定标 质控

定标  质控
定标  质控

定标英文为calibrate

在规定条件下,建立测量装置与一可追溯且已知参考值不确定度的标准之间关系的一整套操作活动。校准可能包括以下步骤:检验、矫正、报告、或透过调整来消除被比较的测量装置在准确度方面的任何偏差。

在生化仪上就是用标准品(其值可溯源至国际标准)来测试其吸光度,得出标准曲线。用于标本检测;

一般最少三次最多12次

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质控Quality Control

为达到规范或规定对数据质量要求而采取的作业技术和措施。

就是把它当成标本来测试有的有商家给定的靶値有的没有

都可以通过绘制质控图了解机器的稳定性

每个质控一般测试6次以上

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定标是前提质控是保证。

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OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,OD=lg(1/trans),其中trans为检测物的透光值。

光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。

吸光度,absorbance,是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的以10为底的对数(即lg(Iin/Iout),吸光度表示物质对光的吸收程度;

CV值:变异系数又称“标准差率”,是衡量资料中各观测值变异程度的一个统计量。公式:标准差与平均数的比值;

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临床研究中误差的来源可以分为两类:一类是随机误差(random error);一类是系统误差(systematic error)。

随机误差:是由于抽样误差所引起的,其大小可以用统计学方法进行估计,但没有方向性,也就是说,这种误差的存在使研究结果随机的高于或小于真值。

系统误差即偏倚(bias):是指研究结果系统地偏离了真实情况。与随机误差不同,偏倚的存在总是造成研究结果或高于真值或低于真值,因而具有方向性。由于在研究工作中定量的估计偏倚的大小很困难,而确定偏倚的方向却相对较容易。当偏倚使研究结果高于真值时,称之为正偏倚,反之,偏倚使研究结果低于真值时,称之为负偏倚。

临床研究中的偏倚一般分为三类,即选择偏倚、信息偏倚、混杂偏倚。

选择偏倚:出现于研究设计阶段,指由于研究对象选择不当而使研究结果偏离真实情况而产生偏倚。研究设计上的缺陷是选择偏倚的主要来源,在确定研究对象时表现得最为突出。常见的情况是在研究开始时实验组和对照组就存在着除诊疗措施以外的差异,而缺乏可比性。

信息偏倚:又称观察偏倚、测量偏倚,是指研究过程中进行信息收集时产生的系统误差。测量方法的缺陷,诊断标准不明确或资料的缺失遗漏等都是信息偏倚的来源。

混杂偏倚:流行病学研究中,由于一个或多个外来因素的存在,掩盖或夸大了研究因素与疾病的联系,从而部分或全部地歪曲了两者间的真实联系,称之为混杂偏倚(confounding bias)或混杂(confounding)。引起混杂的因素称为混杂因子(confounder)。

从某种意义上讲,偏倚是抽样调查所无法避免的误差。也就是说,只要是抽样,就会产生偏倚。相应地,要最大限度地控制偏倚,只能通过多次抽样、预实验等手段加以判断。由于许多调查或实验是无法重复或进行预实验的,所以经验在偏倚的处理上也是非常重要的。

生化检验中的定标复习课程

生化检验中的定标

定标的意义: 定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。它是由仪器与试剂共同确定下 来。当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活 性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。K值就是我们通过定标找 出来的。一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。 标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。任何 标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。因此,K值具有非常决定性的意义,可以 决定标本的准确性。 K值的决定因素: 我们看看K值会受到什么影响呢? 第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。 第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器、试剂的影响,如 果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。仪器和试剂是影响K值的主要因素。 如何确定K值是准确的? 一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。 K值的真面目: K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性 由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。 多长时间定一次标合适? 这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两

点定标。 酶的项目如何确定K值: 一是计算出来的理论K值; K = (TV X 1000)/(SV X L ) X £ 二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准—A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。 生化检验中的各种空白概念 时间:2009-5-8 9:54:09, 点击:61 对所谓“试剂空白""样本空白""水空白""杯空白“等“空白“名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充: 空白概念区别要点:**空白二只含**的空白(只含**的吸光度) 1、试剂空白: 由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所以从理论上说,所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除,试剂本身的吸光度就是试剂空白。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量。 在传统手工方法中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、空白管。其中空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白。因为操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白。 在全自动分析仪上,大体上是模拟手工操作。但许多全自动分析仪为追求速度,在设计上采用一些折中方法来测定试剂空白。以日立全系列生化仪为例。该系列分析仪是做不了实时试剂空白,因为它们全是先加入样本后加试剂,为了折中,只好在定标时做一个试剂空白,保存起来,需要扣除试剂空白时再减这个预先保存的值。这种做法,对于比较稳定的试剂来讲,对结果影响不大。 通俗的讲,日立的仪器工作流程中首先是将标本加入到比色杯中,然后依次加入R1 试剂、R2试剂,所以试剂空白在每个测定项目曲线中是无法看到的。但是7170从CALIBRATION 中是可以看到的,S1ABS就是代表试剂空白吸光度,在CALIBRAT ION画面里的下方找到 Reaction Monitor (反应监察),其中STD(1)就是代表试剂空白反应曲线.为了减小误差,日 立仪器会连续做两次测定,所以你看到FIRST和SECONDS条,计算时是取他们的平均值。做 试剂空白目的之一就是观察试剂是否稳定,积极采取措施纠正。对于日立的这种试剂空白测定很多仪器都采用这种方法,也叫做试剂空白校准。

