4 人表皮生长因子
BioWiseTech Co., LTD.
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1 人表皮生长因子（EGF ）
Human Epidermal Growth Factor （EGF ）
人表皮生长因子（EGF ），是一个含53个氨基酸残基的多肽，大小为 6.2 kDa ，有三个二硫键。EGF 分布在多种组织和体液中。 EGF 对伤口愈合和器官形成有重要作用。它能刺激各种表皮和上皮细胞增殖，分化和生存；促进角质形成细胞的生长和迁移，以及促进成纤维细胞和胚胎细胞的增殖。此外，人表皮生长因子与β-尿抑胃素（β-urogastrone ）为同一物质，能够抑制胃酸的分泌。 本产品为溶液形式，溶在 10 mM 磷酸盐（pH 为 7.2）、0.1% BSA 以及10% 甘油中。
★ 产品号
Cat No : BP002
★ 质量控制
成分：纯化后蛋白溶于10mM 磷酸盐缓冲液 (pH 7.2) 纯度：≥ 95% (SDS-PAGE 和HPLC)
活性：1 × 106
IU/mg (Balb/c 3T3细胞增殖法检测) 无菌处理：0.22 μm 滤膜过滤 内毒素：≤ 0.5 EU/μg 完全按照 GMP 标准生产 存放方法：-20℃
重组人表皮生长因子治疗压疮临床疗效观察
重组人表皮生长因子治疗压疮临床疗效观察 摘要：目的：探讨重组人表皮生长因子治疗压疮的临床效果。方法：将100例压疮患者随机分为观察组（重组人表皮生长因子）50例和对照组（常规换药治疗）50例，观察组在初步清创基础上用重组人表皮生长因子湿敷，再予以敷料包扎；对照组采用5%呋喃西林或1%碘伏纱块湿敷后方纱敷料包扎，比较两组病人的治疗效果。结果：观察组明显缩短压疮创面愈合时间；不同时间创面平均愈合率明显优于对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05 ）；结论：使用重组人表皮生长因子创面湿敷治疗，能显著促进创面愈合，缩短愈合时间，且无毒副作用。 关键词：重组人表皮生长因子；压疮；护理 Abstract：objective to Study of recombinant human epidermal growth factor in the treatment of pressure ulcers. methods 100 cases of patients with pressure ulcers were randomly divided into observation group （recombinant human epidermal growth factor）50 cases and control group （conventional dressing therapy）50 cases，observation group on the basis of preliminary debridement with recombinant human epidermal growth factor shi fu，again be dressing
重组人表皮生长因子凝胶(酵母) (新增)
重组人表皮生长因子凝胶（酵母） Chongzu Ren Biaopi Shengzhangyinzi Ningjiao (Jiaomu) Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel（Yeast） 本品系由高效表达人表皮生长因子基因的酵母，经发酵、分离和高度纯化后,加入凝胶基质制成。含适宜稳定剂，防腐剂，不含抗生素。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 工程菌菌种 2.1.1 名称及来源 重组人表皮生长因子工程菌株，系由带有人工合成的人表皮生长因子基因的DNA片段整合到酵母菌染色体基因组中构建而成。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1 划种BMG1琼脂平板 应呈典型酵母菌菌落形态，无其他杂菌生长。 2.1. 3.2 染色镜检 在光学显微镜下观察，应形状规则，用次甲兰染色，无死亡细胞。 2.1. 3.3 筛选标志检查 应符合该基因表型特征。 2.1. 3.4 人表皮生长因子表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.5 人表皮生长因子基因稳定性检查 涂BMG1琼脂平板，挑选至少50个克隆，用PCR检测人表皮生长因子基因，阳性率应不低于95％。 2.2 原液 2.2.1 种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。 2.2.2 发酵用培养基 采用适宜的不含任何抗生素的培养基。 2.2.3 种子液接种及发酵培养
重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的影响
