细菌检验原始记录表
细菌检验原始记录表 Document number：PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998
细菌检验原始记录（M-03）单位名称：
单位地址：编号：
检验人：复核人：
检验原始记录和出厂检验报告
出厂检验原始记录 化验：审批： 产品名称样品数量抽样基数 规格型号抽样地点生产日期 检验依据 检验项目实测数据检测仪器 酒精度，%(V/V) GB/T10345.3酒精计法 总酸（以乙酸计），g/L GB/T10345.4 总酯（以乙酸乙酯计），g/L GB/T10345.5 第一法 固形物/（g/L） 感官取100mL酒样经蒸馏后定容至100mL备用。 测定值： 测定温度：℃ 吸取50.00ml样液进行测定。 样品测定消耗氢氧化钠标液（ml）：V= V’= 氢氧化钠标液的浓度：c= mol/L = ? ? = 0. 50 60 V c X ()() 0. 50 60 ? ? = = X ()() 2 + = 上述样品加入25.00ml氢氧化钠标准溶液，在100℃水浴锅上回流1h，用 盐酸标准溶液滴至终点 测定时，消耗硫酸标液的体积(ml)：V= V’= 硫酸标液的浓度：c= mol/L () 0. 50 88 V c ? - ? = V X= X ()() 2 + = 取50mL酒样注入恒重100mL瓷蒸发皿，置于水浴至干，在将蒸发皿放 入103℃干燥箱直至恒重。 1000 0. 50 1 ? - = m m X X1= X 2= 色泽和外观： 香气： 口味： 风格： 酒精计 电子天平
出厂检验报告 化验： 审批： 产品名称 抽样人员 生产日期 抽样数量 检验日期 报告日期 检验依据 项 目 检验标准值 检验结果 判定 感 官 色泽和外观 无色或微黄，清亮透明，无悬浮物， 无沉淀； 香气 香气自然纯正清雅； 口味 酒体醇和、甘冽净爽； 风格 具有本品的典型风格。 酒精度/%vol 41-68 总酸/（g/L ） ≥0.3 总酯/（g/L ） ≥0.5 固形物/（g/L ） ≤0.5 甲醇/（g/L ） ≤0.6 结论 该批产品 □符合 □不符合 要求。 日期：
沙门氏菌的检验
沙门氏菌的检验 食品学院14食品质量与安全1班 刘文敏柳基炜卫杰恒温紫君 2 2 2 2 摘要：本实验采用GB/T4789.4-2010的检测方法测定鸡场中的沙门氏菌。通过本实验学习沙门氏菌的检测方法和技术，了解沙门氏菌的一些生化特性；本实验先用显色培养基找出可疑菌落，再做生化试验找出可疑的典型性的沙门氏菌，再通过血清学试验最终确定是否为沙门氏菌属。 关键词：沙门氏菌接种生化试验血清学鉴定 前言 沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一，其病原沙门氏菌属于肠道细菌科。沙门氏菌是一个统称，泛指 2000 多种有紧密连系的细菌，包括引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。虽然只有少数人因沙门氏菌而患病，但是，在世界范围内的细菌性食物中毒事件中，由沙门氏菌引起的占大多数。因此，采用科学、合理的方法检验食品中沙门氏菌，已经成为了人们最关心的问题之一[1]。国标法(GB4789.4-2010)是目前中国规定的食品中沙门氏菌的标准检测方法,也是基层实验室普遍采用的检测方法,它根据沙门氏菌的生长特点和生化特性,采取前增菌、增菌、分离、生化试验和血清学鉴定5个步骤进行[2]。 1材料与方法 1.1实验材料 1.1.1仪器设备 均质器、三角烧瓶、平皿、玻璃棒、接种棒 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃ 吸管：1 mL（具 0.01 mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度或微量移液器及吸头
电子天平PL602-S，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司； 手提式不锈钢压力蒸汽灭菌锅SYQ-DSX-280B，上海申安医疗器械厂 1.1.2试剂药品 鸡肠、靛基质试剂、沙门氏菌O和H诊断血清、API20E生化试剂盒或VITEKGNI 生化鉴定卡 1.1.3培养基 蛋白胨水（BPW)、四硫磺酸钠煌绿（TTB）、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液、亚硫酸铋（BS）琼脂、HE琼脂、三糖铁琼脂、蛋白胨水、尿素琼脂、氰化钾、氰化钾对照、赖氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶对照、甘露醇、山梨醇、β-D半乳糖苷（ONPG）培养基 1.2 实验方法 1.2.1培养基的制备 1.2.1.1培养基的配制步骤 蛋白胨水（BPW）：称取蛋白胨10g、氯化钠5g、磷酸氢二钠9g、磷酸二氢钠1.5g、蒸馏水1000ml，将各成分加入蒸馏水中，搅混均匀，静置约 10 min，煮沸溶解，调节 pH，高压灭菌 121 ℃，15 min。分装10瓶，每瓶90ml 四硫磺酸钠煌绿（TTB）：高压灭菌 121 ℃，15 min灭菌冷却后至30℃，每100ml 基础培养液加碘液2ml，煌绿液1ml 1.2.1.2配制培养基的注意事项 （1)按照说明书上的用量进行换算，称取准确分量的合成培养基粉末； （2）加热煮沸溶解培养基时，留意锅内水位的变化，水位下降可再添加适量的水，以免水分蒸发过多，导致后面分装不够量； （3）往试管中放小导管时，注意处理气泡。 1.2.2 沙门氏菌群检测 1.2.2.1沙门氏菌检测程序
初始污染菌实验方法验证(文件模板)
初始污染菌实验方法验证方案产品名称：一次性包皮环切缝合器 编制：日期： 审核：日期： 批准：日期：…………医疗器械股份限有限公司
目录 初始污染菌实验方法验证方案1．概述 2．验证目的 3．职责与验证申请 4．验证依据 5．验证计划 6．验证内容
