双歧杆菌检验(食品微生物学检验)
食品安全国家标准
食品微生物学检验双歧杆菌检验
1范围
本标准规定了双歧杆菌(B i f i d o b a c t e r i u m)的鉴定及计数方法三
本标准适用于双歧杆菌纯菌菌种的鉴定及计数三本标准适用于食品中仅含有单一双歧杆菌的菌种鉴定三本标准适用于食品中仅含有双歧杆菌属的计数,即食品中可包含一个或多个不同的双歧杆菌菌种三
2设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
2.1恒温培养箱:36??1?三
2.2冰箱:2?~5?三
2.3天平:感量0.01g三
2.4无菌试管:18mm?180mm二15mm?100mm三
2.5无菌吸管:1m L(具0.01m L刻度)二10m L(具0.1m L刻度)或微量移液器(200μL~1000μL)及配套吸头三
2.6无菌培养皿:直径90mm三
3培养基和试剂
3.1双歧杆菌培养基:见A.1三
3.2 P Y G培养基:见A.2三
3.3 M R S培养基:见A.3三
3.4甲醇:分析纯三
3.5三氯甲烷:分析纯三
3.6硫酸:分析纯三
3.7冰乙酸:分析纯三
3.8乳酸:分析纯三
4检验程序
双歧杆菌的检验程序见图1三
图1双歧杆菌的检验程序5操作步骤
5.1无菌要求
全部操作过程均应遵循无菌操作程序三
5.2双歧杆菌的鉴定
5.2.1纯菌菌种
5.2.1.1样品处理:半固体或液体菌种直接接种在双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板三固体菌种或真空冷冻干燥菌种,可先加适量灭菌生理盐水或其他适宜稀释液,溶解菌粉三
5.2.1.2接种:接种于双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板三36??1?厌氧培养48h?2h,可延长至72h?2h三
5.2.2食品样品
5.2.2.1样品处理:取样25.0g(m L),置于装有225.0m L生理盐水的灭菌锥形瓶或均质袋内,于8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1?10的样品匀液三冷冻样品可先使其在2?~5?条件下解冻,时间不超过18h;也可在温度不超过45?的条件解冻,时间不超过15m i n三
5.2.2.2接种或涂布:将上述样品匀液接种在双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板,或取0.1m L适当稀释度的样品匀液均匀涂布在双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板三36??1?厌氧培养48h?2h,可延长至72h?2h三
5.2.2.3纯培养:挑取3个或以上的单个菌落接种于双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板三36??1?厌氧培养48h?2h,可延长至72h?2h三
5.2.3菌种鉴定
5.2.3.1涂片镜检:挑取双歧杆菌平板或M R S平板上生长的双歧杆菌单个菌落进行染色三双歧杆菌为革兰氏染色阳性,呈短杆状二纤细杆状或球形,可形成各种分支或分叉等多形态,不抗酸,无芽孢,无动力三
5.2.3.2生化鉴定:挑取双歧杆菌平板或M R S平板上生长的双歧杆菌单个菌落,进行生化反应检测三过氧化氢酶试验为阴性三双歧杆菌的主要生化反应见表1三可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统三
表1双歧杆菌菌种主要生化反应
编号项目两歧双歧杆菌
(B.b i f i d u m)
婴儿双歧杆菌
(B.i n f a n t i s)
长双歧杆菌
(B.l o n g u m)
青春双歧杆菌
(B.a d o l e s c e n t i s)
动物双歧杆菌
(B.a n i m a l i s)
短双歧杆菌
(B.b r e v e)
1L-阿拉伯糖--+++-2D-核糖-+++++ 3D-木糖-++d++ 4L-木糖------5阿东醇------6D-半乳糖d+++d+ 7D-葡萄糖++++++ 8D-果糖d++d d+ 9D-甘露糖-++---10L-山梨糖------
表1(续)
编号项目两歧双歧杆菌
(B.b i f i d u m)
婴儿双歧杆菌
(B.i n f a n t i s)
长双歧杆菌
(B.l o n g u m)
青春双歧杆菌
(B.a d o l e s c e n t i s)
动物双歧杆菌
(B.a n i m a l i s)
短双歧杆菌
(B.b r e v e)
11L-鼠李糖------12卫矛醇------13肌醇-----+ 14甘露醇----a--a 15山梨醇----a--a 16α-甲基-D-葡萄
糖甙--+---17N-乙酰-葡萄
糖胺-----+ 18苦杏仁甙(扁桃
甙)---++-19七叶灵--+++-20水杨甙(柳醇)-+-++-21D-纤维二糖-+-d--22D-麦芽糖-+++++ 23D-乳糖++++++ 24D-蜜二糖-+++++ 25D-蔗糖-+++++ 26D-海藻糖(覃糖)------27菊糖(菊根粉)--a--a--a 28D-松三糖--++--29D-棉籽糖-+++++ 30淀粉---+--31肝糖(糖原)------32龙胆二糖-+-+++ 33葡萄糖酸钠---+--注:+表示90%以上菌株阳性;-表示90%以上菌株阴性;d表示11%~89%以上菌株阳性;
a表示某些菌株阳性三
5.2.3.3有机酸测定:测定双歧杆菌的有机酸代谢产物(可选项),见附录B三
5.3双歧杆菌的计数
5.3.1纯菌菌种
5.3.1.1固体和半固体样品的制备:以无菌操作称取2.0g样品,置于盛有198.0m L稀释液的无菌均质杯内,8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或置于盛有198.0m L稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1?100的样品匀液三
5.3.1.2液体样品的制备:以无菌操作量取1.0m L样品,置于9.0m L稀释液中,混匀,制成1?10的样品匀液三
5.3.2食品样品
5.3.2.1样品处理:取样25.0g(m L),置于装有225.0m L生理盐水的灭菌锥形瓶或均质袋内,于8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1?10的样品匀液三冷冻样品可先使其在2?~5?条件下解冻,时间不超过18h;也可在温度不超过45?的条件解冻,时间不超过15m i n三
5.3.3系列稀释及培养
用1m L无菌吸管或微量移液器,制备10倍系列稀释样品匀液,于8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n三每递增稀释一次,即换用1次1m L灭菌吸管或吸头三根据对样品浓度的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液,在进行10倍递增稀释时,吸取1.0m L样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿三同时,分别吸取1.0m L空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照三及时将15m L~20m L冷却至46?的双歧杆菌琼脂培养基或MR S琼脂培养基(可放置于46??1?恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀三从样品稀释到平板倾注要求在15m i n内完成三待琼脂凝固后,将平板翻转,36??1?厌氧培养48h?2h,可延长至72h?2h三培养后计数平板上的所有菌落数三
5.3.4菌落计数
5.3.4.1可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量三菌落计数以菌落形成单位(c o l o n y-f o r m i n g u n i t s,C F U)表示三
5.3.4.2选取菌落数在30C F U~300C F U之间二无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数三低于30C F U 的平板记录具体菌落数,大于300C F U的可记录为多不可计三每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数三
5.3.4.3其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数三
5.3.4.4当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数三
5.3.5结果的表述
5.3.5.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克或每毫升中菌落总数结果三
5.3.5.2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算:
N= C
(n1+0.1n2)d (1)式中:
N 样品中菌落数;
C 平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;
n1 第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;
n2 第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;
d 稀释因子(第一稀释度)三
5.3.5.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300C F U,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可
记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算三
5.3.5.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30C F U,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算三
5.3.5.5若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算三5.3.5.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30C F U~300C F U之间,其中一部分小于30C F U或大于300C F U时,则以最接近30C F U或300C F U的平均菌落数乘以稀释倍数计算三
5.3.6菌落数的报告
5.3.
