谷胱甘肽

谷胱甘肽
谷胱甘肽

定义

谷胱甘肽(glutathione GSH) CAS号:70-18-8 EINECS 200-725-4 [1]谷胱甘肽是一种由3个氨基酸组成的短肽,存在于几乎身体的每一个细胞.不过,谷胱甘肽必须有产生的细胞及其前体(维生素C和阿尔法硫辛酸)的条件下,才可以有效地在人体中工作. 在场的谷胱甘肽能帮助保持正常

的免疫系统的功能.这已是其众所周知的关键作用之一,在繁殖淋巴细胞(细胞介导特异性免疫)发生的有效的免疫反应.此外,细胞中的免疫系统产生很多oxiradicals,由于它们的正常运转,因此需要较高浓度的抗氧化剂.谷胱甘肽就发挥了重要作用,这是实现这一要求的关键.

编辑本段原理

加强人体免疫系统你体内的免疫活性,涉及乘法畅通淋巴细胞和抗体

生产需要维护正常水平的谷胱甘肽内淋巴细胞.

抗氧化剂和自由基清除剂谷胱甘肽具有环保护作用的有害影响,包括细菌,病毒污染物和自由基.

调节其他抗氧化剂 -谷胱甘肽其他重要的抗氧化剂如维生素C和E不能做好他们的工作,充分保护您的身体免受疾病.

谷胱甘肽是属于含有巯基的、小分子肽类物质,具有两种重要的抗氧化作用和整合解毒作用。谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成的三肽,半胱氨酸上的巯基为其活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐络合,而具有了整合解毒作用。谷胱甘肽(尤其是肝细胞内的谷胱甘肽)具有非常重要的生理作用就是整合解毒作用,能与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、重金属)等结合,参与生物转化作用,从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质,排泄出体外。

谷胱甘肽有还原型(G-SH)和氧化型(G-S-S-G)两种形式,在生理条件下以还原型谷胱甘肽占绝大多数。谷胱甘肽还原酶催化两型间的互变。该酶的辅酶为磷酸糖旁路代谢提供的NADPH。

编辑本段谷胱甘肽的主要生理作用

谷胱甘肽的另一主要生理作用是做为体内一种重要的抗氧化剂,它能够清除掉人体内的自由基,清洁和净化人体内环境污染,从而增进了人的身心健康。由于还原型谷胱甘肽本身易受某些物质氧化,所以它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被如自由基等有害物质氧化,从而让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能。人体红细胞中谷胱甘肽的含量很多,这对保护红细胞膜上蛋白质的巯基处于还原状态,防止溶血具有重要

意义,而且还可以保护血红蛋白不受过氧化氢氧化、自由基等氧化从而使它持续正常在发挥运输氧的能力。红细胞中部分血红蛋白在过氧化氢等氧化剂的作用下,其中二价铁氧化为三价铁,使血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而失去了带氧能力。还原型谷胱甘肽既能直接与过氧化氢等氧化剂结合,生成水和氧化型谷胱甘肽,也能够将高铁血红蛋白还原为血红蛋白。

另外,维生素C也是体内一种重要的抗氧化剂。由于维生素C能可逆地加氢或脱氢,故维生素C在体内许多氧化还原反应中有重要作用。例如,许多酶的活性基团是巯基(—SH),维生素C能够维持—SH处于还原状态而保持酶的活性;维生素C可以使氧化型谷胱甘肽转变为还原型谷胱甘肽(GSH),使机体代谢产生的过氧化氢(H2O2)还原;维生素C还可保护维生素A、E及某些B族维生素免受氧化。因此,运用谷胱甘肽时,与维生素C并用,能够提高其功效。

目前,人工已研制开发出了谷胱甘肽药物,广泛应用于临床,除利用其巯基以螯合重金属、氟化物、芥子气等毒素中毒外,还用在肝炎、溶血性疾病以及角膜炎、白内障和视网膜疾病等,作为辅助治疗的药物。

编辑本段谷胱甘肽的治疗和预防作用

(1)解毒

(2)辐射病及辐射防护

(3)保护肝脏

(4)抗过敏

(5)改善某些疾病的病程和症状

(6)养颜美容护肤

(7)增加视力及眼科疾病

(8)抗衰老作用

谷胱甘肽(GSH)是由谷氨酸半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的三肽化合物,是一种用途广泛的活性短肽。

GSH的分子量为307.33,熔点为189∽193°C,晶体呈无色透明细长拉状,等电点为5.93。GSH广泛存在于动、植物中,在面包酵母、小麦胚芽和动物肝脏中的含量极高,达100∽1000mg/100g,在人体血液中含

26∽34mg/100g,鸡血中含58∽73mg/100g,猪血中含10∽15mg/100g,在西红柿、菠萝、黄瓜中含量也较高(12∽33mg/100g),而在甘薯、绿豆芽、洋葱、香菇中含量较低(0.06∽0.7mg/100g)。GSH的结构中含有一个活泼的巯基—SH,易被氧化脱氢,这一特异结构使其成为体内主要的自由基清除剂。机体内新陈代谢产生的许多自由基会损伤细胞膜,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉粥样硬化的产生。GSH可以清除自由基,起到强有力的保护作用。例如当细胞内生成少量H2O2时,GSH在谷胱甘肽过氧化物酶的作用下,把H2O2还原成H2O,其自身被氧化为GSSG,GSSG由

存在于肝脏和红细胞中的谷胱甘肽还原酶催作用下,接受H还原成GSH,使体内自由基的清除反应能够持续进行。由于谷胱甘肽是一种非常特殊的氨基酸衍生物,又是含有巯基的三肽,所以在生物体内有着重要的作用。

GSH对于放射线、放射性药物或由于抗肿瘤药物引起的白细胞减少等症状能起到保护作用。GSH能与进入机体的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合,并促其排出体外,起到中和解毒作用。SH还可保护细胞膜,使之免遭氧化性破坏,防止红细胞溶血及促进高铁血红蛋白的还原,对缺氧血症、恶心及肝脏疾病引起的不适具有缓解作用。最新研究还表明,GSH 能够纠正乙酰胆碱、胆碱酯酶的不平衡,起到抗过敏作用,还可防止皮肤老化及色素沉着,减少黑色素的形成,改善皮肤抗氧化能力并使皮肤产生光泽,另外,GSH在治疗眼角膜病及改善性功能方面也有很好作用。谷胱甘肽具有的广谱解毒作用,不仅可用于药物,更可作为功能性食品的基料,在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用,随着肽类物质研究的不断深入,肽类物质具有的神奇功能不断发现,对人体的健康事业发挥越来越大的作用.