初始污染菌实验方法验证方案 1.概述： 初始污染菌的数量可以反映出车间环境卫生的清洁度，与产品灭菌工艺、成品热原及内毒素有直接关系，故而要对其检测方法进行验证，确认其有效性及检测准确性，从而优化产品灭菌工艺及控制产品热原及内毒素，确保产品的安全性。 2.目的： 通过实验验证检测方法的适用性及计数用培养基的适用性。 3.职责与验证申请： 3.1质量管理部提供检测项目方案、接收标准、评价等级及相关实验。 3.2生产技术部负责按验证方案生产相关样品 初始污染菌实验方法验证申请表 4.依据： 《中国药典》2015版 5.验证计划： 5.1实验操作人员确认； 5.2实验室实验设备及器材的确认； 5.3产品取样及方法确认。 6.验证内容： 6.1菌种和菌液制备 验证组 姓名 职务 单位 黄燕 组长 质量管理部经理 …………医疗器械股份有限公司 龙章宏 组员 化验员 苏俊 组员 化验员 胡梓鹏 组员 化验员 批 准 经研究：同意以上成员组成验证小组，按照此方案对本公司的产品的初始污染菌实验方法进行验证。 批准人： 年 月 日
6.1.1 菌种 试验用菌株的传代次数不得超过5 代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0 代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。 6.1.2菌液制备 接种金色葡萄球菌、铜绿假胞菌、枯草芽孢杆菌的培养物至胰酪大豆胨液体培养基 中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，30?35℃培养18?24小时；接种白色念珠菌的培养物至 沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20?25℃培养2-3天，上述培养 后的新鲜培养物用PH7.0无菌化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌化钠溶液制成每lml菌数 小于100cfu(菌落形成）的菌悬液。接种黑曲霉的培养物至沙氏葡萄糖琼脂面培养基上， 20?25℃培养5?7天，加人3?5 ml 0.05%(ml/ml) 聚山梨酯80的pH7.0无菌化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.05% (ml/ml)聚山梨醋80的pH7.0无菌化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成每lml孢子数量小于100cfu的孢子悬液。 菌悬液若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2?8 ℃在24h 内使用。黑 曲霉孢子悬液存在2?8℃，在验证过的贮存期内用。 6.2计数培养基适用性检查 6.2.1需氧菌的计数 分别取1ml的金色葡萄球菌、铜绿假胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各 菌悬液，接种至胰酪大豆胨液体培养基管或胰酪大豆胨琼脂培养基平板。金色葡萄球菌、 铜绿假胞菌、枯草芽孢杆菌在30-35℃，培养不超过3天；白色念珠菌、黑曲霉在20-25℃， 培养不超过5天。每一试验菌株平行制备2 管或2 个平皿。同时，用相应的对照培养 基替代被检培养基进行上述试验。 6.2.2霉菌和酵母菌的计数 分别取1ml的白色念珠菌、黑曲霉各菌悬液，接种至沙氏葡萄糖琼脂培养基。在 20-25℃，培养不超过5天。每一试验菌株平行制备2 管或2 个平皿。同时，用相应的 对照培养基替代被检培养基进行上述试验。 6.2.2结果判定 被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2 范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致；被检液体培养基管与对照培养 基管比较，试验菌应生长良好。 6.2.3试验结果见表1 6.3计数方法验证 6.3.1供试液的制备： 洗脱液用0.9%的灭菌生理盐水，检品液制备在10000级环境中进行。 6.3.2 接种和稀释
初始污染菌检验规程
初始污染菌检验规程 1.?目的? 检测产品、原料、辅料实际带菌（活的微生物群）的数目。? 2.?适用范围? 适用于本公司产品、原料、辅料的初始污染菌的检测。? 3.职责? 由质检部负责执行实施。 4.技术要求 产品、原料初始污染菌数：≤100cfu/g 5.引用标准 GB 15979-2002_一次性使用卫生用品卫生标准 中华人民共和国药典（2015版） GB/T 医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法 6.试剂和培养基 洗脱液 %Nacl 称好9gNaCl溶于1000ml蒸馏水中，充分搅拌直至完全溶解，灭菌备用。 胰蛋白胨大豆琼脂培养基 取胰蛋白胨大豆琼脂培养基38g，加入1000ml蒸馏水中，微温溶解后，调节PH为±， 灭菌分装。 玫瑰红钠琼脂培养基 玫瑰红钠琼脂培养基 g，加入1000ml蒸馏水中，微温溶解后，调节PH为±， 灭菌分装。 7.仪器设备 锥形瓶量筒高压灭菌锅试管灭菌培养皿灭菌刻度吸管超净工作台酒精灯恒温培养箱洗耳球
8.操作方法 样品处理 无菌称取10g可以破坏性类供试品,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡，保温于45℃水浴中5～10min，作为1：10供试液。? 对供试品不能采用破坏性取样可用浸有无菌生理盐水拭子涂抹采样，被采表面积100cm2.加入灭菌生理盐水100ml。保温于45℃水浴中5～10min，不时振摇，作为1：10的供试液。 接种 需厌氧菌 取制备好的供试液接种于有胰蛋白胨大豆琼脂培养基的培养皿中，每支平皿接种1ml供试液，接种3支。取一支有培养基的空白平皿做阴性对照。 霉菌 取制备好的供试液接种于有玫瑰红钠琼脂培养基的培养皿中，每支平皿接种1ml供试液，接种2支。取一支有培养基的空白平皿做阴性对照。 培养 需厌氧培养基置于37℃培养3d ，霉菌培养置于28℃培养5d 9.观察计数 达到培养时间后，观察阴性对照，若阴性对照有菌，则实验失败，应重新进行；阴性对照无菌，则可取出平皿计数，记录每个平皿菌落数 10.结果计算与报告 公式 污染菌总数＝平均菌落数×稀释倍数/克重 菌落计数基本规则? 选取平均菌落数在30～300之间的稀释级作为报告菌落数测定范围。??菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告。大于100 时，采用二位有效数字，在两位有效数值后面，应以四舍五入法计算。 在报告菌落数为“不可计”时，应表明样品的稀释度。? 如果样品菌落总数超过标准的规定，则按10N逐批稀释?