6.1菌落数小于100C F U时,按 四舍五入 原则修约,以整数报告三
5.3.
6.2菌落数大于或等于100C F U时,第3位数字采用 四舍五入 原则修约后,取前2位数字,后面用0代替位数;也可用10的指数形式来表示,按 四舍五入 原则修约后,采用两位有效数字三
5.3.
6.3称重取样以C F U/g为单位报告,体积取样以C F U/m L为单位报告三
5.4结果与报告
根据5.2.3.1二5.2.3.2,5.2.3.3结果,报告双歧杆菌属的种名三根据5.3.6菌落计数结果出具报告,报告单位以C F U/g(m L)表示三
附录A
培养基和试剂
A.1双歧杆菌琼脂培养基
A.1.1成分
蛋白胨15.0g
酵母浸膏2.0g
葡萄糖20.0g
可溶性淀粉0.5g
氯化钠5.0g
西红柿浸出液400.0m L
吐温801.0m L
肝粉0.3g
琼脂粉20.0g
加蒸馏水至1000.0m L
A.1.2制法
A.1.2.1半胱氨酸盐溶液的配制:称取半胱氨酸0.5g,加入1.0m L盐酸,使半胱氨酸全部溶解,配制成半胱氨酸盐溶液三
A.1.2.2西红柿浸出液的制备:将新鲜的西红柿洗净后称重切碎,加等量的蒸馏水在100?水浴中加热,搅拌90m i n,然后用纱布过滤,校正p H7.0?0.1,将浸出液分装后,121?高压灭菌15m i n~ 20m i n三
A.1.2.3制法:将A.1.1所有成分加入蒸馏水中,加热溶解,然后加入半胱氨酸盐溶液,校正p H至6.8?0.1三分装后121?高压灭菌15m i n~20m i n三
A.2P Y G液体培养基
A.2.1成分
蛋白胨10.0g
葡萄糖2.5g
酵母粉5.0g
半胱氨酸-H C l 0.25g
盐溶液20.0m L
维生素K1溶液0.5m L
氯化血红素溶液5m g/m L2.5m L
加蒸馏水至500.0m L
A.2.2制法
A.2.2.1盐溶液的配制:称取无水氯化钙0.2g,硫酸镁0.2g,磷酸氢二钾1.0g,磷酸二氢钾1.0g,碳酸
2013年 初级师微生物检验技术 专业知识 真题
一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1．均匀混合液体时需要使用 A．恒温水浴箱 B．微波炉 C．烤箱 D．振器 E．培养箱 2．关于病毒的说法，不正确的是 A．病毒的分离和鉴定需要组织细胞或动物接种和传代 B．病毒对细胞的感染性不存在任何选择性和特异性 C．用于病毒分离的材料包括传代病毒培养物和采自发病或死亡动物的标本 D．分离或鉴定后的病毒经过冷冻干燥后可以长期保存 E．组织培养细胞接种病毒首先选择敏感细胞 3．不宜冷藏的细菌是 A．流感嗜血杆菌 B．百日咳鲍特菌 C．牛布鲁菌 D．脑膜炎奈瑟菌 E．金黄色葡萄球菌 4．不可以加热的器皿是 A．烧杯 B．三角瓶 C．试管 D．容量瓶 E．蒸发皿 5．动物在受到病毒感染后，体内产生抗体，如果该抗体能与相应的病毒粒子特异性地结合，使后者丧失感染力，这种抗体就称为中和抗体。根据这一原理，用已知的病毒或病毒抗原，可以测知病人体内中和抗体的存在及其效价，这项指标可以反映的机体特性是A．病毒侵袭力 B．病毒感染力 C．抗病毒感染的免疫能力 D应激能力 E．敏感性 6．使用离心机时，不正确的是 A．离心机应放置在平稳、厚实的水平台上 B．离心管连同装有样品的沉淀管应先用天平完全平衡 C．开机前，应盖好顶盖 D开机前，应将速度钮调至所需转速，然后再开机
E．定期检测电刷及整流子磨损情况，并及时更换 7．不能用于培养病毒的方法是 A．细胞培养 B．鸡胚尿囊接种 C．鸡胚卵黄囊接种 D．动物接种 E．人工培养基培养 8．观察细菌的运动性，可用 A．液体培养基摇动培养 B．半固体培养基中穿刺培养 C．液体培养基中静止摇动培养 D．固体培养基表面划线培养 E．固体培养基穿刺培养 9．培养L型细菌，对培养基的要求是 A．高营养 B．高pH值 C．低湿度 D．高渗透压 E．低pH值 10．需避光保存的试剂存放一般用 A．三角瓶 B．棕色瓶 C．试管 D．干燥管 E．量筒 11．一般阳性样品发出报告后，处理样品时间为A．及时处理样品 B．2d后 C．3d后 D．90d后 E．180d后 12．关于疑似禽流感感染的标本的运输，错误的是A．特殊容器，三层包装 B．外包装贴有专门生物危害标志 C．运输过程双人参与 D．只要一个人运输即可 E．运输容器内装有冰袋或干冰
食品微生物检测实验
实验一食品中细菌总数的检验 一、实验目的要求 1、了解细菌总数检验的意义。 2、掌握样品稀释处理的方法和菌落总数计数的方法 3、掌握国标法测定菌落总数的方法和技能 4、熟练无菌操作技术。 二、原理 菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 三、试剂和仪器 （一）最先准备的器材（清洗、烘干、包扎、灭菌） 规格名称数量用途 1、500ml广口瓶1个稀释样品 2、500ml三角瓶1个配制生理盐水 3、250ml三角瓶2个配制营养琼脂 4、18×180mm试管3支稀释样品 5、1ml移液管 5 支 6、直径为90mm平皿10套倒营养平板 7、250ml量筒1支 8、玻璃珠：直径约5mm （二）应灭菌、消毒的器材 剪刀1把不锈钢药匙1把称量纸：适量 酒精消毒的器材：吸耳球1个，滴管胶头4只，开瓶器
（三）应制备的培养基 培养基总量所用容器 1、0.85%NaCl生理盐水1瓶300ml/瓶500ml三角瓶 2、平板计数琼脂（PCA）培养基：2瓶100ml/瓶250ml三角瓶 四、实验内容 （一）、基本操作过程： 样品称量→→样品稀释→→倾注平皿→→培养48小时→→计数报告。 （二）、样品的稀释（样品的处理） 样品：袋装乳粉 外包装消毒→→无菌称样品25g→→加无菌生理盐水→→加盖振荡摇均匀 1、用75%酒精棉球擦拭消毒袋口，用无菌剪刀开封取样。称取检样25g，放入装有适量玻璃珠的灭菌广口瓶子中，然后用225mL温热的灭菌生理盐水徐徐加入（先加入少量生理盐水将乳粉调成糊状，再全部加入，以免奶粉结团），采用振摇法（用力快速振摇50次,振幅不小于40cm）振摇均匀，即为1:10的稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。 2、用1ml灭菌吸管，吸取1∶10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内，振摇试管混合均匀，制成1∶100稀释液。 3、另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用另一支1ml灭菌吸管。 4、根据对检样污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的稀释液1ml于灭菌平皿内，每个稀释度做2个平皿。 5、用1ml生理盐水作空白对照试验，做2个平皿。 注意： ①吸管尖端不要触及瓶口或试管口外部，也不得触及管内稀释液。 ②吸管插入检样液内取样稀释时，插入深度要达2.5cm以上,调整时应使管尖与容器内壁紧贴。 ③进行稀释时，应使吸管内的液体沿管壁小心流加入，以免增加检液。 ④每递增稀释一次，即换用一支1ml灭菌吸管。
