ABO血型检测(玻片法)

ABO血型检测(玻片法)
ABO血型检测(玻片法)

3.ABO红细胞血型检测

波片法

原理:

根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型、及O型四种。可利用红细胞凝集试验即用已知抗A或抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。

ABO抗体有天然和免疫两种。天然抗体是指未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体。人在出生前尚未产生抗体,一般在出生几个月后才开始形成自己的抗体;到5-6岁时,具有较高的效价。

样本:

在操作前应先看说明书,有的厂商推荐用全血,有的厂商指定用盐水、血清或血浆悬浮的浓度较低的红细胞悬浮液。

试剂:

有卫生部颁发的生产许可证和批准文号的厂家生产的经中国药品生物制品检定所批批检定合格,并贴有防伪标签的试剂。

试剂盒组成:

1.有生产许可证的单克隆或多克隆抗A抗原抗体。

2.有生产许可证的单克隆或多克隆抗B抗原抗体。

3.有生产许可证的单克隆或多克隆抗A、B抗原抗体。

4.玻璃载波片或划分成小格的检测板。

5.蘸试剂棒。

操作步骤:

1.取清洁玻片,标明抗A、抗B、抗A、B,

2.在标记好的洁净波片上滴一滴抗-A

3.在另一标记好的洁净波片上滴一滴抗-B。

4.在每一波片的试剂上滴一滴已混匀的要检测的红细胞悬浮液(在盐水、血清或血浆)。

5.每一块波片用一个洁净的试剂棒将试剂和红细胞充分混匀,使混合物的面积大约为20mm x 40mm。

6.轻微倾斜波片2分钟。不要把波片放于发热的表面上。

7.判断,解释并记录所有的反应结果。

结果判读:见表:

红细胞的ABO定型

正向定型结果判读

抗A 抗B抗A,B

---O

+ -+ A

-+ + B

+ + + AB

有明显的凝集块为阳性结果,2分钟后仍为均匀的红细胞悬液则为阴性结果。

注意:

1.波片法较试管法更易使操作者接触样本,工作人员必须阅读厂商说明书上的安全措施

2.波片法不适用于患者和供者血清中的抗体。

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项 一. 原理 根据红细胞上有或无 A抗原或B抗原,将血型分为A型、B型、 AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABC血型。所谓正定型,是用已知抗一 A和抗一B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗一 A或抗一B。 二. 试剂和材料 1.抗一A(B型血)、抗一B(A型血)及抗一A十B(O型血)分型血清(制备方法见本节附注) 2.5%A B及O型试剂红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注; 3.受检者血清; 4.受检者 5%红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注。 三. 方法 1 .试管法 (1)取洁净小试管3支,分别标明抗一A、抗一B和抗一A十B,用滴管分别加抗一A抗一B和抗一A十Bo分型血清各I滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者 5%红细胞盐水悬液 1 滴,混和。 (2)另取洁净小试管3支,分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清I滴于试管底部,再分别以滴管加入A B和O型5% 试剂红细胞悬液I滴,混和。 (3)立即以 1000r /min 离心 1mino

(4)将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。 (5)观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、 B亚型、类B或cisAB的发现。 (6)凝集强度判断标准 2.玻片法 (1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明抗 -A、抗-B和抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清I滴于标明的方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1滴,混和。 (2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明 A 细胞、B细胞和0细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管

ABO血型鉴定(生理盐水法).

ABO血型鉴定(生理盐水法) 1. 原理 根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A型红细胞膜上含有A抗原,B型红细胞膜上含有B抗原,AB 型红细胞膜上含有A、B抗原,抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用已知的抗A、抗B试剂与受检者的红细胞混合时,与抗A 试剂发生凝集者即为A型,与抗B分型试剂发生凝集者即为B型,与抗A、抗B试剂均发生凝集者即为AB型,与抗A、抗B试剂均不凝集者即为O型。所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。 2. 标本采集 2.1 标本种类:新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。 2.2 标本要求: 2.2.1 抗凝剂:如用抗凝血,多主张用EDTA K2(㎎/dL)抗凝。 2.2.2 用手指末梢血作血型检测时,最少样品量为100ul,如手指有 冻疮,则主张采耳垂血。 3. 标本储存:2小时内完成实验,室温放置下不超过8小时,4℃-8℃ 保存不超过48小时。 4. 标本运输:室温运输 5. 标本拒收标准:细菌污染、溶血标本不能作测定 6. 试剂 6.1 试剂名称:ABO血型检测试剂 6.2 试剂生产厂家:长春博德生物技术有限责任公司上海血液生物医药有限责任公司 6.3 试剂组成 试剂1:抗A分型试剂(蓝色),效价1:128,2℃-8℃避光保存,室温放置不宜过久。 试剂2:抗B分型试剂(黄色),效价1:128,2℃-8℃避光保存,室温放置不宜过久。 试剂3:5%A、B及O型红细胞盐水悬液,自制。配制方法:分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞,经盐水洗涤3次,以压积红细胞配成不同浓