检验原始记录规范
检验原始记录规范 1 范围 本规范规定了检验原始记录（以下简称原始记录）的基本要求、格式和填写要求。 2 术语 2.1 测定值 测定时，从仪器仪表或量具上读取的数值。 2.2 给定值 为了得到测定值而按标准规定给出的标准试剂（或试样）特性的量值。 2.3 计算值 由给定值和测定值经计算公式，按有效数字运算规则计算所得到的数值。 2.4 灭菌 用物理或化学的方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌。 2.5 消毒 用物理或化学的方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化。 3 基本要求 3.1 原始记录的内容应包括与检验有关的一切资料、数据和现象，完整地记 录全过程。 3.2 每一样品的原始记录应给出足够的信息以保证检验能够再现。 3.3 原始记录要格式化，每类样品应有固定的格式。 3.4 多个产品的同一检验项目的原始记录不准集中填写。
3.5 填写原始记录最好用钢笔（蓝色或黑色），也可使用碳素笔，禁止用铅笔。 3.6 字迹清晰、端正，尤其是0到9这10个阿拉伯数字和计量单位的书写。 3.7 改正错误的时要用“杠改法”（在需要改正的地方用红色笔划一横杠，在其右上方进行修改），并加盖改正人本人印章或签字确认。 3.8 记录应卷面整齐、洁净。同一页中不准使用两色或两色以上的墨水。 3.9 原始记录不允许重新抄写整理，要保持原始记录的原始属性。 3.10 对因检测、填写或其他原因造成得失误，使原始记录出现多处错误或卷面不洁欲作废的原始记录，不准撕毁废弃，应加盖“作废”（红色）章，仍与重新填写的原始记录一起存档。 4 填写要求 4.1 样品编号 样品编号为样品唯一性标识号，由业务室负责编写，原始记录样品编号应与检验报告及送样单编号一致。 4.2 共页第页 4.2.1 原始记录总页数等于手填原始记录页数与仪器设备自动记录页数之和。 4.2.2 手填写的原始记录应采用A4幅面纸，并算为1页：仪器设备自动记录纸不小于32开为1页；如小于32开，要粘贴在A4幅面原始记录纸上。 4.2.3 从第1起，按顺序排列。 4.3 检验项目 检验项目名称应与产品检验标准中规定的名称一致。如果一个检验项目需引用另一个检验项目的数据，在检验项目栏内应填写两个检验项目名称；本栏内还
初始污染回收率及检测记录
初始污染回收率测定记录 生产批号：型号规格：样品数量：培养皿 个数样品号 培养皿编号 空白 对照 阴性 对照 平均菌落数 （cfu/ml） 初始污染菌 （cfu/件） （平均菌落 数÷SIP） 回收率1 2 3 4 5 1-1 1-2 1-3 1-4 1-5 2-1 2-2 2-3 2-4 2-5 3-1 3-2 3-3 3-4 3-5
4-1 4-2 4-3 4-4 4-5 5-1 5-2 5-3 5-4 5-5 平均回收率修正系数
初始污染菌检测原始记录 生产批号：型号规格：样品数量：培养皿 个数样品号 培养皿编号 阴性 对照 空白 对照 平均菌落数 （cfu/SIP） 初始污染菌 （cfu/件）1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
17 18 19 20 平均初始污染菌 各样品平均菌落 ——————数总和÷样品 数 校正后初始污染 菌 ————（平均初始污染 菌*校正因子） 注：1、在对照的平板中，“+”表示长菌，“－”表示不长菌，“±”表示可疑长菌 2、阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。否则，试验无效。
初始污染检测记录 文件编号： 样品名称： 生产批号：型号规格：样品数量：培养皿 个数样品号空白 对照 阳性 对照 培养皿编号 平均菌落数 （cfu/SIP） 初始污染菌 （cfu/件） 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均初始污染菌 （cfu/件） 校正后初始污染 菌 注：1、在对照的平板中，“+”表示长菌，“－”表示不长菌，“±”表示可疑长菌 2、阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。否则，试验无效。
沙门氏菌检验标准操作规程
1目的P URPOSE 规范888物料、产品的沙门氏菌检验操作，确保检验结果的可靠性。 2范围SCOPE 适用于888物料、产品的沙门氏菌检验工作。 3责任RESPONSIBILITY 微生物检验员严格执行本规程，品质部负责人监督执行。 4程序PROCEDURE 定义和原理 沙门氏菌广泛存在于动物的肠道和内脏，以及被粪便污染的水和土壤中，是细菌性食物中毒的主要病因。本方法利用沙门氏菌呈辛酸酯酶阳性，而氧化酶和脂肪酶均呈阴性的特性，对物料、产品进行沙门氏菌检验。 材料和设备 紫外灯：波长366nm，功率不小于6W。 放大镜：3至4倍。 毛细滴管。 LX-B35L压力蒸汽灭菌锅。 无菌的培养皿。 无菌的接种环。 培养基和试剂 SCDLP液体培养基：按《化妆品卫生规范》（2007版）或使用商品培养基干粉配制。 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液：按—2010附录配制或使用商品试剂。 SS琼脂培养基（含1%蔗糖）：牛肉浸膏(或牛肉粉)，蛋白胨，乳糖，蔗糖，胆盐，柠檬酸钠，硫代硫酸钠，柠檬酸铁，煌绿，中性红，琼脂，蒸馏水1000mL。 HE琼脂培养基：按—2010附录或使用商品培养基干粉配制。 玉米油维多利亚蓝琼脂培养基：灭菌后的基础培养基冷却至50℃左右，边摇边加入玉米油乳化液。倾注平皿，制成平板。基础培养基及玉米油乳化液配方如下： a）基础培养基：蛋白胨5g，酵母浸粉3g，氯化钠5g，琼脂13g，水900mL，。将 各成分加入水中，加热溶解。调节，116℃15min高压灭菌。 b）玉米油乳化液：玉米油100mL，%维多利亚蓝水溶液100mL，%琼脂溶液80mL， 吐温801mL。玉米油加维多利亚蓝水溶液混合，边振动边在沸水中加热溶化。然后， 放入分液漏斗中，弃去蓝色水部分，再将着色的脂肪用水洗1-2次。将着色脂肪20mL 加入810mL琼脂溶液中，再加1mL吐温80，116℃15min高压灭菌。冷却后用超声 波乳化。
