日落黄检测

日落黄检测成分分析饮料糖果日落黄含量检测

日落黄，由对氨基苯磺酸重氮化，与2-萘酚-6-磺酸偶合，经精制而得。主要用于食品和药物的着色，也可用于制造铝盐色淀颜料。溶于水呈黄光橙色澄清溶液，不溶于油脂，几乎不溶于乙醇，遇浓硫酸呈红光橙色，稀释后呈黄色。其水溶液遇浓盐酸不变色，遇浓氢氧化钠呈棕红色，具有酸性染料特性，能使动物纤维直接染色。日落黄是一种人工合成着色剂，有增加外观颜色好看的作用；二氧化硫有防腐、漂白作用；甲醛是一种刺激性很强的化学物，医学上用作防腐剂。不过，如果消费者吃了违规使用这类添加剂的食品，健康可能会受到严重损害。8.15

科标化工分析检测日落黄检测标准如下：

GB6227.1-2010食品添加剂日落黄

GB6227.2-2005食品添加剂日落黄铝色淀

SN/T1743-2006食品中诱惑红、酸件红、亮蓝、日落黄的含量检测高效液相色谱法

YY0144-1993药用辅料日落黄

978-7-5066-5143-1《食品添加剂使用卫生标准》应用指南

DB37/T1106-2008饮料中16种食品添加剂的快速测定超高效液相色谱法

GB25533-2010食品添加剂果胶

GB2760-2011食品安全国家标准食品添加剂使用标准

SN/T2360.1-2009进出口食品添加剂检验规程第1部分：通则

SN/T2360.10-2009进出口食品添加剂检验规程第10部分：护色剂

SN/T2360.9-2009进出口食品添加剂检验规程第9部分：着色剂

SN/T2606-2010进出口食品检验中食品添加剂摄入量的简要评估方法指南

SN/T3257-2012出口食品添加剂生产企业HACCP应用指南

服务范围：成分分析、物理性能、理化性能、可靠性试验、含量分析等。

科标化工分析检测，从事化工材料与制品性能测试、成分分析、配方研究的分析测试研发。10

榨菜中柠檬黄、日落黄测定的探讨和改进

榨菜中柠檬黄、日落黄测定的探讨和改进刘超，景赞，邹沫君，冯慧，黄志勇，吕雪梅（乐山市食品药品检验检测中心，四川乐山６１４０００）摘要：探讨和改进了榨菜中柠檬黄、日落黄２种合成着色剂的检测方法。建立了以ＥＣ２５０/４．６ＮＵＣＬＥＯＤＵＲＣ１８Ｇｒａｕｔｙ５μ ｍ为液相色谱柱；以甲醇、２０ｍｍｏｌ/Ｌ乙酸铵为流动相；采用混合型弱阴离子交换小柱吸附柠檬黄和日落黄，氨化甲醇洗脱；检测波长为２５４ｎｍ；流速为１．０ｍＬ/ｍｉｎ的检测方法。讨论了方法的检出限、定量限；线性范围；方法的准确性、重复性、精密度。结果表明：柠檬黄、日落黄在１．０～１０．０μｇ /ｍＬ内具有良好的线性，检出限分别为柠檬黄０．１５ｍｇ/ｋｇ、日落黄０．１２ｍｇ/ｋｇ，加标回收率分别在８３．３%～９４．３%，８３．８%～９５．０%。与国标方法相比较，提高了方法的准确性、灵敏度及精密度。关键词：榨菜；柠檬黄；日落黄；高效液相色谱中图分类号：ＴＳ２５５．５３文献标志码：Ａｄｏｉ：１０．３９６９/ｊ．ｉｓｓｎ．１０００-９９７３．２０１８．０９．０３８文章编号：１０００-９９７３（２０１８）０９-０１７６-０４ＴｈｅＤｉｓｃｕｓｓｉｏｎａｎｄＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＬｅｍｏｎＹｅｌｌｏｗａｎｄＳｕｎｓｅｔＹｅｌｌｏｗｉｎＰｉｃｋｌｅＬＩＵＣｈａｏ，ＪＩＮＧＺａｎ，ＺＯＵＭｏ-ｊｕｎ，ＦＥＮＧＨｕｉ，ＨＵＡＮＧＺｈｉ-ｙｏｎｇ，ＬＶＸｕｅ -ｍｅｉ（ＬｅｓｈａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｌｅｓｈａｎ６１４０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｄｅｃｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆｌｅｍｏｎｙｅｌｌｏｗａｎｄｓｕｎｓｅｔｙｅｌｌｏｗｉｎｐｉｃｋｌｅｉｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｄ．ＴｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｂａｓｅｄｏｎｎｏｖｅｌＨＰＬＣｃｏｌｕｍｎＥＣ２５０/４．６ＮＵＣＬＥＯＤＵＲＣ１８Ｇｒａｕｔｙ５μｍｗｉｔｈｍｅｔｈｙｌａｌｃｏｈｏｌ，２０ｍｍｏｌ/Ｌａｍｍｏｎｉｕｍａｃｅｔａｔｅａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ．Ａｄｓｏｒｐｌｅｍｏｎｙｅｌｌｏｗａｎｄｓｕｎｓｅｔｙｅｌｌｏｗｂｙｍｉｘｅｄｗｅａｋａｎｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｏｌｕｍｎ，ｗｉｔｈａｍｍｏｎｉａｔｅｄｍｅｔｈａｎｏｌｆｏｒｅｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｉｓ１．０ｍＬ/ｍｉｎａｎｄｔｈｅＵＶｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｉｓ２５４ｎｍ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔ，ｌｉｍｉｔｏｆｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ，ｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅａｎｄａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄａｒｅｄｉｓｃｕｓｓｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｓｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ１．０～１０．０μｇ /ｍＬ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｏｆｌｅｍｏｎｙｅｌｌｏｗａｎｄｓｕｎｓｅｔｙｅｌｌｏｗｉｓ０．１５，０．１２ｍｇ/ｋｇｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅａｄｄｉｎｇｓｔａｎｄａｒｄｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓａｒｅ８３．３%～９４．３%，８３．８%～９５．０%．Ｔｈｅａｃｃｕｒａｃｙ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｐｒｅｃｉｓｉｏｎｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄａｒｅｉｍｐｒｏｖｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎａｔｉｏｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｉｃｋｌｅ；ｌｅｍｏｎｙｅｌｌｏｗ；ｓｕｎｓｅｔｙｅｌｌｏｗ；ＨＰＬＣ榨菜是人们日常喜爱的酱腌菜，但近几年一些不法商贩为了使其颜色更鲜艳在其中超限量添加柠檬黄、日落黄等人工合成着色剂[１]。人工合成着色剂，常以苯、甲苯等为原料，先制备色素中间体，再将１种或者２种中间体进行磺化、偶合、缩合和偶氮化等化学反应而制成，人工合成着色剂不能提供人体所需的任何营养物质，且一些人工合成着色剂还会危害人体健康，如致泄性、致突性与致癌作用等[２]。柠檬黄、日落黄即是２种典型的人工着色剂。ＧＢ５００９．３５-２０１６《食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定》 [３]，采用聚酰胺吸附食品中的人工着色剂，并用乙醇胺溶液进行洗脱。聚酰胺对合成着色剂的吸附能力会受到温度的影响，回收率较低。同时操作步骤复杂，不适合大批量样品的处理。柠檬黄和日落黄均具有苯磺酸钠结构，收稿日期：２０１８-０５-０２作者简介：刘超（１９８４-），男，河南新乡人，工程师，硕士，研究方向：食品安全。— ６７１—食品添加剂第４３卷第９期２０１８年９月中国调味品China Condiment 万方数据

