血液显微镜复检规则建立与验证程序文件

场发射扫描电子显微镜S-4800操作规程

场发射扫描电子显微镜（S-4800）操作规程 开机 1. 检查真空、循环水状态。 2. 开启“Display”电源。 3. 根据提示输入用户名和密码，启动电镜程序。 样品放置、撤出、交换 1. 严格按照高度规定高样品台，制样，固定。 2. 按交换舱上“Air”键放气，蜂鸣器响后将样品台放入，旋转样品杆至“Lock”位，合上交换舱，按“Evac”键抽气，蜂鸣器响后按“Open”键打开样品舱门，推入样品台，旋转样品杆至“Unlock”位后抽出，按“Close”键。 观察与拍照 1. 根据样品特性与观察要求，在操作面板上选择合适的加速电压与束流，按“On”键加高压。 2. 用滚轮将样品台定位至观察点，拧Z轴旋钮（3轴马达台）。 3. 选择合适的放大倍数，点击“Align”键，调节旋钮盘，逐步调整电子束位置、物镜光阑对中、消像散基准。 4. 在“TV”或“Fast”扫描模式下定位观察区域，在“Red”扫描模式下聚焦、消像散，在“Slow”或“Cssc”扫描模式下拍照。 5. 选择合适的图像大小与拍摄方法，按“Capture”拍照。

6. 根据要求选择照片注释内容，保存照片。 关机 1. 将样品台高度调回80mm。 2. 按“Home”键使样品台回到初始状态。 3. “Home”指示灯停止闪烁后，撤出样品台，合上样品舱。 4. 退出程序，关闭“Display”电源。 注意 1. 每天第一次加高压后，进行灯丝Flashing去除污染。 2. 冷场发射电镜一般不断电，如遇特殊情况需要大关机时，依次关闭主机正面的“Stage”电源、“Evac”电源，半小时后关闭离子泵开关和显示单元背面的三个空气开关，关闭循环水。开机时顺序相反。 3. 每半个月旋开空压机底阀放水一次。 4. 待测样品需烘干处理，不能带有强磁性，不能采用铁磁性材料做衬底制样。 5．实验室温度限定在25±5℃，相对湿度小于70% 。 仪器维护 1. 每月进行电镜离子泵及灯丝镜筒烘烤。 2. 每半年进行一次机械泵油维护或更新。 3. 每年进行一次冷却水补充，平时每月检查一次水位。

血常规复检规则

血常规复检规则 一、背景 1、2005年国际血液学复审协作组提出了41条自动全血细胞计数及白细胞分类的复检规则。 2、2006年我国血液学复检专家小组对血细胞复检规则做了释义。 3、2008年我国血液学专家提出了常见血细胞分析仪的复检规则。 二、复检规则的内容 1、仪器无白细胞分类结果或分类结果不全。 2、白细胞数增加或减少。 3、出现某种白细胞比例明显增加或减少。 4、仪器出现报警信息。 5、出现散点图异常。 6、Hb、MCV、RDW等明显异常。 7、血小板数量异常。 8、同一患者连续两次血小板数或白细胞数相差较大。 9、医师申请、血液病复查、放化疗、孕妇、新生儿等特殊患者群体。

三、各种血细胞分析仪复检规则 ADVIA2120血细胞分析仪 编号参数复检条件复检要求 1 WBC首次结果<3.0×109/L或>28.0×109/L 涂片镜检 2 PLT首次结果<100×109/L或>1000×109/L 涂片镜检 3 Hb 首次结果<70g/L或>参考范围上限20g/L 确认标本是否符合要 求；重测标本；涂片镜 检 4 MCV 24h内标本首次结果<75fl或>105fl涂片镜检 5 MCHC 首次结果>380g/L 检查标本是否有脂血、 溶血、RBC聚集及球 形RBC 6 RDW-SV 首次结果>22%涂片镜检 7 Neut# 首次结果<1.0×109/L或>20.0×109/L 涂片镜检 8 Lym# 首次结果>5.0×109/L（成人）或>7.0×109/L 涂片镜检 （<12岁） 9 Mono# 首次结果>1.5×109/L（成人）或>3.0×109/L 涂片镜检 （<12岁） 10 Eos# 首次结果>2.0×109/L 涂片镜检 11 Baso# 首次结果>0.5×109/L 涂片镜检 12 Luc% >8% 涂片镜检 13 大红细胞首次结果出现++~+++报警涂片镜检 14 小红细胞首次结果出现++~+++报警涂片镜检 15 高色素性红细胞首次结果出现++~+++报警涂片镜检 16 低色素性红细胞首次结果出现++~+++报警涂片镜检 17 红细胞大小不等首次结果出现+++报警涂片镜检 18 大血小板首次结果出现++~+++报警涂片镜检 19 原幼细胞阳性报警涂片镜检 20 未成熟粒细胞阳性报警涂片镜检 21 变异淋巴细胞阳性报警涂片镜检 22 核左移++或+++ 涂片镜检 23 有核红细胞阳性报警涂片镜检 24 红细胞碎片阳性报警涂片镜检 25 血小板聚集阳性报警涂片镜检