编辑本段谷胱甘肽的保肝作用

由于谷胱甘肽本身的解毒和抗氧化能力,使得谷胱甘肽具有重要的保肝护肝作用。临床上应用还原型谷胱甘肽作为保肝的重要药物成分。

编辑本段谷胱甘肽的生理功能

主要生理功能

谷胱甘肽的主要生理功能是抗自由基,抗衰老,抗氧化。机体代谢产生的过多自由基会损伤生物膜,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉硬化的产生。谷胱甘肽可消除自由基,能起到强有力的保护作用。谷胱甘肽不仅能消除人体自由基,还可以提高人体免疫力。它不但能增进血球,制造保护物质的功能(保护物质指能保护身体免受感染的物质),同时,也能降低体内发炎物质的总含量,这些发炎物质是由细胞制出来的。谷胱甘肽在老人迟缓化的细胞上所发挥的功效比年轻人大。为此,对于衰老的免疫系统,谷胱甘肽将维持之,并使之臻于健康。

谷胱甘肽对于放射线、放射性药物所引起的白细胞减少等症状,有强有力的保护作用。谷胱甘肽能与进入人体的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合,并促进其排出体外,起到中和解毒作用。

谷胱甘肽可阻止氧化血红蛋白,保护巯基酶分子中-SH基,有利于酶活性的发挥,并且能恢复已被破坏的酶分子中-SH基的活性功能,使酶重新恢复活性。谷胱甘肽还可以抑制乙醇侵害肝脏所产生的脂肪肝。

谷胱甘肽在人体内的生化防御体系起重要作用,具有多方面的生理功能。谷胱甘肽可作为治疗白内障药剂的主要成分。近年来,西方科学家,尤其是日本学者发现谷胱甘肽也具有抑制艾滋病毒的功能。谷胱甘肽是孕妇的必需营养补充剂,它关系到婴儿的体内发育生长。研究表明,有些孕妇身体虚弱缺乏蛋白质,主要是缺乏谷胱甘肽。

食品中添加谷胱甘肽可起到意想不到的作用

1、加入到面制品中,可起到还原作用。不仅使制造面包的时间缩短至原来的二分之一或三分之一,劳动条件大幅度改善,并起到食品营养的强化作用及其他功能。

2、将其加入到酸奶和婴幼儿食品中,相当于维生素C,可起到稳定剂的作用。

3、将其拌到鱼糕中,可防止色泽加深。

4、加到肉制品和干酪等食品中,具有强化风味的效果。

编辑本段研发历史

Merle Norman本次发布的谷胱甘肽,采用了肌肤色素研究中最新的科学技术,研发出独家“谷胱甘肽(Baidi peptide)与高浓度苦参精华(Radix sophorae flavescentis)”以及其它一些独特成份的多重效果配方,可由内而外双重锁定麦拉宁母细胞,让女人恢复珍珠般的亮白肤质,并且能够淡化顽固的色斑。相比一般的产品而言,白荻多肽就像是一把精密的高端“美白锁”,能够紧密地锁住洛氨酸酶,阻止洛氨酸酶的渗透,以此来达到抑制黑色素形成的目的。谷胱甘肽是美国Merle Norman经典作品,风行欧美50年,堪称世纪美白祛斑经典。全面补充白荻多肽和苦参精华,对祛除皱纹、增加肌肤弹性,收缩毛孔、淡化色素,全身美白有极好的功效.

谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的三肽化合物。它于1921年被发现,1930年确定化学结构。美国著名营养保健专家艾尔·敏德尔博士称谷胱甘肽为三倍效能的抗衰老氨基酸。

谷胱甘肽的主要生理功能是抗自由基,抗衰老,抗氧化。机体代谢产生的过多自由基会损伤生物膜,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉硬化的产生。谷胱甘肽可消除自由基,能起到强有力的保护作用。谷胱甘肽不仅能消除人体自由基,还可以提高人体免疫力。它不但能增进血球,制造保护物质的功能(保护物质指能保护身体免受感染的物质),同时,也能降低体内发炎物质的总含量,这些发炎物质是由细胞制出来的。谷胱甘肽在老人迟缓化的细胞上所

发挥的功效比年轻人大。为此,对于衰老的免疫系统,谷胱甘肽将维持之,并使之臻于健康。

谷胱甘肽对于放射线、放射性药物所引起的白细胞减少等症状,有强有力的保护作用。谷胱甘肽能与进入人体的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合,并促进其排出体外,起到中和解毒作用。

谷胱甘肽可阻止氧化血红蛋白,保护巯基酶分子中-SH基,有利于酶活性的发挥,并且能恢复已被破坏的酶分子中-SH基的活性功能,使酶重新恢复活性。谷胱甘肽还可以抑制乙醇侵害肝脏所产生的脂肪肝。

谷胱甘肽在人体内的生化防御体系起重要作用,具有多方面的生理功能。谷胱甘肽可作为治疗白内障药剂的主要成分。近年来,西方科学家,尤其是日本学者发现谷胱甘肽也具有抑制艾滋病毒的功能。谷胱甘肽是孕妇的必需营养补充剂,它关系到婴儿的体内发育生长。研究表明,有些孕妇身体虚弱缺乏蛋白质,主要是缺乏谷胱甘肽。

食品中添加谷胱甘肽可起到意想不到的作用。

1、加入到面制品中,可起到还原作用。不仅使制造面包的时间缩短至原来的二分之一或三分之一,劳动条件大幅度改善,并起到食品营养的强化作用及其他功能。

2、将其加入到酸奶和婴幼儿食品中,相当于维生素C,可起到稳定剂的作用。

3、将其拌到鱼糕中,可防止色泽加深。

4、加到肉制品和干酪等食品中,具有强化风味的效果。

专家给我们详细解答了关于美白针方面的一些疑问,并总结了常见的九大疑问如下:

一、美白针的成分是什么?

美白针由传明酸、VitC、左旋谷胱甘肽、VitB等组成。其中左旋谷胱甘肽也叫还原型谷胱甘肽,有的配方中不是还原型的就没有效果。

二、美白针的作用原理是什么?

美白针有皮肤美白的作用,还有清除体内自由基,抑制过氧化反应,排清等作用。谷胱甘肽结构中的巯基会抑制衡酪氨酸酶,使黑色素的生成速度减缓,是很好的抗氧化剂。

三、美白针安全吗?

美白针的成份其实就是我们日常医院的平常用药,没有什么特别的,就像感冒打针一样,当然,美容院打针就有风险,一旦出现输液反应,不及时处理就有生命安全。

四、美白针的效果持续多久?

有的医院承诺是终生有效,这种说法不科学,一般可持续一年到两年,因为色素代谢是个动态的过程,最好的办法定期补充Vitc,同时配合其它美白办法维持。

五、国产美白针和进口的有什么区别?

国产的和进口的美白针在成份上基本相同,但国产的针剂要便宜一些,至于区别,可以打个比喻,国产车和进口车的区别在哪里?这就是答案。

六、为什么美白针有的人效果好,有的人效果差?