血型鉴定

ABO血型试验(正反定型) 一原理 利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定ABO血型。 二试剂和材料 1.抗-A(B型血),抗-B(A型血)及抗-A+B(O型血)分型血清。2.5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。 3.受检者血清。 4.受检者5%红细胞盐水悬液。 三操作(玻片法) 1.取清洁玻片一张,用蜡笔划成方格,标明抗-A、抗-B和抗-A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A+B分型血清1滴于方格内,再加受检者2%红细胞悬液1滴,混合。 2.另取清洁玻片一张,用蜡笔划成方格,标明A细胞、B细胞和O细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。 3.将玻片轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连续约15min,以肉眼观察有无凝集反应。也可用低倍镜观察结果。 四结果判定:见表1 表1 ABO血型正反定型结果 五注意事项 1.试管、滴管和玻片必需清洁干燥,防止溶血。 2.操作中应先加血清后加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。 3.为防止冷凝集现象的干扰,一般在室温内进行试验。

4.标准抗血清必须符合标准,不要长期放在室温,以免污染和孳长细菌,等渗生理盐水必须等渗、新鲜、无微生物孳生。 5.观察结果要仔细,微弱凝集、或肉眼观察未凝集的标本,要用显微镜观察。 注意特异性凝集与继发性血液凝固、串钱状形成和异物的区别。 六血型鉴定中常见的假阳性反应 1.红细胞串钱形成:红细胞相互重叠,连接成串,象一串重叠的钱币,称为串钱形成,又称假凝集。可见于血浆蛋白紊乱、血沉加快的各种病例或实验中温度过高,作用时间过长,致水分蒸发,血清浓缩。可在观察结果前,再加等渗盐水1滴,彻底混匀,串钱状红细胞因血液稀释而散开。也可用高倍镜仔细观察凝集块的形态和用洗涤后和红细胞配制悬液。 2.寒冷凝集:在较低温度出现的凝集称为寒冷凝集。多数正常人的血清在0~2oC 时能凝集本人的红细胞,又称自家凝集。这种凝集是可逆的,在0-2oC时作用最强,20oC时可消失。但在支原体肺炎、自免溶贫、肝硬化、系统性红斑狼疮等患者血清中,可以出现高效价的病理性自身冷凝集抗体,能与本人及其它各型人的红细胞发生凝集。其最适反应温度是低温,一般在25-30oC凝集作用即减弱。克服方法:被检红细胞在配制悬液前,先用37oC等渗生理盐水洗涤,必要时试验操作可在37oC条件下进行,或在37oC水浴中反复观察几次,报告时要注明有寒冷凝集现象。 七血型鉴定中常见的假阴性反应 1.标准血清效价太低亲和力不强: 抗血清保存方法不当或贮藏时间过长而致 效价减弱是最常见原因。 2.被检红细胞敏感度过低: 如新生儿红细胞抗原形成不足,老年人红细胞敏 感性下降,或红细胞标本贮藏时间过久(红细胞敏感性在血块中下降相对较快),易将A亚型错定为O型。 3.红细胞悬液过浓或过淡: 抗原抗体比例适当时反应最明显。如红细胞悬液 液过浓时,标准血清中的抗体全部被吸收,呈后带现象,以致凝集不明显或不凝集。红细胞浓度太淡,抗体浓度相对增高,呈前带现象而不易凝集,或凝集很弱,未被发现。克服方法: 按规定配制红细胞悬液,悬液太浓时可多加1滴血清,转动玻片,增加红细胞接触的机会.微弱凝集必须用显微镜观察。 4.溶血反应: 红细胞抗原与相对应的免疫抗体相遇,在补体存在时就可发生 溶血。溶血反应与凝集反应在血型鉴定上意义相同,都是抗原抗体反应。克服方法: 玻片法看结果时,片底最好衬以白纸,溶血时液滴边缘呈透明红色,试验前后两次镜下观察,可发现红细胞减少或消失。作血型发现溶血,要换好的等渗盐水和洗涤后红细胞重新配制悬液来作血型鉴定。

ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程 1.目的: 为准确鉴定ABO血型 2.要求: 要求全科人员熟练掌握原理及操作,对有疑问的结果能够做出解释及妥善解决。 3.原理: 根据红细胞上有无A抗原和/或B抗原,将血型分为A型、B型、O型和AB型四种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO 血型。正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原和/或B抗原;反定型是用已知的A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A和/或抗B。反定型中使用O细胞是为了检测抗A、抗B以外的不规则抗体。 4.试剂和材料 4.1 A、抗B分型血清,效价1:128以上 4.2 2%~5%A、B、O标准红细胞。 4.3 受检者血样 5.方法.(试管法) 5.1 取洁净小试管2支,分别标明抗A、抗B,分别滴加抗A、抗B分型血清1滴于试管底部,再分别加入受检者2%~5%红细胞1滴,混合。 5.2 另取洁净小试管3支,标明A C、B C、O C,各加入受检者血清2滴

于试管底部,再分别加入A、B和O型2%~5%标准红细胞1滴,混匀。 5.3 以1000g离心15秒,将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,以肉眼观察有无凝集或溶血现象。观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,这将有助于A、B亚型、类B、或CisAB的发现。★ 6.结果判断: 血型抗A血 清 抗B血 清 A细 胞 B细 胞 O细胞 A + - - + - B - + + - - O - - + + - AB + + - - - 7.正反定型不一致的原因: 有技术问题或红细胞和血清本身问题,常见者有以下数种: 7 1 分型血清效价太低,亲和力不强。 7.2 红细胞悬液浓度过高或过低,抗原抗体比例不适当(出现前带或 后带现象),使反应不明显误判为阴性反应 7.3 受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于 白血病或恶性肿瘤)以及类B或CisAB等。 7.4 受检者血清蛋白紊乱(高球蛋白血病)或实验时温度过高,常引起红细胞呈缗钱状排列。 7.5 受检者血清中缺乏应有的抗A或抗B抗体,如丙种球蛋白缺乏