检验原始记录规范标准[详]
检验原始记录规 1 围 本规规定了检验原始记录（以下简称原始记录）的基本要求、格式和填写要求。 2 术语 2.1 测定值 测定时，从仪器仪表或量具上读取的数值。 2.2 给定值 为了得到测定值而按标准规定给出的标准试剂（或试样）特性的量值。 2.3 计算值 由给定值和测定值经计算公式，按有效数字运算规则计算所得到的数值。 2.4 灭菌 用物理或化学的方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌。 2.5 消毒 用物理或化学的方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化。 3 基本要求 3.1 原始记录的容应包括与检验有关的一切资料、数据和现象，完整地记 录全过程。 3.2 每一样品的原始记录应给出足够的信息以保证检验能够再现。 3.3 原始记录要格式化，每类样品应有固定的格式。 3.4 多个产品的同一检验项目的原始记录不准集中填写。
3.5 填写原始记录最好用钢笔（蓝色或黑色），也可使用碳素笔，禁止用铅笔。 3.6 字迹清晰、端正，尤其是0到9这10个阿拉伯数字和计量单位的书写。 3.7 改正错误的时要用“杠改法”（在需要改正的地方用红色笔划一横杠，在其右上方进行修改），并加盖改正人本人印章或签字确认。 3.8 记录应卷面整齐、洁净。同一页中不准使用两色或两色以上的墨水。 3.9 原始记录不允许重新抄写整理，要保持原始记录的原始属性。 3.10 对因检测、填写或其他原因造成得失误，使原始记录出现多处错误或卷面不洁欲作废的原始记录，不准撕毁废弃，应加盖“作废”（红色）章，仍与重新填写的原始记录一起存档。 4 填写要求 4.1 样品编号 样品编号为样品唯一性标识号，由业务室负责编写，原始记录样品编号应与检验报告及送样单编号一致。 4.2 共页第页 4.2.1 原始记录总页数等于手填原始记录页数与仪器设备自动记录页数之和。 4.2.2 手填写的原始记录应采用A4幅面纸，并算为1页：仪器设备自动记录纸不小于32开为1页；如小于32开，要粘贴在A4幅面原始记录纸上。 4.2.3 从第1起，按顺序排列。 4.3 检验项目 检验项目名称应与产品检验标准中规定的名称一致。如果一个检验项目需引用另一个检验项目的数据，在检验项目栏应填写两个检验项目名称；本栏还可填
初始污染菌检验标准操作规程
1 目的：建立产品初始污染菌数检验及分析标准操作规程。 2 责任：质量检验人员负责执行此规程。 3 范围：适用于未灭菌产品初始污染菌数验证试验的检测分析。 4 内容： 4.1 初始污染菌检测 4.1.1 器材与试剂 4.1.1.1 器材 （1）生化培养箱、霉菌培养箱 （2）立式灭菌柜 （3）超净工作台 （4）无菌过滤装置 （5）无菌镊子、无菌剪子 （6）电子天平 （7）移液器 （8）接种环 4.1.1.2 稀释液、冲洗液 pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液 4.1.1.3 培养基 营养琼脂培养基：按说明书方法保存配制。 4.1.2 检验方法：平皿法 4.1.2.1 供试液的制备 供试品是纱布可用无菌手续称取10g,放入100ml pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液中充分振荡后取样。作为1：10的供试液。供试液10倍递减稀释。 供试品是液体取样10ml加至100ml pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液中充分振荡后取样。作为1：10的供试液。供试液10倍递减稀释。 4.1.2.2 供试液操作方法 每个稀释级各吸取1ml至直径90mm的无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。每个稀释级注2个平皿。 4.1.2.3 阴性对照 取pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。每种计数用的培养基各制备2个平板，均不得有菌生长。 4.1.2.6 培养条件 将已经凝固的平板倒置于37℃培养箱中，一般培养48±2h。 4.1.2.7 计数
将平板置菌落计数器或从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，以投射光衬以暗色背景，仔细观察，计数。必要时可以借助于放大镜、菌落计数器。 4.1.2.7.1 菌落计数基本规则 ①选取平均菌落数在30～300之间的稀释级作为报告菌落数测定范围。如只有1个稀释级平均菌落数在30～300之间，则将稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告。 ②如有两个相邻稀释级的平均菌落数在30～300之间，则先计算两稀释级菌落数的比值。 高稀释级的平均平板菌落数×稀释倍数 比值=———————————————————— 低稀释级的平均平板菌落数×稀释倍数 当比值≤2时，则以2个稀释级的平均菌落数均值报告。当比值>2时，则以低稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告。 ③如各稀释级平均菌落数均在300以上，则按最高平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在30以下，则按最低平均菌落数乘以稀释倍数报告。 ④如各稀释级平均菌落数均不在30～300之间，则以最接近30或300的稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。 ⑤如各稀释级平均菌落数均无菌落生长或最低稀释级平均菌落数小于1时，应报告菌数为<10个/g或ml。 ⑥如有3个稀释级平均菌落数均在30～300之间，则以后2级计算级间比值报告。 ⑦菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告。大于100时，采用二位有效数字，在两位有效数值后面，应以四舍五入法计算。在报告菌落数为“不可计”时，应表明样品的稀释度。 4.1.3 清场 检验完毕，将使用的试剂归位，清理台面，并将用过的工具进行清洗。检测人员应及时填写《初始污染菌数检测记录》，并对检验结果进行判定。 4.1.4 注意事项 4.1.4.1 产品取样应在完成整个灌装或包装过程以后，而又在灭菌前取样； 4.1.4.2 本操作应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的无菌操作台内进行。操作过程应尽量避免任何可能使结果发生偏差的污染。 4.1.4.3 无菌操作台必需定期进行洁净度检测，试验前提前开紫外灯15min后方可进行实验操作。 4.1.4.4 过滤器、滤膜、镊子以及无菌设备使用前应进行灭菌，使用时应保证滤膜在过滤前后的完整性。 5 依据标准及相关文件 2010版《中华人民共和国药典（二部）》附录Ⅺ J微生物限度检查法 GB/T19973.1-2005《医疗器械的灭菌-微生物学方法-第一部分：产品中微生物数量的估计》 GB15980-2009 《一次性使用医疗用品卫生标准》
初始污染菌方法验证
初始污染菌方法验证-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1
验证产品初始污染菌数的试验方法。 2.范围 适用于质量部门对产品初始污染菌数验证试验的检测。 3.职责 质量检验人员负责执行此规程。 4.依据标准及相关文件 2010 版《中华人民共和国药典第二部》附录Ⅺ J 微生物限度检查法 GB/《医疗器械的灭菌-微生物学方法-第一部分产品中微生 物数量的估计》 GB15980-2009 《一次性使用医疗用品卫生标准》 5.试验产品 6.注意事项 本操作应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的无菌操作台内 进行。操作过程应尽量避免任何可能使结果发生偏差的污染。 无菌操作台必需定期进行洁净度检测?试验前提前开紫外灯15min 后方可 进行实验操作。 过滤器、滤膜、镊子以及无菌设备杯使用前应进行灭菌?使用时应保证滤 膜在过滤前后的完整性。 7.器材与试剂 器材 35℃恒温培养箱、23℃恒温培养箱、灭菌器、洁净工作台、无菌过滤装置、镊子、剪子、电子天平、移液器、接种环 稀释液、冲洗液及其制备方法 稀释液、冲洗液配制后按说明书要求进行灭菌。 pH 无菌氯化钠溶液—蛋白胨缓冲液 %无菌氯化钠溶液。 培养基 营养琼脂培养基：按说明书方法保存配制。 玫瑰红钠琼脂培养基：按说明书方法保存配制。 改良马丁液体培养基：按说明书方法保存配制。 改良马丁琼脂培养基：按说明书方法保存配制。 营养肉汤培养基：按说明书方法保存配制。 8.计数方法的验证试验 当建立产品初始污染菌数检查法时，应进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证： 以确认所采用的方法适合于该产品细菌、霉菌及酵母菌的测定。若产品的组分或 原检验条件发生改变可能影响检验结果时，计数方法应重新验证。 验证时，按供试液的制备和细菌、霉菌及酵母菌计数所规定的方法及下列要求进 行。对各试验菌的回收率应逐一进行验证。 菌种 培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代，从菌种保藏中心获得的 冷冻干燥菌种为0代，并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学
初始污染菌数检测
一、目的：为测试灭菌前以及内包装袋的初始污染菌是否符合标准。 二、适用范围：本厂产品以及包装袋。 三、引用标准：GB15980-1995 四、所用的仪器和设备 1、高压消毒锅：使用时严格按照仪器说明书操作。 2、恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。 3、培养皿：一般采用90mm×15mm的硼酸玻璃培养皿。 4、生理盐水：浓度为0.9% 5、灭菌规格板：5×5cm；玻璃试管：13×150mm 6、培养基：普通肉汤琼脂培养基，其配制方法见试剂说明书 五、、操作步骤 1、对敷料类可用无菌手续取10g，放入100mL灭菌生理盐水中，充分震荡80次后。取各 管洗液进行检测。 2、对导管类:选取三套新制备的样品，在净化操作台上，将每套样品用无菌的剪刀剪成大 约1厘米长的段，放入事先灭菌的具塞三角瓶中，加50毫升生理盐水，加塞，充分震荡，使样品的内壁、外壁得到充分的洗脱，然后将冲洗液转移到另一个无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。将每一样本洗液充分均匀后，接种2个平皿，每个平皿加入1ml 洗液。当估计含菌量过高时（每个平板生长菌落数超过300个），应对洗液进行稀释倍数再接种，一般需2-3个不同稀释度，每吸取一个稀释度洗液，更换一支无菌吸管。 3、将凉至45℃普通琼脂培养基，倾注于已加入样液的平皿中，每平皿约15-20ml培养基。 4、将培养基与样液小心摇匀，待琼脂凝固后倒置平皿，置37℃培养箱内培养48h，计 算最终结果菌落数。 六、采样数量：各类产品每批随机抽取10件样品。
七、结果计算 计算公式为： 菌数/每件次（或g）= 平均菌数×稀释倍数---------------------(C2) 件次或重量（g） 初始菌试验报告检品名称生产批号检验日期检验人复核人 一、细菌数测定（37±1℃，3天）
初始污染菌检验规程