重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的影响 【摘要】目的：探讨重组人表皮生长因子（rhEGF）对鼻黏膜结构的影响。方法：对21例（42侧）经鼻内窥镜全鼻窦开放术患者进行同体对照实验，一侧直接将人表皮生长因子喷于纱条填于术后窦口鼻道复合体处，另一侧为止血纱条填塞术腔2日后对照，在用药后3天、1周、2周取双侧鼻黏膜进行透视电镜下观察鼻黏膜结构。结果：用药后3天上皮排列不整，细胞间连接松散，表层纤毛紊乱，大量脱落，1周时上皮、表层纤毛明显修复，2周时黏膜基本正常。结论：重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的损坏较小并可促其迅速恢复。 【关键词】重组人表皮生长因子；鼻黏膜；鼻内镜 重组人表皮生长因子（rhEGF）是可调节多类细胞生长的多肽，是极其重要的血管生成因子[1]。其通过控制具有调节上皮化、血管生成和胶原代谢的细胞增生和移行而帮助创面愈合[2]。rhEGF调节障碍将会导致修复延迟，乃至瘢痕的形成[3]。该药物是否会对鼻黏膜产生刺激或损害，以及损害的程度和损害后是否可逆，是该药物在鼻科临床能否应用的关键，本观察则是该药物对鼻黏膜结构的影响情况。 1 资料和方法 1.1 病例选择：选择双侧鼻息肉全鼻窦炎患者21例，男13例，女8例，年龄21~53岁，平均36.28岁，病程1~10年，患者均为初次手术并无明显变态反应病史，每例患者双侧鼻腔病变基本相同，按照鼻息肉慢性鼻窦炎诊疗评定标准（1997，海口）分类：Ⅱ型2期9例，Ⅱ型3期12例。手术前均作副鼻窦CT 扫描。 1.2 药物及使用方法：药品为重组人表皮生长因子（rhEGF），由深圳华生元基因工程发展有限公司提供（批号：19991201）。 21例均采用局麻鼻内窥镜下鼻息肉摘除全鼻窦开放术，术式为Messerklinger 术式，从前至后切除筛窦，再将上颌窦自然口扩大，酌情处理额窦和蝶窦，切除病变组织时尽量保留正常和病变较轻的黏膜，有利于术后功能的恢复，窦口鼻道复合体处经肾上腺素棉片压迫止血后，随机一侧直接将rhEGF喷于纱条填于该处，另一侧为止血纱条填塞术腔2日后对照，12例左侧做对照组，9例右侧做对照组，rhEGF隔日一换，共4~5次后按术后常规清洁处理。 1.3 组织病理学观察：术后用药3天、1周、2周取双侧窦口鼻道复合体处1
EGF表皮生长因子
表皮生长因子(EGF) 系于公元1962年由意大利女科学家Mantalcini教授和美国博士Cohen在实验中发现的，并因而获得1986年诺贝尔生 理奬与医学奬，是在小老鼠的颔下腺发现了一种可以促使新生小鼠眼睑早开，牙齿早萌的活性成分，而将这活性成分加入培养皮肤表皮细胞的基质后，发现可以促进皮肤表皮细胞的生长，因此将此活性成分命名为EGF(Epidermal Growth Factor)中文为"表皮细胞生长因子，并证实这种活性蛋白具有免疫和自我调节的能力，并能加速表皮组织的新陈代谢，更新已老死及受损的细胞，原来人体器官和发肤的自我修补功能是由一组称为细胞因子(cytokines)的活性蛋白互相协调而成，而EGF是其中的一种因子。主要作用是促进皮肤细胞的增殖、分化，加速新陈代谢，提高新细胞在皮肤中所占的比例，从而使皮肤变得年轻，微量的EGF可赋予衰老细胞全新的生命力，促使各种受损皮肤修复和再生，它还能刺激细胞外一些大分子（如透明质酸、糖蛋白等）的合成与分泌，滋润皮肤，是决定肌肤活力和健康的源泉。EGF又被称为"美丽因子"，人体EGF的含量决定着皮肤年轻的程度。 表皮细胞生长因子(EGF)是由53个氨基酸组成的小分子多 肽，分子量约6000道顿，分子内有三对二硫键结构，因此对酸、热等物理化学因素均很稳定。生长因子是一种蛋白质，主要作用是与细胞表面的接受器结合后，刺激细胞产生一连串的细胞增殖与分化，正常细胞要增殖非有生长因子的刺激不可，皮肤的细胞需要生长因子的刺激来加速更新与再生。EGF是一个相当特殊的3D结构，主要的动作是刺激纤维母细胞上的接受器，结合后，开始制造合成各类纤维和细胞间基质，它的重点在激化细胞的新生、活化纤维母细胞，也就
人表皮生长因子的纯化及浓度在线检测
人表皮生长因子的纯化及浓度在线检测 童望宇1, * ， 姚善泾2, * ， 朱自强2 （1上海市华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 上海市 200237； 2浙江省杭州市浙江大学化学工程与生物工程系，杭州 310027） 摘要 在分离纯化快速开拓系统（?KTA explorer 100）中用凝胶（Sephadex G-50 superfine ）纯化人表皮生长因子，并在优化条件下对其纯化过程中的hEGF 进行定量测定。用标准人表皮生长因子经离子交换柱、蛋白质扫描分析系统及SDS-PAGE 间相互印证，结果表明：在优化条件下，可得到在SDS-PAGE 上与标准样品hEGF 一样清晰的单条带，其产品纯度高于94%，回收率高于36%；其检测的灵敏度可达1μg/ml 。该法不仅对人表皮生长因子的在线检测行之有效，而且对其它蛋白质纯化的在线检测也具有参考价值。 关键词 人表皮生长因子，层析，检测，纯化 中图分类号 TQ0333 Q819 引言 人表皮生长因子（human epidermal growth factor ，hEGF ）是由53个氨基酸残基所组成 的多肽生长因子，分子量约为6200D [1]。人表皮生长因子具有在体内刺激皮肤组织、角膜、肺、气管上皮组织的生长繁殖及抑制胃酸分泌等多种生物学作用，因而可应用于外科伤口的愈合及溃疡病的治疗等医疗领域[2-5]。自1975年Cohen 等人[1]从尿液中首先分离纯化得到人表皮生长因子以来，有关研究的进展很快，除了继续研究从天然来源中分离纯化以外，基于基因工程菌发酵生产也已问世[6-7]，但是不管是从天然资源，还是来自基因工程菌发酵液，hEGF 的浓度总是偏低，需要经过较长时间的分离和纯化流程，才能得到相对较纯的产品。为了设计一个高效和可控的纯化过程，hEGF 的在线分析和检测就成为非常重要。 