回答这个问题,还要从作用机理说起,在黑素合成过程,酪氨酸酶起的关键的作用,紫外线照射可以激活酪氨酸酶,从而加速黑素的产生,酪氨酸酶要发挥正常活性需要铜离子的辅助,而体内还原型谷胱甘肽曾多将减少游离的铜离子,从而影响酪氨酶的活性,使黑色素合成减少,同时黑色素合成过程也被大剂量维生素C所抑制,还原型谷胱甘肽在临床上用于治疗各种理化因素(如药物、酒精、化疗等)导致的中毒性肝损伤,因其含有巯基具有较强的还原作用,可以加速体内自由基的清除,故用于上述中毒性损伤的治疗。如果体内有以上的疾病因素,也可以抵消还原型谷胱甘肽的作用。换一句话说,如果美白的效果没有达到,那么其它的有益的作用,比如清除自由基,排毒的作用肯定占了上风,所以,美白针的作用不单单是美白,如果感觉整体的效果好而美白的效果差,可能是剂量不够,可以加强几次。

七、美白针的价格为什么贵?

美白针的成份全部是药物。其中还原型谷胱甘肽是最贵的,目前只有进口的,而作为美容用药,无法与治疗性用药相比。

八、打美白针有什么禁忌症?

孕妇、心脑血管疾病禁用。

九、打美白针有没有其它配合治疗?

如果配合彩光治疗,电波拉皮可以加速美白针的疗效。

谷胱甘肽简介

谷胱甘肽 1.定义 谷胱甘肽(glutathione GSH)CAS号:70-18-8。谷胱甘肽是一种存在于自然界中的氨基酸复合物,由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸等三种氨基酸组合而成的寡肽。谷胱甘肽在体内以两种形态存在,即还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,简称GSSG)。通常人们所指的谷胱甘肽是还原型谷胱甘肽。还原型谷胱甘肽很容易被氧化,两分子谷胱甘肽的活泼巯基氧化脱氢后以二硫键相连得到的二聚体,即是氧化型谷胱甘肽。其中只有还原型谷胱甘肽才具有生理活性,而生物体内的氧化型谷胱甘肽需经还原后才能发挥生理功能。 2.结构和理化性质 谷胱甘肽是一种白色晶体,化学名为γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,其结构如图1所示。相对分子质量为307.33,熔点是192~195 °C (分解),等电点为5.93。比旋光度[α]D20为+17.60°(C=0.05,H2O),易溶于水、稀醇、液氨和二甲基甲酰氨,不溶于乙醚和丙酮。谷胱甘肽固体较为稳定,而水溶液在空气中易被氧化,谷胱甘肽在高水分活度下不易保存,只有将水分活度控制在0.3以下才能长期稳定保存。 3.生理功能

谷胱甘肽是细胞内存在最丰富的小分子硫醇类化合物,其分子中含有一个特异的γ-肽键,由谷氨酸的γ-羧基与半胱氨酸的α-氨基缩合而成,并且半胱氨酸侧链基团上连有一个活泼巯基,是谷胱甘肽许多重要生理功能的结构基础。 3.1抗氧化作用 还原型谷胱甘肽结构中含有一个活泼的巯基—SH,易被氧化脱氢。它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被如自由基等有害物质氧化,让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能。同时清除自由基。 机体内新陈代谢产生的许多自由基会损伤细胞膜,毁坏免疫系统,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉粥样硬化的产生。由此,谷胱甘肽具有抗衰老和强化免疫系统等作用。 3.2整合解毒作用 谷胱甘肽半胱氨酸上的巯基为其活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐或致癌物质等相结合,并促进其排出体外,起到中和解毒作用。4. 应用 4.1 谷胱甘肽在临床上的应用 谷胱甘肽在临床上有广泛的作用,对细胞有保护作用,可防止红细胞溶血,从而减少高铁血红蛋白的损失;抑制脂肪肝的形成,改善中毒性肝炎和感染性肝炎的症状;对丙烯腈、氟化物、一氧化碳、有机溶剂、重金属等中毒具有解毒作用;对缺氧血症的不适、恶心、呕

GSH含量的测定.doc

主要目的: ——测定物质还原性谷胱甘肽(GSH)的含量。 主要原理: 参照 GSH检测分析试剂盒说明书, 5,5 ’–二硫代–双–(2–硝基苯甲酸)能和 谷胱甘肽(GSH)反应产生 2–硝基– 5–巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物( GSSG), 由于 2–硝基– 5–巯基苯甲酸是一黄色产物,通过测定其在412 nm处的最大吸 收可确定样品中谷胱甘肽的含量用纯化的谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制 成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的谷胱甘 肽( GSH)抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。 TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。用酶标仪在412 nm波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中谷胱甘肽(GSH)的含量。

实验室签章

一、试剂 ——谷还原性胱甘肽( GSH)测定试剂盒(南京建成生物研究所) 二、仪器设备 —— 96 孔酶标板 —— UV-Vis 可见多功能酶标 仪——旋涡混匀器——离心机 ——移液枪及其相应量程枪头

三、实验方法 根据试剂盒说明书具体操作步骤如下: 1.上清液的制备:取稀释后的血清或组织匀浆液 mL,加试剂一应用液 2 mL 混匀, 4000 rpm 离心 10 分钟,取上清液 1 mL 进行显色反应。 2.显色反应:空白管中加入 1 mL 试剂一,标准管加入 20μmol/LGSH标准 液 1 mL,测定管加入上步骤得到的上清液 1 mL,然后各管中分别加入mL 试剂 二、试剂三、 mL 试剂四。 3.混匀,室温静置 5 分钟后,在 412 nm处将酶标板空板进行扫描,准确吸 取 mL 各管反应液加入到新的 96 孔板中,酶标仪测定各孔吸光度( OD值)。 4.血清中 GSH含量计算公式 GSH含量( mg/L) 测定 OD值 -空白 OD 值 -3 mmol/L) ×标准品浓度( 20×10 标准 OD值-空白 OD值 ×GSH分子量( 307)×样本测试前稀释倍数 组织中 GSH含量公式 测定OD值-空白OD值 -3 GSH含量(mg/gprot )×标准品浓度(20×10 mmol/L) ×GSH分子量( 307)×样本测试前稀释倍数÷待测组织匀浆液蛋白浓度 (gprot/L ) 参考文献 Lapshina E A, Sudnikovich E J, Maksimchik J Z, et al. Antioxidative enzyme and glutathione S-transferase activities in diabetic rats exposed to long-term ASA treatment [J]. Life sciences, 2006, 79(19): 1804-1811.