黄曲霉素B1检测卡说明书

黄曲霉毒素B1 检测卡说明书【简介】黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻、茶叶等。鉴于这些霉菌毒素的毒性，欧盟国家规定，黄曲霉毒素B1的残留限量值为5ppb。【检测原理】该试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。【检测范围】花生、玉米、小麦、大米、茶叶、油脂、饲料等；【产品组成】黄曲霉毒素B1免疫胶体金快速检测卡(40份/盒) 滴管（40支）干燥剂（40片）一次性手套（5只）【技术指标】检测下限：5μg／kg；【检测步骤】 1．取5g以上有代表性的粉碎后的谷物样品（过20目筛），准确称取0.5g均匀粉碎试样，加入到配套的15ml离心管中。 2．向离心管中准确加入纯净水和乙酸乙酯各2mL，将瓶塞盖紧密封，用力振荡5分钟，4000rpm离心1分钟（备注：如实验室没有大离心机设备，可以用小离心管取上清液，用小离心机离心）。 3．用吸管取上清液到小玻璃杯中，吹干滤液（吹风机或烘箱），然后用体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液. 4．取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。 5．5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。【结果判断】 1、阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现，表明样品中黄曲霉毒素的浓度小于5ug／kg。 2、阳性:只有对照线(C),无测试线(T)，表明样品中黄曲霉毒素的浓度大于或等于5μg／kg。 3、无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现，或者对照线（C）不出现。

黄嘌呤氧化酶法优化大鼠血清SOD测定条件的探讨

第29卷第3期佛山科学技术学院学报(自然科学版)V o l.29N o.3　2011年5月　Jou rnal of Fo shan U n iversity(N atu ral Science Editi on)M ay2011 文章编号:100820171(2011)0320065203 黄嘌呤氧化酶法优化大鼠血清SOD 测定条件的探讨翁闪凡,张晓林 (佛山科学技术学院检药系,广东佛山528000) 摘要:目的　优化黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD实验条件。方法　采用黄嘌呤氧化酶法,探讨其加样量、方法重复性、显色稳定性、试剂稳定性及样品稳定性等最佳因素。结果　黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD最佳加样量为5Λl,其测定变异系数CV<1%,显色前后20m in吸光度比较(P>0.05);新配试剂与配制3个月试剂做测定,吸光度比较(P<0.01);新鲜标本和4°C放置48h标本进行测定,吸光度比较(P<0.01)。结论　黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD最佳加样量为5Λl,该法重复性好,显色稳定,测定试剂必须新鲜配制,标本必须新鲜制备。关键词:黄嘌呤氧化酶法;SOD;测定中图分类号:R446.112 文献标志码:A 自由基作为引起机体组织细胞损伤的重要因素,引起多种疾病发生、发展,日趋受到国内外医学界的认可及重视。超氧化物阴离子是人类机体内重要的自由基,对机体有很大的损伤作用,超氧化物歧化酶(Sup erox ide dis m u tase,SOD)是广泛存在于各类生物体内的酸性金属酶,催化生物体内超氧自由基(O-2)发生歧化反应,是机体内O-2的天然消除剂,对机体细胞起保护作用。近年来对抗氧化的动物实验研究越来越多,因此建立SOD活性的测定方法,并对其进行方法学探讨显得尤为重要。目前,SOD活性测定主要有黄嘌呤氧化酶法、邻苯三酚自氧化法、羟胺发色法、四氮唑蓝(NB T)显色法、化学发光法[1],笔者主要对黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD进行方法学探讨。 SOD测定试剂盒(南京建成生物工程研究所提供,批号:20100107);722分光光度计;微量加样器;吸嘴;试管。 1　实验原理通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生的超氧阴离子自由基(O-2),后者氧化羟胺形成亚硝酸盐,在显色剂的作用下呈现紫红色,用可见分光光度计检测其吸光度。当被测样品中含SOD时,则对超氧阴离子自由基(O-2)有专一性抑制作用,使形成的亚硝酸盐减少,比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值,通过公式计算可求出被测样品中的SOD活力。 2　实验方法及结果 2.1　加样量 2.1.1　方法取大鼠新鲜血清20例,将加样量分为3Λl、4Λl、5Λl、6Λl4组,根据说明书中提供的抑制率参考范围收稿日期:2011203229 基金项目:广东省自然科学基金资助项目(7010421) 作者简介:翁闪凡(19752),女,广东佛山人,佛山科学技术学院讲师。

