沙门氏菌分离和鉴定培养基

沙门氏菌分离和鉴定培养基

目前使用经典的培养方法来鉴定沙门氏菌(一种强致病性食源性致病菌)的方法

沙门氏菌污染是全球食源性疾病的第二大成因。控制沙门氏菌的暴发是食品监管机构、餐馆和整个食品工业的一项重要任务。

沙门氏菌家族包括 2,300 多种血清型的细菌,但其中有两种类型,即肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏杆菌,约占所有人类感染的一半。大多数沙门氏菌的暴发可以追溯到乳制品、家禽和肉制品,但沙门氏菌几乎可以在任何食物上生长。鸡、鸡蛋及其衍生产品的风险特别高。

图 1.沙门氏菌

食品工业中的微生物控制在预防沙门氏菌暴发中起着关键作用。用于鉴定沙门氏菌的试验和培养基利用了沙门氏菌在生理学或生物化学上与其他属肠杆菌科不同的独特性质。例如,来自沙门氏菌属的细菌多为兼性厌氧菌、氧化酶阴性、过氧化氢酶阳性和革兰氏阴性杆菌。大多数菌株都能运动并发酵葡萄糖,同时产酸和产气。目前用于区分和鉴定沙门氏菌的培养基仍然基于 pH 指示剂指示的碳水化合物发酵的检测(关于碳水化合物发酵能力,另见表 1 )、蛋白水解活性、硫化氢产量和选择性的检测。大多数现代培养基也结合了一些此类检测系统,使培养基更可靠。最常见的选择性培养基和差异培养基的列表见表 2。

阿东糖醇- - 55876阿拉伯糖+/- +/- 80372纤维二糖- - 56481右旋糖+ +/- 63367半乳糖醇+/- +/- 73044果糖+/- +/- 53901半乳糖+ +/- 89608肌醇+/- +/- 89614乳糖- - 28816麦芽糖+ +/- 77653甘露醇+ +/- 94438

甘露糖+/- +/- 94445蜜二糖+ + 93196棉子糖- - 94226鼠李糖+/- +/- 93999水杨苷- - 92971山梨醇+ +/- 93998蔗糖- - 94309海藻糖+ +/- 92961木糖+ +/- 07411表1.沙门氏菌的典型碳水化合物发酵能力

Sigma-Aldrich A0715Andrade 蛋白胨水

Sigma-Aldrich 28943Andrade 蛋白胨水,Vegitone Sigma-Aldrich 95388亚硫酸铋琼脂

Sigma-Aldrich 15835BPL琼脂

Sigma-Aldrich 70134改良亮绿琼脂

Sigma-Aldrich 16026亮绿酚红乳糖蔗糖琼脂Sigma-Aldrich 36408溴甲酚紫肉汤

Sigma-Aldrich 22520中国蓝乳糖琼脂

Sigma-Aldrich 55420氯化琼脂

Sigma-Aldrich 70135DCLS琼脂

Sigma-Aldrich 90035DCLS 琼脂 2 号

Sigma-Aldrich D2935脱羧酶肉汤基质,Moeller Sigma-Aldrich D7809脱氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂Sigma-Aldrich E5399内琼脂

Sigma-Aldrich 70137内琼脂

Sigma-Aldrich 16447葡萄糖溴甲酚紫琼脂Sigma-Aldrich 51490海克通肠道菌琼脂

Sigma-Aldrich 60787克利格勒琼脂

Sigma-Aldrich 61792莱夫森琼脂

Sigma-Aldrich 66304赖氨酸脱羧酶肉汤

Sigma-Aldrich 62915赖氨酸铁琼脂

Sigma-Aldrich 70143麦康凯琼脂 1 号

Sigma-Aldrich 19352麦康凯琼脂 1 号,Vegitone

Sigma-Aldrich M8302, 94

216

麦康凯琼脂,结晶紫,氯化钠

和 0.15% 胆盐

Sigma-Aldrich 70144麦康基肉汤

Sigma-Aldrich 75717, 163

77

紫色麦康凯肉汤

Sigma-Aldrich 63014麦康凯马克杯琼脂Sigma-Aldrich 51405麦康凯琼脂(无盐)Sigma-Aldrich 69965莫塞尔肉汤

Sigma-Aldrich 43052Muller-Kauffmann四硫酸盐肉汤,碱 (ISO)

Sigma-Aldrich 75315OF试验营养琼脂Sigma-Aldrich 81648Pril® 甘露醇琼脂

Sigma-Aldrich 04584增菌肉汤,符合DIN EN ISO 6579:2002

Sigma-Aldrich 17173改良增菌肉汤Sigma-Aldrich R0773增菌培养基

Sigma-Aldrich 92322改良增菌肉汤培养基(碱性),半固态

Sigma-Aldrich 84368Önöz 沙门氏菌琼脂Sigma-Aldrich 84370沙门氏菌浓缩肉汤Sigma-Aldrich 70153亚硒酸盐肉汤(碱性)Sigma-Aldrich 84922亚硒酸盐胱氨酸肉汤Sigma-Aldrich 85438SIM 培养基

Sigma-Aldrich 85463辛蒙斯柠檬酸盐琼脂

Sigma-Aldrich 85640SS-琼脂Sigma-Aldrich 86352TBG 肉汤Sigma-Aldrich 88151连四硫酸盐肉汤

Sigma-Aldrich 88148Muller-Kauffmann四硫酸盐富集肉汤

Sigma-Aldrich 44940三糖铁琼脂

Sigma-Aldrich 51463尿素肉汤

Sigma-Aldrich 42376紫红色胆汁琼脂,Vegitone

Sigma-Aldrich 70189, 798

73

紫红色胆汁葡萄糖琼脂

Sigma-Aldrich 17213不含乳糖的紫红色胆汁葡萄糖琼脂

Sigma-Aldrich 53605不含乳糖的紫红色胆汁葡萄糖琼脂,Vegitone

Sigma-Aldrich 41270紫红色胆汁乳糖葡萄糖琼脂

Sigma-Aldrich 95273VRB 杯琼脂

Sigma-Aldrich 95586XLD琼脂

Sigma-Aldrich 76721XLT4 琼脂(碱)

表2.沙门氏菌选择性和差异性培养基(列表不完整。有关详细信息,请前往 https://www.360docs.net/doc/9f19135851.html,)

此外,默克目前的技术还可提供显色培养基,可检测到沙门氏菌的一种特征性酶,从而提高鉴定可靠性和速度。这些反应基于导致可见颜色变化的发色底物的裂解(参见表 3)。

Sigma-Aldrich 00563HiCrome™MM 琼脂

Sigma-Aldrich 90918改良HiCrome™ RajHans培养基

Sigma-Aldrich 78419HiCrome™ 沙门氏菌琼脂

Sigma-Aldrich 05538改良HiCrome™ 沙门氏菌琼脂

Sigma-Aldrich 84369沙门菌显色琼脂

Sigma-Aldrich 01993沙门菌显色琼脂套装

表3.沙门氏菌显色培养基

图 2.改良HiCrome™ 沙门氏菌琼脂

沙门氏菌等微生物的产硫化氢检测

碳水化合物介质中大量细菌能利用硫氨基酸产生少量 H2S。与醋酸铅结合时,H2S 会产生黑色沉淀,在纸条上产生可见的黑色反应。醋酸铅法非常灵敏,可以检测痕量的硫化氢。

用试纸测试:在蛋白胨水(货号70179)之中接种可疑有机体。在接种培养基上方的塞子和管内壁之间插入醋酸铅纸条,在 35℃下培养 18-24 小时。阳性反应表现为条带下部发黑。在出现阴性反应的情况下,不应出现黑化现象(参见图 3)。

图 2.1.测试微生物测试微生物

图 3.硫化氢测试条

图 4.基于rRNA检测原理的快速试纸

材料

货号产品描述

5587612-碘吡啶98%

A0715Andrade 蛋白胨水suitable for microbiology, NutriSelect® Plus 803723Mn3O4/石墨烯纳米复合物10 mg/mL, dispersion in acetone

95388亚硫酸铋琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Basic 7013433-(甲基氨基)丙酰胺95%

16026亮绿酚红乳糖蔗糖琼脂suitable for microbiology

36408溴甲酚紫肉汤suitable for microbiology, NutriSelect® Plus

56481纤维二糖片suitable for microbiology

22520中国蓝乳糖琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Basic

55420CLED 琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Plus

70135DCLS 琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Plus

D2935Moeller 脱羧酶肉汤基础suitable for microbiology, NutriSelect® Plus D7809脱氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Plus

货号产品描述

6336746-苯基-4-嘧啶羧酸95%

73044甜醇片suitable for microbiology

E5399远藤氏琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Plus

D2935Moeller 脱羧酶肉汤基础suitable for microbiology, NutriSelect® Plus D7809脱氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂suitable for microbiology, NutriSelect® Plus 63367右旋糖片suitable for microbiology

73044甜醇片suitable for microbiology

沙门氏菌分离和鉴定培养基

沙门氏菌分离和鉴定培养基 目前使用经典的培养方法来鉴定沙门氏菌(一种强致病性食源性致病菌)的方法 沙门氏菌污染是全球食源性疾病的第二大成因。控制沙门氏菌的暴发是食品监管机构、餐馆和整个食品工业的一项重要任务。 沙门氏菌家族包括 2,300 多种血清型的细菌,但其中有两种类型,即肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏杆菌,约占所有人类感染的一半。大多数沙门氏菌的暴发可以追溯到乳制品、家禽和肉制品,但沙门氏菌几乎可以在任何食物上生长。鸡、鸡蛋及其衍生产品的风险特别高。 图 1.沙门氏菌 食品工业中的微生物控制在预防沙门氏菌暴发中起着关键作用。用于鉴定沙门氏菌的试验和培养基利用了沙门氏菌在生理学或生物化学上与其他属肠杆菌科不同的独特性质。例如,来自沙门氏菌属的细菌多为兼性厌氧菌、氧化酶阴性、过氧化氢酶阳性和革兰氏阴性杆菌。大多数菌株都能运动并发酵葡萄糖,同时产酸和产气。目前用于区分和鉴定沙门氏菌的培养基仍然基于 pH 指示剂指示的碳水化合物发酵的检测(关于碳水化合物发酵能力,另见表 1 )、蛋白水解活性、硫化氢产量和选择性的检测。大多数现代培养基也结合了一些此类检测系统,使培养基更可靠。最常见的选择性培养基和差异培养基的列表见表 2。

阿东糖醇- - 55876阿拉伯糖+/- +/- 80372纤维二糖- - 56481右旋糖+ +/- 63367半乳糖醇+/- +/- 73044果糖+/- +/- 53901半乳糖+ +/- 89608肌醇+/- +/- 89614乳糖- - 28816麦芽糖+ +/- 77653甘露醇+ +/- 94438

甘露糖+/- +/- 94445蜜二糖+ + 93196棉子糖- - 94226鼠李糖+/- +/- 93999水杨苷- - 92971山梨醇+ +/- 93998蔗糖- - 94309海藻糖+ +/- 92961木糖+ +/- 07411表1.沙门氏菌的典型碳水化合物发酵能力

分离培养沙门氏菌

培养基名称:酚红煌绿琼脂Brilliant Green/ Phenol Red Agar 规格说明:250g干燥培养基 培养基用途:用于分离培养沙门氏菌(伤寒沙门氏菌除外) 。 培养基使用原理: 蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;酚红指示剂在pH6.8时呈黄色,pH8.1呈粉红色,发酵糖产酸的菌落呈黄色,不发酵糖的菌落为红色;煌绿抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。 微生物图册: 培养基配方(每升): 牛肉膏粉5g 蛋白胨 10g 酵母膏粉3g 磷酸氢二钠1g 磷酸二氢钠0.6g

琼脂 15g 乳糖10g 蔗糖 10g 酚红 0.09g 煌绿 0.005g 最终pH7.0±0.2 酚红煌绿琼脂使用方法: 1、称取酚红煌绿琼脂54.7g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌20min,待冷至50℃左右,倾注灭菌平皿,待凝固后备用。 2、用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。 3、将平板翻转放入培养箱中,36±1℃培养20—40h。如有需要培养至48h。 4、观察结果。生长在本培养基上的沙门氏菌典型菌落,使培养基颜色由粉红变红,菌落为红色透明。 酚红煌绿琼脂质量控制: 下列菌株接种在本培养基上,经36±1℃培养20—40h,结果如下: 菌名菌号生长状况菌落特征 鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好红色 奇异变形杆菌CMCC(B)49005 部分或完全抑制红色 大肠埃希氏菌ATCC25922 部分或完全抑制绿色 贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

有效选择沙门氏菌培养基

有效选择沙门氏菌培养基 沙门氏菌(Salmonella)是一类革兰氏阴性、非芽胞形成的杆菌,广泛分布于自然界中,可以引起人和动物的食物中毒和感染。沙门氏菌培养基是用来培养和分离沙门氏菌的一种人工培养基,具有选择性和差异性的特点。下面将介绍几种常用的沙门氏菌培养基及其特点。 1. 沙门氏菌-四糖(SS)琼脂培养基 沙门氏菌-四糖琼脂培养基是一种常用的沙门氏菌选择性琼脂培养基,它能在含有抗生素和染色剂的琼脂培养基上选择出沙门氏菌。SS琼脂培养基中加入了抗生素铺面(如青霉素、链霉素)和一个酸碱指示剂——酚红,用来选择和识别沙门氏菌的生长。沙门氏菌能分解琼脂中的四糖(蔗糖、乳糖、葡萄糖和麦芽糖),并产生硫化氢,导致琼脂由红色变为黑色。这种变色反应是沙门氏菌特有的,可作为沙门氏菌的鉴别特征。 2. 大肠杆菌-沙门氏菌(MacConkey)琼脂培养基 大肠杆菌-沙门氏菌琼脂培养基是一种广泛应用于分离培养沙门氏菌和肠道致病大肠杆菌的常用培养基。这个培养基中含有靛红紫草染料和胆盐,用于选择性培养革兰氏阴性的肠道细菌。沙门氏菌和某些致病性大肠杆菌可以在这个培养基上生长并呈现红色,而其他细菌则无法生长或者生长但是颜色不同。 3. 马来酸甘氨酸涂布-苏博拉盐(XLD)琼脂培养基 马来酸甘氨酸涂布-苏博拉盐琼脂培养基是一种用于分离和鉴定沙门氏菌的常用选择性琼脂培养基。这个培养基中含有马来酸、甘氨酸和某些抑制其他细菌生长的物质,并添加了镉盐来抑制大肠杆菌生长。沙门氏菌菌落在该培养基上呈现红色或红色带黑色中心,有时还有蓝色晕圈,而大肠杆菌则呈现黄色。 4. Rappaport-Vassiliadis (RV) 青霉素抑制培养基 Rappaport-Vassiliadis培养基是一种高速营养荧光琼脂培养基,用于选择和培养沙门氏菌。该培养基中添加了青霉素以抑制大肠杆菌的生长,麦芽糖提供营养,并添加了苏丹红和中性红染料以作为染色质。沙门氏菌能够在这种培养基上生长并产生荧光,而其他细菌则很少生长。 以上所介绍的几种沙门氏菌培养基都具有选择性和差异性,能够帮助实验室分离和鉴定沙门氏菌。在使用这些培养基时,还需要结合其他方法和技术,如传统的生化实验、分子生物学鉴定以及抗生素敏感性测试等,以进一步确认和鉴定沙门氏菌的存在。

鹅沙门氏菌的分离与鉴定沙门氏菌的分离和鉴定

鹅沙门氏菌的分离与鉴定沙门氏菌的分离和鉴定 沙门氏菌病是一种重要的人畜共患病。目前, 已发现的沙门氏菌的血清型有2000多种[1、2]。沙门氏菌属中的许多类型细菌对人、畜以及其他动物均有致病性。各种年龄的动物均可感染,但幼年者较成年易感。近年来,沙门氏菌食物中毒和动物感染沙门氏菌十分严重。由肠炎沙门氏菌引起人的急性胃肠炎在世界各国有增加的趋势,已成为国际公共卫生的一个重要课题。沙门氏菌作为致病菌检测的一项重要指标,在公共卫生、食品卫生、畜牧兽医和出入境检验检疫中均有重要意义。近年来,随着抗菌药物的滥用和不当使用,沙门氏菌病的耐药性日趋严重, 加强对该菌耐药性的监测力度和耐药机制的研究迫在眉睫。 2009年3月,凤阳某养殖户饲喂的800多只10日龄鹅出现死亡,3~4d后死亡100多只,发病鹅主要症状有精神沉郁,卧地不起,眼睑浮肿,食欲减退,饮水正常,排出绿色稀糊状粪便并污染肛门周围的绒毛、腿软,有的病鹅出现呼吸道症状。剖检可见:肝脏瘀血肿大,表面有弥漫性针尖至粟粒大的灰白色坏死灶。胆囊充盈,心肌、胰脏上有坏死灶,脾脏瘀血肿大,气囊混浊有黄色干酪样分泌物,心包膜增厚与心脏粘连,直肠内充满绿色稀粪。为查明病因,控制该病,特进行病原的分离与鉴定。 一、材料和方法 1.材料 1.1病料凤阳某养殖户送检来的10只病死鹅。 1.2设备与器材 隔水式恒温培养箱、手提式压力蒸汽、电炉、托盘天平、FA004型电子分析天平、搪瓷量杯、显微镜、漏斗、记号笔、称量纸、药匙、镊子、棉线、精密pH试纸及各种玻璃器皿等,以上仪器设备及器材均由安徽科技学院动物医学实验室提供。

1.3药品与试剂 各种培养基、革兰氏染液、生化试剂、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、药敏纸片等均由杭州天和微生物试剂有限公司生产。药敏纸片(美满霉素、阿米霉素、庆大霉素、卡那霉素、先锋必素、氯霉素、菌必治、奥复星、麦迪霉素、四环素、新霉素、强力霉素、氨苄西林钠、丁胺卡那霉素、恩诺沙星、)等均由安徽科技学院动物医学实验室提供。 2.方法 2.1 细菌分离培养和形态学观察 2.2细菌分离培养 无菌取病死鸡的肝脏组织分别划线接种于麦康凯平板和SS 琼脂平板上,37℃培养24小时,分别取上述菌落涂片,革兰氏染色镜检,在油镜下观察细菌的形态及染色特性。观察是否存在杂菌。对于已经纯化的细菌进行冷冻保存,未纯化的重复划平板、镜检,直至纯化为止。 2.3培养特性观察 分别接种普通肉汤培养基、三糖铁琼脂培养基、普通琼脂培养基、伊红美蓝培养基、麦康凯培养基和SS培养基,于37℃恒温箱内培养24h,观察该菌的培养特性。 2.4生化试验 自制各种糖发酵管,取纯培养物分别接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等生化管中,置于37℃恒温培养箱中,培养18~24 h,观察发酵管的反应情况。按要求自制各种生化试剂,取纯培养物分别做糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、尿素酶利用实验、柠檬酸盐利用试验、半固体琼脂试验。 2.5药敏试验 参照文献进行。对分离到的菌株进行了药敏试验,共检测15种药物,包括美满霉素、阿米霉素、庆大霉素、卡那霉素、先锋必素、氯霉素、菌必治、奥复星、麦迪霉素、四环素、新霉素、

动物源细菌分离和鉴定方法

动物源细菌分离和鉴定方法 一、大肠杆菌、沙门氏菌的分离和鉴定 1.范围 本方法规定了用于耐药性测定的动物源大肠杆菌和沙门氏菌的分离和鉴定方法。 本方法适用于各种动物及其组织中大肠杆菌和沙门氏菌的分离和鉴定。 2. 设备和材料 2.1 冰箱:O C-4 C和-20 °C O 2.2 恒温培养箱:37C 士1 C和42C。 2.3 显微镜:10X --100 X。 2.4 采样管。 2.5 采样棉拭子、剪子。 2.6 灭菌试管。 2.7 平皿。 2.8 自动细菌鉴定仪。 2.9 API 20E 试子条。 2.3 恒温摇床 2.4 冻存管

3. 培养基和试剂3.1 运送培养基3.2 麦康凯琼脂

3.3沙门氏菌显色琼脂或XLT4琼脂 3.4营养肉汤 3.5鉴定用大肠杆菌、沙门氏菌阳性血清 3.6四硫磺酸盐增菌液(TTB ) 4•大肠杆菌和沙门氏菌分离和鉴定程序 大肠杆菌和沙门氏菌的分离和鉴定程序见图 1 图1:大肠杆菌和沙门氏菌的分离和鉴定程序 动物泄殖腔拭子 发病动物带菌组织(做成匀液) 用接种环接种于麦康凯琼脂 按1:10接种四硫 (TTB ) 42C 24 r 充磺酸盐增菌液 h F 沙门氏菌显色培养基或 XLT4琼脂 三糖铁(TSI )和硫 化物吲哚运动性 培 养基 (SIM )鉴定 检测invA 基因确认 大肠杆菌 API 20E 试条 沙门氏菌 运送培养基或营养肉汤 挑取大肠杆菌可疑菌落纯化 挑取沙门氏菌可疑菌落纯化 氧化酶试验(阴性) 自动细菌鉴定仪 大肠杆菌 沙门氏菌

5.操作步骤 5.1 采样 到已选定的养殖场或屠宰场,用灭菌棉签采动物泄殖腔样品,置 入1-2ml肉汤或运送培养基中0-4C保存。米发病动物组织时,用无菌操作取少量动物组织至于灭菌试管内,0-4 C保存,不超过48小时。 5.2 大肠杆菌的分离 5.2.1 取泄殖腔拭子样品用接种棒直接接种于麦康凯琼脂平面,动物组织样品首先制成匀液,然后用接种棒接种于麦康凯琼脂平面,37C 培养18-24 小时。 5.2.2 挑取粉红色、边缘光滑的大肠杆菌可疑菌落,用麦康凯培养基纯化一代,然后接种于营养琼脂平面37C培养12-24小时,待进一步细菌鉴定。 5.3 沙门氏菌的分离 5.3.1 将泄殖腔拭子或制成匀液的动物组织样品与增菌培养基按 1:10的比例,接种于TTB增菌液中,42 C培养24小时。 532将增菌液摇匀,用接种环接种于沙门氏菌显色培养基37 C培养22-24小时或XLT4琼脂上42C培养22-24小时。 5.3.3 将沙门氏菌显色培养基上紫色的沙门氏菌可疑菌落或XLT4 琼脂培养基上中央黑色边沿透明的沙门氏菌可疑菌落接种于营养琼脂平面 37C培养16-24小时,待进一步细菌鉴定。 5.4 大肠杆菌和沙门氏菌的鉴定(以下方法可任选其一)

有效选择沙门氏菌培养基

有效选择沙门氏菌培养基 沙门氏菌是一种引起食物中毒的病原菌,可以引起急性胃肠道感染。在食品生产过程中,对于沙门氏菌的检测是至关重要的。而在进行沙门氏菌的检测时,选择合适的沙门氏菌培养基是非常重要的。本文将为大家介绍有效选择沙门氏菌培养基的相关知识。 1. 了解沙门氏菌培养基的基本原理 沙门氏菌培养基是一种特殊的培养基,它含有对特定细菌有选择性的成分,可以帮助将沙门氏菌从混合微生物中分离出来,并且可以帮助分辨出这些细菌的特性。沙门氏菌培养基可以分为普通培养基和选择性培养基两种类型。普通培养基可以促使沙门氏菌生长,而选择性培养基可以抑制其他细菌的生长,从而更好地分离出沙门氏菌。 在选择沙门氏菌培养基时,首先需要考虑的是培养基的含有物质是否适合分离出沙门氏菌。有一些含有生长因子、抗生素等成分的培养基可以更好地促进沙门氏菌的生长。对于不同的食品样品,也需要选择适合的培养基。对于含有大量脂肪的样品,需要选择富含胆汁盐的培养基,以防止其他菌群的生长。 3. 考虑培养时间和条件 在选择沙门氏菌培养基时,还需要考虑培养时间以及温度等因素。通常情况下,沙门氏菌需要在37摄氏度下培养24小时以上才能够生长。在选择培养基时,需要注意培养的时间和条件是否适合沙门氏菌的生长。 4. 确保培养基的质量 在选择沙门氏菌培养基时,还需要确保培养基的质量。优质的培养基可以帮助我们更好地分离和鉴定沙门氏菌,从而提高检测结果的准确性。在选择培养基时,需要选择有信誉的生产厂家的产品,并且要注意培养基的储存条件和有效期限。 选择合适的沙门氏菌培养基是非常重要的,它直接影响到沙门氏菌的检测结果。在进行沙门氏菌检测时,需要根据样品的性质、沙门氏菌的生长特性以及培养条件等因素来选择合适的沙门氏菌培养基,从而确保检测结果的准确性。也需要注意培养基的质量和储存条件,以保证培养基的有效性。希望通过本文的介绍,能够帮助大家更好地选择沙门氏菌培养基,提高沙门氏菌检测的准确性和可靠性。

有效选择沙门氏菌培养基

有效选择沙门氏菌培养基 沙门氏菌是一类革兰氏阴性杆菌,属于肠道细菌中的一员。它们通过摄入被感染的食物或水进入人体,引起沙门氏菌感染,导致食物中毒或肠道感染等疾病。沙门氏菌属于人畜共患病菌,广泛存在于各种动物的消化系统中,包括家禽、家畜等。为了有效地筛选出沙门氏菌,必须使用到适宜的培养基。 沙门氏菌培养基的选择对于检测、分离和鉴定沙门氏菌至关重要。根据沙门氏菌的生理特性和营养需求,可以选择以下有效的沙门氏菌培养基: 1. XLD培养基(Xylose Lysine Deoxycholate Agar):XLD培养基是一种选择性富营养培养基,它可以抑制大多数非沙门氏菌菌种的生长。该培养基中含有天冬酰胺,可以抑制肠球菌和厌氧细菌的生长。XLD培养基中的氧化还原指示剂溴百里酚蓝和溴腈酚红可以区分沙门氏菌的产气型和非产气型。 2. SSA培养基(Salmonella Shigella Agar):SSA培养基是一种选择性和差异培养基,它以这两个病原菌属命名。SSA培养基中含有抑制大肠杆菌生长的染料,可以选择性地增殖和分离沙门氏菌。在SSA培养基上,沙门氏菌形成无色或透明的菌落,而大肠杆菌则呈现为带绿色金属光泽的菌落。 3. MSRV培养基(Muller-Kauffmann Tetrationate Rappaport Vassiliadis Medium):MSRV培养基是一种马兰松氏杆菌细胞培养基,含有马兰松氏杆菌抑制剂和培养基颜色变化指示剂。该培养基可以快速选择性地增殖和分离沙门氏菌,并且有助于鉴定产气型沙门氏菌。 4. BGA培养基(Brilliant Green Agar):BGA培养基是一种含有卤素绿素的富含营养的选择性培养基。它抑制大肠杆菌等非沙门氏菌的生长,提供了一个有利于沙门氏菌增殖和定殖的环境。沙门氏菌在BGA培养基上生成小的、透明的菌落。 除了上述提到的培养基,还有许多针对沙门氏菌的选择性培养基,如MSA培养基(Mannitol Salt Agar),SSC培养基(Selenite-Cystine Broth)等。这些培养基在沙门氏菌的分离和鉴定中起着重要作用。

食品微生物检验沙门氏菌检验常用培养基原理解析

食品微生物检验沙门氏菌检验常用培养基原理解析食品微生物检验是确保食品安全和卫生的重要环节。其中,沙门氏菌检验是一项常见的微生物检验方法,用于检测食品中是否存在沙门氏菌。沙门氏菌是一种常见的食源性病原菌,可以引发沙门氏菌感染,导致胃肠道疾病。 沙门氏菌检验常用的培养基有MacConkey培养基和SS培养基。下面将解析这两种培养基的原理和使用方法。 1. MacConkey培养基: MacConkey培养基是一种选择性和差异性培养基,能够选择性地生长革兰阴性菌,如沙门氏菌,并区分产酸和非产酸菌。 培养基中添加了乳糖、胆盐和中性红等成分。胆盐能抑制革兰阳性菌的生长,而对革兰阴性菌无明显影响。乳糖是沙门氏菌的一种常见碳源,能够选择性地促进沙门氏菌的生长。中性红是一种pH指示剂,能够区分产酸和非产酸菌。 使用方法是将食物样品接种到MacConkey培养基上,然后在37°C孵育24小时。如果培养基上出现粉红色的细菌菌落,表示存在沙门氏菌。 2. SS培养基: SS培养基是一种选择性和差异性培养基,主要用于寻找沙门氏菌。

它能够选择性地抑制大多数细菌的生长,同时利用亚硫酸盐和铁盐等成分,区分产气和非产气菌。 培养基中添加了亚硫酸盐、柠檬酸、铁盐和胆盐等成分。亚硫酸盐是一种氧化剂,可以抑制大多数细菌的生长,但对沙门氏菌和其他一些细菌无影响。柠檬酸是一种酸性物质,能够促进产气菌的生长。铁盐是一种指示剂,当沙门氏菌使用铁盐作为能源时,会产生黑色沉淀。胆盐可以抑制革兰阳性菌的生长。 使用方法是将食物样品接种到SS培养基上,然后在37°C孵育24小时。如果培养基上出现黑色沉淀和/或产气,表示存在沙门氏菌。 以上是食品微生物检验中常用的两种沙门氏菌检验培养基的原理解析。使用这些培养基可以快速、准确地检测食品中是否有沙门氏菌污染,从而保障食品安全和卫生。

法国科玛嘉沙门氏菌显色培养基使用说明书

法国科玛嘉沙门氏菌显色培养基干粉1000ml 产品使用指导说明,编写者:上海桥星qx5147 产品用途 用于沙门氏菌的分离和鉴定 组分 琼脂15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉7.0 g/L 色素和选择性物质12.9 g/L pH值7.6±0.2 操作 1、取瓶内干粉34.9g溶于1000 mL去离子水的洁净三角瓶中,充分搅拌混匀。也可根据需要按 照34.9 g/L的比例扩大或缩小制备培养基的量。 2、加热至100℃,不停搅拌,使其完全溶解。切勿加热超过100℃,切勿121℃高压灭菌。若 使用微波炉加热,应将培养基加热沸腾,立即移出,轻轻摇匀,再放入微波炉加热,观察小气泡变为大气泡,直至完全溶解即可。切勿使培养基溢出。 3、加热后的培养基冷却至45℃~50℃,轻轻地摇动均匀,倾注平皿,使其凝固,晾干备用。保存

该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存2周(2℃~8℃,避光)。 质量控制 1、外观 此干粉培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的培养基平板为淡黄色透明固体。 2、微生物实验 接种以下菌株于该培养基平板上,在36±1℃恒温条件下有氧培养18-24h。 质控菌株菌落颜色 肠炎沙门氏菌ATCC13076淡紫色 鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311淡紫色 大肠埃希氏菌ATCC 25922深蓝色,小菌落 弗氏柠檬酸杆菌ATCC8090深蓝色 白色念珠菌ATCC60193抑制 金黄色葡萄球菌ATCC25923抑制 性能及局限 对沙门氏菌灵敏度为100%,特异性为89% (Gaillot et al. 1999)。一些假单胞菌(Pseudomonas)有时也会出现紫色菌落,可以使用氧化酶试验排除。许多伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)可能在培养24-48h才出现紫色菌落。乳糖阳性沙门氏菌(Lactose plus Salmonella)出现金属蓝色。最终的鉴定须做生化试验和血清学鉴定。 贮存条件

四种分离式培养基检测沙门氏菌的效果比对

四种分离式培养基检测沙门氏菌的效果比对 作者:黄耀雄,胡海艳,郑苗,张显勇,梁翠琴 来源:《现代食品》 2017年第6期 摘要:目的:为了更好地开展食品中沙门氏菌的检验工作,使检测工作更加准确、高效,保障食品安全,开展此项目的研究。方法:参照食品国家标准食品微生物检验GB 4789.4-2010食品中沙门氏菌的检验和GB4789.28-2013培养基和试剂的质量要求。结果:本次研究选用的沙门氏菌显色培养基(CAS)、亚硫酸铋琼脂(BS)、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)和HE琼脂(HE)4种培养基的生长率、选择性、特异性均符合GB4789.28-2013中的要求,通过实际加标的结果对比分析发现,显色培养基CAS要优于BS、XLD、HE培养基。结论:在这四种分离式培养基中,显色培养基CAS在分离食品中的沙门氏菌过程中特异性和敏感性是最好。在实际的检测过程中,应灵活运用选择合适的培养基,减少漏检。 关键词:沙门氏菌;培养基;分离效果比较 揶浍卸室卸巍揶浍卸卸,垓萋�橥砘嬖停,瘾椹瞍煅�世�讵猿婿哝,憷煅蹂挽�钴猿芑戢卸,爿讵憷徐跆瘾椹钴麟刳丝。瞍洳卸圊爿讵耖愿耖70%ⅵ80%毽揶浍卸熠衙钴,蘖爿�憷呷钴肟、颖�世黏�[1],对分离出的沙门氏菌流行病的研究十分必要。现如今在食品中检测沙门氏菌的方法主要是常规的生化检测方法、分子生物学方法以及免疫学检测,把目标检测菌从样品中分离出来主要采用常规培养基培养分离。为了更好地开展食品中沙门氏菌的检验工作,做好食品安全风险检测,保障食品安全,开展如下研究。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株 鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311、金黄色葡萄球菌ATCC6538、奇异变形杆菌CMCC49106、粪肠球菌ATCC19433(广东省微生物种质资源库)。 1.1.2 培养基与试剂 沙门氏菌显色培养基(CAS)(法国科玛嘉公司),缓冲蛋白胨水(BPW)、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)、亚硫酸铋琼脂(BS)、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)、HE琼脂(HE)、胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)(北京陆桥技术股份有限公司)。本实验中所用的实验试剂和培养基均在有效期内。 1.1.3 仪器 AC2-4S1生物安全柜(ESCO公司);SS-325全自动灭菌锅(上海申安医疗器械厂);恒温培养箱(上海新苗医疗器械制造有限公司)。 1.1.4 样品 实验所用样品均在市场购买,包括纯牛奶(菌落计数﹤1 CFU/mL)、生猪肉(菌落计数3.8×105 CFU/g)、肉馅(菌落计数:5.2×109 CFU/g,按照GB4789.4-2010[2]

食品微生物检验沙门氏菌检验常用培养基解析

食品微生物检验沙门氏菌检验常用培养基解 析 沙门氏菌检验常用培养基如缓冲蛋白胨水、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)、亚硫酸铋琼脂培养基、HE琼脂培养基及赖氨酸脱羧酶试验、靛基质试验等原理解析。 01 四硫磺酸钠煌绿增菌液(T T B) ●配方中硫代硫酸钠和碘经氧化生成四硫磺酸钠,它对大肠菌群有抑制作用,对沙门氏菌无影响(因沙门氏菌具有四硫磺酸酶,能分解四硫磺酸钠,而大肠菌群没有这种酶,故生长受抑制); ●碳酸钙为缓冲剂,可使沙门氏菌不致因酸碱度改变面死亡。 ●由于配方含碳酸钙,因此,该培养基配置后的最终pH不在7.0±0.2,而是偏碱性。 02 缓冲蛋白胨水(B P W) ●其成分中含有磷酸二氢钾和磷酸氢二钠,起缓冲液的作用;

●蛋白胨提供生长营养,有利于损伤沙门氏菌的复苏。 03 亚硫酸铋琼脂培养基(B S) ●配方中硫代硫酸钠和碘经氧化生成四硫磺酸钠,它对大肠菌群有抑制作用配方中亚硫酸钠可与柠檬酸铋铵生成亚硫酸铋,抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;硫酸亚铁可产生硫化氢,并与铁反应生成黑色沉淀。 ●沙门氏菌在BS上的典型菌落特征:具有金属光泽的棕色或黑色菌落。但有些菌株形成非典型菌落特征:灰绿色的菌落,周围培养基不变。 ●BS平板应制备后避光常温保存,并在24h内使用。 04 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(S C) ●蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;乳糖是可发酵的糖类;亚硒酸氢钠抑制革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌;磷酸盐是缓冲剂;L-胱氨酸为还原剂。 ●使用过程中要注意SC培养基不稳定,配置时避免过度加热。 05

H E琼脂培养基 ●HE琼脂培养基配方中胆盐、去氧胆酸钠、溴麝香草酚兰等成分可抑制革兰氏阳性菌生长;酸性复红作为酸碱指示剂的同时,也可抑制阳性菌,但对阴性肠道菌无抑制作用,选择性较弱。硫代硫酸钠可被细菌还原产生硫化氢,与柠檬酸铁铵反应生成黑色硫化亚铁。 ●菌落特征:蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或全几乎全黑色;有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全黑色。 06 X L D琼脂培养基 ●XLD琼脂培养基配方中木糖、乳糖和蔗糖成分作为可发酵的碳源,除志贺氏菌外,其他大多数肠杆菌均能发酵木糖;沙门氏菌发酵木糖产酸,形成酸性环境有利于产生脱羧酶使赖氨酸脱羧,从而使培养基的pH值升高向碱性转变;在碱性条件下,硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵成分与沙门氏菌产生的硫化氢反应是的菌落的颜色呈黑色;去氧胆酸盐成分可抑制革兰氏阳性菌的生长。 ●菌落特征:菌落呈粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌株为黄色菌落,带或不带黑色中心。 07

显色培养基上沙门氏菌及干扰菌的分离鉴定

显色培养基上沙门氏菌及干扰菌的分离鉴定 王萍;董贵军;乔勇升;张占林 【摘要】研究比较沙门氏菌显色培养基(CAS)上干扰菌与沙门氏菌的区别,提高沙 门氏菌的分离鉴定效率.使用沙门氏菌和7株干扰菌(铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌、施氏假单胞菌、荧光假单胞菌、斯氏普罗威登斯菌、摩氏摩根菌摩根亚种、粪产碱菌亚种)分别接种CAS、BS、XLD和HE培养基,观察菌落形态特征,分析生化试验 结果,考察TTB和SC选择性增菌液对7株干扰菌的选择效果.7株干扰菌在CAS培养基上都是紫色菌落,仔细辨认大部分都可与沙门氏菌区分,无法从菌落形态区分的 恶臭假单胞菌和荧光假单胞菌通过在BS上的生长情况或生化试验可以排除,TTB和SC选择性增菌液对7株干扰菌的选择效果各不相同,提示检测过程中TTB和SC两种增菌液须同时使用,相互补充,提高检出率.%To compare the differences between interference strains and Salmonella in Chromogenic agar Salmonella(CAS) and improve efficiency of isolating and identifying Salmonella. Salmonella and seven kinds of interfering bacteria(Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Pseudomonas fluo-rescens, Providencia stuartii, Morganella morganii ssp morganii, Alcaligenes faecalis ssp faecalis ) were inocu-lated in isolation medium (CAS, BS, XLD and HE) to observe the characteristics of the colony form, analyzed biochemical test results, investigated the selective effect of TTB and SC Broth on seven kinds of interfering bac-teria. Seven kinds of interfering bacteria in CAS medium were purple colonies, most of them can be differentiat-ed from Salmonella by recognizing carefully. Pseudomonas putida, Pseudomonas fluorescens could be

鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验 作者:强会萍等 来源:《当代畜禽养殖业》 2017年第12期 摘要:为了了解江苏省扬州地区鸡沙门氏菌的感染和耐药情况,采取对该地区5个鸡场98份病鸡组织进行细菌分离,并进行了药敏试验、血凝试验和致病性试验。经过分离,得到24株沙门氏菌,血凝鉴定表明,有18株呈阳性,其中5株均能使雏鸡致死。药敏试验结果表明,这5株沙门氏菌对甲硝唑、青霉素、替米考星和氨苄西林有高耐药性;对庆大霉素比较敏感。沙门氏菌不仅耐药性特别严重,而且是危害该地禽类养殖场的主要病原菌。 关键词:沙门氏菌;分离鉴定;药敏试验 沙门氏菌病是一种由沙门氏菌属细菌引起的一种人畜共患病。而沙门氏菌对于食品安全构成严重威胁,我国规模化养鸡产业不断发展,在带来巨大经济效益的同时,也产生了难以避免的危害。抗生素的使用,使得部分细菌产生极强的耐药性,如沙门氏菌。针对这一要点,有关部门对江苏省扬州地区鸡沙门氏菌病原进行了分离鉴定和药敏试验,希望对今后防治该病提供扎实的理论依据。 1材料 (1)病料来源。收集的98份来自江苏省扬州地区5个鸡场,从2016年3月至2016年5月疑患沙门氏菌病的病料组织。 (2)培养基。三糖铁琼脂(TSI)、SS营养琼脂培养基和HE营养琼脂培养基,南京某技术有限公司。 (3)沙门氏菌属诊断血清。沙门氏菌A~F群“O”多价诊断血清,中国生物技术集团公司江苏生物制品研究所。 (4)试验药物。痢菌净、替米考星、青霉素、甲硝唑、氨苄西林,江苏南京动物药业有限公司,批号:20150114;庆大霉素、头孢拉定、头孢唑啉,苏州微生物试剂有限公司,批号:20151335[2]。 (5)试验动物。1日龄健康雏鸡,扬州某鸡场。 2方法 (1)病料采集。于发病地区采集病鸡,临床症状表现为怕冷,减食或废食,排乳白色稀薄黏腻粪便,肛门周围污秽,闭目呆立。致死,剖检取其心、肝、脾、肺和肠于-20℃保存备用。 (2)沙门氏菌的分离鉴定。实验室无菌,将病料组织划线接种于HE营养琼脂培养基和SS 营养琼脂培养基,37℃培养18h后观察,挑取直径约0.5mm的菌落进行革兰氏染色,将革兰氏阴性短杆菌接种于TSI中。 (3)血清型鉴定。挑取TSI中呈阳性的菌落进行沙门氏菌A~F群“O”多价诊断血清玻片凝集试验,设生理盐水为对照组。在平板上将琼脂培养的细菌与少量生理盐水混匀,再加入1滴沙门氏菌多价“O”抗血清,摇晃,观察是否凝集。

沙门氏菌检验 (2)

沙门氏菌检验 1.范围 本法适用于食品中沙门氏菌的检验。 2.设备和材料 处微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下: 2.1 冰箱:2℃~5℃。 2.2 恒温培养箱:36℃±1℃,42℃±1℃。 2.3 均质器。 2.4 振荡器。 2.5 电子天平:感量0.1g。 2.6 无菌锥形瓶:容量500mL,250mL。 2.7 无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。 2.8无菌培养皿:直径90mm。 2.9 无菌试管:3mm×50mm、10mm×75mm。 2.10 无菌毛细管。 2.11 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 2.12 全自动微生物生化鉴定系统。 3.培养基和试剂 3.1 缓冲蛋白胨水(BPW)。 3.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液。 3.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液。 3.4 亚硫酸铋(BS)琼脂。 3.5 HE琼脂。 3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂。 3.7沙门氏菌属显色培养基。 3.8 三糖铁(TSI)琼脂。 3.9 蛋白胨水、靛基质试剂。 3.10 尿素琼脂(pH7.2)。 3.11 氰化钾(KCN)培养基。 3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基。 3.13 糖发酵管。 3.14 邻硝基苯β-D-半乳糖苷(ONPG)培养基。 3.15 半固体琼脂。 3.16 丙二酸钠培养基。 3.17 沙门氏菌O和H诊断血清。 3.18 生化鉴定试剂盒。 4.检验程序 沙门氏菌检验程序见图1。 42℃±118h~24h 36℃±1℃,18h~24h 5.操作步骤

5.1 前增菌 称取25g(mL)样品放入盛有225mL BPW 的无菌均质杯中,以8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或置于盛有225mL BPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需测定pH值,用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2.无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中,如使用均质袋,可直接进行培养,于36℃±1℃培养8h~18h。 如为冷冻产品,应在45℃以下不超过15min,或2℃~5℃不超过18h解冻。 5.2 增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物,移取1mL,转种于10mL TTB内,于42℃±1℃培养18h~24h。同时,另取1mL转种于10mL SC内,于36℃±1℃培养18h~24h。 5.3 分离 分别用接种环取增菌液1环,划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板(或HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板)。与36℃±1℃分别培养18h~24h(XLD平板、HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板)或40h~48h(BS琼脂平板),观察各个平板上生长的菌落,各个平板上的菌落特征见表1。 表1 沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 5.4 生化试验 5.4.1 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可以菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再于底层穿刺;接种针不要灭菌,直接接种懒氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板,于36℃±1℃培养18h~24h,必要时可延长至48h。在三糖铁琼脂和懒氨酸脱羧酶试验培养基内,沙门氏菌属的反应结果见表2。 表2 沙门氏菌属在三糖铁琼脂和懒氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果 5.4.2 接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时,可直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基,也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于36℃±1℃培养18h~24h,必要时可延长至48h,按表3判定结果。将已挑菌落的平板储存于2℃~5℃或室温至少保留24h,以备比必要时复查。

大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定

. 农业大学 兽医微生物学课程论文 题目:大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定 姓名: 学院:动物科技学院 班级:马业科学1201班 学号: 2012 任课教师:温建新 二0一四年四月一日

大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定 马业科学1201 任课教师温建新 摘要:为了鉴别大肠杆菌和沙门氏菌,我们将用过氧化氢试验,甘露醇试验,凝固酶试验等方法进行鉴别,并根据他们的不同性质出现不同的结果,得出菌的种类。 关键词:大肠杆菌沙门氏菌三糖铁糖发酵麦康凯琼脂 引言:大肠杆菌是肠杆菌中埃希氏菌中的代表种。根据O、H、K抗原的不同,可将大肠杆菌株分为不同的血清型。自然界肠杆菌的血清型可分为数万种,但致病性大肠杆菌的数量有限。 沙门氏菌属是有一大群血清学相关的革兰氏阴性、兼性厌氧的无芽孢杆菌组成,系肠杆菌科中重要的病原菌属之一,对任何动物均有致病性,可以欺人的伤寒、副伤寒、肠炎和食物中毒,对动物能致多种临床表现的沙门氏菌病,亦能以继发菌出现在其他疾病中。 大肠杆菌和沙门氏菌作为肠杆菌科的成员具有一些共同的特征,如形态、染色特性等。但一些培养特性和生化特性有差异,可作为鉴别诊断的依据,有时还需要依靠血清学方法。

目录 摘要....................................错误!未定义书签。 关键词错误!未定义书签。 引言错误!未定义书签。 1 材料 (1) 1.1 菌种1 1.2培养基1 1.3生化试剂1 1.4沙门氏菌诊断血清1 1.5器材1 2方法1 2.1 增菌培养1 2.2 直接分离培养1 2.3形态观察1 2.4培养特性观察1 2.5生化试验2 2.5.1糖发酵管接种2 2.5.2 蛋白胨水接种2 2.5.3 葡萄糖蛋白胨水接种 (2) 2.5.4尿素琼脂接种2 2.5.5 枸橼酸盐琼脂接种2 2.6 生化特性的观察2 2.6.1糖发酵实验2 2.6.2 MR实验2 2.6.3 VP实验2 2.6.4 吲哚实验3 2.6.5枸橼酸盐利用实验3 2.6.6硫化氢实验 (3) 2.7 药物敏感试验-扩散法3 3 结果观察3 3.1 大肠杆菌和沙门氏菌在三糖铁琼脂培养基上的生长状况错误!未定义书签。 3.2 细菌的染色、镜检 (4) 3.3 生化管的接种培养4 3.4 吲哚、MR、V-P实验.......................错误!未定义书签。

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