目前，hEGF 的定量检测方法主要有放射免疫分析（Radio immuno-assay, RIA ）[4]、放 射受体分析(Radio receptor assay, RRA) [8]、酶联免疫吸附分析（Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA ）[9]、酶免疫分析（Enzyme immunoassay, EIA ）[10]、反相HPLC [11]和免疫荧光技术[12]等。以上各种方法均有其特点和不同的条件局限性，但均难用于过程的在线检测。 我们在使用?KTA explorer 100进行蛋白质纯化时发现，该系统通过本身带有的软件， 不仅可以与各种层析柱结合进行多种生物质的分离流程研究，而且还可以比较精确地通过出峰面积表示蛋白质量的多少。利用这种定量关系，就为定量确定生物质含量提供了基础。以此为依据，对hEGF 这个比较难于定量与分离的多肽，进行了凝胶层析中在线检测与纯化工艺的优化，达到了纯化与在线定量检测的目的。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 联系人：童望宇，姚善泾， E-mail: tongwy@https://www.360docs.net/doc/7411669752.html, , yaosj@https://www.360docs.net/doc/7411669752.html, 第一作者：童望宇，男，40岁，博士 * 国家自然科学基金资助项目(批准号：29736180) _______________________________________________________________________________https://www.360docs.net/doc/7411669752.html,
外用重组人表皮生长因子 临床资料
外用重组人表皮生长因子 Waiyong Chongzu Ren Biaopi Shengzhangyinzi Recombinant Human Epidermal Growth Factor for External Use 本品系由高效表达人表皮生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后冻干制成。含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。 1基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2制造 2.1工程菌菌种 2.1.1名称及来源 重组人表皮生长因子工程菌株系由带有人工合成人表皮生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。 2.1.2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1划种LB琼脂平板 应呈典型大肠杆菌集落形态，无其他杂菌生长。 2.1. 3.2染色镜检 应为典型的革兰阴性杆菌。 2.1. 3.3对抗生素的抗性 应与原始菌种相符。 2.1. 3.4电镜检查（工作种子批可免做） 应为典型大肠杆菌形态，无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。 2.1. 3.5生化反应 应符合大肠杆菌生物学性状。 2.1. 3.6人表皮生长因子表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.7质粒检查 该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。 2.1. 3.8 目的基因核苷酸序列检查（工作种子批可免做） 目的基因核苷酸序列应与批准序列相符。 2.2原液 2.2.1种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。 2.2.2发酵用培养基 1
易孚(重组人表皮生长因子凝胶)
易孚(重组人表皮生长因子凝胶) 【药品名称】 商品名称：易孚 通用名称：重组人表皮生长因子凝胶 英文名称：Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel 【成份】 重组人表皮生长因子。 【适应症】 本品适用于皮肤烧烫伤创面(浅Π度至深Ⅱ度烧烫伤创面)、残余创面、供皮区创面及慢性溃疡创面的治疗。 【用法用量】 常规清创后，用生理氯化钠溶液清洗创面，取本品适量，均匀涂于患处。需要包扎者，同时将本品均匀涂于适当大小的内层消毒纱布，覆盖于创面，常规包扎，一日一次或遵医嘱。推荐剂量为每lOOcm2创面使用本品10g(以凝胶重量计)。 【不良反应】 未见严重不良反应。 【禁忌】 对本品过敏者 【注意事项】 本品为无菌包装，用后请即旋紧管口，以防污染。本品无抗菌作用，但不会增加创面感染机会。对感染创面，在进行创面清创的前提下，可考虑联合使用抗菌药物控制感染。对于各种慢性创面，如溃疡、褥疮等，在应用本品前，应先行彻底清创去除坏死组织，有利于本品与