定标与质控流程图

定标与质控流程图

解释说明: 一、定标前准备: ?车内实验室环境准备 1、环境温度:实验室的标准温度为20℃,浮动范 围为15℃—25℃。 2、实验室内的相对湿度一般应保持50~70%。 3、实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀、防磁与 屏蔽等方面的环境条件应符合在室内开展的检 定项目之检定规程和计量标准器具及计量检测 仪器设备对环境条件的要求,室内采光应利于 检定工作和计量检测工作的进行。 ?仪器准备 保证仪器工作状态良好,确保检验结果的重复性在可控制范围内。例如检查生化仪光路良好;反应杯 无破损,无染色;各工作臂工作正常等。 试剂准备 确认试剂的批号及有效期,确保试剂的有效性。 ?定标品准备 严格按照说明书配置标准的的定标品,确保定标品的有效性。 二、定标操作: ?定标液设置: 根据所使用的定标液的批号,输入定标液的目标值,最好是设置空白杯的对比;设置正确的定标规则。 ?定标样本申请: 根据所需要定标的项目,申请定标样本。注意定标样本的杯号、反应盘号及虚拟盘号。 ?定标测试:

仪器进行初始化完成后,无任何异常现象时,在“样本检测”的界面点击开始检测。仪器工作过程中, 注意仪器的工作过程中有无异常现象,以确保定标结果 的准确性。 三、定标结果的应用: ?定标结果分析: 待定标测试完成后,在“定标结果”一栏中,查看反应曲线及定标曲线,观察反应曲线是否正常,定标 线是否正常。确定该项目的定标结果是否可用,若不可 用,则需要排除异常后重新进行定标;若可用,则需要 进行质控验证。 ?质控验证: 质控验证是作为定标的补充,是对定标结果的验证,为确保样本检测结果的正确最为重要的一环。只有 通过质控验证的定标结果才可进行样本测试,否则只能 重新进行定标测试。 ?样本测试: 在样本测试中,一定要严格按照检验工作的规范制度进行操作,确保样本检测结果的正确可信。

生化质控操作方法修订稿

生化质控操作方法 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-

iChem---330生化分析仪 做质控,样本测试之前,注意一下几点: 一、试剂针,样本针,搅拌杆以及清洗臂的各个位置是否正确,特别是反应杯的位置,如 把试剂或者标本加至反应杯壁上,对测试有影响; 二、所有反应杯是否干净,杯子里有无残留水,反应杯外壁上是否有水,反应槽里是否有 水,如有水,请擦干净; 三、执行清洗程序,观察7阶清洗臂清洗反应杯时,杯子里的水是否会溢出来,7根清洗针 的针尖是否会滴水下来。 质控测试: 一、点击质控液设置,点击增加,输入名称:质控液,批号:852UN,浓度水平:中,样本 盘号:1号样本盘,虚拟号:0,样本杯号:58,然后选中所有项目,分别点击右下角的平均浓度的白色框,输入项目的靶值和标准差,然后选中某个项目,输入其靶值和 标准差(所有项目的靶值和标准差根据说明书的靶值表设定)见附表: 二、依次输入所有要做质控的项目的靶值和标准差,完成之后,点保存即可,保存之后, 检查下所有靶值和浓度有无输错,如有输错,点击修改,然后再保存; 三、然后点击质控申请,选中你刚刚所加的那个质控液的编号,然后点击编号对应的小正 方形,会出现一个小勾勾,右边所有的项目默认都会选中(有绿点代表选中),确认 所做项目无缺漏之后,点击开始测试,它会自动跳到样本检测的那个界面,点开始测 试,就进行质控的测试了(点开始测试之前,注意全部试剂盖子去掉,质控液用样品 杯装着,放在设定的位置); 四、测试完成之后,点击质控结果,点击查询,观察测试值是否在靶值的正负两个标准差 之内,如不在范围之内,请检查质控液,定标,试剂是否正常,机器测试过程中有无 异常现象; 五、如均无异常,调整K因子,公式:新K因子=(均值÷测试值)×定标出来的K因子; 六、定标出来的K因子在定标结果里查看,首先找到定标结果里的因子,例如UREA的 “K”值是,然后乘以10000等于86, 86才是真正要换算的K因子; 七、得出新的K因子之后,在定标设置里找到项目UREA,将定标规则修改为K因子法,输 入新的K因子,然后点击保存即可; 八、重新做质控测试,观察质控结果。 质控液复溶步骤