微生物检验技师初级师考试试题
微生物检验技师初级师 考试试题 Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】
微生物检验技师初级师考试试题-专业知识(一) 1.肺炎链球菌在临床上主要引起下列何种疾病 A、脓胸 B、大叶性肺炎 C、肺纤维化 D、肺结节 E、支气管炎 答案：B 2.下列何种药物不用于临床上治疗肺炎链球菌肺炎 A、青霉素 B、四环素 C、林可霉素 D、氨基甙类 E、氯霉素 答案：D 3.下列细菌中，引起菌痢症状最轻的是 A、痢疾志贺氏菌 B、福氏志贺氏菌 C、 鲍氏志加氏菌 D、宋内氏志贺氏菌 E、 以上都不对 答案：D 4.在我国，（）是引起 菌痢最主要的原因 A.福氏志贺氏菌 B. 宋内氏志加氏菌＋B D、以上都不是 E、鲍氏志加氏菌 答案：C 5.临床上取病人痰标本 后，应 A、立即温箱干燥后， 送实验室 B、置于4℃ 生理盐水中保存 C、立即送实验室检测 D、置于增菌液中保存 E、室温过夜 答案：C 6.我国城市饮用水卫生 标准规定 A、每1000ml水中大肠 杆菌＜3个 B、每1000ml 水中大肠杆菌＜30个 C、每100ml水中大肠 杆菌＜3个 D、每100ml 水中大肠杆菌＜30个 E、每500ml水中大肠杆 菌＜3个 答案：A 7.霍乱弧菌经人工培养传 代后，显徽镜下观察是 A、杆状 B、球形 C、椭圆形 D、弧形 E、纤丝状 答案：A 8.我国城市饮用水卫生标 准规定 A、每ml水中细菌总数＜ 1000个 B、每ml水中细 菌总数＜10个
C、每100ml水中细菌总数＜10个 D、每500ml 水中细菌总数＜10个 E、每ml水中细菌总数＜100个 答案：E 9.紫外线的杀菌机理可能是 A、紫外线的穿透作用 B、紫外线的高热作用 C、紫外线的辐射作用 D、紫外线凝固细菌蛋白质 E、紫外线干扰细菌DNA 复制与转录 答案：E 10.在固体培养基上生 长出现卷发状菌的细菌是 A、炭疽芽胞杆菌医学. B、肉毒梭菌 C、脆弱 杆菌 D、棒状杆菌 E、蜡 样芽胞杆菌 答案：A 11.在菌落周围出现很 窄的草绿色溶血环的细菌很 可能是 A、金黄色葡萄球菌 B、甲型链球菌 C、乙型 链球菌D、表皮葡萄球 菌 E、腐生葡萄球菌 答案：B 反应中补体一般稀释度 是 A、1：5－10 B、 1：2－4 C、1：11－14 D、1：15－20 E、1：21－25 答案：D 13.厌氧培养的厌氧状 态所用的指示剂是 A、甲基红 B、酚红 C、美兰 D、酚酞 E、 甲酚红 答案：C 14.必须在电子显微镜下 才可见到的细菌的特殊结构是 A、荚膜 B、鞭毛 C、芽胞 D、异染颗粒 E、菌毛 答案：E 15.显徽镜下观察抗酸染 色的结核分枝杆菌的典型形态 是 A、紫色栅栏状排列的杆 菌 B、红色略带弯曲的细 长杆菌
产气荚膜梭菌检验(食品微生物学检验)
食品安全国家标准 食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验 1范围 本标准规定了食品中产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）的检验方法。 本标准适用于食品中产气荚膜梭菌的检验。 2设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a）恒温培养箱：36℃±1℃； b）冰箱：2℃～5℃； c）恒温水浴箱：50℃±1℃，46℃±0.5℃； d）天平：感量0.1g； e）均质器； f）显微镜：10×～100×； g）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头； h）无菌试管：18mm×180mm； i）无菌培养皿：直径90mm； j）pH计或pH比色管或精密pH试纸； k）厌氧培养装置。 3培养基和试剂 3.1胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸（TSC）琼脂：见附录A中A.1。 3.2液体硫乙醇酸盐培养基（FTG）：见附录A中A.2。 3.3缓冲动力-硝酸盐培养基：见附录A中A.3。 3.4乳糖-明胶培养基：见附录A中A.4。 3.5含铁牛乳培养基：见附录A中A.5。 3.60.1%蛋白胨水：见附录A中A.6。 3.7革兰氏染色液：见附录A中A.7。 3.8硝酸盐还原试剂：见附录A中A.8。 3.9缓冲甘油-氯化钠溶液：见附录A中A.9。 4检验程序
产气荚膜梭菌检验程序见图1。 图1产气荚膜梭菌检验程序 5 操作步骤5.1样品制备 5.1.1 样品采集后应尽快检验，若不能及时检验，可在2℃～5℃保存；如8h 内不能进行检验，应以 无菌操作称取25g （mL ）样品加入等量缓冲甘油-氯化钠溶液（液体样品应加双料），并尽快至于-60℃低温冰箱中冷冻保存或加干冰保存。5.1.2 以无菌操作称取25g （mL ）样品放入含有225mL 0.1%蛋白胨水（如为5.1.1中冷冻保存样品， 室温解冻后，加入200mL 0.1%蛋白胨水）的均质袋中，在拍击式均质器上连续均质1min ～2min ；或置于盛有225mL0.1%蛋白胨水的均质杯中，8000r/min ～10000r/min 均质1min ～2min ，作为1:10稀释液。5.1.3 以上述1:10稀释液按1mL 加0.1%蛋白胨水9mL 制备10-2～10-6 的系列稀释液。
食品微生物学实验技术思考题答案