创面肉牙组织的充分接触，提高疗效。当本品的外观、性状发生改变，如出现霉变、变质等现象时，应禁止使用。 【特殊人群用药】 儿童注意事项： 无禁忌。 妊娠与哺乳期注意事项： 尚不明确。 老人注意事项： 无禁忌。 【药物相互作用】 本品遇酒精、碘酒等，可能会使EGF变性，而使活性降低。因此使用酒精、碘酒等消毒后，应再用生理氯化钠溶液清洗创面，然后使用本品。 【药理作用】 1.药理作用：本品为外用重组人表皮生长因子(rhEGF)。可促进动物皮肤创面组织修复过程中的DNA、RNA和羟脯氨酸的合成，加速创面肉芽组织的生成和上皮细胞的增殖，从而缩短创面的愈合时间。 2.毒理研究：(1)重复给药毒性：家兔背部破损皮肤涂抹本品(6g凝胶/次，每日1次，浓度200μg/g，相当于临床用药浓度的20倍)，连续36天，给药局部皮肤及各脏器均未见明显毒性反应。本品较长时间局部应用对愈合后创面的远期影响不清楚。 (2)遗传毒性和生殖毒性：尚无动物研究资料。(3)致癌性：研究文献提示，EGF有促进某些肿瘤细胞生长的作用，但也有一些动物和体外研究文献提示，EGF作为一种具有多种功能的细胞因子，可以抑制某些肿瘤细胞的生长。对于烧伤患者(尤其是较大面积烧伤时)局部较长时间使用本品的影响尚不清楚。临床药代动力学研究结果提示患者烧伤面积达5～10％时，
大鼠表皮生长因子(EGF)说明书
大鼠表皮生长因子(EGF)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中表皮生长因子(EGF)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的大鼠表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF)再与HRP标记抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠表皮生长因子(EGF)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份 封板膜2片（48）2片（96） 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：5400ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分
重组人表皮生长因子生物学活性测定法
重组人表皮生长因子生物学活性测定法 （细胞增殖法/MTT比色法） 本法系依据重组人表皮生长因子对小鼠胚胎成纤维细胞（Balb/c3T3细胞）的生长具有刺激作用，Balb/c3T3细胞的生长状况因重组人表皮生长因子生物学活性的不同而异，以此检测重组人表皮生长因子的生物学活性。 试剂： （1）RPMI 1640培养液： RPMI 1640培养基粉末1袋（规格为1L），加水溶解并稀释到1000ml，加青霉素105U/ml（1ml），链霉素105mg/ml(1ml),再加碳酸氢钠2.1g，溶解后，混匀，除菌过滤，4℃保存。 （2）维持培养液: 量取新生牛血清4ml，加RPMI 1640培养液到1000ml。 （3）完全培养液： 量取新生牛血清100ml，加RPMI 1640培养液到1000ml。 （4）PBS： 量取氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加水溶解并稀释到1000ml的溶液，经121℃，15分钟灭菌。
(5)噻唑蓝（MTT）溶液： 取MTT粉末0.10g，加PBS20ml使溶解，经0.22um滤膜过滤除菌。4℃避光保存。 标准品沉沦的制备： 取理组人表皮生长因子标准品按说明书复溶后，用维持培养液稀释至每1ml 含50 IU。在96孔细胞培养板中，做4倍系列稀释，共8个稀释度，每个浓度做2个孔。以上操作在无菌条件下进行。 供试品溶液的制备： 将供试品按标示量复溶后，用维持培养液稀释成每1ml约含50 IU。在96孔板中，做4倍系列稀释，共8个稀释度，每个浓度做2个孔。以上操作在无菌条件下进行。 测定方法： Balb/c3T3细胞株用完全培养液于37℃、5%二氧化碳培养，控制细胞浓度为每1ml含1.0 X 105 --5.0 X 106个细胞，传代后24—36小时用于生物学活性测定。弃去培养瓶中的培养液，消化和收集细胞用完全培养液配成每1ml含5.0 X 104 --8.0 X 104个细胞的细胞悬液，接种于96孔板中，每孔100ul，于37℃、5%二氧化碳条件下培养。24小时后换成维持培养液。置37℃、5%二氧化碳培
人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书
人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书 供应商：上海乔羽生物有限公司 人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书 Elisa Kit规格：48孔配置/96孔配置 标准品稀释液：1.5ml×1瓶 酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96） 【人表皮生长因子(EGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算： 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒组成： 封板膜:2片（48）/2片（96） 说明书:1份 密封袋:1个 标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF) 水平。用纯化的人表皮生长因子(EGF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF) ，再与HRP标记的表皮生长因子(EGF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF) 呈正相关。用酶标仪
重组人表皮生长因子治疗皮肤擦挫伤疗效观察
重组人表皮生长因子治疗皮肤擦挫伤疗效观察 发表时间：2012-11-16T17:20:14.700Z 来源：《中外健康文摘》2012年第28期供稿作者：王丽莎胡海花王晓红[导读] 在临床应用中未发现一例瘢痕增生者，值得在美容科推广使用。 王丽莎胡海花王晓红（山东威海市文登中心医院美容科山东威海 264400） 【中图分类号】R【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）28-0269-01 【摘要】目的观察重组人表皮生长因子（Recombinant Human Epidermal Growth Factor dericative,rhEGF)对成人女性面部皮肤擦挫伤的临床治疗效果。方法回顾自2008年9月至2011年8月期间，根据知情同意原则，应用rhEGF治疗面部皮肤擦挫伤的病例42例为观察组，未应用的病例34例为对照组，观察记录两组创面恢复时间及创面恢复情况。结果观察组创面愈合时间平均为10.00±1.53天，对照组创面愈合时间平均为13.15±1.97天，观察组创面愈合时间明显较对照组创面愈合时间短（P≤0.05）。观察组创面愈合后创面颜色较对照组浅，皮肤较光滑。结论 rhEGFT对于促进成人女性面部皮肤擦挫伤的创面愈合、加快组织修复具有较好效果。 【关键词】重组人表皮细胞生长因子创面修复 美容科就诊者较其它科室患者对伤口的愈合质量提出了更高层次的要求，尤其是女性患者往往希望伤痕修复的更接近于原来的正常皮肤。针对这一问题，rhEGFT自进入市场以来，因其具有的高效修复、消除皱纹、抗衰老、淡化色斑、滋润补水等作用备受各方关注。现对自2008年9月至2011年8月期间应用rhEGF治疗面部皮肤擦挫伤的病例创面恢复情况进行总结记录，效果较好，现报告如下： 1 资料和方法 1.1一般资料：本组分为观察组和对照组，观察组42人，均为女性，年龄23～47岁，平均35.05岁。对照组34例，均为女性，年龄20～48岁，平均33.88岁。所有病例均为否认瘢痕体质。所有病例均为面部擦挫伤，挫伤面积观察组1.2cm× 2.0cm～ 3.6cm×7.8cm，对照组1.0cm×1.9cm～2.8cm×8.5cm。 1.2方法 1.2.1 观察组新鲜伤口，清除坏死及污染组织，先用3%过氧化氢做好消毒，再用75%酒精对伤口周围皮肤进行消毒处理，然后应用rhEGF于创面，嘱每日定时涂擦，48小时后给予烤电治疗，指导患者注意饮食，加强营养。 1.2.2 对照组除未应用rhEGF，其余处理与观察组相同。 1.2.3 观察记录两组创面愈合情况，两组创面愈合时间用均数±标准差（`x±s）表示。 2 结果 所有创面均一期愈合，观察组愈合创面较对照组光滑，无色素沉着，无瘙痒感等不适症状。 对两组病例年龄、创面面积及愈合时间进行独立样本t检验，以比较两组年龄、创面面积值和愈合时间均数是否有统计学差异，见表1。 表1 观察组与对照组年龄、创面面积和愈合时间 、 观察组与对照组年龄和创面面积均数差异无统计学意义（P≥0.05）。排除两组年龄与创面面积的差异，两组创面愈合时间均数有统计学意义（P<0.05）。 3 讨论 生长因子在创伤愈合中的作用研究表明，外源性生长因子的增加，可促进细胞有丝分裂活动，增加细胞的分裂与增殖，加速皮肤创伤的修复和愈合。重组表皮生长因子是柔碱性纤维细胞生长因子，对创伤细胞有明显趋向活性，可诱导炎性细胞向创作部位移动和改善创面微循环和组织营养状态，能有效促进新生血管形成和增加肉芽组织数量，从而达到快速促进创面愈合的目的 [1]；人重组表皮生长因子溶液除具有上述作用外，在促进组织和再生作用的同时，还能有效地减少病理性瘢痕的产生[2]。随着分子生物学的研究进展,人们对创面愈合的机制认识也不断深化。愈合能力差除与创面产生原因有关外,还与创面本身修复内环境的改变、内源性生长因子含量低下或受体活性下调等因素有关。生长因子在创伤修复中起着举足轻重的作用。重组人表皮生长因子能促进皮肤创面组织修复过程的DNA、RNA和羟脯氨酸的合成，加速创面肉芽组织的生长和上皮细胞的增殖，从而缩短创面的愈合时间。在临床应用中未发现一例瘢痕增生者，值得在美容科推广使用。 参考文献 [1]许杰，关志广，张治平.重组人表皮细胞生长因子在足部慢性溃疡创面修复中的应用[J].国际医药卫生导报，2006.12（17）：136-137. [2]李泳淼，叶胜捷.重组人表皮生长因子和创愈宁合用治疗热水袋烫伤[J]东南国防医药.2007.9（6）.437-438.
重组人表皮生长因子(rhEGF)联合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhFGF)
重组人表皮生长因子(rhEGF)联合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhFGF)对烧伤创面愈合的影响 发表时间：2013-07-26T08:36:07.687Z 来源：《医药前沿》2013年第17期供稿作者：吕海建1 文巧红2 吕英2 孟红2 [导读] 近年来，随着分子生物学在临床应用的进展，细胞因子在组织修复中的作用已经比较明确 吕海建1 文巧红2 吕英2 孟红2 (1惠州市第一人民医院烧伤整形外科 516002；2惠州市中心的医院整形外科 516001) 【摘要】目的观察重组人表皮生长因子(rhEGF) 联合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhFGF)对烧伤创面愈合的影响。方法对60例烧伤患者，每例患者选择同一块深度烧伤创面的两部分，分别采用rhEGF法和rhEGF+ rhFGF法换药治疗，评价上述受试创面愈合后的瘢痕指数(SI)及愈合速度。结果 rhEGF+ rhFGF法残余创面愈合时间(12.45±8.42)天,明显少于rhEGF (29.7±10.12) 天(t=2.225,P<0.05)；两种方法创面分泌物细菌培养阳性率无显著性意义(t=1.684, P>0.05)；愈后2年rhEGF法SI为8.92±1.78，明显低于rhEGF+ rhFGF法 6.12±1.54(t=2.116,P<0.05)；所有受试创面均无肿瘤形成、癌变等并发症发生。结论外用重组人表皮生长因子(rhEGF) 联合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhFGF)治疗深度烧伤创面,能明显减少后期瘢痕的形成,远期疗效和安全性较好。 【关键词】烧伤创面愈合重组人表皮生长因子(rhEGF) 重组人表皮生长因子(rhEGF) 【中图分类号】R62 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）17-0088-02 创面修复是一个极其复杂的病理过程，创面愈合过程是一系列修复细胞如表皮细胞、成纤维细胞及内皮细胞等与细胞外基质及多种细胞生长因子共同作用的结果，这些因子有 3 种作用即趋化作用、合成分泌作用和增殖分化作用,而 rhbFGF 和rhEGF 是两种在创伤修复领域研究最多[1]。本文观察重组人表皮生长因子(rhEGF) 联合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhFGF)对烧伤创面愈合的影响,现报道如下。 1 资料与方法 1.1 临床资料 选择1996年6～12月间我院住院收治的烧伤患者60例(男33例,女27例), 平均年龄(33.27±9.63)岁,平均烧伤面积(9.33±9.54)% TBSA。所有入选病例均存在深度烧伤创面,且不伴有严重心、肺、肝、肾及血液系统疾病,病情相对较轻。各患者均选择一块深度烧伤创面[本组患者受试面积为1%～7%TBSA,平均为(2.37±0.79)%TBSA],并将其分为面积相近的两部分,分别作为治疗创面(治疗组)和对照创面(对照组),进行同体对照实验。用药情况及结果评估均采用双盲法。 1.2 给药方法 对60例烧伤患者，每例患者选择同一块深度烧伤创面的两部分，分别采用rhEGF法和rhEGF+ rhFGF法换药治疗，以洗必泰溶液清洗创面后,用rhEGF法rhEGF+ rhFGF盐水浸透双层干纱布(每10cm×10cm大小的纱布浸药量为10ml),随后将之覆盖在创面上,其上再覆以1%磺胺嘧啶银霜纱布,外用干纱布包扎。每日换药1次,直至创面愈合。 1.3 观察项目 两组同时全程观察记录创面情况及愈合速度,(1)创面愈合速度采用不同时间内创面愈合例数的百分率来表示。(2)以创面愈合为指标,从受试之日起,统计创面完全愈合所需要的时间;(3)用药后对较小创面观察其四周上皮向心性生长速度及残存肉芽面皮岛变大并离心性生长速度;(4)在治疗过程中比较两组创面分泌物培养阳性率。并定期进行肝,肾功能及血尿常规检查和观察局部反应。 1.4 疗效观察 参照改良温哥华瘢痕测量法[2],评判各创面愈后的瘢痕增生情况,即观察瘢痕的色素性、高度、硬度、血管性及自觉症状,并参照各项指标的评分标准打分,随后将各指标得分相加,即得创面愈合后的瘢痕指数(scar index,SI)。同时观察有无肿瘤形成、癌变等并发症发生。 1.5 统计学处理 所有数据以x-±s表示,组间差异采用t检验。 2 结果 rhEGF+rhFGF法残余创面愈合时间(12.45±8.42)天,明显少于rhEGF(29.7±10.12)天(t=2.225,P<0.05)；两种方法创面分泌物细菌培养阳性率无显著性意义(t=1.684,P>0.05)；愈后2年rhEGF法SI为8.92±1.78，明显低于rhEGF+rhFGF法6.12±1.54，(t=2.116,P<0.05)；所有受试创面均无肿瘤形成、癌变等并发症发生。治疗前后均无肝肾功能,血尿常规化验异常,未见局部及全身过敏症状,个别病例在应用时仅有一过性疼痛。所有受试创面均无肿瘤形成、癌变等并发症发生。 3 讨论 近年来，随着分子生物学在临床应用的进展，细胞因子在组织修复中的作用已经比较明确，许多细胞因子可以加速组织的修复和逆转修复不良状态。细胞生长因子是一类刺激细胞分裂的生物活性多肽，在创伤修复过程中具有多种重要作用：趋化作用、吸引炎性细胞和成纤维细胞进入创面、促进细胞增殖、促进创面的血管化、对细胞外基质的产生和降解有调节作用、诱导临近细胞合成细胞因子等[3]。虽然rhbFGF和rhEGF均为生长因子，但二者的效应重点是有差别的。有研究表明[4],rhEGF主要对再上皮化作用显著，而rhbFGF则主要促进创面肉芽组织生长。本研究结果显示,rhEGF+rhFGF法残余创面愈合时间,明显少于rhEGF(t=2.225,P<0.05)；两种方法创面分泌物细菌培养阳性率无显著性意义(t=1.684,P>0.05)；愈后2年rhEGF法SI明显低于rhEGF+rhFGF法(t=2.116,P<0.05)；提示烧伤后早期应用rhEGF+rhFGF 法治疗深度创面,能减轻后期的瘢痕形成,且远期疗效较好。外源rhEGF+rhFGF法减轻远期瘢痕形成的机制可能为[5]:(1)促进了创面表皮细胞的分裂、增殖,加速了创面上皮化过程,使再生表皮增厚,细胞分化好,创面封闭时间提前;(2)促进血管内皮细胞增殖,加速组织血管化进程;(3)促进成纤维细胞在创面的趋化、增殖和分化,促使其合成、分泌细胞外基质成分,使胶原合成时间提前,组织排列有序;(4)真皮形成加速也有利于表皮的及早修复。由此提示,rhEGF可减轻后期瘢痕形成,是因其早期加速了皮肤组织修复,及早封闭了创面,从而提高了再生皮肤的质量。另有报道,rhEGF+rhFGF能抑制皮肤内源性转化生长因子B1(TGFB1)的合成,进而对后者所诱导的胶原过度合成和收缩起抑制作用[6]。因此,EGF可能对瘢痕形成有直接抑制作用。烧伤残余创面的愈合过程是一个十分复杂的生理学过程,在修复过程中由于机体本身对创面部分的修复机制,调动内源性表皮细胞生长因子(EGF)在创面积累明显增多,在创面修复过程中虽EGF受体数目增加,内源性EGF也在修复位点明显示
EGF表皮生长因子
EGF表皮生长因子 EGF表皮生长因子是天津迦妮生物科技开发有限公司生产的化妆品中主要所含成分，主要针对女性皮肤，有着美白、保湿、祛斑、尤其针对妊娠斑、妊娠纹以及身体受外界影响产生的伤疤效果显著，那么，什么是EGF，为什么EGF在这方面有着自己独特的优势呢？今天迦妮就和你一起系统的去了解其中的奥秘，了解一下为什么我们会钟爱EGF。 表皮生长因子是一种小肽，由53个氨基酸残基组成，是类EGF大家族的一个成员，是一种多功能的生长因子，在体内体外都对多种组织细胞有强烈的促分裂作用。EGF同应答细胞表面的特异受体结合，根据《斯。诺美-走在生物医学美容最前沿》A10文献记载，一旦结合，便促进受体二聚化并使细胞质位点磷酸化。被激活的受体至少可与5种具有不同信号序列的蛋白结合，进行信号转导，在翻译水平上对蛋白质的合成起调节作用。此外EGF 可提高细胞内DNA拓扑异构酶活性，也可促进一些与增殖有关的基因表达，如myc 、fos 等。 中文学名表皮生长因子 拉丁学名Epidermal augmentum factor 别称epidermal growth factor 简称EGF 性质一种小肽 作用多功能的生长因子 发现时间1974年 1974年从人尿中提纯出人的表皮生长因子（hEGF）,其结构由53个氨基酸组成，分子量6201道尔顿，分子内有6个半胱氨酸组成的二硫键，形成3个分子内环型结构，组成生物活性所必须的受体结合区域。EGF无糖基部位，非常稳定，耐热耐酸，广泛存在于体液和多种腺体中，主要由颌下腺、十二指肠合成，在人体的绝大多数体液中均已发现，在乳汁、尿液、精液中的含量特异性地增高，但在血清中的浓度较低。众多的实验研究表明，EGF 可刺激多种细胞的增殖，主要是表皮细胞、内皮细胞。用于角膜损伤、烧烫伤及手术等创面的修复和愈合取得了很好的疗效，Montalcini 和Cohen教授因为发现表皮生长因子并分析其结构和作用机理，1986年诺贝尔生理学及医学获奖。 2来源与机理 编辑 表皮生长因子: 一种可刺激表皮和其他多种细胞分裂的蛋白质。
EGF表皮生长因子
表皮xx(EGF) 系于公元1962年由意大利女科学家Mantalcini教授和美国博士Cohen在实验中发现的，并因而获得1986年诺贝尔生理奬与医学奬，是在小老鼠的颔下腺发现了一种可以促使新生小鼠眼睑早开，牙齿早萌的活性成分，而将这活性成分加入培养皮肤表皮细胞的基质后，发现可以促进皮肤表皮细胞的生长，因此将此活性成分命名为EGF(Epidermal Growth Factor)中文为"表皮细胞生长因子，并证实这种活性蛋白具有免疫和自我调节的能力，并能加速表皮组织的新陈代谢，更新已老死及受损的细胞，原来人体器官和发肤的自我修补功能是由一组称为细胞因子(cytokines)的活性蛋白互相协调而成，而EGF是其中的一种因子。主要作用是促进皮肤细胞的增殖、分化，加速新陈代谢，提高新细胞在皮肤中所占的比例，从而使皮肤变得年轻，微量的EGF可赋予衰老细胞全新的生命力，促使各种受损皮肤修复和再生，它还能刺激细胞外一些大分子（如透明质酸、糖蛋白等）的合成与分泌，滋润皮肤，是决定肌肤活力和健康的源泉。EGF 又被称为"美丽因子"，人体EGF的含量决定着皮肤年轻的程度。 表皮细胞生长因子(EGF)是由53个氨基酸组成的小分子多肽，分子量约6000道顿，分子内有三对二硫键结构，因此对酸、热等物理化学因素均很稳定。生长因子是一种蛋白质，主要作用是与细胞表面的接受器结合后，刺激细胞产生一连串的细胞增殖与分化，正常细胞要增殖非有生长因子的刺激不可，皮肤的细胞需要生长因子的刺激来加速更新与再生。 EGF是一个相当特殊的3D结构，主要的动作是刺激纤维母细胞上的接受器，结合后，开始制造合成各类纤维和细胞间基质，它的重点在激化细胞的新生、活化纤维母细胞，也就是他会下达命令给细胞来执行生长胶原蛋白的工作，以激化细胞的在生，达到修复功能。EGF是一种酵素，可快速通过细胞膜进入细胞内作用，提供细胞核信号，启动细胞生长、分裂和分化，对于受损肌肤的修护有强大活性。 EGF在美容方面的作用 1.嫩肤作用:
人表皮生长因子(EGF)酶联免疫分析(ELISA)
人表皮生长因子(EGF)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人表皮生长因子(EGF)含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的人表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF)，再与HRP 标记的表皮生长因子(EGF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人表皮生长因子(EGF)浓度。 试剂盒组成： 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶+重组人表皮生长因子凝胶(酵母)
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶 本品系由高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后，加入凝胶基质制成。含适宜稳定剂、防腐剂，不含抗生素。 1.基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合现行版《中国药典》三部“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 工程菌菌种 2.1.1名称及来源 重组牛碱性成纤维细胞生长因子工程菌株系由带有牛碱性成纤维细胞生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。 2.1.2 种子批建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1 划种LB琼脂平板 应呈典型大肠杆菌集落形态，无其他杂菌生长。 2.1. 3.2染色镜检 应为典型的革兰氏阴性杆菌。 2.1. 3.3 对抗生素的抗性 应与原始菌种相符。 2.1. 3.4 电镜检查（工作种子批可免做） 应为典型大肠杆菌形态，无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。 2.1. 3.5 生化反应 应符合大肠杆菌生物学性状。 2.1. 3.6 牛碱性成纤维细胞生长因子表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.7 质粒检查 该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。 2.1. 3.8目的基因核苷酸序列检查（工作种子批可免做） 目的基因核苷酸序列应与批准序列相符。 2.2 原液制备 2.2.1 种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。 2.2.2 发酵用培养基 采用适宜的不含抗生素的培养基。 1
表皮生长因子两条典型的信号转导途径
表皮生长因子两条典型的信号转导途径 (1)表皮生长因子受体介导的信号转导途径 表皮生长因子与其受体－表皮生长因子受体结合后可引发一系列细胞内变化，最终使细胞发生分化或增殖。表皮生长因子受体是一种受体酪氨酸蛋白激酶，而受体酪氨酸蛋白激酶→Ras→MAPK级联途径是表皮生长因子刺激信号传递到细胞核内的最主要途径。它由以下成员组成：表皮生长因子受体→含有SH2结构域的接头蛋白(如Grb2)→鸟嘌呤核苷酸释放 因子(如SOS)→Ras蛋白→MAPKKK(如Raf1)→MAPKK→MAPK→转录因子等(图21－24)。 表皮生长因子与受体结合后，可以使受体发生二聚体化，从而改变了受体的构象，使其中的蛋白酪氨酸激酶活性增强，受体自身的酪氨酸残基发生磷酸化，磷酸化的受体便形成了与含SH2结构域的蛋白分子Grb2结合的位点，导致Grb2与受体的结合。Grb2中有两个SH3结构域，该部位与一种称为SOS的鸟苷酸交换因子结合，使之活性改变，SOS则进一步活化Ras，激活的Ras作用于MAPK激活系统，导致ERK的激活。最后ERK转移到 细胞核内，导致某些转录因子的活性改变从而改变基因的表达状态及细胞的增殖与分化过程。 (2)γ－干扰素受体介导的信号转导 γ－干扰素是由活化T细胞产生的，它具有促进抗原提呈和特异性免疫识别的作用，并可促进B细胞分泌抗体。γ－干扰素与受体结合以后，也可以导致受体二聚体化，二聚体化的受体可以激活JAK－STAT系统，后者将干扰素刺激信号传入核内。JAK(Janus Kinase)为一种存在于胞浆中的蛋白酪氨酸激酶，它活化后可使干扰素受体磷酸化。STAT(Signal Transducerand Activator of Transcription)可以通过其SH2结构域识别磷酸化的受体并与之结合。然后STAT分子亦发生酪氨酸的磷酸化，酪氨酸磷酸化的STAT进入胞核形成有活性的转录因子，影响基因的表达 表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）受体是研究得比较清楚的酪氨酸激酶受体，存在于特殊的靶细胞的质膜上，调节不同的功能，包括细胞的生长、增殖和分化，并且与肿瘤的发生有关。EGF受体（EGF receptor）结构是一种糖蛋白，由三个部分组成：①细胞外结构域有621个氨基酸残基，富含半胱氨酸，并形成多对二硫键。其上结合有糖基，是EGF结合的位点；②跨膜区由23个氨基酸残基组成；③细胞质结构域，由542个氨基酸残基组成，含有无活性的酪氨酸激酶和几个酪氨酸磷酸化的位点。当EGF同受体细胞外结构域结合位点结合后，受体被激活，导致两个EGF受体单体形成二聚体，激活细胞质部分的酪氨酸激酶，使酪氨酸自我磷酸化。EGF受体上有五个主要的磷酸化的酪氨酸位点，可以同几种不同的蛋白质结合，分别引起细胞内不同的信号应答。在多数情况下，EGF受体被磷酸化的酪氨酸位点同靶蛋白（酶）的SH2结构域相互作用，将靶蛋白（酶）激活，引起细胞应答。如PIP2激酶通过SH2与EGF受体磷酸化的酪氨酸位点相互作用被激活，激活的PIP2激酶使一种膜脂-PIP2磷酸化。另外，磷酸化的酪氨酸位点也可以同具有SH2结构域的磷脂酶Cγ相互作用，并将磷脂酶Cγ激活，激活的磷脂酶Cγ可将质膜中PIP2水解成IP3和DAG，引起与磷脂肌醇-G蛋白偶联系统类似的信号转导。