生化质控操作方法

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生化质控操作方法

iChem---330生化分析仪 做质控,样本测试之前,注意一下几点: 一、试剂针,样本针,搅拌杆以及清洗臂的各个位置是否正确,特别是反应杯的位置,如 把试剂或者标本加至反应杯壁上,对测试有影响; 二、所有反应杯是否干净,杯子里有无残留水,反应杯外壁上是否有水,反应槽里是否有 水,如有水,请擦干净; 三、执行清洗程序,观察7阶清洗臂清洗反应杯时,杯子里的水是否会溢出来,7根清洗针 的针尖是否会滴水下来。 质控测试: 击质控液设置,点击增加,输入名称:质控液,批号:852UN,浓度水平:中,样本盘号:1号样本盘,虚拟号:0,样本杯号:58,然后选中所有项目,分别点击右下角 的平均浓度的白色框,输入项目的靶值和标准差,然后选中某个项目,输入其靶值和 标准差(所有项目的靶值和标准差根据说明书的靶值表设定)见附表: 二、依次输入所有要做质控的项目的靶值和标准差,完成之后,点保存即可,保存之后, 检查下所有靶值和浓度有无输错,如有输错,点击修改,然后再保存; 三、然后点击质控申请,选中你刚刚所加的那个质控液的编号,然后点击编号对应的小正 方形,会出现一个小勾勾,右边所有的项目默认都会选中(有绿点代表选中),确认 所做项目无缺漏之后,点击开始测试,它会自动跳到样本检测的那个界面,点开始测 试,就进行质控的测试了(点开始测试之前,注意全部试剂盖子去掉,质控液用样品 杯装着,放在设定的位置); 四、测试完成之后,点击质控结果,点击查询,观察测试值是否在靶值的正负两个标准差 之内,如不在范围之内,请检查质控液,定标,试剂是否正常,机器测试过程中有无 异常现象; 五、如均无异常,调整K因子,公式:新K因子=(均值÷测试值)×定标出来的K因子; 六、定标出来的K因子在定标结果里查看,首先找到定标结果里的因子,例如UREA的“K” 值是0.0086,然后0.0086乘以10000等于86, 86才是真正要换算的K因子; 七、得出新的K因子之后,在定标设置里找到项目UREA,将定标规则修改为K因子法,输 入新的K因子,然后点击保存即可; 八、重新做质控测试,观察质控结果。

检验科临检生化质控方法

检验科临检、生化室内质控方法 一、质控的概念。质量控制是为了监测和评估本实验室的工作质量,以此决定本实验各检验可否发出的检查、控制手段。 1、OCV:表示本实验室在目前最佳条件下某项目所能达到的最好精密度水平。其基本原则是,OCV测定需采用与常规工作相同的试剂、仪器及检测方法。一般来说,实验室都用OCV测定来确定本室新开展的一项新项目的精密度,如果数值偏大,则说明该测定方法可能不稳定,不成熟,应该尽量避免在本实验室使用该方法。 2、RCV:表示本实验室在目前条件下,常规工作中某项目检验的精密度水平,是室内质控中靶值和允许误差范围确定的依据。在第一次测定OCV后及每更换一次质控血清批号后,均应对新质控血清进行RCV测定。一般实验室的质控工作都是以RCV为标准的。 3、RCVK:表示常规条件下对定值血清测定的变异。在RCVK中,根据RCV 数据所绘制的“空图”,对于同一批号的质控品是不变的。不得将当月的检测结果代替RCV测定中的数据来绘制质控图。 4、RCVU。常规条件下未定值血清测定的变异。 目前在国内外采用最多的质控方法是(均值)图法。我认为佳音内部开展的质控方法还是以其为最佳。在建立图之前应做一些准备工作。 二、准备工作。 1、建立质控的规章制度及普及质控知识。质控工作的开展,是需要耗费大量的时间与精力的,还需要掌握大量的质控知识。这就需要在平时的工作中下大力气规定出一些制度来实施质控的工作,并在检验科中多加强这方面的学习,使每个员工都掌握一定的质控知识,才能让员工在平时的工作中加以用心,把质控工作开展起来。 2、定期检校仪器。对使用的仪器定期进行检查和校正,并建立完善的资料数据,以便在质控工作开展起来后,分析数据时加以应用。 3、制备生化质控血清。质控工作的开展需要大量的质控血清,而假如全部从试剂公司购置的话,是笔不小的开支。可以采取多份血清标本,混合后分装冻存作为质控血清使用。自制质控血清最好一次性制备够半年甚至是一年的量。在检验过程中应注意防止肝炎感染。在使用冻存的质控血清时,必须使其完全融化并达到室温后方可测定。 4、选择标准血清。每一项目都需要标准品来标定一些数据,标准品的品质直接关系到质控的准确性和精密度。因此要做好质控工作,就要选择稳定性较好而瓶间较小的标准品。

生化检验中的定标

定标的意义: 定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。它是由仪器与试剂共同确定下来。当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。K值就是我们通过定标找出来的。一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。 K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度 标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。 K值的决定因素: 我们看看K值会受到什么影响呢? 第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。 第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。仪器和试剂是影响K值的主要因素。 如何确定K值是准确的? 一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K 值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。 K值的真面目: K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。 多长时间定一次标合适? 这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。 酶的项目如何确定K值: 一是计算出来的理论K值; K = (TV × 1000)/(SV × L × ε) 二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。