谷胱甘肽过氧化物酶

本科生毕业论文(设计)
题 姓 学 专 班 学
目: 名: 院: 业: 级: 号:
谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)对灵芝生长发育中 的活性氧物质(ROS)的改变及理化性的质影响 于南 生命科学学院 生物科学 生物科学 101 班 13210101 师亮 职称: 讲师
指导教师:
2013 年 5 月 20 日 南京农业大学教务处制
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目录
摘要 .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 关键词 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 Abstract ................................................................................................... 错误!未定义书签。 Key words ................................................................................................ 错误!未定义书签。 引言 .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 1 材料与方法 ........................................................................................ 错误!未定义书签。 1.1 材料 ....................................................................................... 错误!未定义书签。 1.1.1 菌种 .......................................................................... 错误!未定义书签。 1.1.2 CYM 培养基 ............................................................ 错误!未定义书签。 1.1.3 PDA 固体培养基 ..................................................... 错误!未定义书签。 1.1.4 试剂 .......................................................................... 错误!未定义书签。 1.1.5 主要仪器设备 .......................................................... 错误!未定义书签。 1.2 实验方法 ............................................................................... 错误!未定义书签。 1.2.1 ROS 的测定 ............................................................. 错误!未定义书签。 1.2.2 NBT 测定 ................................................................. 错误!未定义书签。 1.2.3 DAB 染色 ................................................................. 错误!未定义书签。 1.2.4 菌株对氧化物耐受性的检测 .................................. 错误!未定义书签。 1.2.5 胞内 Ca2+的荧光检测 .............................................. 错误!未定义书签。 1.2.6 三萜的测定 .............................................................. 错误!未定义书签。 1.2.7 菌丝分叉检测 .......................................................... 错误!未定义书签。 2 结果与分析 ........................................................................................ 错误!未定义书签。 2.1 GPX 沉默转化子胞内 ROS 含量上升 ......................... 错误!未定义书签。 2.2 NBT 染色显示 GPX 沉默转化子胞内超氧根离子含量上升错误!未定义书签。 2.3 DAB 染色显示 GPX 沉默转化子胞内 H2O2 含量下降...... 错误!未定义书签。 2.4 GPX 沉默转化子的菌株对氧化性物质的耐受力下降 ...... 错误!未定义书签。 2.5 GPX 沉默转化子胞内 Ca2+的含量下降 .............................. 错误!未定义书签。 2.6 GPX 沉默转化子菌株的三萜含量下降: .......................... 错误!未定义书签。 2.7 GPX 沉默转化子菌丝的分叉数减少 .................................. 错误!未定义书签。 3 讨论 .................................................................................................... 错误!未定义书签。 致谢 .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 参考文献 .................................................................................................. 错误!未定义书签。
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小鼠谷胱甘肽转移酶GST酶联免疫分析ELISA

小鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,组织及相关液体样本中谷胱甘肽S转移酶(GST)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)水平。用纯化的谷胱甘肽S转移酶(GST)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽S转移酶(GST),再与HRP标记的谷胱甘肽S转移酶(GST)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽S转移酶(GST)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)浓度。 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存 说明书1份1份 封板膜2片(48)2片(96) 密封袋1个1个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:450pg/ml ×1瓶×1瓶2-8℃保存标准品稀释液×1瓶×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

谷胱甘肽

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抗氧化剂和自由基清除剂谷胱甘肽具有环保护作用的有害影响,包括细菌,病毒污染物和自由基. 调节其他抗氧化剂-谷胱甘肽其他重要的抗氧化剂如维生素C和E不能做好他们的工作,充分保护您的身体免受疾病. 解毒剂- 另一个主要功能是谷胱甘肽的解毒外国化合物等致癌物和有害代谢物. 谷胱甘肽是人体的#1防御细胞的损伤. 维他命A,C,E及贝他胡萝卜素,"抗氧化的"维生素,帮助保护细胞免受损伤. 但主要研究者发现,我们的第一道防线是一种肽(片蛋白),称为谷胱甘肽最重要的抗氧化剂和detoxifier于人体. 优秀的科学家,在史丹福大学研究的影响谷胱甘肽缺乏对人类细胞. "他们指出,如果没有适当的水平谷胱甘肽我们从字面上细胞"自杀"的"经历一个过程称为程序性细胞死亡" 殊死搏斗,在每一个细胞在你身上. 我们的细胞是在打一场仗不断地生存下去.科学家们相信,每一个细胞在体内是攻击000次,一天中的氧和氢分子(freeradicals),企图毁灭我们的身体,结束自己的生命. 这些分子撕裂孔,在我们的细胞,破坏了蛋白质,脂肪,即使是我们的基因.它们可造成的细胞发生变异,成为病害的其他方式,或者干脆停止运转和模具. 破坏氧化自由基牵连的原因是心脏病,中风,阿尔茨海默病,parkenson的疾病,癌症,白内障以及其他健康问题. 这些破坏分子所产生的身体的副产品身体的正常功能. 他们因暴露于太阳X射线和辐射,污染,压力大,体力消耗和因各种疾病. 口服谷胱甘肽(+142%谷胱甘肽)抑制酪氨酸酶活性.一旦酪氨酸酶活性的代谢一直被抑制,然后逆转的时候去合成光色素称为褐色素(phaeomelanin)而非造成皮肤黑、黯淡的合成色素称为真黑素(eumelanin). 循环不断地流,只要存在左旋谷胱甘肽并存代谢黑色素.最后,轻易将你的皮肤迅速改变为白嫩细腻. 经过美国国家食品药品管理局验证和麻萨诸州州总医院的成分及效果检测,亚当森大学的化验室分析数据材料这一切证明我们的超级全身美白胶囊,是一个最安全的,纯净,有效的口服皮肤增白剂在当今市场.

谷胱甘肽的制备

谷胱甘肽的制备 背景 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是由L一谷氨酸、L一半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的一种同时具有1一谷氨酰基和巯基的生物活性三肽化合物?,在生物体内具有多种重要的、独特的生理功能,因此又被称为长寿因子和抗衰老因子。作为一种重要的生理活性物质,GSH在解毒、抗辐射、肿瘤、癌症、氧化衰老和协调内分泌的治疗中效果明显且无副作用,这些同类药物所不具有的优点使得GSH在临床和医药领域有着极为广泛的用途【21。在食品加T中,GSH具有抗氧化、防止褐变、强化风味和营养等功能,已被作为生物活性添加剂应用于保健食品的生产中。但GSH在体内循环周期短、易氧化、不能穿过细胞膜,从而限制了其保健和治疗作用的发挥。据报道,脂质体包埋技术能够有效地提高GSH的保护和治疗作用。 试验步骤 1试验材料 谷胱甘肽(纯度≥98.0%) Amresco公司;乙醇、乙醚、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、柠檬酸(均为分析纯)、吐温一80(化学纯)、卵磷脂、胆固醇国药集团化学试剂有限公司;0.05m01·L。磷酸盐缓冲液(PBS) 自制。

