翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书
翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书

本试剂仅供研究使用标本:体液

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书试验原理:

BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验( ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子

ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物, 然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关

系。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书自备材料

1?蒸馏水。

2?加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3?振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2?实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3?不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书操作注意事项

1 ?试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2?实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3?不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4?使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5?使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6?洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,

有毒。实验完成后应立即读取OD值

8 ?加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9?按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法

1、血清…--操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000 离g 心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000 离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液---1000 离丿心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使

用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37C或更高的温度加热解

冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备

标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

2?洗涤缓冲液(50 )的稀释:蒸馏水50倍稀释。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书操作步骤

1?使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2?根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3?加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素

标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37C温育1小时。

4?甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

6?甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。5?每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37C温育30分钟

如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7?每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37C温育10分钟。避免光照。

8?取岀酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9?在450nm波长处测定各孔的0D值。

局限

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书性能

1.灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.990。

2.特异性:不与其它细胞因子反应。

3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(丫),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算岀相应的浓度。

3、检测值范围:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

PAMY人胰淀粉酶规格:48T/96T

IA-2A 人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体规格:48T/96T

ICA 人胰岛细胞抗体规格:48T/96T

IAA 人胰岛素自身抗体规格:48T/96T

PI 人胰岛素原规格: 48T/96T

NADPH

人烟酰胺腺嘌吟二核苷酸磷酸

规格: 48T/96T

CIC

人循环免疫复合物规格:

48T/96T

IGFBP-4

人胰岛素样生长因子结合蛋白

4

规格:

48T/96T

IGFBP-3

人胰岛素样生长因子结合蛋白

3

规格:

48T/96T

IGFBP2

人胰岛素样生长因子结合蛋白

2

规格:

48T/96T

IGFBP-1

人胰岛素样生长因子结合蛋白

1

规格:

48T/96T

IGF-2R 人胰岛素样生长因子2受体规格: 48T/96T

IGF-2 人胰岛素样生长因子2 规格 :

48T/96T IGF-1 人胰岛素样生长因子

1 规格 :

48T/96T

ISR-B 人胰岛素受体B

规格:

48T/96T

INS

人胰岛素 规格 :

48T/96T

IAPP

人胰岛淀粉样多肽 规格:

48T/96T

TAP

人胰蛋白酶原激活肽

规格 :

48T/96T

Try-n 人胰蛋白酶原n 规格:

48T/96T

trypsi

n 人胰蛋白酶

规格 :

48T/96T

CPAF

人衣原体蛋白酶样活性因子

规格:

48T/96T

HbCO

人一氧化碳血红蛋白

规格 :

48T/96T

NOS

人一氧化氮合成酶 规格:

48T/96T

FA

人叶酸 规格:

48T/96T

OLAb

人氧化低密度脂蛋白抗体

规格:

48T/96T

OxLDL 人氧化低密度脂蛋白

规格 :

48T/96T

elo ngin

人延伸蛋白 规格:

48T/96T

PDGFsR-a 人血血小板衍生生长因子可溶性受体规格: 48T/96T PDGF-AB 人血血小板衍生生长因子AB规格:48T/96T

PF-4/CXCL4 人血小板因子4 规格:48T/96T

PF-3 人血小板因子3 规格:48T/96T

PDGF-BB 人血小板衍生生长因子BB 规格:48T/96T

PDGF 人血小板衍生生长因子规格48T/96T

PAIg 人血小板相关免疫球蛋白规格: 48T/96T

PA-IgM 人血小板相关抗体IgM 规格: 48T/96T

PAC3 人血小板相关补体3 规格48T/96T

TPO 人血小板生成素规格: 48T/96T

PGF 人血小板生长因子规格: 48T/96T

GP-W 人血小板膜糖蛋白W 规格48T/96T

GP-n b皿a 人血小板膜糖蛋白n b皿a 规格:48T/96T

PBP/CXCL7人血小板碱性蛋白规格48T/96T

PAF 人血小板活化因子规格: 48T/96T

TSP-1 人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白 1 规格:48T/96T

FPB 人血纤肽/纤维蛋白肽B 规格48T/96T

FPB 人血纤肽/纤维蛋白肽B 规格48T/96T

FPA 人血纤肽/纤维蛋白肽A 规格48T/96T

FDP 人血纤蛋白原降解产物规格48T/96T

Fbg 人血纤蛋白原规格:48T/96T

Fibrin 人血纤蛋白规格:48T/96T

schistosoma人血吸虫规格: 48T/96T

TXB2 人血栓素B2 规格: 48T/96T

TX-A2 人血栓素A2 规格: 48T/96T

TpP 人血栓前体蛋白规格: 48T/96T

TM 人血栓调节蛋白规格: 48T/96T

CH50 人血清总补体规格: 48T/96T

ST 人血清素/血清胺规格: 48T/96T

SAP 人血清淀粉样蛋白P 规格: 48T/96T

SAA 人血清淀粉样蛋白A 规格: 48T/96T

HSA 人血清白蛋白规格: 48T/96T

HA 人血凝素规格: 48T/96T

PS 人血浆抗凝蛋白S 规格: 48T/96T

PC 人血浆抗凝蛋白C 规格: 48T/96T

GMP-140 人血浆a颗粒膜蛋白规格:48T/96T

HO-2 人血红素氧合酶2 规格: 48T/96T

HO-1 人血红素氧合酶1 规格: 48T/96T

48T/96T Hb-AGE : 人血红蛋白晚期糖基化终末产物规格:

HB-B 人血栓素A2 规格: 48T/96T

HbH 人血栓前体蛋白规格: 48T/96T

HbC 人血栓调节蛋白规格: 48T/96T

an giostatin 人血清总补体规格: 48T/96T

VWF 人血清素/血清胺规格: 48T/96T

BK 人血管舒缓激肽规格:48T/96T

ANG-R-Tie2人血管生成素受体Tie2 规格:48T/96T

ANG-R-Tie1人血管生成素受体Tie1 规格:48T/96T

ANG-4 人血管生成素 4 规格:48T/96T

ANG-2 人血管生成素 2 规格:48T/96T

ANG-1 人血管生成素 1 规格:48T/96T

ANG 人血管生长素规格:48T/96T

VCAM-1/CD106 人血管内皮细胞粘附分子1 规格: 48T/96T VEGFR-3 人血管内皮细胞生长因子受体3 规格: 48T/96T VEGFR-2 人血管内皮细胞生长因子受体2 规格: 48T/96T VEGFR-1 人血管内皮细胞生长因子受体1 规格: 48T/96T VEGF-D 人血管内皮细胞生长因子D 规格48T/96T VEGF-C 人血管内皮细胞生长因子C 规格48T/96T VEGF-B 人血管内皮细胞生长因子B 规格48T/96T VEGF人血管内皮细胞生长因子规格:48T/96T

VE-cad 人血管内皮钙粘着蛋白复合体规格: 48T/96T An giote nsi nase 人血管紧张肽酶规格:48T/96T

ACE 人血管紧张素转化酶规格:48T/96T

aGT 人血管紧张素原规格:48T/96T

AT2R-Ab 人血管紧张素H受体2抗体规格:48T/96T

AT2R 人血管紧张素H受体2 规格:48T/96T

ATH R1 人血管紧张素H受体1抗体规格: 48T/96T

elisa试剂盒

elisa试剂盒 Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM 抗体ELISA检测。 目录 1elisa试剂盒简介 2优点 3回收率 4发展 5使用方法 6制备方法 7影响 8检测原理 9操作步骤 10试剂器材 elisa试剂盒简介 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 2优点 一、高效、灵敏、特异的抗体; 二、稳定的重复性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 五、节省实验经费。

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180 ng/ml,90 ng/ml,45 ng/ml,22.5 ng/ml,11.25 ng/ml, 5.63 ng/ml,2.82 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml。 4. 检测稀释液A:1×10ml。 5. 检测稀释液B:1×10ml。 6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张 12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管 3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

血清铁浓度检测试剂盒说明书

货号:MS2802 规格:100管/96样 血清铁浓度检测试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。 测定原理: 亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。 自备实验用品及仪器: 离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。 试剂组成和配置: 试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入15mL蒸馏水充分溶解。 试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入469μL冰醋酸,加入15mL蒸馏水充分溶解。 标准液:液体×1 支(EP管),100μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。 测定: 1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到520nm,蒸馏水调零。 2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。 3. 空白管:取EP管,依次加入125μL蒸馏水,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm 测定吸光度,记为A空白管。 4. 标准管:取EP管,依次加入125μL标准液,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A标准管。 5. 测定管:取EP管,依次加入125μL血清,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧,置 于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A测定管。注意:空白管和标准管只需测定一次。 血清铁浓度计算公式: 血清铁含量(μmol/dL)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总=10× (A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) C 标准液:100 μmol/L Fe 3+ 标准液;V 总:1 dL=0.1 L。 注意事项: 1、血清铁含量少,所用器皿(EP 管)需要注意,避免被铁污染。 2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。 3. 最低检出限为1μmol/L。 第1页,共1页

转铁蛋白试验(长征医院)

便隐血转铁蛋白临床实验应用体会 宓庆梅上海市长征医院 粪便隐血试验是检测消化道出血的一个重要指标,检测方法选择的不同会直接影响判断消化道是否出血和出血的程度。目前,常规的检测方法有化学法(邻甲联苯胺法)和血红蛋白法(单克隆免疫法)。化学检测法中,易产生假阳性,并且敏感性偏底,对于消化道内的微量出血不易测出;血红蛋白法中,敏感性强,可以检测出很微量的出血情况,但是,消化道内大量出血反而会导致假阴性的结果。便隐血检测是美国最常使用的结肠癌和直肠癌普查初筛试验,也是目前唯一通过随机临床试验证实的,可以降低结肠癌和直肠癌所致死亡的检查,实施每年粪便隐血检测可以早期发现结肠癌和直肠癌的发生,可以降低30%的结肠癌和直肠癌患者的死亡率。本文对化学法、血红蛋白法和转铁蛋白法三种便潜血检测方法抗体法进行了比对试验。用单克隆胶体金显色技术,以试纸条一步法检测粪便中血红蛋白,有较高的敏感性和特异性。转铁蛋白单克隆抗体法试纸是由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、抗转铁蛋白单抗金标垫、玻璃纤维样品吸液层组成,底板中部为硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上有一条转铁蛋白单抗反应线和一条羊抗鼠多克隆抗体控制线,在底板一端端头为吸水板,另一端端头为玻璃纤维样品吸液层,硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和抗转铁蛋白单抗金标垫相互交叠连接,在抗转铁蛋白单抗金标垫上压有玻璃纤维样品吸液层。当人尿液、粪便中带有转铁蛋白抗原时,样品中转铁蛋白抗原可与抗转铁蛋白单克隆抗体金标探针发生特异结合而被抗转铁蛋白单克隆抗体识别,即发生双抗夹心特异结合,因而可测定尿液、粪便中的转铁蛋白含量。 1.材料和方法 1.1试剂: 1.1.1邻甲联苯胺试剂:邻甲联苯胺1g,溶于50ml冰醋酸和50ml无水乙醇的混合液中,置于4℃冰箱中,避光保存;3%过氧化氢液。 1.1.2粪便血红蛋白胶体金试剂盒(简称WH试纸条):万华普曼生物工程有限公司提供的万华牌“消康保”试纸条。 1.1.3转铁蛋白单克隆抗体法试剂盒:万华普曼生物工程有限公司提供的万华牌“消康保”试纸条。 1.2标本来源:本院2008年1月至3月的住院患者随机132例粪便,男81例,女51例,年龄为27岁至71岁。 1.3方法:

代谢相关蛋白质修饰在肿瘤发生发展过程中的作用及机制

项目名称:代谢相关蛋白质修饰在肿瘤发生发展过 程中的作用及机制 首席科学家:赵世民复旦大学 起止年限:2012.1至2016.8 依托部门:教育部上海市科委

一、关键科学问题及研究内容 关键科学问题 本课题将以代谢相关的蛋白质翻译后修饰为切入点,系统挖掘参与代谢酶修饰调控的乙酰化和磷酸化等修饰酶及其修饰底物,系统挖掘被代谢物调控的下游被甲基化和羟基化等修饰的蛋白;在此基础上研究其对细胞代谢的作用,作用的分子机理以及在肿瘤发生中的变化规律和生理病理意义;并通过结构生物学方法寻找通过干预修饰进而干预代谢的小分子化合物。具体地,将就如下关键科学问题开展研究: 1. 发展相关技术和研究体系,系统地挖掘代谢相关翻译后修饰的修饰酶及其底物;探索相关蛋白质修饰酶类和底物通过何种网络及分子机制进行调控。 2. 在肿瘤发生、发展过程中,代谢相关翻译后修饰如何变化,以及这些变化对于肿瘤发生发展有何病理意义。 3. 研究能否通过活性小分子化合物干预代谢相关翻译后修饰,进而干预代谢来实现肿瘤的预防与干预。 主要研究内容 我们将以项目组成员前期在代谢相关的蛋白质翻译后修饰研究为基础,从广度与深度上扩展对代谢失调引发肿瘤机理的研究。在广度方面主要系统地发现参与细胞代谢调控的翻译后修饰的修饰酶,以及被代谢物调控的下游底物蛋白和信号通路。在深度方面主要研究各种翻译后修饰调节代谢的分子机理,重点研究乙酰化

修饰参与代谢调控的机制;在代谢物调控下游翻译后修饰和信号通路的分子机理方面,我们将重点研究对组蛋白甲基化和DNA去甲基化酶的调控机理;同时,用结构生物学的策略寻找针对上述具有治疗潜力的靶分子的活性小分子化合物。 1. 代谢相关的蛋白质的修饰谱及其在肿瘤发生发展过程中的变化规律以肝癌和神经胶质瘤等癌症为模型,建立全细胞的与代谢相关的蛋白质乙酰化、磷酸化、羟基化、甲基化修饰鉴定的技术方法与平台。探讨这些肿瘤发病过程中代谢酶的乙酰化、磷酸化修饰的动态变化,以及被代谢中间物调控的下游羟基化、甲基化等蛋白底物与动态变化。 2.肿瘤发生发展过程中代谢组的变化规律及其与代谢相关修饰变化的对应关系与调控机制通过代谢组学、遗传学以及生物化学策略,比较肿瘤细胞与正常细胞中的代谢物组成特点,重点探讨代谢相关修饰改变与代谢组改变的内在联系;建立能反应肿瘤特征的代谢组谱,力争发现肿瘤特异性代谢标志物(群)。 3. 肿瘤发生发展过程中一些代谢产物作用的信号通路及对肿瘤发生发展的意义 系统地研究与肿瘤发生密切相关的糖酵解通路与三羧酸循环通路相关代谢中产物在肿瘤发生发展过程中的作用机理。重点研究 酮戊二酸( KG)及其结构类似的等代谢中间物影响各种 KG依赖的系列双加氧酶功能的分子生化机理及其对细胞信号通路的影响,包括 KG对PHD、系列组蛋白去甲基化酶以及DNA

蛋白质翻译总结

氨基酸的活化a.起始信号(AUG-甲硫氨酸密码子)和缬氨酸(GUG)极少出现i.真核生物起始氨基酸—甲硫氨酸,原核生物-甲酰甲硫氨酸 ii.SD序列:存在于原核生物起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保 守片段,与16srRNA3’端反向互补。功能将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 1)原核生物的SD序列:原核mRNA起始密码子上一段可与核糖体结合的序列。30s小亚基首先与 翻译因子IF-1(与30s结合)和IF-3(稳定小亚基,帮助其与mRNA结合位点的识别)结合,通过SD序列与mRNA模板相结合。 iii.真核生物依赖于结合5'帽,核糖体小亚基沿mRNA5'端帽子结构扫描到RBS iv.在IF2起始因子和GTP的帮助下,fMet-tRNA进入小亚基的P位,tRNA上的反密码子与mRNA密码子配对。 v.小亚基复合物与50s大亚基结合,GTP水解,释放翻译起始因子vi.翻译的起始 b.后续氨基酸与核糖体的集合:第二个氨酰-tRNA与EF-Tu.GTP形成复合物,进入核糖体的A位,水解产生GDP并在EF-Ts的作用下释放GDP并使EF-Tu结合另一分子GTP形成新的循环。i.肽键的生成:AA-tRNA占据A位,fMet-tRNA占据P位,在肽基转移酶的催化下,A位上的AA-tRNA转移到P位,P位上的起始tRNA转移至E位,与fMet-tRNA上的氨基酸生产肽键。起始RNA随后离开。 ii.移位:核糖体通过EF-G介导的GTP水解所提供的能量向mRNA模板3'末端移动一个密码子,二 肽基-tRNA完全进入P位点 iii.肽链的延申 c.当终止密码子UAA,UAG,UGA出现在核糖体的A位时,没有相应的AA-tRNA能与其结合,而释放因子能识别密码子并与之结合,水解P位上的多肽链与tRNA之间的二酯键,然后新生的肽链释放,核糖体大小亚基解体 i.肽链的终止 d.N端fMet或Met的切除i.二硫键的形成ii.特定氨基酸的修饰iii.新生肽段非功能片段的切除iv.蛋白质前体的加工 e.无义突变:DNA序列中任何导致编码氨基酸的三联密码子突变转变为终止密码子 UAA,UGA,UAG中的突变,使得蛋白质合成提前终止,合成无功能或无意义的多肽。1)错义突变:由于结构基因中某种核苷酸的变化使一种氨基酸的密码变成另一种密码。2)同工tRNA:识别携带相同氨基酸的tRNA i.校正tRNA: ii.tRNA种类 f.蛋白质的生物合成 1.翻译 2019年6月19日 19:50

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被瘦素(LEP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法)产品技术要求huayuyikang

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中铁的含量。 1.1 产品型号/规格 试剂1:1×20 ml、试剂2:1×5 ml;试剂1:1×40 ml、试剂2:1×10 ml;试剂1:2×40 ml、试剂2:2×10 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:4×10 ml;试剂1:4×60 ml、试剂2:2×30 ml;试剂1:1×80 ml、试剂2:1×20 ml;试剂1:2×80 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:5×80 ml、试剂2:5×20 ml;试剂1:3×60 ml、试剂2:1×45 ml;试剂1:6×70 ml、试剂2:3×35 ml;试剂1:5×40 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:4×80 ml、试剂2:4×20 ml;试剂1:4×50 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:8×50 ml、试剂2:2×50 ml;试剂1:8×16.8 ml、试剂2:8×4.2 ml。 1.2 划分说明 试剂1:醋酸缓冲液 0.2 mol/L 表面活性剂适量 稳定剂适量 试剂2:PAPS 2.6 mmol/L 2. 性能指标 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;中文包装标签应清晰、准确、牢固。 2.1.2 试剂1应为无色澄清液体;试剂2应为棕色液体。 2.2 净含量

不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在光径1 cm、主波长578 nm下,以蒸馏水为检测样本时,吸光度应不大于0.300 。 2.4 分析灵敏度 铁含量为30.00 μmol/L时,测定吸光度差值(△A)应大于0.080。 2.5 线性范围 铁试剂在线性范围(0~120] μmol/L内: (a)回归系数r应不小于0.990; (b)在(0~12.0 ] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不大于±1.2 μmol/L;(c)在(12.0~120]范围内,线性相对偏差应不大于±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1 重复性 变异系数(CV)均应不大于5%。 2.6.2 批间差 相对偏差(R)应不大于5%。 2.7 准确度 采用GBW09152 冷冻人血清中无机成分分析标准物质对试剂盒进行测试,相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 铁试剂盒贮存于2 ℃~8 ℃、避光环境中,有效期为12个月。有效期满后应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA检测试剂盒说明书

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA检测试剂 盒说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 樊克生物专业供应: 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)含量。 试验原理: CX3CR1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CX3CR1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将CX3CR1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合 的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CX3CR1的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗CX3CR1抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求九州泰康

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中的总铁结合力。1.1包装规格 试剂Ⅰ(R1):60mL×3、试剂Ⅱ(R2):20mL×3、试剂Ⅲ(R1):60mL×3、试剂Ⅳ(R2):20mL×3; 试剂Ⅰ(R1):60mL×2、试剂Ⅱ(R2):20mL×2、试剂Ⅲ(R1):60mL×2、试剂Ⅳ(R2):20mL×2; 试剂Ⅰ(R1):60mL×1、试剂Ⅱ(R2):20mL×1、试剂Ⅲ(R1):60mL×1、试剂Ⅳ(R2):20mL×1; 试剂Ⅰ(R1):45mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×1、试剂Ⅲ(R1):45mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×1; 试剂Ⅰ(R1):90mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×2、试剂Ⅲ(R1):90mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×2。1.2主要组成成分

2.1 外观 试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;试剂均为澄清溶液,无未溶解物。2.2 装量 试剂瓶内试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长A600nm,记录吸光度值,试剂空白吸光度(R1+R2)不超过0.80A,试剂空白吸光度(R3+R4)不超过0.80A。 2.4 分析灵敏度 Fe:测试浓度100μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 UIBC:测试浓度50μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 2.5 线性 2.5.1铁离子: 在[1,120]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,120]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%; 2.5.2不饱和铁: 在[1,80]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,80]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%。 2.6 重复性 2.6.1批内重复性

铁蛋白测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求furuirunkang

铁蛋白测定试剂盒(化学发光免疫分析法)适用范围:用于体外定量测定人血清中铁蛋白的浓度水平。 1.1规格 96T。 1.2 组成

2.1 外观 a)包装标签应清晰、无磨损; b)试剂盒各组份应齐全、包装完好,液体无渗漏。 2.2 线性 本试剂盒线性范围为:[0.1 ,600] ng/mL。线性相关系数r≥0.9900。 2.3空白限 不大于0.1ng/mL。 2.4准确度 将参考物质作为样本进行检测,其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。 2.5重复性 重复检测质控品Q1和 Q2各10次,其批内变异系数(CV)应不大于10%。 2.6批间差 用三个批号的试剂盒检测质控品Q1和 Q2,三批号试剂盒之间的批间变异系数(CV)应不大于15%。 2.7质控品赋值有效性 质控品测量值应在质控范围内。 2.8特异性 2.8.1与甲胎蛋白的交叉反应 检测浓度为600 ng/mL的甲胎蛋白, 交叉反应率应小于1%。 2.8.2与转铁蛋白的交叉反应 检测浓度为600 ng/mL的转铁蛋白, 交叉反应率应小于1%。 2.8.3与尿微量白蛋白的交叉反应 检测浓度为600 ng/mL的尿微量白蛋白,交叉反应率应小于1%。 2.9稳定性 规定产品2℃~8℃储存,有效期6个月。取到效期后的样品检测准确度、空白限、线性、重复性,应符合2.2~2.5的要求。 2.10溯源性

根据《GB/T 21415—2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源,赋值过程以及不确定度等内容,校准品溯源至中国食品药品检定研究院标准品(150540)。

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试 剂盒 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒 产品规格:96T/48T。 供应商:上海乔羽生物有限公司 上海乔羽有限公司,有elisa试剂盒,抗体,培养基 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒其主要特点如下 专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。 灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 1.标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL 样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。 2.20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒试剂的准备: 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 ELISA试剂盒的优势: 全面——混合8 种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。

铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求lepu

铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中铁的浓度。1.1规格 试剂1: 1×30mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×60mL,试剂2: 2×20mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 1×40mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 1×20mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 2×10mL; 试剂1:3×28mL,试剂2:3×7mL; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L; 试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 2.1 净含量

应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1应为无色或浅色澄清液体,试剂2应为浅色或橙色澄清液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 在600nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.5; 2.4 分析灵敏度 测试25μmol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.005. 2.5 准确度 用参考物质(GBW09152)对试剂(盒)进行测试,相对偏差不超过±5%。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过5%。 2.7 线性 2.7.1在[1,100]μmol/L 区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2[1,8)μmol/L区间内绝对偏差不超过±0.64μmol/L;[8,100]μmol/L区间内相对偏差不超过±8%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差≤6%。 2.9 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

血红蛋白转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求wanhuapuman

血红蛋白/转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法) 适用范围:该产品用于体外定性检测人体粪便样本中的血红蛋白和转铁蛋白的含量。 1.1包装规格 24人份/盒。 1.2 主要组成成分 在血红蛋白检测条和转铁蛋白检测条的基础上外加筒形状的聚苯乙烯塑料外壳制成。血红蛋白检测条主要由塑料板,吸水板,硝酸纤维素膜,胶体金,吸水纸组成;硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线(C线)和包被有鼠抗人血红蛋白单克隆抗体的反应线1(T线)组成;胶体金由鼠抗人血红蛋白单克隆抗体2标记制成;转铁蛋白检测条主要由塑料板,吸水板,硝酸纤维素膜,胶体金,吸水纸组成;硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线(C线)和包被有鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体的反应线1(T线)组成;胶体金由鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体2标记制成。 2.1 外观 外观整洁完整、无破损、无污染;材料附着牢固、内容物齐全。包装完整、标签清晰。 2.2 宽度 膜条应宽于2.5mm。 2.3 移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.4 临界值及重复性 2.4.1 分别检测含被测物相应检出限浓度(见表1)的阳性质控品各20次,其结果阳性率≥95%。 2.4.2 分别检测含被测物相应阴性检测浓度(见表1)的阴性质控品各20次,其结果阴性率≥95%。 表1 被测物检出限检测浓度点

2.5 分析特异性 检测含有宣称不产生交叉反应的最高浓度/水平的干扰物质(详见表2)结果应不出现阳性。 表2 常见的交叉反应源 2.6 批间差 抽取三个批次的试纸条各20人份,分别按临界值及重复性检测方法检测,阴性结果符合率应≥95%,阳性结果符合率应≥95%。 2.7 HOOK效应 检测2000μg/ml的人血红蛋白阳性质控品及400μg/ml的转铁蛋白阳性质控品,结果应均不出现阴性。 2.8 稳定性 检测试纸条在4℃-30℃避光保存36个月后,产品的性能应符合2.4,2.5,2.7的要求。

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书

翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书 本试剂仅供研究使用标本:体液 翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书试验原理: BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验( ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子 ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物, 然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关 系。 翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书自备材料 1?蒸馏水。 2?加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 3?振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。 2?实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3?不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书操作注意事项 1 ?试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2?实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3?不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4?使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 5?使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6?洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)-ELISA试剂盒说明书

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号:E-EL-M0314 (本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!) 声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Col I浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 *: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)

检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Col I抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Col I会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Col I抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Col I抗体与结合在包被抗体上的小鼠Col I结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Col I浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Col I的浓度。 标本收集: 1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂标本。 3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。 4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5.其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 (具体处理方法可参考:https://www.360docs.net/doc/8a11819372.html,/news2.asp?tid=477 ) 6.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 7.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融, 1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做 预实验,以确定稀释倍数)。 试验所需自备物品: 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 3.37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.吸水纸

组织铁含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

组织铁含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4350 规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体55mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前配制,加入7.5mL蒸馏水充分溶解,试剂一变黑后则不能使用; 试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前配制,加入375μL冰醋酸,加入12mL蒸馏水充分溶解;溶解后4℃保存一周; 标准液:液体3mL×1瓶,1μmol/mL Fe3+标准液,4℃保存;临用前稀释8倍即0.125μmol/mL的标准溶液进行实验,现用现配。 产品说明: 铁是人体必须的微量元素之一,它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分,帮助氧的运输,促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱,并影响机体的免疫功能。 亚硫酸钠还原Fe3+生成Fe2+,Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长吸光度即可计算铁含量。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿、冰和蒸馏水。 测定操作: 1、样本处理:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。4000g4℃离心10分钟,取上清。 2、操作步骤: (1)可见分光光度计预热30min,波长调至520nm。蒸馏水调零。 (2)加样表: 第1页,共2页

加入试剂(μL)空白管测定管标准管蒸馏水400-- --400 0.125μmol/mL标准 液 样本-400- 试剂一200200200 试剂二400400400 混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却;加入200μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液800μL,加入1mL玻璃比色皿,于520nm立即测定吸光度,分别记为A空白管,A测定管,A标准管,计算ΔA标准=A标准管-A空白管,ΔA测定=A测定管-A空白管。 3、组织铁含量计算: (1)按组织鲜重计算: 组织铁含量(μg/g鲜重)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷W = 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W (2)按组织蛋白浓度计算 组织铁含量(μg/mg prot)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷(Cpr×V提取) = 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。 C标准液:0.125μmol/mL Fe3+标准液;55.845:Fe的相对分子质量,55.845μg/μmol;Cpr:样品蛋 白浓度,mg/mL;W:样品质量,g;V提取:提取液体积,1mL。 注意事项: 1、当ΔA大于1时,建议将样品用提取液稀释后进行测定;ΔA过小时,可增加酶促反应时间(1h或2h)或 增加加入的样品体积来测定。 2、试剂一溶解变黑后则不能使用;试剂二有毒性,做好防护措施。 第2页,共2页

转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求wanhuapuman

转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法) 适用范围:该产品用于体外定性检测人粪便样本中转铁蛋白的含量。 1.1规格和型号 条型:1.筒装: 1)25人份/筒,12筒/盒 2)25人份/筒,24筒/盒 2.袋装: 1人份/袋;100人份/盒 板型:1)1人份/袋,25人份/盒 2)1人份/袋,40人份/盒 1.2主要组成成分 转铁蛋白检测试纸条主要由塑料板,吸水板,硝酸纤维素膜,胶体金,吸水纸组成;硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线(C线)和包被有鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体1的反应线(T线)组成;胶体金由鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体2标记制成。板型产品主要由卡塞和转铁蛋白检测试纸条组成。 2.1外观 外观整洁完整、无破损、无污染;材料附着牢固、内容物齐全。包装完整、标签清晰。 2.2物理检查 膜条应宽于2.5mm,液体移行速度应不低于20mm/min。 2.3临界值及重复性 本产品临界值为10ng/mL。 检测浓度为40ng/mL的转铁蛋白质控品(配制方法见附录A),平行检测20次,检测结果应一致,显色度均一,结果的阳性率应≥95%。 检测浓度为5ng/mL的转铁蛋白质控品(配制方法见附录A)平行检测20次,检测结果应一致,显色度均一,结果的阴性率应≥95% 2.4特异性

检测浓度为200μg/mL的牛转铁蛋白和200μg/mL的狗转铁蛋白,检测结果应为阴性。 2.5批间差 取3个批号的产品,各40人份,按照2.3的方法检测,结果应符合要求。 2.6 HOOK效应 检测浓度为400μg/mL的转铁蛋白质控品(配制方法见附录A),检测结果应为阳性。 2.7稳定性 产品有效期为24个月,在4℃~30℃条件下放置有效期后2个月,产品性能应符合2.1 ~2.3的要求。

生物文献翻译《人类钙黏着蛋白11是一种促细胞凋亡的肿瘤抑制因子癌症中通过Wntb蛋白信号传递沉默调控细胞》

人类钙黏着蛋白11是一种促细胞凋亡的肿瘤抑制因子,在共同的癌症中通过Wnt/b-连接蛋白信号传递和沉默调控细 胞stemness 16q21-Q22的遗传变异,6-钙黏着蛋白集群的位点,是频繁的涉及多种癌症,暗示这之中存在关键的肿瘤抑制基因(TSGs)。采用1MB阵列比较基因组合杂交(aCGH),我们精确地定位了一个小的半合子删除位点(B1MB)在16q21-22.1,其中包含一个单一的钙黏着蛋白-11基因(CDH11,OB-cadherin)。CDH11是广泛表达在人类正常成年和胎儿组织中,同时它的沉默和启动子CpG甲基化经常发现在肿瘤细胞株中,但是不会再正常的上皮细胞中永生。异常甲基化也经常发生在多种肿瘤中。CDH11沉默可能被颠倒由于药理化或者基因去甲基化,表明一种遗传学的机制。CDH11的异位表达强烈地抑制了肿瘤基因和诱导肿瘤细胞凋亡。此外,CDH11被发现是抑制Wnt/b-钙黏着蛋白和AKT/Rho A信号,以及肌动蛋白应力纤维的形成,从而进一步抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭。CDH11也抑制epithelialto间质转型及下调干细胞标记。因此,我们的工作,确定了CDH11作为一种功能性肿瘤抑制因子和一个WNt/b-钙黏着蛋白和AKT/Rho A信号的重要拮抗剂,在共同的癌症中频繁的遗传性失活。 背景介绍: 使用微卫星标记的各种基因分析已经证实了在多种肿瘤中16q的杂合性频繁流失,包括鼻咽癌,肝癌,乳腺癌,肺癌,前列腺癌和胃癌等。一个决定性的缺失区域已被定位在16q22.1-16q24.3上,暗示候选癌症的抑制基因的出现(TSG)。几个候选的TSGs已经被确定在这一区域了,包括WWOX,CBFA2T3,ATBF1,CMTM3和E-钙黏着蛋白。钙粘素是构成细胞与细胞之间分子链接的重要组成,通过Ca2p依赖的同种相互作用介导实现细胞间粘附的。通过形成二聚体,钙粘素能够聚集,通过一个拉链机制而实现的,而他们的细胞内区域对于肌动蛋白细胞骨架是一个固定区域通过a-钙粘素和b-钙粘素。这些相互作用在维护关键角色组织架构和细胞极性以及限制在肿瘤细胞中运动和增值中起到重要作用,从而导致细胞抑制。六种传统的钙黏着蛋白家族成员,包括CDH1,CDH3,CDH5,CDH8,CDH11和CDH13是位于16q22.1-16q24.3上,作为一个称为6-钙黏着蛋白集群。有些钙粘素已经被确定为功能性的肿瘤抑制物,例如CDH1和CDH13/H-钙粘素,参与细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。 TSGs遗传学改变,包括启动子CpG甲基化和组蛋白修饰,经常参与肿瘤的发生和发展。值得注意的是,在肿瘤CDH1和CDH13遗传学上的沉默已经在多种上皮性肿瘤和造血系统恶性肿瘤中有所报道,表明启动子CpG甲基化介导的沉默是一个重要的监管机制在肿瘤发生破坏的钙黏着蛋白家族成员中。之前我们已经进行了1MB阵列比较基因组杂交的肿瘤细胞株(aCGH)的分析,并确定为唯一的基因CDH11位于16q22.1检测在1MB半合子缺失。 因此,我们推测,在肿瘤发生中有牵连,CDH11可能是一个重要的抑癌因子。目前,我们的遗传学上和功能上的研究表明,经常有CDH11是灭火多个癌基因的启动子甲基化和作为一种肿瘤抑制基因而起作用,诱导肿瘤细胞凋亡和抑制细胞运动侵袭,以及细胞的干性,并通过Wnt/b-catenin和AKT/Rho信号。 实验结果: 1、在16q21-22.1上CDH11的识别作为一个候选TSG

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