定标液和质控的概念作用

定标液和质控的概念作用 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020

定标液和质控的概念以及作用 一、质控品Quality Control: 用于体外诊断的质量控制物质(定值和非定值),是一种旨在用于医学用途的检测系统中使用的物质、材料、物品或设备,其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变化检测系统可能产生的分析偏差等性能特征。质量控制物质(定值和非定值),可用于能力验证、实验室内质量控制。质控品分定值质控品和非定值质控品两种: 1、定值质控品 定值质控品有制造商使用合适的分析方法或过程分析的参考值,并指定参考范围; 2、非定值质控品 非定值质控品可以在标贴上标示目标浓度(如:低、高、中),但是没有指定的参考范围,可以不用指定非定值质控品应用的分析测试系统,但需满足质量控制的系统规则。 二、定标液calibrate: 在规定条件下,建立测量装置与一可追溯且已知参考值不确定度的标准之间关系的一整套操作活动。校准可能包括以下步骤:检验、矫正、报告、或透过调整来消除被比较的测量装置在准确度方面的任何偏差。定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的当我们测定一个标本时,无论是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值叫吸光度,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性那就要乘上一个K值,计算并打印出来。K值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是由试剂

空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度。计算公式:K=标准浓度/(A-标准-A试剂空白) 在生化仪上就是用标准品(其值可溯源至国际标准)来测试其吸光度,得出标准曲线。用于标本检测。 综上,定标是前提,质控是保证。

检验科生化室内质控办法

检验科生化室内质控办法 The latest revision on November 22, 2020

检验科生化室内质控方法 一、质控的概念。质量控制是为了监测和评估本实验室的工作质量,以此决定本实验各检验可否发出的检查、控制手段。 二、1、OCV:表示本实验室在目前最佳条件下某项目所能达到的最好精密度水平。其基本原则是,OCV测定需采用与常规工作相同的试剂、仪器及检测方法。一般来说,实验室都用OCV测定来确定本室新开展的一项新项目的精密度,如果数值偏大,则说明该测定方法可能不稳定,不成熟,应该尽量避免在本实验室使用该方法。 三、2、RCV:表示本实验室在目前条件下,常规工作中某项目检验的精密度水平,是室内质控中靶值和允许误差范围确定的依据。在第一次测定OCV后及每更换一次质控血清批号后,均应对新质控血清进行RCV测定。一般实验室的质控工作都是以RCV为标准的。 四、3、RCVK:表示常规条件下对定值血清测定的变异。在RCVK中,根据RCV数据所绘制的“空图”,对于同一批号的质控品是不变的。不得将当月的检测结果代替RCV测定中的数据来绘制质控图。 五、4、RCVU。常规条件下未定值血清测定的变异。 六、目前在国内外采用最多的质控方法是(均值)图法。我认为佳音内部开展的质控方法还是以其为最佳。在建立 图之前应做一些准备工作。 七、二、准备工作。 八、1、建立质控的规章制度及普及质控知识。质控工作的开展,是需要耗费大量的时间与精力的,还需要掌握大量的质控知识。这就需要在平时的工作中下大力气规定出一些制度来实施质控的工作,并在检验科中多加强这方面的学习,使每个员工都掌握一定的质控知识,才能让员工在平时的工作中加以用心,把质控工作开展起来。 九、2、定期检校仪器。对使用的仪器定期进行检查和校正,并建立完善的资料数据,以便在质控工作开展起来后,分析数据时加以应用。 十、3、制备生化质控血清。质控工作的开展需要大量的质控血清,而假如全部从试剂公司购置的话,是笔不小的开支。可以采取多份血清标本,混合后分装冻存作为质控血清使用。自制质控血清最好一次性制备够半年甚至是一年的量。在检验过程中应注意防止肝炎感染。在使用冻存的质控血清时,必须使其完全融化并达到室温后方可测定。 十一、4、选择标准血清。每一项目都需要标准品来标定一些数据,标准品的品质直接关系到质控的准确性和精密度。因此要做好质控工作,就要选择稳定性较好而瓶间较小的标准品。 十二、三、质控的方法。 十三、1、OCV和RCV的测定和计算机分析。 十四、用制备好的同批质控血清本实验室的最佳条件下反复测定至少20份,计算全部结果的均值、标准差S和变异系数CV,此处的CV即OCV。 十五、取测过OCV或准备用于下阶段的质控血清,每天随病人标本测定一瓶(或一支)。20天后,计算各项目测定结果的、S、CV,此处的CV即为RCV。对于我们集团来说,可能不会每天都有生化测定,这时可以用每次常规测定时做的质控血清的值,连续20次结果计算、S、RCV。 十六、由于计算器及计算机的普及,这里只介绍结果的计算器的算法:按一下STA键,会出现一个统计框,点返回后,输一个结果按一下DAT键。输完结果后,点SUM即为结果的总和;AVE为均值;S即为标准差S;S/AVE即为CV值。2、OCV及RCV测定的注意事项:(1)RCV测定应尽可能保证最佳条件,一个数据尽量来自一瓶质控血清。最好在4-5天内每天测定 十七、4-5个结果,这样4-5天内就可以得到做分析所用的20个数据。综合表达了批间和天间的精密度水平。 十八、(2)RCV测定必须保证是和标本测定相同的处理条件,每次的RCV测定次序必须随机。且20个数据要来自于20次测定中的20瓶质控血清。一天内多个数据,一批内多个数据,或每天将同一瓶质控血清测定多次求平均值,均不符合RCV测定的要求。 十九、(3)、在OCV测定中,如有某个数据超过±3S的范围,应废除全部数据,重新测定OCV。如RCV测定中有一个数据超过±3S的范围,则删除该数据,用剩下的19个数据计算RCV;如果有一个以上的数据超过±3S,则应舍弃全部的数据,重新测定RCV。 二十、(4)当一批质控快要用完时,应提前制备下一批质控血清,并做RCV测定。 二十一、(5)RCV一般比OCV大,但不超过OCV的两倍。且两者的应十分接近。如果RCV值小于OCV值,说明OCV 没有在实验室的最佳条件下测定。