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项 一.原理 根据红细胞上有或无A抗原或B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。 二.试剂和材料 1.抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清(制备方法见本节附注) 2.5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注;3.受检者血清; 4.受检者5%红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注。 三.方法 1.试管法 (1)取洁净小试管3支,分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B,用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。 (2)另取洁净小试管3支,分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B和O型5%试剂红细胞悬液l滴,混和。 (3)立即以1000r/min离心1min。

(4)将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。 (5)观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 (6)凝集强度判断标准 2.玻片法 (1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明抗-A、抗-B和抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1滴,混和。 (2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明A 细胞、B细胞和O细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管

ABO血型鉴定操作规程(试管法)

宁晋县中西医结合医院ABO血型鉴定操作规程 一.项目名称ABO 血型鉴定(正定型) 二.方法试管法 三.检验原理根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,以及血清中有无抗A或(和)抗B抗体,可以将红细胞血型分为A型、B型、O型和AB型。根据抗A和抗B抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,可以鉴定ABO血型。 四.试剂上海血液生物医药有限公司 抗A血型定型试剂和抗B血型定型试剂(单克隆抗体) 五.标本采集抗凝或不抗凝的末梢血或静脉血均可,用生理盐水做成2-5%红细胞悬液六.操作 1 取试管2支并分别标注抗A和抗B。 2 抗A试管中加入抗A试剂一滴,在抗B试管中加入抗B试剂一滴。 3 在抗A、抗B试管中分别加入受检者2-5%的红细胞悬液一滴,混匀。 4 用离心机3400离心15秒。 5 检验是否有溶血(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞 再悬浮。 6 观察凝集情况,并记录结果。必要时借助显微镜。 7 许多红细胞亚型(如Ax)能在抗AB试剂的盐水中凝集,但与抗A不凝,在室温(23±3℃)中放置几分钟,可以增强反应,但放置时间不宜超过30分钟。 8 检验结果的解释 ABO血型反应格局表 正定型 血型抗A试剂抗B试剂 + - A - + B - - O + + AB 七.检验方法的局限性 与反定型一起进行,正反定型不一致须进一步检查。 八.注意事项 1 对含有较多自身冷凝剂素的受检者,需要37℃的生理盐水溶液洗涤受检者红细胞2-3 次,去除吸附在红细胞上的冷凝集素,然后在鉴定血型。 2 新生儿的血样中抗体含量较低,抗原发育不完全。同时可能含有母亲血液中的抗A 或抗B抗体,可能导致假阳性或假阴性的出现。 3 出现ABO正反定型不符,须查明原因并解决问题后在记录结果。

血型测定实验报告

. ..血型测定实验报告 一、实验目的: 学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象,了解抗原抗体反应。 二、实验原理: 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中,红细胞膜上抗原分A和B两种抗原,而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B 抗体,则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清(含有抗B抗体)与标准B型血清(含有抗A抗体)中,观察有无凝集现象,从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统,根据红细胞膜上是否含A、B 抗原而分为A、B、AB、O四型。(见表4-3-1-1) 三 消毒采血针;载玻片;消毒棉签;抗A、抗B血型定型试剂;75%乙醇;受检者血液四、实验步骤 (1)取双凹玻片一块,用干净纱布轻拭使之洁净,在玻片两端用腊笔标明A及B,并分别各滴入A及B标准血清一滴。 (2)细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴,加入含1ml生理盐水的小试管内,混匀,即得约5%红细胞悬液。采血时应注意先用75%酒精消毒指尖或耳垂。 (3)用滴管吸取红细胞悬液,分别各滴一滴于玻片两端的血清上,注意勿使滴管与血清相接触。 (4)竹签两头分别混合,搅匀。 (5)10~30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象,肉眼不易分辨时,则在低倍显微镜下观察,如有凝集反应,可见红细胞聚集成团。 (6)判断血型根据被试者红细胞是否被A,B型标准血清所凝集,判断其血型。 五、实验结果: 我们组本次实验中,载玻片1左边为抗B型定型试剂,呈淡红色,未发生凝聚;右边为抗A 型定型试剂,血液在试剂中凝结,试剂较清亮。该受试者1血型为A。 载玻片2左右边的试剂内的血液皆不出现凝结现象,受试者2为O型血。 六、实验讨论: 1.实验中要分清牙签,不要用一牙签一端同时在抗A血清和抗B血清中搅拌,以免造成抗体试剂不纯。 2.实验中我们组发现15分钟后没有出现血凝现象,可用牙签轻轻搅拌一会儿,有些载玻片上就不现了血块,但有些经搅拌后仍不出现血凝现象,表示确实不含相应的抗原。