食品微生物学实验技术思考题答案 1. 用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用？ 答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比. 2. 列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作答：使用高倍镜和油镜时镜头距离标本较近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。 3. 什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？ 答：在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦的状态，这种现象称为物镜的同焦。利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。 4. 影响显微镜分辨率的因素有哪些？ 答：物镜的NA 值（物镜的数值孔径）与照明光源的波长 5. 根据你的实验体会,谈谈应如何根据所观察微生物的大小,选择不同的物镜进行有效地观察 答：细菌用油镜，真菌用高倍镜。都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度。 答：放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大40 倍的物镜就可以看了，细菌小，要用放大1000 倍的物镜看，感觉还很小。病毒那就要用电子显微镜看了。 6. 哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？ 答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节 7. 进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题? 答：着色不均，染色效果不好。阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌 8. 革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色? 答：不可以。因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁，对
什么是微生物检验
什么是食品微生物检验 吴崇食质12级1班学号：20122629 微生物是个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”，但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等，按照细胞机构分类分为原核微生物和真核微生物。 微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史。在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。一些疾病的致病机制并不清楚。大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。每次流感大流行流感病毒都与前次导致感染的株型发生了变异，这种快速的变异给疫苗的设计和治疗造成了很大的障碍。而耐药性结核杆菌的出现使原本已近控制住的结核感染又在世界范围内猖獗起来。 微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐败的牛奶中约有5千万个细菌，或者讲每夸脱牛奶中细菌总数约为50亿。也就是一滴牛奶中可能含有50 亿个细菌。 微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂，但微生物也有有益的一面。最早是弗莱明从青霉菌抑制其它细菌的生长中发现了青霉素，这对医药界来讲是一个划时代的发现。后来大量的抗生素从放线菌等的代谢产物中筛选出来。抗生素的使用在第二次世界大战中挽救了无数人的生命。一些微生物被广
食品微生物学检验系列知识点汇总
食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总 GB 4789.1-2016 食品卫生学检验总则 一、2016版总则变更内容 1.删除了标准中的英文名称、起草单位变更为中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局。 2.删除了规范性引用文件。 3.修改了实验室基本要求： 微生物专业教育或培训经历（如生物学、植 物学、医学、食品科学与工程、食品质量与安全等与微 生物有关的相关专业），具备相应的资质（应有岗位上岗 证、生物安全上岗证和压力容器上岗证），能够理解并正 确实施检验。 ①人员修改为检验人员实验室生物安全操作和消毒知识（相关标准及培训， 如GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求、消毒技术 规范（2002））。 品。 确保自身安全。
有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验（即无颜 色视觉障碍）。 ②环境与设施--突出温度、湿度和洁净度。 生物危害程度应与实验室生物防护水平相适应: 灭的微生物，如天花病毒。 间传播如霍乱弧菌。 病原微生物分类 沙门氏菌、单增李斯特氏菌。 第四类：通常不会引起人或动物疾病的微生物。 BSL-1）：操作第四类病原微生物（属于正压，适用 ） 实验室生物安全级别BSL-2）：操作第三类病原微生物（属于负压，适用 II级生物安全 ） BSL-3）：操作第二类病原微生物
四级（BSL-4）：操作第一类病原微生物 消毒：是杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其中的孢子。 灭菌：是杀死和去除所有微生物及其中孢子的过程。 蒸法消毒） 消毒剂表面消毒 微生物实验 高压灭菌 干热灭菌（180℃1h或170℃2h） 培养基和试剂灭菌 过滤除菌 紫外线消毒法：紫外灯管放射一定波长，破坏细菌或病毒的DNA和RNA，使他们丧失生存能力和繁殖能力，从而达到灭菌目的。紫外线的特点是对芽孢和营养细胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌芽孢对其抵抗力大，且紫外线穿透力极低，所以只能用于表面灭菌，对固体物质灭菌不彻底。