HITACHI H-7650 透射电镜操作规程

HITACHI H-7650 透射电镜操作规程编号: QW148 样品准备及要求: 1.般生物样品在观察前须制成超薄切片，并且要充分晚干，切片后室温放置1天左右 2.严禁观察磁性样品。， 操作步骤: 一、开机顺序 1.开墙上主机电源电源的开关，开启冷却循环水: 2.开启主机钥匙从OFF到EVC;等1分钟或30分钟后再将钥匙转到Column; 3.仪器自动进入操作软件。 二、样品安装 A: 取样品步骤: 1.关掉灯丝电压; 2.将样品杆拔出一小段距离; 3.顺时针旋转样品杆15度; 4.将样品杆拔出一大段距离; 5.逆时针旋转45度: 6.将真空开关从EVAC拨到AIR; 7.AIR红灯从亮到灭后水平取出样品杆。 B:装样品步骤: 1.在样品杆架上安装好样品于样品杆上; 2.平行将样品杆装入镜筒到AIR灯亮起; 3.将真空开关从AIR拨到EVAC; 4等到EVAC绿灯亮起; 5在EVAC绿灯亮起的30秒内(若超过30秒绿灯会自动熄灭，此时应再次将EVAC 拨到AIR再拨到EVAC,这时EVAC绿灯会再次亮起); 6.将样品杆顺时针转动45度: 7.将样品杆“送进”一大段距离; 8.逆时针旋转样品杆15度; 9.慢慢送入整个样品杆; 三、图像观察 1.通过Stage X、γ旋钮选择想要观察的区域; 2.通过Mag旋钮进一步增大放大倍数;同时需要通过Brightness调整光斑亮度; 3.若光斑不再中心需通过BH旋钮随时将光斑拉致荧光屏中心; 4.使用Focus旋钮将图像调整清晰;用CCD进行拍照存储图像或者通过底片存储图像。 四、数据的存储刻录 1.数据只能用新光盘(非可擦写光盘)刻录，刻录数据应由仪器管理人员操作，严禁用移动硬盘、u盘等从电脑上拷贝数据(出于系统安全考虑); 2.电脑上的数据会定期清理(一般一个月)，请及时拷贝备份。

血液分析仪检测结果显微镜涂片41条复检规则

血液分析仪检测结果显微镜涂片复检规则 2002年，国际著名血液检验专家Berend Houwen发起研究关于血液分析仪全血细胞计数和白细胞分类的显微镜复检规则。2005年，国际血液学组织提出了显微镜复检的41条建议性标准，得到中国血液检验学界的密切关注。表3-7、表 3-8、表3-9、表3-10是复检规则的细节。 表3-7 国际血液分析仪检测结果以手工涂片复查真阳性标准 表3-8 国际血液分析仪检测结果显微镜复检规则（全血细胞计数） 编 号 参数复检条件次序：①-②-③采取措施次序：①-②-③ 1 新生儿①首次标本①涂片复查 2 WBC、RBC、HGB、 PLT 、RET ①超出仪器线性围①稀释标本上机再测 3 WBC、PLT ①低于检验室确认的仪器线性围①按标准操作程序进行复核 4 WBC、RBC、HGB、 PLT ①仪器无检测结果①检查标本有无凝块。②再上机 检测。③仍异常，换用替代计数 方法 5 WBC（×109/L）①＜4.0或＞30.0-和-②首次检 测 ①涂片复查 6 WBC（×109/L）①＜4.0或＞30.0-和-②测定差 值超出预设值-和-③3d ①涂片复查 7 PLT（×109/L）①＜100或＞1000-和-②首次检 测 ①涂片复查 8 PLT（×109/L）①任何测定值-和-②与前次比，①涂片复查

PLT数差值超出限值 9 HGB（g/L）①＜70或＞超过年龄性别参考值 上限20-和-②首次检测①涂片复查。②如有提示，确认标本完整性 10 MCV（fl）①（成人）＜75或＞105-和-②首 次检测-和-③＜24h标本 ①涂片复查 11 MCV（fl）①＞105-和-②成人-和-③＞24h 标本①涂片复查大红细胞相关变化。 ②如未见大红细胞相关变化，取新鲜血再检查。③如无新鲜标本，则在报告中注明 12 MCV（fl）①任何测值-和-②与前次比，差 值超出限值-和-③＜24h 标本①验证标本的完整性/标本的身份 13 MCHC（g/L）①≥参考值上限20①检查有无脂血、溶血、红细胞 凝集、球形红细胞 14 MCHC（g/L）①＜300-和-②MCV正常或增高①检查可能静脉输液污染或其他 特殊原因 15 RDW-CV（%）①＞22-和-②首次检测①涂片复查

血常规复检规则及解释

血常规复检规则 一、国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则： 1.新生儿： （1）复检条件：首次检测标本； （2）复检要求：涂片镜检。 2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞（Ret）： （1）复检条件：超出线性范围； （2）复检要求：稀释标本后重新测定。 3.WBC、PLT： （1）复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围； （2）复检要求：按实验室标准操作规程（SOP）进行。 4.WBC、RBC、Hb、PLT： （1）复检条件：无结果； （2）复检要求：重新检测 ①检查标本是否有凝块， ②重测标本， ③如果维持不变，用替代方法计数。 5.WBC： （1）复检条件：首次结果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L； （2）复检要求：涂片镜检。 6.RBC：

（1）复检条件：3天内Delta值超限，并<200x10e12/L 或>550x10e12/L； （2）复检要求：涂片镜检。 7.PLT：（1）复检条件：首次结果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）Delta值超限的任何结果(3) 复检要求：涂片镜检。 8.Hb：（1）复检条件：首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L；（2）复检要求：①涂片镜检，②确认标本是否符合要求。 9.平均红细胞体积（MCV）：（1）复检条件：24h内标本的首次结果<75fl或>105fl（成人）；（2）复检要求：涂片镜检。 10.MCV：（1）复检条件：24小时以上的成人标本>105fl；（2）复检要求：①涂片镜检观察大红细胞相关变化，②如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，③如无新鲜血标本，报告中注明。 11.MCV： （1）复检条件：24h内标本的Delta值超限的任何结果； （2）复检要求：确认标本是否符合要求。 12.平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）： （1）复检条件：≥参考范围上限20g/L； （2）复检要求：检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。| 13.MCHC： （1）复检条件：<300g/L，同时，MCV正常或增高；

Tescan 扫描电镜操作规程

Tescan 钨灯丝扫描电镜操作规程 1.点击Vent （操作界面右下方）按钮，放气。等待右下方显示Venting Finish,即可进行下一步操作。 2.装载试样。需将试样用导电胶粘紧。（放样时注意操作界面Z轴距离，钨灯丝100以上。）检查每一个螺丝是否拧紧。不应有露在外的螺丝头。 3.小心关上仓门，点击Pump（位于Vent旁边）。抽真空。等待Chamber 真空度钨灯丝到达5*10-2以上即可进行下一步。 4. 操作前参数检查： A，首先检查高压（HV）是否为所需值，若不是可先点击右边信息盘的HV 再在右上边输入所要求值。 B，其次检查Beam intensity值，正常扫描时为10，打能谱时调节为12。 C，点样品操作盘，想要做的第一个样品所在位置（1-7标号）。样品台会移动到视野内。 5.调节Z轴逐次减小，使样品接近镜筒。（这个值为样品台到镜筒的距离。所以合适的值既是自己样品中最高的样的高度加10的余量）比如：自己样品中最高的为10，则最终可以调节z 轴至20。 6. 找好试样位置（点击鼠标的滚珠可以调节位置），开始先点击Mag（视野右手边一竖行快捷键中），再在右上边输入放大倍数（刚开始可先输入100倍），逐级放大。当视野中图像模糊，

