EmCell胚胎干细胞治疗的特点和效果
EmCell——胚胎干细胞治疗的特点和效果
干细胞治疗是把健康的干细胞移植到病人或自己体内，以达到修复病变细胞或重建功能正常的细胞和组织的目的。干细胞疗法就像给机体注入新的活力，是从根本上治疗许多疾病的有效方法。其中，胚胎干细胞治疗备受大众关注，医学人士致力于胚胎干细胞治疗的研究和临床应用。
胚胎干细胞相比其他来源的干细胞有什么优点?(成人自体干细胞,脐带血,动物来源的干细胞)?
1.胚胎干细胞(FST)有着最强的增殖潜力(繁殖能力)。
2.胚胎细胞也能够避免组织相容性的问题。胚胎干细胞的细胞膜上HLA(组织相容性抗体)的表达不存在或非常少。胚胎干细胞进入人体后发展其免疫耐受性,人体事实上就像接受自身细胞一样识别胚胎干细胞,不会启动免疫攻击。
3.胚胎干细胞多能性保存到第9周。
4.胚胎干细胞的5-8孕周使他们失去无节制增殖的性质
胚胎干细胞相对于人工培育胚体干细胞有什么区别?
1.胚胎干细胞收获从胚层5-8周龄的内部器官(胚胎期),以后放在其中乘法是不可能的容器。科学上把卵子受精后头三个星期所形成的细胞称为胚体干细胞。全世界这类细胞无一例外通过人工受精制造出来。这些细胞有全能性。
2. 这两种类型的细胞有多潜能的可选性。
胚胎干细胞和脐带血干细胞有什么区别?
1. 脐带血中多能细胞的增殖和生长潜力低于胚胎干细胞。
2. 脐带血干细胞没有多潜能的可选性。
3. 脐血干细胞表达组织相容性抗原,所以为确保脐血干细胞的植入在收件人的身体,免疫抑制是必要的。
成年人体内的干细胞相对于胚胎干细胞有什么相同和区别?
成年人体内干细胞(成体干细胞)的数量、增殖生长的潜力明显低于胚胎干细胞。不仅如此,成体干细胞子自身细胞膜表面具有已形成并明显表达的组织相容性抗原,所以就像所有的器官移植一样,需要针对受益人挑选捐献者。成体干细胞在移植前需要进行一系列的术前药物准备和移植后免疫抑制治疗,降低机体的排斥反应。成体干细胞相对胚胎干细胞更分化,不具备多能特性,也就是说,成体干细胞转化为特定细胞与组织的能力非常有限。
EmCell胚胎干细胞治疗的效果分为两个阶段:
第一阶段(早期)——几小时后已出现干细胞移植的快速效应。这个效应称为“移植后早期改善综合症”表现为:改善整体感觉,减少疲劳,提高工作效率,增加食欲。这个综合症在晚期
疾病的患者和有严重中毒的患者身上表现的非常明显。此外,在此阶段出现“精神功能改善综合症”的临床效应:减少自身的忧郁症状,改善精神状况,改善睡眠。
第二阶段(细胞效应)--在胚胎干细胞移植入人体1-2个月通过其适应期后出现。效应的出现跟如下关联:胚胎干细胞已找到问题部位,开始繁殖和启动恢复受损组织,器官和系统的过程,从而减少疾病的症状,减慢恶化速度。同时改善白细胞,红细胞的指标,新陈代谢的指标,恢复免疫系统的应有能力,改善各种器官与系统的营养不良程度,提高生活质量。
胚胎干细胞培养有新法
胚胎干细胞培养有新法 2010-12-22 来源：科技日报责编：杨婷 据美国每日科学网12月19日报道，美国研究人员发现，利用软凝胶基质代替硬培养皿来培养小鼠胚胎干细胞，无需添加昂贵的生长因子，便可让干细胞培养物长时间维持同质的多能状态。研究人员表示，这一技术在未来的再生医学中有着巨大的应用前景。相关论文发表在《公共科学图书馆·综合》杂志上。 干细胞研究面临的主要障碍就是如何让小鼠胚胎干细胞培养物保持一种均一的多能状态。多能干细胞可自发地分化成皮肤或者肌肉等不同的组织类型，长期以来，科学家都是利用一种被称作生长因子的化学物质来维持干细胞的多能态不变，但即便如此，培养出来的干细胞还是会很快进入各自的分化阶段，呈现出不同的基因表达和形态，这种多样性分化使得干细胞培养物很难被诱导生成所需的特定组织。 该研究负责人之一、伊利诺伊大学基因组生物学研究所动物科学教授田中哲也表示，可以从培养一群同质的未分化细胞入手，诱使其分化成特定的细胞类型以实现临床应用。 研究小组发现，多能小鼠胚胎干细胞喜欢“抱团”黏附在一起，而处于群体边缘、与坚硬的培养皿接触的细胞分化速度相对较快，于是他们决定对小鼠胚胎干细胞进行机械学研究而非化学研究。由于干细胞比成熟细胞要柔软10倍，研究人员猜测是否是培养皿和细胞之间的机械力刺激了细胞分化，并通过前期研究证实，即使很小的机械力也可诱导细胞分化。 接下来，研究小组将小鼠胚胎干细胞分成3组进行平行试验：第一组用加入了生长因子的常规培养基培养；第二组采用与这些细胞同样硬度的软凝胶基质进行培养，并加入生长因子；第三组同样用软凝胶基质培养，但没有加入生长因子。结果显示，即使缺乏生长因子，利用软凝胶基质培养的干细胞在3个多月传代20次后仍能表现出更明显的同质性和多能性。 研究合作者、伊利诺伊大学机械科学和工程系教授王宁(音译)说，这体现了事物的两面性：机械力能够诱导分化，但如果降低培养基和干细胞之间的机械力，就可以将干细胞保持在多能状态。这项研究证实了在干细胞分化过程中力学环境的重要性不亚于化学生长因子。在活的有机体中，细胞只在短期内分泌生长因子，而机械力则始终在影响每个细胞。 研究小组下一步打算利用这种新技术来培养诱导多能干细胞(iPS)，虽然iPS 细胞医学应用前景广阔，但也是出了名的难以培养。田中哲也说：“我们可以试
60万一针“干细胞治疗”有用吗
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/8b3285023.html, 60万一针“干细胞治疗”有用吗 作者： 来源：《科学大观园》2018年第12期 近些年，伴随着“干细胞”这一概念的产生，与之相关的各种干细胞疗法层出不穷，“干细胞美容”“干细胞抗衰老”等等真假难辨，到底什么是干细胞，什么是干细胞治疗，听听中科院动物研究所所长、周琪院士的解读。 日前，“中国富豪乌克兰续命记”这一话题在社交平台刷屏，四位富豪在中介公司的组织下，远赴乌克兰接受“胚胎干细胞治疗”，试图抗衡自然规律，用钱去买健康买长寿。一针的价格将近60万，他们愿意花400万年轻30岁，不在乎没效果，只要没副作用就行。 院士眼里的干细胞治疗 5月20日，在国家动物博物馆举行的2018全国科技周“科学之夜”活动上，周琪院士为到场的小观众和科普爱好者举办了一场名为《神奇的干细胞与细胞治疗》，对“60万一针”这一热点问题进行了正面回应。 周琪院士在讲座中回应要点如下： 1.干细胞治疗的相关管理与宣传亟待加强。 自古至今，人人都有长生不老的梦，希望延缓衰老、延续生命，更有人称干细胞可以治疗糖尿病、肾病等各种疾病。 看看美国怎么做的，大家知道美国食品药品管理局（FDA）一向监管很严，对干细胞市场也是如此，随便找几个例子： 2011年，加强临床监管的政策; 2016年，强制性管理干细胞市场; 2018年，FDA要求对美国干细胞诊所及加州细胞治疗中心未获得监管部门批准而销售之干细胞产品发出永久禁止令。 这两家就是被很多人标榜在干细胞治疗方面的臨床效果比较好的机构，为什么被发起联邦诉讼？为什么被永久禁止？这些消息在我国为何没有传开？为什么美国的严格监管政策没有人拿出来说？为什么我们很多网站的新闻都把干细胞宣传成为包治百病、长生不老的万能细胞？我们要反思科学素养和普及知识的能力是否齐备。
乌克兰胚胎干细胞全新独创治疗,世界先进(排名第一)
乌克兰干细胞全新独创治疗，世界先进（排名第一） 乌克兰胚胎干细胞可美容抗衰老治疗疾病 乌克兰胚胎干细胞移植治疗中心成立的原因 在佃86年4月26日，苏联的乌克兰共和国切尔诺贝利核能发电厂发生严重泄漏及爆炸事故。事故导致31人当场死亡，上万人由于放射性物质远期影响而致命或重病，至今仍有被放射线影响而导致畸 形胎儿的岀生。1994年，经卫生部批准，乌克兰国立医科大学成立了世界上第一所人类胚胎干细胞 研究治疗中心，迄今为止，已累计为世界各地一万多名癌症、糖尿病、神经系统疾病、血液系统疾病、肝肾疾病等患者移植了胚胎干细胞，拯救和延长了很多人的生命；该中心还在抗衰老、美容、养生等领域为需要的人群服务。 中心主治：艾滋病/艾滋病毒，肌萎缩性侧索硬化症，阿尔茨海默氏病，贫血，抗衰老治疗，动脉高血压，自闭症，癌症，糖尿病的治疗，眼疾，特发性脑病，缺血性心脏病，肝病，肌营养不良症，治疗多发性硬化症，帕金森病治疗，类风湿关节炎，脊髓性肌萎缩症，溃疡性结肠炎和克罗恩病并获得国际上16项国际专利。 干细胞进入人体后如何发挥作用？ 干细胞进入人体后如何发挥作用？ 替代和修复死亡，受损伤的细胞干细胞一旦进入人体内后，由于生物学特征，干细胞具有" 损伤组织趋化作用",即干细胞会"有目的"地迁移到该去的病灶处或机体细胞损伤处，替代和修复死亡,受损伤的细胞，直接起到修复损伤组织的作用； 分泌100多种机体所需的细胞因子干细胞还具有强大的分泌功能，能分泌100多种机体所需的细胞因子，参与血管生长，骨修复，免疫调节，造血调控，神经营养等等?改善机体各个系统的机能，提高机体免疫力等作用? 活化体内处于休眠状态的干细胞活化体内处于休眠状态的干细胞，使体内干细胞数量增加,恢复干细胞的早期质量，使细胞年轻化，组织器官功能年轻化，全身各系统机能得到明显改观，人体衰老的进程得到有效的控制和缓解，机体重新焕发活力 1. 什么是干细胞？ 干细胞和人体其他成熟细胞不同。称为万能细胞或未定向细胞。当给予特定讯号及适当 条件能分化成为特定成熟细胞。 在人类，干细胞可以在生长的胚胎期分化形成不同的组织和器官。人类出生后，各器官 内还存在干细胞，功能是修复、替代受损或病变的组织和器官。
小鼠胚胎干细胞培养
以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol，需要用专用的protocol和培养基。 一般培养－－维持ES细胞处于未分化状态 ES细胞培养用含有LIF（白血病抑制因子）和Feed细胞的培养基（高糖）来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。如果在Feed细胞，那么就需要采用MMC进行处理，抑制Feed细胞增殖，但仍然能保持其分泌LIF因子的活性。下文中暂不提及Feed细胞。Feed细胞可以来源于STO细胞或原代胚胎成纤维细胞。 培养基 ES: 配制一20×不含DMEM，HS，LIF的溶液（该溶液也能用于EB培养基－－见下文）。分装在50ml 离心管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和LIF加入450ml DMEM中制备培养基，0.22 μm滤膜过滤。贮存于4℃，时间不要超过2周。 贮存液 DMEM（高糖） 马血清（HS） L-谷氨酰胺（200mM） MEM NEAA（10mM） HEPES（1M） β-巯基乙醇（55Mm） PEST LIF 复苏细胞 细胞被冻存在10％二甲基亚砜（DMSO）中防止结晶的形成，结晶的形成会损害细胞。然而，二甲基亚砜对细胞有毒性，快速的进行细胞复苏是很重要的。 步骤： 1．从液氮中取出一管细胞； 2．将冻存管置于37℃水浴中2分钟（或放到管内溶液恰好完全溶解）； 3．将细胞转移到一15ml Falcon管中； 4．加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）； 5．离心3分钟； 6．弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，至少吹打10次； 7．接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿； 8．孵育。 冻存细胞 冻存液
人胚胎干细胞研究的临床意义
人胚胎干细胞研究的临床意义 [关键词] 人胚胎干 健康讯: 吕广秀 20XX14上海市解放军第85医院儿科1998年11月，美国James和John Gearhart领导的2个科学小组分别发表论文阐述如何利用囊胚和原始的胚胎生殖细胞培养出可能的人全能型胚胎干细胞（ES cells）和胚胎生殖细胞系（EG cells）［1，2］。ES细胞最引人关注的2条特征是:ES细胞能在体外条件下生长，在原始的去分化条件下能够无限地分裂;同时在体外培养的所有时间内都能保持胚胎来源细胞的一个关键性特征—全能性，即发育成成体中各种细胞的能力。ES细胞的应用前景十分令人鼓舞。胚胎干细胞可以作为研究人类胚胎发育、出生缺陷及胚胎瘤等疾病的新的手段;可以用于至今为止尚未进行的关于的方法;制造人类疾病模型以利用于基础研究、药物开发和毒理学研究，如果克隆技术可以从患者自体组织中获得干细胞，则它们可解决用于治疗退行性疾病的组织短缺以及结束在移植治疗中使用免疫抑制剂;另外干细胞还可以用来作为基因治疗的一种新的基因运载系统。总之，其前景十分广泛。 1 胚胎干细胞的一般定义特征考虑到ES或EG细胞的特性，可以认为有一些表型是所有的ES细胞都应该具有的，其他一些特点可能是属于从不同种属或不同组织中分离出来的某种特定全能性细胞所特有，或表现出在胚胎发育过程中某个特定阶段所具有的特征。一般认为全能性干细胞所应具有的特征如下:（1）来源于一个全能性的细胞群体;（2）具有正常的细胞核型;（3）具永生性，在胚胎状态下能无限制的分裂;（4）培养的细胞株在体外或在畸胎瘤中能自发分化成胚胎外组织（extraembryonic tissues）和分属所有3种胚层的体细胞。但到目前为止，所有已培养成功的哺乳动物细胞中，除小鼠外，灵长类动物ES细胞只满足上述4条标准的前3条。一些研究人员将ES细胞的定义限定为那些能分化成包括生殖细胞在内的所有的细胞。但出于伦理上的原因，来源于人的ES细胞不可能进行试验以验证是否满足这一标准。因此，如果来源于人的细胞能满足其他3条关于ES细胞的一般定义，我们就认为它属于ES细胞。需要指出的是，要从体外培养或畸胎瘤试验验证一个ES细胞能否分化成所有组织类型的细胞是十分困难的，因为不论在体外培养条件下或畸胎瘤中，一些组织都是十分罕见的。 2 胚胎干细胞的最新研究James Thomson和同事于1998年报道利用治疗不孕症所遗弃的囊胚分离出ES细胞。他们所使用的技术与分离小鼠ES细胞相似:将可能
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
细胞的原代培养 点击次数：540 作者：佚名发表于：2009-03-06 16:26转载请注明来自丁香园 一、原代细胞培养原理 原代细胞培养是将机体内的某组织取出，分散成单细胞，在人工条件下培养使其生存并不断生长、繁殖的方法。借助这种方法可以观察细胞的分裂繁殖、细胞的接触抑制以及细胞的衰老、死亡等生命现象。 ? 幼稚状态的组织和细胞，如：动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养 ? 掌握无菌操作技术 ? 了解小鼠解剖操作技术 ? 了解原代细胞培养的一般方法与步骤 ?了解培养细胞的消化分散 ? 了解倒置显微镜的使用 二、实验材料 ? 实验动物：孕鼠或新生小鼠 ? 液体：细胞生长液（内含20%小牛血清） 0.25%胰蛋白酶 平衡盐溶液 70%乙醇 ?器材：灭菌镊子、剪刀若干把 灭菌培养皿、细胞培养瓶、小瓶、烧杯若干个 吸管若干支 酒精灯 原代细胞培养方法 三、胰酶消化法 （1）胰酶消化法操作步骤——取材 a. 用颈椎脱位法使孕鼠迅速死亡。
b. 把整个孕鼠浸入盛有75%乙醇的烧杯中数秒钟消毒，取出后放在大平皿中携入超净台。 c. 用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。 d. 用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。 e. 剔除胚胎周围的包膜（若胚胎较大，应剪去头、爪），将胚胎放于无菌的含有平衡盐溶液的培养皿中。 f. 漂洗胚胎，去掉平衡盐溶液。继续用平衡盐溶液漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。 （2）胰酶消化法操作步骤——切割 a. 将部分胚胎转移至一个无菌小瓶中，用平衡盐溶液漂洗。 b. 然后用眼科手术剪刀小心地绞碎胚胎，直到成1mm3左右的小块，再用平衡盐溶液清洗，洗到组织块发白为止。 c. 静置，使组织块自然沉淀到管底，弃去上清。 （3）胰酶消化法操作步骤——消化、接种培养 a. 视组织块量加入5-6倍的0.25%胰酶液，37℃中消化20-40分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。 b. 加入3-5ml细胞生长液以终止胰酶消化作用（或加入胰酶抑制剂）。 c. 静置5-10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。 d. 1000rpm，离心10分钟，弃上清液。 e. 加入平衡盐溶液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。 f. 加入细胞生长液l-2ml（视细胞量），血球计数板计数。 e. 将细胞调整到5×105/ml左右，转移至25ml细胞培养瓶中，37℃下培养。 （4）胰酶消化法操作步骤——消化、接种培养
人胚胎干细胞的研究发展
人胚胎干细胞的研究发展 摘要：叙述了人胚胎干细胞（hES细胞）的研究现状，并对hES 细胞的研究进展及其应用前景等全面综述。 关键词：人，胚胎干细胞，原始生殖细胞，全能性，多功能性干细胞(Stemcell)是一类具有自我更新能力的多潜能细胞，即干细胞保持未定向分化状态和具有增殖能力，在合适的条件下或给予合适的信号，它可以分化成多种功能细胞或组织器官，又称其为“万用细胞”。干细胞来源于胚胎、胎儿组织和成年组织。根据发育阶段，干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞。1998 年Thomson等第一次从胚胎中分离培养了人体胚胎干细胞(hES C)，并随后发现它能分化为体内几乎所有的细胞后，由此掀起全球范围内的hESC研究热潮。 人胚胎干细胞的生理意义：人胚胎干细胞最有价值的应用是用来修复甚至替换已丧失功能的组织和器官，因为它具有发育分化成所有类型组织细胞的能力。任何导致丧失正常细胞的疾病都可以通过移植由胚胎干细胞分化而来的特异组织细胞来治疗，如用神经细胞治疗神经变性疾病（帕金森综合征、亨廷顿舞蹈症、阿尔茨海默病等），用造血干细胞重建造血功能，用胰岛细胞治疗糖尿病，用心肌细胞修复已坏死的心肌等。 1 人胚胎干细胞的来源 胚胎干细胞来源于着床前的囊胚内细胞团或早期胚胎的原始生殖细胞是一大类未分化的二倍体全能干细胞，具有无限增殖、自我更新
和多向分化的潜能。 2 人胚胎干细胞的生物学特性 (1)具有分化的多潜能性，在体外可诱导分化出属于三个胚层的分化细胞; (2)具有种系传递功能; (3)具有长期的未分化增殖能力，细胞不仅能分化成各种器官组织，而且能增殖生成新的保持同种性状的ES 细胞; (4)易于进行基因改造操作; (5)保留了正常的二倍体的性质且核型正常; (6)胚胎干细胞端粒酶活性呈阳性,具有维持端粒长度,保持干细胞增殖能力的重要作用。 3 人胚胎干细胞的培养 (1) 常规培养液常用的基础培养基有改良伊格尔培养基(MEM)α、达氏修正依氏培养基(DMEM)、组织培养基(TCM)199、F12 等合成培养基，以DMEM应用最为普遍。它的主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子和一些其他辅助物质。 (2) 无血清培养基血清中含有许多未知的成分和一些分化诱导因子，不利与ESC未分化状态的维持。为此人们尝试使用无血清培养液、化学合成培养液’进行ESC的培养，加入刺激细胞生长的激素、细胞因子等，实验表明ESC增殖旺盛，且能保持未分化状态，并认为无血清培养基优于血清培养基。但也有学者认为含血清培养液更利于胚胎干细胞向中胚层细胞分化,是因为血清中富含中胚层诱导因子,
干细胞
干细胞 干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞（pluripotent stem cell）和单能干细胞（unipotent stem cell）。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。 干细胞即为起源细胞。简单来讲，它是一种具有多向分化潜能和自我复制能力的原始未分化细胞，是形成哺乳类各组织器官的祖宗细胞。干细胞的形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。 干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。 干细胞的分离和获取 1998年美国有两个小组分别培养出了人的多能干细胞：James A. Thomson在Wisconsin大学领导的研究小组从人胚胎组织中培养出了干细胞株。他们使用的方法是：人卵体外受精后，将胚胎培育到囊胚阶段，提取 inner cell mass细胞，建立细胞 株。经测试这些细胞株的细胞表面 marker 和酶活性，证实它们就是全能干细胞。用这种方法，每个胚胎可取得15－20干细胞用于培养。John D. Gearhart在 Johns Hopkins大学领导的另一个研究小组也从人胚胎组治中建立了干细胞株。他们的方法是：从受精后5－9周人工流产的胚胎中提取生殖母细胞( primordial germ cell )。由此培养的细胞株，证实具有全能干细胞的特征。 干细胞研究的历史情况 干细胞的研究被认为开始于1960年代，在加拿大科学家恩尼斯特·莫科洛克和詹姆士·堤尔的研究之后。 1959年，美国首次报道了通过体外受精（IVF）动物。60年代，几个近亲种系的小鼠睾丸畸胎瘤的研究表明其来源于胚胎生殖细胞（embryonic germ cells, EG细胞）,此工作确立了胚胎癌细胞（embryonic carcinoma cells, EC细胞）是一种干细胞。1968年，Edwards 和Bavister 在体外获得了第一个人卵子。
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本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！ == 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ == “干细胞”阅读答案 阅读下面的文字，完成19—21题。 干细胞有两大类，一是胚胎干细胞，二是成年干细胞。尽管成年干细胞不如胚 胎干细胞有全能性，但也具有像胚胎干细胞那样潜在的全能分化能力，比如能 分化出神经细胞和心肌细胞等。因此在胚胎干细胞受到伦理限制后，研究人员 的目光转到成年干细胞上，试图诱导成年干细胞定向、定型生长，以治疗相应 的疾病，比如修复心肌以治疗心脏病。但是，大规模的临床实践证明，成年干 细胞还是逊色不少，因而治病救人的重任还是非胚胎干细胞莫属。 去年的《新英格兰医学杂志》上发表了世界上三项最大的干细胞试验治疗结果。在德国和挪威进行的这三项临床治疗试验证明，把心脏病存活者自己的骨髓干 细胞输注到他们受损的心脏中，起到的作用微乎其微。治疗集中心于心脏病导 致的心肌受损，由于受损心肌力量减弱，不能把血液有效地泵到全身组织器官，因此专家尝试用病人自己的成年干细胞来修复他们的心房和心室的心肌。在治 疗中对病人用心导管术注入骨髓干细胞，并且用小气囊堵住心脏有规则的血流 几分钟，以便让输入的干细胞能在心脏生根。 挪威的研究人员对50名一周前患了心脏病的病人注入他们的骨髓干细胞，同时对另一组情况相似的心脏病人进行对照安慰剂治疗(未进行干细胞治疗)。遗憾 的是，6个月后注入骨髓干细胞的病人和进行对照安慰剂治疗的病人的病情相似，均无重大改善。 德国的研究人员对101名一周前患过心脏病的病人注入其自身的骨髓干细胞， 而以另一组103名相似的心脏病人作对照组，给予安慰剂治疗。4个月后，接 受骨髓干细胞的病人心脏改善了5.5个百分点，而接受安慰剂治疗的对照组病 人的心脏功能也改善了3个百分点。这意味着骨髓干细胞可能有用，但作用不 明显。 第三个研究也是德国医生进行的，试验的对象是至少3个月患过心脏病，但平 均患病时间不超过6个月的病人。研究人员对28名病人注入了其自身的骨髓干细胞，对24名病人注入其自身的循环血中的干细胞，还以23名病人作对照组，进行安慰剂治疗。治疗3个月后，接受骨髓干细胞的病人心脏泵血能力比其他 两组病人改善了3个百分点。
胚胎干细胞体外培养.
胚胎干细胞体外培养 (一)胚胎干细胞的来源 目前胚胎干细胞的主要来源有：①囊胚的ICM及受精卵发育至桑葚胚之前的早期胚胎细胞；②从胚胎生殖嵴及肠系膜中分离原始生殖细胞PGCs后培养建系的胚胎生殖细胞(embryonic germ cells，EG细胞)，也具有ESCs的特性，可以分化为各种类型的成熟细胞；③体细胞核转移(somatic cell nuclear transplantation，SCNT)至去核卵母细胞后培育出来的全能细胞。其中囊胚的ICM最为常用。 (二)胚胎干细胞的分离 1.分离获取ESCs的时间：以既保证ESCs的全能性又要有足够的细胞数量为原则来确定ESCs分离获取的最佳时间。以ICM为ESCs来源时：小鼠取3～5天囊胚；猪取9～10天囊胚；羊取7～8天囊胚；牛取6～7天桑葚胚或早期囊胚；人取7～10天囊胚。以PGCs取ES细胞时：小鼠取1 2.5天胎儿生殖嵴；大鼠可取10.5天尿囊、中胚层组织块、12.5天背肠系膜或1 3.5～1 4.5天生殖嵴；牛取29～35天胎儿生殖嵴；人取35～63天的生殖嵴。 2.分离获取ESCs的方法：从PGCs分离ESCs的方法常为机械剪切与消化相结合法，即把采取的胚胎组织充分剪碎，采用EDTA、EDTA/胰酶消化。 从囊胚分离ICM的方法主要有三种： (1)免疫外科学方法：体外培养的小鼠胚泡去除透明带后，经兔抗JCR小鼠脾脏细胞抗血清(抗H-26)作用30分钟，移至1∶6稀释的新鲜豚鼠血清中作用30分钟，Hank’s液冲洗，此时胚泡的滋养外胚层呈空泡状，用眼科手术刀挑去死了的滋养层细胞，留存ICM 细胞用于培养。这种方法利用囊胚腔对抗体的不通透性，通过抗体、补体结合对细胞的毒性杀伤作用，去除滋养层细胞，保留ICM细胞进行培养。 (2)组织培养法：在小鼠受精2.5天后切除卵巢，给予外源激素，使胚胎继续发育，但延缓着床，4～6天后，由子宫冲取胚泡进行培养。结果滋养层细胞生长并推开饲养层细胞，在培养皿底壁上铺展；而ICM细胞增殖，垂直向上生长，形成卵圆柱状结构，在显微镜下用细玻璃针挑出这种柱状结构，消化传代。Evans和Kaufman采用这种方法第一个建立了小鼠ESCs系。 (3)显微外科学方法：小鼠受精后3～4天，由子宫冲取胚泡，利用显微操作系统直接从胚泡中吸出ICM细胞进行培养。 由于免疫外科学方法需要特殊的试剂去除透明带和滋养层，易对内细胞群造成损伤，而显微外科学方法需要专门的仪器设备，且对人员的技术水平要求较高，均难以推广应用。组织培养法将胚泡接种在饲养层上，模拟体内胚泡的着床，更接近自然发育过程，内细胞群增殖旺盛，较易获得胚胎干细胞样集落。 (三)胚胎干细胞的培养和建系 ESCs的分离培养和建系是其得以应用的前提。ESCs建系的原理是：将分离获取的ICM 或PGCs与饲养层共同培养，使之增殖而又保持其未分化状态，这样代代相传从而使ESCs
【2018新课标 高考必考知识点 教学计划 教学安排 教案设计】高二生物：胚胎分割和胚胎干细胞
二、重难点提示 重点：1. 胚胎分割的过程 2. 胚胎干细胞的特点和应用 难点：胚胎干细胞的特点和应用
【随堂练习】 1. 胚胎分割是一种现代生物技术，关于这一技术的叙述正确的是（） A. 胚胎分割可以将早期胚胎任意分割成多份 B. 胚胎分割技术可以获得同卵双胎或多胎 C. 胚胎分割技术属于有性生殖，不属于克隆 D. 胚胎分割技术可以分割任意时期的胚胎 思路分析：在胚胎分割时要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，所以不能将早期胚胎任意分割成多份；胚胎分割移植可以看作无性生殖；胚胎分割一般要在桑椹胚或囊胚时期进行。 答案：B 2. 北京市某医院接生了一名婴儿，医院为他保留了脐带血，如果后来他患了胰岛素依赖型糖尿病，就可以通过脐带血中的干细胞为其治疗。关于这个实例说法正确的是（） A. 用干细胞培育出人体需要的器官来治疗疾病，需要激发细胞的所有全能性 B. 用脐带血干细胞能治疗这个孩子的所有疾病 C. 如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术 D. 如果要移植用他的干细胞培养出的器官，应该长期给他使用免疫抑制药物 思路分析：用脐带血干细胞培养出人体需要的器官用来治疗疾病，不需要激发细胞的所有全能性。脐带血干细胞不能治疗所有疾病，如意外伤害、毒药伤害等。脐带血干细胞最大的优点就是自体移植不会有免疫排斥反应，因而不需要给他使用免疫抑制药物。 答案：C 例题1 利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的最重要原因是（） A. 细胞生长 B. 细胞特化 C. 细胞分化 D. 细胞增殖 思路分析：胚胎干细胞具有发育的全能性，可以被诱导分化形成新的组织细胞，移植胚胎干细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能，因此利用胚胎干细胞治疗肝衰竭主要是利用其分化特性而实现的。 答案：C 例题2 如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题： （1）A细胞是____________，在进行体外受精前要对精子进行____________处理。 （2）进行胚胎分割时，应选择发育到____________时期的胚胎进行操作。 （3）②指的是____________。 （4）通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性状的根本原因是
简述干细胞的形态特征及其研究进展
简述干细胞的形态特征及其研究进展 干细胞是一类具有自我复制能力的原始的未分化细胞，是形成哺乳类各组织器官的原始的多潜能的细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。干细胞在形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。根据它所处的发育阶段可以分为胚胎干细胞和成体干细胞。 胚胎干细胞的发育等级较高，是全能干细胞，而成体干细胞的发育等级较低，是多能干细胞或单能干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已可成功地在体外培养。 干细胞的形态特征： 干细胞具有自我更新复制的能力，能够产生高度分化的功能细胞。 1 胚胎干细胞：胚胎干细胞当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细胞团的 细胞即为胚胎干细胞。具有全能性，可以自我更新并具有分化为体内所有组织的能力。进一步说，胚胎干细胞是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。 2 成体干细胞：成年动物的许多组织和器官，比如表皮和造血系统，具 有修复和再生的能力。成体干细胞在其中起着关键的作用。在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。 3 造血干细胞：造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在 于骨髓、外周血、脐带血中。造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。 4 神经干细胞:理论上讲，任何一种中枢神经系统疾病都可归结为神经 干细胞功能的紊乱。脑和脊髓由于血脑屏障的存在使之在干细胞移植到中枢神经系统后不会产生免疫排斥反应。除此之外，神经干细胞的功能还可延伸到药物检测方面，对判断药物有效性、毒性有一定的作用。 5 肌肉干细胞:可发育分化为成肌细胞，可互相融合成为多核的肌纤维，形成骨骼肌最基本的结构。
GRNOPC1：世界上第一个胚胎干细胞治疗制品
RESEARCH & DEVELOPMENT ISSN 1746-075111 Regen. Med. (2011) 6(6 Suppl.), 11–1310.2217/RME.11.77 ? 2011 Future Medicine Ltd For reprint orders, please contact: reprints@https://www.360docs.net/doc/8b3285023.html,
12Lebkowski Regen. Med. (2011) 6(6 Suppl.)future science group Q How was the patient population for the clinical trial determined? In this open trial, we are recruiting patients who have a complete ASIA A thoracic injury, meaning that these subjects have essentially no motor or sensory activity below the level of the spinal cord lesion. We are targeting subjects whose last fully preserved neurological level is T3 to T11. These patients have severe injuries with significant clinical consequences and are paraplegic – they have no sensory or motor function in their legs. This patient population was chosen after discussions with our clinical steering committee, the investigators in the trial, and the US FDA. The key goal of this first trial is to establish the safety of GRNOPC1 while reducing the potential for harm. GRNOPC1 is administered at the injury site within 14 days of injury. In the selected thoracic injury population, there are relatively large distances between the neurological levels of the spinal cord. If some serious adverse activity such as ascending deterioration of the spinal cord or the development of ectopic tissue were to occur, it would have to progress considerable distances up the spinal cord before clinical consequences were observed, allowing time for intervention. By focusing on patients with complete thoracic injuries we hope to minimize the risks to patients in this first clinical cohort. In recruiting patients for the trial, do physicians face difficulties in terms of patient expectations for this new technology, which has been so widely discussed in the media?That is an issue we have put considerable thought into and have discussed extensively with our investigators in the trial. Any patient who is a candidate for the trial first must go through a considerable amount of screening to ensure that they meet the inclusion/exclusion criteria for the study. After initial screening, subjects must review and sign informed consent for participation in the trial and long-term follow-up. The informed consent form has been approved by our expert committees and each institutional review board at the clinical trial sites. The informed consent document explains in detail that potential benefits from GRNOPC1 are unknown and makes it clear the potential risks of this product. The informed consent document also clearly spells out the subject long-term follow-up commitments for the trial. Physicians and, in many cases, patient advocates are present to council candidate patients at any time during the consent process. The subjects are not just committing themselves to going through surgery to receive the cells, but they are committing to follow-up for 15 years. During the first year, patients in the trial are followed with nine MRIs to look for evidence of any adverse events happening in the spinal cord. So there is a serious commitment for each of the individual patients. We do not have direct contact with patients, but based on physician feedback, candidate subjects are taking the trial and commitment very seriously. what is the latest news from the trial?We are actively recruiting for the trial; we have seven sites open in the USA, recruiting patients from a total of 48 states. To date, we have seen no serious adverse events in the first two patients to receive GRNOPC1. Once we have enrolled our first cohort in the trial, we want to expand the trial in two ways. First, we want to dose escalate. Currently, we are administering a low dose of 2 million cells but, pending agreement from the FDA, we want to escalate the dose up to as many as “ To date, we have seen no serious adverse events in the first two patients to receive GRNOPC1. ”“The subjects are not just committing themselves to going through surgery to receive the cells, but they are committing to follow-up for 15 years. ”
胚胎干细胞的起源和同一性
胚胎干细胞的起源和同一性 摘要 胚胎干细胞在生物研究方面应用广泛，也作为研究哺乳动物早期发育的模型，但是它们精确的起源却是备受争议。传统上认为它们来源于植入前的胚胎，但这暗示着形成胚胎干细胞的细胞可能已经有发育为原始生殖细胞命运倾向的外胚层细胞产生，它通过原始生殖细胞系形成胚胎干细胞。根据最近的研究发现我们提出胚胎干细胞可以直接来源于早期的外胚层细胞，这些胚胎干细胞可以通过不同培养条件形成的两条不同路径出现。 关键词：细胞，胚胎干细胞，同一性 简介 多能性是小鼠胚胎内细胞团形成外胚层的首要要求。在合适的培养条件下，内细胞团细胞可以在体外以胚胎干细胞的形式增殖。这些细胞保持有重新进入一个胚胎（形成嵌合体）的能力，使这些细胞发育为成体的所有组织，包括生殖细胞系和俗称为幼稚多能细胞。多能干细胞最初来源于小鼠睾丸的畸胎瘤。由于畸胎瘤相对其他组织而言在生殖细胞系中更常见可以推断这些畸胎瘤起源于干细胞；小鼠的睾丸瘤一般在出生后形成；在胎儿的睾丸小管中可以清晰的观察到初期的瘤。随后发现多能性细胞系很难与胚胎干细胞区分开来，这些胚胎干细胞来源于体外发育的小鼠重新编程的胚胎的原始生殖细胞。因此，捕获幼稚多能细胞的机会之窗在发育过程中打开两次：第一次在早期的外胚层而第二次在干细胞系。
胚胎生殖细胞与胚胎干细胞的相似之处强烈暗示着胚胎干细胞可能来源于那些已经有发育为原始生殖细胞倾向的外胚层细胞。也有假说称是原始生殖细胞促进培养植入前和植入后发育阶段的胚胎形成外植体。在这个假说中，我们依据近来的发现猜想胚胎干细胞可能通过两条途径得到外植体：直接来源于新形成的外胚层，它处于幼稚多能状态；或者培养在进行遗传重编程的特定原始生殖细胞，使它们重获多能性（图1）。 图1.幼稚多能细胞来源在一定条件下分离小鼠的胚胎干细胞、胚胎生殖细胞和原始生殖细胞。（A）体内发育过程。在囊胚后期的早期外胚层（红色）出现幼稚多能细胞系和受精后8.5天的原始生殖细胞（黄色）（B）体外培养到囊胚期的另一条产生幼稚多能细胞的途径。红心代表早期外胚层分离胚胎干细胞的路径；黄心代表通过形成原始生殖细胞而发育为胚胎干细胞的较长的路径。灰色箭头代表长期培养可能会得到胚胎干细胞或胚胎生殖细胞的假说。图示大小不代表真实比例。 幼稚多能性的出现 哺乳动物受精后产生一个发育为完整的胚胎的受精卵和形成胚外世系。受精卵经过几轮的卵裂之后产生均等的卵裂球，但是在囊胚
胚胎干细胞在临床医学中的应用前景
胚胎干细胞及其在人类疾病治疗中的应用 邱妍，谢冰，芮荣 (南京农业大学动物医学院，江苏南京210095) 摘要：胚胎干细胞是一类多能性干细胞，近年来已成为生命科学研究领域的热点之一。尤其在人类疾病治疗方面有着诱人的应用前景。本文主要介绍了胚胎干细胞在几种疑难疾病治疗上的应用及其前景，胚胎干细胞与异种器官移植，以及目前存在的一些问题。 关键词：胚胎干细胞；分化；疾病；移植 胚胎干细胞（Embryonic stem cells，ES）来源于着床前的囊胚内细胞团（ICM）或早期胚胎的原始生殖细胞（PGCs）。这种多能性细胞可在体外无限增殖并保持未分化状态，适当条件下也可被诱导分化为各种组织细胞。因此，其在良种家畜的繁育，保护日趋减少的遗传资源，动物克隆，细胞分化和胚胎发育的研究，基因调控机理等方面表现出重要的意义，尤其在组织器官的修复与移植治疗上有着潜在的应用价值。近年来，ES细胞在疾病治疗方面的独特作用引起了全世界学者的广泛关注。 1 ES细胞的生物学性质 1.1 形态学特征 ES细胞的形态结构与早期胚胎细胞相似，胞体体积小，核质比高，细胞核显著，有一个或两个核仁。细胞呈多层集落状生长，紧密地聚集在一起，细胞界限不清，形似鸟巢。细胞染色体正常，具有稳定的二倍体核型。 1.2 高度分化潜能 体外培养的ES细胞在饲养层细胞上、条件培养基或添加细胞分化抑制因子(如LIF)的特定条件下，均可以维持其未分化状态。一旦将抑制分化的因素去除，ES细胞能自发地进行分化。若采用悬浮培养，ES细胞则可以形成类胚体（Embryoid body ,EB）,再利用某些物质对其进行诱导分化。在体内，若将ES细胞注射到基因型相同或免疫缺陷小鼠的皮下或肾囊中，经一段时间后在注射部位可形成由三个胚层细胞组织构成的畸胎瘤。 1.3 遗传稳定性 ES细胞可在体外培养条件下建立稳定的细胞系，经长期培养增殖、操作、选择克隆、冷冻保存，仍保持高度未分化状态和发育稳定性。ES细胞含正常二倍染色体，能稳定传代。可以在体外对其进行遗传操作，如导入外源基因、标志基因，基因敲除等，通常不会改变其本身的遗传性能。 1.4 具有特异性标志分子的表达 ES细胞表面含有丰富的碱性磷酸酶（AKP）和阶段特异性胚胎细胞表面抗原（stage-specific embryonic antigens, SSEA），胚胎特异性抗原有SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81等。ES细胞还含有高度表达的Oct-4基因，高活性的端粒酶。这些分子都是鉴定ES细胞多能性的标志分子。 2 ES细胞的定向分化 从理论上讲，多能性干细胞可分化为体内任何类型的细胞。因此在适宜条件下，可以按照人们的意愿对ES细胞进行定向分化。现有的研究报道表明，ES细胞在体外可以定向分化为神经元、神经胶质、胰岛细胞、心肌细胞、横纹肌细胞、平滑肌细胞、软骨细胞、内皮细胞、脂肪细胞及各类血细胞等。