初级检验技师考试微生物检验考试试题及答案
初级检验技师考试微生物检验考试试题及答案 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】
初级检验技师考试微生物检验考试试题及答案(2) 一、名词解释 1.消毒 2.灭菌 3.防腐 4.无菌 5.无菌操作 6.正常菌群 7.菌群失调 二、填空题 1.化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是，和。 2.干热灭菌法包括，，。 3.巴氏消毒法常用于消毒和。 4.常用的湿热灭菌法包括，，、和。 5.紫外线杀菌机理是，导致细菌和。 6.环境中的有机物对细菌有作用，其可与消毒剂发生反应，使消毒剂的杀菌力。 7.普通琼脂培养基灭菌可采用法。 8.手术室空气消毒常采用法。 9.用于新生儿滴眼，预防淋球菌感染常用的消毒剂是。 10.葡萄球菌对其敏感，常用于浅表创伤消毒的消毒剂是。 11.一般化学消毒剂在常用浓度下，只对细菌的有效。对芽胞需要提高消毒剂的和方可奏效。 12.影响化学消毒剂消毒效果的因素主要有、、和等。 13.常用于消毒饮水和游泳池的消毒剂是和。 14.生石灰可用于和的消毒。 15.酚类消毒剂包括和。 三、单选题
1.关于紫外线杀菌不正确的是 A.紫外线杀菌与波长有关 B.紫外线损伤细菌 D.NA.构型 C.紫外线的穿透力弱，故对人体无害 D.紫外线适用于空气或物体表面的消毒 E.一般用紫外线灯做紫外线的杀菌处理 2.关于高压蒸汽灭菌法不正确的是 A.灭菌效果最可靠，应用最广 B.适用于耐高温和潮湿的物品 C.可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物 D.通常压力为2.05kg/ C.m2 E.通常温度为121.3℃ 3.对普通培养基的灭菌，宜采用 A.煮沸法 B.巴氏消毒法 C.流通蒸汽灭菌法 D.高压蒸汽灭菌法 E.间歇灭菌法 4.关于乙醇的叙述，不正确的是 A.浓度在70~75%时消毒效果好 B.易挥发，需加盖保存，定期调整浓度 C.经常用于皮肤消毒
初级检验技师考试微生物检验考试试
初级检验技帅考试微生物检验考试试 题及答案(2) 一、名词解释 1. 消毒 2.灭菌 3.防腐 4.无菌 5.无菌操作 6.正常菌群 7.菌群失调 二、填空题 1. 化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是，和。 2. 干热灭菌法包括，，。 3. xx消毒法常用于消毒和。 4. 常用的湿热灭菌法包括，，、和。 5. 紫外线杀菌机理是，导致细菌和。 6. 环境中的有机物对细菌有作用，其可与消毒剂发生反应，使消毒剂的杀菌力。 7. 普通xx培养基灭菌可采用法。 8. 手术室空气消毒常采用法。 9. 用于新生儿滴眼，预防淋球菌感染常用的消毒剂是。 10. 葡萄球菌对其敏感，常用于浅表创伤消毒的消毒剂是。 11. 一般化学消毒剂在常用浓度下，只对细菌的有效。对芽胞需要提高消毒剂的和方可奏效。12.影响化学消毒剂消毒效果的因素主要有、、和等。 13 .常用于消毒饮水和游泳池的消毒剂是和。 14. 生石灰可用于和的消毒。 15. 酚类消毒剂包括和。
三、单选题 1. 关于紫外线杀菌不正确的是 A. 紫外线杀菌与波长有关 B. 紫外线损伤细菌 D.NA.构型 C. 紫外线的穿透力弱，故对人体无害 D. 紫外线适用于空气或物体表面的消毒 E. 一般用紫外线灯做紫外线的杀菌处理 2. 关于高压蒸汽灭菌法不正确的是 A. 灭菌效果最可靠，应用最广 B. 适用于耐高温和潮湿的物品 C. 可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物 D. 通常压力为2.05kg/ C. m2 E. 通常温度为121.3C 3. 对普通培养基的灭菌，宜采用 A. 煮沸法 B. xx消毒法 C. 流通蒸汽灭菌法 D. 高压蒸汽灭菌法 E. 间歇火菌法
实习一食品的微生物学检验
实习一食品的微生物学检验 实验目的：了解食品微生物检验的过程，常用指标及检验结果评价。 实验内容： （一）细菌总数的测定 1 定义：细菌总数是指1g或lml食品，经过处理，在pH7．4～7．6的普通营养琼脂平板上,35～370C培养24土2小时生长出来的细菌菌落总数。 2.实验试剂（1）琼脂（2）生理盐水（3）蛋白陈（4）牛肉膏（5）氯化钠 3.实验仪器：1）采样瓶（2）平皿（3）吸管（4）试管（5）孵箱 4.操作方法 （1）样品的采集与处理： 在采样和样品处理时，必须严格遵守无菌原则，采样后尽快检验。样品在室温下放 置最好不超过2小时，否则应置于冰箱内，在冰箱放置最长也不要超过12小时。 A 肉与肉制品的采集及处理： （1）样品的采集 ①生肉与内脏：如系屠宰场的猪，可于开腔后立即用灭菌刀采取两腿内侧肌肉509 左右；如果是鲜肉和冻肉，可用灭菌刀采取腿肉或其它部位肌肉5吨左右；，如系脾、肾,可取其全部;如系肝脏，则取靠近肝门带有淋巴结部分。样品采后用无菌镊子夹入灭菌玻璃容器或塑料袋内立即送检，样品内不得放人任何防腐剂。 ②熟肉及灌肠类：一般可取有代表性样品30～50克，肥瘦共存的肉，宜取瘦的，肥瘦难分或量不多时，要随机取样，灌肠类横断采样3～5块，样品取后放入灭菌容器内立即送检。 （b）样品处理。 凡由大块样品中采取一部分，，一般均须在表面，以一烙板灭菌或沸水进行表面灭菌。再用灭菌剪子剪掉表面部分，在无菌条件下，取深层肌肉或内脏10g放人灭菌
容器内，用灭菌剪子剪碎，加入灭菌河沙和灭菌生理盐水100ml研磨混匀制成1：10混悬液。熟肉及灌肠也可不用表面灭菌处理，而直接用无菌操作称取10g 放入灭菌容器内研磨或剪碎，再按上法制成1:10混悬液。 b．乳与乳制品（鲜乳、炼乳、奶粉、酸奶等）。 (a)样品的采集 1.鲜乳：如在畜牧场直接取样，先将牛乳头用酒精棉球表面擦拭消毒，弃去开始挤下的头两把奶，然后再用灭菌容器接取，同一头牛应在各乳头上各取一部分。如在奶站或销售点，可用灭菌采样器采取不同部位有代表性的样品，采后不加防腐剂，立即送检。若为同一批瓶装奶则随机取2～5瓶送检。 2.乳制品。最好采取原装样品，如无原装者，要用灭菌容器取不同部位有代表性的样品送检。 （b）样品处理： 1. 鲜乳：以无菌操作，直接用吸管取10ml加入90ml生理盐水作成1： 10稀释液（需用原液者例外）。 2. 奶粉：无菌称取10g样品，放入预温至450C的生理盐水90m1，溶后混匀制成1： 10稀释液。 3. 炼乳、酸乳：将瓶口或铁筒的表面用点燃的酒精棉球消毒，然后用石炭酸纱布盖好，再用灭菌开罐器开封，无菌称取10g样品放入灭菌容器内，加灭菌生理盐水90ml振摇均匀，制成1:10稀释液。 4. 奶油；将块状样品用灭菌刀取10g，加90ml生理盐水，放入450C 水浴中熔化，摇匀制成1:10稀释液。 C．蛋品: （a）样品采集： 鲜蛋：取完整的鲜蛋放入无菌袋内送检。 干全蛋，于蛋黄和干蛋白:将包装箱开口处用75％酒精棉球消毒后打开,用无菌采样器斜角插入箱底，使样品填满采样器，抽出采样器，用灭菌匙分上、。中、下各取 50g装人250ml广口瓶，混匀，送检。