2 实验方法 1.2.1脂质体的分离方法 1.2.1.1凝胶柱过滤法选用Sephadex G一25凝胶柱,取lmL脂质体混悬液进行上样分离,采用一定的洗脱剂洗脱,洗脱速度控制在0.5—1.0mL-min~,进行分部收集,测定游离的谷胱甘肽总量,计算包封率。 1.2.1.2洗脱剂的选择取1mg·mL“的谷胱甘肽溶液1mL上柱分离,分别选用去离子水、NaCI、乙醇、PBS、乙酸和PBS(NaCl)为洗脱剂进行洗脱,洗脱速度控制在0.5~1.0mL·min~,进行分部收集,。测定洗脱液中的谷胱甘肽总量,计算回收率。1.2.2脂质体包封率的测定方法 1.2.2.1 游离GSH的测定方法采用优化的Ellman?s测定法”1。 1.2.2.2包封率的计算方法将脂质体与游离谷胱甘肽分离,测定游离的谷胱甘肽量,根据下式计算脂质体包埋率:EE(%)=(1一Cf/Ct)×100%。其中:EE—GSH脂质体包封率;Cf一游离GSH含鼍;Ct一总GSH含量。 1.2.3 pH梯度法制备谷胱甘肽脂质体称取一定量的卵磷脂、胆固醇和叶温一80,溶于乙醚,得到类脂溶液;将类脂溶液置于圆底烧瓶中,在40'(2水浴中旋转蒸发除去乙醚,待类脂物在烧瓶壁上成膜后,加入一定pH的0.3tool·L。1柠檬酸10mL,继续旋转蒸发水合30min,得空白脂质体溶液;将谷胱甘肽加入空白脂质体溶液中,用0.5mol·L。1的磷酸氢二钠溶液调节pH,使pH增加3,将上述混合液在冰浴中短时超声(间歇超声,1s/1s),静置2h,即得脂质体p。 1.2.4脂质体平均粒径和粒度分布吸取少量脂质体悬液,稀释至卵磷脂的含量在0.025%(W/W),装入预处理过的透明小瓶中。用丙酮擦拭瓶外部并吹干。放人激光散射仪中进行检测旧?。激光散射测试条4r牛-:温度:25±0.1℃;角度:90。(即垂直照射);波长:632.8nm;扫描时间:300s/样 2结果与讨论 2.1 脂质体分离方法的确定 2.1.1 分离方法的选择测定包封率的前提是将未包封的游离GSH与脂质体分开,凝胶

简述谷胱甘肽的生理功能

简述谷胱甘肽的生理功能?列举目前已经研究发现的与谷胱甘肽具有相似的抗氧化功能的生 物活性成分? 答:谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的活性三肽,广泛存在于动物肝脏、血液、酵母和小麦胚芽中,各种蔬菜等植物组织中也有少量分布。谷胱甘肽具有独特的生理功能,被称为长寿因子和抗衰老因子。具有许多重要生理功能,如蛋白质和核糖核酸的合成、氧及营养物质的运输、内源酶的活力、代谢和细胞保护、参与体内三羧酸循环及糖代谢,具有抗氧化、抗疲劳、抗衰老、清除体内过多自由基、解毒护肝、预防糖尿病和癌症等功效,因此而成为机体防御功能肽的代表。谷胱甘除可在临床上用作治疗眼角膜疾病,解除丙烯酯、氟化物、重金属、一氧化碳、有机溶剂等中毒症状。 目前已经研究发现的与谷胱甘肽具有相似的抗氧化功能的生物活性成分:具有还原性的维生素如VC、VB、类胡萝卜素、多酚类化合物(包括酚酸类、黄酮类、儿茶素类等等)、花青素、原花青素等等,目前研究认为从葡萄籽中提取的原花青素抗氧化活性最强。 一份子葡萄糖经过糖酵解和三羧酸循环的基本反应能量计算及生物学意义? 1. 答:⑴糖酵解:葡萄糖氧化分解成丙酮酸(胞液中): ①葡萄糖的磷酸化为1,6-二磷酸果糖;②1,6-二磷酸果糖裂解为两分子的磷酸丙糖;③两分子的3-磷酸甘油醛转变为两分子丙酮酸; ⑵丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA(线粒体):丙酮酸可穿过线粒体膜进入线粒体基质,在丙酮酸脱氢酶系的催化下,生成乙酰辅酶A。 ⑶三羧酸循环(线粒体):三羧酸循环是从乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合为柠檬酸开始,不断脱氢脱羧,是机体CO2的主要来源。最后回到草酰乙酸。 ⑷氧化磷酸化:是指在生物氧化中伴随着A TP生成的作用。有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。即A TP生成方式有两种。一种是代谢物脱氢后,分子内部能量重新分布,使无机磷酸酯化先形成一个高 能中间代谢物,促使ADP变成A TP。 这称为底物水平磷酸化(胞液中)。如 1,3-二磷酸甘油酸降解为3-磷酸甘油 酸、磷酸烯醇式丙酮酸降解为烯醇式 丙酮酸、琥珀酰CoA降解为琥珀酸和 CoA这三个反应都推动A TP或GTP 的形成。另一种是代谢物上脱下的氢 (质子和电子)经一系列递氢体或电 子传递体,按氧化还原电位的高低, 将电子和质子传递给氧并生成水,在 此过程中释放能量使ADP磷酸化生 成A TP称为氧化磷酸化(线粒体内膜 上)。生物体内95%的A TP来自这种 方式。 能量计算:净生成38A TP ⑴糖酵解(净生成8A TP): ①G→6-P-G,消耗1ATP; ② 6-P-G→1,6-2P-F, 消耗1ATP; ②1,3-2P-甘油酸×2→3-P-甘油酸 ×2,产生2ATP; ④磷酸烯醇式丙酮酸×2→丙酮酸× 2,产生2ATP;⑸ 3-P-甘油醛×2→1, 3-2P-甘油酸×2+NADH×2→呼吸链, 产生6ATP; ⑵丙酮酸氧化(乙酰COA的形成和三 羧酸循环,净生成30ATP): ①丙酮酸×2→乙酰COA×2+CO 2 ×2 +NADH×2→呼吸链,产生6ATP; ②异柠檬酸×2→α-酮戊二酸×2+ NADH×2→呼吸链,产生6ATP; ③α-酮戊二酸×2→琥珀酰CoA×2 +NADH×2→呼吸链,产生6ATP; ④琥珀酰CoA×2→琥珀酸×2+ CoASH×2+2GTP (2GTP+2ADP→ 2ATP) ⑤琥珀酸×2→延胡索酸+FADH 2 ×2 →呼吸链,产生4ATP ⑥苹果酸×2→草酰乙酸×2+NADH× 2→呼吸链,产生6ATP 生物学意义: ⑴糖酵解在无氧及有氧条件下都能 进行,是厌氧生物或需氧生物机体 在缺氧情况下取得能量的主要方 式,是有氧氧化的第一个阶段; ⑵糖酵解途径中形成的许多中间产 物可作为合成其它物质的原料; ⑶三羧酸循环本身产能并不多,但却 是体内产能最大的途径; ⑷三羧酸循环是人体诸多“循环” 中最重要的。它不仅是糖代谢而且是 脂类代谢、蛋白质代谢即三大营养素 的最终(氧化供能)代谢通路; ⑸三羧酸循环不光是三大营养素的 产能通路,也是它们互相联系的枢 纽。如糖与脂肪相互转变。 糖、脂肪、核酸、蛋白质四大物质代谢 之间各通过那些中间产物相联系? 1乳糖操纵子的结构 大肠杆菌的乳糖操纵子含Z、Y及A 三个结构基因,分别编码β-半乳糖苷 酶、透酶、乙酰基转移酶,此外还有 一个操纵序列O、一个启动序列P及 一个调节基因Ⅰ。Ⅰ基因编码一种阻遏 蛋白,后者与O序列结合,使操纵子 受阻遏而处于转录失活状态。在启动 序列P上游还有一个分解(代谢)物 基因激活蛋白CAP结合位点,由P 序列、O序列和CAP结合位点共同构 成LAC操纵子的调控区,三个酶的编 码基因即由同一调控区调节,实现基 因产物的协调表达。 2 阻遏蛋白的负性调节 在没有乳糖存在时,乳糖操纵子处于 阻遏状态。此时,Ⅰ基因列在P启动 序列操纵下表达的乳糖阻遏蛋白与O 序列结合,故阻断转录启动。阻遏蛋 白的阻遏作用并非绝对,偶有阻遏蛋 白与O序列解聚。因此,每个细胞中 可能会有寥寥数分子β半乳糖苷酶、 透酶生成。 当有乳糖存在时,乳糖操纵子即可被 诱导。真正的诱导剂并非乳糖本身。 乳糖经透酶催化、转运进入细胞,再 经原先存在于细胞中的少数β-半乳 糖苷酶催化,转变为别乳糖。后者作 为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使 蛋白构型变化,导致阻遏蛋白与O序 列解离、发生转录,使β-半乳糖苷酶 分子增加1000倍。 3 CAP的正性调节 分解代谢物基因激活蛋白CAP是 同二聚体,在其分子内有DNA结合 区及cAMP结合位点。当没有葡萄糖 及cAMP浓度较高时,cAMP与CAP 结合,这时CAP结合在乳糖启动序列 附近的CAP位点,可刺激RNA转录 活性,使之提高50倍;当葡萄糖存 在时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP 结合受阻,因此乳糖操纵子表达下降。 由此可见,对乳糖操纵子来说CAP 是正性调节因素,乳糖阻遏蛋白是负 性调节因素。两种调节机制根据存在 的碳源性质及水平协调调节乳糖操纵 子的表达。