高效液相色谱法测定杏罐头中的柠檬黄_日落黄

2010年9月第31卷第9期食品研究与开发 [J].分析测试学报，2004，23(3)：26-30 收稿日期：2009-09-03 为了改善食品的感官性状，常在食品中添加人工合成着色剂（又称色素）。色素色泽鲜艳，着色力强，性质稳定，不易褪色，用量较低，可任意拼色，价格便宜。但色素主要以苯、甲苯、萘等化工产品为原料，经化学合成，主要属苯胺类色素，有的色素在人体内可形成致癌性物质α-氨基萘酚和β-萘胺。因此，世界各国对色素的品种、使用范围和使用量都有严格限制。目前，我国对人工合成着色剂的使用范围和使用量都有严格的规定。GB 2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》 [1] 规定，西瓜酱罐头允许限量使用日落黄外其余均不得添加合成色素。采用无水乙醇-氨水溶液浸泡，离心的方法提取被杏果肉吸附的柠檬黄、日落黄，高效液相色谱法测定，方法的重复性好，回收率、精密度较高。 1材料与方法 1.1仪器与试剂1.1.1仪器液相色谱仪： FINNIGAN Surveyor LC 美国菲尼根高效液相色谱仪JJ-2型；匀浆机：江苏省金坛市环宇科学仪器厂SK-1型；快速混匀器：江苏省金坛市医疗仪器厂KQ-250DB ；超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司型；AK/QC-058型离心机：上海安亭。1.1.2试剂柠檬黄、日落黄溶液标准物质：国家标准物质研究中心；去离子水；无水乙醇、氨水、甲醇、甲酸、乙酸、柠檬酸、乙酸铵，均为分析纯；聚酰胺粉过200目筛；甲醇：色谱纯[2]。1.2色谱条件色谱柱：Inertsil ODS-3V 4.6×250mm ；流动相：甲高效液相色谱法测定杏罐头中的柠檬黄、日落黄王冬妍，杨书宁（沈阳产品质量监督检验院，辽宁沈阳110022 ）摘要：水果罐头中添加的合成色素大部分被果肉所吸附，为充分提取色素，优化水果罐头中合成色素的测定方法。采用无水乙醇-氨水溶液浸泡、离心，提取被杏果肉吸附的柠檬黄、日落黄，高效液相色谱法测定。柠檬黄、日落黄的平均回收率分别为99.32%和98.96%，相对标准偏差分别为0.51%和0.33%。关键词：高效液相色谱法；杏罐头；柠檬黄；日落黄 Determination of Tartrazine,Sunset Yellow in Canned Apricot High Performance Liquid Chromatography WANG Dong-yan ，YANG Shu-ning （Shenyang Product Quality Supervision ＆Inspection Institute ，Shenyang 110022，Liaoning,China ）Abstract ：Synthetic pigment added to canned fruit is adsorbed by pulp,in order to fully extract the pigment,optimize the determination of synthetic pigment in canned fruit.This study extracts the tartrazine and sunset yellow adsorbed by apricot pulp with dipping in anhydrous ethanol-ammonia and centrifuging,and determines with high performance liquid chromatography.The average recovery rate of tartrazine and sunset yellow was 99.32%and 98.96%， the relative standard deviation （RSD ）was 0.51%,and 0.33%respectively.Key words ：HPLC ；canned apricot ；tartrazine ；sunset yellow 作者简介：王冬妍（1977—），女（汉），工程师，硕士，研究方向：食品检测技术研究。 777777777777777777777777777777777777777777777777 检测分析 134

黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase, XOD)试剂盒说明书

货号：QS1402 规格：50管/48样黄嘌呤氧化酶（xanthione oxidase,XOD）试剂盒说明书紫外分光光度法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义： XOD（EC 1.17.3.2）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心，肺，肝脏等组织中，当肝功能受损时，XOD大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。测定原理： XOD催化黄嘌呤产生尿酸，尿酸在290nm下有特征吸收峰。自备实验用品及仪器：紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：60mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×4瓶，4℃保存。粗酶液提取： 1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。操作步骤： 1、分光光度计预热30min以上，调节波长至290nm，蒸馏水调零。 2、XOD检测工作液的配制：用时在每瓶试剂二中加入15mL试剂一，充分混匀，现配现用； 3、测定前将XOD检测工作液37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）水浴10min。 4、取1mLXOD检测工作液于1mL石英比色皿中，再加入35μL样本，混匀，室温下立即测定290nm下的初始吸光值A1和1min后的吸光值A2，计算ΔA＝A2-A1。 XOD活性计算： 1、血清（浆）XOD计算：单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=2424×ΔA 2、组织、细菌或细胞中XOD计算：（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。第1页，共2页