《食品微生物》教案
一、《食品微生物》教学内容 （一）目的和任务 1．教学的目的 学生在学习了解有关食品微生物基本理论知识（微生物的定义、微生物的分类、微生物的形态结构、微生物的生理生化特性等）的基础上，能熟练掌握微生物的显微镜观察技术、微生物培养基的制作技术和微生物的接种操作技术，进一步掌握利用微生物进行常见发酵食品生产的技术，并能有效进行发酵过程中的质量控制。 2．教学的要求 1）标准的校内小型生产型实训室，面积200㎡，并配备相应的配套设施设备。其中，包括：光学显微镜、不锈钢锅、水浴锅、超净工作台、杀菌锅、恒温培养箱、玻璃器皿（试管、三角瓶、培养皿、移液管等）。 2）配备一名实训指导教师。 3）相关教学软件、影像及图片资料。 4）铅笔、彩色染料笔、图画纸、坐标纸等 （二）实训所需设备设施及实验地点 1、校内生产型实训环境 标准的校内小型生产型实训室，面积200㎡，并配备相应的配套设施设备。其中，包括：光学显微镜、不锈钢锅、水浴锅、超净工作台、杀菌锅、恒温培养箱、玻璃器皿（试管、三角瓶、培养皿、移液管等）。 生产设备先进，配套良好，使用效率高，效果好。 2、校外实训基地： 千禾食品有限公司、苏东坡酒业有限公司、吉香居食品有限公司、蒙牛乳业眉山公司等。 （三）教学项目及学时分配 1
2 （四）考核方式及成绩评定 1、考核实行过程考核和结果考核相结合。其中过程考核占60%，包括平时表现和任务考核；结果考核占40%，主要是期末综合技能考核。 （五）教材及参考资料 1唐艳红，王海伟．《食品微生物》． 2.无锡轻工业学院编写：调味品酿造加工技术 二、附录
（一）《食品微生物》理论教学教案 1、《微生物概论》
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 2.2致病菌的检验 沙门氏菌，参照GB4789.4进行 金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验
《食品微生物检验》习题库
习题库 项目一食品中的微生物及其检验 一、名词解释 1、微生物： 2、食品微生物检验： 3、食品变质： 4、腐败： 5、酸败： 6、菌落总数： 7、大肠菌群： 8、MPN： 二、填空题 1、食品中的微生物的主要来源是、和。 2、引起食品腐败变质的原因主要有、、和 等方面，其中，最普遍、最主要的因素是。 3、分解蛋白质的微生物以为主，其次是和。 4、分解糖类的微生物以为主，其次是和。 5、分解脂肪的微生物以为主，其次是和。 6、国家食品卫生标准一般包括三个方面的内容：、 和。 7、微生物指标一般分为、和三项。
8、食品微生物检验包括和两个方面。 三、选择题 1、下列描述的微生物特征中，不是所有微生物共同特征的是（） A.个体微小 B.分布广泛 C.种类繁多 D.可无致病性 E.只能在活细胞内生长繁殖 2、土壤中，数量和种类最多的微生物是（） A、细菌 B、霉菌 C、酵母菌 D、放线菌 3、我国城市饮用水卫生标准规定（） A、每1000ml水中大肠杆菌＜3个 B、每1000ml水中大肠杆菌＜30个 C、每100ml水中大肠杆菌＜3个 D、每100ml水中大肠杆菌＜30个 E、每500ml水中大肠杆菌＜3个 4、我国城市饮用水卫生标准规定（E ） A、每ml水中细菌总数＜1000个 B、每ml水中细菌总数＜10个 C、每100ml水中细菌总数＜10个 D、每500ml水中细菌总数＜10个 E、每ml水中细菌总数＜100个 四、判断题 1、菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。（）
2、MPN是指可能产气的数量。（） 3、食品中病原微生物的检验，可以检验出少量的病原微生物（） 五、问答题 1、食品微生物检验的特点有哪些？ 2、食品微生物检验的任务是什么？ 3、食品微生物检验的内容主要包括哪些方面？每一个方面的检验项目是什么？ 4、食品质量的评价指标有哪些？并具体解释之。 5、食品微生物检验的意义是什么？ 6、食品中细菌总数检验的意义是什么？ 7、食品中大肠菌群检验的意义是什么？ 项目二食品微生物检验的基本条件与设备 一、名词解释 1、分辨力： 2、相位： 3、振幅： 二、填空题 1、无菌室通常包括和两部分，这两部分的比例一般为 ，高度一般m左右。 2、对无菌室进行熏蒸消毒时，通常采用的方法是和。 3、在采用氧化熏蒸法对无菌室进行消毒时，使用的高锰酸钾和甲醛的比例为 。
食品微生物学实验技术
食品微生物学实验技术 实验1 食品中细菌菌落总数的测定 1 目的要求 （1）掌握食品中菌落总数测定方法。 （2）了解食品清洁程度（被污染程度）及观察细菌在食品中繁殖的动态，从而为被检样品进行卫生学评价时提供依据。 2 基本原理 菌落（colony）是指细菌在某一种固体培养基上克隆增殖发育成肉眼可见的细菌集团。 菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养成分，培养温度和时间、pH、需氧性质等），所得1mL（g，cm2)检样中所含菌落总数。通常以cfu/g（mL，cm2)表示，cfu代表的colony forning unit。 菌落总数是作为判定食品的清洁程度（被污染程度）的标记，通常越干净的食品，单位样品菌落总数越低。反之，菌落总数就越高。菌落总数的测定是以每个活细菌能克隆增殖形成一个可见的单独菌落为基础的，但是在实践中除了单个细胞形成菌落外，二个或两个以上相连的同种细胞也同样可形成菌落，所以现在均以菌落总数（而不是活细菌数）或菌落形成单位数表达。由于菌落总数的测定是在37℃有氧条件下培养的结果，对于厌氧菌、微需氧菌、嗜冷菌和嗜热菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的细菌也受到限制。