还原型谷胱甘肽的稳定性研究

919 还原型谷胱甘肽的稳定性研究 朱义福 (星湖生物科技股份有限公司,广东肇庆 526040) 摘要:本文研究了pH 、温度、光照以及外加抗氧化剂等因素对还原型谷胱甘肽(GSH)纯品溶液稳定性的影响。结果表明,GSH 水溶液在pH=2.0~4.0范围内最为稳定;在30 ℃以下,24 h 内自身氧化较少;应避光处理或保存;外加抗氧化剂在pH=6.0时,保护作用明显。 关键词:谷胱甘肽;稳定性;抗氧化剂 文章篇号:1673-9078(2011)8-919-923 Stability of Reduced Glutathione under Different Conditions ZHU Yi-fu (Star Lake Bioscience Co., Inc., Zhaoqing 526040, China) Abstract: The effects of pH, temperature, sunlight and antioxidant on the stability of reduced glutathione (GSH) solution were studied in this paper. Results indicated that GSH solution was relative stabile under the following conditions: pH 2.0~4.0 and temperature <30℃. And it should be kept in dark place. Besides, the GSH solution showed the highest stability in the presence of antioxidant at pH 6.0. Key words: glutathione; stability; antioxidant 谷胱甘肽(Glutathione ,GSH ),即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的生物活性三肽化合物。GSH 是许多酶反应的辅基,在生物体内具有清除体内自由基、解毒等多种重要的生理功能,特别是对于维持生物体内适宜的氧化还原环境具有重要意义[1]。国内外关于GSH 的研究主要集中在菌种选育[2]、培养条件优化[3]、分离纯化[4]和临床应用上[5],其工业化生产技术一直被国外极少数发达国家所垄断,国内尚未实现工业化生产,从而造成GSH 的市场价格居高不下,影响了GSH 的推广和应用。 GSH 易溶于水、稀醇、液氨和N,N-2甲基甲酰胺,而微溶于或不溶于醇、醚和酮。GSH 的固体较稳定,而水溶液在外界环境中受温度、pH 、光照等条件影响,易氧化,产生氧化型谷胱甘肽(即GSSG ),GSSG 是由两分子GSH 脱氢后通过二硫键相连的二聚体,其反应如下: 氧化型GSSG 不具有生理活性,只有还原型GSH 才能发挥重要的生理功能。GSH 的不稳定性是造成较难分离纯化、产品纯度不高的重要原因。因此,本文通过大量的试验对GSH 稳定性进行研究,为国内GSH 的工业化生产提供参考。 收稿日期:2011-03-26 作者简介:朱义福(1976-),男,工程师,研究方向:生物医药分离纯化技术 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 GSH 纯品(纯度>98%):日本Kyowa 公司。四氧嘧啶(Alloxan ):美国sigma ; 二硫苏糖醇(DTT ):上海生工所;抗坏血酸(Vc ):广州化学试验厂;保险粉(Na 2S 2O 4):上海国药集团化学试剂公司;其它试剂为国产分析纯。 1.2 主要仪器 SC-15数控超级恒温槽:宁波新芝生物科技公司;CR21G 高速冷冻离心机:日本Hitachi 公司;752型紫外可见光分光光度计:南京第四分析仪器公司;S40 pH 精密测量仪,AB54-S 分析天平:瑞士METTLER TOLEDO 公司;RW20D 搅拌器:德国IKA 公司;Agilent LC1100液相色谱仪:美国HP 公司。 1.3 分析方法 GSH 含量测定采用四氧嘧啶Alloxan 试剂法 [6]:(1)标准曲线的制作:准确称取6.146 mg 的GSH 标准品,用40%乙醇溶解,定容至100 mL ,得到浓度为200 μmol/L 的标准液。取0 mL 、0.2 mL 、0.4 mL 、0.6 mL 、0.8 mL 、1.0 mL 上述标准液于试管中,补加去离子水至1.0 mL ,配成浓度为0 μmol/L 、40 μmol/L 、80 μmol/L 、120 μmol/L 、160 μmol/L 、200 μmol/L 的GSH 溶液。然后依次加入pH 7.6的磷酸缓冲液2.5 mL ,0.1 mol/L 的甘氨酸溶液0.5 mL ,以及Alloxan 试剂1.0 mL ,反应20