生化定标及质控操作说明

生化定标及质控操作说明 ⊙定标液及质控液在溶解之后避光、-20℃保存一个月 一.定标程序 1.设置定标液: 点击定标→定标液设置一般选用的都是线性定标;设置2个定标点一个是蒸馏水,另一个是定标液。(蒸馏水要求是干净新鲜的,要是没有蒸馏水就使用0.9%的生理盐水代替,不要用注射器抽取生理盐水那样瓶塞会污染生理盐水,直接倒出适量生理盐水即可) 再点击添加设置①名称:例如:水②批号、浓度水平一般无意义可以不设置③有效期:尽量设的时间长一些,在每次定标的时候要注意是否超过有效期,保证定标过程顺利④位置:因为样本检测是从1盘开始的,所以设置的时候设置虚拟盘例如:10盘作为定标的专用位置,此位置不能进行其他测试,只能用于定标⑤在项目列表一栏选中项目,并将定标项目的靶值浓度输入浓度一栏。设置完成后点击确认。 2.设置定标规则 点击参数→项目设置→选中项目→点击定标规则→在定标列表中选中所使用的定标液→重复测量次数为 3.每个项目都要设置 3.定标申请 ①点击定标→点击定标申请,在定标类型上选择定标,在项目选择选择要定标的项目(注明:使用双试剂终点法检测的项目如:TB、DB、GLu、UA四个项目要做试剂空白,需要在定标类型上选择试剂空白,然后在项目选择中选择以上四个项目)然后点击确认。 ②将蒸馏水放在样本盘1号位置,把定标液放在2号位置。点击换杯换上干净杯子。因为一个项目的定标需要6个杯子,所以要保证杯子够用。 4.质控 定标做的好不好主要是看质控做的怎么样。做完定标后接着做质控。 (1)设置质控液 点击质控→点击质控液设置→设置①批号、有效期一定是质控液上标示的数字②位置:1号盘40号位,此位置是质控专用位置,不可用于样本检测,如果样本量多,可将样本编在2号盘上。在项目列表一栏上选择项目并填上质控液的浓度和标准差,全部设置好后,点击确认。 (2)操作 做质控有两种方法,一种是:把质控当样本做。第二种是点击质控申请,选中项目进行测试,此过程查询结果比较麻烦。需要点击日内质控,在项目选择中选中项目,点击刷新,将所有项目都刷新一遍,再点击质控汇总,此次质控结果就会显示 5.结果 如果多次定标后质控仍然是做不好,在数值不是很离谱的情况下,可以对项目因子进行调整,根据项目所用测试方法不同,分为两种类型: (1)采用酶法测定的项目(ALT、AST、GGT、ALP)可以通过调整其计算因子来达到目的。点击定标→点击结果查看→选中要调整的项目,点击下方的测试数据修改计算因子。新的计算因子=(质控液靶值/质控实 际测量值)*计算因子(现在的)。改完之后,再重新做质控,看看质控是否在控。 (2)除了上述项目之外的项目,需要修改“R”值。点击定标→点击结果查看→选中要调整的项目,点击测试数据,修改“R”值。R=ac+b(a为吸光度值A ,c为浓度,b为B值。主要是修改a值)。新的a=(质控 液实际测量值/质控靶值)*a(现在的),改完之后在重新做质控,看看质控是否在控。 6.维修和保养 (1)灯泡的寿命是1000小时,要求光源本底值>45000、发光强度>70%,如果光源本底值过低的话,应先关机,呆5-10分钟后再重新开机。 (2)每天工作完成后应用75%或95%的酒精纱布从上往下擦拭样本针。 (3)若样本量大的话,点击维护→点击常规清洗,用碱性清洗液。

生化检测基本常识

生化检测常识

目录 第一章生化检测基本常识 1.1标本的获得 (2) 第二章常规生化检测项目简介 2.1生化项目的临床意义 (2) 第三章生化仪参数测量原理 3.1自动生化仪的分类 (3) 3.2分立式生化仪结构 (5) 3.3生化检验的原理和方法 (6) 3.4生化分析仪测定方法的分类及应用度的计算 (9) 3.5.测定值计算方程 (10) 3.6 定标参数和浓度的计算 (17) 第四章几个重要概念 5.1试剂空白 (21) 5.2样本空白 (21) 5.3水空白 (21) 5.4样本 (21) 5.5质控物质 (21) 5.6底物控制 (21)