但有图像时，点击WD(视野右手边一竖行快捷键中)，在再视野中双击左键可以出现一个小方框（右键调节方框大小），再左右滚动左手边放置的轨迹球聚焦至图像清楚。再放大，再聚焦，直至达到需求即可。 如果图像无法调清楚则观察是否为以下两种情况： 1）调节WD时图像有移动，选择右下方HV附近Adjustment 中第三项弹出一个对话框点Next 视野中会弹出一个闪动图像，然后调节轨迹球（按住F11调节上下方向，F12调节左右方向）直至图像在中心跳动（而不是左右或上下移动）再聚焦。 2）图像有单一方向的拉长，则判断为有相散，点击Stg右手边一竖行快捷键中。然后调节轨迹球。（按住F11调节上下方向，F12调节左右方向）直至图像不在变形，再聚焦。 （一般要求调节清楚地放大倍数大于需要拍照倍数。例如：需要1000倍，则应将2000倍调节清楚。） 7.拍照之前应检查亮度对比度是否合适，视野右手边一竖行快捷键中选择选项，然后轨迹球上下调节对比度，左右调节亮度。 8.右手边一竖行快捷键中选择Speed选项选择扫描速度6 或7，（调节时Speed选择4以下）。然后点击右手边一竖行快捷键中最后一项保存照片。 9.重复6-8完成拍照。 10.实验完成后归位操作： A. 将Z轴输入钨灯丝100，使样品台降回原位。

血常规复检规则及解释之令狐文艳创作

血常规复检规则 令狐文艳 一、国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则： 1.新生儿： （1）复检条件：首次检测标本； （2）复检要求：涂片镜检。 2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞（Ret）： （1）复检条件：超出线性范围； （2）复检要求：稀释标本后重新测定。 3.WBC、PLT： （1）复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围； （2）复检要求：按实验室标准操作规程（SOP）进行。 4.WBC、RBC、Hb、PLT： （1）复检条件：无结果； （2）复检要求：重新检测①检查标本是否有凝块， ②重测标本， ③如果维持不变，用替代方法计数。 5.WBC： （1）复检条件：首次结果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；

（2）复检要求：涂片镜检。 6.RBC： （1）复检条件：3天内Delta值超限，并<200x10e12/L 或>550x10e12/L； （2）复检要求：涂片镜检。 7.PLT：（1）复检条件：首次结果<100x10e9/L 或>1000.0x10e9/L；（2）Delta值超限的任何结果(3) 复检要求：涂片镜检。 8.Hb：（1）复检条件：首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L；（2）复检要求：①涂片镜检，②确认标本是否符合要求。 9.平均红细胞体积（MCV）：（1）复检条件：24h内标本的首次结果<75fl或>105fl（成人）；（2）复检要求：涂片镜检。 10.MCV：（1）复检条件：24小时以上的成人标本>105fl；（2）复检要求：①涂片镜检观察大红细胞相关变化，②如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，③如无新鲜血标本，报告中注明。 11.MCV： （1）复检条件：24h内标本的Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：确认标本是否符合要求。 12.平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）： （1）复检条件：≥参考范围上限20g/L；

血常规复检规则

国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则： 1 .新生儿：( 1)复检条件：首次检测标本； (2)复检要求：涂片镜检。 2. WBC、RBG Hb、PLT网织红细胞(Ret): (1)复检条件：超出线性范围；(2)复检要求：稀释标本后重新测定。 3. WBC、PLT:( 1)复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围；(2)复检要求：按实验室 标准操作规程(SOP进行。 4. WBG RBG Hb、PLT( 1)复检条件：无结果；(2)复检要求：①检查标本是否有凝块， ② 重测标本，③ 如果维持不变，用替代方法计数。 5. WBC: ( 1)复检条件：首次结果＜4.0X109/L或＞30.0x10% ； ( 2)复检要求：涂片镜检。 99 6. WBC: ( 1)复检条件：3 天内Delta 值超限，并＜4.0x10/L 或＞30.0X10 /L ；( 2)复检要求：涂片镜检。 99 7. PLT:( 1 )复检条件：首次结果＜100x10 /L或＞1000.0X10 /L ；(2)复检要求：涂片镜检。 8. PLT：(1 )复检条件：Delta 值超限的任何结果；(2)复检要求：涂片镜检。 9. Hb :( 1)复检条件：首次结果＜70g/L或〉其年龄和性别参考范围上限20g/L ；( 2)复检要求：① 涂片镜检，② 确认标本是否符合要求。 10. 平均红细胞体积(MCV):( 1)复检条件：24h内标本的首次结果＜75fl或＞105fl (成人)；( 2)复检要求：涂片镜检。 11. MCV:( 1)复检条件：24小时以上的成人标本＞105fl ；( 2)复检要求：①涂片镜检观察 大红细胞相关变化，② 如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，③ 如无新鲜血标本，报告中注明。 12. MCV：(1)复检条件：24h 内标本的Delta 值超限的任何结果；(2)复检要求：确认 标本是否符合要求。 13. 平均红细胞血红蛋白浓度( MCHC): (1)复检条件：二参考范围上限20g/L ；(2)复检要求：检查标本是否有脂血、溶血、RBC 凝集及球形红细胞。 14. MCHC: ( 1)复检条件：＜300g/L，同时，MCV正常或增高；(2)复检要求：寻找可 能因静脉输液污染或其他标本原因。 15. RDW： (1)复检条件：首次结果＞22%；(2)复检要求：涂片镜检。 16?22条为白细胞分类的复检规则： 16. 无白细胞分类计数(DC)结果或DC结果不全：(1)复检条件：无条件复检；(2) 复检要求：人工分类和涂片镜检。 17?中性粒细胞绝对计数(Neut #) : (1)复检条件：首次结果＜1.0X109/L或＞20.0X109/L； (2) 复检要求：涂片镜检。 99 18. 淋巴细胞绝对计数(Lym#) : ( 1)复检条件：首次结果＞5.0X10 /L (成人)或＞7.0x10/L (＜12 岁)；(2)复检要求：涂片镜检。 19. 单核细胞绝对计数(Mo no #) : (1)复检条件：首次结果＞1.5X109/L (成人)或＞3.0X109/L (＜12 岁)；(2)复检要求：涂片镜检。 9 20. 嗜酸粒细胞绝对计数 (Eos#)： (1)复检条件：首次结果＞2.0x109/L； (2)复检要求：涂片镜检。 9 21. 嗜碱粒细胞绝对计数( Baso#)：(1)复检条件：首次结果＞0.5x109/L；(2)复检要求：涂片镜检。 22. 有核红细胞绝对计数 (NRBC#)： (1)复检条件：首次出现任何结果； (2)复检要求：涂片镜检。