黄曲霉毒素解毒方法

1、1、4 黄曲霉毒素得解毒措施黄曲霉毒素危害严重，分析每一批家禽饲料中霉菌毒素得含量就是不可能得，当慢性霉菌毒素中毒发生时，除了轻微得生产性能下降外，没有任何明确得临床症状。在发展中国家中，每年黄曲霉毒素都会给饲料业及畜牧业带来巨大经济损失。在过去很长得一段时间里，为尽量减少霉菌毒素得危害所做得努力已经取得长足得进步，避免饲料中黄曲霉毒素得含量超过规定允许得浓度就是预防与治疗毒素中毒得方法之一。为减少黄曲霉毒素及其代谢物残留在动物性食品中以及减轻毒性反应，适当得方法包括物理分离，化学方法与毒素粘合剂就是必须要使用得[42]，如沸石化合物，活性炭，珍珠岩，膨润土，硅藻土等已经被使用。 1、1、4、1 物理去毒方法传统用于霉菌毒素得物理去毒方法主要有混合稀释法、水洗法、热处理、脱壳、磨粉、放射、萃取、吸附等。混合稀释法就是将简单地将霉变饲料与未霉变饲料进行混合，以降低饲料中霉菌毒素得浓度，此法成本低，工作量大，不能从根本上解决饲料中毒素得问题。水洗法可显著减少毒素，但只用于湿磨或发酵得前处理，否则干燥成本太高。霉菌素素在谷物表面含量高，脱壳可有效降低霉菌毒素水平，但工作量大。黄曲霉毒素耐热，一些试验表明热处理似乎能降低一些毒素水平，然而实际效果存疑。磨粉处理只能改变毒素得分布，不能减少毒素总量。放射能杀真菌孢子，但不减少毒素含量。有机溶剂可提取花生油、棉籽油中得黄曲霉毒素，几乎可将油中所有得黄曲霉毒素除去，但成本高，应用不广[43]。在当前得实际生产中，往饲料中添加可以吸附霉菌毒素得物质就是一种常用得方法，利用吸附剂来降低机体对毒素得吸收率，减少毒素对机体得毒害作用，众所周知得吸附剂主要有水合硅铝酸钙钠盐、蒙脱石、膨润土、粘土、沸石与活性炭等。汪前红、齐德生等[44,45]报道含有矿物、酵母等得复合吸附剂以及蒙脱石均能降低AFB1对动物得负面作用。在含黄曲霉毒素日粮中添加复合吸附剂或蒙脱石，均能在一定程度上能缓解AFB1对动物得毒性作用，降低AFB1中毒得死淘率，一定程度上恢复动物得生产性能，提高动物产品得质量。物理吸附法虽在一定条件下能吸附霉菌毒素，但其吸附毒素得特异性与广谱性得统一还就是一个世界性问题。 1、1、4、2 化学去毒方法

辣根过氧化物酶分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的活性

辣根过氧化物酶分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的活性李忠琴1 许小平2 杨海麟1 王武#1 1 （江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡214036） 2（福州大学化学化工学院，福州350002）摘要研究了以辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林反应显色新体系，检测黄嘌呤氧化酶（XOD ）活力的新方法。确定该酶活性测定的最佳条件为：辣根过氧化物酶（HRP ）7000U /L ，4-氨基安替比林（AAP ）1mmol /L ，苯酚（PA ）6mmol /L ，黄嘌呤（XAN ）1mmol /L 溶于50mmol /L Tris-CL 缓冲液（pH 8.4）；反应温度为37℃，保温时间为20min ；检测波长为508nm 。本方法测定XOD 酶活的线性范围为5.0～100.0U /L ，线性关系良好（r =0.9992），检出限为1.3U /L 。该方法操作简单易行，测定结果准确可靠。可有效应用于普通实验室和临床常规生化检测。关键词黄嘌呤氧化酶，辣根过氧化物酶，酶的活力测定，分光光度法 2005-08-30收稿；2005-12-05接受本文系福建省自然科学基金（No.C0410006）和工业生物技术教育部重点实验室基金（No.KLIB-KF200502）资助项目 1 引言黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase ，XOD ，EC 1. 2. 3.22）是一种钼羟类胞质缀合酶。主要用于痛风、心肌梗塞和细胞损伤后次黄嘌呤和黄嘌呤水平的检测［1～3］。目前测定黄嘌呤氧化酶活力主要采用NBT /MTS-PMS 比色法、紫外分光光度法、电化学法及放射化学法［4～8］等方法。但比色法形成的显色物溶解度低，PMS 对XOD 活性有一定的抑制，且NBT 、MTS 和PMS 试剂昂贵。紫外分光光度法中黄嘌呤和尿酸的紫外吸收波长较接近，直接进行紫外检测，干扰严重。其余两种方法操作繁琐，仪器设备要求高而难于推广。本实验根据辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase ，HRP ）［9］和黄嘌呤氧化酶的反应特性，提出了用XOD 偶联辣根过氧化物酶，直接测定黄嘌呤氧化酶活力的新方法。 2 实验部分 2.1 仪器和试剂 U-300型紫外-可见分光光度仪（日本日立公司）；H.H.S 11-2R 恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）；高速冷冻离心机（日本Hitachi CR22G 型）。0.67U /mg 黄嘌呤氧化酶（Sigma 公司）；250U /mg 辣根过氧化物酶（上海双向西巴斯科技有限公司）；4-氨基安替比林（AR ，华东师范大学化工厂）；苯酚（AR ，国药集团上海化学试剂公司）；黄嘌呤（99%，Fluka ）；Tris （BR ，国药集团化学试剂有限公司）；HCL （AR ，国药集团上海化学试剂公司）；叠氮钠（BR ，厦门新隆达试剂有限公司）。2.2 实验方法配制反应显色液：4-氨基安替比林（4-Aminoantipyrine ，AAP ），1mmol /L ；苯酚（phenic acid ，PA ），6mmol /L ；Tris-HCL 缓冲液，50mmol /L ；叠氮钠，0.02%；辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase ，HRP ），7000U /L 。在具塞试管中，依次加入3mL 反应显色液，黄嘌呤（xanthine ，XAN ）溶液100μL ，黄嘌呤氧化酶（XOD ）酶液50μL 。混匀，在37℃下加热20min ，煮沸5min 终止反应。以不加XOD 反应体系作为参比，测定UV-Vis 谱。2.3 样品处理 Arthrobacter g-X 菌株液体发酵48h 后，在10000r /min 转速下离心15min ，收集细胞。再将其悬浮于50mmol /L Tris-HCL 缓冲液（pH 7.5）中，采用250W 超声处理15min 。然后用12000r /min 转速离心10min ，取其上清液测定酶活。第34卷2006年6月分析化学（FENXI HUAXUE ）研究简报Chinese Journal of Analytical Chemistry 第6期821～824