初始污染菌检验规程 1. 目的 检测产品、原料、辅料实际带菌（活的微生物群）的数目。 2. 适用范围 适用于本公司产品、原料、辅料的初始污染菌的检测。 3.职责 由质检部负责执行实施。 4.技术要求 产品、原料初始污染菌数：≤100cfu/g 5.引用标准 GB 15979-2002_一次性使用卫生用品卫生标准 中华人民共和国药典（2015版） GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法 6.试剂和培养基 6.1洗脱液0.9%Nacl 称好9gNaCl溶于1000ml蒸馏水中，充分搅拌直至完全溶解，灭菌备用。 6.2胰蛋白胨大豆琼脂培养基 取胰蛋白胨大豆琼脂培养基38g，加入1000ml蒸馏水中，微温溶解后，调节PH 为7.3±0.2， 灭菌分装。 6.3玫瑰红钠琼脂培养基 玫瑰红钠琼脂培养基31.5 g，加入1000ml蒸馏水中，微温溶解后，调节PH为6.0±0.2， 灭菌分装。 7.仪器设备 锥形瓶量筒高压灭菌锅试管灭菌培养皿灭菌刻度吸管超净工作台酒精灯恒温培养箱洗耳球 8.操作方法 8.1样品处理 8.1.1无菌称取10g可以破坏性类供试品,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡，保温于45℃水浴中5～10min，作为1：10供试液。 8.1.2对供试品不能采用破坏性取样可用浸有无菌生理盐水拭子涂抹采样，被采表面积100cm2.加入灭菌生理盐水100ml。保温于45℃水浴中5～10min，不时振摇，作为1：10的供试液。 8.2接种 8.2.1需厌氧菌 取制备好的供试液接种于有胰蛋白胨大豆琼脂培养基的培养皿中，每支平皿接种1ml供试液，接种3支。取一支有培养基的空白平皿做阴性对照。 8.2.1霉菌 取制备好的供试液接种于有玫瑰红钠琼脂培养基的培养皿中，每支平皿接种1ml供试液，接种2支。取一支有培养基的空白平皿做阴性对照。 8.3培养 需厌氧培养基置于37℃培养3d ，霉菌培养置于28℃培养5d
产品无菌检验操作规程
文件编号： 产品无菌检验操作规程 编制日期 审核日期 批准日期 版号生效日期 公司 通过无菌检验，确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。 2 适用范围 适用于灭菌后医疗器械产品（列举）的无菌检验。 3 检验依据 本厂产品注册标准（编号） EN1174-1996 医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估 《中国药典》（2005年版） GB14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分：生物试验方法 GB15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准 4 仪器、设备 百级层流超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器、集菌仪（器）、电子天平、PH计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶，接种环、无菌棉签、镊子，试管架，大试管若干等。 5 无菌检验室的环境要求 5.1 无菌检验应在环境洁净度10000级下的局部百级的单向流空气区域内进行。 5.2 缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压，阳性对照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于10Pa。无菌检验室的室温应保持18～26℃，相对湿度：45～65%。 5.3 无菌检验室的单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬
浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的监测。每年至少检测一次。 5.4 无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数：每次操作时在层流空气所及台面的左中右置3个营养琼脂平板，暴露30min，于30～35℃培养48小时，菌落数平均应不超过1CFU/平板。 6 无菌检验前的准备 6.1 器具灭菌、消毒 6.1.1 灭菌：试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。可经电热干燥箱160℃以上干烤2小时，或置压力蒸汽灭菌器内121℃蒸汽灭菌30分钟后使用（根据灭菌效果验证决定灭菌参数）。所有的灭菌物品不应超过2周即用毕，否则应重新灭菌。 6.1.2 消毒：凡检验中使用的器材无法灭菌处理的，使用前必须经消毒处理。如无菌检验室的试管架、电子天平、工作台面、工作人员的手、橡胶吸头等。可采用消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换，以防止产生耐药菌株。 6.1.3 标识：器具的灭菌、消毒后必须做好标识，标明灭菌、消毒时间和使用有效期。 6.2 人员、物料进入无菌检验室 6.2.1 开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理，消毒时间不得少于30min。 6.2.2 物料进入无菌检验室流程 6.2.2.1 脱包：进入无菌检验室的物品若有双重包装的，需将外包装在传递窗/缓冲间拆除后，传入试验室。 6.2.2.2 消毒：进入无菌操作室的所有培养基、供试品等的外表都应采用适用的方法进行消毒处理，以避免将外包装污染的微生物带入无菌检验室。 6.2.2.3 传递：查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、消毒标识，是否在有效期内。符合要求的经传递窗传入无菌检验室。 6.2.3 人员进入无菌检验室流程 6.2.3.1 更鞋脱衣：在一更区脱去一般区工作鞋，穿上无菌检验室工作鞋；脱去一般区工作服。 6.2.3.2 洗手：首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫，再用流水连续冲洗20秒，洗净泡沫。 6.2.3.3 更衣：在二更区按照从上到下的顺序穿戴无菌工作服（包括衣、帽、口罩等），要求裤子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有头发。 