因此，这种方法所得到的结果，实际上只包括一群在普通营养琼脂中发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。但由于在自然界这类细菌占大多数，其数量的多少能反映出样品中细菌的总数，正因为如此，用该方法来测定食品中含有的细菌总数已得到了广泛的认可。 3 实验材料 3．1 仪器恒温箱、冰箱、恒温水浴锅、天平、微波炉、均质器。 3．2 材料吸管（容量为0.1mL、1m和10mL）、广口瓶或三角烧瓶、灭菌平皿、试管、酒精灯、试管架、灭菌剪刀、灭菌镊子。 3．3 试剂营养琼脂培养基、75%乙醇、0.85%生理盐水。 4 实验方法与步骤 4．1 菌落总数实验程序（如图28-1） 4．2 检样稀释及培养 （1）以无菌操作将检样25g(25mL)剪碎放于装有225mL灭菌生理盐水和玻璃珠的三角瓶，经过充分振荡或均质处理制作成1：10的均匀稀释液（固体食品有的需先用灭菌研钵研磨后再稀释）。 （2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水的试管（注意吸管尖端不要触及管稀释液），振摇试管混合均匀，作成1：100稀释液，按上述操作顺序，作10倍系列稀释液，每递增稀释一次，即换用1支1mL灭菌吸管。 （3）根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释液，分别在作10倍递增稀释同时，吸取该稀释度的吸管移取1mL稀释液于灭菌平皿，每个稀释度作两个平皿。 （4）稀释液移入平皿后，应及时将融化并冷却到46℃营养琼脂培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使其混合均匀，同时将营养琼脂培养基注入加有无菌生理盐水的灭菌平皿作空白对照。 （5）待琼脂凝固后，翻转平板，置36+1℃温箱培养24+2hr（肉、乳和蛋品为48+2h，水产为30℃48+2h）。
微生物检验技师初级师考试试题
微生物检验技师初级师考试试题-专业知识(一) 1.肺炎链球菌在临床上主要引起下列何种疾病 A、脓胸 B、大叶性肺炎 C、肺纤维化 D、肺结节 E、支气管炎 答案：B 2.下列何种药物不用于临床上治疗肺炎链球菌肺炎 A、青霉素 B、四环素 C、林可霉素 D、氨基甙类 E、氯霉素 答案：D 3.下列细菌中，引起菌痢症状最轻的是 A、痢疾志贺氏菌 B、福氏志贺氏菌 C、鲍氏志加氏菌 D、宋内氏志贺氏菌 E、以上都不对 答案：D 4.在我国，（）是引起菌痢最主要的原因 A.福氏志贺氏菌 B.宋内氏志加氏菌 C.A＋B D、以上都不是 E、鲍氏志加氏菌 答案：C 5.临床上取病人痰标本后，应 A、立即温箱干燥后，送实验室 B、置于4℃生理盐水中保存 C、立即送实验室检测 D、置于增菌液中保存 E、室温过夜 答案：C 6.我国城市饮用水卫生标准规定 A、每1000ml水中大肠杆菌＜3个 B、每1000ml水中大肠杆菌＜30个 C、每100ml水中大肠杆菌＜3个 D、每100ml水中大肠杆菌＜30个 E、每500ml水中大肠杆菌＜3个 答案：A 7.霍乱弧菌经人工培养传代后，显徽镜下观察是 A、杆状 B、球形 C、椭圆形 D、弧形 E、纤丝状 答案：A 8.我国城市饮用水卫生标准规定 A、每ml水中细菌总数＜1000个 B、每ml水中细菌总数＜10个 C、每100ml水中细菌总数＜10个 D、每500ml水中细菌总数＜10个 E、每ml水中细菌总数＜100个 答案：E 9.紫外线的杀菌机理可能是 A、紫外线的穿透作用 B、紫外线的高热作用 C、紫外线的辐射作用 D、紫外线凝固细菌蛋白质 E、紫外线干扰细菌DNA复制与转录 答案：E 10.在固体培养基上生长出现卷发状菌的细菌是 A、炭疽芽胞杆菌医学. B、肉毒梭菌 C、脆弱杆菌 D、棒状杆菌 E、蜡样芽胞杆菌 答案：A 11.在菌落周围出现很窄的草绿色溶血环的细菌 很可能是 A、金黄色葡萄球菌 B、甲型链球菌 C、乙型链球菌 D、表皮葡萄球菌 E、腐生葡萄球菌 答案：B 12.CFT反应中补体一般稀释度是 A、1：5－10 B、1：2－4 C、1：11－14 D、1：15－20 E、1：21－25 答案：D 13.厌氧培养的厌氧状态所用的指示剂是 A、甲基红 B、酚红 C、美兰 D、酚酞 E、甲酚红 答案：C 14.必须在电子显微镜下才可见到的细菌的特殊 结构是 A、荚膜 B、鞭毛 C、芽胞 D、异染颗粒 E、菌毛 答案：E 15.显徽镜下观察抗酸染色的结核分枝杆菌的典 型形态是 A、紫色栅栏状排列的杆菌 B、红色略带弯曲的细长杆菌 C、红色粗大杆菌 D、红色竹节状排列的杆菌 E、紫色细长杆菌 答案：B 16.通常需要培养3－4周才能见到生长的细菌是 A、军团菌 B、结核分枝杆菌 C、炭疽杆菌 D、空肠弯曲菌 E、百日咳鲍特菌 答案：B 17.双糖铁培养基属于 A、基础培养基 B、鉴别培养基 C、营养培养基 D、选择培养基 E、厌氧培养基 答案：B 18.哪种创伤最适宜引起的破伤风梭菌感染 A、深度刺伤或战伤 B、膝肘部大面积擦伤 C、因搔痒挠破的伤痕 D、被猫抓破的伤口 E、被树枝刮破表皮 答案：A 19.初次分离脑膜炎奈瑟菌必须有 A、含5％新鲜红血球的培养基 B、5％－10%的CO2气体环境 C、含10％小牛血清的培养基 D、营养琼脂培养基 E、含万古霉毒和多粘菌毒的培养基 答案：B 20.从疑为淋病的女性患者以棉试子取样作细菌 培养，最佳的取样部位是 A、阴道口 B、肛门 C、尿道口 D、宫颈内 E、宫颈口 答案：D 21.消毒剂，是用于杀灭或清除物体上病原微生物的 化学药物，但对消毒剂的要求是 A、必须杀死含有芽胞的细菌 B、能够杀灭微生物繁殖体即可 C、使微生物毒力失活 D、使微生物酶系统失活 E、抑制微生物生长 答案：B 22.用物理或化学方法杀灭微生物称灭菌其中包括 A、细菌繁殖体、芽胞、真菌、病毒等 B、只包括病原微生物 C、只包括非病原微生物 D、只包括病原微生物繁殖体 E、只是灭活微生物体内某些活性物质 答案：A 23.革兰氏染色结果判定G＋应为 A、红色 B、紫色 C、兰色 D、黄色 E、白色 答案：B 24.革兰氏染色结果判定G－应为 A、红色 B、紫色 C、兰色 D、黄色 E、白色 答案：A 25.庆大霉素培养基，适用于培养何种细菌 A、鼠疫杆菌 B、布鲁氏菌 C、霍乱弧菌 D、白喉杆菌 E、奈瑟氏菌 答案：C 26.突然起病，畏冷发热，体温常在38℃ 以上，同时或一天以后出现腹痛、腹泻，每日大便十 余次。精神、食欲不振，恶心呕吐，其最可能为 A、急性菌痢普通型 B、慢性菌痢 C、慢性菌痢急性发作型 D、急性菌痢中毒型 E、慢性菌痢迁延型 答案：A 27.在进行免疫血清学方法诊断病人时，常用的Ag－ Ab反应影响因素有多种，温度是其中之一，当反应 温度适当增高时，Ag－Ab会出反应 A、增快 B、不变 C、停止