扫描电子显微镜操作规程

扫描电子显微镜操作规程 1. 打开墙上配电箱里的空气开关（见标签上开下关） 2. 打开变压器电源（正常电压应为100v） 3. 打开主机电源：钥匙拧到START位置，停两秒松手，钥匙回到I位置。 4. 打开电脑电源 5. 点击桌面图标，等待 6. 当HT图标显示蓝色后，点VENT排气（排气时vent闪，排完气vent不闪），排完气方可打开样品室 7. 正确选择Z轴高度（需要估计样品高度，Z轴大于样品高度 放入样品，关闭样品台，点击EV AC抽气，抽气时推着样品室门，听到机械泵响声后松手 8. 打开HT图标（此图标在非真空下是灰色，真空位蓝色，打开灯丝拍照为绿色） 9. 选择扫描模式、加速电压（0.5-30KV之间选择，一般微生物类样品选10左右）、WD工作距离（10-15之间选择）、SS电子束斑（一般选30-40） 10. 在SCAN2下调焦、调整对比度及亮度、调消象散（放大时照片晃动、或者样品变形、或者整体移动可点WOBBLE（一般10000倍左右调节有效果）调节光缆使照片不晃动） 11. 高倍下调清晰度，低倍下拍照，拍照选择photo(曝光40秒)或者SCAN4（曝光80秒），拍完选择FREEZE并保存照片 12. 拍完照后关闭灯丝，点VENT排气（排气时vent闪，排完气vent不闪），排完气方可打开样品室，取出样品台；关闭样品台，点击EV AC抽气，抽气时推着样品室门，听到机械泵响声后松手 13. 依次关闭软件、电脑、主机电源、变压器、空开 注意事项 1.注意Z轴的距离要足够高不要让样品碰到探头 2.慢慢调节光缆，防止调节过快看不到被观察物 3.取、放前一定要卸真空，再抽真空 4.关机的时候，要在真空状态下关机

扫描电镜操作流程

SIRION场发射扫描电镜操作规程 一.开机 1.首先检查循环水系统,压力显示约4.5，温度显示约11-18度,为正常范围。 2.检查不间断电源的”LINE”，”INV.”指示灯亮，上部6只灯仅一只亮是为正常。 3.开电镜电脑(白色机箱)的电源，通过密码进入WINDOWS后，先启动”SCS”，然后启 动”Microscope Control”。 二.操作过程 1.有关样品的要求： 需用电镜观测的样品，必须干燥，无挥发性，有导电性，能与样品台牢固粘结（块状试样的下底部需平整，利于粘结）。粉末样品用导电胶带粘结后，需敲击检查，或用吹风机吹去粘结不牢固的粉末。含有机成份的样品（包括聚合物等），需经过干燥处理。 2.交换样品特别注意点： 该电镜的样品台是4轴马达驱动的精密机械，定位精度1微米，同时也可以手动旋钮驱动。样品室中暴露着镜头极靴，二次电子探头，低压背散射电子探头，能谱探头，红外相机，涡轮分子泵等电镜的核心部件，样品台驱动过程中存在着碰撞的可能性，交换样品和驱动样品台时要特别小心。比如样品室门应轻拉轻推；样品要固定牢固，防止掉到镜筒里去；样品高度要合适，Z轴移动样品或手动倾斜样品前，用CCD图象检查样品位置等等。 3.换样品过程：换样品前必须先检查加速电压是否已经关闭，条件符合，可按放气键（“VENT”）。交换样品台操作必须戴干净手套。固定好样品台后（固紧内六角螺丝），必须用专用卡尺测量样品高度，不允许超过规定高度。推进样品室，左手按住样品室门上手柄，右手点击抽真空软件键”PUMP”。整个换样品过程中，不要手动调节样品台位置（倾动除外）。 4.关高压过程：按下软件键“xx kV”，稍等待，听到V6阀的动作声音后，键颜色由黄色变灰色,表示高压已正式关闭。 5.开高压过程：样品室抽真空到达5e -5 mBar以上，可以开高压，观察图象。开高压：检查“Detector”菜单项中的“SE”或“TLD”被选中，按“HT”键，数秒后按软键“xx kV”，应听到V6阀开启的声音，等待键颜色变黄色。图象出来后，同时会弹出一个窗口，提示首先必须聚焦图象，然后按“OK”，使电脑能测出实际的样品高度，次序不可颠倒。在数千倍聚焦完成后（In Focus），按“OK”。 6.聚焦图象：按住鼠标右键，左或右向移动鼠标来聚焦图象。 7.消像散：按住左Shift键，按住鼠标右键移动，消除像散。 8.拍照：按“F2”键，电镜开始单次扫描。扫描结束，过数秒，冻结键（雪花图形）自动激活（变黄色）。这时可用“InOut”菜单中的Image保存图象。 9.拷贝图象：须用新光盘或未开封的新软盘拷贝。 三.关机 1.先关高压，放气后，取出样品后，重抽真空，然后关“Microscope Control”，再关WINDOWS。 电镜的电脑是控制整台电镜的，电脑的CMOS管理，显示卡及驱动程序等与普通电脑不同，请不要当作普通电脑来使用。禁止修改电脑的任何设置，禁止安装任何软件。禁止使用USB