阿拓莫兰(还原型谷胱甘肽片)说明书

阿拓莫兰(还原型谷胱甘肽片)说明书 【阿拓莫兰药品名称】 通用名:还原型谷胱甘肽片 商品名:阿拓莫兰 英文名:Reduced glutathione Tablets 汉语拼音:Huanyuanxing Guguanggantai Pian 【阿拓莫兰成份】 阿拓莫兰主要成份为还原型谷胱甘肽,其化学名为N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸。 【阿拓莫兰性状】 阿拓莫兰为薄膜衣片,除去包衣后显白色。 【阿拓莫兰产品介绍】 阿拓莫兰的主要成分是还原型谷胱甘肽(GSH),GSH是哺乳动物细胞内含量丰富的低分子量多肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸残基组成,对人体具有十分重要的生理功能:解酒精毒性、保护肝脏; 解药物毒性(抗肿瘤药、抗结核药、中枢神经药物、对乙酰氨基酚等中毒),防止抗癌药物的副作用,预防和治疗放射线损害;对抗自由基,抗氧化;提高机体免疫力。 人体在许多状态下都可以使细胞内GSH生物合成能力降低,含量下降,尤其是在病理状态下。外源性GSH的补充,可以预防、减轻、中止、组织细胞的损伤,改变病理生理过程。药理毒理研究表明: 阿拓莫兰的主要成分(还原型谷胱甘肽)是含有巯基(SH)的三肽类化合物,在人体内具有活化氧化还原系统,激活SH酶、解毒作用等重要生理活性。参与体内三羧酸循环和糖代谢,促进体内产生高能量,起到辅酶作用。还原型谷胱甘肽是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及磷酸丙糖脱氢酶的辅酶。还原型谷胱甘肽能激活体内SH酶等,促进碳水化合物、脂肪及蛋白质的代谢,以调节细胞膜的代谢过程。还原型谷胱甘肽参与多种外源性、内源性有毒物质结合生成减毒物质。 【阿拓莫兰适应症】 1)肝损伤:病毒性肝病,药物性肝病,中毒性肝损伤,脂肪肝,肝硬化等; 2)肾损伤:急性药物性肾损伤,尿毒症; 3)化放疗保护; 4)糖尿病:并发症,神经病变; 5)缺血缺氧性脑病;各种低氧血症。 【阿拓莫兰用法用量】 成人常用量为每次口服400mg(4片),每日三次。疗程12周。 【阿拓莫兰不良反应】 1、过敏症:偶有皮疹等过敏症状,应停药。

谷胱甘肽含量测定

【实验目的】 了解植物组中中抗坏血酸-谷胱甘肽循环代谢过程,学习还原型谷胱甘肽含量的测定原理和方法。 【实验原理】 谷胱甘肽是有谷氨酸(Glu)、半胱氨酸(Gly)组成的天然三肽,是一种含巯基(—SH)的化合物,广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG)。2-硝基-5-巯基苯甲酸为一黄色产物,在波长412nm处具有最大光吸收。因此,利用分光光度计法可测定样品中谷胱甘肽的含量。 【器材与试剂】 1.实验仪器与用具 研钵、高速离心机、移液管、离心管、试管、分光光度计 2.实验试剂 还原型谷胱甘肽标准液;偏磷酸溶液;磷酸溶液缓冲液(pH7);二硫代硝基苯甲酸(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)溶液;蒸馏水。 3.实验材料 小麦叶片 【实验步骤】 1.标准曲线制作 取7支试管,编号,按照下表加入各种试剂,混匀,25℃保温反应10min。以1号管为参比调零,测定显色液在412nm处的吸光度。以吸光度为纵坐标,还原型谷胱甘肽物质的量(μmol)为横坐标,绘制标准曲线。 试管号 试剂(ml) 1 2 3 4 5 6 7 10μg/ml GSH标准液0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

蒸馏水 2.0 1.9 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 pH7磷酸缓冲液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 DTNB试剂0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 GSH浓度μg/2ml 0 1 2 4 6 8 10 2.提取 取材后,称取0.2g样品置于研钵中,加入少量5%偏磷酸研磨成匀浆后,定容至6ml, 8000转离心10min。收集上清液来测定谷胱甘肽含量,测量提取液体积。 3.测定 取上清液2ml,显色,操作同标准曲线。重复3次。 显色反应后,分别记录样品管混合液的吸光度和空白对照管反应混合液的吸光度。根据吸光度差值,从标准曲线上查出相应的还原型谷胱甘肽量,计算还原型谷胱甘肽含量(μmol/g)。 4.计算 GSH含量(μmol/g)=(C x×V t)/ (FW×V S) 式中,C x为2ml样品中GSH的含量(μg);V t为样品提取液总体积(ml);V s为显色时样品液体积(ml);FW为样品质量(g)。 【实验结果】 1.标准曲线 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 GSH浓度(μg/2ml)0 1 2 4 6 8 10 吸光度值A 0 0.067 0.134 0.314 0.452 0.579 0.723 以GSH浓度(μg/2ml)为横坐标,吸光度值为纵坐标,建立标准曲线。