6.2.3.4 手消毒：用消毒液浸泡双手5秒以上或用浸过消毒液的棉球擦拭双手。消毒液可用洗必泰、新洁尔灭、碘伏、75%酒精等。 6.2.3.5 人员进入：经缓冲间进入无菌检验室。 6.2.4 人员进入无菌检验室后，进一步用消毒液擦拭工作台面，戴无菌手套。 7 无菌检验操作要求 7.1 全过程必须严格执行无菌操作，防止微生物污染。 7.2 使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散。 7.3 所有操作均应在近火焰区进行，且不得有大幅度或快速动作，以免搅动空气中的尘埃微粒。 7.4 使用金属接种器具时，用前、用后均需灼烧灭菌。 7.5 在接种培养物时，动作应轻、准，防止培养物溅出，产生汽溶胶，造成污染。 7.6 操作过程中所有的带菌物品，用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内，或在检验完成后经传递窗传至一般区，立即用压力蒸汽灭菌锅121℃灭菌30分钟。 8 培养基制备
药材检验原始记录样本
XXXXX药业（饮片）有限公司 原药材检验报告单 XXXXX药业（饮片）有限公司
原药材检验记录 【性状】 结果： 【鉴别】（1）显微鉴别 横截面： 结果： 粉末： 结果： （2）薄层鉴别 供试品溶液的制备：取粉末1g，加乙醇15ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液
蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解。 对照药材、对照品溶液配制：取菊花对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含O.5mg的溶液。 温度：（℃） 相对湿度：（％） 展开剂：三氯甲烷-丙酮-甲醇-5%浓氨试液 （6:1:1:0.1） 薄层板：硅胶G 显色剂：稀碘化铋钾试液 灯光：白光、紫外光灯(365nm) 展距：（cm） 供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置 上，显相同颜色的荧光斑点。 S1为对照药材（对照品为中检所提供编号为） S2为对照品（对照品为中检所提供编号为） T为样品 结果： 【检查】杂质不得过 XX % (附录IX A) 杂质称重: g 杂质计算结果为： % （标准规定不得过 XX %） 结果： 膨胀度应不低于4.0（附录IX O） 温度：（℃）相对湿度：（％） 电子天平型号：CP214 溶剂：水 样品编号 1# 2# 3# 干燥品称重： g g g 第一次样品膨胀后体积： ml ml ml 第二次样品膨胀后体积： ml ml ml （两次差异不超过0.1ml） 膨胀度计算结果为：（标准规定不低于4.0）
结果： 水分不得过12.0% （附录Ⅸ H 第一法）。 温度：（℃）相对湿度：（％） 烘箱型号：DHG-91012SA型电子天平型号：CP214 样品编号 1# 2# 第一次称量瓶干燥(105℃ 3h) （g）（g）第二次称量瓶恒重(105℃ 1h) （g）（g）样品称重（g）（g）第一次称量瓶+样品干燥(105℃ 5h) （g）（g）第二次称量瓶+样品恒重(105℃ 1h) （g）（g）水分计算结果为：（%）（标准规定不得过12.0%） 结果: 总灰分不得过4.0%（附录Ⅸ K） 温度：（℃）相对湿度：（％） 马福炉型号：SX2.5-10 电子天平型号：CP214 样品编号 1# 2# 第一次坩锅称重(600℃ 3h) （g）（g）第二次坩锅恒重(600℃ 0.5h) （g）（g）样品称重（g）（g）第一次坩锅+残渣称重(600℃ 3h) （g）（g）第二次坩锅+残渣恒重(600℃ 0.5h) （g）（g）总灰分计算结果为：（%）（标准规定不得过4.0%） 结果： 酸不溶性灰分不得过3.0％（附录Ⅸ K）。 温度：（℃）相对湿度：（％） 马福炉型号 SX2.5-10 电子天平型号 CP214
疾控中心沙门氏菌检验原始记录
检验原始记录（沙门氏菌） 样品编号：疾控检[201 ] 号 _______________________________________________ 检验依据：《年国家食品污染和有害因素风险工作手册》___________ 检验项目：沙门氏菌_________ 一、培养基及试剂： 1、缓冲蛋白胨水（BPVV：生产厂家____________________ 批号 _________________ 2、四硫磺酸盐煌绿增菌液（TTB）:生产厂家 ___________ 批号 _________________ 3、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）:生产厂家_____________ 批号 _________________ 4、沙门氏菌显色平板：生产厂家_________________ 配置日期 __________________ 5、BS平板：生产厂家 ___________________________ 配置日期 __________________ 6、三糖铁琼脂（TSI）:生产厂家 _________________ 配置日期 _________________ 7、革兰氏染液：生产厂家___________________________ 批号 __________________ &沙门氏菌属诊断血清：生产厂家______________________ 批号 __________________ 二、样品处理：无菌操作取检样g （mL加入盛有—BPW的无菌均质袋内，固体样品用拍击式均质器拍打1 mins 2min，制成1：10均匀稀释液备用。液体样品不需均质，振荡混匀。如需要，测定pH 值，用1mol/L无菌氢氧化钠或盐酸调pH至±。冷冻产品，应在45C以下不超过15min或2Cs 5C不超过18h解冻。 三、实验记录： 25g 检样+BPW225mL ------------- BS 显色培养基 °C放入时间: 取出时间: C放入时间: 取出时间: C放入时间：取出时间: C放入时间：取出时间：C放入时间：取出时间:
医疗器械无菌检验作业指导书教材
无菌检验作业指导书 1目的 通过无菌检验，确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。 2 适用范围 适用于灭菌后医疗器械产品电凝镊的无菌检验。 3 检验依据 3.1、产品注册标准 3.2、《中国药典》（2010年版） 3.3、GB14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分：生物试验方法 3.4、GB15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准 4 仪器、设备 百级层流超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器、电子天平、PH计、冰箱、酒精灯、三角烧瓶，接种环、无菌棉签、镊子，试管架，大试管若干等。 5 无菌检验室的环境要求 5.1 无菌检验应在环境洁净度10000级下的局部百级的单向流空气区域内进行。 5.2 缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压，阳性对照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于10Pa。无菌检验室的室温应保持18～26℃，相对湿度：45～65%。 5.3 无菌检验室的单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的监测。每年至少检测一次。 5.4 无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数：每次操作时在层流空气所及台面的左中右置3个营养琼脂平板，暴露30min，于30～35℃培养48小时，菌落数平均应不超过1cfu/平板。 6 无菌检验前的准备 6.1 器具灭菌、消毒 6.1.1 灭菌：试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。可经电热干燥箱160℃以上干烤2小时，或置压力蒸汽灭菌器内121℃蒸汽灭菌30分钟后使用（根据灭菌效果验证决定灭菌参数）。所有的灭菌物品不应超过2周即用毕，否则应重新灭菌。 6.1.2 消毒：凡检验中使用的器材无法灭菌处理的，使用前必须经消毒处理。
沙门氏菌检验标准操作规程
1 目的PURPOSE 规范888物料、产品的沙门氏菌检验操作，确保检验结果的可靠性。 2 范围SCOPE 适用于888物料、产品的沙门氏菌检验工作。 3 责任RESPONSIBILITY 微生物检验员严格执行本规程，品质部负责人监督执行。 4 程序PROCEDURE 4.1定义和原理 沙门氏菌广泛存在于动物的肠道和内脏，以及被粪便污染的水 和土壤中，是细菌性食物中毒的主要病因。本方法利用沙门氏 菌呈辛酸酯酶阳性，而氧化酶和脂肪酶均呈阴性的特性，对物 料、产品进行沙门氏菌检验。 4.2材料和设备 4.2.1紫外灯：波长366nm，功率不小于6W。 4.2.2放大镜：3至4倍。 4.2.3毛细滴管。 4.2.4LX-B35L压力蒸汽灭菌锅。 4.2.5无菌的培养皿。 4.2.6无菌的接种环。 4.3培养基和试剂 4.3.1 SCDLP液体培养基：按《化妆品卫生规范》（2007版） 或使用商品培养基干粉配制。 4.3.2四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液：按GB4789.4—2010附录 A.5配制或使用商品试剂。 4.3.3 SS琼脂培养基（含1%蔗糖）：牛肉浸膏(或牛肉粉) 5.0g， 蛋白胨5.0g，乳糖10.0g，蔗糖10.0g，胆盐NO.38.5g，柠檬酸 钠8.5g，硫代硫酸钠1.0g，柠檬酸铁1.0g，煌绿1.0g，中性红 0.025g，琼脂13.5g，蒸馏水1000mL。 制订者Prepared By: 88888 审核者Reviewed By: 88888 批准者Approved By: 8888888 CC: 88
4.3.4 HE琼脂培养基：按GB4789.4—2010附录A.5或使用商品 培养基干粉配制。 4.3.5玉米油维多利亚蓝琼脂培养基：灭菌后的基础培养基冷却 至50℃左右，边摇边加入玉米油乳化液。倾注平皿，制成平 板。基础培养基及玉米油乳化液配方如下： a）基础培养基：蛋白胨5g，酵母浸粉3g，氯化钠5g，琼 脂13g，水900mL，pH7.8-8.0。将各成分加入水中，加热 溶解。调节pH7.8-8.0，116℃15min高压灭菌。 b）玉米油乳化液：玉米油100mL，0.1%维多利亚蓝水溶 液100mL，0.5%琼脂溶液80mL，吐温801mL。玉米油加 维多利亚蓝水溶液混合，边振动边在沸水中加热溶化。然 后，放入分液漏斗中，弃去蓝色水部分，再将着色的脂肪 用水洗1-2次。将着色脂肪20mL加入810mL琼脂溶液中， 再加1mL吐温80，116℃15min高压灭菌。冷却后用超声波 乳化。 4.3.6 MUCAP试剂：取MUCAP 100mg，加0.2mL纤维溶解剂溶 解，再加Triton X-100 1.8mL，贮存于4℃冰箱。使用时用 pH5.0的0.1mol/L醋酸盐缓冲液稀释10倍。 4.3.7氧化酶试纸：将甲液与乙液等量混合。取定性滤纸，浸透 混合液后，于70-80℃烘箱烘干，剪成大小适当的纸条，密封于塑料袋或瓶中，贮存于4℃冰箱备用。 甲液：1% α-萘酚乙醇液；乙液：1% 二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。 4.4 检验步骤 4.4.1增菌和前增菌 取样品按SOP-QM-B017制备1：10稀释的检液。取10mL 加到90mLSCDLP液体培养基中，置培养箱36℃±1℃培养 18h～24h。移取10mL，转接种于100mL四硫酸钠煌绿 （TTB）增菌液内，42℃±1℃培养18h～24h。 4.4.2分离培养 4.4.2.1分别用接种环取增菌液1 环，划线接种于一个SS 琼 脂平板（含1%蔗糖）和一个HE琼脂平板。SS琼脂平板于