黄曲霉毒素

黄曲霉毒素是一种强烈的致癌物质，能使人体或动物的免疫功能丧失，诱导畸形、癌症的发生。黄曲霉毒素是毒性极强的化合物，AFB1的急性毒性为成年人半至死量（LD50）10.0。黄曲霉毒素急性中毒症状主要表现为呕吐、厌食、发热、黄疸和腹水等肝炎症状。而黄曲霉毒素的“三致”（致突变、致癌、致畸性）危害性，更引起人们的关注。黄曲霉毒素是目前所知致癌性最强的化合物，对鱼类、禽类、家畜和灵长目类动物的实验肿瘤诱导作用极大，并且能同时诱导多种癌症。黄曲霉毒素对人的致癌性虽然缺乏直接证据，但大量的流行病学调查均证实，黄曲霉毒素的高摄入量和人类肝癌的发病率密切相关。因此，世界各国对食品中的黄曲霉毒素的含量做出了严格的规定。黄霉菌是微生物世界的一个大家族，黄曲霉菌是这个大家族的一员。黄曲霉菌本身是无毒的，但在其繁殖代谢的过程中可分泌出有毒的物质黄曲霉毒素。黄曲毒素是一种剧毒物质，它损害动物的肝脏，引起肝细胞坏死、肝纤维化、肝硬化等病变。黄曲霉毒素是目前发现的最强的致癌物质之一。 1 主要可诱发肝痛，还能诱发胃癌、肾癌、直肠癌及乳腺、卵巢、小肠等部位的肿瘤黄曲霉毒素对人体健康威胁很大。目前已确定其化学结构，黄曲霉毒素B1、B2、C1、G2等17种，其中趴毒性最大。食物中的花生、花生油、玉米、大米、棉籽等最容易污染上黄曲霉寿素，小麦，大麦也常被污染，豆类一般污染较轻，工业化生产的发酵制品如面酱。咸肉、火腿、香肠等肉类食品，亦能受到黄曲霉菌的污染。我国卫生标准规定，花生、花生油、玉米中，黄曲霉毒素含量不超过20微克/公斤；大米、食用油不得超过10微克/公斤；其它粮食、豆类、发酵食品不得超过5微克/公斤；婴儿食品中不得有黄曲毒素。 2 受黄曲霉菌污染的粮及食品不能食用轻度污染的粮及其他食品，可以用一些简单的方法将毒素破坏掉或除去。日常生活中可以用以下方法去毒： 2．1 剔除霉变粮粒因毒素主要集中在霉变的粮粒中，凡表面长有黄绿色霉菌，或破损皱缩、变色、变质的花生米和玉米，都有可能污染黄曲霉毒素。在食用前应仔细挑选，剔除霉变粒。2．2 提高加工精度稻谷污染黄曲霉菌后，米中的毒素主要集中在米糠层，如果在稻谷加工时，将糙米碾得精一点，尽量除去米糠层，可降低大米中毒素的含量。玉米中的黄曲霉毒素有 54~72％集中在皮层和胚中，如在加工时提取胚，可除去大部分毒素。用含黄曲霉毒素的玉米制成玉米淀粉，毒素的含量仅为原有含量的1％。 2．3 水洗去毒将污染上黄曲霉菌的大米用清水反复搓洗五六次，一直洗到水清时再煮饭，可除去大部分毒素。 2．4 加热去毒蒸煮、爆炒或油炸可减少一部分黄曲霉毒素。轻度污染的花生米，爆炒可使黄曲霉毒素B1、C1含量分别减少65％和62％；若用油炸，可使黄曲霉毒素Bl、 Cl含量分别减少69％和67％。大米煮成米饭，一般能破坏20％的黄曲霉毒素。用高压锅煮米饭，去毒效果比普通锅煮饭好。 2．5 植物油中的去毒在含黄曲霉毒素的植物油中，加入活性白陶土或活性炭等吸附剂，搅拌后静置沉淀，取上层清油，毒素含量大为降低。如在含毒花生油中加入1．5％的白陶土，可使含毒量从每公斤100微克降至10微克以下。用含黄曲霉毒较低的植物油烹调食物时，先将油倒入锅内烧至冒微烟(约120℃时)，可除去油中90％以上的毒素。如果菜肴中加葱、姜、蒜等辛香料，对除去黄曲霉毒素效果更为理想。 2．6 山苍子去毒用中药山苍子或山苍子胶丸均可，每百公斤粮食用十四五粒胶丸。用法是先把胶丸剖开，放在小瓶中，用透气纱布扎住瓶口，然后连瓶埋人米缸中，盖上缸盖，让芳香油自然挥发，熏蒸粮食，即可消除黄曲霉毒素。将山苍子野果或干果直接埋人粮食中，亦可收到良好的效果。3 黄曲霉素的去除方法黄曲霉毒素的污染是一个全球性的难题。黄曲霉在食品的加工、生产、贮存、运输等各个