谷胱甘肽的化学与医疗作用

谷胱甘肽的化学与医疗作用 卢 薇 (江苏职工医科大学 南京 210029) 摘要 谷胱甘肽(glutathione,GSH)在体内以氧化型(GSSG)和还原型(GSH)2种形式 存在。GSH分子中的巯基容易失氢氧化,因而可以消除体内的活性氧,具有保护酶和蛋白 质免受氧化,保护脏器免受损伤的功效。人工合成的GSH已广泛用于临床。 关键词 谷胱甘肽 活性氧 酶 解毒作用 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是体内最早发现的天然的游离三肽,普遍存在于动物组织中,如肝、肾、心肌、脾、肠、脑和红细胞等,细胞内浓度为0.5mmol/L~10mmol/L;血浆内浓度仅1μmol/L~5μmol/L,约为细胞内浓度的千分之一。 GSH是由谷氨酸(G lu)、半胱酸(Cys)和甘氨酸(G ly)组成的非蛋白巯基化合物,含有γ-羧基形成的酰胺键,其化学结构及合成反应如图1。 2分子GSH脱氢氧化成为GSSG,后者又可通过磷酸戊糖代谢通路中所产生的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)和GSH还原酶的作用,还原成GSH。 还原型谷胱甘肽分子中最重要的结构是巯基(-SH),-SH容易失氢发生氧化,因此,GSH可以保护一些含-SH的蛋白质及酶免受氧化剂的损害;同时,-SH中的氢容易被自由基提取,如下式所示: -SH+?R-S?+HR 因而具有清除自由基的能力。 还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽在细胞内维持一定的比值(GSH/GSSG=100/1),GSH的含量随年龄、营养状况及内分泌的不同而变化,如甲状腺机能低下或肝脏疾病、药物中毒等情况下会引起GSH水平降低。GSH/GSSG保持稳态关系对维护组织细胞、多种蛋白质、酶的结构及其功能有重要意义。 1 谷胱甘肽的生理功能 1.1 清除体内的过氧化物及自由基 GSH可在含硒过氧化物酶(GSHpx)的催化下将体内有害的过氧化物、自由基(O2-?、HO?)加以化解和清除,如下式所示: 2GSH+ROOH GSHpx GSSG+2ROH ROOH和自由基不仅氧化某些具有重要生理作用的含巯基的酶和蛋白质,使之丧失活力,而且还将细胞膜磷脂分子中多不饱和脂肪酸氧化生成过氧化物;而生成的过氧化脂质又通过自身的催化连续生成大量过氧化物,因此GSH通过自身氧化能中止脂质过氧化的连锁反应。

不同方法提取谷胱甘肽的比较

实验一不同方法提取谷胱甘肽的比较 一、实验目的 1、掌握从干酵母中粗提谷胱甘肽的各种方法。 2、掌握还原型谷胱甘肽定量的方法。 二、实验原理 谷胱甘肽是种重要的三肽,以还原型(GSH)和氧化型(GSSG)广泛的存在于动、植物及微生物。在生物体内起作用的主要是GSH,是细胞内主要的还原性物质,能保护细胞免受氧化性、毒害性化合物和辐射的伤害,还是酶的辅因子。GSH在临床上是重要的解毒药物。 谷胱甘肽是小分子物质,水中溶解度较大,细胞表面出现裂缝就能分散到溶剂中,故可用一些温和的方法提取。 本实验采用热处理、冰冻处理、酸处理、有机溶剂处理等方法提取酵母细胞中的谷胱甘肽,比较最后的得率,探讨各种提取方法的优点和缺点。 三、实验器材、材料和试剂 1、器材 冰箱,离心机,水浴锅,电炉,滴定管,烧杯,玻棒,研钵。 2、实验材料 活性干酵母,2%偏磷酸,5%碘化钾,0.0001mol/l碘酸钾溶液,淀粉指示剂, 乙酸:乙醇(2:1),36%乙酸溶液。 四、实验步骤 1、热水抽提: 1g干酵母与5ml水混合,加15ml沸水,置100℃水浴保温10min,立即放入冰水速冷,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V1。 2、冷冻研磨后有机酸搅拌提取: 1g干酵母先在研钵中研细,与10ml水混合,-20℃冷冻成半固体状,研磨5min转入小烧杯,加10ml 36%乙酸搅拌15min,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V2。 3、酸热处理: 1g干酵母加20ml 2%偏磷酸,60℃水浴中搅拌抽提15min,置冰水速冷,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V3。 4、有机混合液处理: 1g干酵母加20ml有机混合液(甲酸:乙醇=2:1),室温搅拌抽提15min,置冰水速冷,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V4。 5、碘量法测定: 取5ml待测样品,置于250ml锥形瓶中,加入5ml2%偏磷酸溶液、1ml5%碘化钾溶液和2滴淀粉指示剂,用0.0001mol/L的碘酸钾滴定至溶液由无色变为蓝色为止。 KIO3+5KI+6HPO3→3I2 +6KPO3 +3H2O 五、结果及分析 1.将各种方法所消耗的碘酸钾的体积数添入下表 2.比较本实验四种提取酵母中谷胱甘肽的方法的优缺点。 六、注意事项 1、待测定的谷胱甘肽提取液置4℃冰箱保存,防止氧化。 2、酸性溶液中,淀粉会水解,使滴定终点的颜色发生变化,故滴定操作要快速完成。

还原型谷胱甘肽 说明书

【药品名称】 商品名:阿拓莫兰 通用名:还原型谷胱甘肽片 英文名:Reduced glutathione Tablets 汉语拼音:Huanyuanxing Guguanggantai Pian 【阿拓莫兰成份】阿拓莫兰主要成份为还原型谷胱甘肽,其化学名为N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸。 【阿拓莫兰性状】阿拓莫兰为白色糖衣片,除去糖衣后显白色。 【阿拓莫兰作用机制】 阿拓莫兰的主要成分(还原型谷胱甘肽)是含有巯基(SH)的三肽类化合物,在人体内具有活化氧化还原系统,激活SH酶、解毒作用等重要生理活性。参与体内三羧酸循环和糖代谢,促进体内产生高能量,起到辅酶作用。还原型谷胱甘肽是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及磷酸丙糖脱氢酶的辅酶。还原型谷胱甘肽能激活体内SH酶等,促进碳水化合物、脂肪及蛋白质的代谢,以调节细胞膜的代谢过程。还原型谷胱甘肽参与多种外源性、内源性有毒物质结合生成减毒物质。 【阿拓莫兰适应症】 1)肝损伤:病毒性肝病,药物性肝病,中毒性肝损伤,脂肪肝,肝硬化等; 2)肾损伤:急性药物性肾损伤,尿毒症; 3)化放疗保护; 4)糖尿病:并发症,神经病变; 5)缺血缺氧性脑病;各种低氧血症。 【阿拓莫兰禁忌症】对谷胱甘肽过敏者禁用。 【阿拓莫兰注意事项】 1、如在用药过程中出现出疹,面色苍白,血压下降,脉博异常等症状,应立即停药。 2、溶解后的溶液立即使用,剩余的药液不能再用。 3、肌内注射仅限于需要此途径给药时使用,并应避免同一部位反复注射。 【阿拓莫兰药代动力学】文献报道,10名健康男性志愿者单剂量口服600mg谷胱甘肽片(国外品),测得血中谷胱甘肽浓度达峰时间为1.35±0.20h,谷胱甘肽浓度峰值(Cmax)为23.79±7.15μmol/L,药时曲线下面积(AUC)为74.49±16.49μmol/(L·h)。 【阿拓莫兰用法与用量】成人常用量为每次口服400mg(4片),每日三次。疗程12周。 【阿拓莫兰规格】0.1g*36片 【阿拓莫兰有效期】两年。 【阿拓莫兰贮存】密封。 【阿拓莫兰批准文号】国药准字H20050667 【阿拓莫兰生产企业】重庆药友制药有限责任公司

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