MS培养基配制中的五点注意[1]
MS培养基配制中的五点注意
口靳飞
北京教育学院.. 100044
MS培养基广泛用于植物组织培养，在高中生
物新课程中也有所提及。除基本的化学药品配制
要领外，MS培养基的配制还有一定的特殊要求，
笔者试将其总结为.. “五点注意.. ”，描述如下。
1母液配制必须严格分类
配制高浓度的母液是植物组织培养的基本
功。配制母液的目的，除了多次取用、节省实验准
备的时间外，还有抑制杂菌生长的作用。高浓度
的母液能够有效地抑制细菌与霉菌的生长，加上
低温环境( 4E)能够大大增加培养基的存放时
'，
间(一年左右)。一般而言，培养基中的各个成分
可以按照表.. 1的分类方式配成母液。
表1
甘氨酸甘氨酸
烟酸烟酸
有机附加物.. 1O一25倍肌醇肌醇
维生素Bl维生素B．
维生素B 6维生素B
注：“母液倍数.. ”为笔者建议，具体浓度应以实验教学中的具
体用量为准。
按照表1的要求，每一个.. “分类别.. ”为一瓶母
液，按照相应的成分配制好后，4~C避光保存，用时
按照母液倍数进行稀释即可。
母液分类的依据，是要避免.. MS培养基中某
些成分发生沉淀反应。例如，如果将全部的大量
元素混合在一起配制，则.. KHPO和Ca C1易产
生ca，(PO)：沉淀，而C aC1：和Mg SO将生成..
CaSO沉淀。
除上述成分外，还必须加上蔗糖、琼脂以及激
素，才构成用于组织培养的MS培养基。
2激素的溶解方法
MS培养基中常用的激素，如.. 2，4-D、.. NAA、.. 6一
BA，也要配制成.. 10～.. 20倍母液，这样便于称量..
(激素的用量极小，给称量造成不便)，且可以多
次取用。激素的配制与一般的药品不同，需要助
溶剂。
如要配制1 0mL的1 mg／mL2，4一D母液，则应
称取0．01g2，4-D固体，置于小烧杯中，再以1～..
3mL的.. 95％乙醇(或.. 0．1mol／LNaOH)溶解，最后
缓慢加入蒸馏水定容。即每加入1mL蒸馏水，立
即搅拌均匀，使白色沉淀消失。重复数次，直至定
容。
一
般而言，生长素类物质(如.. 2，4一D、NAA)要
用9 5％乙醇(或.. 0．1mol／LNaOH)助溶，而细胞分
裂素类物质(如.. 6一BA)要用.. 0．1mol／L的.. HC1助
溶。助溶剂的用量一定要小，不能因其溶解效果
好而过量使用，否则将影响培养基的质量(改变
培养基成分或.. pH值)。配制好的激素要常温避
光保存，尽快使用(尽量不超过一个月)。有很多
教师习惯将激素母液保存在.. 4 ~C冰箱中，希望获
得较长的保存时间。但事实上这种做法是不可取
的，因为激素在低温环境中易析出沉淀，影响使用
效果。
3危险药品的使用与保管
尽管组织培养技术已经相当成熟，在高中教
学当中也
逐渐地普及，但该技术并不安全。除注
意灭菌锅、超净台等大型仪器的使用安全外，最重
要的当属危险药品的使用与保管。原则上，MS培
养基中任何一种药品都有一定的危险性。现只把
最突出、最需要预防的药品注释如下。..
(1)NH NO KNO
此两种药品为易爆品，取用时一定要轻拿轻
放，保存在阴凉处。另外，目前.. NHN O，的购买受
《教学仪器与实验》第26卷2 010年第4期.. ·35 ·..
地(专栏)
司承办
＼
；实验教学探究
一、P
如何增加生物实验教学的有效性
口徐晓红
浙江省杭州市第二中学.. 310053
摘要从提高教师自身实验素养、加强学生相关技能培养、加强学生质疑问题的能力等5个方面分析并提出了如何加强
生物实验教学的有效性。
关键词生物实验教学有效性
生物实验教学始终是中学教学中一个最为薄
弱的部分，一方面教师的实验教学参考资料比较
缺乏，另一方面各级教育部门虽然有各种类型的
培训，但很少有关于实验方面的培训，使教学者自
身的实验素养不够。反映在教师的实验课上基本
是照本宣科，然后学生依据实验手册按部就班地
到一定的限制，对于即将开设组织培养课程的学
校来说，一定要提前准备好药品。也可以考虑使
用其他培养基，如N或B，培养基，无.. NHNO成
分，亦为组织培养所常用。..
(2)EDTA-Na2、CoC1，、2，.. 4一D
此三种药品为致癌物，配制时要带胶皮手套，
或两层塑料手套。ED TA—Na为金属螯合剂，有
一
定的粘性；.. CoCI：能够导致基因突变，遗传学实
验中也常用其作为致突变剂；.. 2，4-D是高效农药，
对人的皮肤有伤害作用。
4热水定容原则
在母液、激素、蔗糖、琼脂都加入后，很多教师
习惯用微波炉或电磁炉加热溶解培养基(特别是
琼脂)。培养基熔化后，由于水分的蒸发，会造成
体积的减少，从而需要定容。这时一定要用热水..
操作，虽然最后也会得到正确的实验结果，对实验
的评价也算成功，但整堂课上基本没有让学生独
立思考、自主设计实验，为他们提供实验创新的时
间和机会，因而就不能真正有效地提高学生的实
验能力。学生实验能力的不足明显反映在各类考
查中，包括统考、会考、高考中，实验题始终是学生
(60℃左右)进行定容，切忌用冷水( 30℃以下)，
否则培养基中局部的琼脂将凝固，造成营养成分
浓度不均。
5关于调节.. p H
适合的.. pH保证了营养成分的正常发挥，也
决定了培养基的硬度(偏酸则过软，偏碱则过硬，
都不利于组织的生长)，故要十分留意。对于MS
培养基而言，只要各个成分按照用量精确
加人，并
且在熔化培养基时加热时间适合(平均.. l OOmL培
养基加热6 0～90s，保证完全熔化的同时，尽量限
制加热时间)，则培养基的.. pH自然地将处于最适
范围内。调解pH时最好用电子pH计，以保证精
确度。pH试纸的误差较大，要小心调节。可以将..
pH调到比最适值小一些，因为培养基在灭菌后，..
pH将变大。..
(收稿日期：2009．11．10)
·..
36 ‘.. EducationalEquipmentAndExperimentVo1．26，No．4，2 010