柠檬黄与日落黄

柠檬黄与日落黄 1.物理化学性质柠檬黄为橙黄色均匀粉末，无臭，易溶于水。0.1%水溶液呈黄色，柠檬黄溶于甘油、丙二醇、微溶于乙醇，不溶于油脂。21℃时在水中的溶解度为11.8 %，在乙醇中的溶解度为9 %-10 %。耐热性、耐光性、耐盐性均好。耐氧化性较差，遇碱稍变红，还原时褪色。我国食品添加剂卫生标准规定，柠檬黄最大使用量为0.1mg/kg，婴儿食品不得使用。人体日允许摄入量暂定为0～0.75mg/ kg。日落黄为橙色的颗粒或粉末，无臭，易溶于水。0.1%水溶液呈橙黄色，日落黄溶于甘油、丙二醇，但难溶于乙醇，不溶于油脂，21℃时在水中的溶解度为25.3%，乙醇中的溶解度为0.9%～50%。耐光性、耐热性、耐酸性非常强，耐碱性较好，遇碱呈红褐色，还原时褪色。我国食品添加剂卫生标准规定，日落黄最大使用量为0.1g/ kg，婴儿食品不得使用。人体日允许摄入量暂定为0～2.5mg/ kg。 2.食用合成色素应用现状食品加工中食用色素的用量一般很少，但是在着色方面却能发挥巨大的作用，近年来，我国食品结构发生了巨大变革，食用合成色素在食品工业中起的作用越发突出，每年食用合成色素的用量已增至800吨左右。随着食品工业的发展其需求量仍在不断增长，目前年增长率约为3.2％。至2000年止，我国批准使用的食用合成色素有苋菜红、胭脂红、赤藓红、新红、诱惑红、日落黄、柠檬黄、亮蓝、靛蓝以及它们的色淀，酸性红、二氧化肽、β叶绿素铜钠，胡萝卜素（合成）等21种。我国政府对食用合成色素的使用范围和使用量均作出了严格的规定：凡是肉类及其加工品（红肠肠衣除外）、鱼类及其加工品、醋、酱油、腐乳等调味品、水果及其制品、乳类及乳制品、婴儿食品、饼干、糕点都不能使用人工合成色素。只有汽水、冷饮食品、糖果、配制酒和果汁露可以少量使用，一般不得超过1/10000。然而，事实上，在巨大的经济利益的驱使下，食品中合成色素的超标、超范围使用现象屡禁不止。据国家质检总局近年来的国家监督抽查显示，滥用食用色素的现象主要集中在粮食、蜜饯、水果罐头、肉制品等行业。对市场抽检结果表明，一方面消费者在购买食品时较重视食品的外观色泽，另一方面对又滥用色素的现象缺乏鉴别的知识和手段，以及国家相关部门监管和控制等方面所存在的难度都使得滥用合成色素的违法行为在食品工业中有日益扩展的趋势。 3.过量摄入食用合成色素的危害性食用合成色素是指用人工化学合成方法所制造的有机色素，自19世纪问世以来，由于成本低廉、色泽鲜艳、着色力强、性质稳定、可任意调配、让生产者用起来得心应手，以至于在食品生产中应用广泛。在添加色素的食品中，使用天然色素的不足20%，其余均为食用合成色素。但是食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化学产品为原料，经过磺化、硝化、偶氮化等一系列化学反应合成。这些色素大多带有毒性，主要是其化学性能直接影响人体健康，或在代谢过程中产生有害物质，使人体受到损害。大量研究结果表明：食用合成色素有致癌性是由于其大多为偶氮化合物。食用类偶氮色素分子的芳香部分大都有萘环与偶氮键，它们是偶氮色素的颜色载体，偶氮色素由于化学性质较活泼，在强还原剂作用下，R—N=N—R 容易发生断裂，萘环被还原成α—萘胺、β—萘胺，这两种物质具有致癌性。另外，在加工过程中，砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物等化工产品会对食用合成色素造成不同程度的污染，也会对人体造成危害。天然色素由于价格还较高和受目前生活水平所限，其在国内食品制造业中的应用量还较少。随着我国人民生活水平的进一步提高及大众健康意识的增强，回归大自然、食用全天然原料的产品必将成为今后食品消费的主流。广大消费者在日常生活中应加强自我健康和维权意识，在购买商品时不要过分追求食品的色泽，同时认真查阅商品包装上的成分标识，尽量选用无色素或使用天然色素的食品。

黄曲霉毒素及其检测方法整体解决方案

黄曲霉毒素及其检测方法整体解决方案一、黄曲霉毒素介绍黄曲霉毒素(aflatoxin，简称为AF)是到目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素。它可通过多种途径污染食品和饲料，直接或间接进入人类食物链，威胁人类健康和生命安全，对人体及动物内脏器官尤其是肝脏损害严重，该毒素是黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物，普遍存在于霉变的粮食及粮食制品中。黄曲霉毒素比较耐热，加热至230℃才能被完全破坏，因此一般烹饪加工也不易消除。二、黄曲霉毒素对人体的危害 1、引起急、慢性中毒：黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的10倍，砒霜的68倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制DNA、RNA的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。 2、致癌性：黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大75倍，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在30~50ug/kg时为低毒，50~100ug/kg时为中毒，100~1000ug/kg时为高毒，1000ug/kg以上为极毒。鉴于黄曲霉毒素对人类的巨大危害性，我国对其在食品中的含量作了严格规定，其中，乳制品中黄曲霉毒素最高允许量为5ug/kg（即5ppb）。三、黄曲霉毒素的种类黄曲霉毒素主要有4种：即B1、B2、G1、G2，其中B1被认为是主要的有毒物质，有2种这些毒素的代谢产物M1和M2。其中黄曲霉毒素B1主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素M 1是动物摄入黄曲霉毒素B 1 后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。黄曲霉毒素M 1 的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B 1 的基本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食

黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒说明书微量法

黄嘌呤氧化酶（XOD）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号：BC1095 规格：100T/96S 产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存。产品说明： XOD（EC 1.17.3.2）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心，肺，肝脏等组织中，当肝功能受损时，XOD大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。 XOD催化黄嘌呤产生尿酸，尿酸在290nm下有特征吸收峰。需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵、冰和蒸馏水。操作步骤：一、粗酶液提取： 1、细菌、细胞或组织样品的制备收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。或者直接用0.5mg/mL的酶液直接测定，为保证实验准确性建议用提取液梯度稀释后测定。 2、血清（浆）样品：直接检测。

二、测定步骤： 1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至290nm，蒸馏水调零。 2、XOD检测工作液的配制：用时在每瓶试剂二中加入15mL试剂一，充分混匀，待用；用不完的试剂4℃可保存一周。 3、测定前按需取出一定量的XOD检测工作液在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴30min以上。 4、空白管：在EP管中加入10μL水和250μL工作液，立即混匀并取200μL转移至微量石英比色皿或96 孔板中，记录290nm下初始吸光值A1和1min后的吸光值A2。计算ΔA空白＝A2-A1。 5、测定管：在EP管中加入10μL样本和250μL工作液，立即混匀并取200μL转移至微量石英比色皿或96 孔板中，记录290nm下初始吸光值A1和1min后的吸光值A2。计算ΔA测定＝A2-A1。三、XOD活性计算： a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 1、血清（浆）XOD计算：单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化产生1μmol尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（U/mL）＝[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷（ε×d）×106]÷V样÷T=2.131×ΔA 2、组织、细菌或细胞中XOD计算：（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μmol尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（U/mg prot）＝[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷（ε×d）×106]÷(Cpr×V样)÷T=2.131×ΔA÷Cpr （2）按样本鲜重计算：单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μmol尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（U/g鲜重）＝[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷（ε×d）×106]÷（V样÷V样总×W）÷T=2.131×ΔA÷W （3）按细菌或细胞密度计算：单位的定义：每万个细胞每分钟催化产生1μmol尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（U/104cell）[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷（ε×d）×106]÷（V样÷V样总×500）÷T=4.262×

饲料中黄曲霉毒素简易去除法

饲料中黄曲霉毒素简易去除法黄曲霉毒素污染严重的饲料，应该废弃。对轻度污染的饲料，经适当的处理后可以达到饲用标准的，仍可利用。下面介绍几种简易去除法： 1.水洗法：此法适用于籽实饲料的去毒处理，其方法是：先将发霉的饲料磨成碎粉，将其倒进缸中，加入3～4倍水，然后进行搅拌静置浸泡，每日换水搅拌两次，直至浸泡的水由茶色变成无色为止。 2.挑除法：其方法是把饲料中有霉变的部分挑除。可适用于秸秆、颗粒饲料的去毒处理。 3.晾晒去毒法：此法主要用于秸秆饲料的去毒。其方法是：先将发霉饲料置于阳光下晒干，然后进行通风抖松，以除去霉菌的芽孢，使其变得无害而达到无毒的目的。 4.脱胚去毒法：此法主要用于玉米的去毒，因为发霉玉米的毒素主要集中在玉米的胚部。其方法是：先将玉米磨成1.5～4.5毫米的小颗粒，再加5～6倍水，然后进行搅拌，胚部碎片因轻而浮在水面上，将其捞出或随水倒掉，如此反复数次，即可达到脱胚去毒的目的。 5.石灰水浸法：此法适宜对玉米、高粱等籽实类饲料进行去毒处理。其方法是：先将玉米等大粒发霉饲料粉碎成直径1.5～5毫米的小粒，然后将过120目筛后的石灰粉按0.8%～1%的比例掺入发霉饲料中，最后将掺入石灰粉的料和水按1：2的比例倒入容器中搅拌1分钟，然后静止5～8小时，将水倒出，再用清水冲洗2～3次，一般去毒率可达90%以上。 6.热处理法：在湿度较高的条件下，高热或高热高压可破坏毒素，如用260℃处理污染玉米，可使黄曲霉毒素含量下降85%。 7.碱煮处理法：此法适用于对籽实类饲料进行去毒处理。其方法是：按每100克发霉饲料加入3倍的水，再加入500克苏打粉或1000克石灰共煮，待煮到饲料裂开时，让其冷却，然后再用清水冲洗到没有碱味时即可使用。来源：中国农业新闻网

黄曲霉素检测装置

毕业设计题目：黄曲霉素检测装置设计专业：班级：姓名：学号：企业指导教师: 日期：目录黄曲霉素的检测装置 (2) 1引言 (3) 1.1黄曲霉素简介 (3) 1.2设计任务 (3) 2黄曲霉素检测装置的工作原理及结构 (4) 2.1黄曲霉素检测装置示意图 (4) 2.2工作原理 (4) 2.3黄曲霉素的检测器的工艺流程 (5) 3相关仪器的选择 (5) 3.1紫外线LED灯的选择 (5) 3.2激光聚焦镜片的选择 (6) 3.3玻璃滤光片的选择 (6) 4黄曲霉素检测装置相关零件的设计 (7) 4.2聚光镜和滤光镜的组合体零件设计 (7) 4.3扇形支撑板零件设计 (8) 4.4电动推杆的零件设计 (8)

5自动化系统设计 (8) 5.1C51单片机概述 (8) 5.2单片机的应用领域 (9) 5.2.1在工业控制中的应用 (9) 5.2.2在智能仪器中的应用 (9) 5.2.3在家用电器中的应用 (9) 5.2.4在信息和通信产品中的应用 (9) 5.2.5在办公自动化设备中的应用 (10) 5.2.6在汽车电子产品中的应用 (10) 5.3芯片的选择 (10) 5.3.1单片机的确定 (10) 5.3.2单片机的结构 (10) 5.3.3传感器的选择 (13) 5.3.4交流继电器的选择 (13) 6系统硬件电路设计 (14) 6.1电源电路设计 (14) 6.2传感器电路设计 (14) 6.3蜂鸣器电路设计 (15) 6.4继电器电路设计 (16) 7系统程序及软件设计 (16) 7.1流程图及软件整体机构设计 (16) 7.2黄曲霉素检测装置程序的工作过程 (17) 8结语 (19) 附录： (19) 附图1 黄曲霉素检测装置图 (19) 附图2 检测装置示意图 (20) 附图3电路仿真图 (20) 黄曲霉素的检测装置摘要：随着人们生活水平的愈加提高，人们在满足温饱的前提下越来越注重食品的安全，粮食产品中的主要污染物之一的黄曲霉素越来越受到人们的关注。黄曲霉素的分子为真菌毒素，是一种剧毒物质和强致癌物质，黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见，其毒性和致癌性也最强。所以黄曲霉素及时、快速、高效地检测对食品的安全具有重要的意义。本课题主要研究的是发明一种对粮食产品中的黄曲霉素进行快速检测的装置。我国当前对黄曲霉素的检测的仪器都价格昂贵，耗时较长，远远无法达到市

SOD活性测定

SOD活性测定： SOD的测定方法很多，常见的有化学法，免疫法等电点聚焦法等，化学法测定的原理主要是利用有些化合物如邻苯三酚，在自氧化过程中会产生有色中间物降超氧游离基(O2)这样就可以利用SOD分例(O2)。阻止中间物的积累而测定其酶活性。 1、试剂及仪器 (1)邻苯三酚分析纯，用10mmol/LECL配成50mmol/L溶液。 (2)UV－754紫外分光光度计。 2、测定方法： (1)邻苯三酚自氧化速度的测定。在25度、45ml`50mmol/L、PH值8.3、K2HPO4－KH2PO4缓冲液中加入10mmol/L的邻苯三酚，迅速摇匀，倒入光径1cm的比色杯内，在325mm波长下每隔30秒测A值一次，要求自氧化速度控制在0.0700d/mm 左右。 (2)SOD或粗酶抽提液活性测定：测定方法同测邻苯三酚自氧化速度，在加入邻苯三酚前加入待测SOD样液，测得数据按以下公式计算酶活性。 0.0700－A325mm/min ----------------------------------------＊100％度 0.70 样液稀释倍数样液稀释倍数酶活性(u/m1)＝------------＊反应液总体积＊---------------- 50％样液体积 3、蛋白浓度(mg/ml)和蛋白的计算： SOD或粗酶抽提液，经280mm紫外比色测定后，查牛轿清白蛋的标准曲线，由此算出每ml含ug蛋白的量。

蛋白浓度＝ug蛋白/ml＊样液稀释倍数＊10负3次方＝mg蛋白/ml总蛋白＝mg蛋白/ml＊原液总体积＝mg蛋白。 4、比活(u/mg蛋白)的计算：单位活力(u/ml) 总活力比活＝-----------------------＝-----------------＝u/mg蛋白蛋白的浓度(mg蛋白/ml) 总蛋白超氧化物歧化酶的活性测定超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，简称 SOD)广泛存在于生物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的金属类酶。它作为生物体内重要的自由基清除剂，可以清除体内多余的超氧阴离子，在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。离子(O2-)是人体氧代谢产物，它在体内过量积累会引起炎症、肿瘤、色斑沉淀、衰老等疾病，超氧阴离子与生物体内许多疾病的发生和形成有关。由于SOD能专一消除超氧阴离子(O2-)而起到保护细胞的作用，SOD作为一种药用酶，具有广阔的应用前景，并引起了国内外医药界、生物界和食品界的极大关注。按金属辅基成分的不同可分成3种类型。最常见的一种含有铜锌金属辅基(CuZn-SOD)，主要存在于真核细胞的细胞质中，在高等植物的叶绿体基质、类囊体内以及线粒体膜间隙也有存在，CuZn-S0D酶蛋白的分子量约为3.2×104，纯品呈蓝绿色，每个酶分子由2个亚基通过非共价键的疏水基相互作用缔合成二聚体。每个亚基(肽链)含有铜、锌原子各一个，活性中心的核心是铜。第二种含有锰离子(Mn-SOD)，主要存在于真核细胞的线粒体和原核细胞中，在植物的叶绿体基质和类囊体膜上也有存在，纯品呈粉红色，由4条或2条肽链组成。第三种是Fe-S0D，过去一直认为只存在于原核细胞中，近来发现有一些真核藻类甚至某些高等植物中也有存在。Fe-SOD纯品呈黄色或黄褐色，由2条肽链组成，多数情况下每一个二聚体中含有一个Fe原子。 [原理] SOD的活力测定方法很多，常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍，化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -，利