Quanta 200扫描电镜实验室安全操作规程

Quanta 200扫描电镜实验室安全操作规程 1．开机前的检查 1.1室温：18℃～25℃； 1.2湿度：<80％； 1.3Quanta 200 真空泵PVP1和PVP2的油面指示应在规定位置，油要干 净，无色透明，无污染，每月检查一次； 2．试样制备 2.1微细和超细粉体（粒度<10μm）样品，取少量样品直接放在烧杯中，用无水乙醇做溶剂，超声分散，用干净滴管吸取少量液滴置于铜托上，并用红外灯照射干燥； 2.2粗颗粒样品，取少量粘在铜托上的导电胶带上，用无毛纸轻压，使样品颗粒牢牢粘住，并清楚粘在铜托侧面上的粉样； 2.3块状样品，高度应在15mm以下，要用无水乙醇浸泡，清洗干净，放在超声波水槽中处理，以除去油脂、灰尘、赃物和水分； 2.4试样一定要无水、无油，观察前要用红外灯照射干燥。 3．开机 严格按开机顺序操作，开机抽真空5分钟内，系统真空应达到要求（<1.0?10-4Torr），如果系统真空不能达到要求，应检查样品室门是否关好、样品室密封圈垫圈及密封平面是否干净或其它连接处是否有漏气现象。如果不能解决应及时报告，并与厂商联系。 4．试样观察 4.1按仪器说明步骤操作，选择合适工作参数； 4.2注意样品高度，样品的高度要小于卡尺的长度，千万不要使样品观察面碰触物镜下方的背散射电子探测器； 4.3更换样品时，一定要先切断灯丝高压，待灯丝冷却5分钟以后再放气。开关样品室门，手扶住门下侧的拉杆，轻轻地向外或向里推。勿抓X、Y、Z、R调节杆来开关门，门要拉到合适的位置，才能更换试样。要带手套取放样品架，手千万不要伸到样品室内，以防止碰伤各种探测器；

4.4更换样品时，开关门动作要轻，不使镜筒产生过大振动。更换样品后要及时关门，样品室放大气的时间不宜过长，一般不得超过20分钟； 4.5样品室内如果脏了，用无尘纸（布）擦拭，注意不要碰触探测器； 4.6仪器观察过程中，若暂时停止观察，应立即切断灯丝高压； 4.7仪器观察过程中，若突然发生断电事故，应立即切断计算机电源开关再切断服务器电源开关，最后切断总电源开关。 5．关机 关机顺序： 1)切断灯丝高压； 2)将SEM放大倍数调至最小 3)等待灯丝冷却5分钟后，放大气； 4)关SEM程序，退出XT server； 5)关闭计算机； 6)关闭服务器电源； 7)关闭房间内总电源。 6．维护 6.1粉体样品易污染样品室和镜筒，制样时使用量尽量少，样品托上样 品层厚度要非常薄，不要“起皮”； 6.2更换试样时，开关门动作要轻，防止造成粉末样的飞溅，污染样品 室； 6.3SEM系统从安装起就应一直保持真空，所以在长期不用或放假时， 要求每隔五天抽真空一次； 6.4更换样品过程中，要等软件控制面板上的VENT键变成黑色后才可 以打开样品室的门，SEM样品室通大气的时间不宜过长，一般不超过20分钟； 6.5样品室内的探头，千万不要用气球吹，尤其是二次电子的闪烁体； 6.6每季度检查一次涡轮分子泵油的颜色和液位，及时更换或补充专用 真空油； 6.7保持实验室的清洁，擦拭仪器时，要切断整个仪器的电源，用柔软

迈瑞BC-6800血细胞分析仪复检规则的建立与评价

迈瑞BC-6800血细胞分析仪复检规则的建立与评价 发表时间：2018-05-07T15:13:00.203Z 来源：《医师在线》2018年2月上第3期作者：蒲雯陈卫袁露张栩晟 [导读] 在复检规则建立后，应严格执行，并做好相应的记录，以便今后的统计分析以及对复检规则的进一步完善。成都市第四人民医院检验科，四川成都 610083 [摘要] 目的：建立适合本实验BC-6800血细胞分析仪的复检规则并对其进行应用评价，以保证血细胞分析结果的准确性，有利于临床的诊断和治疗。方法：根据国际血液学委员会（ICSH）专家组推荐的国际41条复检规则和迈瑞BC-6800性能特点，结合本院的具体情况制定出25条复检规则。通过对1050份标本进行血细胞分析仪检测，同时对违反复检规则的标本进行对应的复检，并对所有标本制作血涂片，由长期从事临检工作的主管检验师进行显微镜镜检。最后对所有结果数据进行统计分析，对复检规则进行评价及验证。结果：人工镜检结果与仪器检测数据相比较，复检率为17.62%，真阳性率为11.62%，假阳性率为6.00%，真阴性率为79.24%，假阴性率为3.14%，符合国际血液学复审协作组关于假阴性率小于5%的规定，在随后的验证实验中也得到证实。结论：建立适合本实验的复检规则至关重要，本室制定的复检规则既保证了检测结果的准确性，又提高了检验人员的工作效率，能更有效地为临床提供可靠的检验报告。[关键词] 迈瑞BC-6800；复检规则；显微镜检查 随着现代检验医学的不断发展，血细胞分析技术日益革新，各类全自动血细胞分析仪已成为一种应用广泛的检测工具，不但提高了工作效率和准确度，同时也为临床提供了更多的分析参数。仪器分析性能不断提高而检验人员缺乏对其全面的了解、日益增长的标本量、人员的配置相对不足等多方面原因，导致显微镜检查逐渐被忽视。由于血细胞形态的多样性和复杂性，血细胞分析仪尚不具备识别血细胞形态的能力，因此对可疑标本进行显微镜复检十分重要[1]。由于实验室人员少、工作量大，每天有数十数百甚至数千份检验报告需要按时发出，要使用规范的镜检及时发出报告难度很大，因此必须寻找一个简单、快捷的方法筛选出可疑样本，而正确的“筛选标准”是有效筛选的前提。2005年，国际血液学复核协作组发表了“国际血液学复核共识性协作组：自动全血细胞计数和白细胞分类分析后进行复核的建议准则”，简称“血涂片复核41条国际准则”[2]。由于血液分析仪的型号众多，其对细胞识别的能力均有差异，各个实验室的要求也不尽相同，故复检标准也应不同。依照国际41条标准及BC-6800的性能特点，并借鉴其他实验室的经验，结合本实验室的具体情况，制定出25条复检规则并进行评估。 1 材料与方法 1.1 标本来源：自2017年5月8日起，连续10天的1050份门诊和住院患者静脉血（EDTA-K2抗凝）标本共1050份，其中初检标本838例，复检标本212例。 1.2 仪器与试剂 1.2.1 迈瑞BC-6800血细胞分析仪，原装配套试剂、校准品，昆涞公司生产的2个水平血细胞分析非定值质控品进行室内质控。 1.2.2 Olympus CX-31光学显微镜。 1.2.3 瑞氏-吉姆萨染液，由珠海贝索生物技术有限公司生产。 1.3 方法 1.3.1 人员配置：仪器操作、涂片镜检均由经验丰富的主管检验师完成。 1.3.2 仪器准备：确保仪器定期完成校准，通过卫生部及四川省的室间质评，并按要求执行日常保养，每日室内质控情况良好，保证仪器良好的检验状态和试剂稳定。 1.3.3 样本检测：每份静脉血标本采用EDTA-K2抗凝的真空采血管采集，并在2小时内应用BC-6800血细胞分析仪通过CDC模式进行检测。分析数据由BC-6800全自动血细胞分析软件和瑞美检验网络系统处理和保存。 1.3.4 血涂片显微镜镜检：所有样本经仪器检测后立即推片染色，每份标本制备1张血涂片，经瑞氏染色后进行血细胞形态学镜检，参照《全国临床检验操作规程》[3]。镜检内容包括：（1）白细胞、血小板的数量评估；（2）红细胞、血小板的形态评估；（3）100个白细胞分类计数；（4）其他异常：如血液寄生虫等。 1.3.5 涂片镜检阳性判断标准：依据我国血细胞分析复核协作组关于血涂片阳性的评定标准[4]:（1）红细胞明显大小不等，染色异常红细胞>30%。（2）巨大血小板>15%。（3）见到血小板聚集。（4）存在Dohle小体的细胞>10%。（5）中毒颗粒中性粒细胞>10%。（6）空泡变性粒细胞>10%。（7）原始细胞≥1%。（8）早幼/中幼粒细胞≥1%。（9）晚幼粒细胞>2%。（10）杆状核粒细胞>5%。（11）异常淋巴细胞>5%。（12）嗜酸性粒细胞>5%。（13）嗜碱性粒细胞>1%。（14）有核红细胞>1%。（15）浆细胞>1%。 1.3.6 BC-6800复检规则制定:依照国际41条标准及BC-6800的性能特点，并借鉴其他实验室的经验，结合本实验室的具体情况，制定出25条复检规则,见表1。因我室未开展网织红细胞和有核红细胞检测，故规则中未列出相关内容。 1.3.7 复检规则的评估：对每份标本的仪器检测结果和显微镜镜检结果进行统计分析，判断所制定复检规则的合理性、有效性。以显微镜镜检结果为金标准，以本实验室25条复检规则和国际41条复检规则分别对标本结果进行判断。符合复检规则且涂片镜检结果为阳性者为真阳性；不符合复检规则且涂片镜检结果为阴性者为真阴性；符合复检规则，但涂片镜检结果为阴性者为假阳性；不符合复检规则，但涂片镜检结果为阳性者为假阴性。另外，符合计数类的复检规则，依据《全国临床检验操作规程》推荐的方法进行手工复查，偏差在允许范围内为阳性，超出允许范围为阴性。评估结果以复检率、真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率来表示。所有数据用Microsoft Excel 2007进行统计分析。 1.3.8 复检规则建立后，用200份新标本对复检规则进行验证，计算真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率。表1 我院迈瑞BC-6800血细胞分析仪25条复检规则

EVO-18 扫描电镜操作规程

ZEISS EVO-18 扫描电镜操作规程 1、将控制面板灯从红色的“OFF”依次按到—黄色的“STANDBY”— 绿色的“ON”按钮。 2、打开计算机，进入“”“SmartSEM User Interface”操作系统，屏幕上会 出现一个“EM Server”状态栏，不用动等他自动运行。然后会出现一个“用户名和密码”，选择填写用户名为“system”即可，密码没有。这样就进入了操作软件，点击屏幕上方的“TV”模式，可以看到样品室的状态。 3、然后进行样品制备，将样品通过导电胶粘到设备标准样品台上粘牢。样品高 度严格要求在20mm以内，同一批样品高度尽量统一，最大高度差不能超过5mm。样品最大长度和宽度不能超过样品台直径20mm。 4、首先将氮气瓶的总阀门逆时针打开，减压阀不动，在操作软件右侧 “SEM control”界面，点击“Vaccum”按钮，再点击“Vent”进行放气，等样品室门有明显缝隙能够打开的时候，将氮气瓶总阀门顺时针关上，将样品台背面的卡槽和样品室内的卡槽对应上，装上样品台。将样品室门关紧用手按住，同时点击“Vaccum”按钮中的“Pump”进行抽真空。等待真空值达到“System Vaccum=3.00e-005mbar”以上。 5、然后点击“SEM control”界面内点击“Gun”按钮，选择“Beam State”下拉 框为“Beam On”将灯丝电压和电流自动升到固定值。升好后，在“TV”模式下，将样品调到适当高度，点击“Stage Navigation”根据样品地图点击相应位置，找到想要看的样品位于中心位置。然后再点击“TV”将切换到“SEM” 扫描模式，在“SEM control”界面内点击“Scanning”按钮，将“Noise Reducion” 下面的两个下拉框，分别选择为“End Frame”和“Line Avg”。一般N=20，进行样品观察。这时再看屏幕右下角的“WD”值，“WD=8.5~12mm”为最佳，如果不在这个范围，通过“TV”模式再进行调节。 6、样品观察时，有几个键务必记住，界面全屏切换“Shift+F3”；观察区域移动 至中心位置“Ctrl+Tab”；小区域聚焦框健“Reduced”；粗细调焦转换健“Tab”。 操作面板上有“放大按钮”和“调焦距”按钮需要熟练操作。

全自动血细胞分析血涂片复检规则应用分析

全自动血细胞分析血涂片复检规则应用分析 目的：分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用。方法：采取2012年10月-2013年10月本院收集的680份血标本，采取自动血细胞进行分析，同时进行显微镜检查，观察细胞形态、人工白细胞分类等，遵循国际血细胞复检规则进行评估。结果：采取仪器检测和血涂片镜检680份血标本，指标结果显示，其中真阳性率为15.00%、假阳性率为7.35%、真阴性率为76.92%、假阴性率为0.73%，病情诊断意义的重要参数无假阴性，涂片复检率为22.35%，血液病细胞准确率为100%，无漏检现象。结论：采取合理的血细胞计数、白细胞分类的血涂片复检规则具有重要的意义，可确保检测报告的准确性，提高科室工作效率。 标签：自动血细胞分析；血涂片；复检规则 随着电子技术在血细胞分析仪中的广泛应用，血细胞分析仪的检测水平不断提高。采取自动血细胞分析仪可进行高效的标本细胞计数和分类，增强报警提示功能，减少工作人员的任务量，促进检测水平[1]。目前，血细胞分析仪作为一种过筛形态学检查的手段，通过检测系统时所产生的光电信号，进行判断细胞种类，分类正常的形态细胞，特别是在病理条件下的细胞，需要进行人工显微镜复检。为了分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用，在2012年10月-2013年10月期间，本院对收集的血标本，进行分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料采取2012年10月-2013年10月本院收集的680份血标本，其中初诊标本458份，复诊标本222份。所有血标本在采血后的0.6～4 h期间采取XE-2100自动进样模式进行检测，检查项目包括：全血细胞计数（CBC）、白细胞分类（DC）、有核红细胞（NRBc）、网织红细胞（RET），最后记录保存检测报告。 1.2 仪器及试剂仪器采取XE-2100全自动血细胞分析仪，试剂为原装配套试剂，同时准备好校准品和质控品，在血涂片显微镜检查中应用Olympus双目显微镜。 1.3 方法 1.3.1 定期培训科室人员为了更加了解全国临床检验操作规程，掌握各种白细胞分类计数参考方法，制定相关的血涂片检测操作程序，定期组织科室工作人员进行专业的培训，开展本实验的培训，综合分析检测中出现的各种问题，从而采取高效的解决方案。 1.3.2 本科室的复检标准本科室的复检标准，主要体现如下：WBC计数第一次高于20.00×109/L；PLT计数第一次低于100×109/L；Hb第一次低于70 g/L；

血细胞分析复检规则的初步探讨

血细胞分析复检规则的初步探讨 【摘要】目的探讨血细胞分析复检规则。方法本院2011年1月至6月门诊和住院患者乙二胺四乙酸二钾抗凝全血标本8820份，进行全血细胞分析检测，根据本院情况制定的复检标准进行复检。结果真阳性率13.0%，假阳性率27.2%，真阴性率55.3%，假阴性4.5%。结论血细胞分析复检规则制定时应注意，患者的来源、仪器型号、报警信息指标对规则进行制定，以满足临床需要。 【关键词】血细胞分析;复检规则;探讨 近年来，随着血细胞分析技术的完善和设备的更新，全血细胞计数(CBC)和白细胞分类计数(DC)检测结果的精密度和准确度明显提高,各级医院血细胞分析仪已基本普及。然而,血细胞自动分析领域存在诸多问题，如果实验室只根据血细胞分析仪的分类结果，而不作涂片分类直接发报告，则易造成漏诊和误诊，全血细胞计数和白细胞分类计数的复检(review)问题近年来已受到相关学术团体与专家的高度重视与关注1］。就我院制定的血细胞分析复检规则进行汇报如下： 1 材料与方法 1.1 标本选取本院2011年1~6月门诊和住院患者乙二胺四乙酸二钾抗凝全血标本8820份，按临床标本的检测流程和方法在采血后4 h内进行全血细胞分析检测。 1.2 仪器与试剂日本sysmex公司生产的XE2100全自动血细胞分析仪及原装配套试剂、校准物及质控物。Olympus显微镜购自日本奥林巴斯光学工业株式会社。仪器的校准：sysmex公司工程师利用SCS1000全血校准物对sysmex XE2100全血细胞分析仪进行校准。采用配套的两水平e check全血质控物进行室内质量控制，保证结果的精密度和准确性。 1.3 根据本院情况制定的复检标准①无白细胞自动分类结果。②白细胞总数低于 2.5×109/L、高于25×109/L。③白细胞自动分类结果某种细胞百分比结果严重异常：中性分叶粒细胞大于或等于0.85、淋巴细胞≥0.60、单核细胞≥0.15、嗜酸性粒细胞≥0.10、嗜碱性粒细胞≥0.03。④仪器的其他提示；E：血红蛋白＜70 g/L，≥180 g/L；F：血小板＜80×109/L，或≥500×109/L。⑤仪器出现可疑提示。 1.4 检测方法所有标本按临床标本的检测流程和方法进行全血细胞分析检测)，并全部推片染色，由本室工作经验超过10年并有中级以上技术职称的技术人员按操作。血细胞显微镜检查异常判断标准:①细胞：形态异常(分叶过多、中毒颗粒、空泡变性等异常结构、异型淋巴细胞＞2％、杆状粒细胞＞5％、存在不成熟幼稚细胞。②红细胞：存在有核红细胞、大小不一、染色形态异常等。③血小板：血小板凝聚、严重体积异常等。 1.5 评估指标2］包括真假阳性率、真假阴性率、灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、总有效率、检验效能和复检率。灵敏性(％)=真阳性数/(真阳性数+假阴性数)×100％；特异性(％)=真阴性数/(真阳性数+假阴性数)×100％；阳性预测值(％)=真阳性数/(真阳性数+假阳性数)×100％；阴性预测值(％)=真阴性数

8.KYKY-EM3200型扫描电子显微镜操作规程

1 目的 为了正确指导KYKY-EM3200型扫描电子显微镜的操作及注意事项。 2 范围 本规程规定了KYKY-EM3200型扫描电子显微镜的操作步骤、常见故障及处理方法、注意事项、保养规定及其他说明。 3 操作步骤 3.1操作前检查 3.1.1仪器接电正常。 3.1.2废气排放管路畅通。 3.2操作步骤 3.2.1真空系统自动操作 3.2.1.1 真空系统自动开机 3.2.1.1.1 开电源（机械泵、压缩机、变压器及仪器总电源）；开循环水。 3.2.1.1.2 开真空电源，并按一下“STAND BY”准备开关，此时红灯亮。 3.2.1.1.3 将主机背后真空控制板上的自动/手动（AUTO/MAN）开关置于自动（AUTO）状态，此时V2和D.P（扩散泵电炉加热）开始工作（灯亮）。 3.2.1.1.4预热30min以后，再按一下“STAND BY”（灯灭），这时V2、D.P、V5、V4全部打开，系统自动进入高真空状态。 3.2.1.1.5 在系统进入抽高真空以后，真空表头开关指在“MANIFOID”挡，或是“FORELINE”挡，指针都指示在“LO V AC”区，接近到1μ（到头）。如果真空表头置“HI V AC”档，指针指示到“HI V AC”区，指示高真空度。一般指针指示到“LO V AC”区1μ左右，即可开始工作。 3.2.1.2 真空系统自动关机 3.2.1.2.1 关V1，按一下“STAND BY”开关（灯亮），此时V5、V4关闭（只有V2和D.P开着）。 3.2.1.2.2 将主机背后真空控制板上的自动/手动（AUTO/MAN）开关置于手动（MAN），打开V2（ON），其余开关都是关（OFF），这时 D.P（扩散泵电炉）关，只有V2开着继续抽扩散泵前级的低真空。 3.2.1.2.3 30min后，关闭电源、关闭机械泵、循环水。 3.2.3 样品喷金操作

不同原理尿液分析仪检测尿有形成分结果比较及显微镜复检规则探讨

不同原理尿液分析仪检测尿有形成分结果比较及显微镜复检 规则探讨 摘要】目的：探讨不同原理尿液分析仪检测尿有形成分结果比较及显微镜复检 规则。方法：使用UF-1000i尿有形成分分析仪和AX-4280尿干化学分析仪检测住 院患者尿液标本，先检查红细胞、白细胞和管型，在与显微镜结果进行对比。结果：采用UF-1000i检测红细胞和白细胞的灵敏度要高于AX-4280，但AX-4280的 特异度要高于UF-1000i，经流水线检验尿液版的阴性率为100％；UF-1000i检测 红细胞、白细胞和管型结果与显微镜尿沉淀检查有明显统计学差异，P＜0.05。结论：AX-4280和UF-1000i检测结果有一定的差异，所以不能使用UF-1000i代替显 微镜尿沉淀检查，还需要按照复检规则复检，提高检测结果的准确性。 【关键词】：尿液分析仪；有效成分；显微镜；复检 目前的尿液分析仪主要有有形成分和干化学分析仪两种，两种仪器的原理有一定的差异， 但是检查结果可以相互补充[1]。干化学分析仪能够定性检测，有形成分可以定量检测筛查尿 液标本。如果两种仪器检测检查结果存在差异，可进行显微镜检查，排除假阴性或假阳性结果，确保结果准确[2]。本次研究探讨了不同原理尿液分析仪检测尿有形成分结果比较及显微 镜复检规则，现将结果报告如下： 1 资料与方法 1.1 一般资料 使用UF-1000i尿有形成分分析仪和AX-4280尿干化学分析仪检测住院患者尿液标本，两种 分析仪组成尿液分析流水线，先取10ml混匀的患者标本，以1500r/min离心5min，丢掉上 层清液，取沉淀物0.2ml，混匀后使用定量显微镜检查。本次共测得患者尿液标本1000例。 按照《全国临床检验操作规程》，比较三种方法检测的红细胞、白细胞检查结果，以尿沉渣 显微镜结果作为参考，对比检查结果的假阳性、假阴性。 1.2 统计学方法。 使用统计学软件SPSS21.0对本次研究数据进行分析，计数资料使用（n，％）表示，采用 X2 test进行分析，当P＜0.05时说明有统计学意义。 2 结果 2.1 UF-1000i、AX-4280的诊断指标对比结果 参考尿沉渣显微镜检查结果，分别对UF-1000i和AX-4280检查结果判断，见表1。 3 讨论 UF-1000i分析仪主要使用半导体激光流式细胞染色技术，可以对细胞中不同的有形成分进 行荧光染色，通过分析不同角度的散射光和荧光亮度来统计不同性质的有形成分[3]。AX- 4280分析仪主要通过化学显色技术，能够定性检测尿液中红细胞、白细胞和蛋白。两种分析 仪的检测原理不相同，所以造成的部分检测结果也存在一定的差异，需要对结果存在差异的 标本在使用显微镜复检。根据相关研究显示[4]，UF-1000i和AX-4280分析仪的灵敏度和特异 性都有明显的差异，UF-1000i的灵敏度要高于AX-4280，但是特异性比较低。无论是哪种筛 查性检测方式都无法保证百分百的正确，都会存在假阳性和假阴性结果，但是如果联合UF-1000i和AX-4280筛查尿液标本时，阴性预测率可达到100％。所以，当两种分析仪的检测结 果相同时，不需要在进行显微镜复检，这样也有利于尿液标本检测的规范化。但是如果两种 分析仪的检测结果不相同时，不能够使用UF-1000i代替显微镜检查，要制定相应的显微镜复 检规则[5]。结合本次研究结果显示，当UF-1000i和AX-4280分析仪检查的红细胞、白细胞和 管型检查结果都是阴性时，不需要使用显微镜复检；如果都是阳性且量级相当时，也不需要 复检。笔者结合工作经验总结复检规则：第一，红细胞检测时，UF-1000i为阳性，但是AX-4280为阴性，这种情况可能为尿液中有草酸钙结晶，也可能是细菌、真菌和非定型结晶干扰。AX-4280检测红细胞为阳性但UF-1000i为阴性，这种情况比较少，可能与尿液中氧化酶物质