血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤

血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤 一.血型鉴定 1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型 试管、患者RhD定型试管。 2.标本准备分离患者的血浆,取一滴压积红细胞,三次洗涤,制备患者2%-5%红细胞悬 液。 3.加样 ABO正定型:1滴(50ul)抗A、抗B试剂加1滴(50ul)患者红细胞悬液。 ABO反定型:1滴(50ul)患者血清加1滴(50ul)反定型试剂红细胞。 RhD定型:1滴(50ul)抗D血清加1滴(50ul)患者红细胞悬液。 4. 结果判断 离心(2档):轻摇试管,肉眼观察有无凝集,记录ABO、RhD血型结果。 二.不规则抗体筛查(生理盐水法+凝聚胺法) 1.排管标记01、02、03及自身对照管 2.加样各试管分别加入相应的患者血清2滴(100ul)及筛选细胞1滴(50ul)。 3.结果观察 离心(2档),观察结果 先看上清液有无溶血,轻轻混匀,肉眼观察有无凝集,结果判断并记录。 各试管分别加入低离子介质0.65ml,轻轻混匀(参照试剂说明书) 各试管再分别加凝聚胺溶液2滴(100ul)混匀,离心 先观察上清液有无溶血 弃去上清液,留约0.1ml,轻轻混匀 肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验) 各试管分别加入重悬液2滴(100ul),轻轻混匀 肉眼观察凝集是否在1min内消失 显微镜检查 三.交叉配血试验(生理盐水法+凝聚胺法) 1.标本准备 分离供血者血浆与红细胞 三次洗涤,制备供血者2%-5%红细胞悬液 2.排管标记 排管,主侧、次侧及自身对照管 3.加样 各试管分别加入相应的备检血清2滴(100ul)及2%-5%备检红细胞悬液1滴(50ul)4. 结果观察 离心(2档),观察结果 先看上清液有无溶血 轻轻混匀,肉眼观察有无凝集 结果判断并记录 各试管分别加入低离子介质0.65ml,轻轻混匀(参照试剂说明书) 各试管再分别加凝聚胺溶液2滴(100ul)混匀,离心 先观察上清液有无溶血 弃去上清液,留0.1ml,轻轻混匀

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程(1)(1)

疑难血型鉴定及交叉配血处 理流程(1)(1) -标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程 一、正反定型不一致 1、重复试验(严格正规操作)。 2、重新取血(以纠正污染或弄错标本造成的不符),溶血标本不能用于合血。 3、洗涤红细胞后进行以下试验(正反定型凝集低于2+的,应首先怀疑是由于亚型或抗原 抗体活降低引起。) 1)、用自身血清、红细胞做定型对照,检验自身有无完全抗体。 2)、用O型红细胞做反定型对照,确认是否存在ABO系统以外完全抗体。 3)、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型: ①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞,但与抗H的凝集强度高于A1细胞(3+ 以上); ②A亚型(特别是A2中约有1-8%会产生抗A1),与抗A1基本不发生凝集。 ③用抗AB(O型血清或血浆)是因为它的抗A效价较高,与弱A和弱B抗原亲和力强。 4)、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在(A亚型中有部份会产生抗A1,能与A1发生凝集,但不与A2凝集。) 5)、询问病史,判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误,可延长反应时间,或用灵敏度更高的血型卡做反定型。 6)、被检红细胞做直抗(观察有无被抗体致敏的情况),若为阳性,应将细胞放散至阴性后再定血型。 4、若还不能确定血型,应增加血型物质的检测(如唾液等)。 二、交叉配血不合 (一)主侧端不相合 1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。 2、病人血清中存在同种抗体,与供血者红细胞上的相应抗原反应。 3、供血者红细胞上已经包被了抗体,导致抗球蛋白试验阳性。 4、病人血清不正常,如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集,血清中存在高分子聚 合物的血浆扩容剂引起假阳性。 5、试验系统被污染。 (二)次侧端不相合 1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。 2、病人与供血者的ABO血型不相合。 3、病人的红细胞已经包被了抗体,直接抗人球蛋白试验阳性。 4、抗筛阴性,而次侧不合多由自身抗体引起(此是抗人球配血不合,而聚凝胺配血通过可 输血)。 (三)配血不合的主要因素 1、血型是否正确。 2、是否有自身抗体。 3、是否有同种异体抗体。

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

一.原理 根据红细胞上有或无A抗原或B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。 二.试剂和材料 1.抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清(制备方法见本节附注) 2.5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注;3.受检者血清; 4.受检者5%红细胞盐水悬液,制备方法见本节附注。 三.方法 1.试管法 (1)取洁净小试管3支,分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B,用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。 (2)另取洁净小试管3支,分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B和O型5%试剂红细胞悬液l滴,混和。 (3)立即以1000r/min离心1min。 (4)将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以内眼观察有

无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。 (5)观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 (6)凝集强度判断标准 2.玻片法 (1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明抗-A、抗-B和抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1滴,混和。 (2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明A 细胞、B细胞和O细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程 一、正反定型不一致 1、重复试验(严格正规操作)。 2、重新取血(以纠正污染或弄错标本造成的不符),溶血标本不能用于合血。 3、洗涤红细胞后进行以下试验(正反定型凝集低于2+的,应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。) 1)、用自身血清、红细胞做定型对照,检验自身有无完全抗体。 2)、用O型红细胞做反定型对照,确认是否存在ABO系统以外完全抗体。 3)、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型: ①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞,但与抗H的凝集强度高于A1细胞(3+以上); ②A亚型(特别是A2中约有1-8%会产生抗A1),与抗A1基本不发生凝集。 ③用抗AB(O型血清或血浆)是因为它的抗A效价较高,与弱A和弱B抗原亲和力强。 4)、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在(A亚型中有部份会产生抗A1,能与A1发生凝集,但不与A2凝集。) 5)、询问病史,判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误,可延长反应时间,或用灵敏度更高的血型卡做反定型。 6)、被检红细胞做直抗(观察有无被抗体致敏的情况),若为阳性,应将细胞放散至阴性后再定血型。 4、若还不能确定血型,应增加血型物质的检测(如唾液等)。 二、交叉配血不合 (一)主侧端不相合 1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。 2、病人血清中存在同种抗体,与供血者红细胞上的相应抗原反应。 3、供血者红细胞上已经包被了抗体,导致抗球蛋白试验阳性。 4、病人血清不正常,如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集,血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂 引起假阳性。 5、试验系统被污染。 (二)次侧端不相合 1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。 2、病人与供血者的ABO血型不相合。 3、病人的红细胞已经包被了抗体,直接抗人球蛋白试验阳性。 4、抗筛阴性,而次侧不合多由自身抗体引起(此是抗人球配血不合,而聚凝胺配血通过可输血)。 (三)配血不合的主要因素 1、血型是否正确。 2、是否有自身抗体。 3、是否有同种异体抗体。

临床血型鉴定、交叉合血及订血流程

第一部分血型鉴定 一、主要流程 离心→核收→登记→鉴定→复核→报告 二、详细流程及操作步骤 1.接收并检查标本是否合格(有无凝块,条码是否清晰完整等),若不合格则联系临床医生处理并登记; 2.3000RPM离心5分钟,使红细胞与血浆分离; 3.将标本核收入LIS系统中“戴安娜手工合血”项目下,并依次编号; 4.登记:在“血型鉴定原始记录本”上登记病人信息和编号; 5.检测前准备: (1)红细胞悬液配制:取软管,加入1ML生理盐水,再加入10UL红细胞后混匀待用; (2)反定型准备:取两只软管,分别标记“反A/反B”及编号,并分别加入混匀后的 A1\B标准红悬一滴; 6.检测: (1)正定型:取正定型鉴定卡片并标记病人姓名,检测日期和编号,撕开铝箔,每孔加 入50UL上述制备并混匀好的红悬,卡式离心机离心9分钟后观察结果; (2)反定型:向上述制备并混匀好的“反A\反B”管中每管加入100UL待检者血浆, 混匀静置1分钟后,3000RPM离心1分钟后观察结果; 7.结果判读:先以反定型判读血型,再以正定型进行验证 (1)反定型:于灯光下轻轻摇晃试管,出现絮状物表明有凝集,判定方式与正定型判断 相反; (2)正定型:以凝胶柱上端出现红细胞凝集物为阳性,直接判读ABO和RH血型,并注 意检查质控是否失效; 8.结果登记并签字:将结果登记至“血型鉴定原始记录本”并签字; 9.录入并审核发布报告:将结果录入“戴安娜手工合血”项目下,点击保存,最后检查一遍后审核报告。

第二部分临床配血及发血流程 (一)主要流程:申请单与标本接收→大血型和抗筛检测→交叉合血→出库收费→发血(二)详细步骤: (1)申请单与标本接收: ①接收到临床用血申请单后,首先明确用血类型为常规用血还是紧急用血,如果 是紧急用血则需问清楚紧急用血的原因,病人目前全身情况等,并涉及后续交 叉配血方法学选用的区别,常规用卡式合血法,紧急用凝聚胺合血法; ②核对病人信息并检查标本合格之后,请医生在“标本接收与血袋回收记录本” 上签字;大血型和抗筛检测: ③检测前准备: 1)大血型用标准红悬:取两只软管分别标记A1/B,按照4滴生理盐水:1 滴混匀后红悬的比例配制适量的A1/B标准红悬待用; 2)抗筛检测用红悬:同样取三支软管,分别标记I/II/III,按照4滴生理盐水: 1滴相应抗筛红悬的比例配制适量待用; 3)待检者红悬:按1ML生理盐水:10UL红细胞的比例于软管中配制并混匀 待用; (2)抗筛检测:取抗筛卡三孔,标记病人姓名/日期及I/II/III编号,按编号分别加入I/II/III 型红悬50UL,再向每孔加入25UL待检者血浆,温育器中温育15分钟后,于卡式 离心机离心9分钟后观察结果并记录于输血申请单上; (3)大血型鉴定:取大血型鉴定卡标注病人信息,检测日期后于A\B\C\D\E\Ctl孔每孔 加入50ul待检者红悬,A1/B孔分别加入50ul相应的标准红悬和50ul待检者血浆 后离心9分钟后观察结果并记录于输血申请单; (4) 交叉合血 根据患者的血型,申请量,病人血色素及全身状况结合库存及效期选择合适的血液 品种和血量进行配血→取软管一支,将血袋上标记标签1贴于其上并扯下一段血 辫将其内血液转移至软管中离心(3000RPM 3分钟)备用→以1ML生理盐水:10UL 红细胞的比例分别配制献血者和受血者红悬备用→将血袋上另一标记标签撕下贴 于申请单,同时将“病例备查”和“存档备查”两个标签撕下备用→用小纸片标注 病人姓名和血袋号后与血袋一起放回冰箱保存。 ①常规用血合血---卡式法 取配血卡两孔,分别标注好主次侧,并写好病人姓名,血袋号,日期等信息, 主侧加入50UL献血者红悬和25UL受血者血浆,次侧加入50UL受血者红悬 和25UL献血者血浆,于温育器中温育15分钟后卡式离心机离心9分钟后观 察结果;同时需使用ABO/RH(D)血型卡复查献血员血型,方法同血型鉴定。 ②紧急用血合血---凝聚胺法 取2支试管分别标记主/次侧,主侧加入50UL献血者红悬、100UL受血者血 浆和4滴低离子介质,次侧加入50UL受血者红悬、100UL献血者血浆和4 滴低离子介质→混匀后置于室温孵育1分钟→3000RPM离心10秒后轻摇试 管观察红细胞是否凝集,如有凝集则表明配血不合,需查找原因,无凝集则继 续下一步操作;→每管加2滴凝聚胺溶液并混匀后静置15秒→3000RPM离 心10秒后彻底弃上清,轻摇试管确保每一管均凝集→每管加入2滴重悬液后 轻摇试管,观察红细胞是否凝集,若出现凝集且轻摇不消散则说明配血不合, 需进一步寻找原因。 (5)出库及收费

血型鉴定方法有哪些

血型鉴定方法有哪些 血型鉴定方法有哪些?血型就是红细胞上特异抗原的类型。在ABO血型系统,根据红细胞膜上是否含有A、B抗原而分为A、B、AB、O型。血型系统对输血具有重要意义,以不相容的血型输血可能导致溶血反应的发生,造成溶血性贫血、肾衰竭、休克以至死亡。血型鉴定方法有哪些?让我们通过下文来了解一下吧。 实验材料 人;显微镜、离心机、采血针、玻片、滴管、1ml吸管、小试管、试管架、牙签、消毒注射器及针头、碘酒、棉球、消毒棉签;标准A、B型血清、生理盐水、75%酒精。 实验步骤 1.玻片法 (1)将标准A型与B型血清各一滴,滴在玻片的两侧,分别标明A与B。

(2)用75%酒精棉球消毒左手无名指端,用消毒采血针刺破皮肤。滴1滴血于盛有 lml生理盐水的小试管中,混均制成红细胞悬液(浓度约5%)。 (3)用滴管吸取红细胞悬液,分别滴一滴于玻片两侧的血清上,用两支牙签分别混匀(注意严防两种血清接触)。 (4)15分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据图40判定血型。 血型检查结果判断 2. 试管法 取小试管 2支,分别标明 A、B字样。分别加入A、B型标准血清与受试者的红细胞悬液各1滴,混匀后离心1分钟(100转/min)。取出试管后用手指轻弹试管底,使沉淀物被弹起,在良好的光源下观察结果。轻弹管底时,若沉淀物成团漂起,表示发生凝集现象,若沉淀物边缘呈烟雾状逐渐上升,最后使试管内液恢复红细胞悬液状态,表示无凝集现象。 【注意事项】

1.试管法较玻片法结果准确。 2.吸A型、B型标准血清及红细胞悬液时,应使用不同的滴管。 3.肉眼看不清凝集现象时,在低倍显微镜下观察。 4.红细胞悬液及标准血清须新鲜,因污染后产生假凝集。 5.红细胞悬液不能太浓或太淡,否则可出现假阴性反应。 血型鉴定方法有哪些?看了上文,想必你已经知道答案了吧。产检测定血型的重要性,目前,一些医院将测定孕妇血型列为产前检查中一项常规项目。血型测定内容有ABO血型及Rh血型。测定血型也有便于及时发现母儿血型不合,及早了解血型,便可做好孕期中的监测,采取相应的预防措施,在适宜的时间终止妊娠,并做好新生溶血症的各项监测及处理,以减少其危害。

血型鉴定操作规程

血型鉴定操作规程 一.玻片法(仅适用于正定型) 1 .原理: 1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO血型。 1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分RhD阳性和RhD阳性。 2 .标本采集: 用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。紧急情况下可以使用抗凝动脉血。婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可采集末梢血。 3. 标本运送与储存: 采集好的标本与申请单同期尽快(一般2小时内)送往输血科。标本采集后和检测后,应置于2~8℃环境下。检测后的标本应至少保存7天,以备结果查对。 4 .仪器与材料: 抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、载玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。 5. 操作步骤: 5.1用标记笔在载玻片上划分成A、B、D三个区域; 5.2在标记好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B和抗-D血型定型试剂; 5.3再各加1滴10%患者红细胞悬液(该红细胞悬液可以是盐水悬液,也可以 是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞); 5.4用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混合,并把混合物均匀涂开, 使其覆盖大约直径20mm的面积; 5.5缓慢连倾斜摇动玻片1-2min,观察结果并记录。 6. 结果判定: 6.1凝集或发生溶血为阳性结果; 6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果; 6.3对结果有怀疑,应用试管法或微柱凝胶法重复实验。 二、纸板法 1 .原理: 1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO血型正定型。A1细胞上含有A和A1抗原,B细胞上含有B抗原。用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体,即反定型。综合正反定型结果确定受检标本ABO血型。 1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分RhD阳性和RhD阳性。 2 .标本采集: 用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。紧急情况下可以使用抗凝动脉血。婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,可采集末梢血。 3. 标本运送与储存: 采集好的标本与申请单同期尽快(一般2小时内)送往输血科。标本采集后

Rh(D)血型鉴定(试管法)操作程序

Rh (D)血型鉴定(试管法)操作程序 1、目的 建立Rh(D)血型操作规程,确保血型鉴定准确性和规范性。 2、适用范围 适用于试管法进行Rh(D)血型鉴定试验操作程序 3、试剂 3.1厂家: 上海血液生物医药有限公司 3.2产品有限期:24个月 3.3试剂规格: 10ml 支 3.4试剂稳定性:试剂未开启:2-8℃避光保存,稳定至包装盒上的效期。 3.5试剂开启后请注明日期并签名,效期按厂家说明书要求。 4、质控操作 按照《输血相容性检测室内质控操作程序》执行,质控通过后填写《血库IQC 检测反应记单》 5、检测原理 目前发现的人类红细胞上Rh 抗原有C 、c 、D 、E 、e5种,Rh 血型形成的天然性抗体极少,主要是免疫性抗体,已知有抗D 、抗E 、抗e 、抗C 、抗c 抗体等五种。抗D 抗体是Rh 血型系统中最常见的抗体。Rh 抗体有完全抗体和不完全抗体两种完全抗体在机体受到抗原刺激初期出现,一般属IgM 型,机体再次受抗原的刺激则产生不完全抗体,如果五种不完全抗体血清(抗D 、抗E 、抗e 、抗C 、抗c)做鉴定,可将Rh 血型系统分为18个型别,在临床上因D 抗原的抗原性最强, 专业领域:血库 文件编号: Rh (D)血型鉴定(试管法) 操作规程 版本及修订后: 启用日期: 编写者: 审批者:

出现的频率高,临床意义较大,故一般只做D抗原的血型鉴定,如仅用抗D血清进行鉴定,则凡带有D抗原者称为Rh阳性,不带D抗原者称为Rh阴性。 6、标本处理 6.1核对信息,将检查申请单信息与样本条码信息进行核对,信息一致方可进行下述操作。 6.2标本收集 EDTA-K2抗凝血2ml 6.2.2标本出现溶血、乳糜血,为不合格样品,不能用于检测。 6.3标本制备 6.3.1EDTA抗凝血2ml,离心1000g/3min,分理出血球与血浆待用。 6.3.2制备5%红细胞悬液,取50ml血球+1000ul0.9%生理盐水。 7、操作步骤 7.1取洁净试管一支,表明抗D用滴管滴加Rh(D)IgMh试剂50ul,并向管中滴加待检着5%红细胞悬液50ul,混匀: 7.2摇匀后用血库专用离心机500g,离心60秒,观察结果: 7.3将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如果肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以低倍镜观察结果。 7.4结果判读 反应强度凝集 4+ 强反应,单一凝集块,无游离红细胞 3+ 强反应,几个大的凝集块 2+ 很多小的凝集块中混有大的凝集块,无游离红细胞 1+ 在游离红细胞背景下有很多小的凝集块 +/- 肉眼可观察游离红细胞下小的凝集块,光镜下课观察到很多小的红细胞凝集块 - 镜下未见凝集块,红细胞均匀分布 7.5判断结果应仔细核对后填写《手工、半自动血型血清学原始记录》,避免电子报告与原始记录不符。

ABO血型鉴定正反定型试验方法

ABO血型鉴定正反定型试验方法 一、试剂和材料: (一)单克隆抗A、抗B试剂(由试剂厂家提供) (二)显微镜、载玻片 (三)A型、B型红细胞(本实验室制备的5%混悬液) (四)EDTA抗凝的待测红细胞全血 (五)竹签 二、方法(玻片法): (一)正定型: 1.在一块干净的玻片上,间隔一定距离做好标记,分别滴一滴抗A和抗B试剂; 2.在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血; 3.用竹签混匀试剂和红细胞,并使混合物直径>15mm; 4.轻摇玻片,两分钟内观察结果,必要时可以在低倍镜下观察; 5.判读、解释并记录反应结果。 (二)反定型: 1.在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴; 2.在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴; 3.混匀(同正定型); 4.轻摇玻片,两分钟内观察结果,必要时可以在低倍镜下观察; 5.判读、解释并记录反应结果。 6.结合正反定型反应结果、判定血型,见表1 表1 ABO血型正反定型试验结果判定 正定型反定型 血型抗体试剂+红细胞标本红细胞试剂+血清标本 抗A 抗B A细胞B细胞 + O O + A O + + O B O O + + O + + O O AB 三、附注: (一)表中“O”表示无凝集,“+”表示凝集,一般都是3-4个+的强凝集反应; (二)2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应; (三)若得到弱的或可凝集反应结果,该标本应用试管法重新试验; (四)由于新生儿在出生4~6个月内,血浆中的ABO抗体活动太弱,并且含有来自母亲的抗体,故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型; (五)做正定型时,还可加一抗A、B血清(O型人血清),以检测ABO弱抗原;做反定型时可以加试一O型红细胞,借以证实是否有不规则抗体的存在。

医嘱查对流程

医嘱查对流程 查对制度是为保证患者安全防止差错事故发生的一项重要措施。对于无论直接或间接地用于患者的各种治疗、检查物品及其生活用品(如药物、敷料、器械、压缩气体以及治疗、急救和监护设备等),必须品名正规,标识清楚,具有国家正式批准文号、出厂标记、日期、保存期限,物品外观表现均符合安全要求。凡字迹不清、不全面或标记不明确以及有疑问的,一律禁止使用。使用过程中如患者有不适反应应该立即停用,再次进行查对应用的一切物品,直到找出原因。所用物品不得丢弃,应该按要求妥善保管备查。 一、手术患者查对制度 (一)择期手术,在手术前的各项准备工作、患者的知情同意与手术切口标志皆已完成后方可手术; (二)每例手术患者佩戴“腕带”,其上具备有患者查对用的患者身份信息。 (三)建立病房与手术室之间的交接程序,麻醉科医师、手术室护士与病房医师、护士应当严格按照查对制度的要求进行逐项交接,核对无误后双方签字确认。 (四)手术安全核查是由手术医师、麻醉医师和巡回护士三方,在麻醉手术前、手术开始前和患者离开手术室前共同对患者身份和手术部位等内容进行核对的工作,由麻醉师主持并填写表格,无麻醉医师参加的手术由手术医师主持并填写表格。 (五)实施手术安全核查前,参加手术的手术医师、麻醉医师、巡回与洗手护士等人员必须到位。 (六)手术安全核对必须按照核对步骤进行,核对无误后方可进行下一步操作。(七)确保手术前预防性抗生素规范地使用,在术前,由病房医师下达医嘱; 二、医嘱查对制度

(一)处理长期医嘱或临时医嘱要记录处理时间、签全名,若有疑问必须问清后方可执行。(二)护士转抄或微机输出医嘱时,要按“三查七对”要求执行。每天由两人认真核对医嘱一次,护士长每周参加查对医嘱一次。整理医嘱后需经另一人查对,方可执行。(三)转抄或微机输出医嘱者与查对者均须签名或盖章(四)抢救患者时,下达口头医嘱后执行者须复述一遍,待医师确认后方可执行并保留用过的空安瓿核对。 三、服药、注射、输液查对制度 (一)服药、注射、输液前必须严格进行三查七对。三查:备药前查、备药中查、备药后查。 七对:对床号、姓名、药名、剂量、浓度、时间和用法。 (二)清点药品和使用药品前要仔细检查药品有无变质、针剂安瓿有无裂痕、标签及有效期。(三)摆药后必须经两人核对方可服用。 (四)对易过敏的药物,给药前须询问患者有无过敏史;使用毒、麻、限剧药时,要经过反复核对。静脉给药要注意有无变质、瓶口松动、裂缝。注意药物配伍禁忌。(五)用药前,患者若提出疑义应及时查对后再给予。 四、输血查对制度 (一)查采血日期、血液有无血块和溶血,并查血袋有无裂缝。(二)查输血单与血袋标签上供血者的姓名、血型及血量是否相符。(三)查对患者科别、床号、姓名、住院号及血型。(四)输血前需经两人再次核对无误后方可输入。 (五)输血完毕应保留血袋24小时,以备必要时送检。 五、饮食查对制度 (一)每日查对医嘱后,以饮食单为依据,核对患者床前饮食卡。查对床号、姓名及饮食种类。 (二)发放饮食前查对饮食单与饮食种类是否相符。

疑难血型鉴定和疑难交叉配血

疑难血型鉴定与疑难交叉配血 1、疑难血型鉴定 疑难血型就是一种血型难以检定或判定(正反定型不一致)得现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体与特殊抗原或抗体检测角度出发,结合血型血清学与分子生物学研究方法对患者样本进行检测。而对于不规则抗体筛查与鉴定,主要就是对抗体种类与特性进行研究,尤其就是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定,从而较为准确得分析患者血清抗体得特异性。在工作中遇到此类情况时,应按照以下步骤进行分析与处理:(1)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因,主要包括抗原类影响因素与抗体类影响因素,抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。 (2)设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。 流程图1 疑难血型鉴定流程

2014年1月,在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P1Pk血型系统得p表型,经分子生物学基因测序,初步推断A4GALT 基因第3外显子得903C>G突变就是患者p表型形成得分子生物学基础,该研究成果从不同角度与深度撰写论文,先后发表《临床军医杂志》与《中国输血杂志》论文各一篇,并由此逐步展开疑难血型鉴定。在此之后得工作中,通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B3等血型亚型,形成了一套相对完整得疑难血型鉴定思路与流程。 2014年2月与2015年10月,在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗得患者,经一系列血清学试验,确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体,该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。在后期工作中,通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查与鉴定结果进行分析,对厦门地区住院患者不规则抗体得分布特征有了较为清晰得了解,该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》,并形成了一套相对完整得不规则抗体筛查与鉴定流程。 2、疑难交叉配血 交叉配血就是确保安全有效输血得最重要环节,只有交叉配血真正相合(相容)才能保障临床输血治疗得安全性。现一般进行供者与受者ABO、RhD同型配血,只有配血相合时才能输血(特殊情况例外),当出现配血不相合时,则视为“疑难配血"。目前,输血科常用得交叉配血得方法主要包括聚凝胺法、卡式法与抗球蛋白法。当遇到异常得配血实验结果时,应以抗人球蛋白法为准,但任何一种实验方法都存在假阳性或假阴性得可能。因此,需在不同得情况采取不同得检测技术,建立适合本实验室得血液免疫学检测流程。在工作中遇到疑难配血时,可按照以下步骤进行分析与处理: (1)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因,交叉配血不合包括主侧配血不合与次侧配血不合,其产生原因主要如下:①主侧配血不合:患者血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素;供着红细胞直抗阳性(相对少见).②次侧配血不合:患者红细胞黏附免疫球蛋白或抗体,直抗阳性,全凝集或多凝集;供着血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素(相对少见)。 (2)设计实验进行配血疑难配血流程见流程图2.

相关文档
最新文档