第一章生化检测基本常识 生化检测是医院检验科(或化验室)常用的检测手段,通常以人的血清为标本,通过测量血清中各生化成份的含量,为临床诊断提供依据。 1.1标本的获得 一般要求病人空腹时采静脉血(全血)。全血经过离心机离心,分层为血清和血细胞,正常情况下,上层颜色浅且透明(血清),下层颜色深且不透明(血细胞)。有的血清较为特殊,或分层不明显(融血),或血清不透明(脂血,呈牛奶状)。 第二章常规生化检测项目简介 2.1生化项目的临床意义 ◆丙氨酸氨基转移酶(ALT):又称为谷丙转氨酶(GPT)是衡量肝功能的重要指标,许多低端医 疗机构在做体检时仅测此一项生化项目。正常人一般在40U/L以内。干粉试剂复溶后为单试剂,液体试剂一般为双试剂,应用动力学法可计算结果。 ◆蛋白:通常测白蛋白(ALB)和总蛋白(TP),终点法。一般用单试剂,有的TP试剂为双试剂, 可用两点终点法测。蛋白质是血清的主要成份,大部份由肝细胞合成。通过蛋白的测定可以协助某些疾病的诊断。 ◆血糖:血液中的葡萄糖简称血糖(GLU)。常用于糖尿病的诊断。正常人空腹血糖一般为3.9~ 6.1mmol/L。市场上单、双试剂的商品化试剂盒都有,可用终点法(单试剂)或两点终点法测量 (双试剂)。 ◆门冬氨酸氨基转移酶(AST):又称为谷草转氨酶(GOT),主要用于心肌和肝胆疾病及骨骼肌病 的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在40U/L以内。同ALT一样,无论单、双试剂,用动力学法可计算结果。 ◆碱性磷酸酶(ALP):主要用于肝胆疾病及骨骼病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常 人一般在240U/L以内。用动力学法计算结果。 ◆γ-谷氨酰转移酶(GGT):主要用于肝胆疾病诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般 在50U/L以内。用动力学法计算结果。 ◆胆红素(BiL):胆红素的测定,能准确反映黄疸的程度,判断黄疸的类型。一般测量总胆红素(TBil) 和直接胆红素(DBil)。 ◆甘油三酯(TG):其含量测定是血脂分析的重要内容之一。 ◆总胆固醇(CHOL):是游离胆固醇和胆固醇酯的总称,其测定对高脂蛋白血症和冠心病的诊断 及发病机理的研究有一定意义。 ◆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):主要在肝脏中合成,是血清中颗粒数最多的脂蛋白。其含量是 冠心病诊断的重要依据之一。 ◆肌酐(CREA):是肌酸代谢的最终产物,由肾脏排出。是肾功能的重要指标之一。 ◆尿素(Urea):是蛋白质分解代谢的终产物。血尿素测定是肾功能的最敏感指标。 ◆载脂蛋白A1(APOA1):是高密度脂蛋白的主要组成成分,临床上主要用于脑血管病风险度的估 计。 ◆载脂蛋白B(APOB):是低密度脂蛋白的主要组成成分,临床上主要用于冠心病的风险度的估计。 ◆肌酸激酶(CK):肌酸激酶通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中,是 一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。可用于早期诊断急性心肌梗,常见肌病(如进行性肌营养不良发作期、病毒性心肌炎、多发性肌炎、挤压综合征等严重肌肉损伤)及脑血管疾病的诊断。

生化检验质控操作流程

生化检验质控操作流程

生化检验质控操作流程 【操作步骤】 一、室内质控品的选择 理想的室内质控品至少应具备以下特点:人血清基质;无传染性;瓶间变异小,酶类项目CV%<2%,其它分析物CV%<1%;冻干品复溶后稳定性好,多数常规生化项目2~8℃稳定7天,-20℃稳定30天;有效期应在1年以上。 二、质控品的正确使用与保存 严格按质控品说明书操作和保存,不使用超过保质期的质控品;冻干质控品的复溶确保所用溶剂的质量和所加溶剂的量的准确性,复溶时应轻轻摇匀,使内容物完全溶解,切忌剧烈振摇,防止泡沫产生,复溶时间不得少于20分钟;质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定;每天至少做两水平以上质控品。 三、室内质控图的绘制 1.均值和质控限的确定 在开始室内质控时,首先要确定质控图的均值和质控限,将质控品应与常规标本一起测定。根据20次质控结果(每天开一瓶,一天测一次),对数据进行离群值检验(剔除超过3s 外的数据),计算出平均数和标准差,作为暂定均值和暂定标准差。 以此暂定均值和标准差作为下一个月室内质控图的均值和

四、失控情况处理及原因分析 室内质控出控时,应填写失控报告单,并上交专业主管,由专业主管做出是否发出与测定质控品相关的那批患者标本检验报告并分析及登记失控原因。失控信号的出现受多种因素的影响,这些因素包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效,仪器维护不良以及采用的质控规则、质控限范围、一次测定的质控标本数等等。 失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批患者标本报告可能作废。此时,首先要尽量查明导致的原因,然后再随机挑选出一定比例(例如5%或10%)的患者标本进行重新测定,最后根据既定标准判断先前测定结果是否可接受,对失控做出恰当的判断。对判断为真失控的情况,应该在重做质控结果在控以后,对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判断为假失控时,常规测定报告可以按原先测定结果发出,不必重做。当得到失控信号时,可以采用如下步骤去寻找原因: 1.立即重测定同一质控品。此步是主要是用以查明人为误差,每一步都认真仔细操作,以查明质控的原因;另外,这一步还可以查出偶然误差,如是偶然误差,则重测的结果应控。如果重测结果仍不在允许范围,则可以进行下一步操作。 2.新开一瓶质控品,重测失控项目。如果质控品结果正常,

生化检验中的定标审批稿

生化检验中的定标 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】

定标的意义: 定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。它是由仪器与试剂共同确定下来。当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。K值就是我们通过定标找出来的。一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。 K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度 标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。 K值的决定因素: 我们看看K值会受到什么影响呢? 第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。 第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。仪器和试剂是影响K值的主要因素。 如何确定K值是准确的? 一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。 K值的真面目: K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。 多长时间定一次标合适? 这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。

生化检验中的各种空白概念

生化检验中的各种空白概念

生化检验中的各种空白概念 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,同学们可能会感到困惑.特此汇集了一下各种言论,并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充: 空白概念区别要点:**空白=只含**的空白(吸光度) 1、试剂空白: 由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所以从理论上说,所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除。试剂本身的吸光度就是试剂空白。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量。 在传统手工方法中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、空白管。其中空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白。因为操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白。 在全自动分析仪上,大体上是模拟手工操作。但许多全自动分析仪为追求速度,在设计上采用一些折中方法来测定试剂空白。以日立全系列生化仪为例。该系列分析仪是做不了实时试剂空白,因为它们全是先加入样本后加试剂,为了折中,只好在定标时做一个试剂空白,保存起来,需要扣除试剂空白时再减这个预先保存的值。这种做法,对于比较稳定的试剂来讲,对结果影响不大。

(3)现代全自动生化仪大多采用双波长测定。双波长测定的原则是根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征,选择两个波长和,使干扰组分在这两个波长处的吸光系数相等,而使待测物质在两波长处的吸光系数有显著差别。以两波长分别测定分析溶液的吸光度,以两个吸光度值之差(△A)计算。这也可以扣除一部分样本空白。 (4)有些仪器,例如日立系列,有专门的“血清信息”功能的设置。做法都是单独占用一个空白通道来计算,这也叫做样品空白校准。 3、水空白: 比色杯在加入水以后的吸光度。水空白的意义主要是对光路系统进行检查和校正,如光源,比色杯等,同时在计算中起到消除“杯差”的作用。日立7060中的Cell Blank(杯空白)测定的就是水空白。定标的意义: 定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。它是由仪器状态和试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个K值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是由试剂空白与标准品,经过仪器测定出两个吸光度。

定标 质控

定标英文为calibrate 在规定条件下,建立测量装置与一可追溯且已知参考值不确定度的标准之间关系的一整套操作活动。校准可能包括以下步骤:检验、矫正、报告、或透过调整来消除被比较的测量装置在准确度方面的任何偏差。 在生化仪上就是用标准品(其值可溯源至国际标准)来测试其吸光度,得出标准曲线。用于标本检测; 一般最少三次最多12次 ====================================== 质控Quality Control 为达到规范或规定对数据质量要求而采取的作业技术和措施。 就是把它当成标本来测试有的有商家给定的靶値有的没有 都可以通过绘制质控图了解机器的稳定性 每个质控一般测试6次以上 ====================================== 定标是前提质控是保证。 ******************************************************************************* **************************************************** ******************************************************************************* **************************************************** OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,OD=lg(1/trans),其中trans为检测物的透光值。 光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 吸光度,absorbance,是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的以10为底的对数(即lg(Iin/Iout),吸光度表示物质对光的吸收程度; CV值:变异系数又称“标准差率”,是衡量资料中各观测值变异程度的一个统计量。公式:标准差与平均数的比值;

检验科生化室内质控方法

1检验科生化室内质控方法 一、质控的概念。质量控制是为了监测和评估本实验室的工作质量,以此决定本实验各检验可否发出的检查、控制手段。 1、OCV:表示本实验室在目前最佳条件下某项目所能达到的最好精密度水平。其基本原则是,OCV 测定需采用与常规工作相同的试剂、仪器及检测方法。一般来说,实验室都用OCV测定来确定本室新开展的一项新项目的精密度,如果数值偏大,则说明该测定方法可能不稳定,不成熟,应该尽量避免在本实验室使用该方法。 2、RCV:表示本实验室在目前条件下,常规工作中某项目检验的精密度水平,是室内质控中靶值和允许误差范围确定的依据。在第一次测定OCV后及每更换一次质控血清批号后,均应对新质控血清进行RCV测定。一般实验室的质控工作都是以RCV为标准的。 3、RCVK:表示常规条件下对定值血清测定的变异。在RCVK中,根据RCV数据所绘制的“空图”,对于同一批号的质控品是不变的。不得将当月的检测结果代替RCV测定中的数据来绘制质控图。 4、RCVU。常规条件下未定值血清测定的变异。 目前在国内外采用最多的质控方法是 (均值)图法。我认为佳音内部开展的质控方法还是以其为最佳。在建立 图之前应做一些准备工作。 二、准备工作。 1、建立质控的规章制度及普及质控知识。质控工作的开展,是需要耗费大量的时间与精力的,还需要掌握大量的质控知识。这就需要在平时的工作中下大力气规定出一些制度来实施质控的工作,并在检验科中多加强这方面的学习,使每个员工都掌握一定的质控知识,才能让员工在平时的工作中加以用心,把质控工作开展起来。 2、定期检校仪器。对使用的仪器定期进行检查和校正,并建立完善的资料数据,以便在质控工作开展起来后,分析数据时加以应用。 3、制备生化质控血清。质控工作的开展需要大量的质控血清,而假如全部从试剂公司购置的话,是笔不小的开支。可以采取多份血清标本,混合后分装冻存作为质控血清使用。自制质控血清最好一次性制备够半年甚至是一年的量。在检验过程中应注意防止肝炎感染。在使用冻存的质控血清时,必须使其完全融化并达到室温后方可测定。 4、选择标准血清。每一项目都需要标准品来标定一些数据,标准品的品质直接关系到质控的准确性和精密度。因此要做好质控工作,就要选择稳定性较好而瓶间较小的标准品。 三、质控的方法。 1、OCV和RCV的测定和计算机分析。 用制备好的同批质控血清本实验室的最佳条件下反复测定至少20份,计算全部结果的均值 、标准差S和变异系数CV,此处的CV即OCV。 取测过OCV或准备用于下阶段的质控血清,每天随病人标本测定一瓶(或一支)。20天后,计算各项目测定结果的 、S、CV,此处的CV即为RCV。对于我们集团来说,可能不会每天都有生化测定,这时可以用每次常规测定时做的质控血清的值,连续20次结果计算 、S、RCV。 由于计算器及计算机的普及,这里只介绍结果的计算器的算法:按一下STA键,会出现一个统计框,点返回后,输一个结果按一下DAT键。输完结果后,点SUM即为结果的总和;AVE为均值 ;S即为标准差S;S/AVE即为CV值。 2、OCV及RCV测定的注意事项: (1)RCV测定应尽可能保证最佳条件,一个数据尽量来自一瓶质控血清。最好在4-5天内每天测定

生化检验中的各种空白概念

生化检验中的各种空白概念 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,同学们可能会感到困惑.特此汇集了一下各种言论,并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充: 空白概念区别要点:**空白=只含**的空白(吸光度) 1、试剂空白: 由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所以从理论上说,所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除。试剂本身的吸光度就是试剂空白。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量。 在传统手工方法中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、空白管。其中空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白。因为操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白。 在全自动分析仪上,大体上是模拟手工操作。但许多全自动分析仪为追求速度,在设计上采用一些折中方法来测定试剂空白。以日立全系列生化仪为例。该系列分析仪是做不了实时试剂空白,因为它们全是先加入样本后加试剂,为了折中,只好在定标时做一个试剂空白,保存起来,需要扣除试剂空白时再减这个预先保存的值。这种做法,对于比较稳定的试剂来讲,对结果影响不大。

通俗的讲,日立的仪器工作流程中首先是将标本加入到比色杯中,然后依次加入R1试剂、R2试剂,所以试剂空白在每个测定项目曲线中是无法看到的。但是7170从CALIBRATION中是可以看到的,S1ABS就是代表试剂空白吸光度,在CALIBRATION画面里的下方找到Reaction Monitor(反应监察),其中STD(1)就是代表试剂空白反应曲线.为了减小误差,日立仪器会连续做两次测定,所以你看到FIRST和SECOND两条,计算时是取他们的平均值。做试剂空白目的之一就是观察试剂是否稳定,积极采取措施纠正。对于日立的这种试剂空白测定很多仪器都采用这种方法,也叫做试剂空白校准。 总的说来,自动生化仪上的试剂空白一般表现为零点吸光度,该吸光度是通过校准确立的。 2、样本空白: 由于溶血、脂血、黄疸等情况,会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。所以对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可以去除这方面的影响。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。自动生化仪上,很难界定样本空白。与消除样本空白有关的大约有如下几点: (1)在双试剂测定时,加入试剂1和样品后的吸光度可一定程度上扣除样本空白,所以有单试剂不能扣除样本空白的说法。 (2)现在优质的试剂的抗干扰能力都比较强,比如有些双试剂,R1加入后先和样本孵育一段时间,将血红蛋白、脂肪、胆红素等反应掉,再加入R2开始测定反应。在一定围都可以消除样本空白。

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