玉米多倍体诱导的实验设计方案

一、实验原理：

秋水仙素与正在分裂的细胞接触后，可抑制微管的聚合过程，不能形成纺锤丝，使染色体无法分向两极，从而产生染色体加倍

二、提出假设

假设：用0.01% 0.03% 0.05% 0.07% 0.09%等不同梯度浓度的秋水仙素，诱导玉米种子的人工效果不同。

预期：浓度为0.01%的秋水仙素处理的玉米种子根细胞加倍效果最好。

三、实验具体设计

(1)实验变量是秋水仙的不同浓度，因此在处理玉米种子时的时间，处理的环境应相同。

(2)实验目的探究秋水仙素对植物细胞的最适加倍浓度，以蒸馏水培养植物作为对照组。

(3)实验人人员分配：

本组成员。

做空白对照组。

0.01%的秋水仙素处理的玉米根尖加倍效果图。

0.03%的秋水仙素处理的玉米根尖加倍效果图。

0.05%的秋水仙素处理的玉米根尖加倍效果图。

0.07%，0.09%的秋水仙素处理的玉米根尖加倍效果图。

(4)由于秋水仙素有毒，在操作过程中应该小心谨慎，避免将秋水仙素溅到皮肤上。处理的材料在弱光或疑难的条件下处理。（秋水仙素有毒）

四．方法与步骤

方法：玉米根尖多倍体的诱发

步骤：1.将50-70粒饱满的玉米种子放入呈有自来水的干净容器中处理1天。使玉米种子处于吸涨状态。

2.将吸涨好的玉米种子摆放在铺有湿润滤纸的培养皿中置于25℃-28℃条件下发芽、芽越壮越好。

3.配制一系列不同浓度的秋水仙素。

秋水仙素的浓度（c）0.01% 0.03% 0.05% 0.07% 0.09% 秋水仙素的体积（ml）0.1 0.3 0.5 0.7 0.9 蒸馏水体积（ml）9.9 9.7 9.5 9.3 9.1

4.当玉米种子的根长到1-3cm以上时取出洗净。将水吸干并移到盛有不同浓度秋水仙素的培养皿中，每组5个玉米粒，并做好相应浓度的记号，25℃黑暗条件下处理玉米根尖直到膨大为止。另设一清水对照。处理过程中勿使药剂干涸。

5.取材：选取根尖膨大的玉米籽粒，截取根尖1cm左右，为保证实验的成功性多取几个根尖。

6.解离：将取材好的根尖用1mol盐酸侵泡，并在60℃的水浴锅中加热10min。

7.制片：用十字制片法

8.染色：醋酸杨红法与希夫试剂染色法（希夫试剂的染色效果比醋酸杨红的染色效果好）

9.镜检：在显微镜下拍照的时候，拍取特点突出的效果图（方便之间进行比较，得出实验结论）

四：提交作业

蒸馏水空白试验

0.01%秋水仙素

0.03%秋水仙素

0.05%秋水仙素

0.07%秋水仙素

0.09%秋水仙素

五结果分析

结果：由上面图片空白试验作对比可知用0.07%的秋水仙素诱导玉米多倍体的效果最好，其次是0.05%，0.03%，0.09%，最后是0.01%。

分析：不同梯度的秋水仙素浓度对玉米多倍体的诱导效果不同，最是浓度的秋水仙素对玉米多倍体的诱导效果最好，有实验可知0.07%的秋水仙素浓度诱导玉米多倍体的效果最好，在一定浓度范围内，随着秋水仙素浓度的增加，诱导效果明显增加，多倍体的数目明显增加，在最适浓度时多倍体数目最多，超过最适浓度以后，随着秋水仙素浓度的增加，诱导多倍体的效果又会下降。

参考文献

（1）张铭堂。40年玉蜀黍研究的进展{j}.科学农业，1996,44（1-2）：53-80 （2）田增荣（译）。秋水仙素对小麦小孢子胚胎发生产生双倍体植株的直接影响【

J】。国外农学-麦类作物