硅胶上键合乙基 500mg 500mg 1000mg 3ml 6ml 6ml 50 30 30 合物。500mg 500mg 1000mg 3ml 6ml 6ml 50 30 30 碱,核苷,表面活化剂。容量:0.2毫当量/克。 Phenyl 硅胶上键合苯基 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 相对C18和C8，反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物 Alumnia A (acidic) 酸性 PH ~5 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 极性化合物离子交换和吸附萃取,如维生素. Silica 无键合硅胶 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 极性化合物萃取,如乙醇，醛, 胺,药物,染料，锄草剂,农药, 酮,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 Alumnia B (basic) 碱性 PH~8.5 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 吸附萃取和阳离子交换。 Cyano(CN) 硅胶上键合丙氰基烷 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 反相萃取,适合于中等极性的化合物,正相萃取,适合于极性化合物,比如,黄曲霉毒素,抗菌素,染料,锄草剂,农药 ,苯酚,类固醇。弱阳离子交换萃取,适合于碳水化合物和阳离子化合物。 Alumnia N (neutral) 中性 PH~6.5 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 极性化合物吸附萃取。调节pH,阳和阴离。子交换.适合于维生素,抗菌素,芳香油,酶,糖苷, 激素 Amino(NH2) 硅胶上键合丙氨基 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 正相萃取,适合于极性化合物。弱阴离子交换萃取,适合于碳水化合物,弱性阴离子和有机酸化合物。 Florisil 填料-硅酸镁 100mg 200mg 500mg 500mg 1000mg 1ml 3ml 3ml 6ml 6ml 100 50 50 30 30 极性化合物的吸附萃取,如乙醇,醛,胺,药物, 染料,锄草剂,农药,PCBs,酣,含氮类化合物, 有机酸,苯酚,类固醇固相萃取柱及填料(SPE column)

固相萃取小柱的常见问题及C18小柱操作步骤

SPE常见问题解答

固相萃取（Solid Phase Extraction SPE ）是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。大多数用来处理液体样品。萃取、浓缩和净化其中的半挥发性和不挥发性化合物；也可用于固体样品，但必须先把固体样品处理成液体。目前国内主要应用于食品安全领域，如各类抗生素、抗菌药的在各类食品种的残留分析；农产品中农药残留分析；各类食品中合法、非法添加剂分析等。在药物研究领域，广泛应用于药物药代、药动分析和中药分析。在环保领域，应用于环境中多环芳烃（PAHs ）、多氯联苯（PCBs ）、各类农药分析；饮用水、地下水和污水的有机物质分析。根据应用原理可分为：反相萃取柱、正相萃取柱、离子交换柱、吸附柱四种；近年来，新开发的混合模式萃取小柱，由于其使用更方便，专属性更强，应用越来越广泛。一、反相萃取柱反相基本方法反相基本方法Strata? C18-E, C18-U, C18-T ?强疏水性选择性 ?适用于从水性样本和生物样本中保留大多数有机化合物 ?增强碱性物质的保留* Strata? C18-E 是疏水性最强的硅胶基质端基封尾键合相；Strata? C18-U 是非封尾疏水性键合相，不推荐用于碱性化合物；Strata? C18-T 是大孔径端基封尾键合相。 Strata? C8 ?疏水选择性稍低于C18 ?适用于中等极性化合物?提高对碱性化合物的选择性 Strata? Phenyl ?强芳香性选择性 ?适用于含有苯环或其他芳香环的化合物和碱性化合物 Strata? SDB-L ?固定相：聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物?疏水选择性强于C18 ?适用于大多数有机化合物 ?pH范围更宽，无二级副反应存在

固相萃取小柱

文章摘要：第一、参考固相萃取柱的类型及应用，选择适当的填料类型，然后选择固相萃取柱的大小和填料量。样品量萃取柱的大小1ml 1ml 1ml~250ml，且不要求萃取速度3ml 1ml~250ml，要求快速萃取6ml 10ml~250ml，要求高样品容量12，20或60ml 1L和要求高样品容量90mm ...... 第一、参考固相萃取柱的类型及应用，选择适当的填料类型，然后选择固相萃取柱的大小和填料量。样品量萃取柱的大小1ml 1ml 1ml~250ml，且不要求萃取速度3ml 1ml~250ml，要求快速萃取6ml 10ml~250ml，要求高样品容量12，20或60ml <1L，且不要求萃取速度12，20或60ml 100ml~1L 47mm >1L和要求高样品容量90mm 反相、正相和吸附类型的过程：被萃取样品的质量不超过柱中填料量的5%，也就是说，如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱，分析物质不超过5毫克。离子交换过程：您必须考虑离子交换的容量：SAX和SCX其吸附剂容量为0.2毫当量/克。第二、选择好萃取柱后，按图所示的四个步骤进行萃取过程：步骤一：预处理萃取柱. 在萃取样品之前,为了湿润固相萃取柱填料,用一满管溶剂冲洗管子。反相类型硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理,然后用水或缓冲溶液。甲醇湿润吸附剂表面和渗透键合烷基相,以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用在甲醇之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样，是用之消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰,也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。正相类型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。离子交换填料将用于非极性有机溶剂中的样品,其用3-5ml的去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。为了使固相萃取填料从预处理到样品加入时都保持湿润,允许大约1毫升的预处理溶剂在管过滤片(frit)或萃取片表面之上。如果样品是从一个贮液管或过滤管引入固相萃取管,则多加入0.5毫升最后的预处理溶剂到1毫升的固相萃取管中,如果是2毫升到3毫升的萃取柱中,多加入4升到6毫升管中等等。这是为了保证在样品加入之前萃取柱湿润。如果在样品加入之前,萃取柱中的填料干了,重复预处理过程。在重新引入有机溶剂之前,用水冲洗柱中缓冲溶液的盐步骤二：加入样品. 将样品装入萃取柱，此时，固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样，当样品流出时，所选择的化合物（包括杂质）被留在萃取柱上。步骤三：冲洗填料. 用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。步骤四：洗脱感兴趣的化合物。用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。

固相萃取基本原理与操作

一、固相萃取基本原理与操作 1、固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等 2）离子交换作用：SAX, SCX，COOH、NH2等 3）物理吸附：Florsil、Alumina等 2、p H值对固相萃取的影响 pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲，因为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。而目标物的离子化程度则与pH值有关。如对于弱碱性化合物来讲，其pH值必须小于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其pH值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。 3、固相萃取操作步骤及注意事项针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍

有不同。 1）填料保留目标化合物固相萃取操作一般有四步（见图1）： ? 活化---- 除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸） ? 上样---- 将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜，最大不超过5ml/min） ? 淋洗---- 最大程度除去干扰物。（建议此过程结束后把小柱完全抽干） ? 洗脱---- 用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜）如下图1: