生物学常用试剂配制

生物学常用试剂配制
生物学常用试剂配制

常用试剂

储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃,相对湿度不超过80%。包装必须密封,切勿受潮。应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。

操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。

0.5M EDTA(PH 8.0)

组分浓度: 0.5 mol/L EDTA(MW:372.24)

配制量: 500ml

配制方法:

1.称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。

2.加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。

3.用NaOH调节调节pH值至8.0(约需加入20g固体NaOH),当pH 接近8.0时,EDTA 方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。

4.高温高压灭菌后,室温保存半年。

5M NaCl

组份浓度:5mol/L NaCl (MW:58.5)

配制量:1L

配制方法:

1.准确称取氯化钠29

2.5g,置于1L的蓝盖瓶中。

2.用去离子水溶解并稀释至1L。

3.高温高压灭菌后,常温保存。

2.5M CaCl2

组份浓度:2.5mol/L CaCl2 (MW:110.98)

配制量:50ml

配制方法:

1.准确称取氯化钙g于50ml的conical tube中。

2.用去离子水溶解并稀释至500ml,用0.22μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。

3.贮存于4℃。

50% 甘油

组分浓度:50%(V/V) glycerol

配制量:100ml

配制方法:

1. 量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中:100% glycerol 50ml

2.加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。

3.高温高压灭菌,4℃保存。

4.使用时,到超净台分装。

Amp-氨苄青霉素(钠盐)

放置:置于4°C冰箱

配方及配法:配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于-20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(200ug/ml)加入培养基。Kan-卡那霉素(硫酸根)

放置:置于试剂柜

配方及配法:配成20mg/ml的1000*溶液储存(4g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于-20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(20ug/ml)加入培养基。

DTT(二硫苏糖醇)

放置:置于-20°C冰箱顶层

配方及配法:1M DTT的配制:溶解7.7g IPTG 于50 mL水中,溶解后分装成1。5ml管,置于-20°C冰箱第二层使用浓度为1-10Mm

PMSF(苯甲基磺酰氟)

放置:试剂柜

0.1M PMSF的配制:分子量174.19

保存室温保存,配成PMSF溶液后需-20℃保存。

配制溶解0.87g的PMSF于足量的异丙醇中,定容到50ml。分成小份贮存于―20℃。工作浓度1mM

注意:有毒,对呼吸道粘膜、眼睛和皮肤有很强的危害性,配制时请在通风橱进行,并穿实验服及戴一次性手套。

10×TE Buffer(pH 8.0)

组份浓度: 100 mMTris-HCl,10 mM EDTA

配制量: 1L

配置方法

1. 量取下列溶液,置于1L蓝盖瓶中。

1.0M Tris-HCl Buffer(pH8.0)100mL

0.5M EDTA(pH8.0)20mL

2. 向蓝盖瓶中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定容至1L,高温高压灭菌。

4. 室温保存半年。

注意:此为贮存液,使用时稀释100倍,用于PCR纯化和质粒提取后产物保存。

0.5M PIPES (PH 6.7)

配制量:10 ml(MW:302.4)

配制方法:

1. 称取1.5g,加入到15 ml塑料离心管内。

2. 加8 ml的水,搅拌溶解。

3. 用5M KOH 调PH至6.7

4. 0.22um滤膜过滤,-20℃保存。

1.5M Tris-HCl(pH8.8)

组份浓度: 1.5 mol/L Tris-HCl

配制量: 1L

配制方法:

1.称取181.7g的Tris-base(MW:121.14)置于1L蓝盖瓶中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存半年。

1.0M Tris-HCl(pH8.0)

组分浓度: 1.0 mol/L Tris-HCL

配制量: 1L

配制方法:

1.称取121g的Tris-base(MW:121.14)于1L蓝盖瓶中,

2.加入900ml的去离子水,充分搅拌均匀,

3. 用浓盐酸调pH值至8.0,每升约需40-50ml浓盐酸,用水调整终体积至1L。如需其他PH 的Tris,根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸。

4.高温高压灭菌后,室温保存半年。

注意:测PH时需使用温度补偿电极,因为温度变化对Tris的PH有很大影响。

浓盐酸的体积(ml)8.6 14 21 28.5 38 46 56 66 71.3 76

pH9.0 8.8 8.6 8.4 8.2 8.0 7.8 7.6 7.4 7.2

10%SDS

组份浓度: 10%(W/V)SDS

配制量:500mL

配置方法

1.称量50g高纯度的SDS置于500mL蓝盖瓶中,加入约400mL的去离子水,68℃加热溶解。

2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。

3.将溶液定容至500mL后,室温保存。

注意:SDS为固体粉末状,吸入会对肺造成损害,应在通风橱中称取SDS。溶解时,SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。

30%APS (过硫酸铵)

组份浓度:30%(W/V)APS

配制量:1mL

配制方法:

1.准确称取0.3g APS。

2.加入0.8mL的去离子水溶解。

3.贮存于4℃。

注意:30%的过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。

10×SDS-PAGE Running Buffer

配制量:1L

配制方法:

1.称量下列试剂,置于1L蓝盖瓶中。Tris 20g; Glycine 144 g; 10% SDS 100 ml

2.加入约700 ml的去离子水搅拌溶解。

3.定容至1L,混匀,室温保存。

50X TAE Buffer (pH8.5)

组分浓度:2M Tris-base,100mM EDTA, 1M冰乙酸

配制量:1L

配制方法:

1、称取下列试剂,置于1L蓝盖瓶中:Tris-base 242.2g; 0.5M EDTA(PH8.0) 200ml

2.加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解,再加入57.1ml的冰乙酸,混合均匀。

3、加去离子水将溶液定容至1L。

4、高温高压灭菌后,室温保存半年。

6X DNA Loading Buffer(Agarose)

组分浓度:0.09%(W/V)溴酚蓝0.09%(W/V)xylene cyanol FF, 60% glycerol, 60mM EDTA 配制量:50ml

配制方法:

1.称取下列试剂,置于50ml离心管中:溴酚兰0.125g

2.向离心管中30ml去离子水,加热充分溶解。

3.加入15ml甘油,最终用去离子水定容至50ml,混匀,室温保存。

4.使用时,分装1ml一管,加入,4℃保存。

5X loading buffer (蛋白)

1.称量下列试剂置于10ml 塑料离心管中。

1 M Tris?Cl (pH 6.8) 1.25 ml

10%SDS (电泳级)5ml

溴酚蓝(BPB)25 mg(可以少加一点)

甘油2.5 ml

2-ME 250ul

2.加去离子水溶解后定容至5 ml。

3.小份(500 ul/份)分装后于-20保存。

5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右

常用试剂的配制

1、2,4-二硝基苯肼溶液 I.在15mL浓硫酸中,溶解3克2,4-二硝基苯肼。另在70mL95%乙醇里加20mL 水,然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中,搅动混合均匀即成橙红色溶液(若有沉淀应过滤)。 Ⅱ.将1.2克2,4一二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中,配好后储于棕色瓶中,不易变质。 I法配制的试剂,2,4-二硝基苯肼浓度较大,反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大,因此便于检验水中醛且较稳定,长期贮存不易变质。2、卢卡斯(Lucas)试剂 将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融,稍冷后放在干燥器中冷至室温。取出捣碎,溶于23mL浓盐酸中(比重1.187)。配制时须加以搅动,并把容器放在冰水浴中冷却,以防氯化氢逸出。此试剂—般是临用时配制。 3、托伦(Tollens)试剂 I.取0.5mL10%硝酸银溶液于试管里,滴加氨水,开始出现黑色沉淀,再继续滴加氨水,边滴边摇动试管,滴到沉淀刚好溶解为止,得澄清的硝酸银氨水溶液,即托伦试剂。 Ⅱ.取一支干净试管.加入1mL5%硝酸银,滴加5%氢氧化钠2滴,产生沉淀,然后滴加5%氨水,边摇边滴加,直到沉淀消失为止,此为托伦试剂。 无论I法或Ⅱ法,氨的量不宜多,否则合影响试剂的灵敏度。I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱,在进行糖类实验时,用I法配制的试剂较好。 4、谢里瓦诺夫(Seliwanoff)试剂 将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100mL。 5、希夫(Schiff)试剂 在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐,放置冷却后,加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸,再用蒸馏水稀释至200mL。 或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液,冷却后加入0.2g品红盐酸盐,溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色,用蒸馏水稀释至200mL。 此外,也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中,冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失,加入0.5g活性炭,振荡过滤,再用蒸馏水稀释至500mL。 本试剂所用的品红是假洋红(Para-rosaniline或Para-Fuchsin),此物与洋红(Rosaniline或Fuchsin)不同。希夫试剂应密封贮存在暗冷处,倘若受热或见光,或露置空气中过久,试剂中的二氧化硫易失,结果又显桃红包。遇此情况,应再通入二氧化硫,使颜色消失后使用。但应指出,试剂中过量的二氧化硫愈少,反应就愈灵敏。 6、0.1%茚三酮溶液 将0.1g茚三酮溶于124.9mL95%乙醇中,用时新配。 7、饱和亚硫酸氢钠 先配制40%亚硫酸氢钠水溶液,然后在每100mL的40%亚硫酸氢钠水溶溶液中,加不含醛的无水乙醇25mL,溶液呈透明清亮状。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质,所以上述溶液也可按下法配制:将研细的碳酸钠晶体(Na2CO3?10H2O)与水混合,水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜,然后在混合物中通入二氧化硫气体,至碳酸钠近乎完全溶解,或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中,至碳酸钠全部溶解力止,配制好后密封放置,但不可放置太久,最好是用时新配。 8、饱和溴水 溶解15克溴化钾于100mL水中,加入10g溴,振荡即成。 9.莫利许(Molish)试剂

生物学中常用的试剂

3、生物学中常用的试剂: ⑴①斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混 合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 ②班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 ⑵双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇 匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 ⑶苏丹Ⅲ:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀配制而成。 用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 ⑷①二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 ②甲基绿:用于染色DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成绿色。 ⑸①50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。 ②75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。 ③95%的酒精溶液:⑴冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝提纯DNA;⑵固定细胞形态,与卡诺氏试剂类同, 用于“观察根尖细胞有丝分裂”“低温又到染色体加倍”。 ⑹15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 ⑺龙胆紫溶液、醋酸洋红染液、改良的苯酚品红溶液:用于染色体着色,通常染色3~5min。 ⑻碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。不能用于“验证酶的专一性”。 ⑼①丙酮、无水乙醇:用于提取叶绿体中的色素。 ②层析液:利用不同色素在层析液中溶解度不同,用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。 ③二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。

常用试剂的配制.

常用试剂的配制 1.无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO 3 0.175g Na 2HPO 4 ·12H 2 O 0.076g KH 2PO 4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO 3调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。 2.甲基红试剂 (1)成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95%乙醇 300ml (2)用途:测定甲基红反应。 3.Hanks液(原液) 原液甲: NaCl 160g KCl 8g MgSO 4·7H 2 O 2g MgCl 2·6H 2 O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl 2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。 原液乙: Na 2NPO 4 ·12H 2 O 3.04g KH 2PO 4 1.2g 葡萄糖 20g 加入800ml双蒸水,溶解。 0.4%酚红溶液100ml 上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。 使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO 3 调整PH值。 4.0.4%酚红溶液 称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒

几乎完全解,加入0.lmol/LNaOHl0ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。 5.pH7.2 Tris-NH 4 CI溶液(红细胞崩解液) Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g NH 4 Cl(氯化氨) 3.735g 加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。 6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。 7.磷酸盐缓冲液(PB) A 液:为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH 2PO 4 ·H 2 O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最 后补加蒸馏水至 1000ml 。 B 液:为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na 2HPO 4 .7H 2 O 3.6g(或 Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g, 或Na 2HPO 4 · 2H 2 O 35.6g ), 加蒸馏水溶解,最后加水至 1000ml。若再加 蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。 8.0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS) 硼酸钠(Na 2B 4 O 7 .10H 2 O) 0.46g 硼酸(H 2BO 3 ) 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。9.PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法一: 0.2mol/L Na 2HPO 4 ( Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g加蒸馏水至1000ml) 0.2mol/L NaH 2PO 4 (NaH 2 PO 4 ·2H 2 O 35.6g加蒸馏水至1000ml) 取0.2mol/L Na 2HPO 4 81.0ml 加0.2mol/L NaH 2 PO 4 19ml,再加1900mlH 2 O和 17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。 PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。 配制方法二: 甲液(0.1mol/LKH 2PO 4 溶液):KH 2 PO 4 13.608g,加蒸馏水至1000ml。 乙液(0.1mol/L Na 2HPO 4 溶液):Na 2 HPO 4 35.814g,加蒸馏水至1000ml。 取甲液19ml,乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。

高中生物实验方法与常用试剂

高中生物实验方法与常用试剂 1.实验方法 实验方法是整个实验设计的精髓,是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下: (1)化学物质的检测方法: ①淀粉——碘液(蓝色) ②还原性糖——斐林试剂、班氏试剂(砖红色) ③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)或酸碱指示剂 ④乳酸——pH试纸 ⑤O2——余烬复燃无O2——火焰熄灭 ⑥蛋白质——被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫色) ⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液(橘黄色)、苏丹Ⅳ染液(红色) ⑧DNA——二苯胺(蓝色) ⑨染色体——龙胆紫溶液(紫色),醋酸洋红溶液(红色) (2)实验结果的显示方法: ①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量 ◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率; ◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目; ◆植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量 ③原子途径——放射性同位素示踪法 ④细胞液浓度大小——质壁分离和复原 ⑤细胞是否死亡——质壁分离的复原 ⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量,发育速度等(饲喂法) ⑦生长激素作用——生长速度(体重变化,身高变化) ⑧胰岛素作用——动物活动状态(切除、移植胰腺) ⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度 ⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基 ⑴生长素作用——向光性 (3)实验条件的控制方法: ①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物 ②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液 ④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境 ⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热 ⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光 ⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光 ⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠 ⑨线粒体提取——细胞匀浆离心 ⑩骨的脱钙——盐酸溶液 ⑴灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌,对不同材料,灭菌方法不同:培养基用高压蒸气灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒;整个接种过程都在实验室无菌区进行。 (4)实验中控制温度的方法:

日常溶液的配制

一.标准溶液配置 -------------------------------------------------------------------------------- 1. 0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液 2. 0.1NNa2S2O3·5H2O标准溶液的制备,24.82g/L 3. 6N醋酸(HAC) 4. 10%碘化钾溶液 二. 指示剂---------- ------------------------------------------------------------------ -------- 3 1. 甲基橙 2. 甲基红 3. 酚酞 4. 10%铬酸钾指示液 5. 0.5%淀粉指示液 6. 碘化钾淀粉试纸 7. 还原黄G试纸的制备 三、试剂的测定 ------------------------------------------------------------------------------- 4 1. 次氯酸钠质量浓度的测定 2. 漂白粉中有效氯的测定 3. 冰醋酸(HAC) 4. 硫化碱(Na2S) 5. 双氧水质量浓度及分解率的测定 6. 烧碱浓度测定 7. 双氧水浓度测定 四.测试方法--------------------------------------------------------------------------------- 6

1. 比移值测定法(滤纸/染液上升法) 2. 缩水率测定 3. pH值的测定 4. 生物整理用纤维素酶活力的测定方法 4.1.滤纸崩溃法 4.2.CMC粘度法 一. 标准溶液配置 1.0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液 称取9.5g纯高锰酸钾(KMnO4)溶于1L蒸馏水中,再煮沸15min左右,待冷却后盖紧,避免与尘埃及有机物接触,同时不可与强光接触.静置数天后,用石棉过滤储存于棕色试剂瓶中,并放置暗处,然后用草酸钠标定. 2.0.1N Na2S2O3·5H2O标准溶液的制备24.82g/L 制备:称取25g化学纯粹的硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O),溶解于1L新煮沸(煮沸以驱除水中溶解的二氧化碳和防止微生物的作用,如有二氧化碳的存在,并与水反应生成碳酸,会使硫代硫酸钠起分解作用.)而冷却的,加有0.1g无水碳酸钠的蒸馏水中,搅动使溶解,移入暗色大瓶中保存,瓶口用塞子盖紧,待校准. 制备或保存时应注意下列几点:日光能促进Na2S2O3 溶液分解作用,所以Na2S2O3溶液应该保存在清洁的有色瓶中,尽可能避免和空气接触.制成的Na2S2O3溶液,它的浓度随放置时间稍有改变,在最初10-14天中,浓度常常有些增加,过此以后浓度就会慢慢减小.若在配置溶液时加入Na2CO3,使其在溶液中的浓度约为0.01-0.02%,就可以防止溶液的分解.

高中生物常见试剂大全

高中生物常见试剂大全,快来盘点! 1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 4.苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 5.二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 6.甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。吡罗红:检测RNA,呈红色 7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。 8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。 9、95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精 10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖,使细胞分离开来。“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15%盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。洗去卡诺氏液 8%盐酸:(1)盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;(2)盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合

11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色 12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红 15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素 16.层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。 17.二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。 18.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。 19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。 20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血 21、氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA 的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。

高中生物实验常用的试剂(人教版,很全)

生物学中常用的试剂: (乙液)。用法:将1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO 4 斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 (乙液)。用法:向3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO 4 待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 4.苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 5.二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 6.甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 吡罗红:检测RNA,呈红色 7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。 8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。 9、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA

10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11.龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色 改良苯酚品红染液:检测染色体,红色 健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色 12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红 15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素 16.层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。 17.二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。 18.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。

高中生物常用试剂及其作用

高中生物常用试剂及其作用 1.斐林试剂:用于检测还原糖。成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。 用法:将斐林试剂甲液和乙液等量混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,现配现用,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2.双缩脲试剂:用于检测蛋白质或者多肽(注意:氨基酸不和其发生作用)。成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。 用法:向待测液中先加入1ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,(先A后B,A大于B)。摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 3.苏丹Ⅲ:用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色 苏丹Ⅳ:用于检测脂肪。可将脂肪染成红色 4.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红 5.二苯胺:用于鉴定DNA。在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 6.班氏试剂:由A液(CuSO4溶液)B液(柠檬酸钠和NaCO3溶液)配制而成。作用及检测原理与斐林试剂相似,但班氏试剂可长期使用。 7.甲基绿和吡罗红:甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。 8.健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色,而细胞质接近无色。活体染色剂 9.龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色 10.改良苯酚品红染液:检测染色体,红色 11.溴麝香草酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄 12.酸性重铬酸钾溶液:检测酒精,橙色变为灰绿色 13.二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。 14.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止色素受破坏。 15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素 16.层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开 17.0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。 18.胰蛋白酶:①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织,使组织细胞分散 19.秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制纺缍体的形成。 20.氯化钙:增强细菌细胞壁的通透性,可用于基因工程 21.NaHCO3/ Na2CO3 Na2HPO4/ NaH2PO4:酸碱缓冲对→调节PH 22. 20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 23. 台盼蓝:细胞活性染料,用于检测细胞膜的完整性,可以使死细胞变蓝 24.卡诺氏液:固定细胞形态 25.N-1-萘基乙二胺盐酸盐:泡菜制作中测定亚硝酸盐(经酸化,重氮化)的含量,形成玫瑰红色 26. 刚果红:与纤维素形成红色复合物 27.伊红美蓝:大肠杆菌黑色带金属光泽 28.酚红试剂:分离土壤中分解尿素细菌的检测,作用于氨,呈现红色 29.NaHCO3溶液:用于探究环境因素对光合作用强度的影响的试验中,用于提供CO2,或维持反应体系中CO2含量的相对稳定

关于生物化学常用试剂配制

常规试剂配制和测定方法 一、溶液的配制 1. Mandels营养盐溶液(1000 mL) 名称重量(g) 硫酸铵((NH4)2SO4)14 磷酸二氢钾(KH2PO4)20 尿素(H2NCONH2) 3 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 3 氯化钙(CaCl2·2H2O) 4 注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 2. Mandels微量元素溶液(1000 mL) 名称重量(g) 氯化钴(CoCl2·6H2O) 硫酸锌(ZnSO4·7H2O) 硫酸锰(MnSO4·H2O) 硫酸亚铁(FeSO4·7H2O) 注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 3. DNS试剂的配制(1000 mL) (1)取:3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)7.5 g 氢氧化钠(NaOH )14.0 g 充分溶解于1000 mL 水中(水预先煮沸10 min) (2)加入:酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)216.0 g 苯酚(在50 ℃水浴中融化)mL 偏重亚硫酸钠(Na2S2O5) 6.0 g

(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置5天后便可使用,平时盛一小瓶(250 mL)使用,要放在冰箱中冷藏。此溶液每月配制一次。 注意:倒入瓶中时要尽量装满!! 4. 考马斯亮蓝G-250的配制(1000 mL) 称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中,加入100 mL 85 %磷酸,用蒸馏水稀释至1000 mL ,滤纸过滤。最终试剂中含%(w/v)考马斯亮蓝 G-250,%(w/v)乙醇,%(w/v)磷酸。 5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制(1000 mL) 名称分子量Mn 重量(g) 柠檬酸(C6H8O7·H2O)210 210 NaOH 40 准确称取柠檬酸210 g,溶于约750 mL煮沸(10 min)蒸馏水中,待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g,完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中,冷却后将容量瓶定容到1000 mL(原始)。(检验方法:取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍,测定稀释液的pH值,pH值应为) 6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定 (1)标准糖溶液的配制 准确称取2.000 g葡萄糖/木糖(葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h),蒸馏水溶解,全部转移至1 L容量瓶内,摇匀,配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。 取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管,分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶,蒸馏水定容,摇匀。即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液。 取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管,分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶,每瓶再加入mL柠檬酸缓冲液,蒸馏水定容,摇匀。即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖。(2)标准方程的测定: ①葡萄糖/木糖标准方程的测定

盐酸标准溶液的配制和标定

盐酸标准溶液的标定 一.仪器与试剂 仪器:全自动电光分析天平 1台 (1)称量瓶 1只 (2)试剂瓶 1000ml 1个 (3)锥形瓶 250ml 3个 (4)酸式滴定管 50ml 1支 (5)量筒 50mL 1只 试剂: (1)0.1mol/L 盐酸待标定溶液 (2)无水碳酸钠(固基准物) (3)溴甲酚绿-甲基红混合指示剂 二、步骤 0.1mol/L 盐酸标准溶液的标定 1.标定步骤 用称量瓶按递减称量法称取在270~300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.15~0.22g(称准至0.0002g),放入250ml 锥形瓶中,以50ml 蒸馏水溶解,加溴甲酚绿-甲基红混合指示剂10滴(或以25ml 蒸馏水溶解,加甲基橙指示剂1~2滴),用0.1mol/L 盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色(或由黄色变为橙色),加热煮沸2分钟,冷却后继续滴定志溶液呈暗红色(或橙色)为 终点。平行测定3次,同时做空白实验。以上平行测定3次的 算术平均值为测定结果。 2.计算 ()99 .52100001?-?=V V m C HCl 式中: m —基准无水碳酸钠的质量,g; V 1—盐酸溶液的用量,ml; V 0—空白试验中盐酸溶液的用量,ml; 52.99—1/2 Na 2CO 3摩尔质量,g/mol C HCL —盐酸标准溶液的浓度,mol/L.

氢氧化钠溶液的标定 1、试剂: (1)0.1000mol/L 氢氧化钠待标定溶液 (2)酚酞指示剂 2、仪器: (1)全自动电光分析天平 1台 (2)称量瓶 1只 (3)碱式滴定管 (50mL ) 1支 (4)锥形瓶 (250mL ) 3支 (5)烧杯 (250mL ) 2只 (6)洗瓶 1只 (7)量筒 (50mL ) 1只 3、测定步骤: 准确称取在110℃~120℃准确称取在110~120℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.5~0.6g(称准至0.0002g),放入250ml 三角瓶中,加入250ml 的蒸馏水溶解,加酚酞指示剂2滴,用0.1mol/LNaOH 溶液滴定至由无色变为红色30秒不褪色为终点,平行测定3次,同时作空白试验。 4、计算:C (NaOH)=22 .204)(100001?-?V V m 式中:m —邻苯二甲酸氢钾的质量,g 1V —NaOH 溶液的用量,ml 0V —空白试验NaOH 溶液的用量,ml 204.22 —邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量,g/mol NaOH C —NaOH 标准溶液的浓度,mol/L

生物学常用试剂配制完整版

生物学常用试剂配制 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

常用试剂 储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃,相对湿度不超过80%。包装必须密封,切勿受潮。应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。 操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。 EDTA(PH ) 组分浓度: mol/L EDTA(MW:) 配制量: 500ml 配制方法: 1.称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。 2.加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。 3.用NaOH调节调节pH值至(约需加入20g固体NaOH),当pH 接近时, EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。 4.高温高压灭菌后,室温保存半年。 5M NaCl 组份浓度: 5mol/L NaCl (MW: 配制量: 1L 配制方法: 1.准确称取氯化钠,置于1L的蓝盖瓶中。 2.用去离子水溶解并稀释至1L。 3.高温高压灭菌后,常温保存。 CaCl2 组份浓度:L CaCl2 (MW: 配制量: 50ml 配制方法: 1.准确称取氯化钙 g于50ml的conical tube中。 2.用去离子水溶解并稀释至500ml,用μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。 3.贮存于4℃。 50% 甘油 组分浓度: 50%(V/V) glycerol 配制量: 100ml 配制方法: 1. 量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中: 100% glycerol 50ml 2.加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。 3.高温高压灭菌,4℃保存。 4.使用时,到超净台分装。 Amp-氨苄青霉素(钠盐) 放置:置于4°C冰箱

高中生物学中常用的试剂

高中生物学中常用的试剂 1、斐林试剂:成分:质量浓度为0.1g/ml 的NaOH(甲液)和质量浓度为0.05g/ml 的CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。 3、双缩脲试剂:成分:质量浓度为0.1g/ml的NaOH(A液)和质量浓度为0.01g/ml的CuSO4(B液)。用法:向待测液中先加入2ml A 液,摇匀,再向其中加入3~4滴B 液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于体积分数为95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 5、二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 6、甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 7、50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。 8、75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力。75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 9、体积分数为95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 10、体积分数为15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11、龙胆紫溶液:(质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟。(也可以用醋酸洋红染色) 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14、丙酮:用于提取叶绿体中的色素。 15.二氧化硅:有助于提取色素过程中研磨得更充分。 16.碳酸钙:防止提取色素过程中研磨时色素被破坏。 17.层析液:色素能溶解在层析液中,由于溶解度不同使色素分子随层析液扩散的速度不同,而使色素分子分离开。 18.秋水仙素:用于育种工作中,使单倍体植株变成纯合正常植株,原理是抑制分裂过程中纺锤体的形成,使染色单体无法分离,而染色体数目加倍。

化验室化学试剂管理规定

化验室化学试剂管理规定 1.范围和目的 本规程适用于品检科所有化学试剂以及配制试剂。 制定本规程的目的是为了建立化验室化学试剂的购买、接受、储存、发放、使用、销毁使用管理规程,使化验员能正确地使用试剂,保证化验工作质量。 2.化学试剂的购买: 技术员根据库存量及化学试剂检验需要量提出购买计划,经化验室负责人审核,公司厂长批准,交供应科采购员购买。 3.化学试剂的入库 购买后由采购员直接交给仓库管理员并办理入库手续。 技术人员根据购买计划办理出库手续并通知化学试剂管理员到出库接受。 化学试剂管理员先检查包装的完好性,封口是否严密,试剂无泄漏,标签是否粘贴牢固无破损,内容清晰,贮存条件明确,瓶签已部分脱胶的,应及时用胶水粘贴。无标签的试剂不得入库。严格按采购计划单内容,逐一核对。 化学试剂保管员必须每天检查一次温湿度表并记录。超出规定范围的应及时调整。 无标签的试剂应予销毁。 4.化学试剂的领用 化验员根据检验需要量提出领用要求。 化学试剂管理员根据化验员的要求发放化学试剂,并填写化学试剂领用记录。 5.化学试剂贮存 原装化学试剂贮存环境 55 5 55℃,相对湿度以45-75%为宜。 5应有良好的通风设备。 化验室内化学试剂的贮存 5 配制好的化学试剂应存放于试剂架上。性质不稳定的配制试剂应根据不同的性质存放,如放在阴暗处、冰箱等地方。使用化学试剂的过程中应特别注意其外观的变化。 配制化学试剂一般贮存1~2个月为宜,过期不得使用,须重新配制。在使用过程中发现有沉淀的,亦不得使用。 55需要冷藏保存的化学试剂应放在冷藏箱内保存。 易潮解、易失水风化、易挥发易吸收、二氧化碳、易氧化、易吸水变质化学试剂,需密闭保存或蜡封保存,应存放试剂柜下部柜中,平时应关门上锁;。 易爆炸品、易燃品、腐蚀品应单独存放,平时应关门上锁,剧毒品用后归还专用库(柜)。某些高活性试剂应低温干燥贮放。 保持室内清洁,通风和温湿度应符合规定。 每日检查一次消防灭火器材的完好状况,保证随时可以使用。

生物学中常用的试剂及实验结果等

生物实验知识点 一、生物学中常用的试剂: 1、斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3、双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 5、二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 6、甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 吡罗红:检测RNA,呈红色 7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。 8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。 9、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色 健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14、碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红 15、丙酮:用于提取叶绿体中的色素 16、层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。 17、二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。 18、碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。19、0.3g/mL 的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。 20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血 21、氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。 22、胰蛋白酶:①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散于。 23、秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。 24、氯化钙:增强细菌细胞壁的通透性,可用于基因工程。 25、石磊试剂:检验溶液酸碱性→判断光合速率与呼吸速率快慢的关系; 26、NaHCO3/ Na2CO3 Na2HPO4/ NaH2PO4:酸碱缓冲对→调节PH 27、NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M) 28、溴麝香草酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄常用的实验方法

高中生物所有实验试剂作用归纳

高中生物实验试剂归纳 1、斐林试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。 用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。 和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3、双缩脲试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。 用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 4、苏丹Ⅲ: 用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。 用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 5、二苯胺: 用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 6、甲基绿: 用于鉴定DNA。 DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 7、50%的酒精溶液: 在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。 8、75%的酒精溶液: 用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力。 75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 9、95%的酒精溶液: 冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 10、15%的盐酸: 和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11、龙胆紫溶液:(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml) 用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟。(也可以用醋酸洋红染色) 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁: 用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL 8.0 约42mL 4. 将溶解定容至1L。 5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl (pH8.8)□配制量1L □配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1L。 5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。 1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL 500 mM EDTA(pH8.0)20mL 2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。 3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。 4. 室温保存。 4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠 (pH5.2)□配制量100mL □配置方法1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。 5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 □配制量1L □配置方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。 NaCl 8 g KCl 0.2g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27g 2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵 □配制量100mL □配置方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。 2.加去离子水将溶液定容至100mL。 3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.密封瓶口于室温保存。 注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。 7、Tris- HCl平衡苯酚□配置方法 1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。 2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。 3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下: ①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。 ②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。 ③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ④重复操作步骤③。 ⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。 ⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。

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