食品微生物检验的内容及检测技术
食品微生物检验的内容及检测技术 食品安全检验过程的主要内容 食品微生物的检验。食物在生产过程中以及放置过程中会受到环境中微生物的损坏或影响，在部分研究中，将食品中细菌数量对食品的损坏程度作为食品安全检测的首要内容。在食品微生物的检验过程中，我们主要对人体有害微生物进行检验，其中在食品安全检验过程中，因为食品中有多种微生物共存现象，所以在检验前，微生物检验员要把不同的菌体进行分离，这样才能更加清楚的了解各种微生物的数量及菌体的分布情况，包括生产型食品微生物，如醋酸杆菌，酵母菌等和使食物变质的微生物，如霉菌、细菌等和食源性病原微生物如溶血性大肠杆菌，肉毒杆菌等。对食品原辅料微生物的控制和产成品微生物的检验是保证食品安全的重 要途径。 针对食品致病菌的相关检验。不同的致病菌会对人们的身体健康有不同程度的危害，像我们在生活中经常吃到的大米，有些不法商家将发霉的大米加工后再次放入市场进行二次销售，虽然经加工后，在外表上和普通大米没啥两样，但这种大米中含有黄曲霉这一致病菌，据可靠信息表明，黄曲霉的危害性十分巨大，如果人们长时间吃这样的大米，出现
癌症的风险要比常人高出很多倍，由此可见，食品中致病菌的检验是保证我们能吃到放心食品十分关键的微生物检测技术，所以我们在致病菌的检验上对不同种类的致病菌进行定量严格检验。如乳制品和肉制品的致病菌主要是黄曲霉菌和大肠杆菌，而蛋制品中则容易出现染沙门菌、大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，罐头食品容易出现肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌。 食品微生物检验中的主要特点 对食品检测要求相对较高。在食品微生物的一系列检验中，由于食品中涉及的微生物种类较多，因此加大了食品微生物检验的难度。国家标准或行业标准对不同食品中微生物的含量特别是致病菌的含量有明确的要求。在食品的运输过程中，食品致病菌以及其他微生物对相应的食品有一定的污染，随着微生物种类的增多，检测人员需要对食品受致病菌影响的程度、食品保质期以及其他相关的标准进行测量，难度会随着微生物种类的增多而复杂。所以在微生物检验上我们对每一阶段的食品安全检测都要重视，在各个微生物的测量上，相关的检测技术要求就有所提高。 食品微生物检验效率。随着食品市场的商品流通提高，人们对食品需求不断增加，而食品安全问题却在日益严重，为了保障人们在能够及时满足食品种类和数量要求的同时，进一步促进食品安全的保障措施落实，必须加强食品安全的
食品微生物教学大纲与课程简介
课程简介 课程号：0432904 课程名称：食品微生物英文名称：Food Microbiology 周学时：5.0 学分：5.0 预修要求：无 内容简介：本书主要阐述了与食品有关的微生物的形态、培养及生理特征；微生物遗传变异与优良菌种的选育与保藏；微生物与食品的相互关系及其生态条件；与食品有关的微生物的活动规律；各种有益微生物为人类制造的不同种类的食品及其功能；食品中污染微生物的种类、给人类带来的危害；防止食品腐败变质的措施；微生物及其毒素污染食品引起的人和畜禽类食物中毒的种类及预防措施等。课程教学内容包括理论教学和实验教学二部分。 选用教材： 朱乐敏．食品微生物学．第二版．北京：化学工业出版社，2011 参考教材： 万萍．食品微生物基础与实验技术．第二版．北京：科学出版社，2010 董明盛，贾英民．食品微生物学．第一版．北京：中国轻工业出版社，2008 陈红霞，李翠华．食品微生物学及实验技术．第一版．北京：化学工业出版社，2008 吕嘉枥．食品微生物学．第一版．北京：化学工业出版社，2007 无锡轻工大学，天津轻工业学院．食品微生物学．第一版．北京：中国轻工业出版社，2006 张文治．新编食品微生物学．第一版．北京：中国轻工业出版社，2006 周德庆．微生物学教程．第二版．北京：高等教育出版社，2002 何国庆，贾英民．食品微生物学．第一版．北京：中国农业大学出版社，2002
《食品微生物》教学大纲 一、课程的教学目的和基本要求 教学目的：食品微生物是食品营养与检验专业的一门重要专业课。这是一门交叉性学科，它以微生物学、生物化学、食品营养学、无机化学、有机化学等学科的理论基础知识和技能作为基础，研究食品微生物检测的技术和方法。通过本课程的学习，使学生可胜任食品检验中的有关微生物的检测工作。 基本要求：通过对《食品微生物基础与实验技术》的学习，使学生掌握微生物及其生命活动规律和应用，能够检测微生物，结合微生物的营养组成和生长的理论，掌握微生物培养、接种等操作技能；学习微生物的遗传和变异知识，掌握菌种的保藏。通过微生物的基础理论知识的学习，明确其应用的广泛性，帮助学生深入自学食品卫生等质量控制，对今后从事食品卫生方面的检验工作起到重要作用。 二、相关教学环节安排 1．采用多媒体投影教学及演示教学。 2．实验课单列，每周4学时。 3．每周布置复习重点，主要针对基本概念、基本规律。 三、课程主要内容及学时分配 理论课每周3学时，共16周；实验课每周2学时，共16周。 理论课主要内容： 第一章绪论1 第一节微生物概念及其特性1 一、微生物的概念1 二、微生物与人类的关系1 三、微生物在生物学分类中的地位2 四、微生物的特点2 第二节微生物的发现与微生物学的发展4 一、微生物形成前的历史4 二、微生物学的形成4 第三节微生物与食品微生物5 一、微生物学的概念及研究对象5 二、微生物学的主要分支学科5 三、食品微生物学的概念及研究内容6 四、食品微生物学研究任务6 第四节微生物的应用与前景7 一、微生物资源的开发和利用7 二、微生物与环境7 三、微生物菌体食品（食用蕈菌）7 四、微生物风味物质8 五、微生物与食源性感染8 第二章微生物的主要类群9 第一节原核微生物9 一、细菌9 二、放线菌17 三、其他原核微生物19 第二节真核微生物22 一、酵母菌22 二、霉菌26 第三节非细胞型微生物30